1′-гідроксипропан-3′-іміноцимарин, який проявляє кардіотонічну, діуретичну та протизапальну активність, спосіб його одержання

1. 1'-Гідроксипропан-3'-іміноцимарин загальної формули: O O C2 2 (19) 1 3 Винахід відноситься до фармації та медицини, а саме - до засобів на основі природного цимарину для лікування серцево-судинних захворювань і способів одержання таких засобів з подальшим їх використанням в якості лікарських субстанцій при створенні препаратів у різних лікарських формах. Сучасний арсенал лікарських засобів серцевосудинної дії представлений, насамперед, засобами рослинного походження, які здебільшого мають одну фармакологічну дію, притаманну серцевим глікозидам. Альтернативним рішенням є створення конкурентоспроможних лікарських засобів шляхом часткового синтезу на основі природних речовин, яким будуть притаманні основна фармакологічна дія та інші види активності, які використовують у комплексній терапії серцевосудинних захворювань. Відомий високоліпофільний серцевий глікозид середньої тривалості дії дігоксин [1]: Засіб одержують з листя наперстянки шорсткої. Показання до застосування: застійна недостатність кровообігу, необхідність регулювання частоти серцевих скорочень, тахікардія. Відомий також серцевий глікозид Кстрофантин- [1]: Засіб показаний при гострій серцево-судинній недостатності, тахікардії, аритмії. До спільних недоліків дігоксину і строфантинуК можна віднести моно-спрямованість фармакологічної дії, тоді як ефективне лікування захворювань серцево-судинної системи потребує більш широкого спектру фармакологічної дії на різні ланки організму людини. Завдання винаходу полягає у створенні нового засобу з широким спектром фармакологічної дії для лікування захворювань серцево-судинної системи. Поставлене завдання вирішується шляхом створення нової індивідуальної хімічної сполуки 1гідрокси-пропан-3-іміноцимарину загальної формули: 96327 4 що проявляє кардіотонічну, діуретичну та протизапальну активність. Заявлена сполука відноситься до азометинів (шифових основ). Відомий спосіб одержання азометинів (продуктів взаємодії альдегідів з первинними амінами), шляхом нагрівання компонентів у водно-спиртових сумішах [2]. Недоліками відомого способу є низький вихід азометинів, який не перевищує, як правило, 35 %, що зумовлено зворотністю реакції. Це пояснюється тим, що одержані азометини у присутності води гідролізуються з утворенням початкових альдегідів і амінів. Тому використовувати воду в якості середовища для проведення реакції не тільки не можна, а необхідно видаляти навіть ту, що утворюється при взаємодії альдегіду з аміном за реакцією: де R і R = H, Alk, Аг. Завданням винаходу є створення нового засобу одержання 1-гідрокси-пропан-3'-іміноцимарину, який, завдяки використанню безводного органічного розчинника для проведення реакції з наступним ефективним очищенням цільового продукту, дозволяє одержати останній з високим виходом і ступенем очищення. Поставлене завдання вирішується таким чином, що у способі одержання 1-гідрокси-пропан3-іміноцимарину шляхом взаємодії альдегідів з первинними амінами при нагріванні у середовищі органічного розчинника з подальшим очищенням цільового продукту, винаходом передбачено, що реакції піддають природний цимарин і амінопропанол у середовищі киплячої суміші ізопропа-нолу з бензолом з наступним хроматографічним очищенням на колонці силікагелю та кристалізацією цільового продукту. Згідно з винаходом в якості органічного розчинника використовують суміш безводного ізопропанолу з бензолом при співвідношенні 1:2-1:5. Винаходом також передбачено, що амінопропанол піддають реакції у 1,15-1,25-кратній кількості від розрахункової. У відповідності з винаходом після досягнення у реакційному середовищі співвідношення цільового продукту і природного цимарину як 4:1 завершення реакції здійснюють шляхом упарювання реакційної маси до сиропоподібного стану. 5 96327 6 Згідно з винаходом в якості розчинника для - хлористий метилен - метанол (95:5) - 70 мл, елюювання колонки силікагелю використовують - хлористий метилен - метанол (94:6) - 70 мл, суміш хлористого метилену з метанолом у співвід- хлористий метилен - метанол (93:7) - 70 мл, ношенні 92:8 - 90:10 або хлороформу з метанолом - хлористий метилен — метанол (92:8) — 300 у співвідношенні 90:10 - 88:12. мл, Винаходом передбачено, що цільовий продукт - хлористий метилен — метанол (91:9) — 200 кристалізують з суміші етилацетату з диетиловим мл, ефіром. - хлористий метилен - метанол (90:10) - 200 Винахід здійснюють наступним чином. мл. Збирають фракції по 15 мл і аналізують їх за Заявлену сполуку 1-гідрокси-пропан-3допомогою ТШХ в системі хлористий метилен іміноцимарин одержують при взаємодії природнометанол (90:10), проявник - реактив Раймонда. го цимарину з амінопропанолом у середовищі кипЦільова речовина десорбується при проходженні лячої суміші безводного ізопропанолу з бензолом через колонку суміші хлористого метилену — меза наступною схемою: танолу (92:8 - 90:10). До цього елююються супутні речовини. Фракції, які містять цільовий продукт, об’єднують, упарюють на водяній бані. Залишок (5,0 г) розчиняють при нагріванні в 3 мл етилацетату, додають 12 мл диетилового ефіру. Осад, що випав, розтирають скляною паличкою до повного перетворення його на кристалічний порошок. Злиз подальшим хроматографічним очищенням вають матковий розчин, а осад промивають диецільового продукту на колонці силікагелю і кристатиловим ефіром (20 мл2). Висушують у вакуумі. лізацією з суміші етилацетату з діетиловим ефіОдержують 3,85 г цільової речовини (77 % від розром. рахункового). В результаті одержують нову індивідуальну Приклад 2. хімічну сполуку 1-гідрокси-пропан-3-іміноцимарин Проводиться аналогічно прикладу 1, але відз вираженою кардіотонічною, діуретичною та проміною є те, що в якості елюенту при колонковій тизапальною дією, що може бути використана як хроматографії беруть суміш хлористого метилену фармацевтична субстанція при створенні ефектиметанолу (99:1 - 88:12). Одержують цільову речовних засобів у різних лікарських формах для лікувину з виходом 75 % від розрахункового. вання захворювань серцево-судинної системи. Приклад 3. Всі параметри заявленого засобу одержання Проводиться аналогічно прикладу 1, але відзазначеної нової сполуки визначені експериментаміною є те, що реагенту амінопропанолу беруть льним шляхом і дозволяють здійснювати оптима1,1 - кратну кількість від розрахункової. Одержульним чином даний спосіб та обумовлюють одерють цільову речовину з виходом 63 %. жання цільового продукту з високим виходом, Приклад 4. високим ступенем очищення, з широким спектром Проводиться аналогічно прикладу 1, але відфармакологічної дії. міною є те, що реагенту амінопропанолу беруть Винахід ілюструється прикладами. 1,35 - кратну кількість від розрахункової. ОдержуПриклад 1. ють цільову речовину з виходом 71 %. 4,4 г цимарину розчиняють в 25 мл суміші безПриклад 5. водних ізопропанолу та бензолу, додають 0,72 г Проводиться аналогічно прикладу 1, але відамінопропанолу (1,2-кратна кількість). Суміш киміною є те, що реагенту амінопропанолу беруть п'ятять в колбі на масляній бані впродовж 2 годин. 1,15 - кратну кількість від розрахункової. ОдержуТемпературу масляної бані підтримують у межах ють цільову речовину з виходом 76 %. 90-100 °C. По мірі випарювання розчинника через Приклад 6. кожні 20-25 хвилин додають бензол по 10 мл. ЧеПроводиться аналогічно прикладу 1, але відрез 2 години після визначення ТШХ методом співміною є те, що реагенту амінопропанолу беруть відношення цільового продукту і цимарину як 4:1 1,25 - кратну кількість від розрахункової. Одержуреакційний розчин концентрують до сиропоподібють цільову речовину з виходом 75 %. ного стану. Приклад 7. Із одержаного напівпродукту відокремлюють Оцінку кардіотонічної активності 1-гідроксицільову речовину хромато-графуванням на колонпропан-3-іміноцимарину проводили у дослідах на ці силікагелю. Силікагель з розміром часток 0,04білих щурах лінії Вістар масою 200-250 г. Щурів 0,06 мм у кількості 300 г змішують з хлористим наркотизували тіопенталом натрію у дозі 50 мг/кг. метиленом і суміш переносять у скляну хроматогПід час експерименту проводили реєстрацію часрафічну колонку (внутрішній діаметр 25 мм). Фільтоти і глибини дихальних екскурсій, пульсу, та скотрувальний матеріал - вата. Напівпродукт синтезу рочувальну активність міокарду за допомогою ме(15 мл) переносять у колонку на адсорбент. Елютоду електрокардіографії. Внутрішньочеревно юють сумішшю хлористого метилену - метанолу вводили 1-гідрокси-пропан-3-іміноцимарин у дозі 99:1-90:10: 7,5 мг/кг. Одержані результати представлені у - хлористий метилен - метанол (99:1) - 70 мл, таблиці 1. - хлористий метилен - метанол (98:2) - 70 мл, Через 10 хвилин після внутрішньочеревного - хлористий метилен - метанол (97:3) - 70 мл, введення у дозі 7,5 мг/кг 1-гідрокси-пропан-З'- хлористий метилен - метанол (96:4) - 70 мл, іміноцимарину спостерігали тенденцію до урі 7 96327 8 дження частоти та збільшення амплітуди дихальз контролем і перевищував за цими показниками них екскурсій, а також відмічали виражене уріпрепарат порівняння дігоксин на 19,5 % та 12,2 % дження частоти серцевих скорочень та збільшення відповідно. амплітуди зубцю R, що свідчитьпро покращення Через 180 хвилин спостерігали урідження часскорочувальної функції міокарду. тоти дихальних екскурсій на 18,2 %, а також уріЧерез 20 хвилин після введення досліджуваної дження частоти серцевих скорочень на 45,1 % та сполуки спостерігали урідження частоти дихальзбільшення амплітуди зубцю R на 23,1 % відповідних екскурсій на 20 %, а також урідження частоти но до контролю. серцевих скорочень на 34,6 % та збільшення ампУрідження частоти дихальних екскурсій на 9,1 літуди зубцю R на 24,6 % відповідно до контролю. %, а частоти серцевих скорочень на 45,1 % та збіНайбільше урідження частоти пульсу та дихальних льшення амплітуди зубцю R на 23,1 % відповідно екскурсій спостерігалось через 120 хвилин після до контролю спостерігалось через 210 хвилин пісвведення 1-гідрокси-пропан-3-іміноцимарину і ля введення 1-гідрокси-пропан-3-іміноцимарину. складало відповідно 48,1 % та 66,1 % в порівнянні Таблиця 1 Кардіотонічна активність 1-гідрокси-пропан-3-іміноцимарину (n=10) Вихідні дані 10 20 40 60 Доза, Частота Частота Частота R, Частота R, Частота мг/кг Пульс R, мм пульс R, мм пульс пульс пульс R, мм дихання дихання дихання мм дихання мм дихання 1 Контроль 150,2 50,0 13,0 148,0 52,0 13,0 150,0 50,0 13,0 152,0 48,0 13,0 152,0 48,0 13,1 У відсотках 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 2 Доcл. 7,5 151,4 52,8 14,2 138,4 45,2 14,8 93,6* 40,0* 16,2* 92,4* 37,6* 17,0* 91,2* 32,0* 17,0* сполука % к контролю 100,8 105,6 109,2 93,5 86,9 113,8 65,4 80,0 124,6 60,7 78,3 130,8 60,0* 66,7 129,8* 3 Дігоксин 2,0 154 55,0 13,5 142,0 48,0 13,8 136,0 46,0 14,9 124,0 44,0 16,0 120,0 40,0 16,2 № Сполука Продовження таблиці 1 90 120 150 180 210 Доза, Частота Частота Частота R, Частота R, Частота мг/кг пульс R, мм пульс R, мм пульс пульс пульс R, мм дихання дихання дихання мм дихання мм дихання Контроль 150,0 46,0 13,1 148,0 46,0 13,1 146,0 46,0 13,0 146,0 44,0 13,0 142,0 44,0 13,0 1 У відсотках 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 Досл. 7,5 80,8* 32,8* 17,5* 71,2* 30,4* 16,5* 72* 34,4* 16,0* 74,0* 36,0* 16,0* 78,0* 40,0 16,0 2 сполука % к контролю 53,9 71,3 134,6 48,1 66,1 126,9 49,3 74,7 123,1 50,7 81,8 123,1 54,9 90,9 123,1 Дігоксин 2,0 110,0* 40,0 16,3* 100,0* 36,0* 15,8* 96,0* 40,0 15,1 100,0* 40,0 14,8 106,0* 40,0 14,5 3 % к контролю 73,3 86,9 124,4 67,6 78,3 120,6 65,8 86,9 116,2 68,5 90,9 113,8 74,6 90,9 111,5 № Сполука. Примітка: * - достовірність результатів при р