Спосіб ранньої диференційної діагностики хронічного гепатиту та цирозу печінки

Спосіб ранньої диференційної діагностики хронічного гепатиту та цирозу печінки шляхом дослідження біологічного матеріалу, взятого з організму хворого, і оцінювання одержаних Винахід належить до медицини, точніше, до гастроентерологи, і може бути використаний для ранньої диференційної діагностики хронічного гепатиту та цирозу печінки Зростання числа захворювань хронічними гепатитами (ХГ) та цирозом печінки (ЦП) в останні роки робить нагальною необхідність розробки високоінформативного методу ранньої діагностики цих захворювань Особливо грізним захворюванням печінки є ЦП І дуже важливо для хворого вчасно діагностувати момент переходу ХГ в ЦП, тобто встановити ранній диференційний діагноз Рання діагностика початку трансформування ХГ в ЦП у хворого дає можливість загальмувати процес розвитку з'єднувальної тканини в печінці Для цього проводять додаткове лікування, наприклад, кортикостероїдами, які не є безпечними для організму, щоб призначати їх без строгого обґрунтування такої необхідності Встановлення диференційного діагнозу є важливим для життєвого прогнозу, для прийняття рішення про трансплантацію печінки іт ш показників, який відрізняється тим, що як біологічний матеріал використовують пробу крові хворого, яку досліджують методом динамічної міжфазної тензюметри, оцінюють одержані показники поверхневого натягу сироватки крові в межах термінів життя поверхні, а саме короткого терміну (0,01 с) - ПН1, в межах середнього (1с) ПН2, та довгого (100 с) - ПНЗ і, коли ПН1 приймає значення від 70,4 до 72,0 мН/м, а ПН2 - 67,3 мН/м і нижче, ПНЗ - 58,8 мН/м і нижче, діагностують хронічний гепатит, коли ПН1 і ПН2 дорівнюють або перевищують ВІДПОВІДНО 72,1 мН/м і 68,2 мН/м, а ПНЗ приймає значення від 58,9 до 59,6 мН/м, діагностують цироз печінки, причому патологію печінки у пацієнта виключають, коли значення ПН1 не перевищує 70,3 мН/м, ПНЗ приймає значення не нижче 59,7 мН/м, а ПН2 - від 67,4 до 68,1 мН/м Відомий широковживаний спосіб діагностики хвороб печінки шляхом біохімічних досліджень крові Недоліком відомого способу є неможливість встановлення диференційного діагнозу ХГ та ЦП, оскільки біохімічні показники при обох хворобах в багатьох випадках можуть бути однаковими (Справочник по гастроэнтерологии Под ред В Х Василенко — М Медицина, 1976 — С 281 284) Відомий спосіб є незручним (великий об'єм забраної крові при серійних аналізах) і вартісним при багаторазових дослідженнях стану хворого в динаміці Відомий спосіб ранньої диференційної діагностики ХГ та ЦП шляхом ультразвукових досліджень (УЗД) печінки (Клиническое руководство по ультразвуковой диагностике Под ред В В Митькова — М Видар, 1996 — Т 1 — С 43-47) Недоліком відомого способу ранньої диференційної діагностики ХГ та ЦП є його недостатня точність Шляхом УЗД зафіксувати початок розвитку з'єднувальної тканини в печінці трансформування ХГ в ЦП - дуже важко, тому для 00 47189 ранньої діагностики відомий спосіб застосовують рідко Відомий, обраний за прототип, спосіб ранньої диференціиної діагностики ХГ та ЦП шляхом пункційної біопсії печінки, який є найближчим до способу, що заявляється, по суті та досягнутому технічному результату і включає морфологічне дослідження біологічного матеріалу - пунктату, взятого з печінки хворого, і оцінювання одержаних показників Точність ВІДОМОГО способу-прототипу складає 81 - 95% (Ш Шерлок, Дж Дули Заболевания печени и желчных путей Пер с англ — М ГЭОТАР Медицина, 1999 — С 38-47) Недоліком відомого способу-прототипу є велика КІЛЬКІСТЬ ускладнень через його швазивність, бо він включає пунктацію печінки За даними американських вчених Ш Шерлока та Дж Дули (там же, С 39, 42) біопсія в 12,5% випадків ускладнюється внутрішньочеревною кровотечею, 0,11% випадків закінчуються смертю через кровотечу Через добу після біопсії у 23% хворих виявляють внутрішньопечінкові гематоми (С 43) Протипоказано виконання пункційної біопсії печінки хворим з низьким рівнем тромбоцитів у крові, хворим на лейкоз чи гемофілію Часто бувають варіації анатомічної будови та розмірів печінки В разі невеликої печінки пункційна голка може не досягти органа, при порушенні анатомічних співвідношень можлива пункція жовчного міхура або крупних кровоносних судин в воротах печінки Перфорація капсули печінки може виявитись смертельною БІОПСІЯ печінки протипоказана при напруженому асциті, яким часто ускладнюється ЦП, оскільки зразок тканини печінки одержати не вдається У хворих з фіброзом або ЦП частота ускладнень біопсії досягає 20% (там же, С 40) Часто зразок тканини печінки, взятий при біопсії, виявляється замалим для аналізу Основними причинами неінформативності біопсії є замалий зразок, відсутність в ньому портальних трактів, осередкове ураження печінки і особливо недосвідченість морфолога Високого проценту інформативності при виконанні відомого способу (81 - 95%) можливо досягти тільки при серійних дослідженнях (С 45), що є небезпечним для більшості хворих 3 цієї ж причини відомий спосіб не використовують для діагностики динаміки розвитку патологічного процесу в печінці, а також для перевірки ефективності лікування Причиною недоліків відомого способупрототипу є його швазивність - необхідність пунктацм печінки В основу винаходу поставлено задачу в способі ранньої диференціиної діагностики ХГ та ЦП шляхом нешвазивного забору біологічного матеріалу та визначення інтегрального показника морфологічного стану печінки забезпечити високу точність діагнозу без ускладнень для хворого Перевагою способу, що заявляється, є можливість здійснення серійних діагностичних заходів, перевірки динаміки розвитку патологічного процесу в печінці, а також ефективності застосовуваного лікування Спосіб, що заявляється, є безпечним, дешевим, безболісним, зручним для хворого і лікаря Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі ранньої диференціиної діагностики ХГ та ЦП, який включає дослідження біологічного матеріалу, взятого з організму хворого, і оцінювання одержаних показників, новим є те, що в якості біологічного матеріалу використовують пробу крові хворого, яку досліджують методом динамічної міжфазної тензюметрм, оцінюють одержані показники поверхневого натягу (ПН) сироватки крові в межах термінів життя поверхні, а саме короткого терміну (0,01с) - ПН1, в межах середнього (1с) - ПН2, та довгого (100с) - ПНЗ і, коли ПНІ приймає значення від 70,4 до 72,0мН/м, а ПН2 - 67,ЗмН/м і нижче, ПНЗ -58,8мН/м і нижче, діагностують ХГ, коли ПН1 і ПН2 дорівнюють або перевищують ВІДПОВІДНО 72,1 мН/м і 68,2мН/м, а ПНЗ приймає значення від 58,9 до 59,6мН/м, діагностують ЦП, причому патологію печінки у пацієнта виключають, коли значення ПНІ не перевищує 70,ЗмН/м, ПНЗ приймає значення не нижче 59,7мН/м, а ПН2 - від 67,4 до 68,1 мН/м Між сукупністю ознак винаходу і технічним результатом, якого можна досягти при його реалізації, існує причинно - наслідковий зв'язок БІОЛОГІЧНОЮ ОСНОВОЮ діагностики патологічних порушень в печінці при трансформації ХГ в ЦП є зміни в морфології клітин цього органа, а також зміни імунологічного, вірусологічного, біохімічного стану крові Саме на морфологічному аналізі тканин печінки базується відомий спосіб-прототип ранньої диференціиної діагностики ХГ та ЦП шляхом пункційної біопсії печінки Відомий спосіб хоч і досить точний (81 - 95%), але супроводжується багатьма суттєвими ускладненнями через його швазивність Спосіб ранньої диференціиної діагностики ХГта ЦП, який заявляється, є настільки ж точним, як і відомий, та нешвазивним, а значить позбавленим ускладнень пункційної біопсії печінки Спосіб, що заявляється, дозволяє одержати інтегральну інформацію про склад поверхневих шарів крові та процеси, що відбуваються в рідкій фазі методом динамічної міжфазної тензюметрм (вимірювання змін поверхневого натягу (ПН) з часом) При ХГта ЦП в крові відбуваються зміни рівнів багатьох протеїнів та ЛІПІДІВ, що проявляють сурфактантні властивості, а тому здатні змінювати ПН цієї біологічної рідини Вивчення динамічного ПН сироватки крові досі ще не проводились Той факт, що спосіб ранньої диференціиної діагностики ХГ та ЦП, який заявляється, є настільки ж точним, як і пункційна біопсія печінки, виявився досить неочікуваним Для оцінки причин діагностичної значимості динамічної міжфазної тензюметрм спосіб було опробувано на 76 хворих ХГ У 32 з цих 76 ПІДДОСЛІДНИХ пацієнтів було встановлено розвиток ЦП Для порівняння було обстежено також і групу з 68 здорових людей (табл 1) Правильність ранньої диференціиної діагностики, проведеної за способом, що заявляється, було підтверджено 47189 шляхом пункційної біопсії печінки (відомий спосібпрототип) у 100% випадків Середні значення показників динамічного ПН сироватки Групи обстежених Всі хворі ХГ ЦП Число обстежених 76 44 32 68 ПН1, мН/м 71,6 ± 0 , 0 7 * 71,2 ± 0 , 0 8 * Наявність хибних часток Лімфопстоцитарна інфільтрація Нейтрофільна інфільтрація Проліферація жовчних капілярів Внутрішньоклітинний холестаз + + + + + іаолиця "і и . ш - ш е и їїvi х н и + о,: ень Прим 0,4 0,4 0,1 0,1 0,1 зники ПН їй 58,1 ± рину, низькою Здорові 70,0 ± 0 , 4 1 Л П Ь Г та ЗДрС№ктивн зеті л крові, а також аспартатдепдрогеази (ACT), Примітка аланіндепдрогенази (АЛТ) При ЦП під впливом * - ВІДМІННОСТІ між аналогічними показниками у хворих';лвйаіро(ВїгаівТ0тір7бт+отдійЬїїіоЕ!;!1р™9рюючоі функції ** - ВІДМІННОСТІ між аналогічними показниками у хворижачіа-іМІГта ЦаТрш^штргичноддівтлідарні міжфазної тензюметрм крові стають залежними від рівнів Як видно з табл 1, вибрані в якості загального та прямого білірубіну, загального білку, диференційно-діагностичних критеріїв ХГ і ЦП альбумінів, аг-, Р-, у-глобулінів Пригнічення показники (середні значення) динамічної процесу утворення холестерину при ЦП міжфазної тензюметрм сироватки крові ПН1, ПН2 і призводить до зміни характеру залежності між ПНЗ достовірно вищі у хворих на ЦП, навіть на результатами тензюметрм та цим показником, ранніх стадіях, порівняно з хворими на ХГ і ще зростання рівня сечовини в крові - до формування вищі, ніж у здорових, за виключенням ПНЗ, який є ВІДПОВІДНИХ кореляцій Як і в разі ХГ, при ЦП нижчим, ніж у здорових Середні значення ПН2 та утримуються зв'язки параметрів ПН з показниками ПНЗ у хворих на ХГ виявилися нижчими, ніж у ЛПНГ, ЛПДНГ Розвиток у хворих на ЦП синдрому здорових Одержані результати доводять, що у патологічної регенерації, супроводжується хворих на ЦП показники ПН1, ПН2, ПНЗ підвищенням вмісту а-фетопротешу в крові і має достовірно вищі, ніж у хворих на ХГ (табл 1), і тому наслідком виникнення кореляцій цього показника зростання показників ПН у хворих на ХГ є негативним симптомом, який свідчить про трансформацію ХГ в ЦП Щоб пояснити цей феномен були проведені додаткові дослідження Кореляційні зв'язки між біохімічними показниками та параметрами вивчено кореляційні зв'язки між параметрами динамічного ПН сироватки крові і морфологічними Показні ознаками гепатобюптатів та біохімічними БІОХІМІЧНІ показники ХГ показниками сироватки крові 76 хворих на ХГ (44) і ПН1 ПН2 ПНЗ ЦП (32) Результати цих досліджень приведено в ACT + 0,07 + 0,08 + 0,03 табл 2 та З -0,04 -0,09 -0,03 АЛТ Проаналізувавши кореляційну картину Білірубін загальний + 0,07 + 0,10 + 0,14 залежностей між біохімічними показниками і Білірубін прямий -0,19 -0,04 -0,10 динамічним ПН сироватки крові при патології Загальний білок -0,27 + 0,03 -0,01 печінки (табл 2 та 3), можна прийти до висновку, Альбумін + 0,22 -0,01 -0,11 що в разі ХГ показники ПН залежать, головним чином, від вмісту циркулюючих імунних комплексів оп-глобуліни -0,42 -0,17 -0,12 (Х2-ГЛОбуЛІНИ -0,09 + 0,02 -0,07 (Цік), 72,1 ±0,1Г Р-глобуліни Кореляційні зв'язки між морфологічними ознаками ге сироватки к| Морфологічна ознака Зерниста дистрофія гепатоцитів Вакуольна дистрофія гепатоцитів Жирова дистрофія гепатоцитів Зниження вмісту глікогену в гепатоцитах Поліморфізм клітин Поліморфізм ядер Ступеневий некроз клітин Мостовидний некроз клітин Розширення зони портальних трактів Склероз зони портальних трактів + 0,02 у-глобуліни -0,13 + 0,35* Lljail + 0,24 + 0,34 ,+. 0,39* ftr -0,49* -0,01 + 0,44* - 0,35* -0,03 l s Id MetpetlVICI -0,28 а-фётопротеш ечоьи ЙШужна -0,17 t2- \Ш -ПНІ + ftHf -О24ПДНГ п _ +_П_2 +.РЛ.4 .РЛ. ^і^ста реля^і^статистіїчн яняппу жнпгпі fag пя 0,58* 0,57* 0,6Г + 0,13 К 0,18 -0,33 + 0,04 + 0,05 чин ржа не іНЗІП 47189 стадії розвитку патологічного процесу в печінці при трансформації ХГ в ЦП величина показників динамічного ПН крові змінюється скачкоподібно Тому, на відміну від біохімічних досліджень, тензюметрія крові дозволяє зафіксувати цей надзвичайно важливий момент (і для хворого, і для лікаря) - початок розвитку ЦП Дійсно, динамічний ПН при ЦП змінюється через наявність у хворих якісних відмінностей від ХГ, а саме зниження маси функціонально повноцінних гепатоцитів (звідси зниження білковосинтетичної функції печінки) та синдрому патологічної регенерації (звідси підвищення рівня афетопротешу крові) Поступовий розвиток фіброзу печінкової тканини при перебігу ХГ від першої до третьої стадії має, вірогідно, менший вплив на формування показників ПН Тому зміна параметрів тензиометрм крові є несуттєвою на І-ІІІ стадіях ХГ, але на етапі "III-IV стадія ХГ" (а IV стадія і є вже ЦП) здійснюється скачкоподібно Для доведення високої точності заявленого способу ранньої диференційної діагностики служать дані про існуючі достовірні кореляційні зв'язки між морфологічними ознаками гепатобюптатів та параметрами динамічного ПН сироватки крові, приведеними в табл 2 На дані тензюметрм крові безпосередньо впливає стан ушкодження тканин печінки (патологічної регенерації) Як показали паралельні дослідження патологічного процесу в печінці у 76 хворих, диференційний діагноз, поставлений за способом, що заявляється, в 100% випадків підтвердився морфологічним аналізом гепатобюптатів (прототип) Дослідним ШЛЯХОМ встановлено, що найточнішою інтегральною характеристикою патологічного стану печінки є саме три показника, одержані за методом динамічної міжфазної тензюметрм, ПН сироватки крові в межах термінів життя поверхні, а саме короткого терміну (0,01с) ПН1, в межах середнього (1с) - ПН2, та довгого (100с) ПНЗ Багаторазові тезюметричні дослідження крові 76 хворих (під ретельним контролем морфологічного аналізу гепатобюптатів) дозволили визначити ЧІТКІ ЧИСЛОВІ діапазони для встановлення диференційного діагнозу ХГ та ЦП, а саме коли ПН1 приймає значення від 70,4 до 72,0мН/м, а ПН2 - 67,ЗмН/м і нижче, ПНЗ - 58,8мН/м і нижче, діагностують ХГ, коли ПН1 і ПН2 дорівнюють або перевищують ВІДПОВІДНО 72,1 мН/м і 68,2мН/м, а ПНЗ приймає значення від 58,9 до 59,6мН/м, діагностують ЦП, причому патологію печінки у пацієнта виключають, коли значення ПН1 не перевищує 70,ЗмН/м, ПНЗ приймає значення не нижче 59,7мН/м, а ПН2 - від 67,4 до 68,1 мН/м (табл 4) Динамічний ПН сироватки крові вивчали, користуючись комп'ютерним тензюметром марки "МРТ2 Lauda" (ФРН), який діє за принципом фіксування максимального тиску в бульбашці повітря Розділення інтервалу між бульбашками на так званий "мертвий термін" та період життя поверхні 8 Діагностичні значення показників динамічного ПН сироватки крові у: способом, що заявляється Групи обстежених ХГ ЦП Здорові Число обстежених 44 32 68 ПН1, мН/м 70,4 - 72,0 >72,1