Засіб для лікування гематоцитопенічних реакцій теплокровних організмів

Засіб для лікування гематоцитопенічних реакцій теплокровних організмів, що містить природний продукт, який відрізняється тим, що як природний продукт він містить хлорофіл-каротиновий концентрат, виділений з мікроводорості Chlorella vulgaris, і додатково хлорофілін натрію при наступному співвідношенні компонентів, мас.%: Винахід стосується медицини і може бути використаний для запобігання та лікування захворювань крові. Система крові здебільшого найпершою реагує на вплив зовнішніх чинників. Нині найчастіше спостерігаються анемії, тромбоцитопенії, лейкопеніїї різного генезу. В умовах дії несприятливих екологічних факторів пошуки ефективних препаратів для лікування вказаних захворювань стають дедалі актуальнішими. В залежності від виду захворювань застосовують різні засоби їх лікування. Для лікування гіпохромних анемій застосовують сполуки заліза (залізо відновлене, аскорбінат заліза), сполуки миш'яку (миш'яковий ангідрид, калію арсеніт, натрію арсенат); для лікування анемій використовують препарати, одержані з печінки й шлунку (камполон); для лікування злоякісних анемій застосовують вітамінні препарати (вітаміни В6, В12, ВС). Лейкопенії в клінічній практиці лікують за допомогою нуклеінату натрію, пентоксилу, тезану, лейкогену [1]. Найбільш поширеним для лікування захворювань крові є препарат гемостимулін [1], до складу якого входять суха (ліофілізована) кров, лактат закисного заліза та сульфат міді. Строк лікування ним складає 4-5 тижнів. При застосуванні гемостимуліну часто як побічна дія можуть виникати подразнення слизової оболонки шлунку, нудота. Задачею винаходу є створення нового більш ефективного засобу для лікування гематоцитопенічних реакцій, який би діяв у більш короткі строки й не мав побічної дії. Поставлена задача вирішується в засобі для лікування гематоцитопенічних реакцій, що містить природний продукт, в якому згідно з винаходом, як природний продукт міститься хлорофіл-каротиновий концентрат, виділений з мікроводорості Chlorella vulgaris, і додатково хлорофілін натрію при наступному співвідношенні компонентів, мас.%: Компоненти білок ліпіди (з поліненасиченими жирними кислотами до 80 %) каротиноїди похідні хлорофілів терпени Кількість 45 - 50 % 8 - 10 % 0,015 - 0,020 % 0,4 - 0,5 % 1,8 - 2,2 % У токсикологічному відношенні це - нетоксична речовина, яка практично не має побічних ефектів. Хлорофіл-каротиновий концентрат одержують згідно з авторським свідоцтвом СРСР № 820013. Хлорофілін натрію являє собою порошок чорного кольору, розчинний у воді та спирті. Одержують його з хвойної лапки шляхом бензинової екстракції з подальшим нагріванням екстракту до 60-70° С та омиленням 30 %-ним розчином NaOH. Після закінчення омилення реакційну суміш розводять водою в співвідношенні 1:3 і двічі промивають бензином, після чого обробляють її водним розчином C2 (13) 25582 Хлорофіл-каротиновий концентрат являє собою багатокомпонентний засіб, до складу якого входять: (11) Мас.% 97 - 98 2-3 UA Компоненти хлорофіл -каротиновий концентрат хлорофілін натрію Мас.% 97 - 98 2-3 (19) Компоненти хлорофіл -каротиновий концентрат хлорофілін натрію 25582 сірчаної кислоти до кислої реакції і піддають відстоюванню. Нерозчинний у воді хлорофілін-сирець тричі промивають бензином, відганяють розчинник і промивають хлорофілін до нейтральної реакції. Потім хлорофілін розчиняють у спирті й нейтралізують лугом, після чого спирт відганяють. Використовують хлорофілін натрію у вигляді водного чи спиртового розчину. Засіб, що пропонується, отримують шляхом механічного змішування. З метою вивчення характеру дії засобу при гематоцитопеніях різного походження було поставлено досліди на білих неінбредних щурах двох статей, вагою 180-210 г (n = 290), при цьому використовували 3 моделі: 1. Для одержання гемічних анемій тваринам зроблено кровопускання з розрахунку 1 мл на 100 г маси тіла. Вилучений об'єм крові компенсували введенням стерильного фізіологічного розчину в очеревинну порожнину. 2. Анемічну та лейкопенічну реакції одержували зовнішнім рентгенопроміненням з розрахунку 5 Гр на тварину одноразово за допомогою апарату ІГУР. 3. Анемічну, лейкопенічну та тромбоцитопенічну реакції одержували за допомогою перорального введення бензолу по 2 мл/кг на протязі 5 діб. Стан морфологічного складу периферійної крові та кісткового мозку контролювали загальноприйнятними методами за допомогою мазків з наступним забарвленням їх за Романовським-Гимза, Паппенгеймом. Дослідні препарати вводили перорально з розрахунку 2,5 мл/кг маси тіла. При лікуванні викликаних патологійзапропонованим засобом з'ясувалось, що на тлі кровопускання через 5 діб явищ анемій не визначено; при рентгенівському опромінюванні та введенні бензолу спостерігалась тенденція до зменшення еритроцитів (від 9,74 до 9,85 %), кількість яких відновлювалась до 10 доби (табл. 1). Кількість лейкоцитів при кровопусканні та введенні запропонованого засобу залишалась без змін. При рентгенопромінюванні на 10 добу спостерігалась лейкопенія до 16,11 %, при лікуванні тварин запропонованим засобом кількість лейкоцитів повністю відновлювалась через 25 діб. На тлі бензольної лейкопенії кількість лейкоцитів відновлювалась через 15 діб (табл. 2). 2 Таблиця 1 Вплив запропонованого засобу та гемостимуліну на перебіг анемій різної етиології (еритроцити у 1 мм3, білі щури, n = 110) Групи тварин з анеміями різної етиології, фармакологічні втручання Спостереження у динаміці фон через 5 діб 1. контроль 9670440±592730 7484290±670810 2. ХКК 9872560±67840 3. ХКК+ХН (2 %) 9736290±72420 4. ХКК+ХН (2,5 %) 5. ХКК+ХН (3 %) через 10 діб через 15 діб через 20 діб через 25 діб 6422810±586470 8410290±496370 8640480±582870 9310460±67628 9610520±576290 9720490±642260 9640980±574390 10282680±686410 11486360±59638 9816240±64840 9460260±57340 10480710±62440 10629240±56890 107403601±6168 9844960±69470 9940860±58490 10681370±64760 10786220±56470 10484280±62740 10294190±6481 9636270±57840 9984670149820 10292470±76810 10340470±66410 10270670±62280 10674840±7486 6. гемостимулін 9466730±498718 7210460±469560 893288±746212 9192684±576492 10142548±574492 10242826±49264 1. контроль 8876970±572428 7216474±574248 6646472±642863 7467272±611239 6242129±596291 5847229±57247 2. ХКК 9278648±662396 9147277±672576 9249148±681412 9641288±584688 10149492±496833 10469728±74281 3. ХКК+ХН (2 %) 9472860±57810 9560290±62460 9720460±61790 9940290±57460 10416360±52860 10670280±5786 4. ХКК+ХН (2,5 %) 9216830±52460 9420890±61460 9884240±67660 10260490±62810 10540340±61860 10670420±5947 5. ХКК+ХН (3 %) 9147960±54610 9516290±59816 9864460±62390 10194290±64980 10262140±61980 10416840±5749 6. гемостимулін 9476292±572427 7484264±491386 7621734±539436 8864262±619741 9124366±547788 1034621±67351 1. контроль 10241934±741363 8221368±644297 7641247±631496 7964816±539842 8634211±681436 9469176±69341 2. ХКК 9429164±421116 9192349±637447 9337249±583488 9842632±576383 10244126±532911 10416211±49839 3. ХКК+ХН (2 %) 9634810±62810 9570290±57860 9860260±59410 10194940±57260 10362440±56980 10684960±5986 4. ХКК+ХН (2,5 %) 9144830±54980 9446290±51720 9716290±58610 10219380±62450 10419290±67720 10682190+5786 Кровопускання: Бензол: 5. ХКК+ХН (3 %) 9264130±54840 9134980±59760 10294480±62860 10467380±64710 10613240±62410 10846490±6126 6. гемостимулін 8988241±533813 7631247±618472 7149226±548272 7866211±532834 8229144±576721 8966844±54446 25582 3 Ro-опромінення: Таблиця 2 Вплив запропонованого способу та гемостимуліну на перебіг лейкопеній різної етіології (білі щури, n=180) Групи тварин, фармакологічні агенти, вивчені показники Строки спостережень фон через 5 діб через 10 діб через 15 діб через 20 діб через 25 діб Кровопускання: 12726±3622 6473±1648 8917±2416 10263±3687 10988±3639 12194±4293 768916±41269 892239±36434 846436±32637 872491±36737 839496±32478 786536±42788 11984±4367 12127±4819 12773±3687 12894±4837 12681±3688 12914±4937 761639±41728 796817±39734 812316±47821 837429±49217 841637±41986 856733±36981 11649±4963 12464+5146 12863±5881 12916±5746 12982±5416 12984±5183 7445131±39816 812416±41419 846286+47136 872916±39784 894219±37883 899786±36142 11739±3678 12146±4122 12678±4222 12972±3787 12678±3942 12976±4272 11416±3491 12148±3971 12413±3742 12782±3981 12916±4181 12899±4679 738149±42889 846216±36733 852473±39294 868419±41198 879284±42419 894196±37419 12428±4728 11739±3637 11482±4219 11374±3737 11982±4836 12474±3973 747681±49584 673481±57194 641812±43913 636767±42978 729631±42296 768284±54484 Ro-опромінення: 1. контроль - лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 12636±1784 14108±2463 9433±2637 8262±2481 7396±1783 6327±2139 783961±27688 627168±24475 593422±19768 512316±16966 494739±18989 463837±21981 25582 4 1. контроль - лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 2. ХКК -лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 3. ХКК+ХН (2 %) лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 4. ХКК+ХН (2,5 %) лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 5. ХКК+ХН (3 %) лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 6. гемостимулін лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин Продовження таблиці 2 Групи тварин, фармакологічні агенти, вивчені показники Строки спостережень 2.ХКК -лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 3. ХКК+ХН (2 %) лейкоцити, М±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 4. XKK+XH (2,5 %) лейкоцити, M±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 5. XKK+XH (3 %) лейкоцити, M±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 6. гемостимулін - лейкоцити, M±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин через 5 діб через 10 діб через 15 діб через 20 діб через 25 діб 12683±1689 13127±1486 10639±1378 11784±1783 11982±2463 12841±1962 741629±63837 533347±71416 427736±83766 547879±62136 689932±57139 739579±47122 12464+2662 12682±2416 12873±1988 12933±2916 13286±2784 13316±2416 136292±56788 741487±54483 768293±53289 779416±49983 786312±51833 788473±53814 12384±1974 12746±2916 12782±1789 1288111619 12973±1718 12982±1988 139416±56842 746712±51428 752412±56477 768384±51417 789419±47799 793384±49633 12277±1866 12489±1786 12673±1649 12781±1499 13196±1784 13447±1648 746113±42728 762312±41733 781416+37899 796139±34337 798483±36914 797384±41484 11986±3747 12643±4984 10894±4748 9649±3647 11147+4889 11849±4647 743511±57278 782347±48673 794568±58968 812357±67129 823672±54747 842759±67244 Бензол: 1.контроль - лейкоцити, M±m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 2. ХКК -лейкоцити, M +m, тис. у мм3 ретикулоцити на 1 тис. клітин 3. XKK+XH (2 %) лейкоцити, M±m, тис. у мм3 -ретикулоцити на 1 тис. клітин 12846±3462 6493±1966 563711439 6109±1378 9489±2618 11603±4806 746102±36722 691406±29741 612827±27703 598396±31639 547637±27106 596804±37439 11986±2988 10637±1764 10434±2247 11788±1936 11849±1783 11981±2433 738421±29144 744279±27239 760127±19847 765243±21472 766483127129 763492±22481 11899±2149 11916±1788 12146±1984 12478±2916 12672±2144 12416±2016 726834±24916 732429±29718 741327±21416 740294±24418 752136±21733 762436+27648 25582 5 фон Продовження таблиці 2 Групи тварин, фармакологічні агенти, вивчені показники Строки спостережень фон 4. XKK+XH (2,5 %) лейкоцити, M±m, тис. у мм3 -ретикулоцити на 1 тис. клітин 5. XKK+XH (3 %) лейкоцити, M±m, тис. у мм3 -ретикулоцити на 1 тис. клітин 6. гемостимулін -лейкоцити, M±m, тис. у мм3 -ретикулоцити на 1 тис. клітин через 5 діб через 10 діб через 15 діб через 20 діб через 25 діб 11781±1789 12384±1811 12416±1981 12511±1733 12618±1648 12738±1419 731483±34811 741293±29716 751046+27418 756142±24713 762316±21419 772292±29519 11276+1784 11988±1974 12344±1733 12476±2016 12788±2149 12972±2416 742836±24719 756149±21733 761219±24822 778048±21419 786194±29292 788216±27419 12648±4394 11106±5696 10607+5106 11419+5226 11526±6428 12418+5436 729632±37412 677419±41986 684216139828 691427±41728 716427±36422 734842±37427 25582 6 25582 Лікування за допомогою гемостимуліну виявилось значно менш ефективним. Так, при кровопусканні препарат сприяв відновленню кількості еритроцитів через 20 діб, при рентгенівському опромінюванні й бензольній інтоксикації - через 25 діб. Лейкопенічні реакції компенсувались при всіх моделях патології через 25 діб. При аналізі формули крові у контрольних тварин спочатку спостерігались відносний лімфоцитоз, який змінювався лімфопенією, тромбоцитопенією, ретикулоцитопенією, зрушенням формули крові ліворуч. Застосування запропонованого засобу запобігало появі ретикулоцитопеніії, що свідчить про наявність компенсаторних можливостей, тому що ці формені елементи є поліпотентними клітинами. У кінці експерименту у 25 % тварин вивчено мієлограми. При кровопусканні мієлограми мало відрізнялись від показників контрольних тварин. При зовнішньому рентгенопроміненні та бензольній інтоксикації зафіксовано у контрольній групі тварин пригнічення майже всіх ростків крові. Особливо це стосується еритро-, лімфо- та гранулоцитопоезу. При введенні запропонованого засобу та гемостимуліну не спостерігалось значних змін з боку гранулоцитарних елементів, дещо зменшувалась кількість лімфоїдних клітин при відсутності впливу на інші гемопоетичні ростки. У селезінці та лімфовузлах спостерігалась тенденція до зменшення кількості лімфоцитів і локального розвитку строми. Аналогічна картина спостерігалась при вивченні дії запропонованого засобу на культуру кісткового мозку цуценят через 6, 12, 24 години від початку дії препарату. Таким чином, з наведених даних видно, що запропонований препарат у порівнянні з відомими на фоні цитопенічних реакцій діє більш ефективно і значно скорочує строки компенсації патологій, що виникли під впливом зовнішніх чинників. Загалом, засіб сприяє оптимізації кровотворної функції при кровопусканнях, бензольній інтоксикації, зовнішньому іонізаційному опроміненні за рахунок стимуляції гемопоетичних ростків, про що свідчить досить значний ретикулоцитоз у периферійній частині крові. Джерела інформації: 1. Машковский М. Д. Лекарственные средства. Т. ІІІ.- М.: Медицина, 1993. __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 7