Лікувальний препарат, який виявляє протипухлинну дію щодо злоякісних клітин, та спосіб лікування

Реферат: Винахід належить до медицини, зокрема до онкології, стосується лікувального препарату, що містить оксалат літію, диметилксантин і фторурацил та способу лікування злоякісних пухлин. UA 98665 C2 (12) UA 98665 C2 UA 98665 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід належить до медицини, зокрема до засобів лікування онкологічних захворювань, і може бути використаний як основа для створення лікувальних препаратів протипухлинної дії. Аналіз результатів багаточисельних досліджень показав, що онкологічні захворювання людини виникають в результаті системних порушень цілого ряду життєвих відправлень клітин. В результаті відбувається зміна і порушення структурно-біохімічних властивостей клітин, починаючи з зовнішніх рецепторів мембран і закінчуючи біоенергетикою та цитокінезом. Відома фармацевтична композиція, яка призначена для лікування і профілактики онкологічних захворювань. Вагова кількість компонентів фармацевтичної композиції, що виконана в рідинній формі, наступна: лимонний сік 1000-1100 мл; фруктоза 1000-1100 г; етиловий спирт 40 % 500-550 мл; хлористий кальцій 35-55 г; хлористий кальцій (кальцій-41) 0,05-5 мг; оксид цинку 1-12 г; колекальциферол (вітамін D3) 0,15 мг (6000 ME) (Патент № 2377007 6А61К 31/00 RU). Недоліком цієї фармацевтичної композиції є те, що вона не в змозі індукувати апоптоз злоякісної клітини, тому що молекули кислоти, яка входить до її складу, мають дифузний тип проникнення в клітину і не можуть накопичуватися в ній в критичних концентраціях, які необхідні для апоптозу злоякісних клітин. Найбільш близьким за технічною суттю до лікувального препарату, що заявляється, є вибраний за прототип фармацевтичний склад для профілактики і лікування ракових захворювань. Фармацевтичний склад включає щонайменше три активні сполуки, присутні в кровообіговій системі: щонайменше одну амінокислоту, щонайменше один вітамін і щонайменше один компонент, вибраний з групи, що складається з аденіну, 2-деокси-D-рибози, D-манози, D-глюкозаміну, яблучної кислоти, щавлевооцтової кислоти, аденозинтрифосфату і/або їх фармацевтично прийнятних солей (Патент № 2138257 6А61КЗ1/195 RU). Недоліком відомого фармацевтичного складу є те, що яблучна і щавлевооцтова кислоти і/або фармацевтично прийнятні солі є сполуками, які швидко метаболізуються в мітохондріях в циклі Кребса. Якщо ці сполуки використовуються як цитолітики, то зниження їх концентрації в клітинах організму буде уповільнювати процеси розпаду пухлинних клітин. В фармацевтичному складі відсутні речовини, які прискорюють диференціацію клітин, набір вітамінів та амінокислот прискорює процеси небажаного росту пухлинних клітин. Також в ньому відсутні сполуки, які уповільнюють нуклеїновий обмін, що, як правило, прискорює процеси зростання пухлинних клітин. В прототипі присутні аденін або 2-деокси-D-рибоза, які прискорюють процес біосинтезу нуклеїнових кислот, що вкрай не потрібно, бо це прискорює ростові процеси пухлини; решта речовин підтримують життєдіяльність організму, але не борються з пухлиною. В основу винаходу поставлена задача вдосконалення способу лікування онкозахворювань шляхом створення універсального лікувального протипухлинного препарату, який містить нову сукупність його складових, що за рахунок системності дії лікувального препарату на процес знищення (апоптозу) ракових клітин та прискорення диференціювання ембріональних клітин, забезпечує профілактику і лікування онкологічних захворювань, усуваючи післяопераційне використання опромінювання та хіміотерапію, що завдають шкідливої дії організму хворої людини. Поставлена задача вирішується тим, що застосовується оксалат літію у виробництві лікувального препарату, який виявляє протипухлинну дію щодо злоякісних клітин, лікувальний препарат, що являє собою водний розчин і містить фармацевтично прийнятну сіль органічної кислоти, згідно з винаходом, водний розчин як фармацевтично прийнятна сіль органічної кислоти містить оксалат літію та додатково містить диметилксантин і фторурацил у наступному співвідношенні всіх компонентів (мас. %): оксалат літію 0,2-3,2 диметилксантин 0,1-1,75 фторурацил 0,1-0,175 вода дистильована до 100. Спосіб лікування злоякісних пухлин, що полягає у прийманні усередину організму лікувального препарату та контролюванні стану хворого за цитологічними аналізами, згідно з винаходом, для приймання лікувального препарату, що заявляється, готують розчин, для чого розбавляють 5 мл лікувального препарату у 50-100 мл води, перорально вводять його до організму один раз на добу, протягом тримісячного курсу, контролювання стану хворого проводять щомісячно, за результатами цитологічних аналізів приймають рішення продовжити курс лікування або закінчити його, лікування повторюють через кожні 2-3 роки. Оксалат літію відомий як сіль щавлевої кислоти, що використовують в кріохімічному методі одержання літійвмісних феритів з низькою точкою магніто-фазового переходу (точкою Кюрі), а 1 UA 98665 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 також як засіб для методу хімічного аналізу якості техногенної сировини (зокрема дисперсності частинок). Солі літію мають психотропну дію і використовуються в медицині при профілактиці і лікуванні ряду психічних захворювань. Найбільш поширений в цій якості карбонат літію застосовується в психіатрії для стабілізації настрою людей, що страждають біполярним розладом і частими перепадами настрою. З одного боку, встановлено, що літій здатний регулювати активність деяких ферментів, які беруть участь в перенесенні з міжклітинної рідини в клітини мозку іонів натрію і калію. З іншого боку, відмічено, що іони літію безпосередньо впливають на іонний баланс клітини. У винаході, що заявляється, оксалат літію використовується як специфічний засіб, здатний викликати апоптоз пухлинних клітин. Це відбувається через те, що оксалат літію, проникаючи в + пухлинну клітину, надлишково закислює її через накопичення протонів H , що легко проникають через клітинну мембрану, і їхній надлишок викликає апоптоз пухлинної клітини. На відміну від прототипу, лікувальний препарат, що заявляється, містить складову, яка знижує інтенсивність нуклеїнового обміну клітини фторурацил. Уповільнення нуклеїнового обміну клітини сприяє уповільненню ділення клітини і посиленню ефективності дії лікувального препарату, що заявляється. Для зниження швидкості нуклеїнового обміну клітини, який є обов'язковою умовою пухлинного процесу, використовується зменшена концентрація фторурацилу. Диметилксантин введений з метою збільшення вмісту в клітинах цАМФ, яка прискорює процес диференціювання ембріональних клітин, що здатний зменшити кількість існуючих і новостворених пухлинних клітин. Водний розчин лікувального препарату, що заявляється, готується довільним змішуванням визначеної кількості всіх компонентів. Спосіб використання лікувального препарату, що заявляється, є наступним і пояснюється конкретними прикладами. Відміряють добову дозу лікувального препарату - 5 мл, розбавляють її у 50-100 мл води і отриманий лікувальний розчин хворий приймає один раз на добу протягом трьох місяців; кожного місяця хворому проводять цитологічний аналіз. Якщо за результатами цитологічних аналізів не виявлені ракові клітини, лікування припиняють і в подальшому повторюють за способом, що заявляється, через кожні 2-3 роки; при виявленні за результатами цитологічних аналізів ракових клітин, лікування продовжують за способом, що заявляється, до одужання. Розглянемо післяопераційний випадок: цитологічні аналізи показали поодинокі ракові клітини в організмі хворого. Хворому призначають приймання лікувального препарату за способом, що заявляється. Хворий відміряє добову дозу лікувального препарату - 5 мл, розбавляє її у 50-100 мл води і приймає отриманий лікувальний розчин один раз на добу протягом трьох місяців. Кожний місяць хворий здає цитологічний аналіз, за яким лікар наглядає за динамікою процесу лікування. Якщо за результатами цитологічного аналізу після третього місяця лікування не виявлені ракові клітини, лікування припиняють і в подальшому повторюють за способом, що заявляється, через кожні 2-3 роки; при виявленні ракових клітин, лікування продовжують за способом, що заявляється, до одужання. З метою профілактики при хронічних захворюваннях виразковою хворобою, панкреатитом та ін., при яких є ризик переродження здорових клітин в ракові, лікування за способом, що заявляється, проводять протягом одного року і відновлюють лікування через кожні два або три роки, зважаючи на те, що епігенетичні процеси пухлинного росту можуть відновитися через цей час. Оксалат літію, при попаданні в організм хворого, вибірково закислює злоякісні клітини, не впливаючи на здорові клітини організму хворого, внаслідок чого відбувається відмирання злоякісних клітин (апоптоз); оксалат літію гальмує утворення аденозинтрифосфату, не дозволяє раковим клітинам ділитися. Фторурацил в невеликих концентраціях гальмує ділення ракових клітин за рахунок утворення нуклеїнових кислот, підсилює дію оксалату літію. Диметилксантин виступає як інгібітор фосфодіестерази, за рахунок чого в клітині збільшується вміст цАМФ, і в злоякісних клітинах, які знаходились на стадії початку диференціювання, диференціювання прискорюється. Лікувальний препарат, що заявляється, знижує небезпеку перетворення здорових клітин в злоякісні і знижує швидкість і об'єм розвитку метастаз. Крім цього, лікувальний препарат, що заявляється, не має токсичних властивостей на відміну від існуючих протипухлинних препаратів. 2 UA 98665 C2 5 Приклад 1 Випробування протипухлинної активності лікувального препарату, що заявляється, за способом, що заявляється, проводили на суспензійній культурі пухлинних клітин Раджі, мишах С57В1/6 і на пацюках; антипроліферативну активність лікувального препарату, який заявляється, проводили на клітинній культурі Раджі і на мишах С57В1/6. В Таблиці 1 наведений приклад використання лікувального препарату, що заявляється. Таблиця 1 Вміст компонентів, в мас. % Склад лікувальн. препарата оксалат літію диметилксантин фторурацил 1 2 3 4 5 10 0,2 3,2 2,0 1,5 0,9 1,7 0,1 1,05 0,175 1,0 0,09 1,0 1,05 0,1 1,75 Вода дистильов. решта решта решта решта решта Живі оброблені клітини, (%) 27 10,1 10,0 11,2 11,6 Із Таблиці 1 випливає, що найбільше зменшення пухлинних клітин відбувається при обробці їх лікувальним препаратом за складом 3. В Таблиці 2 наведена кількість клітин клітинної культури Раджі карциноми легень Льюїса (карциному 3LL), які залишились живими (живі оброблені клітини) через три доби інкубації. Для експерименту використовували мишей - самців лінії С57В1/6 масою 25-28 г. Таблиця 2 Концентрація лікувального препарату, (мМ) 0,1 1,0 5,0 10,0 Живі контрольні клітини, (%) Живі оброблені клітини, (%) 100 100 100 100 27,7 10,0 11,2 10,0 15 20 25 30 35 Нижче наведений графік залежності кількості живих оброблених клітин від концентрації лікувального препарату в порівнянні з кількістю живих клітин, які не були оброблені. По вертикальній осі наведений відсоток кількості живих оброблених клітин, по горизонтальній осі концентрації лікувального препарату. З наведених даних таблиці 2 і графіка випливають наступні висновки: - інкубація клітинної культури Раджі в суспензії з додаванням лікувального препарату, який заявляється, через три доби надала зниження відсотка живих клітин до (10,0-27,7) % практично незалежно від концентрації лікувального препарату в межах (1-10) мМоль, це свідчить про чітко виражену системність дії лікувального препарату, який заявляється; - збільшення концентрації лікувального препарату при обробці живих клітин не приводить до збільшення кількості загиблих пухлинних клітин, що свідчить про системність дії лікувального препарату і що оптимальна доза лікувального препарату знаходиться в межах зазначених концентрацій всіх компонентів лікувального препарату; - властивості лікувального препарату, що заявляється, є найбільш прийнятними для лікування онкозахворювань. Приклад 2 При дослідженні впливу лікувального препарату, який заявляється, на злоякісний процес використовували метастазуючую карциному легень Льюїса (карциному 3LL). В процесі прищеплення клітин пухлин зазначеного штаму знаходились в середовищі 199. Карциному 3LL прищеплювали по 2,510 клітин на тварину у м'язи стегна. В Таблиці 3 наведені протипухлинний і антиметастатичний ефекти Д при внутрішньочеревному введенні лікувального препарату щодо карциноми легень Льюїса у мишей С57В1/6 (на 24 добу після прищеплення пухлини); n=10. 3 UA 98665 C2 Таблиця 3 Середня Середній Об'єм кількість Зниження Гальмування об'єм Зменшення первинної легеневих кількості Група тварин росту пухлини, метастазів об'єму пухлини, метастазів метастазів, (%) K на тварину, метастазів, (%) 3 (мм ) на тварину, (%) 3 (мм ) (шт.) Контроль 121,1±0,5 22,5±0,8 25,4±4,0 Група І 81,3±0,4* 32,5±0,8 14,8±0,8* 26,4 12,8±1,7* 49,9 Група II 93,2±0,5* 22,5±1,4 18,7±0,9* 18,2 16,3±2,0* 35,8 Група III 72,5±0,3 40,4±0,8 12,3±0,7* 45,5 12,1±1,4* 52,4 * - Р