Протипухлинний препарат на основі сполуки платини та 5-фторурацилу та спосіб його одержання

1 Протипухлинний препарат на основі сполуки платини та 5-фторурацилу у суміші водних розчинів хлористого натрію та цитрату натрію, який відрізняється тим, що як сполуку платини містить цис-дихлородіамінплатину при співвідношенні компонентів препарату, мас % цис-дихлородіамінплатина 0,010-0,250 5-фторурацил 0,110-4,800 хлористий натрій 0,085-0,095 цитрат натрію 0,040-0,050 вода решта до 100,0 2 Спосіб одержання протипухлинного препарату на основі сполуки платини та 5-фторурацилу шляхом змішування розчину 5-фторурацилу в воді з попередньо приготованим розчином сполуки платини в суміші водних розчинів хлористого натрію та цитрату натрію, який відрізняється тим, що як сполуку платини використовують цис- дихлородіамінплатину, а приготування її розчину проводять шляхом и розчинення у суміші розчинів хлористого натрію та цитрату натрію при їх ВМІСТІ, мас % хлористий натрій 0,085-0,095 цитрат натрію 0,040-0,050 вода решта до 100, що підкислений оцтовою кислотою до рН 3,0-4,0 при температурі 80-90°С, після чого одержану суміш змішують при 18-20°С з ацетоном та етиловим ефіром при співвідношенні на 1 об'ємну частину суміші розчинів об'ємних частин ацетону 0,1-0,3 етилового ефіру 0,1-0,2, після чого одержану суміш висушують виморожуванням до утворення сухого люфілізату, а після змішування одержаного люфілізату з розчином 5фторурацилу додають воду для ІН'ЄКЦІЙ ДО досягнення необхідної концентрації активних речовин в препараті О 00 5 ю 54180 Винахід відноситься до фармакологи, а саме до протипухлинних препаратів, які можуть бути використані для системних, репонарних, суперселективних шляхів введення, в тому числі для введення в середину пухлини, при комбінованому або паліативному лікуванні хворих з метастазуючими злоякісними новоутвореннями, які не мають чутливості до інших хіміотерапевтичних засобів Відомий протипухлинний препарат на основі сполуки платини формули {[PtCI(NH3)(H2O)]6(C39H49O32Ni5P4)}n (Pt-DNA), де п = 2000 ± 200, та 5-фторурацилу - натрієвої солі 5фторурацилу (NaFlu) формули Pt-DNA-Flu та фармацевтичного розріджувача - суміші водних розчинів натрію хлориду (NaCI), натрію цитрату (Na3cyt) та амонію хлориду (ІЧЬЦСІ) при співвідношенні компонентів препарату, мас % Pt-DNA 0,130-0,153 NaFlu 0,025-0,370 NaCI 0,080 - 0,090 Na3cyt 0,040 - 0,053 NH4CI 0,015-0,018 Вода решта до 100 [Пат України № 23676, МПК А61К 9/00, 9/08] Вміст NaFlu в препараті коливається в значному діапазоні, який визначається його терапевтичною активністю, але незначний вміст активної речовини Pt-DNA в препараті призводить до необхідності введення и терапевтичної дози в значному об'ємі рідини - 250мл, що обмежує сферу застосування препарату та, як наслідок, можливості хіміотерапії Підвищення вмісту Pt-DNA призводить до її асоціації та агрегації, які викликають зниження протипухлинної активності та підвищення токсичної дії препарату Крім того, використання препаратів, що мають значний об'єм, обмежується внутрішньовенними, внутрішньоартеріальними та внутрішньочеревними інфузіями, що є ефективним для хворих з невеликими дрібно вогнищевими пухлинами, але мало ефективним для хворих з вузловими пухлинами значного розміру, тому, що інфузм не здатні забезпечити великі ЗЛОЯКІСНІ новоутворення достатньою КІЛЬКІСТЮ активних речовин, а значний об'єм препарату не дозволяє використовувати його для суперселективного шляху введення, а саме внутрішньопухлинного, за допомогою якого у вогнищі пухлини можливе створення значної концентрації препарату Спосіб одержання препарату на основі сполуки платини формули {[PtCI(NH3)(H2O)]6(C39H49O32Ni5P4)}n, де п = 2000 ± 200, натрієвої солі 5-фторурацилу та фармацевтичного розріджувача включає додавання 5% водного розчину NaFlu до попередньо приготованого розчину Pt-DNA в суміші водних розчинів NaCI, Na3cytTa NH4CI [Пат України № 23676, МПК А61К 9/00, 9/08] Відсутність спеціальної обробки Pt-DNA, яка могла б запобігти асоціації та агрегації макромолекул Pt-DNA в розчині, не дає можливості одержати препарат, який мав би широкий діапазон вмісту активної речовини, без токсичної дії на організм і характеризувався високою протипухлинною активністю Задача винаходу полягає в розробці протипухлинного препарату на основі сполуки платини та 5-фторурацилу, який шляхом використання іншої сполуки платини забезпечує розширення можливості його застосування, як для внутрішньовенного, внутрішньоартеріального та внутрішньочеревного, так і для внутрішньопухлинного введення Вирішення задачі полягає в протипухлинному препараті на основі сполуки платини та 5фторурацилу у суміші водних розчинів NaCI та Na3cyt - фармакологічного розріджувача, який, ВІДПОВІДНО до винаходу, в якості сполуки платини містить цис- дихлородиамшплатину [PtCbtNbbh]DDP при співвідношенні компонентів препарату, мас % DDP 0,010-0,250 NaFlu 0,110-4,800 NaCI 0,085-0,095 МазсуІ 0,040 - 0,050 Вода решта до 1 00 Використання DDP в якості сполуки платини, що має протипухлинну активність створює можливість підвищення тт вмісту в препараті при сумісному використанні з NaFlu та досягнення однакового протипухлинного результату від однакової терапевтичної дози активної речовини Мінімальний вміст сполуки платини в препараті обмежений зростанням об'єму терапевтичної дози при цьому, а максимальний вміст DDP обмежений його розчинністю в водному розчині розріджувача Діапазон допоміжних речовин розріджувача забезпечує стабільність ХІМІЧНОГО складу активної речовини та попереджає її асоціацію і агрегацію Задача винаходу полягає в розробці способу одержання протипухлинного препарату на основі сполуки платини та 5-фторурацилу, який шляхом введення додаткової операції його одержання забезпечують підвищення вмісту активних речовин в препараті без підвищення його токсичного впливу на організм при збереженні його протипухлинної активності Задача вирішується способом одержання протипухлинного препарату на основі сполуки платини та 5-фторурацилу шляхом змішування розчину NaFlu в воді з попередньо приготованим розчином сполуки платини в суміші водних розчинів NaCI та Na3cyt, в якому ВІДПОВІДНО ДО винаходу, в якості сполуки платини використовують DDP, а приготування її розчину проводять шляхом розчинення DDP у суміші розчинів NaCI та Na3cyt при їх ВМІСТІ, мас % NaCI 0,085 - 0,095 Na3cyt 0,040 - 0,050 Вода решта до 100, що підкислений оцтовою кислотою до рН 3,0 - 4,0 при температурі 80 - 90°С, після чого одержану суміш змішують при 18 - 20°С з ацетоном та етиловим ефіром при співвідношенні на 1 об'ємну частину суміші розчинів об'ємних частин ацетону 0,1 - 0,3 етилового ефіру 0,1 - 0,2, після чого одержану суміш висушують виморожуванням до утворення сухого люфілізату, а після змішування одержаного люфілізату з розчином 54180 NaFlu, додають воду для ІН'ЄКЦІЙ ДО досягнення необхідної концентрації активних речовин в препараті Використання в якості сполуки платини DDP дозволяє провести попередню її обробку, кінцевим етапом якої є люфілізація, без зміни хімічної структури, в той час, як люфілізація Pt-DNA призводить до руйнування її хімічної структури Попередня обробка DDP забезпечує створення більш розчинної структури сполуки і запобігає асоціації та агрегації и молекул при збереженні протипухлинної активності та низького токсичного впливу Для приготування препарату використовували фармацевтичний препарат "Фторурацил" фірми "Дарниця" з вмістом NaFlu 5мас % Дані, що характеризують залежність складу препарату, що заявляється, від параметрів способу його одержання наведені в таблиці 1 Таблиця 1 Склад препарату, мас% КІЛЬКІСТЬ ВИХІДНИХ компонентів Люфілізат, мг 1 135 Склад люфілізату, Об'єм 5% розчину Об'єм мг NaFlu, мл води, мл 2 DDP10 NaCI 85 Na3cyt 40 DDP NaFlu NaCI N3cyt вода 3 4 5 6 7 8 9 2,2 97,8 0,010 0,11 0,085 0,040 99,755 Продовження таблиці 1 1 175 235 320 360 395 2 DDP 50 NaCI 85 Na3cyt 40 DDP 100 NaCI 90 Na3cyt 45 DDP 185 NaCI 90 Na3cyt 45 DDP 220 NaCI 90 Na3cyt 50 DDP 250 NaCI 95 Na3cyt 50 3 4 5 6 7 8 9 11,0 89,0 0,050 0,55 0,085 0,040 99,275 22,0 78,0 0,100 1,10 0,090 0,045 98,665 41,0 59,0 0,185 2,05 0,090 0,045 97,630 85,0 15,0 0,220 4,25 0,090 0,050 95,390 96,0 4,0 0,250 4,80 0,095 0,050 94,805 Фармакологічні властивості препарату, що заявляється, протипухлинну активність та токсичність-досліджували на тваринах та при апробації в КЛІНІЦІ на хворих при введенні в пухлину Дослідження проводили на білих безпородних мишах з трансплантованою модельною саркомою 180 Дію препарату, що заявляється, порівнювали з дією відомих препаратів Pt-DNA-Flu, DDP та NaFlu Перед введенням DDP попередньо розчиняли у фізіологічному розчині Досліджувані препарати вводили в черевну порожнину тричі з інтервалом 1 - 2 дні Контрольним групам тварин подібним чином вводили фармацевтичний розріджувач суміш водних розчинів NaCI (0,09мас %) та Na3cyt (0,050мас %) або водний розчин NaCI (0,90мас % фізіологічний розчин) Протипухлинну активність препарату оцінювали по відсотку гальмування росту пухлини (ГРП,%) на 14 добу після трансплантації пухлини Токсичність препаратів - по відсотку виживання тварин (ВТ,%) та по відсотку тварин з токсичними виявами (ТТВ,%) у вигляді діареї, лейко- та тромбоцитопенії Досліджувався вплив об'єму та терапевтичної дози препарату Результати дослідження зведені в таблицю 2 Таблиця 2 Номер досліду Склад препарату, мас % 1 1 контроль 2 Фармацевтичний розріджувач NaCI 0,090 Об'єм курсової терапевтичної дози препарату, мл/кг 3 23,0 курсова терапевтична доза, мг/кг Сполуки NaFlu платини 4 5 ГРП, % ВТ, % ттв, % 6 7 8 100,0 0,0 2 контроль3 4 5 6 7 Na3cyt 0,050 Вода 99,860 Фармацевтичний розріджувач NaCI 0,900 Вода 99,100 Pt-DNA-Flu Pt-DNA 0,130 NaFlu 0,350 Вода 99,520 Pt-DNA-Flu Pt-DNA 0,1 85 NaFlu 0,500 Вода 99,315 DDP 0,100 NaCI 0,900 Вода 99,000 NaFlu 5,00 Вода 95,00 54180 8 23,0 100,0 0,0 23,0 30,0 81,0 90,0 100,0 0,0 16,2 30,0 81,0 72,0 80,0 30,0 8,1 8,1 70,0 80,0 60,0 60,0 70,0 100,0 81,0 1,7 Продовження таблиці 2 1 7 8 9 10 11 12 2 DDP 0,010 NaFlu 0,110 NaCI 0,085 Na3cyt 0,040 Вода 99,755 DDP 0,050 NaFlu 0,550 NaCI 0,085 Na3cyt 0,040 Вода 99,275 DDP 0,100 NaFlu 0,100 NaCI 0,090 Na3cyt 0,045 Вода 99,665 DDP 0,185 NaFlu 2,050 NaCI 0,090 Na3cyt 0,045 Вода 97,630 DDP 0,220 NaFlu 4,250 NaCI 0,090 Na3cyt 0,050 Вода 95,390 DDP 0,250 NaFlu 4,800 NaCI 0,095 Na3cyt 0,050 Вода 94,805 3 4 5 6 7 8 104,0 10,4 115,0 75,0 100 0,0 20,80 10,4 115,0 76,0 100,0 0,0 10,40 10,40 115,0 72,0 100,0 0,0 11,25 20,8 230,0 86,0 75,0 60,0 4,72 10,4 200,0 92,0 100,0 0,0 4,17 10,4 200,0 88,0 100,0 0,0 Аналіз даних таблиці 2 показує, що препарат Pt-DNA-Flu (приклад 3) найбільш активно пригнічує розвиток пухлини без токсичних виявів при внутрішньочеревному введенні тваринам курсової терапевтичної дози в обсязі 23,0мл/кг, який досягається при ВМІСТІ 0,130мас % Pt-DNA та 0,350мас % NaFlu в складі відомого препарату Зменшення об'єму курсової терапевтичної дози до 16,2мл, який досягається при ВМІСТІ 0,185мас% Pt-DNA та 0,500мас % NaFlu (приклад 4), призводить до зни ження протипухлинної дії препарату та підвищення його токсичності ГРП - 72,0%, ВТ - 80,0%, ТТВ 30,0% у порівнянні з показниками препарату з меншим вмістом активних речовин (приклад 3) ГРП - 90,0%, ВТ -100%, ТТВ - 0,0% Використання протипухлинних препаратів DDP та NaFlu, кожного окремо, дозволяє суттєво зменшити об'єм необхідної терапевтичної дози цих препаратів у порівнянні з Pt-DNA-Flu (приклади 5, 6), але рівень їх терапевтичної активності та ток сичності поступається, як препарату Pt-DNA-Flu, так і препарату, що заявляється Введення препаратів DDP та NaFlu викликає ВІДПОВІДНО у 60% та 100% тварин діарею, лейко- та тромбоцитопенію, від якої гине 20 - 30% особин експериментальної групи Поєднання в протипухлинному препараті, що заявляється, двох активних речовин DDP та NaFlu супроводжується зниженням токсичності та підвищенням протипухлинної активності (приклади 7 12), а крім того можливістю змінювати об'єм терапевтичної дози в широкому діапазоні від 104мл/кг до 4,17мл/кг При оптимальній терапевтичній дозі препарату, яка складає з розрахунку на DDP 10,4мг/кг, а в розрахунку на NaFlu - 200мг/кг, показники ГРП, ВТта ТТВ практично відповідають рівню відомого препарату Pt-DNA-Flu, але можливість змінювати в широких межах концентрацію активних речовин у розчині, а отже варіювати об'єм терапевтичної дози в широких межах та и межі, надає значних переваг препарату, що заявляється Високий рівень протипухлинної активності, відсутність токсичного впливу на організм, межі варіювання об'єму рідини, яка вміщує терапевтичну дозу, при введенні препарату, що заявляється, дозволяє його використовувати не тільки при внутрішньочеревних, внутрішньоартеріальних та внутрішньовенних інфузіях, але й для введення без 54180 10 посередньо в пухлину і таким чином розширити шляхи введення препарату та можливості хіміотерапії, що підтверджують і результати клінічної апробації Препарат, що заявляється, був використаний в КЛІНІЦІ для лікування 49 хворих з метастатичними вузловими злоякісними новоутвореннями печінки діаметром більше 2см в найбільшому вимірюванні Хворим проводили комплексне лікування, яке включало введення препарату, що заявляється, крізь шкіру в середину пухлини тонкою голкою під контролем ультразвуку Препарат вводили тричі з інтервалом 1 день Курсова терапевтична доза препарату для хворого вагою 70кг, що в розрахунку на DDP складала 60 - 90мг, а в розрахунку на NaFlu - 1750 - 2320мг, займала об'єм 36 - 60мл У порівнянні з хворими іншої групи, лікування яких проводили по тій же схемі, але із застосуванням препарату Pt-DNA-Flu, який вводили внутрішньоартеріально у вигляді дозованих крапельних інфузій в обсязі 750 - ЮООмл розчину, що містили в розрахунку на Pt-DNA 1000 - 1500мг, а в розрахунку на NaFlu - 2800 - 2900мг, у хворих, яких лікували с застосуванням препарату, що заявляється приблизно у два рази зменшилась частота випадків метастазування та в три рази подовжився безрецидивний період і таким чином поліпшилась якість життя та збільшився її термін ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044) 236 - 47 - 24