6-аміно-5,7-диметил-3н-тіазоло[4,5-b]піридин-2-он, що проявляє антиоксидантну дію

Реферат: 6-Аміно-5,7-диметил-3H-тіазоло[4,5-b]піридин-2-он, що проявляє антиоксидантну дію. UA 76718 U (12) UA 76718 U UA 76718 U 5 10 15 Корисна модель належить до синтезу органічних сполук і фармації, зокрема одержання біологічно активних сполук, що виявляють антиоксидантну дію і можуть бути використані в клінічній медицині як антиоксидантні лікарські засоби. У живих клітинах у результаті аеробних метаболічних процесів постійно утворюються активні форми кисню (АФО). Серед них найпоширенішими є супероксидний аніон-радикал (О2), гідрогену пероксид (Н2О2), гіпохлориту аніон (СlO), гідроксид-радикал (НО). АФО відіграють важливу роль у передачі клітинних сигналів, а також ініціюють процес вільнорадикального окиснення ліпідів (ВРОЛ). Проте, як свідчать клінічні та експериментальні дані, активні метаболіти кисню виконують також негативну функцію: сприяють розвитку значної кількості захворювань, зокрема таких, як атеросклероз, рак, діабет, нейродегенераційні захворювання (хвороби Паркінсона, Альцгеймера, Хантінґтона та ін. Зазвичай організм захищає себе від негативної дії АФО, контролюючи концентрацію цих частинок у клітинах. Проте за надмірної кількості АФО або ослаблення антиоксидантного захисту організму виникає окиснювальний стрес, що призводить до ушкодження внутрішньоклітинних структур і виникнення захворювань. В молекулі об'єкту, що заявляється, міститься піридиновий цикл, тому близьким за складом і будовою до заявлених сполук є похідне піридину-антиоксидантний лікарський засіб - мексидол [1] формули: OH COOH * H3C 20 25 N COOH C2 H 5 Однак цей лікарський засіб має ряд недоліків, зокрема, при його застосуванні спостерігаються нудота, сухість слизової оболонки рота, шкірно-алергічні реакції. У цьому контексті актуальним є пошук органічних сполук, здатних проявляти високу антиоксидантну активність, та розробка на їхній основі нових лікарських засобів. В основу корисної моделі поставлена задача створення нових антиоксидантних лікарських засобів, що мають покращені властивості та не викликають побічних явищ. Поставлена задача вирішується тим, що синтезований 6-аміно-5,7-диметил-3Н-тіазоло[4,5b]піридин-2-он формули: H3C N H N O S H2 N CH3 30 35 40 45 , що проявляє антиоксидантну дію. Синтезована сполука - білий кристалічний порошок, добре розчинний у ДМФА, ДМСО, розчинах лугів і мінеральних кислот; нерозчинний у воді. Структура 6-аміно-5,7-диметил-3H-тіазоло[4,5-b]піридин-2-ону підтверджена даними кількісного елементного аналізу та спектроскопії ПМР. Одержані результати свідчать про відповідність синтезованої сполуки заявленій. Заявлений 6-аміно-5,7-диметил-3H-тіазоло[4,5-b]піридин-2-он одержують шляхом відновлювального розщеплення 5,7-диметил-6-фенілазо-3H-тіазоло[4,5-b]піридин-2-ону. Найбільш оптимальними умовами для одержання сполуки є використання як відновника цинкового порошку у середовищі ацетатної кислоти. Необхідний 5,7-диметил-6-фенілазо-3Нтіазоло[4,5-b]піридин-2-он синтезують взаємодією 4-імінотіазолідону-2 з αфенілазоацетилацетоном. Антиоксидантну активність сполук досліджували in vitro, визначаючи зменшення концентрації вільного радикалу [2]. Для цього використали відносно стабільний радикал 2,2дифеніл-1-пікрилгідразилу (ДФПГ). Інтенсивно фіолетовий ДФПГ у розчині етанолу характеризується максимумом поглинання світла при 517 нм. У присутності антиоксидантів гаситься вільнорадикальний центр ДФПГ, внаслідок чого розчин поступово втрачає фіолетове забарвлення. Порівняння оптичної густини розчину, який містить досліджувану субстанцію та надлишок радикала, з оптичною густиною розчину самого радикалу дає змогу визначати радикал-поглинальну активність (РПА) сполук (таблиця). Розчини сполук в етанолі (0,3 мл, 20 моль/л) додавали до спиртового розчину ДФПГ (2,7 мл, 150 моль/л). Суміш інтенсивно перемішували і залишали на 2 год. Після цього розчин 1 UA 76718 U вносили в кювету спектрофотометра і визначали його оптичну густину. Радикал-поглинальну активність сполук обчислювали за формулою:  ДФПГ   s    100 %,  ДФПГ 5 10 де ДФПГ - оптична густина розчину вільного радикала ДФПГ (135 моль/л), AS - оптична густина розчину ДФПГ із тестованою речовиною. Як стандарт використовували аскорбінову кислоту (РПА=21,5 %). Вимірювання проводили тричі з незалежними аліквотами. Токсикометричні дослідження синтезованої сполуки вивчали за відомою методикою [3]. Речовини вводили в дозах 500, 800, 1000, 1500 мг/кг маси тварини при одноразовому парентеральному введенні суспензії речовин білим мишам обох статей масою 18-22 г. За тваринами спостерігали впродовж 14 днів. Як контроль використовували групу тварин, яким було введено воду очищену. Результати проведених досліджень подано у таблиці. Таблиця Сполука або еталонний лікарський засіб Аскорбінова кислота H3C N РПА % LD50, мг/кг 34 39 225 H N O S H2 N CH3 15 20 25 30 35 У результаті проведених токсикометричних досліджень встановлено, що значення LD 50 дозволяє віднести 6-аміно-5,7-диметил-3H-тіазоло[4,5-b]піридин-2-он до V класу безпеки, тобто за ступенем токсичності і небезпеки він відповідає вимогам до лікарських засобів. Отже, сполука, що заявляється, проявляє високу антиоксидантну дію, а за ступенем токсичності і небезпеки відповідає вимогам до лікарських засобів, тому може бути перспективним антиоксидантним засобом. Для розуміння запропонованої корисної моделі нижче наведено приклад одержання досліджуваної сполуки. 6-Аміно-5,7-диметил-3H-тіазоло[4,5-b]піридин-2-он. У 35 мл ацетатної кислоти вносять 5 ммоль 5,7-диметил-6-фенілазо-3H-тіазоло[4,5-6]піридин-2-ону. Суміш нагрівають до кипіння, що призводить до повного розчинення 5,7-диметил-6-фенілазо-3H-тіазоло[4,5-b]піридин-2-ону. В отриманий розчин, який продовжують нагрівати, у декілька прийомів упродовж 1 год. вносять 35 ммоль активованого цинкового порошку, що призводить до знебарвлення розчину. Потім розчин відфільтровують, до фільтрату, охолодженого до кімнатної температури, додають 50 мл води і залишають на 4 год. Осад, що випав, відфільтровують, промивають водою і висушують. Вихід 0,6 г (62 %). Т.топл. 280 °C (з. розкл.) (з ацетатної кислоти). Знайдено, %: N 21,40; S 1 16,55. C8H9N3OS. Обчислено, %: N 21,52; S 16,42. Спектр Н ЯМР , м.ч., J, Гц (ДМСО-D6, 400 МГц): 2,11 (с, 3Н, СН3), 2,28 (с, 3Н, СН3), 4,67 (с, 2Н, ΝΗ2), 11,89 (с, 1Н, NH). Джерела інформації: 1. Машковский Μ.Д. Лекарственные средства. В двух томах. Т. 1 - Изд. 13-е, новое. Харьков: Торсинг, 1998.-560 с. 2. Molyneux P. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity // J. Sci. Technol.-2004. - Vol. 26. - P. 211-219. 3. Стефанов О.В. Доклінічні дослідження лікарських засобів /Методичні рекомендації. - Київ: Авіцена, 2001.-527 с. 40 2 UA 76718 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 6-Аміно-5,7-диметил-3H-тіазоло[4,5-b]піридин-2-он формули: H3C H N N O S H2 N CH3 5 , що проявляє антиоксидантну дію. Комп’ютерна верстка Л. Купенко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3