Лікування або попередження геморагічних вірусних інфекцій за допомогою імуномодулюючих сполук

1. Спосіб лікування або попередження геморагічної вірусної інфекції у індивідуума, який полягає в тому, що індивідуумові вводять в ефективній кількості імуномодулюючу сполуку формули А C2 2 (19) 1 3 92727 4 кликається вірусом Юквітиба, геморагічну пропасЛехігуанаса, геморагічної пропасниці Денге, синдницю, що викликається вірусом чорної лагуни, герому шоку Денге, хвороби лісу Куасанур, геморагіморагічну пропасницю, що викликається вірусом чної пропасниці Омська або жовтої пропасниці. Даний винахід претендує на пріоритет попередньої заявки U.S. серійний номер 60/622,022, яка подана 27 жовтня 2004р. і включена в даний опис. Даний винахід стосується лікування та попередження геморагічних вірусних інфекцій. Віруси геморагічної пропасниці (HFV) являють собою віруси, які належать до декількох таксономічних родин. HFV викликають різні синдроми захворювання зі схожими клінічними характеристиками, які називають синдромами гострої геморагічної пропасниці. Патофізіологічними відмітними ознаками HFV-інфекції є ураження мікросудин і підвищена проникність судин. До HFV, які являють собою РНК-віруси, належать віруси родини Arenaviridae, такі як вірус Ласса, а також віруси південноамериканських геморагічних пропасниць, включаючи віруси Юнін, Мачупо, Гуанаріто та Сабіа, які є збудниками пропасниці Ласса й аргентинської, болівійської, венесуельської та бразильської геморагічних пропасниць відповідно, вірус білої води Арройо (Whitewater Arroyo) і вірус Флексала; родини Filoviridae (віруси Ебола та Марбурга); родини Bunyaviridae: вірус конго-кримської геморагічної пропасниці (CCHFV), вірус пропасниці долини Рифта, хантавіруси геморагічної пропасниці, асоційованої із нирковим синдромом, включаючи вірус Хантаан, вірус Сеула, вірус Добрава (який називають також вірусом Добрава-Бєлграда) і вірус Пуумала, і хантавіруси, асоційовані з хантавірусним легеневим синдромом, включаючи вірус Бейоу, вірус чорного грецького каналу (Black Creek Canal), вірус Нью-Йорка, вірус Син-Номбре, вірус Андеса, вірус Орана, вірус Юквітиба, вірус чорної лагуни та вірус Лехігуанаса; і родини Flaviviridae (Денге, пропасниця Денге, геморагічна пропасниця Денге, синдром шоку Денге, хвороба лісу Куасанур, геморагічна пропасниця Омська, жовта пропасниця). У природних умовах зараження людей відбувається в результаті укусу інфікованого членистоногого або в результаті контакту з інфікованими тваринами-носіями збудника інфекції в природі. Віруси геморагічної пропасниці мають дуже велику інфекційність при переносі у вигляді частинок, що знаходяться у повітрі (аерозоль); вони приводять до високої захворюваності й у ряді випадків до високої смертності; і, очевидно, становлять велику небезпеку як біологічна зброя. Точний патогенез HFV варіюється залежно від етіологічного агента. Основним органом-мішенню є ендотелій судин. Очевидно, у патогенезі HFV важливу роль відіграють імунологічні та запальні медіатори. Всі HFV можуть викликати тромбоцитопенію, а деякі викликають також тромбоцитарну дисфункцію. Інфекція вірусами Ебола та Марбурга, вірусом пропасниці долини Рифта та вірусом жовтої пропасниці приводить до руйнування інфікованих клітин. Для інфекції, яка викликається вірусами родини Filoviridae, характерно дисемінова не внутрішньосудинне згортання (DIC). Віруси Ебола та Марбурга можуть викликати геморагічний діатез і некроз тканини внаслідок безпосереднього ураження судинних ендотеліальних клітин і тромбоцитів, що супроводжується погіршенням мікроциркуляції, а також цитопатичними діями на паренхімні клітини з вивільненням імунологічних і запальних медіаторів. З іншого боку, віруси родини Arenaviridae, очевидно, опосередковують кровотечу шляхом стимуляції запальних медіаторів макрофагами, тромбоцитопенії і інгібування агрегації тромбоцитів. Інкубаційний період при зараженні HFV становить від 2 до 21 днів. Клінічні картини цих захворювань є неспецифічними та варіабельними, що затрудняє встановлення діагнозу. Слід зазначити, що не у всіх пацієнтів розвиваються геморагічні прояви. Навіть серед пацієнтів, заражених вірусом Ебола, у значної частини можуть не проявлятися клінічні симптоми кровотечі. Першими симптомами гострого HFV-синдрому можуть бути пропасниця, головний біль, міалгія, сип, нудота, блювота, діарея, біль в животі, артралгії, міалгії та нездужання. Захворювання, які викликаються вірусом Ебола, Марбурга, вірусом пропасниці долини Рифта, вірусом жовтої пропасниці, вірусом геморагічної пропасниці Омська та вірусом хвороби лісу Куасанур, характеризуються різким початком, в той час як пропасниця Ласса й захворювання, які викликаються вірусами Мачупо, Юнін, Гуанаріто та Сабіа, починаються більш непомітно. Перші ознаки можуть включати пропасницю, тахіпное, відносну брадикардію, гіпотензію (яка може розвиватися до циркуляторного шоку), крововилив під кон'юнктиву, фарингіт і лімфаденопатію. Може виникати енцефаліт, що супроводжується делірієм, епілептичними припадками, церебелярними ознаками та комою. Більшість HFV викликають почервоніння шкіри або плямисту шкірну висипку, хоча сип важко виявляти в темношкірих людей і він варіюється залежно від вірусузбудника. Геморагічні симптоми, якщо вони виникають, розвиваються пізніше з перебігом хвороби й включають петехію, пурпуру, крововилив у слизові оболонки та кон'юнктиву, справжню гематурію, гематемезис і мелену. Як правило, відбувається ураження печінки й ураження нирок пропорційно серцево-судинної аномалії. Аномалії, що виявляються у лабораторних умовах, включають лейкопенію (за винятком деяких випадків пропасниці Ласса), анемію або гемоконцентрацію, і підвищений рівень ферментів у печінці; як правило, має місце DIC, що супроводжується аномаліями згортання, і тромбоцитопенію. Рівні смертності становлять від менш ніж 1% для пропасниці долини Рифта до 70-90% для інфекцій, які викликаються вірусами Ебола та Марбурга. Неспецифічна та варіабельна клінічна картина, що викликається HFV, є суттєвою діагностич 5 92727 6 ною ознакою. Клінічні діагностичні критерії, засноВідповідними похідними ароматичних або гевані на затверджених ВОЗ стандартах для контротероциклічних амінокислот X є: аміди, моно- або лю синдрому гострої геморагічної пропасниці, діС1-С6алкілзаміщені аміди, ариламіди та складні включають температуру більше 101°F (38,3°C) С1-С6алкілові або арилові ефіри. Відповідними протягом менш ніж 3 тижнів; хворобливий стан і ацильними або алкільними фрагментами R є: розвідсутність факторів схильності до геморагічних галужені або нерозгалужені алкільні групи, які міспроявів; і принаймні два з наступних геморагічних тять від 1 до приблизно 6 атомів вуглецю, ацильні симптомів: геморагічна або пурпурна висипка, ногрупи, які містять від 2 до приблизно 10 атомів сова кровотеча, гематемезис, гематурія, кровохарвуглецю, і блокувальні групи, такі як карбобензикання, присутність крові в випорожненні або інші локсигрупа та трет-бутилоксикарбоніл. Краще, геморагічні симптоми з не встановленим альтерякщо n означає 2, атом вуглецю групи СН, преднативним діагнозом. Лабораторні методи діагносставленої у формулі А, має стереоконфігурацію, тики HFV включають виявлення антигену, вияввідмінну від стереоконфігурації X. лення антитіла IgM-класу, виділення в клітинній В кращих варіантах здійснення винаходу закультурі, візуалізацію за допомогою електронної стосовують такі сполуки, як -D-глутаміл-Lмікроскопії, імуногістохімічні методи та полімеразтриптофан, -L-глутаміл-L-триптофан, -Lну ланцюгову реакцію зі зворотною транскриптаглутаміл-Nin-форміл-L-триптофан, N-метил- -Lзою. глутаміл-L-триптофан, N-ацетил- -L-глутаміл-LСучасна терапія інфекції, що викликається триптофан, -L-глутаміл-L-триптофан, -LHFV, в основному є підтримуючою, однак залежно аспартил-L-триптофан та -D-аспартил-Lвід агента з певним успіхом застосовували рибавітриптофан. У найбільш кращих варіантах здійсрин. Пацієнти, інфіковані HFV, дають слабку реакнення винаходу застосовують -D-глутаміл-Lцію на інфузії рідини й у них швидко розвивається триптофан, іноді позначуваний також SCV-07. Ці набряк легенів. сполуки, методи одержання цих сполук, фармацеТаким чином, у даній галузі зберігається необвтично прийнятні солі цих сполук і їх фармацевтихідність у розробці способів лікування або поперечні композиції описані в US 5916878, включеному в дження геморагічних вірусних інфекцій. даний опис як посилання. Відповідно до даного винаходу спосіб лікуванВинахід можна застосовувати для попереня або попередження геморагічної вірусної інфекдження і/або лікування геморагічних вірусних інції в індивідуума полягає в тому, що індивідуумові фекцій, що включають (але не обмежуючись ними) вводять в ефективній кількості імуномодулюючу інфекції, викликувані вірусами родини Arenaviridae, сполуку формули А: такими як вірус Ласса, а також віруси південноамериканських геморагічних пропасниць, включаючи віруси Юнін, Мачупо, Гуанаріто та Сабіа, які є збудниками пропасниці Ласса й аргентинської, болівійської, венесуельської та бразильської геморагічних пропасниць відповідно, вірус білої води У формулі Α, n означає 1 або 2, R означає воАрройо та вірус Флексала; родини Filoviridae (вірудень, ацил, алкіл або пептидний фрагмент, і X си Ебола та Марбурга); родини Bunyaviridae: вірус означає ароматичну або гетероциклічну амінокисконго-кримської геморагічної пропасниці (CCHFV), лоту або її похідну. Бажано X означає L-триптофан вірус пропасниці долини Рифта, хантавіруси гемоабо D-триптофан. рагічної пропасниці, асоційованої із нирковим синОдин з варіантів здійснення даного винаходу дромом, включаючи вірус Хантаан, вірус Сеула, стосується лікування або попередження геморагівірус Добрава (який називають також вірусом Дочних вірусних інфекцій шляхом введення індивідубрава-Бєлграда) і вірус Пуумала, і хантавіруси, умові імуномодулюючої сполуки. асоційовані з хантавірусним легеневим синдроБажано індивідуум являє собою ссавця, більш мом, включаючи вірус Бейоу, вірус чорного грецькраще індивідуум являє собою хвору людину. кого каналу, вірус Нью-Йорка, вірус Син-Номбре, Введення з метою попередження можна здійвірус Андеса, вірус Орана, вірус Юквітиба, вірус снювати індивідуумам, які мають високий ризик чорної лагуни та вірус Лехігуанаса; і родини внаслідок контакту з потенційними носіями хвороFlaviviridae (Денге, пропасниця Денге, геморагічна би або безсимптомними носіями. пропасниця Денге, синдром шоку Денге, хвороба Імуномодуляторні сполуки, пропоновані в далісу Куасанур, геморагічна пропасниця Омська, ному винаході, являють собою імуномодулятори жовта пропасниця). формули А: Вірус Пічинда (Pichinde) використовують як прийнята модель для пропасниці Ласса. Сполуки формули А можна вводити в дозах, що становлять приблизно 0,001-10мг. Дози можна вводити один або декілька разів на тиждень, переважно щодня, шляхом введення доз один або декілька разів на день. Дози можна вводити шляхом У формулі Α, n означає 1 або 2, R означає вовнутрішньом'язової ін'єкції, хоча можна застосовудень, ацил, алкіл або пептидний фрагмент, і X вати інші форми ін'єкції та інфузії й інші форми означає ароматичну або гетероциклічну амінокисвведення, такі як оральна або назальна інгаляція лоту або її похідну. Бажано X означає L-триптофан або можна використати прийом усередину оральабо D-триптофан. ним шляхом. 7 92727 8 У кращих варіантах здійснення винаходу спопропасниці Ласса, і віруси Юнін, Мачупо, Гуанаріто луки формули А вводять у дозі, що становить прита Сабіа, які є збудниками південноамериканських близно 0,01-10мг, більш краще в дозі, що станогеморагічних пропасниць. вить приблизно 0,1-1мг. Пропасниця Ласса, також як і тварина-носій Дози можна вимірювати також у мікрограмах вірусу Ласса, Mastomys sp., є ендемічним для Зана кілограм ваги тіла індивідуума, у цьому випадку хідної Африки. Захворювання характеризується дози становлять приблизно 0,01-100мкг/кг, більш пропасницею, слабістю, хворобливим станом, гокраще приблизно 0,1-10мкг/кг і найбільш краще ловним болем і фарингітом і настає через 7-18 приблизно 1мкг/кг. днів після зараження. До інших загальних симптоПід обсяг винаходу підпадають аналоги, що мів належать біль у суглобах і спині, кашель, блюмають біологічну активність, які містять фрагменвота та діарея. На відміну від геморагічних пропати, що мають заміщення, делеції, подовження, сниць вона не супроводжується шкірною заміни або інші модифікації, які мають практично висипкою, екхімозом або петехією. Летальність таку ж біологічну активність, що й SCV-07, наприсеред госпіталізованих пацієнтів становить 15клад, пептид, що є похідною SCV-07, який має 20%, але для всіх випадків зараження вірусом Ладостатній ступінь гомології з SVC-07, так що він сса може становити менше 2-3%. Не було виявлефункціонує практично в такий же спосіб і має пракно випадків переносу захворювання від людини до тично таку ж активність, що й SCV-07. людини аерозольним шляхом. Однак контакт із Введення можна здійснювати будь-яким привиділеннями інфікованої людини являє собою знадатним методом, включаючи введення оральним чний фактор ризику. шляхом, шляхом ін'єкції, періодичної інфузії, безВіруси Юнін, Мачупо, Гуанаріто та Сабіа, є перервної інфузії й т.п. етіологічними агентами південноамериканських У деяких варіантах здійснення винаходу спогеморагічних пропасниць: аргентинської, болівійлуки формули А є присутніми у фармацевтично ської, венесуельської та бразильської геморагічної прийнятному рідкому носії, такому як вода для пропасниці відповідно. Незважаючи на розхоін'єкцій, сольовий розчин, що містить фізіологічні дження всі вони характеризуються подібними проконцентрації солей, або т.п. явами, які включають пропасницю, хворобливий Ефективні кількості сполуки формули А можна стан і міалгію, які починаються через 1-2 тижні визначати шляхом стандартних експериментів з після зараження. Коли хвороба прогресує, розвититрування доз. ваються додаткові симптоми: шлунково-кишковий Сполуки формули А можна вводити також у дистрес, запаморочення, головний біль, фотофосполученні з іншими імуностимуляторами або пробія, ретроорбітальний біль, тахікардія, петехія та тивірусними засобами. крововилив у кон'юнктиву. Вірус Мачупо, очевидАренавіруси викликають зростаюче занепоконо, найбільш пристосований для переносу захвоєння суспільної охорони здоров'я як з погляду інрювання від людини до людини, зафіксований фекцій, що виникають природним шляхом, так і нозокоміальний і внутрішньородинний перенос можливості застосування як біологічної зброї. Роінфекції. На відміну від інших аренавірусів, які видина Arenaviridae включає оболонкові віруси з амкликають геморагічну пропасницю, після зараженбісмисловим бісегментним геномом. Його 22 члена ня вірусом Гуанаріто відомі випадки розвитку глупідрозділяють на 2 серокомплекси. Комплекс лімхоти, як і при зараженні вірусом Ласса. Смертність фоцитарний хоріоменінгіт-Ласса включає п'ять при зараженні вірусами південноамериканської відомих вірусів «Старого Світу», у той час як комгеморагічної пропасниці становить приблизно плекс Такариба складається з 17 вірусів «Нового 20%. Світу» з Північної та Південної Америки. Кожний Внаслідок викликуваного ними високого рівня вірус пов'язаний з одним видом гризунів або із смертності, інфективності при передачі через часдвома близькородинними видами гризунів-носіїв тинки, які знаходяться у повітрі, і потенційну загрозбудника інфекції в природі (можливим виключензу виникнення кризи охорони здоров'я вірусам ням є вірус Такариба, що єдиний був виділений із Ласса, Юнін, Мачупо, Гуанаріто та Сабіа Центром двох видів кажанів). Ця тісна асоціація з хазяїномз контролю захворюваності (CDC) була надана гризуном обмежує географічне поширення вірусу категорія А патогенів. Робота із цими агентами до географічного поширення резервуара (твариниповинна виконуватися з дотриманням мер обереносія). Вірус лімфоцитарного хоріоменінгіту жності, зазначених в BSL-4. (LCMV), асоційований з повсюдно розповсюджеВірус Пічинда (РІС) являє собою непатогенний ною домашньою мишею (Mus musculus), є єдиним вірус комплексу Такариба. Вірулентність РІС у аренавірусом, виявленим в усьому світі. морських свинках різко зростала в результаті сеБезсимптомно інфіковані гризуни входять у рійних пасажів у селезінку в отриманих після 13 контакт із людьми, які заражаються в результаті пасажів морських свинок. Інфікування морських вдихання вірусу, що перебуває в аерозольованих свинок адаптованим вірусом викликало захворюекскретах. Більшість аренавірусів не приводять до вання, дуже схоже на пропасницю Ласса у мавп і інфікування людини й не всі аренавіруси, про які людини. При цьому виникали наступні симптоми: відомо, що вони інфікують людей, викликають запропасниця, тромбоцитопенія, тромбоцитарна хворювання. Однак деякі аренавіруси викликають дисфункція, просочування із судин, респіраторний у людей захворювання від середнього до дуже дистрес, реплікація вірусу в більшості тканин песерйозного ступеня важкості. Найбільш важливириферичної нервової системи та мінімальні гістоми є LCMV, які викликають фатальний ЦНСлогічні зміни в інфікованих тканинах. Оскільки вісиндром, вірус Ласса, що є етіологічним агентом рус Пічинда не є патогенним для людини, то ця 9 92727 10 модель знайшла широке застосування як малонезроблене припущення, що дія SCV-07 здійснюєтьбезпечної моделі при дослідженні пропасниці Ласся завдяки його впливу на диференціювання плюса й геморагічної пропасниці, що викликається рипотентних стовбурних клітин у тимоцити і/або ареновірусами. диференціювання тимоцитів у Т-клітини. Крім того, Нуклеозидний аналог рибавірин являє собою оскільки введення SCV-07 приводить до збільосновний противірусний терапевтичний засіб при шення Th1-цитокинів IL-2 і IFN , але не Тh2пропасниці Ласса і є перспективним терапевтичцитокинів, було зроблене припущення, що дія ним засобом при геморагічній пропасниці, яка виSCV-07 здійснюється шляхом переважної активакликається аренавірусами. Однак, хоча терапія з ції Th1-клітин. використанням рибавірину може попереджати або Вся зростаюча кількість даних дозволяє припослабляти гостру геморагічну пропасницю, його пустити, що CD4+-Th1-клітини та асоційовані з низастосування при аренавірусній інфекції іноді моми цитокіни, включаючи IL-2 та IFN , відіграють же приводити згодом до неврологічного захворюважливу роль у формуванні захисної імунної відвання. На моделях інфекції та захворювання, що повіді на мікобактеріальну інфекцію. У дослідженвикликається ареновірусами, у тварин було винях з використанням моделі туберкульозу на мипробувано також декілька імунологічних методів шах було встановлено, що SCV-07 істотно лікування, але вони не увінчалися успіхом. In vitro зменшує ураження легень. Продукування IFNy аренавіруси в 10->1000-разів менш чутливі до індукованими за допомогою Con-Α клітинами сеIFN , ніж вірус везикулярного стоматиту. Ця нечулезінки оброблених SCV-07 тварин було вище, у тливість підтверджується дослідженнями на інфітой час як виробництво IL-4 було нижче, ніж у клікованих вірусом Мачупо макака-резус при викоритинах необроблених тварин. Фагоцитарна активстанні індукуючих IFN полі(ІСLС). Загальна ність перитонеальних макрофагів помітно збільсмертність і строк смерті не поліпшувалися в решувалася в порівнянні з необробленими зультаті терапії, а в деяких групах при обробці неінфікованими контролями. Ці дані доклінічних істотно підвищувалася віремія. Lucia і ін. дослідосліджень є основою для початку клінічних досджували застосування IFN , рибавірину та імуноліджень з застосування SCV-07. На фазі II клінічмодулюючого лікарського засобу С246,783 на моного дослідження, проведеної в Росії, було встаделі з використанням інфікованих РІС морських новлено, що введення SCV-07 приводить до свинок. До впливів, здійснюваних С246,783, налезбільшення зустрічальності культур, що є присутжать індукція IFN і активація NK-клітин і макрофаніми у слизу, у яких відсутньої мікобактерії, і впливає на загоєння каверн і симптом туберкульозу, гів. У тварин, оброблених IFN (аж до 1,7×105 од.) без яких-небудь побічних дій, що індукуються ліабо С246,783, не було виявлено зниження смерткарським засобом. Ефективність SCV-07 відносно ності. У цьому дослідженні було виявлене зменвипадків туберкульозу в людини підкріплює гіпотешення смертності при введенні рибавірину щодня зу про його ефективність відносно інших захворюпротягом 28 днів після інфекції; строк смерті провань, для яких установлено, що Тh1-імунітет відіглонгувався при обробці на 14 днів. Відносна нечурає важливу роль, включаючи викликуване тливість аренавірусів до IFN типу І, очевидно, зігаренавірусами захворювання. рала істотну роль у фактичній невдачі цих На основі вищевикладеного були розпочаті досліджень. два пілотні дослідження з метою вивчення ефекНезважаючи на ці невдачі ранніх спроб викотивності SCV-07 при лікуванні інфікованих РІС ристання імунотерапії для аренавірусів Т-клітинна морських свинок. стимуляція все ще залишається невивченим меНижче винахід більш докладно проілюстроватодом лікування. Тому було проведено пілотне ний на прикладах, що не обмежують його обсяг. дослідження для вивчення впливу імуномодулююПриклад 1: чого лікарського засобу SCV-07 на інфікованих РІС 20 самців морських свинок лінії Hartley (вагою морських свинках. Відомо, що SCV-07 підвищує 400-450г) розподіляли на групи по п'ятьох особин у Тh1-відповідь на імунологічні стимули. кожній. SCV-07, -D-глутаміл-L-триптофан, є предстаТваринам в групі 0 не вводили SCV-07. вником класу імуномодулюючих лікарських засоТваринам в групі 1 вводили і.р. по 1мкг/кг SCVбів, що мають -глутамільні або -аспартильні 07 щодня протягом п'яти днів до зараження. фрагменти, що був відкритий російськими вченими Тваринам в групі 2 вводили і.р. по 1мкг/кг SCVі його ефективністю досліджується у відношенні 07 один раз на день зараження. декількох показників у США фірмою SciClone Тваринам в групі 3 вводили і.р. по 1мкг/кг SCVPharmaceuticals, Inc. SCV-07 має багато видів іму07 один раз наступного дня після зараження. номодулюючої активності in vivo та in vitro. SCV-07 Інфекції: тварин інокулювали і.р. 100 БУО адапідвищує індуковану Con-A проліферацію тимоциптованого для морських свинок РІС. тів і лімфоцитів, підвищує індуковане Соn виробВагу тіла та температуру, а також опосередкоництво інтерлейкіну-2 (IL-2) і експресію рецептора вані маркери розвитку захворювання вимірювали IL-2 лімфоцитами селезінки, і стимулює експресію принаймні три рази на тиждень. Очевидно, що Thy-1.2 на клітинах кісткового мозку. In vivo SCVхворих тварин оцінювали частіше. У попередній 07 здійснює сильну імуностимулюючу дію на підроботі постулювалося, що втрата 25% ваги являє даних імуносупресії за допомогою 5-FU тварин і на кінцеву стадію захворювання тварини. Однак моделі імунізації з використанням овечих еритроIACUC Медичного відділення Університету Техаса цитів. висунув вимогу, щоб як кінцеву втрату ваги визнаТочний механізм дії SCV-07 до кінця невиявлений. Однак, на основі вищевказаних даних було 11 92727 12 валася втрату ваги, яка складає 20%, після чого (р=0,66, 0,77 і 0,40 для груп 1, 2 і 3 відповідно). тварин умертвляли. Додавання ваги протягом 11 днів після зараження У групі 0 поєднували тварин, що брали участь (д.п.з.) в оброблених тварин було найбільшим у у двох окремих експериментах; в одному, котрий групі 1 (таблиця 1), однак для жодної із груп додаописаний у даному розділі і який проводили за вання ваги не відрізнялося від контролів. Не було участю груп обробки 1-3, і в іншому, що описаний виявлено також розходжень температури, які оцінижче і який проводили за участю груп обробки 4нювали на 11 д.п.з., між обробленими та контро6. льними тваринами (таблиця 2). З таблиць 1 і 2 не Хоча була тенденція до прояву ефективності, видно, що одна контрольна тварина, яка вижила, що видно за зменшенням смертності в групах обналежала до другої контрольної групи. Ця тварина робки, статистичний аналіз виживаності за меторізка змінила в контрольній групі середню темпедом Каплана-Мейєра з використанням логарифміратуру убік зменшення, а додавання ваги убік збічного рангового критерію підтвердив очевидний льшення. Таким чином, вихідні результати досліфакт, що жодна із кривих виживаності оброблених дження більшою мірою дають підставу припустити тварин не мала статистично достовірної відміннонаявність ефективності, ніж це можна бачити з сті від кривої виживаності контрольних тварин об'єднаних даних. Таблиця 1 Середній відсоток додавання ваги в інфікованих РІС морських свинок на 10-11 д.п.з. Група Середнє значення С.К.В. ± Значення Р* 0 1 2 3 4 5 6 1,79±13,50 0,59±10,71 -3,75±12,48 -1,15±12,26 -0,35±20,07 6,73±19,02 5,62±16,78 0,48 0,92 0,65 0,64 0,21 0,23 * порівняння обробленої групи із групою 0 з використанням t-критерію Ст'юдента. Таблиця 2 Середня температура (°С) в інфікованих РІС морських свинок на 10-11 д.п.з. Група 0 1 2 3 4 5 6 Середнє значення С.К.В. 40,35±0,63 40,40±1,00 40,48±0,72 40,40±0,69 40,03±0,59 39,38±0,75 40,28±0,63 ± Значення Р* 0,72 0,82 0,68 0,23 0,17 0,46 * порівняння обробленої групи із групою 0 з використанням t-критерію Ст'юдента. Хоча результати першого досліду не виявилися статистично достовірними, вони були достатньою підставою для початку другого дослідження. Приклад 2: Знову 20 тварин розподіляли на 4 групи по п'ять особин у кожній. Тваринам в групі 0 не вводили SCV-07. Тваринам в групі 4 вводили і.р. по 1мкг/кг SCV07 щодня протягом п'яти днів після зараження. Тваринам в групі 5 вводили і.р. по 10мкг/кг SCV-07 щодня протягом п'яти днів після зараження інфекції. Тваринам в групі 6 вводили і.р. по 100мкг/кг SCV-07 щодня протягом п'яти днів після зараження. Інфекції: тварин інокулювали і.р. 100 БУО адаптованого для морських свинок РІС. Вагу тіла та температуру, а також опосередковані маркери розвитку захворювання вимірювали як описано вище. Смертність знижувалася в групах 5 і 6, але тільки для групи 5 крива виживаності статистично вірогідно відрізнялася від групи 0 (р=0,77, 0,03 і 0,27 для груп 4, 5 і 6 відповідно). Додавання ваги тіла після 11 д.п.з. було більше в групах обробки 5 і 6, ніж у контрольних тварин, однак розходження не було статистично достовірним (таблиця 1). Температура тіла у всіх трьох групах обробки була нижче, ніж у контрольних тварин, але розходження також не були достовірним (таблиця 2). В обох експериментах у тварин брали зразки сироватки. У цей час аналіз цих зразків триває, але попередні результати дозволяють припустити наявність віремії, що не виявляється, за 48год. до гострого захворювання та смерті. 13 92727 14 Ці результати дозволяють припустити, що пах обробки та істотне зниження смертності при введення SCV-07 здійснює терапевтичну дію на введенні і.р. лікарського засобу в дозі 10мкг/кг інфікованих РІС морських свинок, про що свідчить протягом 5 днів після зараження. тенденція зменшення смертності в декількох гру Комп’ютерна верстка А. Рябко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601