Спосіб спектрофотометричного визначення ніфедипіну в комбінованому лікарському засобі

Реферат: Спосіб спектрофотометричного визначення кількісного вмісту ніфедипіну у таблетках включає приготування аналітичного розчину з подальшим його спектрофотометруванням та розрахунком кількісного вмісту ніфедипіну. Спосіб використовується для визначення ніфедипіну в комбінації з атенололом та хлорталідоном, приготування аналітичного розчину проводять шляхом екстрагування ніфедипіну з таблеткової маси за допомогою ацетону, що виключає супутню екстракцію атенололу та хлорталідону. Також готується розчин стандартного зразку, оптичну густину розчинів вимірюють за довжини хвилі 336 нм, причому оптичну густину кожної проби вимірюють тричі з вийманням кювети завтовшки 1 см, а кількісний вміст ніфедипіну розраховується за методом стандарту. UA 91987 U (12) UA 91987 U UA 91987 U 5 10 15 Корисна модель належить до фармації, зокрема до способів хімічного аналізу, а саме до контролю якості лікарських форм промислового виробництва, які містять ніфедипін у комбінації з атенололом та хлорталідоном. За даними літератури кількісне визначення ніфедипіну в субстанції можна визначати методом церіметрії, методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ), УФспектрофотометрією, розраховуючи вміст діючої речовини методом стандарту та методом питомого показника поглинання, методом екстракційної спектрофотометрії, термографії, спектрофлуориметрії. Усі ці методи характеризуються своєю похибкою вимірювання і мають як ряд переваг, так і ряд недоліків, пов'язаних з розкладанням ніфедипіну під час аналізу, неселективністю колориметричних реакцій, нестійкістю забарвлених сполук, відсутністю специфічності та точності проведення аналізу, складністю, необгрунтованою процедурою пробопідготовки та ін. [1-8]. До аналогів заявленого способу спектрофотометричного кількісного визначення ніфедипіну можна віднести наступний спосіб кількісного визначення ніфедипіну в однокомпонентних таблетках: точну наважку таблеткової маси, що відповідає 0,03 г ніфедипіну розчиняють у 2 мл хлороформу доводять об'єм до 100 мл безводним етиловим спиртом, перемішують та фільтрують. 5 мл одержаного розчину доводять безводним етанолом до 100 мл і спектрофотометрують за довжини хвилі 333 нм. Вміст ніфедипіну розраховують за питомим A 1%  140 20 25 30 35 40 45 50 55 60 показником поглинання 1см [9]. Основним недоліком даного методу можна вважати неможливість визначення ніфедипіну у комбінації з атенололом та хлорталідоном, оскільки всі ці речовини розчинні у спирті та будуть заважати визначенню один одного у комбінації. Даний метод є дуже чутливим до класу приладу, тобто різні прилади дають значні відхилення величини поглинання для одного й того ж розчину. Тобто даний метод не дозволяє точно визначити кількісний вміст ніфедипіну в умовах різних лабораторій, а також не дозволяє визначити кількісний вміст ніфедипіну в комбінації з іншими лікарськими засобами. Задача корисної моделі полягає у створенні простого способу кількісного визначення ніфедипіну у комбінованому лікарському засобі, який би дозволяв забезпечити необхідну специфічність, точність та відтворюваність результатів аналізу при проведенні контролю якості. Поставлена задача вирішується тим що, що спосіб спектрофотометричного визначення кількісного вмісту ніфедипіну у таблетках, включає приготування аналітичного розчину з подальшим його спектрофотометруванням та розрахунком кількісного вмісту ніфедипіну. Згідно з корисною моделлю, передбачено, що спосіб використовується для визначення ніфедипіну в комбінації з атенололом та хлоргалідоном, приготування аналітичного розчину проводять шляхом екстрагування ніфедипіну з таблеткової маси за допомогою ацетону, що виключає супутню екстракцію атенололу та хлорталідону, також готується розчин стандартного зразку, оптичну густину розчинів вимірюють за довжини хвилі 336 нм, причому оптичну густину кожної проби вимірюють тричі з вийманням кювети завтовшки 1 см, а кількісний вміст ніфедипіну розраховується за методом стандарту. Всі параметри заявленого способу визначені дослідним шляхом. Придатність заявленої методики підтверджується валідаційними характеристиками [10, 11]. Оптичну густину досліджуваних розчинів доцільно визначати спектрофотометричним методом за довжини хвилі 336 нм, оскільки на даній ділянці спектру для молекули ніфедипіну спостерігається пологий максимум поглинання. -5 Розведення досліджуваних розчинів до 410 г/мл забезпечує величину значення оптичної густини в межах 0,4-0,7, що суттєво підвищує точність заявленого способу. Заявлений спосіб здійснюється наступним чином: Аналітичний розчин препарату: Точну наважку порошку таблеток, еквівалентну 50 мг ніфедипіну поміщають в круглодонну колбу місткістю 25 мл, додають 10 мл ацетону і ретельно збовтують протягом 10 хв. Отриманий розчин фільтрують крізь паперовий фільтр "синя стрічка", до залишку додають ще 10 мл ацетону, збовтують і фільтрують через той самий фільтр. Операцію повторюють ще один раз. Ацетон з фільтрату відганяють, залишок висушують у сушильній шафі при 100-105 °C до повного видалення розчинника. Залишок розчиняють в 50 мл 95 % розчину спирту етилового, перемішують 25 хв, фільтрують, відкидаючи перші 10 мл фільтрату. 2 мл фільтрату поміщають в колбу місткістю 50 мл і доводять до мітки 95 % розчином спирту етилового. Стандартний розчин: 50,0 мг (точна наважка) стандартного зразку (СЗ) ніфедипіну (що відповідає вимогам ДФУ) розчиняють у 95 % розчині спирту етилового і доводять об'єм розчину тим самим розчинником до 50,0 мл, беруть аліквоту 2 мл і переносять її в колбу місткістю 50,0 мл, доводячи до мітки 95 % розчином спирту етилового. 1 UA 91987 U 5 10 15 20 25 Оптичну густину аналітичного та стандартного розчинів вимірюють за аналітичної довжини хвилі 336 нм відносно розчину порівняння - 95 % етиловий спирт. Вимірювання оптичної густини отриманих розчинів проводять тричі з вийманням кювети з використанням кювети завдовжки 1 см при температурі 20±2 °C за однакових умов з мінімальним інтервалом у часі. У порівнянні з аналогічними способами, запропонований спосіб характеризується рядом переваг: по-перше, для екстрагування ніфедипіну із таблеткової маси запропоновано використовувати ацетон, який не екстрагує інші діючі речовини таблетки, по-друге, для кількісного вмісту ніфедипіну запропоновано використання методу стандарту, який дозволяє нівелювати похибку обладнання, вплив температури і враховує вилив мірного посуду та пробопідготовки на невизначеність аналізу. Концентрація аналітичного розчину і розчину робочого стандарту підібрана таким чином, що оптична густина на спектральній ділянці, що досліджується, знаходиться в межах від 0,4-0,7, що сприяє підвищенню точності аналізу. Для запропонованого способу кількісного визначення проведено вивчення наступних валідаційних характеристик: робасність, збіжність, прецизійність, правильність, лінійність. Отриманні валідаційні характеристики узгоджені з критеріями відповідності згідно до вимог ДФУ [10,11]. Корисна модель ілюструється прикладами. Приклад 1. Для дослідження заявленого способу було вивчено лінійність, збіжність та правильність. Вивчення характеру залежності величини оптичної густини від концентрації ніфедипіну проводили за стандартизованою процедурою валідації, при цьому використовуючи 9 вихідних розчинів з точними наважками концентрацій (від 80 % до 120 % із кроком 5 %). Кожний модельний розчин вимірювали тричі. Отримані результати були статистично оброблені та визначено, що вимоги до параметрів лінійної залежності, правильності та збіжності стосовно заявленого способу виконуються на всьому діапазоні концентрацій. Дані розрахунків наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Статистично оброблені результати метрологічних характеристик Метрологічні характеристики Критичні значення Лінійність Кутовий коефіцієнт лінійної залежності b Sb Вільний член лінійної залежності а а, % = 3,8 Sa Коефіцієнт кореляції методики r R0=0,9957 Збіжність та правильність Середнє Z % Відносне стандартне відхилення sZi % Відносний довірчий інтервал Δz ΔAs %=2,4 Критерій невизначеності систематичної δ, %=0,3257 похибки δ Висновок 30 35 Отримані значення 1,0020 0,004777 -0,3404 0,4832 0,9999 99,85 0,1752 0,3257 0,15 Відповідає Дані, отримані у результаті вивчення валідаційних характеристик лінійності, збіжності та правильності, характеризуються їх відповідністю до критеріїв прийнятності заявленого способу. Приклад 2. Важливе значення для випробовування заявленого способу має вивчення параметрів стабільності та робасності, які полягають у визначенні стійкості розчинів ніфедипіну до впливу різних зовнішніх факторів. Дослідження стабільності розчину випробуваного зразку та розчину стандартного зразку проводили шляхом вимірювання оптичної густини кожні 15 хвилин протягом 60 хвилин. Показники стабільності зазначених розчинів у часі наведені у таблиці 2. 2 UA 91987 U Таблиця 2 Вивчення стабільності у часі розчинів випробуваного та стандартного зразків Розчин Випробуваний Стандартний 5 10 15 20 25 30 35 Термін дослідження стабільності nt, хв 0 15 30 45 60 0,599 0,598 0,599 0,603 0,603 0,599 0,599 0,601 0,603 0,603 Середнє RSDt, % 0,600 0,601 0,388 0,333 Δt, % 0,647 0,555 max δ, % 0,77 Дані, наведені у таблиці 2, свідчать про стійкість розчинів випробуваного та робочого стандартного зразків у часі. Статистично оброблені експериментальні дані свідчать, що заявлений спосіб характеризується точністю та може бути відтворний в умовах інших аптек та лабораторій з контролю якості лікарських засобів. Таким чином, заявлений спосіб спектрофотометричного визначення ніфедипіну в складній лікарській формі відповідає вимогам ДФУ, є простим, доступним і може бути використаний для аналізу якості в умовах аптек та лабораторій з контролю якості лікарських засобів. Джерела інформації: 1. British Pharmacopoeia. - London. The Stationary Office. - 2001. - Vol. 1-2. - 3199 p. 2. El-Yazbi Fawzy A. A computerized spectrophotometry method for the determination a atenolol and nifedipine in the presence of degradation products of nifedipine / El-Yazbi Fawzy Α., Kovar KarlArtur // Sci. pharm. - 1998. - Vol. 6, № 4. - P. 325-333. 3. Elwalily A.M. Stability indicating first derivative spectrophotometric assay for nifedipine in its on a diode array spectrophotometr / Elwalily A.M., Korany M.A., El-Anwar F.M., Zamel S.M. // Anal. Lett. - 1992. - Vol. 25, № 1. - P. 81-98. 4. R.O.C. Filho. Stability stadies on nifedipine tablets using thermogravimetry and differential scanning calorimetry / R.O.C. Filho, P.l.B.M. Franco, E.G. Concei, M.l.G. Leles // J. of Thermal Analysis and Calorimetry. - 2008. - Vol. 93 (2). - P. 381-385. 5. N. Rahman. Extractive spectrophotometric methods for the determination of nifedipine in pharmaceuticals formulations using bromocresol green, bromophenol blue, bromothymol blue and eriochrome black Τ / N. Rahman, N.A. Khan, S.N.H. Azmi // Farmaco. - 2004. - Vol. 59 (1). - P. 47-54. 6. Sheika M. Al-Ghannam. Spectrofluorometric determination of nicardipine, nifedipine and isradipine in pharmaceutical preparations and biological fluids / Sheika M. Al-Ghannam, Abeer M. AlOlyan // Cent. Eur. J. Chem. - 2008. - Vol. 6 (2). - P. 222-228. 7. Vertzoni M.V. Sensitive and simple liquid chromatographic method with ultraviolet detection for the determination of nafedipine in canine plasma / Vertzoni M.V., Reppas C., Archontaki H.A. // Anal. Chim. Acta. - 2006. - Vol. 573-574. - P. 298-304. 8. Международная фармакопея / ВОЗ. - 3-е изд. - Женева: ВОЗ, 1995 - Т. 4: Испытания, методы и общие требования. Спецификации для контроля качества фармацевтических препаратов, вспомогательных веществ и дозированных лекарственных форм. - 3-е изд. - 425 с. th 9. Pharmacopoeia of the People's Republic of China. - 8 ed. - People's Medical Publishing House. - 2005. - Vol. 2. - 909 p. 10. Державна Фармакопея України / Державне підприємство "Науково-експертний фармакопейний центр". - Доповнення 1. - Харків: РІРЕГ, 2004. - 520 с. 11. Державна Фармакопея України / Державне підприємство "Науково-експертний фармакопейний центр". - Доповнення 2. - Харків: РІРЕГ, 2008. - 608 с. 40 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 45 50 Спосіб спектрофотометричного визначення кількісного вмісту ніфедипіну у таблетках, що включає приготування аналітичного розчину з подальшим його спектрофотометруванням та розрахунком кількісного вмісту ніфедипіну, який відрізняється тим, що спосіб використовується для визначення ніфедипіну в комбінації з атенололом та хлорталідоном, приготування аналітичного розчину проводять шляхом екстрагування ніфедипіну з таблеткової маси за допомогою ацетону, що виключає супутню екстракцію атенололу та хлорталідону, також готується розчин стандартного зразку, оптичну густину розчинів вимірюють за довжини хвилі 336 нм, причому оптичну густину кожної проби вимірюють тричі з вийманням кювети завтовшки 1 см, а кількісний вміст ніфедипіну розраховується за методом стандарту. 3 UA 91987 U Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4