Спосіб вимірювання внутрішньоочеревинного тиску у щурів

Реферат: Спосіб вимірювання внутрішньоочеревинного тиску у щурів включає вимірювання внутрішньочеревного тиску за допомогою латексного балончика, причому латексний балончик розміром 0,80,10,40,1 см вводять в пряму кишку тварині, яка була попередньо відсаджена упродовж доби на голод з вільним доступом до води, наповнюють водою об'ємом 0,02-0,04 мл, температурою 36 – 37 °С, витримують 15-20 хвилин до повної адаптації стінки прямої кишки на введений балончик, після чого проводять запис тиску впродовж 120-180 хвилин. UA 121729 U (12) UA 121729 U UA 121729 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме до експериментальної хірургії, і може бути використана для вимірювання внутрішньоочеревинного тиску під час експериментального моделювання підвищеного внутрішньоочеревинного тиску на лабораторних тваринах. Ряд патологічних процесів супроводжується підвищенням тиску в черевній порожнині, в результаті чого розвивається внутрішньоочеревинна гіпертензія. Вона може виникнути при внутрішньоочеревинних і за очеревинних кровотечах, запальних процесах в черевній порожнині, травмах черевної порожнини, післяопераційних набряках внутрішніх органів та ін. Внутрішньоочеревинний тиск є важливим показником стану органів черевної порожнини за розвитку перитоніту. Динамічний контроль внутрішньоочеревиннного тиску в експерименті дозволяє досліджувати функціональні, морфологічні і патоморфологічні зміни органів черевної порожнини та розробляти нові методи діагностики та лікування гострого панкреатиту. Увага до проблеми внутрішньоочеревинної гіпертензії за останні роки значно зросла. Однак експериментальні моделі і методики їх вивчення та лікування внутрішньоочеревинної гіпертензії до теперішнього часу залишаються недосконалими. Відомий спосіб вимірювання внутрішньоочеревинного тиску шляхом використання еластичного резервуара, що заповнюється рідиною [патент РФ на винахід RU № 2 358330, опубл. 10.06.2009 "Способ определения внутрибрюшного давления в эксперименте с использованием мелких лабораторных животных"]. Згідно зі способом, в черевній порожнині тварини розміщують балончик, виготовлений з матеріалу медичної рукавички та герметично закріплений на трубки від системи для внутрішньовенних інфузій довжиною 10-12 см. Виготовлений таким чином балончик підшивають до черевної стінки тварини, вільний кінець грубки виводять через підшкірний тунель на задню поверхню шиї, лапаротомну рану зашивають наглухо. Реєстрацію внутрішньоочеревинного тиску проводять за допомогою підключення вільного кінця трубки до вимірювального пристрою, як такий використовують вертикальний штатив з мірною лінійкою від водного манометра, до якого в вертикальному положенні прикріплений венозний катетер. Розташування трубки на шиї не дозволяє тварині, що знаходиться в клітці, вільно дістати до нього зубами. При вимірюванні тиску тварин поміщають на один рівень з нульовою відміткою вимірювальної шкали пристрою. На трубку накладають затискач, пробку знімають і під'єднують трубку до перехідника. Затискачі з трубок знімають. Рух стовпчика підфарбованої рідини по катетеру уздовж вимірювальної лінійки показує зміну внутрішньоочеревинного тиску в міліметрах водяного стовпа. Конструкція системи дозволяє багаторазово підключати тварин до вимірювальної системи і спостерігати динаміку внутрішньоочеревинного тиску протягом тривалого часу. Недоліком способу є його інвазивність, а саме: потреба в лапаротомії для розміщення резервуару в животі тварини, що впливає на достовірність отриманих даних, оскільки сам балончик своїм об'ємом створює додатковий тиск, а внутрішньоочеревинне втручання може призвести до запальних процесів, що також може негативно впливати на достовірність результатів проведеного експерименту. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити об'єктивний та нетравматичний спосіб вимірювання динаміки зміни внутрішньоочеревинного тиску у щурів, під час його корекції різноманітними засобами. Поставлена задача вимірювання внутрішньоочеревинного тиску вирішується шляхом вимірювання тиску в прямій кишці у щурів, які попередньо упродовж доби були відсаджені на голод з вільним доступом до води, за допомогою балончика розміром 0,80,10,40,1см, виготовленого з тонкої гуми презерватива та закріпленого на катетері діаметром 0,2 см, заповненого водою об'ємом 0,02-0,04 мл з температурою 36-37 °C, що ілюструється на фото, та приєднаного до вимірювальної системи. Даний спосіб ґрунтується на тому, що у щурів, які впродовж доби перед експериментом були відсаджені на голод з вільним доступом до води, товста та пряма кишки порожні, тому моторна активність відсутня і внутрішньоочеревинний тиск передається через стінку прямої кишки до введеного балончика. Отже, тиск в балончику відповідає тиску в черевній порожнині. Це дає змогу вимірювати тиск в черевній порожнині без необхідності порушувати її цілісність, що вигідно відрізняє наш спосіб від описаних вище. Спосіб здійснюється наступним чином. Вимірювання внутрішньоочеревинного тиску було проведено на білих нелінійних щурах віком 4-6 місяців вагою 130-277 г, які утримувалися в умовах акредитованого віварію. Усі маніпуляції з тваринами проводили згідно з Міжнародною конвенцією роботи з тваринами та Законом України "Про захист тварин від жорстокого поводження". Прилади, що використовувались для наукових досліджень, підлягали метрологічному контролю. Вимірювання тиску проводили на апаратно-програмному комплексі, для обробки показників тиску використовували спеціальну комп'ютерну програму, яка автоматично обраховувала і 1 UA 121729 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 відображала значення тиску в графічному та цифровому видах. Після проведення калібрування балончик вводили в пряму кишку попередньо знерухомленим щурам, які упродовж доби перед експериментом були відсаджені на голод та заповнювали його водою об'ємом - 0,02-0,04 мл температурою 36-37 °C. Далі після 15-20 ти хвилин адаптації прямої кишки на введений балончик, здійснювали запис тиску протягом 1 20-1 80 хв. Під час відпрацювання методики, для контролю відповідності тиску виміряного в прямій кишці внутрішньоочеревинному тиску, одночасно з моніторингом тиску у прямій кишці проводили одномоментне вимірювання внутрішньоочеревинного тиску прямим методом за допомогою введеної в черевну порожнину медичної голки, приєднаної через перфузійну систему до вимірювального приладу. В результаті проведених досліджень встановлено, що у щурів з гострим панкреатитом (n=6) внутрішньоочеревинний тиск, який був виміряний за допомогою балончика, в середньому дорівнював 6,060,54 см. вод. ст. (див. табл.). Одночасне вимірювання тиску прямим методом за допомогою голки показало, що між його значенням 6,910,29 см. вод. ст. та значенням внутрішньоочеревинного тиску, виміряного балончиком у прямій кишці, статистично значущої різниці не було. Отже, вимірювання тиску в прямій кишці за допомогою балончика з показовим для відображення внутрішньоочеревинного тиску. Приклади реалізації: Приклад 1. Дослідження проведені на 27 білих нелінійних щурах віком 4-6 місяців вагою 130277 г, яких утримували в умовах акредитованого віварію. Усі маніпуляції з тваринами проводили згідно з Міжнародною конвенцією роботи з тваринами та Законом України "Про захист тварин від жорстокого поводження". Прилади, що використовувались для наукових досліджень, підлягали метрологічному контролю. Усіх тварин було розділено на 3 групи: 1 група (n=6) інтактний контроль без моделювання гострого панкреатиту, 2 група (n=1 1) - моделювання гострого панкреатиту без корекції внутрішньоочеревинного тиску, 3 група (n=10) корекція внутрішньоочеревинної гіпертензії піпекуронію бромідом (ардуан, ВАГ "Гедеон Ріхтер") після моделювання гострого панкреатиту. Гострий панкреатит моделювали шляхом двократного внутрішньоочеревинного введення 20 % L-аргініну в дозі 1 г/кг маси тіла щура з інтервалом в 1 год. Наявність гострого панкреатиту підтверджено морфологічно і біохімічно. Дослідження проводили па 5 добу після моделювання гострого панкреатиту, коли відмічалось найбільше підвищення ВЧТ. Упродовж доби перед експериментом щурі були відсаджені на голод з вільним доступом до води. Тварин наркотизували уретаном Sigma, USA 1,1 г/кг маси, внутрішньоочеревинно. В пряму кишку вводили катетер з латексним балончиком розміром 0,80,10,40,1см, який заповнювали водою об'ємом -0,02-0,04 мл з температурою 36-37 °C. Упродовж 60 хв. реєстрували базальний тиск, після чого щурам групи інтактного контролю і щурам 2-ї групи з гострим панкреатитом внутрішньом'язово вводили воду для ін'єкцій, а щурам 3-ї групи з гострим панкреатитом внутрішньом'язово вводили недеполяризуючий міорелаксант піпекуронію бромід в дозі 0,04 мг/кг. При цьому допоміжна вентиляція легень не використовувалася, оскільки суттєвих порушень функції зовнішнього дихання у тварин не спостерігалось. Далі продовжували запис тиску в прямій кишці ще протягом 120 хв. Для характеристики тиску використовували параметри, які автоматично обраховувались комп'ютерною програмою. Приклад 2. Дослідження проведені на 27 білих нелінійних щурах віком 4-6 місяців вагою 130277 г, які утримувалися в умовах акредитованого віварію. Усі маніпуляції з тваринами проводили згідно з Міжнародною конвенцією роботи з тваринами та Законом України "Про захист тварин від жорстокого поводження". Прилади, що використовувались для наукових досліджень, підлягали метрологічному контролю. Метою роботи було дослідити вплив гангліоблокатора бензогексонію на внутрішньоочеревинний тиск у щурів з експериментально змодельованим гострим панкреатитом. Усіх тварин було розділено на 3 групи: 1 група (n=6) -інтактний контроль без моделювання гострого панкреатиту, 2 група (n=11) - моделювання гострого панкреатиту без корекції внутрішньоочеревинного тиску, 3 група (n=10) корекція внутрішньоочеревинної гіпертензії бензогексонієм (бензогексоній-здоров'я, ВАТ ФК "Здоров'я") після моделювання гострого панкреатиту. Гострий панкреатит моделювали шляхом двократного внутрішньоочеревинного введення 20 % L-аргініну в дозі 1 г/кг маси тіла щура з інтервалом в 1 год. Наявність гострого панкреатиту підтверджено морфологічно і біохімічно. Дослідження проводили на 5 добу після моделювання гострого панкреатиту, коли відмічалось найбільше підвищення внутрішньоочеревинного тиску. Упродовж доби перед експериментом щури були відсаджені на голод з вільним доступом до води. Тварин наркотизували уретаном Sigma, USA 1,1 г/кг маси, внутрішньоочеревинно. Дослідження внутрішньоочеревинного тиску проводили шляхом вимірювання тиску в прямій кишці у щурів за допомогою балонографічного методу. В пряму кишку вводили катетер з латексним балончиком розміром 0,80,10,40,1см, 2 UA 121729 U 5 який заповнювали водою об'ємом - 0,02-0,04 мл температурою 36-37 °C. Упродовж 60 хв. реєстрували базальний тиск, після чого щурам групи інтактного контролю і щурам 2-ї групи з гострим панкреатитом внутрішньом'язово вводили воду для ін'єкцій, а щурам 3-ї групи з гострим панкреатитом внутрішньом'язово вводили гангліоблокатор бензогексоній 3,2 мг/кг. Далі продовжували запис тиску в прямій кишці ще протягом 120 хв. Для характеристики тиску використовували параметри, які автоматично обраховувались комп'ютерною програмою. Таблиця Порівняльна таблиця значень внутрішньоочеревинного тиску, виміряного прямим методом та за допомогою балончика у прямій кишці Номер щура 1 2 3 4 5 6 М+m Ефект у %% Середнє значення внутрішньоочеревинного тиску, виміряного прямим методом (см. вод. ст.) 20 хв. 120 хв. експерименту 120 хв. експерименту експерименту 4,25 7,74 4,41 3,46 6,62 4,58 6,01 9,43 7,15 3,12 7,69 4,33 3,64 4,92 3,87 3,73 5,06 3,94 4,040,42** 6.910,29 4.710,20**  33,4 %  32 % Середнє значення тиску в прямій кишці (см вод. ст.) 20 хв. експерименту 6,58 5,42 8,21 6,53 4,72 4,88 6,060,54 10 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 Спосіб вимірювання внутрішньоочеревинного тиску у щурів, що включає вимірювання внутрішньочеревного тиску за допомогою латексного балончика, який відрізняється тим, що латексний балончик розміром 0,80,10,40,1 см вводять в пряму кишку тварині, яка була попередньо відсаджена упродовж доби на голод з вільним доступом до води, наповнюють водою об'ємом 0,02-0,04 мл, температурою 36-37 °С, витримують 15-20 хвилин до повної адаптації стінки прямої кишки на введений балончик, після чого проводять запис тиску впродовж 120-180 хвилин. 3 UA 121729 U Комп’ютерна верстка М. Мацело Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4