5-ацетамідо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанідино-d-гліцеро-d-галактонон-2-єнопіранозонова кислота у кристалічній формі, спосіб її отримання, антивірусна фармацевтична композиція і спосіб її отримання

1 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галактонон-2енопиранозоновая кислота в кристаллической форме 2 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по п 1, кристаллы которой имеют низкое размерное соотношение 3 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по п 2, кристаллы которой являются пластинчатыми 4 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по любому из пп 1-3, в которой практически вся кристаллизационная вода теряется приблизительно при 80-90° С 5 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по любому из пп 1-4, характеризующаяся следующими рентгеноструктурными данными 10,06-30,25 6,77-69,81 6,63-89,61 6,35-12,69 6,05-54,56 5,38-25,11 5,05-98,58 4,61-12,58 4,42-100,00 4,31-8,28 4,17-11,67 3,98-75,00 3,90-52,61 3,77-20,33 3,69-36,17 3,48-26,53 3,41-53,25 3,37-17,61 3,16-18,39 3,02-31,08 2,98-9,25 2,92-6,28 2,87-13,58 2,82-10,78 2,78-6,78 2,74-18,03 2,69-15,33 2,65-6,25 2,63-6,44 2,59-11,44 2,49-14,31 2,45-18,81 2,41-8,64 2,35-11,36 2,19-5,42 2,13-12,25 2,11-6,56 2,02-8,33 1,98-5,47 6 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по п 1, кристаллы которой имеют высокое размерное соотношение 7 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по п 6, кристаллы которой имеют игольчатую форму 8 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по любому из пп 1, 6 или 7, в которой содержание воды является стабильным в широком интервале значений относительной влажности 9 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая ки q ГО (О 46723 слота в кристаллической форме по любому из пп 1, 6-8, в которой 1 моль кристаллизационной воды теряется приблизительно при 84-90°С и еще 1 моль кристаллизационной воды теряется приблизительно при 135-143°С 10 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по любому из пп 1, 6-9, характеризующаяся следующими рентгеноструктурными данными 16,88-66,34 10,38-50,60 9,50-16,08 8,47-40,46 7,12-100,00 5,84-11,78 5,33-18,83 5,21-33,99 4,78-12,94 4,57-75,81 4,32-16,37 4,25-18,49 4,14-43,26 3,96-10,33 3,76-22,11 3,64-25,16 3,57-37,04 3,52-15,69 3,40-16,85 3,34-21,20 3,17-13,52 3,13-17,04 3,06-7,48 2,94-10,19 2,92-8,45 2,86-9,17 2,76-9,56 2,72-9,22 2,67-6,81 2,64-8,06 2,60-5,46 2,58-6,52 2,51-5,31 2,49-6,66 2,45-5,55 2,43-5,89 2,39-15,93 2,38-10,38 2,31-8,40 2,22-5,94 2,16-5,36 2,11-6,28 2,03-7,24 1,91-6,57 11 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по любому из пп 2-5, практически свободная от кристаллической формы по любому из пп 6-10 12 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиноО-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме по любому из пп 6-10, практически свободная от кристаллической формы по любому из пп 2-5 13 Способ получения 5-ацетамидо-2,3,4,5тетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-О-галактонон2-енопиранозоновой кислоты в кристаллической форме, отличающийся тем, что осуществляют кристаллизацию 5-ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси4-гуанидино-О-глицеро-О-галактонон-2енопиранозоновой кислоты из водного раствора 14 Способ по п 13, получения кристаллической формы по любому из пп 2-5 15 Способ по п 14, в котором температуру водного раствора поддерживают выше чем примерно 50°С 16 Способ по п 15, в котором температуру водного раствора поддерживают в интервале от 50 до 55°С 17 Способ по любому из пп 14-16, в котором в водный раствор вводят затравку кристаллов кристаллической формы по любому из пп 2-5 18 Способ по п 13 получения кристаллической формы по любому из пп 6-10 19 Способ по п 18, в котором температуру водного раствора поддерживают менее чем примерно 40°С 20 Способ по п 19, в котором температуру водного раствора поддерживают в интервале от 20 до 30°С 21 Способ по любому из пп 18-20, в котором в водный раствор вводят затравку кристаллов кристаллической формы по любому из пп 6-10 22 Способ по любому из пп 13-21, в котором добавляют противорастворитель в водный раствор 23 Способ по п 22, в котором в качестве противорастворителя используют кетон или алканол 24 Способ по п 23, в котором в качестве противорастворителя используют ацетон 25 Способ получения кристаллической формы по любому из пп 2-5, который включает взаимопревращение кристаллической формы по любому из пп 6-Ю 26 Способ по п 25, в котором взаимопревращение осуществляют путем старения водного раствора 27 Способ по п 25, в котором взаимопревращение осуществляют путем добавления основания к водному раствору 28 Способ получения кристаллической формы по любому из пп 6-10, в котором добавляют водный раствор 5-ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галактонон-2енопиранозоновой кислоты к аналогичному объему противорастворителя 29 Способ по п 28, в котором в качестве противорастворителя используют ацетон 30 Фармацевтическая композиция, обладающая действием противовирусного агента и содержащая в качестве активного компонента 5ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидино-Оглицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновую кислоту в кристаллической форме и фармацевтически приемлемый носитель для нее 31 Фармацевтическая композиция по п 30, в форме порошка 32 Способ получения фармацевтической композиции в виде водного раствора или суспензии, который включает растворение в воде кристаллической 5-ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4 гуанидино-О-глицеро-О-галактонон-2 Настоящее изобретение относится к производным N-ацетил-нейраминовой кислоты и их использованию в медицине Более конкретно, изобретение связано с конкретными физическими формами 5-ацетамидо-2,3,4,5, -тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (4-гуанидиновый аналог ДАНА, также известен как 5-(ацетиламино)2,6-ангидро-3,4,5-тридеокси-4-гуанидино-Оглицеро-О-галакто-нон-2-еноновая кислота), их фармацевтическими рецептурами и их использованию в терапии В опубликованной заявке PCT/AU 91/00161 (публикация No WO 91/16320) описан ряд производных 5-(ацетиламино)-2,3,5-тридеокси-Оглицеро-О-галакто-нон-2-енопиранозоновой кислоты (2,3-дидеокси-2,3-дидегидро-І\І-ацетилнейраминовая кислота, ДАНА), включая 4гуанидиновый аналог ДАНА 4-Гуанидиновый аналог ДАНА получают путем взаимодействия соответствующего О-ацил-защищенного 4-аминового аналога ДАНА с S-метилизомочевиной, с последующим удалением защиты, хроматографической очисткой и сушкой с вымораживанием Структура 4-гуанидинового аналога ДАНА показана ниже он 0) CQjH NH 4—гуанидиновый аналог ДАНА Заявители обнаружили, что соединение формулы (1) может быть получено в кристаллической форме Таким образом, согласно первому аспекту изобретения предоставляется 5-ацетамидо2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-Огалакто-нон-2-енопиранозоновая кислота в кристаллической форме Далее мы обнаружили, что вещество формулы (I) может быть получено путем кристаллизации при определенных условиях в виде кристаллического гидрата (в последующем Гидрат I) Гидрат I существует в виде кристаллов, имеющих малые размерные соотношения, например пластинчатые кристаллы, которые являются благоприятными для фармацевтических рецептур из-за их физических свойств, например хороших характеристик текучести Содержание воды в Гидрате I определяется относительной влажностью (RH) Поглощение воды Гидратом I изменяется от нуля при нулевой относительной влажности до 10% при относительной влажности 90 - 100% 46723 6 енопиранозоновой кислоты Соединение формулы (I) также может кристаллизоваться в виде дигидрата (в последующем Гидрат II) Гидрат II существует в виде кристаллов, имеющих большие размерные соотношения, например игольчатые кристаллы Содержание воды в этих кристаллах остается практически постоянным в широком интервале значений относительной влажности (RH примерно 10 - 90%) Стабильное содержание воды в Гидрате II является преимуществом данной кристаллической формы при использовании в фармацевтике Таким образом, согласно дополнительному аспекту изобретения, предоставляется 5ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидино-Оглицеро-О-галакто-нон-2-енопиранозоновая кислота в форме кристаллов, имеющих малые соразмерные отношения, таких как пластинчатые кристаллы Согласно следующему аспекту изобретения предоставляется 5-ацетамидо-2,3,4,5тетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в форме кристаллов, имеющих большие размерные соотношения, например, игольчатых кристаллов Хотя пластинчатые кристаллы считаются типичной Формой Гидрата I, а игольчатые кристаллы считаются типичной Формой Гидрата II, понятно конечно, что нельзя исключить возможность существования при определенных условиях либо Гидрата I, либо Гидрата II в альтернативных Формах или кристаллах Следует понимать, что все такие альтернативные Формы или альтернативный склад кристаллов охватываются объемом настоящего изобретения Кроме того, предоставляется 5-ацетамидо-2, 3, 4, 5-тетра-деокси-4-гуанидино-О-глицеро-Огалакто-нон-2-енопиранозоновая кислота в форме кристаллов, имеющих стабильное содержание воды в широком интервале значений относительной влажности, например 10 - 30% Гидрат I теряет практически всю свою кристаллизационную воду приблизительно при 80 90°С Разложение происходит при 299°С Гидрат II теряет один моль кристаллизационной воды приблизительно при 84 - 90°С и еще один моль кристаллизационной воды приблизительно при 135 - 143°С Согласно дополнительному аспекту изобретения предоставляется 5-ацетамидо-2,3,4,5тетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-О-галактонон2-енопиранозоновая кислота в форме криталлогидрата, который теряет практически всю свою кристаллизационную воду приблизительно при 80 -90°С Согласно еще одному аспекту изобретения предоставляется 5-ацетамидо-2, 3, 4, 5тетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-О-галактонон-2-енопиранозоновая кислота в форме кристаллогидрата, который теряет один моль кристаллизационной воды приблизительно при 84 8 46723 90°С и еще один моль кристаллизационной воды слоты затравки кристаллов Гидрата I, а Гидрат II приблизительно при 135-143°С может быть получен путем введения затравки кристаллов Гидрата II в водный раствор 5В предпочтительном аспекте изобретение ацетамидо-2,3,4,5-тетра-деокси-4-гуанидино-Ьпредставляет 5-ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4глицеро-О-галакто-нон-2-енопиранозоновой кигуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2слоты енопиронозоновую кислоту в форме Гидрата I, как он определен в изобретении, практически не соДля получения Гидрата II предпочтительно держащую Гидрата II, как он определен в изобреприменять относительно разбавленный водный тении раствор, например, раствор 5-ацетамидо-2,3,4,5тетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-О-галактоВ дополнительном предпочтительном аспекте нон-2-енопиранозоновой кислоты в 15 -30 объем изобретение предоставляет 5-ацетамидо-2,3,4,5воды, например, в 20 объемах воды Гидрат I мотетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-О-галактожет удобно кристаллизоваться из относительно нон-2-енопиранозоновую кислоту в форме Гидраконцентрированного водного раствора, например, та II, как он определен в изобретении, практически раствора 5-ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4не содержащую Гидрата I, как он определен в изобретении гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты в 12 - 20 объемах воТермин "практически не содержащая" или ды, как например в 12-15 объемах воды "практически свободная от" означает, что содержание альтернативного гидрата составляет менее Мы обнаружили, что Гидрат II может превра5%, как, например, менее 2%, например, менее щаться в Гидрат І в водной суспензии или насы1% альтернативного гидрата щенном растворе Такое взаимное превращение может быть осуществлено путем длительного 5-йцетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиностарения водной суспензии или насыщенного расО-глицеро-О-галакто-нон-2-енопиранозоновая китвора Гидрата II, например, старения в течение слота может быть получена в кристаллической ряда дней, например, более 10 суток, например, форме путем кристаллизации соединения из водоколо 15 суток Альтернативно, взаимное превраного раствора щение может быть осуществлено в присутствии Каждый из Гидратов I или II может быть полуоснования, например, органического основания, чен в чистом виде, свободном от альтернативного такого как имидазол гидрата, путем регулирования концентрации раствора и температуры, при которых происходит Выделение либо Гидрата I, либо Гидрата II из кристаллизация водного раствора может быть усилено путем добавления в раствор подходящего противоОбычно 5-ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4растворителя Подходящими противогуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновая кислота может быть получена в растворителями являются смешивающиеся с воформе Гидрата I, путем кристаллизации вещества дой растворители, в которых соединение формуиз водного раствора при температуре выше, чем лы (I) имеет низкую растворимость Удобно, чтобы приблизительно 50°С, предпочтительно при 50 этот противо-растворитель был кетоном, таким 55°С как ацетон, или алканолом, таким как пропанол-2 Предпочтительным противо-растворителем являОбычно 5-ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4ется ацетон гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновая кислота может быть получена в Мы также обнаружили, что добавление водноформе Гидрата II, путем кристаллизации соединего раствора 5-ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4ния из водного раствора при температуре выше, гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2чем приблизительно 40°С, предпочтительно при енопиранозоновой кислоты к аналогичному объе20 - 30°С му противо-растворителя, который определен выше, приводит к осаждению Гидрата II НаприВ типичном случае, кристаллизация 5мер, добавление водного раствора 5-ацетамидоацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидино-О2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-Оглицеро-О-галакто-нон-2-енопиразоновой кислоты галакто-нон-2-енопиранозоновой кислоты в 12 - 15 из водного раствора при температуре в интервале объемах воды к 12 - 20 объемам ацетона дает приблизительно 40-50аС, приводит к образованию кристаллы Гидрата II смеси кристаллов пластинчатой и игольчатой формы Такие смеси неблагоприятны для пригоОписанные здесь способы получения критовления фармацевтических рецептур из-за разсталлического материала, и, в частности, способы личных физических свойств Гидрата I и Гидрата II, получения Гидрата I и Гидрата II, составляют дов частности свойств их текучести полнительные аспекты настоящего изобретения Введение в водный раствор 5-ацетамидо5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидино2,3,4,5-тетраде-окси-4-гуанидино-О-глицеро-ОО-глицеро-О-галакто-нон-2-енопиранозоновая кигалакто-нон-2-енопиранозоновой кислоты затравслота в кристаллической форме может примеки кристаллов Гидрата I или Гидрата II может приняться в качестве противовирусного агента, как вести к кристаллизации затравочного гидрата описано в заявке WO 91/16320, ссылка на которую Поэтому получение Гидрата I или Гидрата II необприведена для сведения ходимо осуществлять в отсутствии затравки не5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидиножелательного гидрата Наоборот, Гидрат I может О-глицеро-О-галакто-нон-2-енопиранозоновая кибыть получен путем введения в водный раствор 5слота в кристаллической форме может входить в ацет-амидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4-гуанидино-Осостав фармацевтической композиции для исглицеро-О-галакто-нон-2-енопиранозоновой ки 46723 пользования в качестве противовирусного агента, как описано в заявке WO 91/16320 Предпочтительные фармацевтические рецептуры или готовые препаративные формы 5ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси~4-гуанидино-Оглицеро-О-галакто-нон-2-енопиранозоновой кислоты включают порошкообразные составы и водные растворы или суспензии Для приготовления предпочтительных порошкообразных составов требуется микронное измельчение лекарственного вещества Хорошие свойства текучести Гидрата I делают его особенно пригодным для микронного измельчения Гидрат II обладает адекватными свойствами текучести, а также особенно быстрой скоростью растворения в воде Эти свойства Гидрата II делают его особенно благоприятным для приготовления водных растворов или суспензий Гидраты I и II подвергались исследованию порошковой дифракции рентгеновских лучей Дифрактограммы были получены при использовании дифрактометра Сименс D-500 и излучения СиКа Интенсивности рентгеновского излучения измеряли с увеличением на 0,02 градуса с 5 секундными интервалами с использованием сцинтилляционного счетчика в интервале величин между 5 и 55°2d В таблицах 1 и 2 соответственно приведены расстояния d и интенсивности I, полученные для Гидрата I и Гидрата II Таблица 1 d(A) 10,06 6,77 6,63 6,35 6, 05 5,38 5, 05 4, 61 4,42 4,31 4,17 3,98 3,90 3,77 3,69 3,48 3,41 3,37 3,16 3,02 2,98 2,92 2,87 2,82 2,78 2,74 2,69 2,65 2,63 2,59 2,49 2,45 I (%) 30,25 69,81 89,61 12,69 54,56 25,11 98,58 12,58 100,00 8,28 11,67 75, 00 52, 61 20,33 36,17 26,53 53,25 17,61 18,39 31,08 9,25 6,28 13,58 10,78 6,78 18,03 15,33 6,25 6,44 11,44 14,31 18,81 10 2,41 2,35 2,19 2,13 2,11 2,02 1,98 8,64 11, 36 5,42 12,25 6,56 8,33 5,47 Таблица 2 d(A) 16,88 10, 38 9,50 8,47 7,12 5,84 5,33 5,21 4,78 4,57 4,32 4,25 4,14 3,96 3,76 3,64 3, 57 3,52 3,40 3,34 3,17 3, 13 3,06 2,94 2,92 2,86 2,76 2,72 2,67 2,64 2,60 2,58 2,51 2,49 2,45 2,43 2,39 2,38 2,31 2,22 2,16 2,11 2,03 1,91 I (%) 66,34 50,60 16,08 40,46 100,00 11,78 18,83 33,99 12,94 75,81 16,37 18,49 43,26 10,33 22,11 25,16 37,04 15,69 16, 85 21,20 13,52 17,04 7,48 10,19 8,45 9,17 9,56 9,22 6,81 8,06 5,46 6,52 5,31 6,66 5,55 5,89 15,93 10,38 8,40 5,94 5,36 6,28 7,24 6,57 Следующие примеры иллюстрируют изобретение, однако они не предназначены для ограничения его Все температуры даны в °С Пример 1 Получение Гидрата I Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (5,0г) и 60мл воды 11 46723 12 нагревают до 100°С, чтобы получить прозрачный Пример 4 Получение Гидрата II раствор Раствор охлаждают в течение 30 минут Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4до 55°С и выдерживают между 55 и 50°С в течегуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2ние 4 часов получая суспензию кристаллов В теенопиранозоновой кислоты (10,0г) и 400мл воды чение 90 минут добавляют 80мл ацетона, причем нагревают 2час при 20°С Полученный раствор температуру поддерживают между 48 и 55°С Обосветляют путем вакуумной фильтрации Добавразовавшуюся суспензию перемешивают 1 час, ляют 110мл ацетона, и твердое вещество начинадавая температуре снизиться примерно до 20°С, ет кристаллизоваться Образовавшуюся суспензатем суспензию оставляют стоять в течение 17 зию перемешивают в течение 2,5час при 20°С часов при комнатной температуре Продукт собиТвердое вещество собирают методом вакуумной рают с помощью вакуумной фильтрации, и осадок фильтрации и промывают 2 раза смесью 4 1 ацена фильтре промывают 2 раза смесью 4 1 ацетотона и воды (по 20мл) и затем 20мл ацетона на и воды (по 10мл) и затем 10мл ацетона ПроТвердое вещество сушат 24час в вакуумном дукт сушат на воздухе при комнатной температуре шкафу при 30°С и затем доводят до равновесной и влажности, получая 4,5г Гидрата I (пластинчавлажности при комнатной температуре и влажнотые кристаллы) сти, получая 7,7г Гидрата II (игольчатые кристаллы) Спектр ПМР (D O) 2,04 (ЗН, с), 3,67 (2Н, 2 м ), 4,23 (1Н, м ), 4,42 (2Н, м ), 5,63 (1Н, д , J = 2,5 ГЦ) ИК - спектр (Нуйол) 3248, 3338, 3253, NH, ОН 1692, 1666, 1646, 1619, 1575, СО (CH3CONH, CO2), CN Содержание воды - 8,4вес % в расчете на Ci2H2oN407-1,7H20 Пример 2 Получение Гидрата I Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (15,0г) и 180мл воды нагревают до 10О°С, получая прозрачный раствор Раствор осветляют путей вакуумной фильтрации через фильтровальную бумагу, затем охлаждают приблизительно до 55°С и выдерживают при температуре между 55 и 50°С в течение 4 часов, чтобы обеспечить начало кристаллизации В течение 120 минут добавляют 210мл ацетона, причем температуру поддерживают между 48 и 55°С Образующуюся суспензию перемешивают и охлаждают до 30°С и затем суспензии дают стоять в течение 17 часов при комнатной температуре Продукт отфильтровывают и промывают 2 раза смесью 4 1 ацетона и воды (по 30мл) и затем 30мл ацетона Твердое вещество сушат на воздухе при комнатной температуре и влажности, получая 12,0г Гидрата I (пластинчатые кристаллы) Характеристики вещества см выше Пример 3 Получение Гидрата II Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (10,Ог) и 100мл воды нагревают до 95°С Полученный раствор осветляют путем вакуумной фильтрации Затем раствор охлаждают до 30°С и добавляют при перемешивании в течение 5 минут 250мл ацетона Образовавшейся густой белой суспензии дают стоять в течение 20 час при комнатной температуре Методом вакуумной фильтрации собирают твердое вещество и промывают 2 раза смесью 4 1 ацетона и воды (по 20мл) и затем 20мл ацетона Твердое вещество сушат в течение 24 час в вакуумном шкафу при 35°С и затем доводят до равновесия с атмосферной влагой при комнатной температуре и влажности, получая 8,16г Гидрата II (игольчатые кристаллы) Характеристики вещества см выше Содержание воды - 10,6вес%, в расчете на C12H20N4O7 Н 2 О - 9,8% Характеристики вещества см выше Содержание воды - 11,1 вес % в расчете HaCi2H2oN407 H2O - 9,8% Пример 5 Получение Гидрата II Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (50,Ог) и 1150мл воды нагревают до 75°С Полученный раствор осветляют путем вакуумной фильтрации и промывают его 100мл воды Затем раствор охлаждают до 7°С в течение 1час и добавляют 500мл ацетона Образовавшийся раствор медленно перемешивают 0,5час , и в течение этого времени начинает кристаллизоваться твердое вещество Затем добавляют в течение 2час 750мл ацетона, поддерживая температуру от 5 до 10°С Продукт собирают методом вакуумной фильтрации и промывают 2 раза смесью 4 1 ацетона и воды (по 100мл) и затем 100мл ацетона Твердое вещество сушат на воздухе при комнатной температуре и влажности, получая 46,Ог Гидрата II (игольчатые кристаллы) Содержание воды - 9,8вес %, в расчете на Данные рентгеноструктурного анализа согласуются со структурой Гидрата II (>99%) Пример 6 Осаждение Гидрата II Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (50,Ог) и 600мл воды нагревают до 100°С Полученный горячий осветленный раствор добавляют в течение 8 минут к 700мл ацетона, быстро перемешиваемого при комнатной температуре, что вызывает повышение температуры смеси от 20 до 56°С и осаждение твердого вещества Образовавшейся суспензии дают охладиться до 20°С при перемешивании, затем твердое вещество собирают методом вакуумной фильтрации и промывают 2 раза смесью 4 1 ацетона и воды (по 100мл) и затем 100мл ацетона Твердое вещество сушат на воздухе при комнатной температуре и влажности, получая 47,9г Гидрата II (игольчатые кристаллы) Содержание воды - 10,Овес %, в расчете на Данные рентгеноструктурного анализа согласуются со структурой Гидрата II (>99%) Пример 7 Кристаллизация Гидрата I из воды Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2 13 14 рата I), затем суспензию перемешивают 3 суток Добавляют 200мл ацетона, и суспензию перемешивают 1 час Твердое вещество собирают методом вакуумной фильтрации, и промывают 2 раз смесью 4 1 ацетона и воды (по 20мл) и затем 20мл ацетона Продукт сушат на воздухе при комнатной температуре и влажности, получая 9,0 г пластинчатых кристаллов Гидрата I Данные рентгеноструктурного анализа согласуются со структурой Гидрата II (>99%) Пример 10 Взаимное превращение Гидрата II в Гидрат I при использовании основания Суспензию Гидрата II 5-Ацетамидо-2,3,4,5тетрадеокси-4-гуанидино-О-глицеро-О-галактонон-2-енониранозоновой кислоты (5,0г) и 30мл воды, содержащей 2,96г имидазола, перемешивают и нагревают при 30°С в течение 40 часов Оставшееся твердое вещество собирают методом вакуумной фильтрации, и промывают водой (2 раза по 1мл и 2 раза по 5мл) Продукт сушат на воздухе при комнатной температуре и влажности, получая 3,93г Гидрата I (пластинчатые кристаллы) ИК - спектр согласуется со структурой Гидрата I Пример 11 Получение Гидрата I путем добавления затравки Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (5,0г) и 60мл воды нагревают при 100°С, получая раствор Образовавшийся раствор осветляют путем вакуумной фильтрации Затем полученный раствор охлаждают примерно до 50°С, вводят затравку Гидрата I и оставляют без перемешивания на 1 час при 50 55°С Поддерживая температуру при 48 - 55°С, добавляют 70мл ацетона Суспензию перемешивают 1 час при 50 - 55°С, затем подвергают старению в течение ночи при комнатной температуре без перемешивания Твердое вещество собирают методом вакуумной фильтрации, и промывают 2 раза смесью 4 1 ацетона и воды (по 10мл) и затем 2 раза ацетоном (по 10мл) Продукт сушат в вакууме, затем доводят до равновесия при комнатной температуре и влажности, получая 3,8г Гидрата I (пластинчатые кристаллы) 46723 енопиранозоновой кислоты (35,7г) и 350 мл воды нагревают до 95°С, получая прозрачный раствор Значение рН раствора доводят до 7,0 (от рН 6,4) водной уксусной кислотой (ЮОмкл, 10об%) Образовавшемуся раствору дают охладиться до комнатной температуры при перемешивании, получая суспензию кристаллов Продукт собирают методом вакуумной фильтрации, затем сушат в вакууме при комнатной температуре, получая 28,9г Гидрата I (пластинчатые кристаллы) ИК - спектр согласуется со структурой Гидрата I Пример 8 Получение Гидрата II путей добавления затравки Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (30,0г) и 540мл воды нагревают при 75°С, получая раствор Образовавшийся раствор осветляют путем вакуумной фильтрации и промывают его 54мл воды Затем раствор нагревают до 100°С, охлаждают до 40°С, вводят затравку Гидрата II (0,Зг) При дальнейшем понижении температуры до комнатной происходит кристаллизация Образовавшуюся суспензию перемешивают 1 час при комнатной температуре, охлаждают до 5°С, затем в течение 1,5 часов добавляют 600мл ацетона Твердое вещество собирают методом вакуумной фильтрации, и промывают 2 раза смесью 4 1 ацетона и воды (по 60мл) и затем 60мл ацетона Твердое вещество сушат на воздухе при комнатной температуре и влажности, получая 26,5 г Гидрата II (игольчатые кристаллы) Данные рентгеноструктурного анализа согласуются со структурой Гидрата II (90 - 95%), (5 10% Гидрата I) Пример 9 Взаимное превращение Гидрата II в Гидрат I при старении Смесь 5-Ацетамидо-2,3,4,5-тетрадеокси-4гуанидино-О-глицеро-О-галакто-нон-2енопиранозоновой кислоты (10,Ог) и 200 мл воды нагревают при 100°С, получая раствор Раствор быстро охлаждают до 30°С, вносят затравку Гидрата II (0,05г) и затем выдерживают в течение ночи без перемешивания В оптическом микроскопе наблюдали исключительно характерные иглы Гидрата II Суспензию подвергают старению без перемешивания при комнатной температуре в течение 11 суток (когда в оптическом микроскопе наблюдали наличие нескольких кристаллов Гид Данные рентгеноструктурного анализа согласуются со структурой Гидрата I ( > 99%) ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044)456-20- 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71