Фармацевтичний аерозольний препарат, спосіб його виробництва та спосіб лікування з його використанням

1 Фармацевтичний аерозольний препарат, який відрізняється тим, що містить (a) HFA пропелент, (б) фармацевтично активний поліпептид, який дисперговано у пропеленті, та (в) сурфактант, який являє собою Cs-Сіє жирну кислоту або и сіль, сіль жовчної кислоти, фосфоліпід або алкілсахарид, причому сурфактант посилює системну абсорбцію поліпептиду у нижніх дихальних шляхах 2 Препарат за п 1, який відрізняється тим, що сурфактантом є сіль Cs-Сіє жирної кислоти 3 Препарат за п 2, який відрізняється тим, що сіль жирної кислоти вибрано з натрієвих, калієвих та лізинових солей каприлату (Cs), капринату (Сю), лаурату (С12) та міристату (Си) 4 Препарат за п 1, який відрізняється тим, що сурфактантом є сільтрипдроксижовчної кислоти 5 Препарат за п 4, який відрізняється тим, що сіль жовчної кислоти вибрано з солей холевої, глікохолевої та таурохолевої кислот 6 Препарат за п 5, який відрізняється тим, що сіль жовчної кислоти вибрано з натрієвих та калієвих солей холевої, глікохолевої та таурохолевої кислот 7 Препарат за п 6, який відрізняється тим, що сіллю жовчної кислоти є таурохолат натрію 8 Препарат за п 1, який відрізняється тим, що сурфактантом є одноланцюжковий фосфоліпід, вибраний з лізофосфатидилхолінів, лізофосфатидилгліцеринів, лізофосфатидилетаноламшів, лізофосфатидилінозитів та лізофосфатидилсеринів 9 Препарат за п 1, який відрізняється тим, що сурфактант вибрано з алкілглюкозидів або алкілмальтозидів Зоя 10 Препарат за п 9, який відрізняється тим, що сурфактант вибрано з децилглюкозиду і додецилмальтозиду 11 Препарат за будь-яким з пп 1-10, який відрізняється тим, що пропелент містить 1,1,1,2-тетрафторетан (Р134а), 1,1,1,2,3,3,3-гегтгафторпропан (Р227) або 1,1-дифторетан (Р152а) 12 Препарат за п 11, який відрізняється тим, що пропелент містить 1,1,1,2-тетрафторетан (Р134а) та 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан (Р227) 13 Препарат за п 11 або п 12, який відрізняється тим, що пропелент містить узгоджену за густиною суміш 1,1,1,2-тетрафторетану (Р134а) та 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропану (Р227) 14 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що поліпептид має молекулярну масу до 40 кД включно 15 Препарат за п 14, який відрізняється тим, що поліпептид має молекулярну масу до ЗО кД включно 16 Препарат за п 15, який відрізняється тим, що поліпептид має молекулярну масу до 25 кД включно 17 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що поліпептид має молекулярну масу до 20 кД включно 18 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що поліпептид має молекулярну масу до 15 кД включно 19 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що поліпептид має молекулярну масу до 10 кД включно 20 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що поліпептидом є пептидний гормон 21 Препарат за будь-яким з пп 1-13, який відрізняється тим, що поліпептид вибрано з інсуліну, глюкагону, С-пептиду інсуліну, вазопресину, десмопресину, кортикотропіну (АСТН), кортикотропіновивільнюючого гормону (CRH), гонадотропшовивільнюючого гормону (GnRH), агоністів та антагоністів гонадотропшовивільнюючого гормону, гонадотропшу (лютеїнізуючого гормону чи LHRH), кальцитоншу, паратиреоідного гормону (РТН), бюактивних фрагментів РТН, таких як РТН (34) та РТН (38), соматотропного гормону (GH) (наприклад соматотропного гормону людини (hGH)), coматотропшовивільнюючого гормону (GHRH), со О 42047 матостатину, окситоцину, передсердного натршуретичного фаісгору (ANF), тиротропшовивільнюючого гормону (TRH), дезоксирибонуклеази (DNasa), пролаїсгину та фолікулостимулюючого гормону (FSH) і їх аналогів 22 Препарат за п 21, який відрізняється тим, що поліпептид є інсуліном 23 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що він містить етанол КІЛЬКІСТЮ аж до 20% від маси пропеленту та сурфактанту 24 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що він містить етанол КІЛЬКІСТЮ аж до 5% від маси пропеленту та сурфактанту 25 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що він містить добавки, які вибрано з ад'ювантів, носив, ароматизуючих речовин, буферів, антиоксидантів та ХІМІЧНИХ стабілізаторів 26 Препарат за п 25, який відрізняється тим, що добавки вибрані з лактози, глюкози, фруктози, галактози, трегалози, сахарози, мальтози, рафінози, мальтиту, мелецитози, стахюзи, лактиту, палатиніту, крохмалю, ксиліту, маніту, мюшозиту, їх гідратів, аланіну, гліцину та бетаїну і альбуміну 27 Препарат за п 26, який відрізняється тим, що носієм є мелецитоза 28 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що сурфактант є наявним у співвідношенні сурфактант поліпептид у межах від 1 10 до 1 0,2 29 Препарат за п 28, який відрізняється тим, що сурфактант є наявним у співвідношенні сурфактант поліпептид у межах від 1 4 до 1 1 30 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що поліпептид містить частки, які мають діаметр 0,01-10 мікрон 31 Препарат за п ЗО, який відрізняється тим, що поліпептид містить частки, які мають діаметр 0,1-6 мікрон Цей винахід стосується лікарських препаратів, що містять медично корисні пептиди та білки, для інгаляції з аерозольного інгалятора Ряд ЛІКІВ вводять в аерозольних препаратах через глотку або ніс Спосіб дозування такого аерозольного препарату, який широко використовується, включає приготування такого суспензійного препарату ЛІКІВ, ЯК тон-коздрібнений порошок у зрідженому газі, що він відомий як пропелант Дозуючі інгалятори, що працюють під тиском, або pMDI's як правило використовують для доставки таких препаратів пацієнту Поверхнево-активні речовини або сурфактанти як правило включають для полегшення диспергування ЛІКІВ у пропеленті та для запобігання агрегації мікронізованих часток ЛІКІВ До останнього часу в усіх фармацевтичних аерозольних композиціях використовували про 32 Препарат за п ЗО, який відрізняється тим, що поліпептид містить частки, які мають діаметр 0,1-5 мікрон 33 Препарат за будь-яким з пп 30-32, який відрізняється тим, що, принаймні, 50 % поліпептиду складається з часток зазначеного розміру 34 Препарат за будь-яким з пп 30-32, який відрізняється тим, що, принаймні, 60 % поліпептиду складається з часток зазначеного розміру 35 Препарат за будь-яким з пп 30-32, який відрізняється тим, що, принаймні, 70 % поліпептиду складається з часток зазначеного розміру 36 Препарат за будь-яким з пп 30-32, який відрізняється тим, що, принаймні, 80 % поліпептиду складається з часток зазначеного розміру 37 Препарат за будь-яким з пп 30-32, який відрізняється тим, що, принаймні, 90 % поліпептиду складається з часток зазначеного розміру 38 Препарат за будь-яким з попередніх пунктів, який відрізняється тим, що концентрація поліпептиду складає від 0,1 мг/мл до 25 мг/мл препарату 39 Спосіб виробництва поліпептидного аерозольного препарату, що його заявлено у будьякому з пунктів 1-38, який відрізняється тим, що включає стадії змішування поліпептиду та сурфактанту у водному буфері, висушування для отримання твердого порошку, необов'язково мікронізацм твердого порошку, додання частини пропеленту та, необов'язково, етанолу у посудину при низькій температурі, змішування та додання решти пропеленту та, необов'язково, етанолу 40 Препарат за будь-яким з пп 1-38, який відрізняється тим, що придатний для використання у терапії 41 Препарат за будь-яким з пп 1-38, який відрізняється тим, що є придатним для виробництва медикаменту для лікування захворювань через дихальні шляхи 42 Спосіб лікування пацієнта, що потребує лікування, який відрізняється тим, що включає введення зазначеному пацієнту терапевтично ефективної КІЛЬКОСТІ фармацевтичного аерозольного препарату за будь-яким з пунктів 1-38 пеленти, що містять хлорфторвуглець (CFC's) Типовими поверхнево-активними диспергуючими речовинами, що їх використовували у препаратах, були, наприклад, сорбітантриолеат, олеїнова кислота, лецитіни та етанол Оскільки CFC беруть участь у руйнуванні озонового шару, з'явилось нове покоління пропелентів, щоб посісти їх місце Пдрофгоралканові (HFA) пропеленти, такі як 1,1,1,2-тетрафгоретан (Р134а), 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан (Р227) та 1,1-діфгоретан (Р152а), вважаються найбільш перспективними новими пропелентами Вони не тільки є прийнятними для довкілля, але також мають низьку токсичність та тиск парів, що є придатними для використання у аерозолях Однак, сурфактанти, які традиційно використовуються у СFC-препаратах, не дуже підходять для використання з новим поколінням пропелентів, і тому в останні роки було запропоновано деякі альтернативні сурфактанти для ви 42047 користання специфічно з HFA пропелентами, серед них поліетоксиліровані сурфактанти та фторовані сурфактанти Ліки на основі пептидів традиційно не входять до числа тих ЛІКІВ, ЯКІ ВВОДЯТЬ З аерозольних препаратів, хоч було запропоновано різні аерозольні препарати Наприклад, Патент США № 5284656 описує препарат колонієстимулюючого фактору гранулоцитів (G-SCF), що містить тонкоздрібнений порошок, який включає G-SCF, суспендований у пропеленті, з допоміжною добавкою сурфактанту, такого яктриолеат сорбггану, соєвий лецитін чи олеїнова кислота Патент США № 5364838 описує препарат інсуліну, де сухий порошок інсуліну суспендовано у пропеленті з низькою точкою кипіння з розріджувачем, таким як олеїнова кислота Ми несподівано виявили, що різні речовини, які посилюють абсорбцію поліпептидів у дихальних шляхах також є виключно придатними як сурфактанти для використання з HFA пропелентами Винахід стосується фармацевтичного аерозольного препарату, що містить (a) HFA пропелент, (б) фармацевтично- активний поліпептид, який дисперговано у пропеленті, та (в) сурфактант, яким є Cs-Ci6 жирна кислота або и сіль, сіль жовчної кислоти, фосфоліпід або алкілсахарид, такий сурфактант посилює системну абсорбцію поліпептиду у нижніх дихальних шляхах Сурфактанти, що використовуються у цьому винаході, є на диво придатними для використання з HFA пропелентами, їх властивості щодо посилення абсорбції поліпептиду надають їм подвійну функціональність, що робить їх особливо корисними для використання у цих поліпептидних аерозольних препаратах З-поміж жирних кислот чи їх солей більш прийнятними є солі Cs-Ci6 жирних кислот Прикладами більш прийнятних солей жирних кислот є натрієві, калієві та ЛІЗИНОВІ солі каприлату (Се), капринату (Сю), лаурату (С12) та мірістату (Си) Оскільки природа протиюна не має особливого значення, потенційно корисними є будь-які солі жирних кислот Найбільш прийнятною сіллю жирної кислоти є капринат натрію Підходящими СОЛЯМИ ЖОВЧНИХ КИСЛОТ мо жуть бути, наприклад, солі холевої кислоти, хенодезоксихолевої кислоти, глікохолевої кислоти, тауро-холевої кислоти, глікохенодезоксихолевої кислоти, таурохенодезоксихолевої кислоти, дезоксихолевої кислоти, глікодезоксихолевої кислоти, тауродезоксихолевої кислоти, літохолевої кислоти та урсодезоксихолевої кислоти З-поміж солей жовчних кислот більш прийнятними є солі трипдроксижовчних кислот Більш прийнятними солями є солі холевої, глікохолевої та таурохолевої кислот, особливо їх натрієві та калієві солі Найбільш прийнятною сіллю жовчної кислоти єтаурохолат натрію Підходящими фосфоліпідами можуть бути, наприклад, одноланцюжкові фосфоліпіди, наприклад, лізофосфатиділхолін, л ізофосфатиділ гліцерин, лізофосфатиділетаноламш, лізофосфатиділінозит та лізофосфатиділсерин або дволанцюжкові фосфоліпіди, наприклад, діацилфосфатиділхоліни, діацилфосфатиділгліцерини, діацилфос фатиділетаноламіни, діацилфосфатиділінозити та діацилфосфатиділсерини З-поміж фосфаліпідів більш прийнятними є діацилфосфатиділгліцерини та діацилфосфатиділхоліни, наприклад, дюктаноілфосфатиділгліцерин та дюктаноілфосфатиділхолш Підходящими алкілсахаридами можуть бути, наприклад, алкілглюкозиди або алкілмальтозиди, наприклад, децилглюкозид та додецилмальто-зид Найбільш прийнятними сурфактантами є солі жовчних кислот Пропелент може містити, наприклад, один чи декілька з названих нижче 1,1 1,2-тетрафторетан (Р134а), 1,1,1,2,3,3,3-гегтгафторпропан (Р227) та 1,1-діфгоретан (Р152а), наприклад, можливо у суміші з одним чи декількома іншими пропелантами Більш прийнятно, щоб пропелант містив Р134а або Р227 чи суміш Р134ата Р227, наприклад суміш Р134а та Р227, яку узгоджено за густиною Поліпептид може бути будь-яким медично або діагностично корисним пептидом чи білком малого до середнього розміру, наприклад, аж до молекулярної маси (MW) близько 40 кД, для якого бажаним є системне введення Механізми поліпшення абсорбції поліпептиду, що відповідають цьому винаходу, в основному, є застосовуваними та можуть використовуватись для всіх таких поліпептидів, хоча міра, до якої поліпшується їх абсорбція, може змінюватись ВІДПОВІДНО ДО MW та фізико-хімічних властивостей поліпептиду і специфічного сурфактанту, що використовується Передбачається, що поліпептиди, які мають молекулярну масу аж до ЗО кД мають бути найбільш корисними у цьому винаході, такі як поліпептиди, які мають молекулярну масу аж до 25 кД чи аж до 20 кД, і особливо аж до 15 кД або аж до 10 кД Поліпептид є, більш прийнятно, пептидним гормоном, таким як інсулін, глюкагон, С-пептид інсуліну, вазопресин, десмопресин, кортикотропін (АСТН), корти котропінвивільнюючий гормон (CRH), гонадотропш-вивільнюючий гормон (GnRH), агоністи та антагоністи гонадотропін-вивільнюючого гормону, гонадотропш (лютеїнізуючий гормон або LHRH), кальцитонін, паратиреоідний гормон (РТН), бюактивні фрагменти РТН, такі як РТН(34) та РТН(38), соматотропний гормон (GH) (наприклад соматотропний гормон людини (hGH)), соматотропш-вивільнюючий гормон (GHRH), соматостатин, окситоцин, передсердний натріуретичний фактор (ANF), тіротропш-вивільнюючий гормон (TRH), дезоксирибонуклеаза (DNasa), пролактин та фолікулостимулюючий гормон (FSH) і аналоги будь-якого з вищезазначених Інші можливі поліпептиди включають фактори росту, штерлейкини, поліпептид ні вакцини, ферменти, ендорфіни, глікопротеїни, ліпопротеїни та поліпептиди, втягнені у шлях коагуляції крові, які справляють свою фармакологічну дію системно Передбачається, що більшість, якщо не всі, поліпептидів від малого до середнього розміру може бути ефективно доставлено способами цього винаходу Більш прийнятним поліпептидом є інсулін До препаратів цього винаходу, на доповнення до ЛІКІВ, пропеленту та сурфактанту, може бути включено невелику КІЛЬКІСТЬ етанолу (як правило 42047 до 5%, але, можливо, аж до 20% за масою) Етанол, як правило, включають до аерозольних композицій, тому що він може поліпшити роботу дозуючого клапану, і у деяких випадках - також підвищити стабільність дисперсії Композиція може, звичайно, містити ІНШІ добавки, коли це необхідно, включаючи ІНШІ фармацевтичні активні речовини, ад'юванти, носи, ароматизуючі речовини, буфери, антиоксиданти, ХІМІЧНІ стабілізатори тощо Як приклади підхожих добавок можна навести, наприклад, лактозу, глюкозу, фруктозу, галактозу, трегалозу, сахарозу, мальтозу, рафінозу, мальтит, мелецитозу, стахюзу, лактит, палатиніт, крохмаль, ксиліт, маннит, мюінозит тощо та їх гідрати, і амінокислоти, наприклад аланін, гліцин та бетаїн, та пептиди і білки, наприклад альбумін Більш прийнятним носієм є мелецитоза Препарат ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО винаходу є особливо корисним завдяки ПОДВІЙНІЙ функціональності специфічних сурфактантів, що використовуються Сурфактанти, запропоновані цим винаходом, є не тільки на диво спроможними до утворення тонких дисперсій у новому ПОКОЛІННІ пропелентів, але, що дуже важливо, також поліпшують абсорбцію поліпептиду Ці препарати є стійкими та забезпечують високу бюдоступність поліпептидів з добрим відтворенням Сурфактанти, що використовуються у цьому винаході, можуть покращувати абсорбцію поліпептиду шляхом, наприклад (1) Вдосконалення параклггинної проникності поліпептиду за рахунок індукування структурних змін у тісних контактах між епітеліальними клітинами (2) Вдосконалення трансклггинної проникності поліпептиду шляхом взаємодії з білковими або ЛІПІДНИМИ складовими частинами мембрани або їх екстрагування (3) Взаємодія між підсилювачем та пептидом, яка збільшує розчинність поліпептиду у водному розчині Це може відбуватися за рахунок запобігання утворенню поліпептидних агрегатів (дімерів, тримерів, гексамерів) або за рахунок солюбілізацм поліпептидних молекул у мицелах підсилювача (4) Зменшення в'язкості або розчинення слизового бар'єру, що вистилає альвеоли та проходи легенів, за рахунок чого відкривається доступ до епітеліальної поверхні для безпосередньої абсорбції поліпептиду (5) Зниження активності інгібіторів протеази у легенях та, таким чином, підвищення СТІЙКОСТІ поліпептиду та підсилення його абсорбції Сурфактанти можуть функціонувати тільки за одним з названих вище механізмів або за двома та більше Сурфактант, який діє шляхом кількох механізмів, є більш сприятливим для підвищення ефективної абсорбції поліпептиду, ніж той, що використовує лише один чи два Під виразом "підсилює абсорбцію" розуміють, що КІЛЬКІСТЬ поліпептиду, який абсорбовано у системну циркуляцію у присутності сурфактанту, є більшою, ніж при його відсутності Більш прийнятно, щоб сурфактант був присутнім у цьому винаході у співвідношенні сурфактант поліпептид у межах приблизно від 1 10 до 1 0,2, більш прийнятно від 1 4 до 1 1, більш прийнятно від 1 4 до 1 2,5 Більш прийнятна концентрація поліпептиду у препаратах цього винаходу - від 0,1 мг/мл до 25 мг/мл У міру того, як це є можливим, поліпептид, більш прийнятно, складається з часток, що мають діаметр менше 10 мікрон, наприклад, 0,01-10 мікрон, або 0,1-6 мікрон, наприклад, 0,1-5 мікрон Більш прийнятним є те, щоб, принаймні, 50% поліпептиду складалося з часток у бажаних межах розмірів Наприклад, принаймні, 60%, більш прийнятно, принаймні, 70%, ще більш прийнятно, принаймні, 80% і найбільш прийнятно, принаймні, 90% поліпептиду складається з часток у бажаних межах розмірів Тому поліпептид для використовування у цьому винаході має бути перероблено для включення до препаратів для того, щоб отримати частки у бажаних межах розмірів Наприклад, поліпептид може бути мікронізовано, наприклад, у придатному млині, такому як струминний млин Альтернативно, частки у бажаних межах розмірів можна отримати, наприклад, способами сушіння при розпиленні або регульованої кристалізації, наприклад кристалізації з використанням надкритичних рідин Доцільним Є те, щоб сурфактант для використання у цьому винаході також складався з часток у бажаному діапазоні розмірів ВІДПОВІДНО, поліпептид та сурфактант змішують у водному буфері та висушують, щоб одержати твердий порошок, який потім необов'язково мікронізують Мікронізований порошок додають до фракції пропеланту (та, необов'язково, етанолу) при низькій температурі Після змішування ЛІКІВ додають сурфактант та пропелант, що залишилися, та, необов'язково, етанол, і суспензією заповнюють ПІДХОЖІ контейнери Поліпептидний аерозольний препарат цього винаходу є придатним для місцевого або системного лікування захворювань та може вводитись, наприклад, через верхні та нижні дихальні шляхи, включаючи введення через ніс Таким чином, цей винахід представляє також зазначений поліпептид ний аерозольний препарат для використання у терапії, використання поліпептидного аерозольного препарату у виробництві медикаменту для лікування захворювань через дихальні шляхи та спосіб лікування пацієнта, який потребує лікування, що включає введення зазначеному пацієнтові терапевтично ефективної КІЛЬКОСТІ поліпептидного аерозольного препарату цього винаходу Захворюваннями, які можна лікувати порошком цього винаходу, є деякі з тих, що їх можна лікувати порошкоподібним поліпептидом у кожному випадку, наприклад, препарати, що містять інсулін, ВІДПОВІДНО до цього винаходу, можуть використовуватись, наприклад, при лікування діабетів, препарати, що містять кортикотропін, можуть використовуватись, наприклад, при лікуванні запальних захворювань, препарати, що містять GnRH, можуть бути корисними, наприклад, при лікуванні чоловічої безплідності Показання для усіх зазначених поліпептидів є добре відомими Поліпептидні аерозольні препарати цього винаходу можуть також використовуватись у профілактичних заходах 42047 Наведені нижче приклади представлено для ілюстрації, але не обмеження винаходу Препарати інсуліну у Р134а та/або Р227 готують з різними сурфактантами, щоб оцінити якість одержаних суспензій У наведених нижче прикладах суспензії за якістю оцінюють як "прийнятні" або "добрі" Прийнятна суспензія характеризується однією чи кількома ознаками, такими як повільне розшарування або поділення, готовність до повторного диспергування, слабка флокуляція або відсутність кристалізації чи морфологічних змін, так що дисперсія є досить стійкою для забезпечення рівномірного дозування Добра дисперсія є ще більш стійкою Приклад 1. Інсулін (25-35 частин, як зазначено нижче) додають у ХІМІЧНИЙ стакан з водою та розчинюють Сурфактант (65-75 частин, як зазначено вище) додають та розчинюють і доводять рН до 7,4 Розчин концентрують випарюванням води Одержаний твердий осад подрібнюють, просіюють та мікронізують у струминному млині 40 або 50 мг порошку завантажують у вкриту пластиком скляну пляшечку Пляшечку охолоджують приблизно до -40°С сумішшю сухого льоду (твердого дюксиду вуглецю) та ізопропанолу і додають 10 мл охолодженого Р134а (приблизно -40°С) Пляшечку закривають дозуючим клапаном і потім енергійно сколихують протягом близько ЗО секунд Приклади з 1д до 1п додатково обробляють в ультразвуковій ванні протягом близько 10 хвилин Результати Приклад № Сурфактант Відношення сурфактант:інсулін Суспензія 1а капринат натрію 25 75 добра 1Ь капринат калію 27 73 добра 1с капринат лізину 35 65 добра 1d мірістат натрію 30 70 добра 1е лаурат натрію 25 75 добра 1f каприлат натрію 25 75 добра ig таурохолат натрію 25 75 добра 1h дюктаноїл фосфатид іл 25 75 добра гліцерин 1J додецилмальтозид 25 75 добра 1k лізопальмггоілфос 25 75 прийнятна 25 75 прийнятна 25 75 добра фатіділ гліцерин 1m лізопальмггоілфосфатіділХОЛІН 1n дюктаноілфосфатиділ холін Приклад 2. Капринат натрію (25 частин) та інсулін (75 частин) мікронізують, а потім змішують у сухому стані 40 мг цієї суміші додають до вкритої пластиком скляної пляшечки Пляшечку охолоджують до приблизно -40°С сумішшю сухого льоду та ізопропанолу та додають 10 мл охолодженого (приблизно до -40°С) Р134а Пляшечку закривають дозуючим клапаном і потім енергійно сколихують протягом близько ЗО секунд Одержують добру суспензію Приклад 3. Інсулін (25-35 частин, як зазначено нижче) додають у ХІМІЧНИЙ стакан з водою та розчинюють Сурфактант (65-75 частин, як зазначено вище) додають та розчинюють і доводять рН до 7,4 Розчин концентрують випарюванням води Одержаний твердий осад подрібнюють, просіюють та мікронізують у струминному млині 40 або 50 мг порошку завантажують у вкриту пластиком скляну пляшечку Пляшечку охолоджують приблизно до -40°С сумішшю сухого льоду та ізопропанолу і додають 10 мл охолодженого (приблизно до -40°С) Р227 Пляшечку закривають дозуючим клапаном і потім енергійно сколихують протягом близько ЗО секунд Приклади з Зд до Зп додатково обробляють в ультразвуковій ванні протягом близько 10 хвилин 42047 Результати Приклад № Сурфактант Відношення сурфактант:інсулін Суспензія За капринат натрію 25 75 добра ЗЬ капринат калію 27 73 добра Зс капринат лізину 35 65 добра 3d мірістат натрію 30 70 добра Зе лаурат натрію 25 75 добра 3f каприлат натрію 25 75 добра 3g таурохолат натрію 25 75 добра 3h дюктаноїл фосфатид іл 25 75 добра гліцерин 3] додецилмальтозид 25 75 добра 3k лізопальмггоілфосфат 25 75 прийнятна 25 75 прийнятна 25 75 добра ІДІЛ гліцерин 3m лізопальмггоілфосфат 1 ДІЛ ХОЛІН 3n дюктаноїл фосфатид іл ХОЛІН Приклад 4. Мікронізовані препарати, що містять DNa3y, сурфактант (таурохолат натрію або дюктаноілфосфатиділ гліцерин) та мелецитозу (відношення DNa3a сурфактант мелецитоза - 1 0,33 98,67, загальна маса 50 мг), додають до вкритої пластиком скляної пляшечки, охолоджують приблизно до -40°С Охолоджений пропелант 134а або пропелант 227 (приблизно -40°С, близько 10 мл) додають у пляшечки та закривають дозуючим клапаном і обробляють в ультразвуковій ванні протягом близько 10 хвилин Ідентичні препарати готують, додаючи 5% (мас /мас ) етанолу перед обробленням в ультразвуковій ванні Якість суспензій оцінюють відразу або після зберігання при кімнатній температурі протягом 20 годин У всіх випадках було одержано добрі суспензії Приклад 5. Капринат натрію та інсулін мікронізують окремо і потім змішують у сухому стані Відношення капринату натрію до інсуліну - 25 75 80 мг цієї суміші додають у аерозольну посудину Аерозольну посудину охолоджують приблизно до -40°С суміш шю сухого льоду та ізопропанолу і додають 10 мл охолодженого (приблизно до -40°С) Р134а Аерозольну посудину закривають дозуючим по 50 мкл клапаном і потім обробляють впродовж пари хвилин в ультразвуковій ванні Розміри часток інсуліну в аерозолі, що його виділяють з контейнера, вимірюють за допомогою інерційного сепаратору "Andersen" при 28,3 л/хвил Фракція тонких часток (менше, ніж 6 мкм) складає 41% від дози, яку було виділено Вимірювання часток повторюють після зберігання протягом двох МІСЯЦІВ при кімнатній температурі, та не спостерігають ніякого погіршення Фракція тонких часток складає 46% Приклад 6. 50 аерозольних зразків, що містять інсулін та таурохолат натрію (відношення 75 25, 8 мг/мл) готують так Речовини зважують у хімічному стакані ХІМІЧНИЙ стакан охолоджують приблизно до 40оС сумішшю дюксиду вуглецю та ізопропанолу Додають пропелант (Р134А, приблизно -40°С), суміш перемішують протягом кількох хвилин з ultraturrax, потім вливають у технологічну посудину та ще додають пропелант (Р134А, приблизно -40°С) 42047 (Загальний об'єм 500 мл) Препарат перемішують за допомогою ultraturrax та завантажують у дозуючі інгалятори, 10 мл у кожний Інгалятори закривають дозуючими клапанами Аерозолі зберігають у різних умовах 5°С, сухі умови 2, 8 та 13 тижнів 30°С, відносна вологість 30% 11 тижнів Якість суспензій оцінюють У всіх випадках одержували добрі суспензії Додатково оцінюють стабільність інсуліну шляхом вимірювання з використанням стандартних хроматографічних методик концентрації продуктів розкладання дезамідоінсуліну та інших домішок, що стосуються інсуліну У всіх випадках вміст домішок був у припустимих межах (менші, ніж 5% дезамідоінсуліну та менше, ніж 3% інших домішок, що стосуються інсуліну) Приклад 7. Дозуючий інгалятор, що працює під тиском, який заповнено препаратом з прикладу 5, використовують, і аерозоль, що виділився, збирають у проміжному пристрої Потік повітря (8 л/хвил) пропускають крізь проміжний пристрій у виділяючу систему, дії якої піддають впродовж п'яти хвилин кожного з п'яти собак Цільова інгальована доза дорівнює 1 од інсуліну/кг Бюдоступність визначають, порівнюючи криву вмісту його у плазмі після інгаляції з кривою вмісту у плазмі після внутрішньовенного вливання на ранніх стадіях Бюдоступність дорівнює 66% ЛІКІВ, що дістаються легенів Приклад 8. Дозуючі інгалятори, що працюють під тиском, заповнюють препаратом з прикладу 6 або ВІД ПОВІДНИМ препаратом без підсилювача Кожний інгалятор використовують, і аерозоль, що виділився, збирають у проміжному пристрої Потік повітря (8 л/хвил) пропускають крізь проміжний пристрій у виділяючу систему, дії якої піддають впродовж двох хвилин кожного з п'яти собак Цільова інгальована доза дорівнює 1 од інсуліну/кг Зразки крові збирають перед дозуванням та через різні часові інтервали аж до 245 хвилин після початку дозування Концентрацію інсуліну у плазмі вимірюють за допомогою радюімуноаналізу З препаратів без підсилювача інсулін, в основному, абсорбується відносно повільно з піковими рівнями інсуліну у плазмі, що мають місце між 50 та 100 хвилинами після введення деяким тваринам У інших тварин ПІКОВІ рівні інсуліну у плазмі спостерігають між 10 та 20 хвилинами після введення При абсорбції з препаратів, що відповідають винаходу, піковий рівень інсуліну у плазмі досягається у всіх тварин у межах 10 хвилин після введення з наступнім іншим піком близько 25 хвилин у всіх тварин Як правило більш швидка абсорбція інсуліну з препаратів, що відповідають винаходу, є ближчою до кривих натурального інсуліну в плазмі після приймання їжі у здорових людей Більш того, відсутність відхилень серед тварин показує, що бажаний рівень абсорбції інсуліну більш легко та надійно досягається при використанні препаратів цього винаходу Тираж 50 екз Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна, 88000, м Ужгород, вул Гагаріна, 101 (03122) 3 - 7 2 - 8 9 (03122) 2 - 5 7 - 0 3