Дисперсійне середовище для одержання липосом

ДЛЯ СЛУЖЕБНОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ ЭКЭ »* СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУ6ЛИН V (; Q Ь ^ . 1637085 А1 ( 5 1 ) 5 А 61 К 3 7 / 2 2 . 3 1 / 6 8 5 . 9 / 1 0 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ ПРИ ПЧНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1 (21) 4655924/14 (22) 0 9 . 1 2 . 3 8 (71) Харьковский государственный фармацевтический институт (72) И.Л.Дикий, В.Д.Яковенко, Л.С.Стрельникоа, И.Э.Бусыгина, М.М.Великая, С,Л.Педенко, А.Д.Базавлук, Л.Ф.Силаева и Т.И.Ковалева (53) 612.015 (038.8) (56) Машковский М.Д.» Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1935, т.н., с.422. ( 5 4 ) ДИСПЕРСИОННАЯ СРЕДА ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПОСОМ (57) Изобретение относится к биологии и медицине и к а с а е т с я применения п р е п а р а т а э к т е р и ц и д , обладающего п р о тивовоспалительным д е й с т в и е м , в к а ч е с т в е дисперсионной среды для п о л у чения л и п о с о м . Эктерицид, к а к д и с п е р сионная с р е д а , о б л а д а е т у н и в е р с а л ь н о с т ь ю , пригоден д л я получения р а з личных видов липосом различными м е т о дами. Марголис Л . Б . и Б е р г е л ь с о н Д . Д . Липосомы и их в з а и м о д е й с т в и е с к л е т к а м и . - М.: Наука, 1 9 8 6 , с . 7 - 3 3 . г (Л И з о б р е т е н и е о т н о с и т с я к биологии и медицине и к а с а е т с я применения э к терицида в к а ч е с т в е дисперсионной среды для получения л и п о с о м . Целью и з о б р е т е н и я я в л я е т с я с о з д а ние у н и в е р с а л ь н о г о с р е д с т в а в к а ч е с т в е дисперсионной среды д л я п о л у чения л и п о с о м . П р и м е р 1. Получение м у л ь т и ламеллярных липосом методом д и с п е р гирования тонких пленок фосфолипида (общая м е т о д и к а ) . В круглодонную колбу емкостью 2 л помещают 20 мл с п и р т о в о г о р а с т в о р а лецитина с концентрацией 10 г / л . Р а с т ' в о р упаривают и высушивают на р о т о р ном и с п а р и т е л е при 20 мм р т . с т . и 4 0 ° С . В колбу добавляют 10 мл э к т е рицида и интенсивно встряхивают при 45°С в т е ч е н и е 20 мин с о с т е к л я н н ы ми б у с а м и . После окончания в с т р я х и 11-91 1 вання полученную эмульсию охлаждают до комнатной температуры и доводят ее объем до 40 мл. А. Включение эритромицина фосфата в мультиламеллярные липосомы. Готовят 10 мл раствора эритромицина фосфата в эктершдиде (конц. 123,0 г / л ) , рН эктерицида доведен до 3,0 при помощи 0,1 н . раствора гидрокарбоната натрия. В круглодонную колбу емкостью 2 л помещают 20 мл спиртового раствора лецитина Х г / л ) . Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при 2,0 мм р т . с т . и 40°С. В колбу добавляют раствор антибиотика и интенсивно встряхивают при 45°С в течение 20 мин. После окончания встряхивания полученную эмульсию охлаждают до комнатной температуры и разбавляют эктернцидом до 40 мл. Полученную взвесь липо с 65 00 О 00 1637035 сом центрифугируют црк 36 OOOg, супернатант отбрасывают, осадок ресуспендируют в эктершщпе (конечный объем 40 мл). Операцию центрифугиро^ вания - ресуспеидирования повторяют трижды. Полученные ЛИПОСОІ>&І могут быть лиофилизироваиы, Б.Включение в мультиламеллярные лкпосомы окситетрациклина при рН 2 , 5 . 7,0 мг окситетрациклииа растворяют в 10 мп экстерицида, рН которого доведен до 2,5 при помощи 0,1 н . раствйра гидрокарбона га натрия. Дальнейшую обработку проводят по примеру 1А. В. Включение в г^льтнламеллярные липосомы окснтетрациклииа при рН 7,0. 6,9 мг окситетрациклина растворяют в 10 мл эктерицида, рН которого доведен до 7,0 при помощи 0,1 н . раствода гидрокарбоната натрия.Дальнейшую обработку проводят по примеру 1А. П р и м е р 2. Получение моноламелляриых лнпосом методом детергент 1 ного диализа (общая методика), К 20 мл 0,4%-ного раствора трнтона-Х-ЮО прибавляют 2 мл 10%-ного спиртового раствора лецитина.Спирт отгоняют при 20 мм р т . с т . и 40°С. Полученную прозрачную жидкость трижды диализуют через мембрану аппарата "Искусственная почка" против пятикратного объема эктерицида (каждый диализ проводят в течение 4 ч ) . A. Инкапсулирование эритромицина фосфата. • рИ эктерицида доводят до 8,0 при помощи 0,1 н . раствора гидрокарбоната натрия. В 20 мл полученного раствора растворяют тритог-Х-100 и эритромицина фосфат (конечные концентрации 0,4% и 123 г/л соответственно). Далее по примеру 2 проводят обработку смеси. Б. Инкапсулирование окситетрациклина при рН 2 , 5 . рН эктерицида доводят до 2,5 при помощи 0,1 и. раствора гидрокарбоната натрия. В 20 мл полученного раствора растворяют тритон-Х-100 и окситетрациклин (конечные концентрации 0,4% и 7,0 г/л соответственно). Целее обработку проводят по общей методике припера 2. B. Инкапсулирование окситетрацикдина при рН 7 , 0 . рН эктерицида доводят до 7,0 при помощи 0,1 н, раствора гндрокарбоната натрия. Далее обработку проводят по примеру 2Б, П р и м е р З . Получение липосом методом этанольной инжекции (общая методика), 2 мл 10%-ного раствора лецитина быстро выпрыскивают в 40 мл эктери10 цида (40°С) при интенсивном перемешивании. Полученную ^ з в е с ь липосом охлаждают до комнатной температуры, не прекращая перемешивание» затем центрифугируют при 60 000g и 0°С. 15 Супернатант отбрасывают, осадок р е суслендиругот в эктерициде (конечный объем 40 мл). Операцию центрифугироваиия-ресуспендирования проводят 5 раз. 20 А. Инкапсулирование эритромицина фосфата. рН эктерицида доводят до 8,0 при помощи 0,1 н . раствора гидрокарбона25 та натрия. В 40 мл полученного р а с т вора растворяют (при 40°С) до насыщения эритромицина фосфат. В полученный раствор (при той же температуре) при интенсивном помешивании впрыскивают 2 мл І О/?-ного спиртового раство30 ра лецитина. Дальнейшую обработку проводят по общей методике примера 3, ,86 В2,0*1,00 Нет j 4,1 і 0,95 Б2,«± 1,00 8,00 4I,0± 1,10 6 6 , 0 t 1.12 Твяи-80 2.50 8,00 33,l±1,O0 3 6 . 9 t 1.20 Twm-BO 2,50 2,50 t 8,00 9,0±l,00 33,040,99 1 l D | I H I I • « і t o t . Лияосо»»! крвякпиі лйофилизировапкые 2 г . , > Липосот не формируются Тс же Твия-аО 2,50 я водной Фазе - 3 нес. " " " 1637085 Редактор Л.Лашкова Составитель С.Мельникова Техред М.Дидык ^ Корректор С.Шекмар Заказ 1067 Тираж 303 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101