Ін’єкційний препарат на основі есенціальних фосфоліпідів та спосіб його одержання

Реферат: Винахід належить до ін'єкційного препарату на основі есенціальних фосфоліпідів та способі його одержання, який містить як консервант спирт бензиловий, дезоксихолієву кислоту як стабілізатор, натрію хлорид, натрію гідроксид і воду очищену, а також додатково містить ліпоїд S100 та рибофлавін. Спосіб одержання ін'єкційного препарату полягає у розчиненні та змішуванні компонентів, причому спочатку отримують натрієву сіль дезоксихолевої кислоти, для чого у воді для ін'єкцій при температурі не менше 20 °C розчинюють натрію гідроксид до повного розчинення, далі добавляють дезоксихолеву кислоту та перемішують до отримання прозорого розчину, потім в отриманий розчин вносять ліпоїд S100 та перемішують до отримання непрозорої емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 350-450 нм, в якій при температурі не менше 20 °C розчиняють натрію хлорид з подальшим диспергуванням емульсії методом високого тиску до отримання емульсії ліпосом есенціальних фосфоліпідів розміром UA 109706 C2 (12) UA 109706 C2 35-60 нм, в якій розчиняють рибофлавін і бензиловий спирт, перемішують та проводять стерилізуючу фільтрацію. UA 109706 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід належить до фармацевтичної галузі, зокрема ін'єкційних препаратів на основі фосфоліпідів, і може бути використаний для лікування жирової дегенерації печінки, гострих і хронічних гепатитів, цирозу печінки, токсичних уражень печінки, токсикозу у вагітних, псоріазу та радіаційного синдрому, а також перед та після операцій на печінку та жовчний міхур. На даний час відомі різні способи отримання фосфоліпідів, зокрема відомий спосіб (Патент РФ № 2085192, Кл. А61K 31/355; А61K 9/12, публ. 1997 р.), в якому суміш фосфоліпідів розчиняють в органічному розчиннику, наприклад хлороформі, дихлорметані, метанолі і етанолі або їх сумішах. Потім розчин випаровують, висушують за допомогою роторного випарника, проводять гідратацію, циклічну гомогенізацію під тиском 10-200 МПа в безперервному процесі і стерилізацію ліпосомної суспензії за допомогою фільтрації. Проте додавання до матеріалу водного розчину призводить до утворення багатошарових ліпосом різного розміру. Також, відомий спосіб одержання ліпосом (Патент РФ № 2071765, Кл. А61K 9/127, публ. 1997 p.) з діаметром часток менше 0,5 мкм шляхом розчинення фосфоліпідних речовин в органічному розчиннику, висушування одержаного розчину з утворенням ліпідної плівки, ресуспензування в дисперсійному середовищі, диспергування ліпідів в мікроемульсію шляхом гомогенізації через мікрощілину при перепаді тиску від 50-300 атм до нормального впродовж 5 хвилин (10 циклів). Недоліком наведених способів є те, що гомогенізація фосфоліпідів під високим тиском пов'язана з високими швидкостями проходження матеріалу через апарат і короткочасним впливом на матеріал в зоні обробки, що призводить до необхідності використання великої кількості циклів гомогенізації. Крім того, клапанним гомогенізаторам характерна значна витрата електроенергії на одиницю продукції, а також висока металоємність. Гомогенізуючий клапан, що використовується для проведення процесу гомогенізації, під час експлуатації інтенсивно зношується під дією кавітаційної ерозії та інших факторів і вимагає швидкої заміни або технічного обслуговування. В патенті на винахід України № 79703 (Кл. A61J 7/00; А61Р 1/08; A61L 2/20, публ. 2007 p.), отримують ліпосоми шляхом додавання до води і/або біологічно-активних речовин, і/або вітамінів, і/або лікарських препаратів 1-5 % лецитину. Суміш в промислових умовах в безперервному процесі нагрівають при перемішуванні до температури 40±2 °C та пропускають через роторно-пульсаційний апарат зі швидкістю течії рідини через щілини апарату 0,009 м/сек., частотою перекриття щілин 3000 Гц і середньою витратою суміші 800 л/год. В результаті реалізації цього способу одержують ліпосоми розміром 150-500 нм. Запропонований спосіб є високотехнологічним, енергоощадним і дозволяє одержувати ліпосоми в безперервному потоці промисловим способом. Недоліком цього способу є те, що він не дозволяє одержувати ліпосоми з діаметром менше 100 нм, які є більш стійкими при зберіганні і в багатьох випадках більш застосовувані. В патенті на винахід № 75023 (Кл. С11В 11/00; А61K 49/00; A61L 2/20, публ. 2006 p.), фосфоліпідну суміш отримують способом, що включає стадії: контактування принаймні двох фосфоліпідів з неводним розчинником; концентрування розчину до стану густого гелю; контактування густого гелю з другим неводним розчинником та збирання утвореної в результаті твердої речовини. Також наведений спосіб одержання фосфоліпідної суспензії, що включає контактування фосфоліпідної суміші з неводним (або водним) розчинником, внаслідок чого суміш розчиняється у неводному розчиннику. Прототипом запропонованого винаходу є ін'єкційний препарат на основі фосфодитихлоліну (Патент України № 97742 Кл. А61K 9/00; А61K 31/685; А61K 31/585; А61K 31/355; А61K 31/047; А61Р 3/04, публ. 2011 p.) з розміром ліпосом 40-60 нм, який містить лецитин, бензиловий спирт як консервант, дезоксихолієву кислоту як стабілізатор, натрію хлорид, натрію гідроксид, воду очищену як допоміжні речовини та додатково містить рибофлавін і альфа-токоферол. Спосіб одержання цього препарату полягає у тому, що розчиняють лецитин в етиловому спирті, потім розчиняють дезоксихолієву кислоту і альфа-токоферол в етиловому спирті, обидва розчини зливають в ємкість і випаровують на роторноплівковому випаровувачі при тиску 110 мВа і перемішують з інтенсивністю більше 100 об./хв. до утворення плівки, потім зменшують оберти і тиск до 40 мВа при температурі водяної бані 43 °C і температурі холодоагента -10 °C, випарювання проводять під азотною подушкою, протягом 2-х годин, готують розчин натрію хлориду, натрію гідроксиду і рибофлавіну і розчиняють в ньому одержану плівку, додають розчин бензилового спирту (консервант) і проводять ультразвукове диспергування одержаного розчину при охолодженні протягом 2-х годин. Проте, за даним винаходом, спосіб виготовлення препарату є складним, довгим за часом та кількістю технологічних операцій, а використання спирту збільшує кількість домішок. 1 UA 109706 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 В основу запропонованого винаходу поставлена задача знизити кількість домішок в препараті, а отже отримати досконалу за однорідністю ін'єкційну субстанцію есенціальних фосфоліпідів розміром 35-60 нм, а також спростити та прискорити час на виготовлення препарату. Поставлена задача досягається тим, що ін'єкційний препарат на основі есенціальних фосфоліпідів, який містить як консервант спирт бензиловий, дезоксихолієву кислоту як стабілізатор, натрію хлорид, натрію гідроксид і воду очищену, згідно з винаходом, додатково містить ліпоїд S100 та рибофлавін, при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: ліпоїд S100 5,51-5,90 спирт бензиловий 0,85-0,95 дезоксихолієва 2,53-2,61 кислота натрію хлорид 0,2124-0,2596 натрію гідроксид 0,2403-0,2937 рибофлавін 0,0095-0,0105 вода ін'єкцій 90,6322-89,769. Поставлена задача досягається ще й тим, що у способі одержання ін'єкційного препарату на основі есенціальних фосфоліпідів, який полягає у розчиненні та змішуванні компонентів, згідно з винаходом, спочатку отримують натрієву сіль дезоксихолевої кислоти, для чого у воді для ін'єкцій при температурі не менше 20 °C розчинюють натрію гідроксид до повного розчинення, далі добавляють дезоксихолеву кислоту та перемішують до отримання прозорого розчину; потім в отриманий розчин вносять ліпоїд S100 в кількості 56,0 г та перемішують до отримання непрозорої емульсії крупних есенціальних фосфоліпідів розміром 350-450 нм, в якій при температурі не менше 20 °C розчиняють 2,4 г. натрію хлориду до повного розчинення. Для отримання емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 35-60 нм проводять диспергування емульсії методом високого тиску, потім в отриманій емульсії розчиняють рибофлавін і бензиловий спирт, перемішують та проводять стерилізуючу фільтрацію. Такий склад препарату на основі есенціальних фосфоліпідів та запропонований спосіб його виготовлення дозволяє зменшити час отримання есенціальних фосфоліпідів розміром 35-60 нм, не використовувати спирти, що дає змогу знизити кількість домішок в препараті, та досягти досконалої за однорідністю ін'єкційної субстанції есенціальних фосфоліпідів. Ін'єкційний препарат на основі есенціальних фосфоліпідів отримують таким чином. Спосіб отримання ін'єкційного фосфоліпідного препарату полягає в тому, що спочатку отримують натрієву сіль дезоксихолевої кислоти, потім отримують емульсію есенціальних фосфоліпідів розміром 350-450 нм та емульсію есенціальних фосфоліпідів розміром 35-60 нм, проводять стерилізуючу фільтрацію з розливом та закупорюванням в ампули. Отримання натрієвої солі дезоксихолевої кислоти. У воді для ін'єкцій при температурі не менше 20 °C розчиняють натрію гідроксид до повного розчинення. Потім розчиняють дезоксихолеву кислоту до стану, коли за візуальним контролем отриманий розчин стане прозорим. Для отримання емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 350-450 нм в розчин натрієвої солі дезоксихолевої кислоти вносять ліпоїд S100 та перемішують до отримання однорідної емульсії світло-жовтого кольору. Потім додають 2,4 г натрію хлориду та розчиняють до повного розчинення при температурі не менше 20 °C. Отримання емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 35-60 нм проводять шляхом диспергирування емульсії методом високого тиску при температурі не нижче 20 °C. Для отримання готової лікарської форми препарату в емульсії розчиняють рибофлавін і бензиловий спирт. Перемішують та передають на стадію стерилізуючої фільтрації. Відбирають контрольні проби для аналізу. Проводять фільтрацію розчину та розлив в ампули. Стерилізуючу фільтрацію розчину проводять через мембрані фільтри PES (Поліефірсульфон) з подальшим стерильним розливом в ампули з темного скла, які попередньо продуті стерильним азотом. Перевагу запропонованого винаходу в порівнянні з прототипом наведено в таблицях 1 та 2. 2 UA 109706 C2 Таблиця 1 Критерії порівняння (на 100 л готового препарату) Домішки в фосфатидилхолінах (есенціальних фосфоліпідах), мг/мл Використання спирту, мг/мл Час виготовлення за способом, год. Кількість технологічних стадій Прототип (за патентом № Запропонований винахід 97742) 3,4 0,4 4,5 90,0 25 26,0 4 Таблиця 2 Назва показника Опис Колір 3 Відносна густина (кг/м ) рН Спирт бензиловий (мг/мл) Етанол (мг/мл) Есенціальні фосфоліпіди (мг/мл) Домішки (фосфатидилхоліни) (мг/мл) 5 10 15 20 Допустимі межі Прототип На момент На кінець терміну випуску придатності Прозорий жовтий розчин Відповідає Відповідність стандартному Відповідає розчину 1,007-1,012 1,009 7,5-9,5 8,76 8,55-9,45 8,10-9,45 9,03 Не більше 5,02 4,5 Запропонований винахід Відповідає Відповідає 1,007 8,64 9,02 52,26-57,76 45,5-7,76 54,96 56,5 Не більше 4 Не більше 6,62 3,4 0,4 Як видно з таблиць 1 та 2, новий запропонований спосіб має переваги в порівнянні з прототипом - в кількості технологічних операцій, в часу їх виконання, в зменшенні кількості домішок есенціальних фосфоліпідів, у виключенні етилового спирту з технологічного процесу. Запропонований винахід пояснюється прикладом. Приклад Спочатку отримували натрієву сіль дезоксихолевої кислоти. Для чого у воді для ін'єкцій при температурі не нижче 20 °C розчиняли 2,8 г натрію гідроксиду, потім добавляли 25,4 г дезоксихолевої кислоти і перемішували до отримання прозорого розчину. Для отримання емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 350-450 нм в розчин натрієвої солі дезоксихолевої кислоти вносили ліпоїд S100 в кількості 56,0 г та розчиняли до отримання емульсії світло-жовтого кольору. При температурі не нижче 20 °C в отриманій емульсії розчиняли 2,4 г натрію хлориду. Для отримання емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 35-60 нм проводили диспергування емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 350-450 нм методом високого тиску при температурі не нижче 20 °C. Для отримання готової лікарської форми препарату в емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 35-60 нм розчиняли 0,095 г рибофлавіну і 9,3 г бензилового спирту. Отриману готову лікарську форму препарату перемішували та передавали на стадію стерилізуючої фільтрації. Потім відбирали контрольні проби для аналізу, проводили стерилізуючу фільтрацію розчину через мембрані фільтри та розливали в ампули з темного скла, які попередньо були продуті стерильним азотом. 25 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 30 1. Ін'єкційний препарат на основі есенціальних фосфоліпідів, який містить як консервант спирт бензиловий, дезоксихолієву кислоту як стабілізатор, натрію хлорид, натрію гідроксид і воду очищену, який відрізняється тим, що додатково містить ліпоїд S100 та рибофлавін, при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: ліпоїд S100 5,51-5,90 спирт бензиловий 0,85-0,95 дезоксихолієва кислота 2,53-2,61 натрію хлорид 0,2124-0,2596 3 UA 109706 C2 5 10 натрію гідроксид 0,2403-0,2937 рибофлавін 0,0095-0,0105 вода ін'єкцій 90,6322-89,769. 2. Спосіб одержання ін'єкційного препарату на основі есенціальних фосфоліпідів, який полягає у розчиненні та змішуванні компонентів, який відрізняється тим, що спочатку отримують натрієву сіль дезоксихолевої кислоти, для чого у воді для ін'єкцій при температурі не менше 20 °C розчинюють натрію гідроксид до повного розчинення, далі добавляють дезоксихолеву кислоту та перемішують до отримання прозорого розчину, потім в отриманий розчин вносять ліпоїд S100 та перемішують до отримання непрозорої емульсії есенціальних фосфоліпідів розміром 350-450 нм, в якій при температурі не менше 20 °C розчиняють натрію хлорид з подальшим диспергуванням емульсії методом високого тиску до отримання емульсії ліпосом есенціальних фосфоліпідів розміром 35-60 нм, в якій розчиняють рибофлавін і бензиловий спирт, перемішують та проводять стерилізуючу фільтрацію. Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4