Спосіб спектрофотометричного визначення піридоксину гідрохлориду у лікарських формах аптечного виготовлення
Номер патенту: 55080
Опубліковано: 10.12.2010
Автори: Георгіянц Вікторія Акопівна, Євтіфєєва Ольга Анатоліївна, Здорик Олександр Анатолійович
Формула / Реферат
Спосіб спектрофотометричного визначення піридоксину гідрохлориду у лікарських формах аптечного виготовлення, що включає приготування аналітичного розчину препарату, вимірювання оптичної густини при довжині хвилі 292 нм та розрахунок концентрації піридоксину гідрохлориду, який відрізняється тим, що поряд з аналітичним додатково готують розчин робочого стандарту, причому розведення обох розчинів здійснюють 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти до концентрації 1.10-5 г/мл і концентрацію піридоксину гідрохлориду визначають за методом стандартів.
Текст
Спосіб спектрофотометричного визначення піридоксину гідрохлориду у лікарських формах 3 аптечного виготовлення, що включає приготування аналітичного розчину препарату, вимірювання оптичної густини при довжині хвилі 292 нм та розрахунок концентрації піридоксину гідрохлориду, згідно з корисною моделлю поряд з аналітичним розчином додатково готують розчин робочого стандарту, причому розведення обох розчинів здійснюють 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти до концентрації 1 10-5 г/мл, а концентрацію піридоксину гідрохлориду визначають за методом стандарту. Всі параметри заявленого способу визначені експериментальним шляхом. Використання 0,1 М розчину хлористоводневої кислоти забезпечує стабілізацію кислотності аналітичного та розчину робочого стандарту, які розводять до однакової концентрації 1 10-5 г/мл, що сприяє підвищенню точності заявленого способу при визначенні піридоксину гідрохлориду в препаратах аптечного приготування в умовах різних аптек та лабораторій. Підвищенню точності також сприяє використання методу стандарту [5], що обумовлює простоту, доступність і точність заявленого способу при його відтворюванні в умовах аптек. Заявлений спосіб здійснюється наступним чином: Аналітичний розчин: 5 мл 0,2% розчину аптечного приготування переносять у мірну колбу місткістю 50 мл та доводять об'єм до мітки 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти (розведення А). 5 мл розведення А переносять у мірну колбу місткістю 100 мл і доводять об'єм до мітки 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти. Оптичну густину аналітичного розчину вимірюють за довжини хвилі 292 нм відносно розчинника - 0,1 М хлористоводневої кислоти. Вимірювання оптичної густини проводять тричі. Розчин робочого стандарту: 0,1 г піридоксину гідрохлориду (точна наважка) поміщають у мірну колбу місткістю 100 мл, додають 70 мл води Р, після повного розчинення кристалів піридоксину гідрохлориду доводять об'єм водою Р до мітки та знову перемішують. 1 мл отриманого розчину поміщають у мірну колбу місткістю 100 мл та доводять об'єм до мітки 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти. Відразу після виготовлення вимірюють оптичну густину аналітичного розчину та розчину робочого стандарту за довжини хвилі 292 нм, специфічної для піридоксину гідрохлориду, компенсаційний розчин - 0,1 М розчин хлористоводневої кислоти. У вимірювальну кювету наливають аналітичний розчин і визначають його оптичну густину проти компенсаційного розчину. Потім кювету виймають, видаляють її вміст, знову наливають аналітичний розчин і визначають оптичну густину. Операцію проводять тричі. У такий самий спосіб отримують не менше трьох значень оптичної густини для робочого стандарту. Вимірювання проводять за однакових умов з мінімальним інтервалом у часі. Для розрахунків використовують середні значення одержаних оптичних густин аналітичного розчину і розчину робочого стандарту. Розрахунок концентрації Сх піридоксину гідрохло 55080 4 риду у випробовуваному зразку проводять за відомою формулою: i Cst Vм.к 100 Cx st Vnin де Аi - оптична густина випробуваного розчину; Ast - оптична густина стандартного розчину; Сst - концентрація розчину стандартного зразку, (г/мл); Vм.к - об'єм мірної колби для розведення, (мл); Vnin - об'єм піпетки, (мл). У порівнянні з прототипом заявлений спосіб має ряд відмінностей та переваг. По-перше, для кількісного визначення вмісту піридоксину запропоновано використання методу стандарту, який дозволяє нівелювати похибку обладнання, вплив температури, вплив мірного посуду та пробопідготовки на невизначеність аналізу. По-друге, визначення піридоксину гідрохлориду пропонується проводити при розведенні 1 10-5 г/мл. По-третє, використання 0,1 М розчину хлористоводневої кислоти в якості розчинника дозволяє контролювати рН аналітичного розчину. Для запропонованого способу кількісного визначення піридоксину гідрохлориду у препаратах аптечного виготовлення проведено вивчення наступних метрологічних характеристик: діапазону застосування, робасності (стабільність та вплив рН), точності, прецизійності на рівні внутрішньолабораторної точності, а також відтворюваності в умовах різних лабораторій. Отримані валідаційні характеристики узгоджувалися з критеріями відповідності згідно до вимог ДФУ [6]. Корисна модель ілюструється прикладами. Приклад 1. Заявлений спосіб був апробований на модельних розчинах піридоксину гідрохлориду. Аналітичний розчин готували наступним чином: 5 мл випробовуваного 0,2 % розчину піридоксину гідрохлориду переносили у мірну колбу місткістю 50 мл та доводили об'єм до мітки 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти, отримуючи розведення А. 5 мл розведення А переносили у мірну колбу 100 мл і доводили об'єм до мітки 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти. Відразу після приготування аналітичного розчину готували розчин робочого стандарту: 0,1 г (точну наважку) піридоксину гідрохлориду поміщали у колбу місткістю 100 мл та доводили об'єм до мітки 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти. 1 мл отриманого розчину поміщали в мірну колбу місткістю 100 мл та доводили об'єм до мітки 0,1 М розчином хлористоводневої кислоти. Після чого вимірювали оптичну густину аналітичного розчину та розчину стандартного зразку по три рази. Розрахунки кількісного вмісту піридоксину гідрохлориду проводили за формулою: i Cst Vм.к 100 Cx st Vnin де Аi - оптична густина випробуваного розчину; Ast - оптична густина стандартного розчину; Сst - концентрація розчину стандартного зразку, (г/мл); Vм.к - об'єм мірної колби для розведення, (мл); Vnin - об'єм піпетки, (мл). 5 55080 Знайдено середні значення трьох вимірів оптичної густини для аналітичного розчину і розчину робочого стандарту: Аі = 0,401, Ast = 0,399 і Cst = 0,002 г/мл. Концентрація піридоксину гідрохлориду склала: 0,401 0,00001 50 100 C X, г / мл 0,00201 / мл. г 0,399 5 5 Одержаний результат свідчить про відповідність якості приготованого в аптечних умовах 0,2% розчину піридоксину гідрохлориду існуючим вимогам [7]. Приклад 2. Згідно з вимогами статті ДФУ «Валідація аналітичних методик», була перевірена робасність, тобто стійкість заявленого способу до малих змін умов проведення експерименту: стабільність аналітичних розчинів у часі та вплив рН на коливання 6 оптичної густини [6]. При вивченні стабільності у часі для аналітичного розчину та розчину робочого стандарту було встановлено, що оптична густина для обох розчинів є стабільною протягом всього проміжку часу (60 хвилин ) і систематична похибка не перевищує припустиме критичне значення max = 0,82%. Для вивчення впливу рН середовища штучно створювали коливання рН ±10%. Аналітичні розчини мають кисле середовище (рН = 1,2), тому інтервал відхилень склав 1,1 - 1,3 рН. Коливання рН відтворювали штучно додаючи по 1-2 краплі 0,1 М розчину НСl або 0,1 М розчину NaOH. В експерименті виявили, що вплив коливань не вносить змін до величин оптичної густини та не перевищує максимальну невизначеність методики. Дані досліду наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Вплив рН на поглинання оптичної густини аналітичними розчинами Розчин № 1 2 3 Оптичні густини Ai, середнє трьох вимірів Випробування 0,1M HCl без додавання 0,1M NaOH 0.3630 0.3610 0.3623 0.4040 0.4010 0.3997 0.4437 0.4407 0.4413 Середнє значення А SrpH RSDpH,% 0.3621 0.4016 0.4419 0.0010 0.0022 0.0016 0.10 0.22 0.16 рН, % 0.30 0.65 0.46 max,% 0,82 Примітка: SrpH - стандартне відхилення оптичної густини; RSDpH - відносне стандартне відхилення оптичної густини; рН - напівширина відносного довірчого інтервалу; max - максимально допустиме значення систематичної похибки. Приклад 3. Дослідження лінійності заявленого способу проводили на п'яти модельних лікарських формах з урахуванням рівномірного розкиду концентрацій 0,2% піридоксину гідрохлориду від номінального вмісту за прописом на всьому діапазоні застосування методики (80%, 90%, 100%, 110%, 120%) за схемою згідно вимогам ДФУ [6]. Одержані результати наведено у таблиці 2 та на графіку лінійності. Таблиця 2 Результати вивчення лінійності модельних розчинів Метрологічні характеристики Кутовий коефіцієнт лінійної залежності b Sb Вільний член лінійної залежності а Критичне значення для вільного члена а Sa Коефіцієнт кореляції методики r Критерій лінійного коефіцієнту кореляції Rc Залишкове стандартне відхилення So 1% Критичне значення залишкового стандартного відхилення, RSD0 Висновок: На Фіг.1 зображено графік лінійної залежності оптичної густини від концентрації піридоксину гідро хлориду у нормалізованих координатах [5]. Результати та параметри 1.0010 0.0055 0.4188 4.096 0.5552 0.9998 0,9951 0,3018 1,4456 Відповідає Одержані результати свідчать про виконання вимог до параметрів лінійної залежності, тобто лінійність методик підтверджується на всьому діапазоні визначення для концентрацій 80 % - 120%. 7 55080 Приклад 4. Відтворюваність заявленого способу оцінювали шляхом проведення міжлабораторних досліджень. Розраховували середнє значення концентрації піридоксину гідрохлориду у лікарській формі за експериментальними даними двох лабораторій Zintra, об'єднане відносне стандартне відхилення 8 RSDZintra, міжлабораторну систематичну погрішність Zintra, відносний довірчий інтервал середнього значення intra, Результати статистичної обробки отриманих експериментальних даних наведено у таблиці 3. Таблиця 3 Результати вивчення відтворюваності заявленого способу введено у % до концентрації знайдено у % до концентрації розчину порівняння (Yi%) № модельного розчину порівняння (Хiфакт%) випробування випробування розчину Лаб.1 Лаб.2 Лаб.1 Лаб.2 1 80.95 80.65 2 80.15 80.15 80.70 80.90 3 80.95 80.40 4 90.48 90.20 5 90.05 90.05 90.23 89.95 6 90.73 89.95 7 100.50 100.25 8 100.15 100.15 100.75 100.50 9 100.25 100.00 10 110.28 110.05 11 110.15 110.15 110.28 110.30 12 110.78 109.80 13 121.05 120.85 14 120.30 120.30 121.05 120.60 15 121.30 121.11 Середнє Об'єднане середнє Z Відносне стандартне відхилення, Szi% Об'єднане відносне стандартне відхилення Відносний довірчий інтервал середнього значення intra,. Критичне значення для прецизійності результатів Міжлабораторну систематичну погрішність Zintra Критерій невизначеності систематичної похибки Отже, для запропонованого спектрофотометричного способу кількісного визначення піридоксину гідрохлориду у 0,2 % розчині аптечного виготовлення, були визначені наступні параметри: робасність, лінійність, відтворюваність. Заявлений спосіб характеризується міжлабораторною систематичною погрішністю Zintra ± 0,38, що не перевищує критерій невизначеності до систематичної похибки. Значення систематичної похибки для заявленого способу майже вдвічі менше систематичної похибки аналогічного спектрофотометричного способу за методом показника поглинання. Отримані результати свідчать про відповідність заявленого способу вимогам ДФУ та можливість його використання для визначення якості лікарських форм аптечного приготування з вмістом піридоксину гідрохлориду в умовах аптек і лабораторій. Заявлений спосіб є простим, експресним, точним та достовірним. Він дозволяє контролювати знайдено у % до введеного Zi=100(Yi/Xi) випробування Лаб.1 Лаб.2 101.00 100.63 100.69 100.94 101.00 100.31 100.47 100.17 100.19 99.89 100.75 99.89 100.35 100.10 100.60 100.35 100.10 99.85 100.11 99.91 100.11 100.14 100.57 99.68 100.63 100.46 100.63 100.25 100.83 100.67 100.54 100.22 100.38 0.31 0.35 0,33 0,04 2,56 0.38 0.82 якість виготовлених в умовах аптеки розчинів піридоксину гідрохлориду. Джерела інформації 1. Melvin Hochberg, Daniel Melnick, and Bernard L. Oser. CHEMICAL DETERMINATION OF PYRIDOXINE. REACTIONS IN PURE SYSTEMS. J. Biol. Chem. 1944 155: 109-117. 2. Mariana Surmeian. Simultaneous Determination of Ascorbic Acid, Pyridoxine Hydrochloride, and Tyrosine by Derivative UV Spectrophotometry. Drug Development and Industrial Pharmacy, Vol. 24, 1998 , p. 691 - 696. 3. Государственная фармакопея СССР. 10-е изд-е. М.: Медицина, 1968. -1080 с. 4. Піняжко P.M. Спектрофотометричний метод аналізу похідних піридину та піридин карбонових кислот / Фармацевтичний журнал. - 1965. - № 5. С.17-21. 5. Евтифеева О.А., Георгиянц В.А. Стандартизованная процедура валидации методик количественного определения экстемпоральных лекарст 9 55080 венных средств в условиях аптек и лабораторий по контролю качества // Фармаком. - 2007. - №1. С.69-81. 6. Державна Фармакопея України /Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». - Доповнення 2. - Харків: РІРЕГ. -2008. - 608 с. Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко 10 7. Наказ МОЗ України № 626 від 15.12.2004 р. (із змінами та доповненнями) "Про затвердження Правил виробництва (виготовлення) лікарських засобів в умовах аптеки" //Юридичні аспекти фармації. - X., 2006. - Т.3. -С.49-59. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for spectropphotometric determination of pyridoxine hydrochloride in pharmaceutical forms of pharmaceutical preparation
Автори англійськоюZdoryk Oleksandr Anatoliiovych, Yevtifeieva Olha Anatoliivna, Heorhiants Viktoria Akopivna
Назва патенту російськоюСпособ спектрофотометрического определения пиридоксина гидрохлорида в лечебных формах аптечного изготовления
Автори російськоюЗдорик Александр Анатолиевич, Евтифеева Ольга Анатолиевна, Георгиянц Виктория Акоповна
МПК / Мітки
МПК: A61K 31/4415, G01J 3/12
Мітки: піридоксину, формах, спектрофотометричного, спосіб, аптечного, визначення, гідрохлориду, лікарських, виготовлення
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/5-55080-sposib-spektrofotometrichnogo-viznachennya-piridoksinu-gidrokhloridu-u-likarskikh-formakh-aptechnogo-vigotovlennya.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб спектрофотометричного визначення піридоксину гідрохлориду у лікарських формах аптечного виготовлення</a>
Попередній патент: Пристрій ущільнювальний штока
Наступний патент: Смуга психологічної підготовки рятувальників
Випадковий патент: Заглибний зонд