Спосіб компенсації негативного впливу гербіцидів на коропа (cyprinus carpio l.) за використання пробіотичного препарату

Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Спосіб компенсації негативного впливу гербіцидів на коропа (Cyprinus carpio L.), який полягає у тому, що у воду додають пробіотичний препарат для підвищення захисних функцій організму коропа, який відрізняється тим, що як пробіотичний препарат використовують препарат бацилярний субтиліс і доза препарату становить 125 млн. мікробних клітин на 1 дм води, для ікри та личинок коропа препарат вносять одноразово, для дорослих особин один раз на 5-10 днів.

Текст

Реферат: Спосіб компенсації негативного впливу гербіцидів на коропа (Cyprinus carpio L.) полягає у тому, що у воду додають пробіотичний препарат для підвищення захисних функцій організму коропа. Як пробіотичний препарат використовують препарат бацилярний субтиліс і доза препарату становить 125 млн. мікробних клітин на 1 дм води, для ікри та личинок коропа препарат вносять одноразово, для дорослих особин один раз на 5-10 днів. UA 69721 U (12) UA 69721 U UA 69721 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі екології та гідробіології і може бути використана у діяльності систем охорони природи, дослідницьких та рибогосподарських організаціях з метою підвищення захисних функцій організму риб в умовах гербіцидного забруднення. Відомо, що у сучасних лісовому та сільському господарствах широко використовуються засоби хімічного походження, в тому числі гербіциди. Надходження їх до водойм у вигляді аерозолей, при знесенні повітряною хвилею під час обробки об'єктів, що знаходяться поблизу водойм, а також, внаслідок змиву дощовими водами з рослин та ґрунту згубно впливає на риб, призводячи до зниження захисних функцій їхнього організму, появи захворювань і патологій. Упродовж тривалого часу для лікування риб застосовуються антибактеріальні препарати (антибіотики, нітрофурани, сульфаніламіди). Безконтрольне використання цих речовин призвело до різкого зниження їх ефективності [Юхименко Л. Н. Химиотерапия бактериальных болезней рыб, достоинства и недостатки / Л. Н. Юхименко, К. В. Гаврилин, Л. И. Бычкова // Проблемы патологии, иммунологии и охраны здоровья рыб и других гидробионтов: тез. докл. всеросс. науч.-практ. конф. - М.: Россельхозакадемия, 2003. - С. 143-143; Юхименко Л. Н. Проблема экологической безопасности лечебных и профилактических мероприятий в рыбоводстве / Л. Н. Юхименко, Л. И. Бычкова, К. В. Гаврилин, Е. С. Трифонова // Аквакультура и интегрированные технологии: проблемы и возможности: матер, междунар. науч.-практ. конфер. (11-13 апреля 2005 г.). - М.: ГНУ ВНИИР, 2005. - Т. 2. - С. 344-347]. Тому в рибогосподарській практиці постійно проводяться роботи з пошуку ефективних засобів підвищення захисних функцій організму риб, у тому числі в умовах гербіцидного забруднення. В основу корисної моделі поставлено задачу створити такий спосіб компенсації наслідків токсичного впливу гербіцидів на коропа (Cyprinus carpio L.), який можливо було б використовувати у технологіях вирощування ставкових риб і який би забезпечував підвищення їх виживання у разі дії токсикантів. Поставлена задача вирішується шляхом додавання у воду пробіотичного препарату бацилярного субтилісу (БПС-44). Препарат БПС-44 створено на основі аеробних спороутворюючих бактерій Bacillus subtilis 44-p. Штам бактерій Bacillus subtilis 44-р депоновано у Депозитарії Державного науково-контрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів (вул. Донецька, 30, м. Київ) за реєстраційним номером 141. Доза пробіотичного препарату БПС3 44 для риб становить 125 млн. мікробних клітин на 1 дм води. Препарат БПС-44 необхідно вносити: для ікри та личинок коропа - одноразово, для дорослих особин - один раз на 5-10 днів упродовж часу, поки зберігається загроза отруєння риб гербіцидами. В умовах гербіцидного забруднення застосування пробіотичного препарату БПС-44 сприяє підвищенню життєздатності ікри та виживанню личинок коропа; заселенню організму личинок сапрофітною аеробною споровою мікрофлорою; нормалізації функцій крові коропових риб і позитивно впливає на біохімічну рівновагу в організмі риб. Пробіотичний препарат БПС-44 значною мірою нівелює токсичний вплив гербіцидів і може застосовуватись для корегування порушень у риб при їх дії. Можливість здійснення способу відображено у наведених нижче прикладах. Приклад № 1 Вплив гербіциду Раундап на життєздатність ікри коропа та можливість профілактики його токсичної дії пробіотичним препаратом БПС-44. Дослід з вивчення впливу Раундапу (діюча речовина - ізопропіламінна сіль гліфосату, 480 3 г/дм ) [Перелік пестицидів і агрохімікатів, дозволених до використання в Україні / [В. Л. Петрунек, Г. О. Лагуточкіна, Д. В. Іванов та ін.]. - К.: Юнівест Маркетинг, 2001.-274 с.], в 3 3 концентраціях 0,05 ГДК (гранично допустима концентрація) (0,001 мг/дм ), 0,5 ГДК (0,01 мг/дм ), 3 3 3 3 1 ГДК (0,02 мг/дм ), 2 ГДК (0,04 мг/дм ), 4 ГДК (0,08 мг/дм ), 40 ГДК (0,8 мг/дм ), 400 ГДК (8,0 3 3 мг/дм ), 4000 ГДК (80 мг/дм ), а також сумісної дії пробіотичного препарату БПС-44 й Раундапу (у визначених концентраціях) на життєздатність заплідненої ікри коропа, проводили у 1-літрових акваріумах, з відстояною водопровідною водою (температура води становила 18,0-20,2 °C, 3 концентрація кисню - 7,8-8,2 мг/дм , рН - 7,7-8,1). Як спосіб введення БПС-44 в організм риб на ранніх стадіях ембріонального розвитку була проведена обробка заплідненої ікри, шляхом додавання у воду (за добу до внесення Раундапу) пробіотичного препарату, з концентрацією 3 мікроорганізмів Bacillus subtilis 125 млн. мікробних клітин на 1 дм води. У кожному з варіантів використовували по 100 ікринок. Ефективність БПС-44, щодо дії різних концентрацій Раундапу вивчали за кількістю життєздатної ікри методом прямого обліку. Встановлено, що пробіотичний препарат БПС-44 компенсує токсичну дію гербіциду Раундап, про що свідчить збільшення кількості життєздатної ікри на всіх стадіях її розвитку. При дії БПС3 44 та гербіциду, в концентраціях 8,0-80 мг/дм на ікру коропа в період розвитку, а саме від 1 UA 69721 U 5 10 15 20 25 запліднення до кінця гаструляції, виживання ембріонів у порівнянні до тих, що перебували лише під впливом Раундапу достовірно збільшилось, в середньому на 3,6 %, що, на нашу думку, пояснюється підвищенням токсикорезистентності оболонок зародка, завдяки діяльності бактеріального штаму Bacillus subtilis 44-p. Компенсаторний вплив БПС-44 щодо дії Раундапу чітко проявлявся на стадії утворення очних бокалів та рухливості ембріонів в оболонці, де смертність ікри також значно зменшилась. Під час вилуплення личинок загибель ікри у групах з 3 пробіотичним препаратом та концентраціями гліфосату 0,001-80 мг/дм зменшилась в середньому на 9,4 % порівняно з варіантами досліду, де використовували лише Раундап. Приклад № 2 Підвищення життєздатності личинок коропа в умовах дії гербіциду Раундап за використання пробіотичного препарату БПС-44. Дослід з вивчення впливу Раундапу, а також сумісної дії БПС-44 й Раундапу на виживання личинок коропа здійснювали у 1-літрових акваріумах, з відстояною водопровідною водою 3 (температура води була на рівні 20,8-22,1 °C, вміст кисню - 7,0-7,8 мг/дм , рН - 7,5-8,4) у різних варіантах. Варіанти досліду: 1) контроль; 2) вплив різних концентрацій Раундапу, а саме 0,05 3 3 3 3 ГДК (0,001 мг/дм ), 0,5 ГДК (0,01 мг/дм ), 1 ГДК (0,02 мг/дм ), 2 ГДК (0,04 мг/дм ), 4 ГДК (0,08 3 3 3 3 мг/дм ), 40 ГДК (0,8 мг/дм ), 400 ГДК (8,0 мг/дм ), 4000 ГДК (80 мг/дм ) здійснювався тільки на личинок після їхнього вилуплення без попереднього впливу на ікру; 3) з попереднім впливом Раундапу (у всіх визначених концентраціях) на ікру, потім - на личинок; 4) вплив пробіотичного препарату БПС-44 за різних концентрацій Раундапу на личинок коропа без попереднього впливу гербіциду на ікру, дія дослідних препаратів на личинок здійснювалася тільки після їхнього вилуплення; 5) з попереднім впливом досліджуваного гербіциду (у всіх визначених концентраціях) на ікру, потім сумісна дія препарату БПС-44 і Раундапу на личинок. Відхід личинок в усіх варіантах досліду визначали методом прямого обліку. Встановлено, що пробіотичний препарат БПС-44 проявляє суттєвий позитивний вплив на виживання личинок коропа, як тих, що потрапляли у токсичні умови вже у постнатальному розвитку, так і тих, які на стадії ікри піддавалися дії досліджуваного токсиканту. Його ефект найкраще проявляється за умов гербіцидного навантаження, що перевищує ГДК у 2-4 рази (табл.1, 2). 30 Таблиця 1 Вплив Раундапу на виживання личинок коропа, які не піддавалися його попередній дії (упродовж ембріонального розвитку), % (М±m, n=6) Концентрація 3 Раундапу, мг/дм Контроль 0,001 (0,05 ГДК) 0,01 (0,5 ГДК) 0,02 (1 ГДК) 0,04 (2 ГДК) 0,08 (4 ГДК) 0,8 (40 ГДК) 8,0 (400 ГДК) 80 (4000 ГДК) 12 91,8±2,01 90,9±2,80 90,1±1,76 89,6±3,08 87,3±2,21 84,5±2,22* 80,2±2,99* 69,3±2,55* 0,0 Тривалість експозиції, год. 24 48 72 91,1±1,35 90,3±2,11 88,8±1,63 89,2±1,68 86,3±1,70 83,7±1,64* 87,3±1,82 86,7±1,93 83,2±1,69* 86,0±1,66* 83,5±1,99* 81,9±1,34* 83,5±2,24* 81,1±1,72* 76,4±1,98* 80,4±1,62* 78,3±1,44* 70,3±1,50* 72,6±1,67* 55,6±1,32* 48,6±0,92* 58,7±2,37* 22,4±0,29* 4,6±0,09* 0,0 0,0 0,0 96 85,2±2,37 79,0±1,64* 78,4±2,26 74,3±1,60* 62,0±1,53* 43,1±1,55* 12,9±0,18* 0,0 0,0 Таблиця 2 Вплив пробіотичного препарату БПС-44 та Раундапу на виживання личинок коропа, які не піддавалися попередній дії гербіциду (упродовж ембріонального розвитку), % (М±m, n=6) Концентрація 3 Раундапу (мг/дм ) + БПС-44 Контроль 0,001+БПС-44 0,01+БПС-44 0,02+БПС-44 0,04+БПС-44 Тривалість експозиції, год. 12 24 48 72 96 91,8±2,01 92,7±2,25 91,1±1,70 90,4±1,40 89,3±1,90 91,1±1,35 91,5±2,81 90,2±2,76 88,4±1,65 88,1±2,33 90,3±2,11 88,9±2,23 87,6±1,85 87,2±1,21 86,8±2,43 88,8±1,63 85,6±2,76 84,3±1,76 83,8±1,85 81,5±3,11 85,2±2,37 82,1±1,13 81,4±1,44 79,5±2,50 74,6±4,07 2 UA 69721 U Продовження таблиці 2 0,08+БПС-44 0,8+БПС-44 8,0+БПС-44 80+БПС-44 5 10 15 20 88,9±2,53 87,1±1,99 83,0±1,54* 46,1±1,23* 85,3±2,60 84,6±1,79* 67,5±1,31* 37,8±1,64* 83,0±3,00 82,5±3,16 60,1±0,97* 32,8±0,72* 80,2±3,42* 73,1±1,68* 44,5±0,75* 21,0±0,42* 67,7±0,71* 52,0±0,97* 25,3±0,20* 10,6±0,12* Приклад № 3 Використання пробіотичного препарату БПС-44 для формування мікробоценозу личинок коропа та підвищення їх резистентності при дії гербіциду Раундап. У досліді використовували личинок коропа зразки матеріалу відбирали у віці 2, 8 та 14 діб життя личинок, які піддавалися впливу Раундапу й сумісній дії БПС-44 з Раундапом. При проведенні мікробіологічних досліджень, з метою уникнення потрапляння сторонніх мікроорганізмів із води або поверхні, личинок коропа оброблювали етиловим спиртом, а потім, шестикратно промивали у стерильному фізіологічному розчині і гомогенізували у пробірках з цим же розчином у співвідношенні 1:9 (маса: об'єм) до отримання гомогенної суспензії. Перед посівом проби прогрівали на водяній бані при 80 °C упродовж 10 хв. з метою знищення неспорової мікрофлори. В отриманій суспензії визначали титр клітин Bacillus subtilis використовуючи живильне середовище - м'ясопептонний агар. Типовість виділених бактеріальних культур перевіряли під мікроскопом у пофарбованих за Грамом мазках, спостерігаючи типові для аеробних бацил клітини - грампозитивні палички з центрально розташованими спорами. Встановлено, що застосування пробіотичного препарату БПС-44 в умовах гербіцидного забруднення сприяє кількісному збільшенню бацилярної складової мікрофлори та скорішому заселенню організму личинок риб сапрофітною аеробною споровою мікрофлорою. При сумісній дії БПС-44 й різних концентрацій гербіциду Раундап титр мікробних клітин Bacillus subtilis залишається високим протягом 14 діб (табл. 3, 4), що має важливе значення для використання у рибництві даного пробіотичного препарату. Таблиця 3 Кількість життєздатних клітин аеробних бацил в організмі личинок коропа різного віку за дії Раундапу (М±m, n=6) 3 Кількість бактерій, КУО/см , в організмі личинок коропа віком: Концентрація Раундапу у 3 воді акваріуму, мг/дм 2 доби 8 діб 14 діб 3 3 3 0,000 (контроль) (4,0±0,2)·10 (6,3±1,1)·10 (7,2±0,8)·10 3 3 3 0,001 (5,6±1,0)·10 (6,4±1,9)·10 (1,7±0,4)·10 * 3 3 2 0,010 (3,9±1,2)·10 (1,2±0,1)·10 * (8,6±1,4)·10 * 3 2 2 0,020 (3,7±0,6)·10 (9,2±0,9)·10 * (6,8±0,6)·10 * 3 2 2 0,040 (3,2±0,8)·10 (6,6±1,3)·10 * (1,2±0,1)·10 ** 3 2 1 0,080 (2,7±1,1)·10 (5,4±0,9)·10 * (7,6±0,6)·10 *** 3 2 0,800 (1,9±0,5)·10 (1,9±0,4)·10 ** 0,9±0,2*** 3 8,000 (1,4±0,3)·10 X X 80,000 X X X Примітка. Вірогідна різниця порівняно з контрольною групою личинок відповідного віку: *-р

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Method for compensation of herbicides negative effect on carp (cyprinus carpio l.) using probiotic preparation

Автори англійською

Barbukho Olena Volodymyrivna, Zhydenko Alla Oleksandrivna, Aheiev Volodymyr Oleksandrovych

Назва патенту російською

Способ компенсации негативного воздействия гербицидов на карпа (cyprinus carpio l.) при использовании пробиотического препарата

Автори російською

Барбухо Елена Владимиривна, Жиденко Алла Александровна, Агеев Владимир Александрович

МПК / Мітки

МПК: C12N 1/20

Мітки: carpio, коропа, впливу, компенсації, спосіб, використання, пробіотичного, гербіцидів, негативного, препарату, cyprinus

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/7-69721-sposib-kompensaci-negativnogo-vplivu-gerbicidiv-na-koropa-cyprinus-carpio-l-za-vikoristannya-probiotichnogo-preparatu.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб компенсації негативного впливу гербіцидів на коропа (cyprinus carpio l.) за використання пробіотичного препарату</a>

Подібні патенти