Спосіб корекції імунологічних та біохімічних порушень у хворих на хронічний пієлонефрит з рецидивуючим перебігом

Реферат: Спосіб корекції імунологічних та біохімічних порушень у хворих на хронічний пієлонефрит з рецидивуючим перебігом включає традиційну антибактеріальну терапію, додаткове застосування препарату імуномодулюючої дії. Як імуномодулюючий лікарський засіб внутрішньо застосовують Нуклеїнат у дозі 0,25 г 4 рази на добу протягом 14 днів та при зниженні у крові рівнів фактора некрозу пухлин-α та моноцитарного хемоатрактантного протеїну-1 більше ніж на 30 % та більше від вихідних даних, а також при визначенні активності β-галактозидази сечі у межах від 4,5 до 14,6 мкмоль/год/ммоль креатиніну і відсутності реєстрації активності трансамідинази сироватки крові ефект корекції імунологічних та біохімічних порушень вважають досягнутим. UA 82540 U (12) UA 82540 U UA 82540 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Спосіб належить до медицини, а саме до нефрології, клінічної імунології та біохімії, і може бути використаний для підвищення ефективності терапії хворих на хронічний пієлонефрит з рецидивуючим перебігом. Пієлонефрит є одним з найпоширеніших інфекційних захворювань та становить серйозну економічно-соціальну проблему охорони здоров'я як в Україні, так і у всьому світі. Більш ніж у 30 % хворих, які перенесли гострий пієлонефрит, розвивається рецидивуючий перебіг захворювання (більше 3 епізодів протягом року). Лікування пієлонефриту базується на застосуванні антимікробної терапії. Втім, у разі рецидивуючого перебігу пієлонефриту антибактеріальні лікарські засоби використовуються як для лікування, так і для профілактики захворювання, що призводить до появи полірезистентних штамів бактерій, постійної персистенції збудників та вторинного імунодефіциту. На сьогодні є доведеним, що недостатність місцевого та загального імунітету у хворих на пієлонефрит є важливою складовою розвитку рецидивуючого перебігу захворювання. Саме тому застосування препаратів імуномодулюючої дії з метою корекції патологічних зсувів за рахунок підвищення резистентності організму у цієї категорії хворих набувають надзвичайної актуальності. Відомій спосіб комплексної терапії хронічного пієлонефриту (1), який включає доповнення загальновизнаної схеми антибактеріального лікування препаратом імуновіт. Імуновіт є флавоноїдним глікозидом, до складу якого входять рутозид 25 мг та аскорбінова кислота 100 мг і має здатність поглинати вільні радикали, гальмувати перекісне окислювання ліпідів та є стимулятором Т-клітинної ланки імунітету, його призначають по 1 т 3 рази на добу, протягом місяця, що сприяє швидкому покращенню самопочуття хворих, зниженню рівнів лейкоцитурії та бактеріурії. Недоліками способу є те, що цей препарат протипоказаний пацієнтам, що отримують сульфаніламіди та антибіотики групи аміноглікозидів, які є препаратами вибору у хворих на хронічний пієлонефрит. Крім цього імуновіт не впливає на цитокінову ланку імунітету, яка відіграє важливу роль в патогенезі інфекційно-запальних захворювань. Найбільш близьким до способу, що заявляється, є спосіб лікування хворих на хронічний пієлонефрит, взятий нами за найближчий аналог (2), який включає поряд із антибактеріальною терапією додаткове застосування розчину препарату Протефлазид рослинного походження, що має противірусну та імуномодулюючу дію, 3 рази на день за наступною схемою: на 1-й тиждень лікування по 5 крапель (0,2 мл), нанесеними на грудочку, цукру або хліба, на 2 та 3-й тиждень по 10 крапель (0,4 мл), на 4-й тиждень - по 8 крапель (0,3 мл). Недоліками способу є незручність його застосування для хворої людини (3 рази на добу препарат необхідно накрапати на шматочок цукру або хліба), особливо в умовах великого мегаполіса, беручи до уваги той факт, що на хронічний пієлонефрит з рецидивуючим перебігом найчастіше хворіють жінки молодого працездатного віку, які переважно лікуються амбулаторно. До недоліків способу належить також його відносно висока собівартість. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалити спосіб корекції імунологічних та біохімічних порушень у хворих на хронічний пієлонефрит з рецидивуючим перебігом шляхом доповнення схеми антибактеріальної терапії препаратом Нуклеїнат (натрієва сіль нуклеїнової кислоти), що має імуномодулюючу дію з метою підвищення ефективності лікування за рахунок позитивного впливу на функціональну активність імунокомпетентних клітин крові та функціональний стан канальцевого відділу нефрону, для цього до та після лікування, як критерії імунологічних та біохімічних порушень, визначають сироватковий рівень прозапальнихцитокінів - фактор некрозу пухлин-альфа і моноцитарний хемоатрактантний протеїн-1 та показники реноспецифічної ферментурії та ферментемії, зокрема активність канальцевих ферментів лізосомного (β-галактозидази сечі) та мітохондріального (трансамідинази сироватки крові) походження, що дасть можливість залежно від кількісних величин прозапальних цитокінів і показників ферментурії та ферментемії своєчасно дати оцінку ефективності терапії, що була застосована, щодо впливу її на патологічний процес в організмі в цілому та в нирках хворих на хронічний пієлонефрит з рецидивуючим перебігом зокрема, та використовувати одержані дані для подальшої оптимізації лікувальної тактики ведення таких хворих та зниження частоти рецидивів захворювання. Препарат Нуклеїнат має здібність нормалізувати клітинний імунітет, підвищуючи міграцію і кооперацію Т- і В-лімфоцитів і фагоцитарну активність макрофагів, пригнічує підвищену агрегацію тромбоцитів та проявляє протизапальну активність, що призводить до посилення неспецифічної резистенції організму до вірусної та бактеріальної інфекції, нормалізації імунного статусу людини, прискорення процесів регенерації, підвищення енергозабезпечення клітин шляхом стимулювання синтезу макроергічних сполук, пригнічення окислювальних процесів в 1 UA 82540 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 клітинних мембранах, їх стабілізації, оптимізації окислювально-відновних процесів та посилення антиоксидантної активності в тканинах. Поставлена задача вирішується тим, що спосіб корекції імунологічних та біохімічних порушень у хворих на хронічний пієлонефрит з рецидивуючим перебігом, що включає традиційну антибактеріальну терапію, доповнену застосуванням препарату імуномодулюючої дії, згідно з корисною моделлю, як імуномодулюючий лікарський засіб внутрішньо застосовують Нуклеїнат у дозі 0,25 г 4 рази на добу протягом 14 днів та при зниженні у крові рівнів фактора некрозу пухлин-α та моноцитарного хемоатрактантного протеїну-1 більше ніж на 30 % та більше від вихідних даних, а також при визначенні активності β-галактозидази сечі у межах від 4,5 до 14,6 мкмоль/год./ммоль креатиніну і відсутності реєстрації активності трансамідинази сироватки крові ефект корекції імунологічних та біохімічних порушень вважають досягнутим. Спосіб корекції імунологічних та біохімічних порушень у хворих на хронічний пієлонефрит з рецидивуючим перебігом виконують наступним чином: на фоні антибактеріальної терапії (хінолони, цефалоспорини, нітрофурани, один з яких використовують, згідно зі встановленою чутливістю виявлених збудників) призначають препарат Нуклеїнат у дозі 0,25 г, 4 рази на добу протягом 14 днів, побічних реакцій препарату не зафіксовано; - вміст цитокінів (фактор некрозу пухлин-альфа і моноцитарний хемоатрактантний протеїн-1) визначають за допомогою імуноферментного аналізу, згідно з інструкцією виробника; - для визначення активності ферменту β-галактозидази в пробірку беруть 0,2 мл профільтрованої сечі і додають до них 0,3 мл 0,1 М цитратного буферу рН 4,0 та 0,2 мл субстрату, який включає 5,0 мМ розчин 2-нітрофеніл-β-D-галактопіранозиду у 0,1 М цитратному буфері рН 4,0, проби інкубують 30 хв. при 37 °C, ферментативну реакцію зупиняють додаванням 0,8 мл 0,1 М розчину вуглекислого натрію, оптичну щільність пара-нітрофенолу, що утворився, вимірюють на фотоелектроколориметрі при 400 нм проти контрольної проби, у яку розчин субстрату вносять після припинення ферментативної реакції, активність β-галактозидази сечі розраховують у мкмолях пара-нітрофенолу, що утворився протягом 1 години, із розрахунку на 1 ммоль креатиніну сечі, вміст якого визначають за кольоровою реакцією Яффе з пікриновою кислотою; - для визначення активності трансамідинази в центрифужну пробірку вносять 0,35 мл 0,007М розчину L-канаваніну-Н2SО4 (готують на 0,14М фосфатному буфері, рН 7,5), 0,35 мл 0,007М розчину L-орнітину-НСl (готують на 0,14М фосфатному буфері, рН 7,5) та здійснюють преінкубацію протягом 15 хв. при 37 °C у водяній бані, потім у дослідну пробу вносять 0,2 мл сироватки крові, суміш інкубують протягом 60 хв. при 37 °C, у контрольну пробу джерело ферменту (сироватку крові) додають після інкубації, реакцію зупиняють додаванням 0,1 мл 50 % розчину трихлороцтової кислоти, для осадження білків проби центрифугують при 3000 об./хв. 20 хв., потім по 0,5 мл надосадової рідини із дослідної та контрольної проб відбирають у окрему пробірку, доводять водою до 1,0 мл та здійснюють колориметричне визначення L-аргініну, що утворився в результаті ферментативної реакції, за модифікованоюреакцією Сакагучи, для чого до 1,0 мл розчину, що вміщує L-аргінін у дослідній та контрольній пробах, додають 2,0 мл розчину 2N NaOH, енергійно струшують та приливають 1,0 мл 0,02 % розчину 8-оксихіноліну (готують перед застосуванням із 0,2 % спиртового розчину шляхом розведення водою у 10 разів), ретельно перемішують і вносять по 1,0 мл гіпоброміту натрію (готують шляхом додавання 0,05 мл брому до 100 мл 0,5N NaOH), негайно струшують та відразу добавляють по 1,0 мл 40 % розчину сечовини (реактиви для здійснення реакції Сакагучи обов'язково тримають у холодильній камері), колориметрують через 6-10 сек. на фотоелектроколориметрі при 490 нм (кювети - 10 мм) проти води, колір розчину, що утворився в результаті ферментативної реакції, при кімнатній температурі не є стійким, але є стійким протягом декількох годин, якщо проби помістити у льодяну баню, активність трансамідинази є пропорційною різниці екстинцій між дослідним та контрольним визначеннями, вміст L-аргініну, що утворився під час ферментативної реакції, визначають за калібрувальним графіком. Активність ферменту виражають у ммолях L-аргініну, що утворився за 1 годину інкубації при 37 °C, із розрахунку на 1 л сироватки крові; вміст цитокінів у сироватці крові, активність β-галактозидази сечі та активність трансамідинази сироватки крові визначають до та після завершення курсу лікування. Апробацію запропонованого способу проведено у відділенні нефрології та діалізу і лабораторіях імунології та біохімії ДУ "Інститут нефрології НАМН України" у 55 жінок, хворих на хронічний рецидивуючий пієлонефрит, з яких 30 пацієнток на фоні антибактеріального лікування отримують, за запропонованим способом, препарат Нуклеїнат (дослідна група) та 25 жінок склали групу порівняння, тобто отримували тільки антибактеріальні препарати. 5 Критеріями включення до дослідження були наявність бактеріурії ≥10 КУО/мл та часте рецидивування захворювання (більше 3 разів на рік). Контрольну групу склали 25 умовно 2 UA 82540 U 5 10 здорових осіб. Групи, що досліджувалися, за статтю та віком поміж собою практично не відрізнялися. Аналіз показників прозапальних цитокінів методом імуноферментного аналізу, що представлені у таблиці, показав достовірне зниження у сироватці крові хворих, що отримували Нуклеїнат, середніх рівнів фактора некрозу пухлин-альфа та моноцитарного хемоатрактантного протеїну-1 (р