Еритропоетинові міметичні шарнірно-серцевинні міметитіла людини, композиції, способи та застосування

1. Нуклеїнова кислота, що кодує амінокислотну послідовність SEQ ID NО:88. 2. Поліпептид, що містить амінокислоти SEQ ID NО:88. 3. Вектор, що містить нуклеїнову кислоту за п. 1. 4. Клітина-хазяїн, що містить нуклеїнову кислоту за п. 1. C2 2 89481 1 3 тривалий період піврозпаду або ввести функції, такі як зв'язування Fc рецептора, зв'язування білка А та фіксація комплементу. Однією специфічною та життєво важливою роллю кровотворної система ссавця є продукування еритроцитів або червоних кров'яних клітин, котрі транспортують кисень до різних тканин тіла тварини. Процес продукування еритроцитів ("еритропоез") відбувається безперервно протягом тривалості життя тварини для компенсації руйнування еритроцитів. Типова червона кров'яна клітина має відносно коротку тривалість життя, звичайно, 100-120 діб. Еритропоез є точно контрольованим фізіологічним механізмом, за допомогою якого продукується достатня кількість еритроцитів, які забезпечують відповідну оксигенацію тканини, проте не така велика, щоб завадити кровообігу. Еритропоез, як тепер відомо, контролюється, головним чином, поліпептидним еритропоетином (ΕΠΟ), кислотним глікопротеїном. Еритропоетин утворюється в результаті експресії однокопійного гена, розміщеного у хромосомі ссавця. Амінокислотна послідовність для рекомбінантного ΕΠΟ людини ("rHuEPO") суттєво ідентична амінокислотній послідовності для ΕΠΟ, одержаного із сечових джерел людини. Проте, глікозилювання rHuEPO відрізняється від такого для сечового ΕΠΟ та ΕΠΟ сироватки людини. У здорового ссавця ΕΠΟ присутній у плазмі крові у вельми низьких концентраціях, оскільки тканини достатньо оксигенуються наявною кількістю циркулюючих еритроцитів. Присутній ΕΠΟ стимулює продукування нових еритроцитів замість втрачених через процес старіння. Крім того, утворення ΕΠΟ стимулюється за умов гіпоксії, коли постачання кисню до тканин тіла знижується нижче нормальних фізіологічних рівнів, незважаючи на адекватну перфузію даної тканини кров'ю. Гіпоксія може бути спричинена кровотечею, руйнуванням еритроцитів, індукованим радіацією, різними анеміями, значною висотою або тривалими періодами втрати свідомості. Навпаки, якщо кількість червоних кров'яних клітин перевищує потрібну для нормальної оксигенації тканини, утворення ΕΠΟ знижується. Проте, деякі хворобливі стани включають аномальний еритропоез. Рекомбінантний ΕΠΟ людини (rHuEPO) застосовується терапевтично у ряді країн. У США Управління по санітарному нагляду за якістю їстівних продуктів та медикаментів (FDA) схвалило використання rHuEPO при лікуванні анемії, пов'язаної з кінцевою стадією ниркової хвороби. Пацієнти, що піддаються гемодіалізу для лікування цього розладу, потерпають від тяжкої анемії, спричиненої розривом та передчасною загибеллю еритроцитів в результаті лікування діалізом. ΕΠΟ також корисний у лікуванні інших типів, анемії. Наприклад, анемії, що індукована хіміотерапією, анемії, що пов'язана з мієлодисплазією, анеміями, пов'язаними з різними природженими розладами, анемією, що пов'язана зі СНІДом, та анемією, що пов'язана з недоношеністю. Крім того, ΕΠΟ може відігравати роль в інших галузях, наприклад, як допомога для більш швидкого відновлення нормального гематокриту у пацієнтів з пе 89481 4 ресадкою кісткового мозку, у пацієнтів, яких готують до аутогенних трансфузій крові, та у пацієнтів, що потерпають від розладів, пов'язаних з надлишком заліза. Еритропоетин (ΕΠΟ) являє собою глікопротеїновий гормон, який складається із 165 амінокислот та чотирьох вуглеводневих ланцюгів, що діє як основний регулятор еритропоезу шляхом зв'язування зі специфічним рецептором на поверхні клітин-попередників еритроцитів. Це зв'язування сигналізує про їх проліферацію та диференціацію у зрілі червоні кров'яні клітини. Зазначений еритропоетиновий рецептор являє собою 484амінокислотний глікопротеїн з високою спорідненістю до еритропоетину. Для еритропоетинового рецептора однією із ключових подій, що керує активацією, може бути індукована лігандом гомодимеризація. Еритропоетин має відносно короткий період напіввиведення. Уведений внутрішньовенно, еритропоетин елімінується зі швидкістю, що співпадає з кінетикою першого порядку, при циркуляторному періоді напіввиведення, який варіює від приблизно 3 до 4 годин у пацієнтів з хронічною нирковою хворобою (CRF). У межах терапевтичної дози рівні еритропоетину у плазмі, що визначаються, зберігаються протягом принаймні 24 годин. Після підшкірного уведення еритропоетину пікові рівні у сироватці досягаються протягом 5-24 годин і потім повільно падають. Невеликі пептидоміметики еритропоетину були ідентифіковані кількома групами шляхом скринінгу довільних фагових розгорнутих пептидних бібліотек на спорідненість до еритропоетинового рецептора. Ці послідовності нe мають гомології з еритропоетином. У функціональних пробах кілька із цих пептидів виявляли активність, проте що складала лише 1/100000-ну активності рекомбінантного еритропоетину. Хоча було зроблено кілька спроб підвищити активність цих пептидів шляхом приготування ковалентних димерів або мультимерів пептидоміметиків, ці сполуки все ж мають активність у 1000-10000 разів нижчу, ніж еритропоетин на мольній основі, і мають дуже короткі періоди піврозпаду, що робить їх непридатними для використання як терапевтичних агентів. Відповідно, є потреба у запровадженні поліпшених та/або модифікованих версій ΕΠΟ терапевтичних білків, з допомогою яких можливо подолати ще одну із зазначених та інших проблем, котрі відомі у даній галузі. Даний винахід запроваджує ΕΠΟ міметичні шарнірно-серцевинні міметитіла людини, включаючи модифіковані імуноглобуліни, продукти розщеплення та інші їх визначені частини, та варіанти, так само як і композиції ΕΠΟ міметичних шарнірно-серцевинних міметитіл, кодуючі або комплементарні нуклеїнові кислоти, вектори, клітини-хазяї, композиції, препарати, пристрої, трансгенні тварини, трансгенні рослини, та способи їх одержання та використання, як описано та/або подано у даному тексті, сумісно з тим, що відомо у даній галузі. Даний винахід також запроваджує принаймні одне ізольоване ΕΠΟ міметичне шарнірно 5 серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, як описано у даному тексті та/або відомо у даній галузі. Зазначене ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло може, при потребі, включати принаймні одну CH3 ділянку, що прямо з'єднана з принаймні однією СН2 ділянкою, що прямо з'єднана з принаймні однією частиною принаймні однієї шарнірної ділянки або її фрагментом (Н), що прямо з'єднаний з додатковою лінкерною послідовністю (L), що прямо з'єднана з принаймні одним ΕΠΟ міметичним терапевтичним пептидом (Р), що, при потребі, додатково прямо з'єднаний з принаймні частиною принаймні однієї варіабельної послідовності антитіл (V). У варіанті, якому віддається перевага, пара CH3-СН2-шарнір-лінкертерапевтичний пептид з додатковою N-кінцевою послідовністю антитіл, пара, що при потребі, з'єднана шляхом асоціації або ковалентним зв'язком, таким як, але не обмежуючись цим, принаймні одним Cys-Cys дисульфідним зв'язком, або принаймні однією СН4, або іншою імуноглобуліновою послідовністю. В одному варіанті ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло включає формулу (І): ((V(m)-P(n)-L(o)-H(p)-CH2(q)-CH3(r))(s), де V являє собою принаймні одну частину Nкінця імуноглобулінової варіабельної ділянки, Ρ є принаймні одним біоактивним ΕΠΟ міметичним поліпептидом, L є принаймні однією лінкерною послідовністю, Η являє собою принаймні одну частину імуноглобулінової варіабельної ділянки, СН2 є принаймні частиною імуноглобулінової СН2 константної ділянки, CH3 є принаймні частиною імуноглобулінової CH3 константної ділянки, m, n, o, p, q, r та s можуть бути, незалежно, цілими числами у межах 0, 1 або 2 та 10, імітуючи різні типи молекул імуноглобуліну, наприклад, але не обмежуючись цим, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2, IgM, IgD, IgE, або будь-який їх підклас, і таке подібне, або будь-яка їх комбінація. Таким чином, ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло даного винаходу імітує принаймні частину антитіла або імуноглобулінової структури, або функцію з притаманними йому властивостями та функціями, запроваджуючи у той же час терапевтичний пептид з притаманними йому або набутими in vitro, in vivo або in situ властивостями чи активностями. Різні частини даного антитіла та частини терапевтичного пептиду принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла даного винаходу можуть варіювати, як тут описано, у комбінації з тим, що відомо у цій галузі. Даний винахід запроваджує, в одному аспекті, ізольовані молекули нуклеїнової кислоти, включаючи комплементарні, що мають значну ідентичність або гібридизовані з полінуклеотидом, що кодує специфічні міметитіла або визначені частини, або їх варіанти, що включають принаймні одну визначену послідовність, домен, частину або їх варіант. Даний винахід також запроваджує рекомбінантні вектори, що включають принаймні одну із зазначених ізольованих молекул нуклеїнової кис 89481 6 лоти ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла, клітини-хазяї, що містять такі нуклеїнові кислоти та/або рекомбінантні вектори, так само як і способи приготування та/або використання таких нуклеїнових кислот, векторів та/або клітин-хазяїв ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла. Принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант даного винаходу імітують зв'язування Ρ частини даного міметитіла з принаймні одним лігандом, або має принаймні одну біологічну активність принаймні одного білка, субодиниці, фрагмента, частини або будь-якої їх комбінації. Даний винахід також запроваджує принаймні одне ізольоване ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, як тут описано та/або відомо у даній галузі, де зазначене ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант має принаймні одну активність, таку як, але не обмежуючись цим, відомі біологічні активності принаймні одного біоактивного пептиду або поліпептиду, що відповідає Ρ частині Формули І. Таким чином, ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло може бути піддано скринінгу на відповідну активність згідно з відомими способами, таку як принаймні одна нейтралізуюча активність по відношенню білка або його фрагмента. Даний винахід також запроваджує принаймні одну композицію, що включає (а) принаймні одне ізольоване ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, що кодує нуклеїнову кислоту, та/або ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло як тут описано; і (b) придатний носій або розріджувач. Даний носій або розріджувач, при потребі, може бути фармацевтично прийнятним, згідно з відомими методами. Дана композиція може, при потребі, додатково включати принаймні одну додаткову сполуку, білок або композицію. Даний винахід також запроваджує принаймні один спосіб для експресії принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанта у клітиніхазяїні, що включає культивування клітинихазяїна, як тут описано та/бо відомо у даній галузі, за умов, що принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант експресовані у визначуваній та/або відновлювальній кількостях. Даний винахід також запроваджує принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, визначену частину або варіант у - способі чи композиції, при застосуванні у терапевтично ефективній кількості, для модуляції, лікування або зменшення симптомів принаймні одного із кісткових та суглобних розладів, серцево-судинного розладу, зубного або ротового розладу, дерматологічного розладу, вушного, носового або горлового розладу, ендокринного або метаболічного розладу, шлунково-кишкового розладу, гінекологічного розладу, печінкового або біліарного розладу, акушерського розладу, гематологічно 7 го розладу, імунологічного або алергічного розладу, інфекційного захворювання, м'язовоскелетного розладу, онкологічного розладу, неврологічного розладу, розладу системи харчування, офтальмологічного розладу, педіатричного розладу, розладу, пов'язаного з отруєнням, психіатричного розладу, ниркового розладу, легеневого розладу, або будь-якого іншого відомого розладу. (Див., наприклад, роботу The Merck Manual, 17th ed., Merck Research Laboratories, Merck and Co., Whitehouse Station, NJ (1999), посилання на яку включено у даний текст у повному обсязі), як це необхідно при багатьох станах, таких як, але не обмежуючись цим, до, після або підчас даної хвороби чи стану лікування, як це відомо у даній галузі. Даний винахід також запроваджує принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, визначену частину або варіант у способі чи композиції, при застосуванні у терапевтично ефективній кількості, для модуляції, лікування або зменшення симптомів принаймні однієї імунної, серцево-судинної, інфекційної, злоякісної та/або неврологічної хвороби у клітині, тканині, органі, у тварини чи пацієнта, як це необхідно при багатьох станах, таких як, але не обмежуючись цим, до, після або підчас даної хвороби чи стану лікування, як це відомо у даній галузі та/або описано у даному тексті. Даний винахід також запроваджує принаймні одну композицію, пристрій та/або спосіб доставки терапевтично або профілактично ефективної кількості принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини чи варіанту згідно з даним винаходом. Даний винахід також запроваджує принаймні одне антиідиотипове антитіло до принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла даного винаходу. Зазначене антиідиотипове антитіло включає будь-який білок або пептид, що включає молекулу, котра містить принаймні частину молекули імуноглобуліну, таку як, проте не обмежуючись цим, принаймні одну гіперваріабельну ділянку (CDR) важкого або легкого ланцюга, або її частину, що зв'язує ліганд, варіабельну ділянку важкого ланцюга або легкого ланцюга, константну ділянку важкого ланцюга або легкого ланцюга, рамкову ділянку, або будь-яку її частину, що у конкурентний спосіб зв'язує ΕΠΟ рецепторну зв'язувальну ділянку принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла даного винаходу. Такі ідіотипові антитіла даного винаходу можуть включати або бути одержані від будь-якого ссавця, такого як, але не обмежуючись цим, людина, миша, кріль, щур, гризун, примат і таке подібне. Даний винахід також запроваджує принаймні одну ізольовану молекулу нуклеїнової кислоти, включаючи комплементарну або гібридизовану з полінуклеотидом, що кодує принаймні одне антиідиотипове антитіло ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла, що включає принаймні одну визначену послідовність, домен, частину або її варіант. Даний винахід також запроваджує рекомбінантні вектори, що включають зазначене анти 89481 8 ідиотпове антитіло ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла, яке кодує молекули нуклеїнової кислоти, клітини-хазяї, котрі містять такі нуклеїнові кислоти та/або рекомбінантні вектори, так само як і способи приготування та/або використання таких антиідиотипове антитіло-нуклеїнових кислот, векторів та або клітин-хазяїв. Даний метод також запроваджує принаймні один спосіб для експресії принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або антиідиотипового антитіла ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла у клітиніхазяїні, що включає культивування клітинихазяїна, як тут описано, за умов, що принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або антиідиотипове антитіло експресоване у визначуваній та/або відтворювальній кількостях. Даний винахід також запроваджує принаймні одну композицію, що включає (а) ізольоване ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, що кодує нуклеїнову кислоту, та/або ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло як тут описано; і (b) придатний носій або розріджувач. Даний носій або розріджувач, при потребі, може бути фармацевтично прийнятним, згідно з відомими носіями або розріджувачами. Дана композиція може, при потребі, додатково включати принаймні одну додаткову сполуку, білок або композицію. Даний винахід також запроваджує принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, у способі чи композиції, для застосування у терапевтично ефективній кількості для модуляції або лікування принаймні одного стану, пов'язаного з білком, у клітині, тканині, органі, у тварини чи пацієнта, та/або, до, після або підчас даного стану, як це відомо у даній галузі та/або описано у даному тексті. Даний винахід також запроваджує принаймні одну композицію, пристрій та/або спосіб доставки терапевтично або профілактично ефективної кількості принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла згідно з даним винаходом. Даний винахід також запроваджує принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, у способі чи композиції, для діагностування принаймні одного стану, пов'язаного з ΕΠΟ, у клітині, тканині, органі, у тварини чи пацієнта, та/або, до, після або підчас даного стану, як це відомо у даній галузі та/або описано у даному тексті. Даний винахід також запроваджує принаймні одну композицію, пристрій та/або спосіб доставки для діагностування принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла згідно з даним винаходом. В одному аспекті, даний винахід запроваджує принаймні одне ізольоване ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло людини, що включає принаймні одну Р(n) ділянку, яка включає принаймні частину принаймні однієї SEQ ID NOS: 1-30, наприклад, як подано у Таблиці 1 нижче, або, при потребі, з однією або кількома заміщеннями, делеціями або інсерціями, як тут описано або як відомо у даній галузі. В іншому аспекті даний винахід запроваджує принаймні одне ізольоване ΕΠΟ 9 міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло людини, де зазначене ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло специфічно зв'язує принаймні один епітоп, що включає принаймні 1-3 принаймні одного ліганда або зв'язувальну ділянку, де даний ліганд зв'язаний принаймні з частиною принаймні однієї SEQ ID NOS: 1-30, як подано у Таблиці 1 нижче, або, при потребі, з однією або кількома заміщеннями, делеціями або інсерціями, як тут описано або як відомо у даній галузі. Принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло може, при потребі, крім того, або зв'язувати білок зі спорідненістю, що вибирається, принаймні, із 10-9М, принаймні 10-10М, принаймні 10-11М, або, принаймні, 10-12Μ; або суттєво нейтралізувати принаймні одну активність принаймні одного білка або його частини. Також запроваджена ізольована нуклеїнова кислота, що кодує принаймні одне ізольоване ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло людини; ізольований вектор нуклеїнової кислоти, що включає ізольовану нуклеїнову кислоту, та/або прокаріотну чи еукаріотну клітину-хазяїна, що включає дану ізольовану нуклеїнову кислоту. Зазначена клітинахазяїн може, при потребі, бути, принаймні, клітиною, що вибирається із COS-1, COS-7, НЕK293, ВНK21, СНО, BSC-1, Hep G2, 653, SP2/0, 293, HeLa, клітини мієломи або лімфоми, або будьякого її деривату, її іморталізованої або трансформованої клітини. Крім того, запроваджений спосіб для продукування принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла, що включає трансляцію даного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла, котре кодує нуклеїнову кислоту, за умов in vitro, in vivo або in situ, так що дане ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло експресоване у визначуваній та/або відновлювальній кількостях. Також запроваджена композиція, що включає принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло людини та принаймні один фармацевтично прийнятний носій або розріджувач. Дана композиція може, при потребі, додатково містити ефективну кількість принаймні однієї сполуки або білка, що вибирається із принаймні однієї сполуки з визначуваною міткою або репортера, протиінфекційних ліків, серцево-судинних системних ліків (CV), ліків центральної нервової системи (CNS), ліків вегетативної нервової системи (ANS), ліків респіраторного тракту, ліків шлунково-кишкового тракту (GI), гормональних ліків, ліків для регулювання рідинного або електролітичного балансу, гематологічних ліків, протипухлинних ліків, імуномодуляторних ліків, офтальмологічних, вушних або назальних ліків, ліків локального призначення, ліків, пов'язаних з харчуванням, TNF антагоніста, протиревматичних ліків, м'язового релаксанту, наркотичних, нестероїдних протизапальних ліків (ΝΤΗΕ), анальгетиків, анестетиків, седативних засобів, локальних анестетиків, нервово-м'язових блокаторів, протимікробних засобів, антипсоріатичних засобів, кортикостроїдів, анаболічних стероїдів, еритропоетину, імунізаційних засобів, імуноглобуліну, імунодепресантів, гормону росту, ліків, що замінюють гормони, радіофарма 89481 10 цевтичних засобів, антидепресантів, антипсихотичних засобів, стимуляторів, ліків проти астми, бета агоністів, стероїдів, що уживаються шляхом інгаляції, епінефрину або його аналогу, цитокіну або цитокінового антагоніста. Даний винахід також запроваджує антиідиотипове антитіло або фрагмент, що у специфічний спосіб зв'язує принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло даного винаходу. Крім того, запроваджується спосіб для діагностування або лікування хворобливого стану у клітині, тканині, органі або у тварини, що включає (а) контактування або застосування композиції, що містить ефективну кількість принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла людини даного винаходу, з або до, клітини, тканини, органу або тварини. Даний спосіб також може, при потребі, включати використання ефективної кількості 0,001-50мг/кг клітин, тканини, органу або тварини. Даний спосіб також може, при потребі, включати контактування або застосування з використанням принаймні однієї схеми, що вибирається із парентеральної, підшкірної, внутрішньом'язової, внутрішньовенної, інтрартикулярної, інтрабронхіальної, інтраабдомінальної, інтракапсулярної, внутрішньохрящевої, внутрішньополостної, внутрішньочеревної, інтрацелебелларної, інтрацеребровентрикулярної, у товсту кишку, інтрацервікальної, внутрішньошлункової, внутрішньопечінкової, внутрішньоміокардної, внутрішньокісткової, внутрішньотазової, внутрішньоперикардної, інтраперитонеальної, інтраплевральної, у простату, внутрішньолегеневої, інтраректальної, інтраренальної, інтраретинальної, інтраспінальної, внутрішньосуглобової, інтраторокальної, внутрішньоматочної, внутрішньоміхурової, болюсної, вагінальної, ректальної, трансбукальної, сублінгвальної, інтраназальної або трансдермальної схеми. Даний спосіб також може, при потребі, включати застосування, до, сумісно або після (а) контактування або застосування, принаймні однієї композиції, що містить ефективну кількість принаймні однієї сполуки або білка, що вибирається із принаймні однієї сполуки з визначуваною міткою або репортером, протиінфекційних ліків, серцевосудинних системних ліків (CV), ліків центральної нервової системи (CNS), ліків вегетативної нервової системи (ANS), ліків респіраторного тракту, ліків шлунково-кишкового тракту (GI), гормональних ліків, ліків для регулювання рідинного або електролітичного балансу, гематологічних ліків, протипухлинних ліків, імуномодуляторних ліків, офтальмологічних, вушних або назальних ліків, ліків локального призначення, ліків, пов'язаних з харчуванням, TNF антагоніста, протиревматичних ліків, м'язового релаксанту, наркотичних, нестероїдних протизапальних ліків (NSAID), анальгетиків, анестетиків, седативних засобів, локальних анестетиків, нервово-м'язових блокаторів, протимікробних засобів, антипсоріатичних засобів, кортикостероїдів, анаболічних стероїдів, еритропоетину, імунізаційних засобів, імуноглобуліну, імунодепресантів, гормону росту, ліків, що замінюють гормони, радіофармацевтичних засобів, антидепресантів, антипсихотичних засобів, стимуляторів, ліків 11 проти астми, бета агоністів, стероїдів, що уживаються шляхом інгаляції, епінефрину або його аналогу, цитокіну або цитокінового антагоніста. Запроваджений також медичний пристрій, що містить принаймні одне ізольоване ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло людини даного винаходу, де зазначений пристрій придатний для контактування або застосування принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла з використанням принаймні однієї схеми, що вибирається із парентеральної, підшкірної, внутрішньом'язової, внутрішньовенної, інтрартикулярної, інтрабронхіальної, інтраабдомінальної, інтракапсулярної, внутрішньохрящевої, внутрішньополостної, інтрацеліальної, інтрацелебелларної, інтрацеребровентрикулярної, у товсту кишку, інтрацервікальної, внутрішньошлункової, внутрішньопечінкової, внутрішньоміокардної, внутрішньокісткової, внутрішньотазової, внутрішньоперикардної, інтраперитонеальної, інтраплевральної, у простату, внутрїшньолегеневої, інтраректальної, інтраренальної, інтраретинальної, інтраспінальної, внутрішньосуглобової, інтраторокальної, внутрішньоматочної, внутрішньоміхурової, болюсної, вагінальної, ректальної, трансбукальної, сублінгвальної, інтраназальної або трансдермальної схеми. Запроваджений також виріб для фармацевтичного або діагностичного застосування людиною, що включає пакувальний матеріал та контейнер, котрий містить розчин або ліофілізовану форму принаймні одного ізольованого ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла людини даного винаходу. Даний виріб може, при потребі, мати даний контейнер як компонент парентеральної, підшкірної, внутрішньом'язової, внутрішньовенної, інтрартикулярної, інтрабронхіальної, інтраабдомінальної, інтракапсулярної, внутрішньохрящевої, внутрішньополостної, інтрацеліальної, інтрацелебелларної, інтрацеребровентрикулярної, у товсту кишку, інтрацервікальної, внутрішньошлункової, внутрішньопечінкової, внутрішньоміокардної, внутрішньокісткової, внутрішньотазової, внутрішньоперикардної, інтраперитонеальної, інтраплевральної, у простату, внутрішньолегеневої, інтраректальної, інтраренальної, інтраретинальної, інтраспінальної, внутрішньосуглобової, інтраторокальної, внутрішньоматочної, внутрішньоміхурової, болюсної, вагінальної, ректальної, трансбукальної, сублінгвальної, інтраназальної або трансдермальної системи або пристрою доставки. Запроваджений також спосіб для одержання принаймні одного ізольованого ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла людини даного винаходу, що включає запровадження клітинихазяїна або трансгенної тварини, або трансгенної рослини, або рослинної клітини, що здатна до експресії у відтворюваних кількостях даного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла. У даному винаході запроваджене також принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, що отримане з допомогою зазначеного вище способу. Даний винахід запроваджує також принаймні один спосіб для експресії принаймні одного ΕΠΟ 89481 12 міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла, або антиідиотипового антитіла, у клітині-хазяїні, що включає культивування клітини-хазяїна, як тут описано, за умов, коли принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло експресоване у визначуваній та/або відтворюваній кількостях. Даний винахід також запроваджує будь-який описаний тут винахід. Каркас, CDR та шарнірні ділянки помічені у боксах. Залишки послідовностей пронумеровані для кожного амінокислотного положення. Перелік амінокислотних заміщень або гепів (позначені як "-"), що спостерігаються в кожному положенні у вирівняних послідовностях, показаний під кожним залишком послідовності. Даний винахід запроваджує ізольовані, рекомбінантні та/або синтетичні міметитіла або визначені частини, або ваоіанти. так само як 1 композипії та кодуючі молекули нуклеїнової кислоти, що включають принаймні один полінуклеотид, що кодує принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло. Такі міметитіла або визначені частини, або варіанти даного винаходу включають специфічні послідовності ΕΠΟ міметичних шарнірно-серцевинних міметитіл, домени, фрагменти та їх визначені варіанти, і способи приготування та використання таких нуклеїнових кислот, та міметитіл або визначених частин чи варіантів, включаючи терапевтичні композиції, способи та пристрої. Даний винахід також запроваджує принаймні одне ізольоване ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, як тут описано та/або відомо у даній галузі. Зазначене ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло може, при потребі, включати принаймні одну CH3 ділянку, що прямо з'єднана з принаймні однією СН2 ділянкою, що прямо з'єднана з принаймні однією шарнірною ділянкою або її фрагментом (Н), що прямо з'єднана з додатковою лінкерною послідовністю (L), що прямо з'єднана з принаймні одним терапевтичним пептидом (Р), при потребі, додатково прямо з'єднана з принаймні частиною принаймні однієї варіабельної (V) послідовності антитіл. У варіанті, якому віддається перевага, ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло включає формулу ((V(m)-P(n)-L(o)-H(p)-CH2(q)-CH3(r))(s), де V являє собою принаймні одну частину Nкінця імуноглобулінової варіабельної ділянки, Ρ є принаймні одним біоактивним пептидом, L є поліпептидом, котрий запроваджує структурну гнучкість, надаючи даному міметитілу можливість мати альтернативні орієнтації та зв'язувальні властивості, Η являє собою принаймні частину імуноглобулінової варіабельної шарнірної ділянки, СН2 є принаймні частиною імуноглобулінової СН2 константної ділянки, CH3 є принаймні частиною імуноглобулінової CH3 константної ділянки, m, n, о, р, q, r та s можуть бути, незалежно, цілими числами у межах 0, 1 або 2 та 10, імітуючи різні типи молекул 13 імуноглобуліну, наприклад, але не обмежуючись цим, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgD, IgE, і таке подібне, або будь-яку їх комбінацію. Мономер, де m=1, може бути з'єднаний з іншими мономерами шляхом асоціації або, ковалентним зв'язком, таким як, проте не обмежуючись цим, Cys-Cys дисульфідний зв'язок, або іншою імуноглобуліновою послідовністю. ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло даного винаходу імітує структуру антитіла з притаманними йому властивостями та функціями, запроваджуючи у той же час терапевтичний пептид з притаманними йому або набутими in vitro, in vivo або in situ властивостями чи активностями. Різні частини даного антитіла та частини терапевтичного пептиду принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла даного винаходу можуть варіювати, як тут описано, у комбінації з тим, що відомо у цій галузі. Як застосовується у даному тексті, "ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло", "частина ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла", або "фрагмент ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла" та/або "варіант ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла" і таке подібне імітує, має або симулює зв'язування принаймні одного ліганда або принаймні одну біологічну активність принаймні одного білка, таку як зв'язування ліганда чи активність. Міметитіла, корисні у способах та композиціях даного винаходу, характеризуються придатною спорідненістю до зв'язування з білковими лігандами або рецепторами, і, при потребі, та, краще, мають низьку токсичність. Зокрема, ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, де окремі компоненти, такі як частина варіабельної ділянки, константна ділянка (без СН1 частини) та фрагмент, або будь-яка його частина (наприклад, частина J, D або V ділянок варіабельного важкого або легкого ланцюга; принаймні частина принаймні однієї шарнірної ділянки, константний важкий ланцюг або легкий ланцюг, і таке подібне) окремо та/або колективно, при потребі, і, краще, мають низьку імуногенність, корисне у даному винаході. Міметитіла, що можуть бути використані у даному винаході, характеризуються, при потребі, їх здатністю лікувати пацієнтів протягом тривалих періодів часу з добрим і значним послабленням симптомів та низькою токсичністю. Низька імуногенність та/або висока спорідненість, так само як і інші невизначені властивості, можуть давати свій внесок у досягнуті терапевтичні результати. "Низька імуногенність" визначається тут як значне підвищення НАМА, НАСА або НАНА реакцій у менше, ніж приблизно 75%, або, краще, менше, ніж приблизно 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, та/або 1% пацієнтів, що піддаються лікуванню, та/або підвищення низьких титрів у пацієнтів, що піддаються лікуванню (менше приблизно 300, краще, менше приблизно 100, при вимірюванні методом подвійного антигенного ферментативного імунологічного аналізу) (дивись, наприклад, Elliott et al., Lancet 344:1125-1127 (1994)). 89481 14 Застосування Ізольовані нуклеїнові кислоти даного винаходу можуть бути застосовані для одержання принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла, його фрагмента або визначеного варіанта, що можуть бути використані для впливу на клітину, тканину, орган або тварину (включаючи ссавців та людей) для модуляції, лікування, послаблення, допомоги у запобіганні початку, або послаблення симптомів принаймні одного пов'язаного з білком стану, що вибирається із, проте не обмежуючись цим, принаймні одного імунного розладу або захворювання, серцевосудинного розладу або захворювання, інфекційного, злоякісного, та/або неврологічного розладу або захворювання, Анемії, імунного/автоімунного захворювання, та/або ракового/інфекційного, так само як і інших відомих або визначених станів, що пов'язані з білком. Такий спосіб може включати застосування ефективної кількості композиції або фармацевтичної композиції, що містить принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, до клітини, тканини, органа, тварини або пацієнта, що потребує такої модуляції, лікування, полегшення, запобігання, або послаблення симптомів, ефектів чи механізмів. Ефективна кількість може включати приблизно від 0,0001 до 500мг/кг із розрахунку на одноразове або багаторазове уживання, або для досягнення концентрації у сироватці 0,00015000мкг/мл із розрахунку на одноразове або багаторазове уживання, або будь-яку ефективну область або значення, як це робиться та визначається з використанням відомих методів, як це описано у даному тексті або відомо із споріднених галузей. Посилання На всі публікації або патенти, що цитовані у даному тексті, зроблені повні посилання, оскільки вони показують стан справ у цій галузі на час подання даної заявки та/або входять до опису та обґрунтування даного винаходу. Публікації стосуються будь-яких наукових або патентних публікацій, або будь-якої іншої інформації, що наявна у будь-якому медійному форматі, включаючи всі записані, електронні або друковані формати. На наступні роботи в даному тексті зроблені повні посилання: Ausubel, et al., ed., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., NY, NY (1987-2003); Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor, NY (1989); Harlow and Lane, Antibodies, A Laboratory Manual, Cjld Spring Harbor, NY (1989); Colligan, et al., eds., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, Inc., NY (19942003); Colligan et al., Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, NY (1997-2003). Міметитіла даного винаходу Зазначене ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло може, при потребі, включати принаймні одну CH3 ділянку, що прямо з'єднана з,принаймні однією СН2 ділянкою, що прямо з'єднана з принаймні однією частиною принаймні одного фрагмента шарнірної ділянки (Н), такою, що вона містить принаймні одну серцевинну шарнірну 15 ділянку, що прямо з'єднана з додатковою лінкерною послідовністю (L), тцо прямо , з'єднана з принаймні одним терапевтичним пептидом (Ρ), при потребі, додатково прямо з'єднана з принаймні частиною принаймні однієї варіабельної (V) послідовності антитіл. У варіанті, якому віддається перевага, пара CH3-CH2-H-L-V є парою, що при потребі, з'єднана шляхом асоціації або ковалентним зв'язком. Таким чином, ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло даного винаходу імітує структуру антитіла з притаманними йому властивостями та функціями, запроваджуючи у той же час терапевтичний пептид з притаманними йому або набутими in vitro, in vivo або in situ властивостями чи активностями. Різні частини антитіла та частини терапевтичного пептиду принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла даного винаходу можуть варіювати, як тут описано, у комбінації з тим, що відомо у цій галузі. Таким чином, міметитіла даного винаходу запроваджують принаймні одну придатну властивість, у порівнянні з відомими білками, таку як, проте не обмежуючись цим, підвищений період піврозпаду, підвищена активність, більш специфічна активність, підвищена авідність, вибрана або більш придатна підмножина активностей, менша імуногенність, підвищена якість або тривалість принаймні одного бажаного терапевтичного ефекту, менше побічних ефектів і таке подібне. Фрагменти міметитіл згідно з Формулою (І) можуть бути одержані шляхом ферментативного гідролізу, синтетичними або рекомбінантними методами, як відомо у цій галузі та/або описано у даному тексті. Міметитіла можуть бути одержані у множині зрізаних форм з використанням генів антитіл, де один або кілька термінуючих кодонів були введені вище природного термінуючого сайта. Різні частини міметитіл можуть бути з'єднані у хімічний спосіб за допомогою звичайних способів, або можуть бути одержані як суміжний білок з використанням методів генної інженерії. Наприклад, нуклеїнова кислота, що кодує принаймні одну із константних ділянок ланцюга антитіла людини, може бути експресована з одержанням суміжного білка для використання у міметитілах даного винаходу. Дивись, наприклад, Ladner et al., US Patent No. 4946778 та Bird, R.E. et al., Science, 242:423426 (1988), де розглядаються антитіла з одним ланцюгом. Як застосовується у даному тексті, термін "міметитіло людини" стосується антитіла, в якому суттєво кожна частина даного білка (наприклад, ΕΠΟ міметичний пептид, каркас, CL, CH домени (наприклад, СН2, СН3), шарнір, (VL, VH)), як очікується, є суттєво не-імуногенною в людських організмах з лише незначними змінами послідовностей або варіаціями. Такі зміни або варіації, при потребі, і краще, зберігають або знижують імуногенність у людей відносно немодифікованих антитіл людини або міметитіл даного винаходу. Таким чином, антитіло людини та відповідне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло даного винаходу відрізняється від химерного або гуманізованого антитіла. Можна зазначити, що антитіло людини та ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметиті 89481 16 ло може бути продуковане твариною (не людиною) або клітиною, що здатна експресувати імуноглобулінові (наприклад, з важким ланцюгом та/або легким ланцюгом) гени людини. Міметитіла людини, що є специфічними щодо принаймні одного білкового ліганда або рецептора, можуть бути створені проти відповідного ліганда, такого як ізольований та/або ΕΠΟ білковий рецептор або ліганд, або його частина (включаючи синтетичні молекули, такі як синтетичні пептиди). Приготування таких міметитіл проводиться з використанням відомих способів ідентифікації та аналізу зв'язувальних ділянок ліганда або послідовностей принаймні одного білка або його частини. У варіанті, якому віддається перевага, принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант даного винаходу, продукується принаймні однією клітинною лінією, змішаною клітинною лінією, іморталізованою клітиною або клоновою популяцією іморталізованих та/або культуральних клітин. Іморталізовані клітини, що продукують білок, можуть бути одержані з використанням придатних методів. Краще, коли принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант генеруються запровадженням нуклеїнової кислоти або векторів, які містять ДНК, котра отримана або має суттєво подібну послідовність до принаймні одного локусу імуноглобуліну людини, що функціонально реаранжований, або котрий може піддаватись функціональному реаранжуванню і котрий, крім того, включає структуру міметитіла, як тут описано, наприклад, але не обмежуючись Формулою (І), де частини С- та Nкінцевих варіабельних ділянок можуть бути використані для V, шарнірних ділянок для Н, СН2 для СН2 та CH3 для CH3, як відомо у даній галузі. Термін "функціонально реаранжований", як застосовується у даному тексті, стосується сегмента нуклеїнової кислоти із імуноглобулінового локусу, що піддався V(D)J рекомбінації, продукуючи у такий спосіб імуноглобуліновий ген, котрий кодує імуноглобуліновий ланцюг (наприклад, важкий ланцюг), або будь-яку його частину. Функціонально реаранжований імуноглобуліновий ген може бути прямо або посередньо ідентифікований з використанням придатних способів, таких як, наприклад, секвенування нуклеїнової кислоти, гібридизація (наприклад, саузерн-блоттінг, нозернблоттінг), з використанням зондів, що можуть гібридизуватись з кодуючими з'єднаннями між генними сегментами, або ферментативна ампліфікація імуноглобулінових генів (наприклад, полімеразна ланцюгова реакція) праймерами, котрі можуть гібридизуватись з кодуючими з'єднаннями між генними сегментами. Чи продукує клітина ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або частину, або варіант, що включає особливу варіабельну ділянку або варіабельну ділянку, яка включає особливу послідовність (наприклад, принаймні одну Ρ послідовність), можна також визначити з використанням придатних методів. Міметитіла, визначені частини та варіанти даного винаходу можуть також бути одержані з використанням принаймні одного ΕΠΟ міметичного 17 шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, що кодує нуклеїнову кислоту, із запровадженням трансгенних тварин або ссавців, таких як кози, корови, коні, вівці і таке подібне, що продукують такі міметитіла або визначені частини, або варіанти у своєму молоці. Такі тварини можуть бути запроваджені з використанням відомих способів, як застосовується для кодуючих послідовностей антитіл. Дивись, наприклад, проте не обмежуючись цим, US Patents Nos. 5827690, 5849992, 4873316, 5849992, 5994616, 5565362, 5304489, і таке подібне, на кожен із яких у даному тексті зроблено посилання. Міметитіла, визначені частини та варіанти даного винаходу можуть також бути одержані з використанням принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, що кодує нуклеїнову кислоту, із запровадженням трансгенних рослин та культурованих рослинних клітин (наприклад, але не обмежуючись цим, тютюну та кукурудзи), що продукують такі міметитіла, визначені частини або варіанти у частинах рослин або у клітинах, котрі вирощені із них. Як приклад, що не вносить будьяких обмежень, листя трансгенного тютюну, що експресує рекомбінантні білки, було успішно застосоване для запровадження значних кількостей рекомбінантних білків, наприклад, з використанням здатного до індукції промотору. Див., наприклад, Cramer et al., Curr. Top.Microbol. Immunol. 240:95-118 (1999) та наведені у цій роботі посилання. Крім того, трансгенний маїс або кукурудза були використані для експресії білків ссавців на рівні комерційного виробництва, з біологічними активностями, еквівалентними до активностей в інших рекомбінантних системах, або виділених із природних джерел. Див., наприклад, Hood et al., Adv. Exp. Med. Biol, 464:127-147 (1999) та наведені у цій роботі посилання. Антитіла також були одержані у великих кількостях із насіння трансгенних рослин, включаючи фрагменти антитіл, такі як міметитіла з одним ланцюгом (scGFv), включаючи насіння тютюну та бульби картоплі. Див., наприклад, Conrad et al., Plant Mol. Biol. 38:101-109 (1998) та наведені у цій роботі посилання. Таким чином, міметитіла, визначені частини та варіанти даного винаходу можуть бути також одержані з використанням трансгенних рослин згідно з відомими способами. Див. також, наприклад, Fischer et al., Biotechnol. Appl, Biochem. 30:99-108 (жовтень 1999), Ma et al., Trends Biotechnol. 13:522-7 (1995); Ma et al., Plant Physiol. 109:341-6 (1995); Whitelam et al., Biochem. Soc. Trans. 22:940-944 (1994); та наведені у цій роботі посилання. На вищенаведені роботи у даному тексті зроблені повні посилання. Міметитіла даного винаходу можуть зв'язувати ліганди білка людини з широким діапазоном спорідненостей (KD). У варіанті, якому віддається перевага, принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло людини даного винаходу може, при потребі, зв'язувати принаймні один ліганд білка з високою спорідненістю. Наприклад, принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло даного винаходу може зв'язувати принаймні один ліганд білка з KD, що 89481 18 дорівнює або менше приблизно 10-7Μ або, краще, при KD, що дорівнює або менше приблизно 0,1-9,9 (або будь-який діапазон або значення) Χ 10-7, 10-8, 10-9, 10-10, 10-11, 10-12, або 10-13Μ, або будь-який двапазон або значення. Спорідненість або авідність ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла до принаймні одного ліганда білка може бути визначена експериментально з використанням будь-якого придатного способу, наприклад, як застосовується, для визначення спорідненості або авідності зв'язування. (Див., наприклад, Berzofsky, et al., "AntibodyAntigen Interactions," In Fundamental Immunology, Paul, W.E., Ed., Raven Press: New York, NY (1984); Kuby, Janis Immunology, W.H. Freeman and Company: New York, NY (1992); тa описані в цих роботах способи). Визначена спорідненість взаємодії конкретне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло-ліганд може варіювати, якщо вимірювання проводяться за різних умов (наприклад, концентрація солі, рН). Таким чином, вимірювання спорідненості та інших лігандзвязувальних параметрів (наприклад, KD, Kа, Kd) проводиться, краще, зі стандартизованими розчинами ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла та ліганда, та стандартизованим буфером, таким як буфер, що описаний у даній заявці. Молекули нуклеїнової кислоти З використанням поданої тут інформації, тацої як нуклеотидні послідовності, що кодують принаймні 90-100% суміжних амінокислот принаймні однієї SEQ ID NOS:1-30, так само як принаймні однієї частини антитіла, де зазначені вище послідовності уведені як Ρ послідовність Формули (І) із запровадженням ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла даного винаходу, що додатково включає визначені фрагменти, варіанти або їх узгоджені послідовності, або осаджений вектор, який включає принаймні одну із цих послідовностей, молекула нуклеїнової кислоти даного винаходу, що кодує принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, може бути одержана з використанням методів, що описані у даній заявці або відомі у цій галузі. Молекули нуклеїнової кислоти даного винаходу можуть бути у формі РНК, такої як мРНК, гяРНК, тРНК, або будь-якої іншої форми, або у формі ДНК, включаючи, проте не обмежуючись цим, кДНК та геномну ДНК, отриману шляхом клонування або одержану синтетичним шляхом, або будь-яку їх комбінацію. Будь-яка частина принаймні однієї нитки ДНК або РНК може бути кодуючим ланцюгом, що відомий також як сенсовий ланцюг, або вона може бути некодуючим ланцюгом, на який також посилаються як на анти-сенсовий ланцюг. Ізольовані молекули нуклеїнової кислоти даного винаходу можуть включати молекули нуклеїнової кислоти, що містять відкриту рамку зчитування (ORF), при потребі, з одним або кількома інтронами, молекули нуклеїнової кислоти, що містять кодуючу послідовність для ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту; та молекули нуклеїнової 19 кислоти, що містять нуклеотидну послідовність, яка суттєво відрізняється від описаних вище, але яка, через виродження генетичного коду, все ще кодує принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло, як тут описано або відомо у даній галузі. Звичайно, даний генетичний код добре відомий у даній галузі. Таким чином, фахівцеві у даній галузі буде звичайною справою генерувати такі вироджені нуклеїново-кислотні варіанти, що кодують специфічне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіанти даного винаходу. Див., наприклад, Ausubel, et al., supra, і такі варіанти нуклеїнових кислот включені у даний винахід. Як тут зазначалось, молекули нуклеїнової кислоти даного винаходу, котрі включають нуклеїнову кислоту, що кодує ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, можуть включати, проте не обмежуючись цим, такі, що самі кодують амінокислотну послідовність фрагмента ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла; кодуючу послідовність для всього ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або його частини; кодуючу послідовність для ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла, фрагмента або частини, так само як додаткові послідовності, такі як кодуюча послідовність принаймні одного сигнального лідера або злитого пептиду, з або без зазначених вище додаткових кодуючих послідовностей, таких як принаймні один інтрон, сумісно з додатковими, некодуючими послідовностями, включаючи, але не обмежуючись цим, некодуючі 5' та 3' послідовності, такі як транскрибовані, нетрансльрвані послідовності, що відіграють роль у транскрипції, мРНК процесінгу, включаючи сигнали сплайсінгу та поліаденілірування (наприклад, рибосомне зв'язування та стабільність мРНК); додаткову кодуючу послідовність, яка кодує додаткові амінокислоти, такі як ті, Що запроваджують додаткові функціональності. Таким чином, послідовність, що кодує ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, може бути злита з маркерною послідовністю, такою як послідовність, що кодує пептид, котрий полегшує очищення злитого ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, який містить фрагмент або частину ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла. Полінуклеотиди, котрі селективно гібридизуються з полінуклеотидом, як описано у даній заявці Даний винахід запроваджує ізольовані нуклеїнові кислоти, котрі гібридизуються за селективних умов гібридизації з розкритим тут полінуклеотидом або іншими, що тут розкриті, включаючи їх визначені варіанти або частини. Так, полінуклеотиди даного варіанта можуть бути використані для виділення, визначення, та/або кількісного визначення нуклеїнових кислот, що містять такі полінуклеотиди. Низько або помірно жорсткі умови гібридизації звичайно, але не виключно, застосовуються з послідовностями, що мають знижену ідентичність відносно комплементарних послідовностей. Помі 89481 20 рно та сильно жорсткі умови можуть бущ, при потребі, застосовані до послідовностей більшої ідентичності. Умови з низькою жорсткістю дозволяють селективну гібридизацію послідовностей, що мають приблизно 40-99% ідентичність послідовностей і можуть бути застосовані для ідентифікації ортологічних або паралогічних послідовностей. При потребі, полінуклеотиди даного винаходу будуть кодувати принаймні частину ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначену частину, або варіант, що кодується описаними тут нуклеотидами. Полінуклеотиди даного винаходу охоплюють послідовності нуклеїнових кислот, що можуть бути використані для селективної гібрідизації з полінуклеотидом, який кодує ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант даного винаходу. Див., наприклад, роботи Ausubel, supra; Colligan, supra, на кожну із яких у даній заявці зроблено повне посилання. Конструювання нуклеїнових кислот Ізольовані нуклеїнові кислоти даного винаходу можуть бути одержані з використанням (а) рекомбінантних методів, (b) синтетичних методів, (с) методів очищення, або їх комбінацій, що добре відомі у даній галузі. Дані нуклеїнові кислоти можуть зручно включати послідовності на додаток до полінуклеотиду даного винаходу. Наприклад, мультиклонуючий сайт, що включає один або кілька ендонуклеазних рестрікційних сайтів, може бути уведений у дану нуклеїнову кислоту для полегшення ізоляції полінуклеотиду даного винаходу. Наприклад, гексагістидинова маркерна послідовність запроваджує зручні засоби для очищення білків даного винаходу. Нуклеїнова кислота даного винаходу - за виключенням кодуючої послідовності - є, при потребі, вектором, адаптером, лінкером для клонування та/або експресії полінуклеотиду даного винаходу. До таких клонуючих та/або експресуючих послідовностей можуть бути додані додаткові послідовності з метою оптимізації їх функції у клонуванні та/або експресії, полегшення ізоляції даного полінуклеотиду, або поліпшення введення даного полінуклеотиду у клітину. Використання клонуючих векторів, експресуючих векторів, адаптерів та лінкерів добре відомо у даній галузі. Див., наприклад, Ausubel, supra; або Sambroock, supra. Рекомбінантні методи для конструювання нуклеїнових кислот Композиції ізольованих нуклеїнових кислот даного винаходу, таких як РНК, кДНК, геномна ДНК, або будь-яка їх комбінація, можуть бути одержані із біологічних джерел з використанням будьякого числа методологій клонування, що відомі фахівцям у даній галузі. У деяких варіантах олігонуклеотидні зонди, що селективно гібридизуються, за придатних умов жорсткості, з полінуклеотидами даного винаходу, використовуються для ідентифікації потрібної послідовності у бібліотеці кДНК або геномної ДНК. Ізоляція РНК та конструювання кДНК та геномної бібліотек добре відомі звичайним фахівцям у даній галузі. (Див., наприклад, Ausubel, supra; або Sambroock, supra). 21 Синтетичні методи для конструювання нуклеїнових кислот Ізольовані нуклеїнові кислоти даного винаходу можуть бути також одержані шляхом прямого хімічного синтезу з використанням відомих методів (див., наприклад, Ausubel, et al., supra). Хімічний синтез, загалом, дає олігонуклеотид з одним ланцюгом, котрий може бути перетворений у дволанцюгову ДНК шляхом гібридизації з комплементарною послідовністю, або полімеризації з ДНК полімеразою з використанням єдиного ланцюга як матриці. Фахівцеві у даній галузі зрозуміло, що хоча хімічний синтез ДНК може обмежуватись послідовностями із приблизно 100 або більше основ, довші послідовності можуть бути одержані шляхом зшивання більш коротких послідовностей. Рекомбінантні експресуючі касети Даний винахід також запроваджує рекомбінантні експресуючі касети, що містять нуклеїнову кислоту даного винаходу. Нуклеїново-кислотна послідовність даного винаходу, наприклад, кДНК або геномна послідовність, що кодує ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант даного винаходу, може бути використана для конструювання рекомбінантної експресуючої касети, що може бути уведена у принаймні одну потрібну клітину-хазяїна. Рекомбінантна експресуюча касета типово включає полінуклеотид даного винаходу, що оперативно з'єднаний з транскрипційними ініціюючими регуляторними послідовностями, котрі спрямовують транскрипцію даного полінуклеотиду до потрібної клітини-хазяїна. Для прямої експресії нуклеїнових кислот даного винаходу можуть бути застосовані як гетерологічний, так і негетерологічний (тобто ендогенний) промотори. У деяких варіантах ізольовані нуклеїнові кислоти, тцо слугують як промотор, енхансер або інші елементи, можуть бути введені у відповідне положення (вище, нижче або в інтрон) негетерологічної форми полінуклеотиду даного винаходу, щоб здійснити підвищувальну або знижувальну регуляцію експресії полінуклеотнду даного винаходу. Наприклад, ендогенні промотори можуть бути змінені in vivo або in vitro шляхом мутації, делеції та/або заміщення, як відомо у даній галузі. Полінуклеотид даного винаходу може бути експресований, як бажано, у сенс або анти-сенс орієнтації. Зрозуміло, що контроль генної експресії як у сенс, так і анти-сенс орієнтації може безпосередньо впливати на характеристики, що спостерігаються. Іншим способом супресії є сенс-супресія. Уведення нуклеїнової кислоти, що має конфігурацію з сенсорієнтацією, як було показано, є ефективним засобом блокування транскрипції генів-мішеней. Вектори та клітини-хазяї Даний винахід також стосується векторів, що включають молекули ізольованих нуклеїнових кислот даного винаходу, клітин-хазяїв, що загалом отримуються методами генної інженерії з рекомбінантними векторами, та одержання принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, за допомогою рекомбінантних методів, як це добре відомо у даній галузі. Див., наприклад, роботи 89481 22 Sambrook, et al., supra; Ausubel, et al., supra, на кожну із яких у даній заявці зроблено повне посилання. Дані полінуклеотиди можуть, при потребі,., бути з'єднані з вектором, що містить селектований маркер, для розповсюдження у хазяїні. Загалом, плазмідний вектор уводиться у клітину з використанням придатних відомих способів, таких як електроспособи, і такого подібного, інші відомі способи включають використання даного вектора як осаду, такого як осад фосфату кальцію, або у комплексі із зарядженим ліпідом. Якщо даний вектор є вірусом, він може бути заповнений in vitro з використанням відповідної пакувальної клітинної лінії і потім трансдукований у клітини-хазяї. ДНК інсерт має бути ефективно з'єднаний з відповідним промотором. Експресуючі конструктивні елементи додатково містять сайти, при потребі, принаймні один сайт ініціації транскрипції, термінації та, у транскрибованій ділянці, рибосомний сайт зв'язування для трансляції. Кодуюча частина зрілих транскриптів, яка експресована зазначеними конструктивними елементами, буде переважно включати трансляцію, що ініціюється у початкового та термінуючого кодону (наприклад, UAA, UGA або UAG), відповідним чином розміщеного в кінці мРНК, яка має транслюватись, де перевага для експресії клітини ссавця або еукаріотної клітини віддається UAA та UAG. Краще, але при потребі, коли експресуючі вектори включають принаймні один селектований маркер. Такі маркери включають, наприклад, але не обмежуючись цим, гени, резистентні до метотрексату (МТХ), дигідрофолат редуктази (DHFR, US Pat. Nos. 4399216, 4634665, 4656134, 4956288, 5149636, 5179017, ампіциліну, неоміцину (G418), мікофенольної кислоти або глутамін синтетази (GS, US Pat. Nos. 5122464, 5770359; 5827739) для культури еукаріотних клітин, та гени, резистентні до тетрацикліну або ампіциліну для культурування у Е. coli та інших бактеріях або прокаріотах (на наведені вище патенти у даному тексті зроблені повні посилання). Відповідні культуральні середовища та умови для описаних вище клітин-хазяїв відомі у даній галузі. Придатні вектори добре відомі досвідченим фахівцям у цій галузі. Уведення векторного конструктивного елемента у клітинухазяїна може здійснюватись шляхом кальційфосфатної трансфекції, трансфекції, що опосередкована DEAE-декстраном, катіонної трансфекції, що опосередкована ліпідом, трансдукції, інфікування або за допомогою інших відомих методів. Такі методи описані у даній галузі, наприклад, роботи Sambrook, supra, Chapters 1-4 та 16-18; Ausubel, supra, Chapters 1, 9, 13, 15, 16. Принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант даного винаходу можуть бути експресовані у модифікованій формі, такій як злитий білок, і можуть включати не тільки сигнали секреції, але також додаткові гетерологічні функціональні ділянки. Наприклад, ділянка додаткових амінокислот, зокрема заряджених амінокислот, може бути додана до N-кінця ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, 23 або варіанту для поліпшення стабільності та персистенції у клітині-хазяїні, підчас очищення або підчас подальших маніпуляцій та зберігання. Крім того, пептидні складові можуть бути додані до ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту даного винаходу для полегшення очищення. Такі ділянки можуть бути вилучені перед кінцевим приготуванням ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або принаймні його фрагмента. Такі методи описані у багатьох стандартних лабораторних підручниках, таких як Sambrook, supra, Chapters 17.29-17.42 та 18.1-18.74; Ausubel, supra, Chapters 16, 17 та 18. Фахівцям у даній галузі відомі численні експресуючі системи, що є наявними для експресії нуклеїнової кислоти, яка кодує білок даного винаходу. Ілюстрацією клітинних культур, корисних для одержання міметитіл, визначених частин або їх варіантів, є клітини ссавців. Системи клітин ссавців часто є у формі моношарів клітин, хоча можуть також використовуватись клітинні суспензії або біореактори. Ряд придатних ліній клітин-хазяїв, що здатні експресувати інтактні глікозильовані білки, розроблено у даній галузі, включаючи COS-1 (наприклад, АТСС CRL 1650), COS-7 (наприклад, АТСС CRL-1651), НЕK293, ВНK21 (наприклад, АТСС CRL-10), СНО (наприклад, АТСС CRL 1610, DG-44) та BSC-1 (наприклад, АТСС CRL-26) клітинні лінії, клітини hepG2, клітини P3X63Ag8.653, SP2/0-Agl 4,293, HeLa клітини і такі подібні, котрі є в наявності, наприклад, у фірми American Type Culture Collection, Manassas, Va. Клітини-хазяї, яким віддається перевага, включають клітини лімфоїдного походження, такі як мієломні та лімфомні клітини. Особлива перевага віддається клітинамхазяям P3X63Ag8.653 (АТСС Accession Number CRL-1580) та SP2/0-Agl4 (АТСС Accession Number CRL-1851). Експресуючі вектори для цих клітин можуть включати одну або кілька із наступних експресуючих контрольних послідовностей, таких як, але не обмежуючись реплікатором, промоторні (наприклад, пізні або ранні SV40 промотори, CMV промотор (наприклад, US Pat. Nos. 5168062, 5385839), та HSV tk промотор, pgk (фосфогліцерат кіназа) промотор, EF-1 альфа промотор (наприклад, US Pat. No.5266491), принаймні один імуноглобуліновий промотор людини, енхансер, та/або процесінгові інформаційні сайти, такі як рибосомні зв'язувальні сайта, сплайсингові сайти, сайти поліаденілірування (наприклад, SV40 великий Τ Ag полі А додаткова ділянка), та транскрипційні термінльні послідовності. Див., наприклад, Ausubel et al., supra; Sambroock et al., supra. Відомі та є у наявності й інші клітини, корисні для одержання нуклеїнових кислот або білків даного винаходу, наприклад, на фірмі American Type Culture Collection Catalogue of Cell Lines and Hybridomas (www.atcc.org), або від інших відомих чи комерційних джерел. Коли застосовуються еукаріотні клітини-хазяї, у даний вектор звичайно вводяться поліаденілюючі або транскрипційні термінальні послідовності. 89481 24 Прикладом термінальної послідовності є поліаденілююча послідовність із бичачого гену гормону росту. Можуть також включатись послідовності для точного сплайсінгу даного транскрипту. Прикладом сплайсінгової послідовності є VP1 інтрон із SV40 (Sprague, et al., J. Virol. 45:773-781 (1983)). Крім того, як відомо, у даний вектор можуть бути введені генні послідовності для контролю реплікації у клітині-хазяїні. Очищення ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або його визначеної частини, або варіанту ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант можуть бути відновлені та очищені із рекомбінантних клітинних культур з використанням добре відомих методів, включаючи, але не обмежуючись цим, очищення білку А, осадження із сульфату амонію або етанолу, кислотну екстракцію, аніоно- або катіонообмінну хроматографію, гідрофобну хроматографію, афінну хроматографію, гідроксилапатитну хроматографію та лектинову хроматографію. Для очистки може застосовуватись також високопродуктивна рідинна хроматографія ("HPLC"). Дивись, наприклад, роботи Colligan, Current Protocols in Immunology, або Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, NY, (1977-2003), наприклад, Chapters 1, 4, 6, 8, 9, 10, на кожну із яких у даній заявці зроблено повне посилання. Міметитіла або визначені частини, або варіанти даного винаходу включають природно очищені продукти, продукти хімічних синтетичних процедур та продукти, одержані рекомбінантними методами із еукаріотного хазяїна, включаючи, наприклад, клітини дріжджів, вищих рослин, комах та ссавців. У залежності від застосованого хазяїна у процедурі рекомбінантного одержання, ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант даного винаходу можуть бути глікозильовані або неглікозильовані, де перевага віддається глікозильованим. Такі методи описані у багатьох стандартних лабораторних підручниках, таких як Sambrook, supra, розділи 1737-17.42; Ausubel, supra, глави 10, 12, 13, 16, 18 та 20, Colligan, Protein Science, supra, глави 12-14, на які у даній заявці зроблені повні посилання. Міметитіла, визначені фрагменти та/або варіанти Ізольовані міметитіла даного винаходу включають ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, їдо кодується будь-яким із полінуклеотидів даного винаходу, як тут розглянуто більш детально, або будь-яке ізольоване чи одержане ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, або визначена частина, або його варіант. Краще, коли ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло або зв'язуюча ліганд частина, або варіант зв'язують принаймні один ΕΠΟ білковий ліганд чи рецептор, і у такий спосіб запроваджує принаймні одну ΕΠΟ біологічну активність відповідного білка чи його фрагмента. Різні терапевтично або діагностично важливі білки добре відомі у даній галузі, і придатні проби таких біл 25 ків та їх біологічні активності також добре відомі у цій галузі. Приклади, що не вносять будь-яких обмежень, придатних ΕΠΟ міметичних пептидів для даного винаходу подані у Таблиці 1 нижче. Ці пептиди можуть бути одержані з використанням розкритих способів та/або відомих у цій галузі. У більшості випадків використовуються однолітерні скорочення амінокислот. X у цих 'послідовностях (і у цій специфікації, якщо у конкретному випадку не зазначено інше) означає, що присутнім може бути будь-який із 20 природних або відомих амінокислотних залишків або їх відомих похідних, або будьяких їх відомих модифікованих амінокислот. Будьякий із цих пептидів може бути з'єднаний тандемом (тобто послідовно), з або без лінкерів, і у зазначеній таблиці подано кілька таких тандемних прикладів. Лінкери подаються як "D" і можуть бути будь-яким лінкером, що тут описаний. Тандемні повтори та лінкери показані розділеними для ясності тире. Будь-який пептид, що містить цистеїнільний залишок, може, при потребі, бути зшитий з іншим пептидом, що містить Cys, кожен із яких або обидва можуть бути з'єднані з вектором. У таблиці наведені кілька таких зшитих прикладів. Будь-який пептид, що має більше одного Cys залишку, може так само утворювати внутрішньопептидний дисульфідний зв'язок; див., наприклад, ЕПО-міметичні пептиди у Таблиці 1. Кілька прикладів внутрішньо 89481 26 пептидних дисульфід-звязаних пептидів подані у зазначеній таблиці. Будь-який із цих пептидів може бути одержаний як тут описано, і кілька таких прикладів подані у даній таблиці. Для похідних, де карбоксильний кінець може бути кепірований аміногрупою, така кепіруюча аміногрупа показана як NH2. Для похідних, де амінокислотні залишки заміщені складовими, відмінними від амінокислотних залишків, ці заміщення позначені d, що відповідає будь-якій складовій, відомій у цій галузі, наприклад, як описано у роботах Bhatnager et al., (1996), J. Med. Chem. 39: 3814-9 та Cuhbertson et al. (1997), J. Med. Chem. 40: 2876-82, на які у даному тексті зроблені повні посилання. J замісник та Ζ замісники (Ζ5, Z6...Z40) є такими, як визначено у US Pat. Nos. 5608035, 5786331 та 5880096, на які у даному тексті зроблені повні посилання. Для ЕПОміметичних послідовностей (Таблиця 1) замісники Х2-Х11 та ціле число "n" є такими як визначено у WO 96/40772, на яку у даному тексті зроблено повне посилання. Залишки, що позначені жирним шрифтом, являють собою D-амінокислоти, але, при потребі, можуть бути L-амінокислотами. Усі пептиди з'єднані через пептидні зв'язки, якщо не зазначено інше. Скорочення перелічені в кінці даної специфікації. У колонці "SEQ ID NO." "NR" означає, що для даної послідовності нема потреби у лістингу послідовності. 27 ΕΠΟ біологічні активності добре відомі у даній галузі. Див., наприклад, Anagnostou Α., et al., Erythropoietin has a mitogenic and positive chemotactic effect on endothelial cells. Proceedings of the National Academy of Sciences (USA) 87: 597882 (1990); Fandrey J and Jelkman WE, Interleukin 1 and tumor necrosis factor-alpha inhibit erythropoietin production in vitro. Annals of the New York Academy of Science 628: 250-5 (1991); Geissler К et al Recombinant human erythropoetin: A multipotential hemopoietic growth factor in vivo and in vitro. Contrib. Nephrol. 87: 1-10 (1990); Gregory CJ Erythropoietin sensitivity as a differentiation marker in the hemopoietic system. Studies of three erythropoietic colony responses in culture. Journal of Cellular Physiology 89: 289-301 (1976); Jelkman W et al Monokines inhibiting erythropoietin production in human hepatoma cultures and in isolated perfused rat kidneys. Life Sci. 50 :301-8 (1992); Kimata Η et al 89481 28 Human recombinant erythropoietin directly stimulates В cell immunoglobulin production and proliferation in serum-free medium. Clinical and Experimental Immunology 85: 151-6 (1991); Kimata Η et al Erythropoietin enhances immunoglobulin production and proliferation by human plasma cells in a serumfree medium. Clin. Immunology Immunopathol. 59: 495-501 (1991); Kimata Η et al Effect of recombinant human erythropoietin on human IgE production in vitro Clinical and Experimental Immunology 83: 483-7 (1991); Коurу MJ and Bondurant MC Erythropoietin retards DNA breakdown and prevents programmed cell death in erythroid progenitor cells. Science 248: 378-81 (1990); Lim VS et al Effect of recombinant human erythropoietin on renal function in humans. Kidney International 37: 131-6 (1990); Mitjavila MT et al Autocrine stimulation by erythropoietin and autonomous growth of human erythroid leukemic cells in vitro. Journal of Clinical Investigation 88: 789-97 29 (1991); Andre Μ et al Performance of an immunoradiometric assay of erythropoietin and results for specimens from anemic and polycythemic patients. Clinical Chemistry 38: 758-63 (1992); Hankins WD et al Erythropoietin-dependent and erythropoietin-producing cell lines. Implications for research and for leukemia therapy. Annals of the New York Academy of Science 554: 21-8 (1989); Kendall RGT et al Storage and preparation pf samples for erythropoietin radioimmunoassay. Clin. Lab. Haematology 13: 189-96 (1991); Krumvieh D et al Comparison of relevant biological assays for the determination of biological active erythropoietin. Dev. Biol. Stand. 69: 15-22 (1988); Ma DD et al Assessment of an EIA for measuring human serum erythropoietin as compared with RIA and an in-vitro bioassay, British Journal of Haematology 80: 431-6 (1992); Noe G et al A sensitive sandwich ELISA for measuring erythropoietin in human serum British Journal of Haematology 80: 285-92 (1992); Pauly JU et al Highly specific and higly sensitive enzyme immunoassays for antibodies to human interleukin 3 (IL3) and human erythropoietin (ЕРО) in serum. Behring Institut Mitteilungen 90: 112-25 (1991); Sakata S and Enoki Υ Improved microbioassay for plasma eryihropoietin based on CFU-E colony formation. Ann. Hematology 64: 224-30 (1992); Sanengen Τ et al Immunoreactive erythropoietin and erythropoiesis stimulating factor(s) in plasma from hypertransfused nejnatal and adult mice. Studies with a radioimmunoassay and a cell culture assay for erythropoietin. Acta Physiol. Scand. 135: 11-6 (1989); Widness JA et al A sensitive and specific erythropoietin immunoprecipitation assay: application to pharmacokinetic studies. Journal of Lab. СІ; для одержання додаткової інформації дивись також окремі клітинні лінії, що застосовуються в індивідуальних біопробах. На всі перелічені вище роботи у даній заявці зроблені повні посилання. ΕΠΟ може бути проаналізований з використанням клітинних ліній, таких як HCD57, NFS-60, TF-1 та UT7, що реагують на даний фактор. Активність ΕΠΟ може оцінюватись також у пробі на утворення колоній шляхом визначення числа CFU-E із клітин кісткового мозку. Альтернативним та цілком відмінним методом визначення є RT-PCR кількісне визначення цитокінів. ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або його визначена частина або варіант, що частково або, краще, у значній мірі запроваджує принаймні одну біологічну активність принаймні одного білка або фрагмента, може зв'язувати білковий або фрагментний ліганд і у такий спосіб запроваджувати принаймні одну активність, що в іншому разі опосередковується шляхом зв'язування білка з принаймні одним білковим лігандом або рецептором, або через інші, залежні від білка чи опосередковані механізми. Як застосовується у даному тексті, термін "активність ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла" стосується ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла, що може модулювати або забезпечувати принаймні одну білково-залежну активність наприблизно 20-10000%, краще, принаймні приблизно 60, 70, 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 89481 30 100,110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000% або більше, у залежності від проби. Здатність ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанта запроваджувати принаймні одну білково-залежну активність оцінюється, краще, за допомогою принаймні однієї придатної білкової біологічної проби, як описано у даному тексті або відомо у даній галузі. ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло людини або визначена частина, або варіант даного винаходу можуть бути подібними до будь-якого класу (IgG, IgA, IgM і т.д.) або ізотипу, і можуть включати принаймні частину каппа або ламбда легкого ланцюга. В одному варіанті ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло людини або визначена частина, або варіант включають варіабельний фрагмент IgG важкого ланцюга, шарнірну ділянку, СН2 та CH3, наприклад, принаймні один із ізотипів, IgG1, IgG2, IgG3 або IgG4. Принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло людини або визначена частина, або варіант даного винаходу зв'язує принаймні один визначений ліганд, специфічний до принаймні одного білка, субодиниці, фрагмента, частини або будь-якої їх комбінації. Принаймні один ΕΠΟ міметичний пептид принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла, визначеної частини, або варіанту даного винаходу може, при потребі, зв'язувати принаймні один визначений лігандний епітоп даного ліганда. Зв'язування епітопу може включати будь-яку комбінацію принаймні однієї амінокислотної послідовності із принаймні 1-3 амінокислот зі всією визначеною частиною суміжних амінокислотних послідовностей, що вибираються із групи, яка складається із білкового ліганда, такого як ΕΠΟ рецептор або його частина. Такі міметитіла можуть бути одержані шляхом з'єднання різних частин Формули (І) ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла з використанням відомих способів, шляхом одержання та експресії принаймні однієї (тобто однієї або кількох) молекули нуклеїнової кислоти, що кодує дане ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, з використанням відомих методів рекомбінантної ДНК технології або з використанням будь-якого іншого придатного способу, такого як хімічний синтез. Міметитіла, що зв'язуються з людськими ΕΠΟ лігандами або рецепторами і що включають принаймні одну частину, котра визначає варіабельну ділянку важкого або легкого ланцюга, можуть бути одержані з використанням придатних способів, таких як вияв фага (Katsude, Y., et al., Int J Mol. Med, l(5):863-868 (1998)), або способів з використанням трансгенних тварин, як відомо у даній галузі та/або описано у даній заявці. ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, визначена частина або варіант можуть .бути експресовані з використанням кодуючої нуклеїнової кислоти або її частини у придатній клітині-хазяїні. 31 89481 Краще, коли такі міметитіла або їх фрагменти, що зв'язують ліганд, можуть зв'язувати людські ΕΠΟ ліганди або рецептори з високою спорідненістю (наприклад, KD менше або дорівнює приблизно 10-7Μ). Амінокислотні послідовності, котрі є суттєво такими самими, як послідовності, що описані у даному тексті, містять послідовності, які включають консервативні амінокислотні заміщення, так само як і амінокислотні делеції та/або інсерції. Консервативні амінокислотні заміщення стосуються, заміни першої амінокислоти на другу амінокислоту, що має хімічні та/або фізичні властивості (наприклад, заряд, структуру, полярність, гідрофобність/гідрофільність), котрі подібні до властивостей першої амінокислоти. Консервативні заміщення включають заміну однієї амінокислоти на другу у межах наступних груп: лізин (К), аргінін (R) та 32 гістидин (Н); аспартат (D) та глутамат (Е); аспарагін (N), глутамін (Q), серин (S), треонін (Т), тирозин (Y), K, R, Н, D та Е; аланін (А), валін (V), лейцин (L), ізолейцин (І), пролін (Р), фенілаланін (F), триптофан (W), метіонін (М), цистеїн (С) та гліцин (G); F, W та Y; C, S та T. Амінокислотні коди Амінокислоти, що складають міметитіла або визначені частини, або варіанти даного винаходу, часто скорочують. Найменування амінокислот можуть зазначатись шляхом позначення даної амінокислоти її однолітерним кодом, її тридітерним кодом, назвою або тринуклеотидним кодоном(ми), як добре відомо у даній галузі (див. Alberts, В., et al., Molecular Biology of The Cell, Third ed., Garland Publishing, Inc., New York, 1994), як подано у Таблиці. Таблиця 2 Одно літерний код Трилітерний код А Ala С Cys D Asp Ε Glu F Phe G Gly Η His I IIe K Lys L Leu Μ Met Ν Asn Ρ Pro Q Gin R Arg S Ser Τ Thr V Val W Trp Υ Tyr Назва Аланін Цистеїн Аспартамова кислота Глутамінова кислота Фенілаланін Гліцин Гістидин Ізолейцин Лізин Лейцин Метіонін Аспарагін Пролін Глутамін Аргінін Серин Треонін Валін Триптофан Тирозин ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант даного винаходу можуть включати одне або кілька амінокислотних заміщень, делецій або добавок, як із природних мутацій, так і маніпуляцій людини, як Тринуклеотидний кодон(и) GCA, GCC, GCG, GCU UGC, UGU GAC, GAU GAA, GAG UUC, UUU GGA, GGC, GGG, GGU САС, CAU AUA, AUC, AUU AAA, AAG UUA, UUG, CUA, CUC, CUG, CUU AUG AAC, AAU CCA, CCC, CCG, CCU CAA, CAG AGA, ASS, CGA, CGC, CGG, CGU AGC, AGU, UCA, UCC, UCG, UCU АСА, ACC, ACG, ACU GUA, GUC, GUG, GUU UGG UAC, UAU тут визначено. Такі або інші послідовності, котрі можуть бути використані у даному винаході, включають, проте не обмежуючись цим, наступні послідовності, що подані у Таблиці 3, як далі описано на Фігурах 1-42, з відповідними SEQ ID NOS 31-72. 33 Певна річ, кількість амінокислотних заміщень, які може зробити фахівець у даній галузі, залежить від багатьох чинників, включаючи ті, що описані вище. Загалом, кількість амінокислотних заміщень, інсерцій або делецій для принаймні одного із ΕΠΟ міметичних шарнірно-серцевинних міметитіл не буде перевищувати 40, 30, 20, 19, 18, 17, 16,15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 амінокислот, таких як 1-30, або будь-яку область чи значення у цій області, як визначено у даному тексті. 89481 34 Наступний опис компонентів ΕΠΟ шарнірносерцевинного міметитіла даного винаходу базується на використанні формули І даного винаходу, ((V(m)-P(n)-L(o)-H(p)-CH2(q)-CH3(r))(s), де V являє собою принаймні одну частину Nкінця імуноглобулінової варіабельної ділянки, Ρ є принаймні одним біоактивним пептидом, L є принаймні одним лінкерним поліпептидом, Η являє собою принаймні одну частину принаймні однієї 35 імуноглобулінової шарнірної ділянки, СН2 є принаймні частиною імуноглобулінової СН2 константної ділянки, CH3 є принаймні частиною імуноглобулінової CH3 константної ділянки, m, n, о, р, q, r та s є, незалежно, цілими числами у межах 0, 1 або 2 та 10, імітуючи різні типи молекул імуноглобуліну, наприклад, але не обмежуючись цим, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgD, IgE, і таке подібне, або будь-яий їх субклас, або будь-яку їх комбінацію. У шарнірно-серцевинних міметитілах даного винаходу додаткова N-кінцева V ділянка може включати 1-20 амінокислот принаймні однієї важколанцюгової варіабельної остовної 1 (FR1) ділянки, наприклад, як подано на Фігурах 1-9 (SEQ ID NOS:31-39), або принаймні однієї LC варіабельної ділянки, наприклад, як подано на Фігурах 10-31 (SEQ ID NOS:40-61), включаючи заміщення, делеції або інерції, як подано на цих Фігурах, де перевага віддається поданим на Фігурах 5, 6 та 8. Крім того, перевага віддається варіабельним послідовностям, що включають послідовність Q-X-Q. Ρ частина може містити принаймні один будьякий терапевтичний пептид, як відомо у даній галузі або як описано у даному тексті, такий як, але не обмежуючись тими, що подані у Таблиці 1, SEQ ID NOS:1-30, або як відомо у даній галузі, або будь-яку їх комбінацію, або їх консенсусну послідовність, або будь-який їх злитий білок. Додатковою лінкерною послідовністю може бути будь-який, придатний пептидний лінкер, як відомо у даній галузі. Послідовність, якій віддається перевага, включає будь-яку комбінацію G та S, наприклад, Х1-Х2-Х3-Х4-Хn, де X може бути G або S, і n може дорівнювати 5-30. Приклади, що не вносять будь-яких обмежень, включають GS, GGGS, GSGGGS, GSGGGSGG і таке подібне. У даному винаході СН1 частина не використана, і змінна кількість амінокислот із N-кінця шарнірної ділянки вилучена, наприклад, як подано на Фігурах 1-42 та у Таблиці 3. Змінна кількість амінокислот, використаних для шарнірно-серцевинної ділянки міметитіла даного винаходу, включає, проте не обмежуючись цим, делецію будь-яких із 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46,47,48,49, 50, 51, 52, 53. 54, 55, 56, 57, або 1-3, 2-5,2-7,2-8, 3-9, 4-10, 5-9, 5-10, 5-15, 10-20, 2-30, 20-40, 10-50, або будь-яку область, або значення із цієї області, N-кінцевих амінокислот принаймні однієї шарнірної ділянки, наприклад, як подано на Фігурах 32-40, або у Таблиці 3 вище, наприклад, але не обмежуючись цим, делецію будь-якої і до усіх амінокислот від 99-101 до 105-107, амінокислот 99-105, 99-108, 99-111, 99-112, 99-113, 99-114, 99-115, 99-119, 99-125, 99-128, 99-134, 99-140, 99143, 99-149, 99-155 та 99-158 Фігур 32-40, що відповідають SEQ ID NOS:62-70, включаючи заміщення, інерції або делеції, що описані на Фігурах 32-40. У варіантах, яким віддається перевага, шарнірно-серцевинні ділянки даного винаходу включають делецію N-кінця даної шарнірної ділянки для запровадження шарнірно-серцевинної ділянки, що включає делецію до, але не включаючи Cys 89481 36 залишок, або до, але не включаючи послідовність Cys-Pro-Xaa-Cys. Ще в одному варіанті, якому віддається перевага, такі шарнірно-серцевинні послідовності, що використані у шарнірносерцевинному міметитілі даного винаходу, включають амінокислоти 109-113 або 112-113 Фіг.36 (SEQ ID NO:66) (lgG1); 105-110 або 109-110 Фіг.37 (SEQ ID NO:67) (IgG2); 111-160, 114-160, 120-160, 126-160, 129-160, 135-160, 141-160, 144-160, 150160, 156-160 та 159-160 Фіг.38 (SEQ ID NO:68 (IgG3); або 109-110 Фіг.39 (SEQ ID NO:69) (IgG4). СН2, CH3 та додаткова СН4 послідовність може бути будь-якою придатною людською послідовністю або послідовністю, що сумісна з людською, наприклад, як подано на Фігурах 1-42 та у Таблиці 3, або як відомо у даній галузі, або будь-якою їх комбінацією, або консенсусною послідовністю, або будь-яким їх злитим білком. Амінокислоти у ΕΠΟ міметичному шарнірносерцевинному міметитілі або визначеній частині, або варіанті даного винаходу, котрі важливі для функціонування, можуть бути ідентифіковані з використанням методів, відомих у даній галузі, таких як сайт-спрямований мутагенез або аланінскануючий мутагенез (наприклад, Ausubel, supra, глави 8, 15; Cunningham and Wells, Science 244:1081-1085 (1989)). В останньому методі у кожний залишок даної молекули вводяться окремі аланінові мутації. Результуючі молекули мутанта потім випробують на біологічну активність, таку як, проте не обмежуючись цим, принаймні одна зв'язана з білком активність, як визначено у даному тексті або як відомо у даній галузі. Сайта, що є критичними для зв'язування ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, можуть також ідентифікуватись методами структурного аналізу, такими як кристалізація, ЯМР або фотоафінне мічення (Smith, et al., J. Mol. Biol. 224:899-904 (1992) and Vos, et al., Science 225:306-312 (1992)). Міметитіла або визначені частини, або варіанти даного винаходу можуть включати як Ρ частину Формули (І), проте не обмежуючись цим, принаймні одну частину, послідовність або комбінацію, що вибирається із 3 до всіх із принаймні однієї SEQ ID NOS:1-30. Варіанти, що не вносять будь-яких обмежень, котрі можуть підсилити або підтримати принаймні одну із перелічених вище активностей, включають, проте не обмежуючись цим, будь-який із зазначених вище поліпептидів, включають додатково принаймні одну мутацію, яка відповідає принаймні одному заміщенню, інсерції або делеції, котрі не вплинуть у значній мірі на придатні біологічні активності або функції зазначеного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла. ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант можуть також, при потребі, включати принаймні одну функціональну частину принаймні одного поліпептиду як Ρ частину Формули (І), принаймні одну із 90100% SEQ ID NOD: 1-30. ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло може також, при потребі, включати амінокислотну послідовність для Ρ частини Формули (І), вибрану із однієї або кількох SEQ ID NOS:1-30. 37 В одному варіанті Ρ амінокислотна послідовність або її частина має приблизно 90-100% ідентичність (тобто 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 або будь-який діапазон чи значення у цій області) з відповідною амінокислотною послідовністю відповідної частини принаймні однієї SEQ ID NOS:1-30. Краще, 90-100% амінокислотна ідентичність (тобто 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 або будь-який діапазон чи значення у цій області) визначається з використанням придатного комп'ютерного алгоритму, як відомо у цій галузі. Міметитіла або визначені частини, або варіанти даного винаходу можуть включати будь-яке число суміжних амінокислотних залишків від ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту даного винаходу, де це число вибирається із групи цілих чисел, які складаються із 10-100% числа суміжних залишків в ΕΠΟ міметичному шарнірносерцевинному міметитілі. При потребі, ця підпослідовність суміжних амінокислот є, принаймні приблизно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250 або більше амінокислот завдовжки, або будь-який діапазон чи значення у цій області. Крім того, число таких підпослідовностей може бути будь-яким цілим числом, що вибирається із групи, яка складається із від 1 до 20, такого як принаймні 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 або більше. Як зрозуміло фахівцям у даній галузі, даний винахід включає принаймні одне біологічно активне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант даного винаходу. Біологічно активні міметитіла або визначені частини, або варіанти мають специфічну активність принаймні 20%, 30% або 40%, і, краще, принаймні 50%, 60% або 70%, і, найкраще, принаймні 80%, 90% або 95%-1000% від активності природного (несинтетичного), ендогенного або спорідненого та відомого включеного або злитого білка, або визначеної частини, або варіанту. Фахівцям у даній галузі добре відомі методи якісного та кількісного аналізів ферментативної активності та специфічності субстрату. В іншому аспекті, даний винахід стосується міметитіл людини та зв'язуючих ліганд фрагментів, як тут описано, котрі модифіковані шляхом ковалентного приєднання органічної складової. Така модифікація може продукувати ΕΠΟ міметичне шарнірно-сеацевинне міметитіло або зв'язуючий ліганд фрагмент з поліпшеними фармакологічними властивостями (наприклад, підвищений in vitro період піврозпаду у сироватці). Зазначена органічна складова може являти собою лінійну або розгалужену гідрофільну полімерну групу, жирнокислотну групу або жирнокислотну ефірну групу. В окремих варіантах дана гідрофільна полімерна група може мати молекулярну вагу від приблизно 800 до приблизно 120000 Дальтонів, і може бути поліалкангліколем (наприклад, поліетиленгліколь (PEG), поліпропіленгліколь (PPG)), вуглеводневим полімером, амінокислотним полімером або поліві 89481 38 нілпіролідоном, і зазначена жирнокислотна або жирнокислотна ефірна група може включати від приблизно восьми до приблизно сорока вуглецевих атомів. Модифіковані міметитіла та зв'язуючий ліганд фрагменти даного винаходу можуть включати одну або кілька органічних складових, що ковалентно зв'язані, прямо або посередньо, з ΕΠΟ міметичним шарнірно-серцевинним міметитілом або визначеною частиною, або варіантом. Кожна органічна складова, що зв'язана з ΕΠΟ міметичним шарнірно-серцевинним міметитілом або зв'язуючим ліганд фрагментом даного винаходу, може, незалежно, являти собою гідрофільну полімерну групу, жирнокислотну групу або жирнокислотну ефірну групу. Як застосовується у даному тексті, термін "жирна кислота" охоплює монокарбонові кислоти та дикарбонові кислоти. "Гідрофільна полімерна група", що як термін застосовується тут, стосується органічного полімеру, який більш розчинний у воді, аніж в октані. Наприклад, полілізин більш розчинний у воді, аніж в октані. Таким чином, ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло, модифіковане шляхом., ковалентного приєднання полілізину, охоплюється даним винаходом. Гідрофільні полімери, що придатні для модифікації міметитіл даного винаходу, можуть бути лінійними або розгалуженими і включають, наприклад, поліалкангліколі (наприклад, PEG, монометоксйполіетиленгліколь (mPEG), PPG і таке подібне, вуглеводні (наприклад, декстрин, целюлоза, олігосахариди, полісахариди і таке подібне), полімери гідрофільних амінокислот (наприклад, полілізин, поліаргінин, поліаспартат і таке подібне), поліалканоксиди (наприклад, поліетиленоксид, поліпропіленоксид і таке подібне) та полівінілпіролідон. Краще, коли гідрофільний полімер, котрий модифікує ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло даного винаходу, має молекулярну вагу від приблизно 800 до приблизно 150000 Дальтонів, як окремий молекулярний об'єкт. Наприклад, PEG2500, PEGsooo, PEG7500, PEG9000, PEGioooo, PEG12500, PEG15000, PEG20000, де субіндекс відповідає середній молекулярній вазі даного полімеру у Дальтонах. Дана гідрофільна полімерна група може бути заміщена однією - приблизно шістьома алкільними, жирнокислотними або жирнокислотними ефірними групами. Гідрофільні полімери, що заміщені жирнокислотною або жирнокислотною ефірною групою, можуть бути одержані за допомогою придатних методів. Наприклад, полімер, що містить аміногрупу, може бути сполучений з карбоксилатом жирної кислоти або жирнокислотним ефіром, і активований карбоксилат (наприклад, активований Ν,Ν-карбонілдіімідазолом) на жирній кислоті або жирнокислотному ефірі може бути сполучений з гідроксильною групою на полімері. Жирні кислоти та жирнокислотні ефіри, що,,придатні для модифікації міметитіл даного винаходу, можуть бути насиченими або можуть містити одну або більше ненасичених одиниць. Жирні кислоти, що придатні для модифікування міметитіл даного винаходу, включають, наприклад, n-додеканоат (С12, лаурат), n-тетрадеканоат (С14, 39 мирістат), n-октадеканоат (С18, стеарат), nейкозаноат (С20, арахідат), n-докозаноат (С22, бегенат), n-триаконтаноат (С30), n-тетраконтаноат (С40), цис-D9-октадеканоат (С18, олеат), усі цисD5,8,11,14-ейкозатетраеноати (С20, арахідонат), октандикислота, тетрадекандикислота, октадекандикислота, докозандикислота і таке подібне. Придатні жирнокислотні ефіри включають моноефіри дикарбонових кислот, що містять пряму або розгалужену нижчу алкільну групу. Зазначена нижча алкільна група може містити від одного до приблизно дванадцяти, краще, від одного до приблизно шести вуглецевих атомів. Модифіковані людські міметитїла та зв'язуючі ліганд фрагменти можуть бути одержані з використанням придатних методів, таких як за реакцією з одним або кількома модифікуючими агентами. "Модифікуючий агент", як термін, що тут використовується, стосується придатної органічної групи (наприклад, гідрофільний полімер, жирна кислота, ефір жирної кислоти), що містить активаційну групу. "Активаційна група" являє собою хімічну складову або функціональну групу, що здатна, за відповідних умов, реагувати з другою хімічною групою, утворюючи у такий спосіб ковалентний зв'язок між, модифікуючим агентом та другою хімічною групою. Наприклад, аміно-реакційні активаційні групи включають електрофільні групи, такі як тозилат, мезилат, гало (хлоро, бромо, фторо, йодо), N-гідроксисукциніміділові ефіри (NHS), і таке подібне. Активаційні групи, що можуть реагувати з тіолами, включають, наприклад, малеімід, йодоацетил, акрилоліл, піридил дисульфіди, 5-тіол-2нітробензойну кислоту, тіол (TNB-тіол), і таке подібне. Альдегідна функціональна група може бути сполучена з молекулами, що містять амін або гідразин, і азидна група може реагувати з тривалентною фосфорною групою з утворенням фосфорамідату або фосфорімідних зв'язків. Придатні методи для введення активаційних груп у молекули відомі у даній галузі (дивись, наприклад, Hermanson, G.T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996)). Активаційна група може бути безпосередньо зв'язана з даною органічною групою (наприклад, гідрофільним полімером, жирною кислотою, ефіром жирної кислоти), або через лінкерну складову, наприклад, дивалентну С1-С12 групу, де один або кілька вуглецевих атомів можуть бути замінені на гетероатом, такий як кисень, азот або сірка. Придатні лінкерні складові включають, наприклад, тетраетиленгліколь, -(СН2)3-, -NH-(CH2)6-NH-, -(CH2)2NH- та -СН2-О-СН2-СН2-О-CH2-CH2-O-CH-NH-. Модифікуючи агенти, що містять лінкерну складову, можуть бути одержані, наприклад, за реакцією моно-Вос-алкілдіаміну (наприклад, моно-Восетилендіамін, моно-Вос-діаміногексан) з жирною кислотою у присутності 1-етил-3-(3диметиламінопропіл) карбодііміду (EDC) з утворенням амідного зв'язку між даним вільним аміном та карбоксилатом жирної кислоти. Вос-захисна група може бути вилучена із даного продукту шляхом обробки трифторооцтовою кислотою (TFA) з оголенням первинного аміну, котрий може бути сполучений з іншим карбоксилатом, як описано, 89481 40 або може реагувати з малеїновим ангідридом, і результуючий продукт піддається циклізації з одержанням активованої малеімідо похідної жирної кислоти. (Див., наприклад, Thompson, et al., WO 92/16221, на яку у даному тексті зроблено повне посилання). Модифіковані міметитіла даного винаходу можуть бути одержані шляхом реакції людського ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або зв'язуючого ліганд фрагмента з модифікуючим агентом. Наприклад, органічні складові можуть бути зв'язані з даним ΕΠΟ міметичним шарнірно-серцевинним міметитілом у специфічний "несайтовий" спосіб шляхом застосування амінореакційного модифікуючого агента, наприклад, NHS ефіру PEG. Модифіковані людські міметитіла або зв'язуючи ліганд фрагменти можуть також одержуватися шляхом відновлення дисульфідних зв'язків (наприклад, внутрішньоланцюгових дисульфідних зв'язків) ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або зв'язуючого ліганд фрагмента. Потім відновлені ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або зв'язуючий ліганд фрагмент можуть бути піддані реакції з тіолреакційним модифікуючим агентом з одержанням модифікованого ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла даного винаходу. Модифіковані людські міметитіла та зв'язуючі ліганд фрагменти, що містять органічну складову, котра зв'язана зі специфічними сайтами ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту даного винаходу, можуть бути одержані з використанням придатних методів, таких як обернений протеоліз (Fisch et al., Bioconjugate Chem., 3:147-153 (1992); Werlen et al., Bioconjugate Chem., 5:411-417 (1994); Kumaran et al., Protein Sci. 6(10):2233-2241 (1997); Itoh et al., Bioorg. Chem., 24(l):59-68 (1996); Capellas et al., Biochem. Bioeng., 56(4):456-463 (1997)), і методи описані у роботі Hermanson, G.T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996). Композиції із ΕΠΟ міметичних шарнірносерцевинних міметитіл Даний винахід також запроваджує принаймні одну композицію із ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, що включає принаймні одне, принаймні два, принаймні три, принаймні чотири, принаймні п'ять, принаймні шість або більше міметитіл, або їх визначених частин, або варіантів, як описано у даній заявці та/або відомо у даній галузі, котрі складаються у композицію, суміш, форму, які не зустрічається у природі. Склад таких композицій, як рідкий або твердий розчини, суміші, суспензії, емульсієї або колоїди, може подаватись у вагових відсотках, об'ємних, у вигляді концентрації, молярності, моляльності, як відомо у даній галузі або як описано у даному тексті. Такі композиції можуть містити 0,0000199,9999 відсотків за вагою, об'ємом, у вигляді концентрації, молярності, моляльності, як рідкий, газовий або твердий розчини, суміші, суспензії, емульсії або колоїди, як відомо у даній галузі або як описано у даному тексті, будь-який діапазон або значення із вказаної області, таке як, проте не об 41 межуючись цим, 0,00001, 0,00003, 0,00005, 0,00009, 0,0001, 0,0003, 0,0005, 0,0009, 0,001, 0,003, 0,005, 0,009, 0,01, 0,02, 0,03, 0,05, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4,0, 4,3, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4, 99,5, 99,6, 99,7, 99,8, 99,9%. Такі композиції даного винаходу, таким чином, містять, проте не обмежуючись цим, 0,00001100мг/мл та/або 0,00001-100мг/г. Дана композиція може, при потребі, додатково включати ефективну кількість принаймні однієї сполуки або білка, що вибираються із принаймні одних ліків із протиінфекційних ліків, серцевосудинних системних ліків (CV), ліків центральної нервової системи (CNS), ліків вегетативної нервової системи (ANS), ліків респіраторного тракту, ліків шлунково-кишкового тракту (GI), гормональних ліків, ліків для регулювання рідинного або електролітичного балансу, гематологічних ліків, протипухлинних ліків, імуномодуляторних ліків, офтальмологічних, вушних або назальних ліків, ліків локального призначення, ліків, пов'язаних з харчуванням, або такого подібного. Такі ліки добре відомі у даній галузі, включаючи препарати, показання, дозування та застосування для кожних із поданих тут ліків (див., наприклад, Nursing 2001 Handbook of Drugs, 21th edition, Springhouse Corp., Springhouse, PA, 2001; Health Professional's Drug Guide 2001, ed., Shannon, Wilson, Stang, PrenticeHall, Inc., Upper Saddle River, NJ; Pharmacotherapy Handbook, Wells et al, ed., Appleton & Lange, Stamford, CT, на кожну із яких у даній заявці зроблені посилання). Протиінфекційні ліки можуть бути принаймні одними ліками, що вибираються із амебіцидів або принаймні із антипротозойних ліків, протигельмінтних, протигрибкових, протималярійних, протитуберкульозних або принаймні із антилепротиків, аміноглікозидів, пеніцилінів, цефалоспоринів, тетрациклінів, сульфонамідів, флуорохінолонів, противірусних ліків, макролідних протиінфекційних ліків, змішаних протиінфекційних ліків. CV ліками можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із інотропіків, протиаритмічних ліків, антиангезіальних, гіпотензивних, протиліпемічних, змішаних серцево-судинних ліків. CNS ліками можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із ненаркотичних анальгетиків або принаймні із антипіретиків, нестероїдних протизапальних ліків, наркотичних або принаймні одних із опіоїдних анальгетиків, седативно-гіпнотичних, протисудомних, антидепресантів, ліків проти неспокою, антипсихотичних ліків, стимуляторів центральної нервової системи, ліків проти паркінсонізму, змішаних ліків центральної нервової системи. ANS ліками можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із холінергетиків (парасимпатоміметиків), антихолінергетиків, адренергетиків (симпатоміметиків, адренергічних блокаторів (симпатолітиків), релаксантів скелетної мускулатури, нервово-м'язових блокаторів. Ліками 89481 42 респіраторного тракту можуть бути принаймні одні ліки, що вибираються із антигістамінних ліків, бронхолітичних ліків, відхаркувальних ліків, або принаймні одних ліків із протикашльових ліків, змішаних респіраторних ліків. Ліками GI тракту можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із антацидів або принаймні із адсорбентів, або принаймні із ліків проти метеоризму, травних ферментів, або принаймні солюбілізаторів жовчних каменів, ліків проти діареї, проносних засобів, протиблювотних ліків, противиразкових ліків. Гормональними ліками можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із кортикостероїдів, андрогенів або принаймні одного із анаболічних стероїдів, естрогенів або принаймні одного із прогестинів, гонадотропінів, антидіабетичних ліків, або принаймні одного із глюкагонів, тиреоїдних гормонів, антагоністів тиреоїдних гормонів, пітуїтарних гормонів, паратиреоїдо-подібних ліків. Ліками для регулювання рідинного та електролітичного балансу можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із діуретиків, електролітів, або принаймні одного із розчинів заміщення, підкислювачів або підлуговувачів. Гематологічними ліками можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із ліків, які підвищують рівень гемоглобіну, антикоагулянтів, кров'яних дериватів, тромболітичних ферментів. Протипухлинними ліками можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із алкілуючих ліків, антиметаболітів, протипухлинних антибіотиків, протипухлинних засобів, що змінюють баланс гормонів, змішаних протипухлинних ліків. Імуномодуляторними ліками можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із імунодепресантів, вакцин або принаймні одного, із токсоїдів, антитоксинів, або принаймні одного із протиотрутних засобів, імунних сироваток, модифікаторів біологічної реакції. Офтальмологічними, вушними та назальними ліками можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із офтальмологічних протиінфекційних ліків, офтальмологічних протизапальних засобів, міотичних засобів, мідриатичних засобів, офтальмологічних вазоконстрикторів, змішаних офтальмологічних препаратів, вушних, назальних ліків. Ліками локального призначення можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із місцевих протиінфекційних засобів, скабіцидів або принаймні одних ліків від педикульозу, кортикостеолїдів місцевого призначення. Ліками, пов'язаними з харчуванням, можуть бути принаймні ті ліки, що вибираються із вітамінів, мінералів або калорійних препаратів. Дивись, наприклад, зміст роботи Nursing 2001 Drug Handbook, supra. Принаймні один амебіцид або одні антипротозойні ліки можуть вибиратись із атовакону, хлорокіну гідрохлориду, хлорокіну фосфату, метронідазолу, метронідазолу гідрохлориду, пентамідин ізетіонату. Принаймні одні протигельмінтні ліки можуть вибиратись із мебендазолу, пірантел памоату, тіабендазолу. Принаймні одні протигрибкові ліки можуть вибиратись із амфотерицин В холестерин сульфатного комплексу, амфотерицин В ліпідного комплексу, амфотерицин В ліпосомалу, флуконазолу, флукітозину, грізеофулвіну мікрокристалічного, грізеофулвіну ультрамікрокристалі 43 чного, ітраконазолу, кетоконазолу, ністатину, тербінафіну гідрохлориду. Принаймні одні протималярійні ліки можуть вибиратись із хлорокіну гідрохлориду, хлорокіну фосфату, доксицикліну, гідроксихлорокіну сульфату, мефлокіну гідрохлориду, примакіну фосфату, ігіриметаміну з сульфадоксином. Принаймні одні протитуберкульозні ліки або антилепротики можуть вибиратись із клофазиміну, циклосерину, дапсону, етамобутолу гідрохлориду, ізоніазиду, піразинаміду, рифабутину, рифампіну, рифапентину, стрептоміцину сульфату. Принаймні один аміноглікозид може вибиратись із амікацину сульфату, гентаміцину сульфату, неоміцину сульфату, стрептоміцину сульфату, тобраміцину сульфату. Принаймні один пеніцилін може вибиратись із амоксициліну/клавуланату калію, амоксициліну тригідрату, ампіциліну, ампіциліну натрію, ампіциліну тригідрату, ампіциліну натрію/сулбактаму натрію, клоксациліну натрію, диклоксациліну натрію, мезлоциліну натрію, нафциліну натрію, оксациліну натрію, пеніцилін G бензатину, пеніцилін G калію, пеніцилін G прокаїну, пеніцилін G натрію, пеніцилін V калію, піперациліну натрію, піперациліну натрію/тазобактаму натрію, тикарциліну динатрію, тикарциліну динатрію/клавуланату калію. Принаймні один цефалоспорин може вибиратись із принаймні одних ліків із цефаклору, цефадроксилу, цефазоліну натрію, цефдініру, цефепиму гідрохлориду, цефіксиму, цефметазолу натрію, цефоніциду натрію, цефоперазону натрію, цефотаксиму натрію, цефотетану динатрію, цефокситину натрію, цефподоксиму проксетилу, цефпрозилу, цефтазидиму, цефтибутену, цефтизоксиму натрію, цефтриаксону натрію, цефуроксиму аксетилу, цефуроксиму натрію, цефалексину гідрохлориду, цефалексину моногідрату, цефрадину, лоракарбефу. Принаймні один тетрациклін може вибиратись із демеклоцикліну гідрохлориду, доксицикліну кальцію, доксицикліну хіклату, доксициліну гідрохлориду, доксициліну моногідрату, міноцикліну гідрохлориду, тетрацикліну гідрохлориду. Принаймні один сульфонамід може вибиратись із ко-тримоксазолу, сульфадіазину, сульфаметоксазолу, сульфізоксазолу, сульфізоксазолу ацетилу. Принаймні один флуорохінолон може вибиратись із алатрофлоксацину мезилату, ципрофлоксацину, еноксацину, левофлоксацину, ломефлоксацину гідрохлориду, налідиксової кислоти, норфлоксацину, офлоксацину, спарфлоксацину, тровафлоксацину мезилату. Принаймні одні антивірусні ліки можуть вибиратись із абакавіру сульфату, ацикловіру натрію, амантадину гідрохлориду, ампренавіру, цидофовіру, делавірдину мезилату, диданозину, ефавірензу, фамцикловіру, фомівірсену натрію, фоскарнету натрію, гансикловіру, індинавіру сульфату, ламівудину, ламівудину/зидовудину, нелфінавіру мезилату, невірапіну, озелтамівіру фосфату, рибавірину, римантадину гідрохлориду, ритонавіру, сакинавіру, сакинавіру мезилату, ставудину, валацикловіру гідрохлориду, залцитабіну, занамівіру, зидовудіну. Принаймні одні макролідні протиінфекційні ліки можуть вибиратись із азитроміцину, кларитроміцину, диритроміцину, еритроміцину основи, еритроміцину естолату, еритроміцину ети 89481 44 лсукцинату, еритроміцину лактобіонату, еритроміцину стеарату. Принаймні одні змішані протиінфекційні ліки можуть вибиратись із азтреонаму, бацитрацину, хлорамфенікол натрій сукцинату, кліндаміцину гідрохлориду, кліндаміцину пальмітату гідрохлориду, кліндаміцину фосфату, іміпенему та циластатину фосфату, мЕПОпенему, нітрофурантоїну макрокристалів, нітрофурантоїну мікрокристалів, хінупристин/далфопристину, спектиноміцину гідрохлориду, триметоприму, ванкоміцину гідрохлориду (Див., наприклад, с.с. 24-214 роботи Nursing 2001 Drag Handbook). Принаймні одні інотропні ліки можуть вибиратись із амринону лактату, дигоксину, мілринону лактату. Принаймні одні протиаритмічні ліки можуть вибиратись із аденозину, аміодарону гідрохлориду, атропіну сульфату, бретиліуму тозилату, дилтіазему гідрохлориду, дизопіраміду, дизопіраміду фосфату, есмололу гідрохлориду, флекайніду ацетату, ібутиліду фумарату, лідокаїну гідрохлориду, мексилетину гідрохлориду, моріцизину гідрохлориду, фенітоїну, фенітоїну натрію, прокаїнаміду гідрохлориду, пропафенону гідрохлориду, пропанололу гідрохлориду, хінідину бісульфату, хінідину глюконату, хінідину полігалактуронату, хінідину сульфату, соталолу, токаініду гідрохлориду, верапамілу гідрохлориду. Принаймні одні антиангезіальні ліки можуть вибиратись із амлодипідину безилату, амілу нітриту, бепридилу гідрохлориду, дилтіазему гідрохлориду, ізосорбіду динітрату, ізосорбіду мононітрату, надололу, нікардипіну гідрохлориду, нифедипіну, нітрогліцерину, пропранололу гідрохлориду, верапамілу, верапамілу гідрохлориду. Принаймні одні гіпотензивні ліки можуть вибиратись із ацебутололу гідрохлориду, амлодипіну безилату, атенололу, беназеприлу гідрохлориду, бетаксололу гідрохлориду, бісопрололу фумарату, кандезартану цилексетилу, каптоприлу, картеололу гідрохлориду, карведілолу, клонидіну, клонидіну гідрохлориду, діазоксиду, дилтіазему гідрохлориду, доксазозину мезилату, еналаприлату, еналаприлу малеату, епросартану мезилату, фелодипіну, фенолдопаму мезилату, фозиноприлу натрію, гуанабензу ацетату, гуанадрелу сульфату, гуанфасину гідрохлориду, гідразину гідрохлориду, ірбесартану, ізрадипіну, лабеталолу гідрохлориду, лізинопропілу, лозартану калію, метилдопа, метилдопату гідрохлориду, метопрололу сукцинату, метопрололу тартрату, міноксиділу, моексипрілу гідрохлориду, надололу, нікардипіну гідрохлориду, ніфедипіну, нізолдипіну, нітропрусиду натрію, пенбутололу сульфату, периндоприлу ербуміну, фентоламіну мезилату, піндололу, празозину гідрохлориду, пропанололу гідрохлориду, хінаприлу гідрохлориду, рамиприлу, телмисартану, теразозину гідрохлориду, тимололу малеату, трандолаприлу, валсартану, верапамілу гідрохлориду. Принаймні одні протиліпемічні ліки можуть вибиратись із аторвастатину кальцію, церивастатину натрію, холестираміну, колестиполу гідрохлориду, фенофібрату (мікронізованого), флувастатину натрію, гемфіброзилу, ловастатину, ніацину, правастатину натрію, симвастатину. Принаймні одні змішані CV ліки можуть вибиратись із абциксимабу, алпроста 45 дилу, арбутаміну гідрохлориду, цилостазолу, клопідогрелю бісульфату, дипіридамолу, ептифібатиду, мідодрину гідрохлориду, пентоксифіліну, тиклопідину гідрохлориду, тирофібану гідрохлориду. (Див., наприклад, с.с. 215-336 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні одні ненаркотичні анальгетики або антипіретики можуть вибиратись із ацетамінофену, аспірину, холіну магнію трисаліцилату, дифлунізалу, магнію саліцилату. Принаймні одні нестероїдні протизапальні ліки можуть вибиратись із целекоксибу, диклофенаку калію, диклофенаку натрію, етодолаку, фенопрофену кальцію, флубіпрофену, ібупрофену, індометацину, індометацину натрію тригідрату, кетопрофену, кеторолак трометаміну, набуметону, напрооксену, нагфоксену натрію, оксапрозину, піроксикаму, рофекоксибу, суліндаку. Принаймні одні наркотичні або опіоїдні анальгетики можуть вибиратись із алфентанілу гідрохлориду, бупренорфіну гідрохлориду, буторфанолу тартрату, кодеїну фосфату, кодеїну сульфату, фентанілу цитрату, фентанільної трансдермальної системи, фентаніл трансмукозальних ліків, гідроморфону гідрохлориду, меперидіну гідрохлориду, метадону гідрохлориду, морфіну гідрохлориду, морфіну сульфату, морфіну тартрату, налбуфіну гідрохлориду, оксикодону гідрохлориду, оксикодону пектинату, оксиморфону гідрохлориду, пентазокіну гідрохлориду, пентазоцину гідрохлориду та налоксону гідрохлориду, пентазоцину лактату, пропокисфену гідрохлориду, пропоксифену напзилату, реміфентанілу гідрохлориду, суфентанілу цитрату, трамадолу гідрохлориду. Принаймні одні седативно-гіпнотичні ліки можуть вибиратись із хлоралгідрату, естазоламу, флуразепаму гідрохлориду, пентобарбіталу, пентобарбіталу натрію, фенобарбіталу натрію, секобарбіталу натрію, темазепаму, триазоламу, залеплону, золпідему тартрату. Принаймні одні протисудомні ліки можуть вибиратись із ацетазоламіду натрію, карбамазепіну, клоназепаму, хлоразепату дикалію, діазепаму, дивалпрексу натрію, етосуксімду, фосфенітону натрію, габапентину, ламотригіну, сульфату магнію, фенобарбіталу, фенобарбіталу натрію, фенітону, фенітону натрію, фенітону натрію (з розширеною дією), примідону, тіагабіну гідрохлориду, топірамату, вальпроату натрію, вальпроєвої кислоти. Принаймні один антидепресант може вибиратись із амітриптиліну гідрохлориду, амітриптиліну памоату, амоксапіну, бупропіону гідрохлориду, циталопраму гідроброміду, кломіпраміну гідрохлориду, дезипраміну гідрохлориду, доксепіну гідрохлориду, флуоксетину гідрохлориду, іміпраміну гідрохлориду, іміпраміну памоату, міртазапіну, нефазадону гідрохлориду, нортриптиліну гідрохлориду, пароксетину гідрохлориду, фенелзіну сульфату, сертраліну гідрохлориду, транілципроміну сульфату, триміпраміну малеату, венлафаксину гідрохлориду. Принаймні одні ліки проти неспокою можуть вибиратись із алпразоламу, буспірону гідрохлориду, хлордіазепоксиду, хлордіазепоксиду гідрохлориду, хлоразепату дикалію, діазепаму, доксепіну гідрохлориду, гідроксизину ембонату, гідроксизину гідрохлориду, гідроксизину памоату, лоразепаму, мефробамату, мідазоламу 89481 46 гідрохлориду, оксазепаму. Принаймні одні антипсихотичні ліки можуть вибиратись із хлорпромазину гідрохлориду, клозапіну, флуфеназину деканоату, флуфеназину енантату, флуфеназину гідрохлориду, галоперидолу, галоперидол деканоату, галоперидол лактату, локзапіну гідрохлориду, локзапіну сукцинату, мезорідазину безилату, моліндону гідрохлориду, оланзапіну, перфеназину, пімозиду, прохлорперазину, кетіапіну фумарату, рисперидону, тіоридазину гідрохлориду, тіотиксену, тіотиксену гідрохлориду, трифлуоперазину гідрохлориду. Принаймні один стимулятор центральної нервової системи може вибиратись із амфетаміну сульфату, кофеїну, декстроамфетаміну сульфату, доксапрам гідрохлориду, метамфетаміну гідрохлориду, метилфенідату гідрохлориду, модафінілу, пемоліну, фентерміну гідрохлориду. Принаймні одні ліки проти паркінсонізму можуть вибиратись із амантадину гідрохлориду, бензтропіну мезилату, біпериден гідрохлориду, біпериден лактату, бромокриптину мезилату, карбідопалеводопа, ентакапону, леводопа, перголіду мезилату, праміпексолу дигідрохлориду, ропініролу гідрохлориду, селегіліну гідрохлориду, толкапону, тригексифенідил гідрохлориду. Принаймні одні змішані ліки центральної нервової системи можуть вибиратись із бупропіон гідрохлориду, донепезил гідрохлориду, дроперидолу, флувоксаміну малеату, карбонату літію, цитрату літію, наратриптан гідрохлориду, нікотину полакрилексу, нікотинової трансдермальної Системи, пропофолу, ризатриптан бензоату, зибутраміну гідрохлориду моногідрату, суматриптану сукцинату, такрину гідрохлориду, золмитриптану. (Див., наприклад, с.с. 337530 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні один із холінергетиків (наприклад, парасимпатоміметиків) може вибиратись із бетанехолу хлориду, едрофонію хлориду, неостигміну броміду, неостигміну метилсульфату, фізостигміну саліцилату, піридостигміну броміду. Принаймні один із антихолінергетиків може вибиратись із атропіну сульфату, дицикломіну гідрохлориду, глікопіролату, гіосциаміну, гіосциаміну сульфату, пропантеліну броміду, скополаміну, скополаміну бутилброміду, скополаміну гідроброміду. Принаймні один із адренергетиків (симпатоміметиків) може вибиратись із добутаміну гідрохлориду, допаміну гідрохлориду, метарамінолу бітартрату, норепінефрину бітартрату, фенілефрину гідрохлориду, псевдоефедрину гідрохлориду, псевдоефедрину сульфату. Принаймні один із адренергічних блокаторів (симпатолітиків) може вибиратись із дигідроерготаміну мезилату, ерготаміну тартрату, метисергіду малеату, пропанололу гідрохлориду. Принаймні один із релаксантів скелетної мускулатури може вибиратись із баклофену, каризопродолу, хлорзоксазону, циклобензаприну гідрохлориду, дантролену натрію, метокарбамолу, тизанідину гідрохлориду. Принаймні один із нервово-м'язових блокаторів може вибиратись із атракурію безилату, цисатракурію безилату, доксакурію хлориду, мівакурію хлориду, панкуронію броміду, піпекуронію броміду, рапакуронію броміду, рокуронію броміду, сукцинілхоліну хлориду, тубокурарину хло 47 риду, векурнію броміду. (Див., наприклад, с.с. 53184 роботи Nursing 2001 Drag Handbook). Принаймні одні із антигістамінних ліків можуть вибиратись із бромфеніраміну малеату, цетиризину гідрохлориду, хлорофеніраміну малеату, клемастину фумарату, ципрогептадину гідрохлориду, дифенгідраміну гідрохлориду, фексофенадину гідрохлориду, лоратадину, прометазину гідрохлориду, прометазину теоклату, трипролідину гідрохлориду. Принаймні одні із бронхолітичних ліків можуть вибиратись із албутеролу, албутеролу сульфату, амінофіліну, атропіну сульфату, ефедрину сульфату, епінефрину, епінефрину бітартрату, епінефрину гідрохлориду, іпратропію броміду, ізопротеренолу, ізопротеренолу гідрохлориду, ізопротеренолу сульфату, левалбутЕПОлу гідрохлориду, метапротеренолу сульфату, окстрифіліну, пірбутЕПОлу ацетату, салметЕПОлу ксинафоату, тербуталіну сульфату, теофіліну. Принаймні одні із відхаркувальних ліків або із протикашльових ліків можуть вибиратись із бензонатату, кодеїну фосфату, кодеїну сульфату, декстраметорфану гідроброміду, дифенгідраміну гідрохлориду, гуафенезину, гідроморфону гідрохлориду. Принаймні одні зі змішаних респіраторних ліків можуть вибиратись із ацетилцистеїну, бекламетазону дипропіонату, берактанту, будезоніду, калфактанту, кромоліну натрію, дорназа альфа, епопростенолу натрію, флунізоліду, флутиказону пропіонату, монтелукасту натрію, недокромілу натрію, паливізумабу, триамцинолону ацетоніду, зафірлукасту, зилетону (Див., наприклад, с.с. 585-642 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні одні із антацидів, адсорбентів або ліків проти метеоризму можуть вибиратись із карбонату алюмінію, гідроксиду алюмінію, карбонату кальцію, магалдрату, гідроксиду магнію, оксиду магнію, симетикону, бікарбонату натрію. Принаймні одні із травних ферментів або солюбілізаторів жовчних каменів можуть вибиратись із панкреатину, панкреліпази, урозидолу. Принаймні одні із ліків проти діареї можуть вибиратись із атапульгіту, вісмуту субсаліцилату, кальцію полікарбофілу, дифеноксилату гідрохлориду або атропіну сульфату, лопераміду, октреотиду ацетату, опійної тинктури, опійної тинктури (камфорованої). Принаймні одні проносні засоби можуть вибиратись із бісокодилу, полікарбофілу кальцію, каскара саграда, ароматичного рідинного екстракту каскара саграда, рідинного екстракту каскара саграда, касторової олії, докузату кальцію, докузату натрію, гліцерину, лактулозу, цитрату магнію, гідроксиду магнію, сульфату магнію, метилцелюлози, мінерального масла, поліетиленгліколю або розчину електроліту, псиліуму, сенни, фосфатів натрію. Принаймні одні із протиблювотних ліків можуть вибиратись із хлоропромазину гідрохлориду, дименгідринату, долазетрону мезилату, дронабінолу, гранісетрону гідрохлориду, меклізину гідрохлориду, метоклопроаміду гідрохлориду, ондансетрону гідрохлориду, перфеназину, прохлорперазину, прохлорперазину едизилату, прохлорперазину малеату, прометазину гідрохлориду, скополаміну, триетилперазину малеату, триметобензаміду гідрохлориду. Принаймні одні із противиразкових 89481 48 ліків можуть вибиратись із циметидину, циметидину гідрохлориду, фамотидину, ланзопразолу, мізопростолу, нізатидину, омепразолу, рабепрозолу натрію, рантидину вісмуту цитрату, ранитидину гідрохлориду, сукралфату. (Див., наприклад, с.с. 643-95 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні одні із кортикостероїдів можуть вибиратись із бетаметазону, бетаметазону ацетату або бетамезону натрій фосфату, бетаметазону натрій фосфату, кортизону ацетату, дексаметазону, дексаметазону ацетату, дексаметазону натрій фосфату, флудокортизону ацетату, гідрокортизону, гідрокортизону ацетату, гідрокортизону ципіонату, гідрокортизону натрію фосфату, гідрокортизону натрію сукцинату, метилпреднізолону, метилпреднізолону ацетату, метилпреднізолону натрій сукцинату, преднізолону, преднізолону ацетату, преднізолону натрій фосфату, преднізолону тебутату, преднізону, триамцинолону, триамцинолону ацетоніду, триамцинолону діацетату. Принаймні одні із андрогенних або анаболічних стероїдів можуть вибиратись із даназолу, флуоксиместерону, метилтестостерону, нандролону деканоату, нандролону фенопропіонату, тестостерону, тестостерону ципіонату, тестостерону енантату, тестостерону пропіонату, тестостеронової трансдермальної системи. Принаймні один із естрогенів або прогестинів може вибиратись із етерифікованих естрогенів, естрадіолу, естрадіолу ципіонату, естрадіол/норетиндрон ацетатної трансдермальної системи, естрадіолу валерату, естрогенів (спряжених), естропіпату, етиніл естрадіолу, етиніл естрадіолу та дезогестрелу, етиніл естрадіолу та етинодіолу діацетатуj етиніл естрадіолу та дезогестрелу, етиніл естрадіолу та етинодіол діацетату, етиніл естрадіолу та левоноргестрелу, етиніл естрадіолу та норетиндрону, етиніл естрадіолу та норетиндрону ацетату, етиніл естрадіолу та норгестимату, етиніл естрадіолу та норгестрелу, етиніл естрадіолу та норетиндрону, та ацетату і фумарату заліза (II), левоноргестрелу, медроксипрогестерону ацетату, местранолу та норетиндрону, норетиндрону, норетиндрону ацетату, норгестрелу, прогестерону. Принаймні один із гонадротропінів може вибиратись із ганіреліксу ацетату, гонадореліну ацетату, гістреліну ацетату, менотропінів. Принаймні одні із. антидіабетичних ліків або глюкагонів можуть вибиратись із акарбози, хлорпропаміду, глімепіриду, гліпізиду, глюкагону, глібуриду, інсулінів, метформіну гідрохлориду, міглітолу, піоглітазону гідрохлориду, репагліниду, розиглітазону малеату, троглітазону. Принаймні один із тиреоїдних гормонів може вибиратись із левотироксину натрію, ліотироніну натрію, ліотриксу, тиреоїду. Принаймні один із антагоністів тиреоїдних гормонів може вибиратись із метимазолу, йодиду калію, йодиду калію (насиченого розчину), пропілтіоурацилу, радіоактивного йоду (йодиду натрію 131І), концентрованого розчину йоду. Принаймні один із пітуїтарних гормонів може вибиратись із кортикотропіну, козинтропіну, десмопресину ацетату, лепроліду ацетату, репозиторного кортикотропіну, соматрему, соматропіну, вазопресину. Принаймні одні із паратиреоїдо-подібних ліків можуть вибиратись із кальцифедіолу, кальцитоніну 49 (людини), кальцитоніну (лосося), кальцитріолу, дигілротакистерину, етидронату динатрію. (Див., наприклад, с.с. 696-796 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні один із діуретиків може вибиратись із ацетазоламіду, ацетазоламіду натрію, амілориду гідрохлориду, буметаніду, хлорталідону, етакринату натрію, етакринової кислоти, фуросеміду, гідрохлоротіазиду, індапаміду, маніту, метолазону, спіронолактону, торсеміду, триамтерену, сечовини. Принаймні один із електролітних розчинів або розчинів заміщення може вибиратись із ацетату кальцію, карбонату кальцію, хлориду кальцію, цитрату кальцію, глубіонату кальцію, глуцептату кальцію, глюконату кальцію, лактату кальцію, фосфату кальцію (двохосновного), фосфату кальцію (трьохосновного), декстрану (високомолекулярного), декстрану (низькомолекулярного), гетакрохмалю, хіюриду магнію, сульфату магнію, ацетату калію, бікарбонату калію, хлориду калію, глюконату калію, ін'єкції Рінгера, ін'єкції Рінгера (лактатної), хлориду натрію. Принаймні один із підкислювачів або підлуговувачів може вибиратись із бікарбонату натрію, лактату натрію, трометаміну. (Див., наприклад, с.с. 797-833 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні одні із ліків, що підвищують рівень гемоглобіну у крові, можуть вибиратись із фумарату заліза (II), глюконату заліза (II), сульфату заліза (II), сульфату заліза (II) (сухого), залізо-декстрану, залізо-сорбіту, комплексу полісахариди-залізо, натрій залізо (III) глюконатного комплексу. Принаймні один із антикоагулянтів може вибиратись із ардепарину натрію, дальтепарину натрію, данапароїду натрію, еноксапарину натрію, гепарину кальцію, гепарину натрію, варфарину натрію. Принаймні один із дериватів крові може вибиратись із альбуміну 5%, альбуміну 25%, антигемофільного фактору, антиінгібіторного коагулянтного комплексу, антитромбіну III (людини), фактору IX (людини), фактору IX комплексу, плазмово-білкових фракцій. Принаймні один із тромболітичних ферментів може вибиратись із альтеплази, аністреплази, ретеплази (рекомбінантної), стрептокінази, урокінази. (Див., наприклад, с.с. 834-66 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні одні із алкілуючих ліків можуть вибиратись із бусульфану, карбоплатини, кармустину, хлорамбуцилу, цисплатини, циклофосфаміду, іфосфаміду, ломустину, мехлоретаміну гідрохлориду, мелфалану, мелфалану гідрохлориду, стрептозокіну, темозоломіду, тіотепи. Принаймні один із антиметаболітів може вибиратись із капецитабіну, кладрибіну, цитарабіну, флоксурідину, флударабіну фосфату, флюороурацилу, гідроксисечовини, меркаптопурину, метотрексату, метотрексату натрію, тіогуаніну. Принаймні одні із протипухлинних антибіотиків можуть вибиратись із блеоміцину сульфату, дактиноміцину, даунорубіцину цитрату ліпосомалу, даунорубіцину гідрохлориду, доксорубіцину гідрохлориду, доксорубіцину гідрохлориду ліпосомалу, епірубіцину гідрохлориду, ідарубіцину гідрохлориду, мітоміцину, пентостатину, плікаміцину, валрубіцину. Принаймні одні із протипухлинних засобів, що змінюють баланс гормонів, можуть 89481 50 вибиратись із анастрозолу, бікалутаміду, естрамустину фосфату натрію, екземестану, флутаміду, гозерелину ацетату, летрозолу, лепроліду ацетату, мегестролу ацетату, нилутаміду, тамоксифену цитрату, тестолактону, тореміфену цитрату. Принаймні одні зі змішаних протипухлинних ліків можуть вибиратись із аепарагінази, палички Кальметта-Герена (BCG) (живої внутрішньоміхурової), дакарбазину, доцетакселу, етопозиду, етопозиду фосфату, гемцитабіну гідрохлориду, іринотекану гідрохлориду, мітотану, мітоксантрону гідрохлориду, паклитакселу, пегаспаргази, порфимеру натрііо, прокарбазину гідрохлориду, ритуксимабу, тенипозиду, топотекану гідрохлориду, трастузумабу, тертинону, вінбластину сульфату, вінкристину сульфату, вінорелбіну тартрату. (Див., наприклад, с.с. 867-963 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні один із імунодепресантів може вибиратись із азатиоприну, базиліксимабу, циклоспорину, даклізумабу, лімфоцитного імунного глобуліну, муромонабу-СD3, мікофенолату мофетилу гідрохлориду, сиролімусу, такролімусу. Принаймні одні із вакцин або токсоїдів можуть вибиратись із вакцини BCG, протихолерної вакцини, токсоїдів дифтерії та тетанусу (адсорбованих), дифтерійного та тетанусового токсоїдів, та безклітинної адсорбованої протикоклюшної вакцини, дифтерійного та тетанусового токсоїдів, та повноклітинної протикоклюшної вакцини, Haemophilius b кон'югованих вакцин, вакцини проти гепатиту А (інактивованої), вакцини проти гепатиту В (рекомбінантної), вакцини проти вірусу грипу 1999-2000, тривалентні типи А & В (очищений поверхневий антиген), вакцини проти вірусу грипу 1999-2000, тривалентні типи А & В (субвіріон або очищений віріон), вакцини проти вірусу грипу 1999-2000, тривалентні типи А & В (увесь віріон), вакцини проти вірусу японського енцефаліту (інактивованої), вакцини проти хвороби Лайма (рекомбінантної OspA), вакцини проти вірусу кору, паротиту та корової краснухи (живої), вакцини проти вірусу кору, паротиту та корової краснухи (живої атенуйованої), вакцини проти вірусу кору (живої атенуйованої), менінгококової полісахаридної вакцини, вакцини проти вірусу паротиту (живої), протичумної вакцини, пневмококової вакцини (полівалентної), полівірусної вакцини (інактивованої), полівірусної вакцини (живої, оральної, тривалентної), антирабічної вакцини (адсорбованої), антирабічної вакцини (людської диплоїдної клітини), вакцини проти вірусу корової краснухи та паротиту (живої), вакцини проти вірусу корової краснухи (живої, атенуйованої), токсоїду тетанусу (адсорбованого), токсоїду тетанусу (флюїдного), протитифоїдної вакцини (оральної), протитифоїдної вакцини (парентеральної), протитифоїдної Vi полісахаридної вакцини, вакцини проти вірусу вітряної віспи, вакцини проти жовтрї лихоманки. Принаймні одні із антитоксинів або протиотрутних засобів можуть вибиратись із протиотрути від отрути павука "чорна удова", протиотрути Crotalidae (полівалентного), дифтерійного антитоксину (кінського), антивеніну Micrurus fulvius. Принаймні одна із імунних сироваток може вибиратись із цитомегаловірусного імунного глобуліну (внутрішньовенного), гепатит В імунного глобуліну (лю 51 дини), імунного глобуліну внутрішньом'язового, імунного глобуліну внутрішньовенного, антирабічного імунного глобуліну (людини), респіраторносинцитіального вірусного імунного глобуліну внутрішньовенного (людини), Rho(D) імунного глобуліну (людини), Rho(D) імунного глобуліну внутрішньовенного (людини), протиправцевого імунного глобуліну (людини), вітряна віспа-"зостер"iмунного глобуліну. Принаймні один із модифікаторів біологічної реакції може вибиратись із альдеслейкіну, епоетину альфа, філграстиму, глатирамеру ацетату для ін'єкцій, інтерфЕПОну альфакон-1, інтерфЕПОну альфа-2а (рекомбінантного), інтерфЕПОну альфа-2b (рекомбінантного), інтерфЕПОну бета-1a, інтерфЕПОну бета-1b (рекомбінантного), інтерфЕПОну гамма- 1Ь, левамізолу гідрохлориду, опрелвекіну, саргамостиму. (Див., наприклад, с.с. 964-1040 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні одні із офтальмологічних протиінфекційних ліків можуть вибиратись із бацитрацину, хлорамфеніколу, ципрофлоксацину гідрохлориду, еритроміцину, гентаміцину сульфату, офлоксацину 0,3%, поліміксину В сульфату, сульфацетаміду натрію 10%, сульфацетаміду натрію 15%, сульфацетаміду натрію 30%, тобраміцину, відарабину. Принаймні одні із офтальмологічних протизапальних засобів можуть вибиратись із дексаметазону, дексаметазону натрію фосфату, диклофенаку натрію 0,1%, флуорометолону, фрубіпрофену натрію, кеторолаку трометаміну, преднізолону ацетату (суспензія), преднізолону натрію фосфату (розчин). Принаймні одні із міотичних засобів можуть вибиратись із ацетилхоліну хлориду, карбахолу (внутрішньоочного), карбахолу (місцевого), екотіофату йодиду, пілокарпіну, пілокарпіну гідрохлориду, пілокарпіну нітрату. Принаймні одні із мідриатичних засобів можуть вибиратись із атропіну сульфату, циклопентолату гідрохлориду, епінефрину гідрохлориду, епінеприлу борату, гоматропіну гідробромиду, фенілефрину гідрохлориду, скополаміну гідроброміду, тропікаміду. Принаймні одні із офтальмологічних вазоконстрикторів можуть вибиратись із нафазоліну гідрохлориду, оксиметазоліну гідрохлориду, тетрагідрозоліну гідрохлориду. Принаймні одні зі змішаних офтальмологічних ліків можуть вибиратись із апраклонідину гідрохлориду, бетаксололу гідрохлориду, бримонідину тартрату, картеололу гідрохлориду, дипівефрину гідрохлориду, дорзоламіду гідрохлориду, емедастину дифумарату, флуоресцеїну натрію, кетотіфену фумарату, латанопросту, левобунололу гідрохлориду, метипранололу гідрохлориду, хлориду натрію (гіпертонічного), тимололу малеату. Принаймні одні із вушних ліків можуть вибиратись із борної кислоти, карбаміду пероксиду, хлорамфеніколу, триетаноламіну поліпептиду олеату-конденсату. Принаймні одні із назальних ліків можуть вибиратись із беклометазону дипропіонату, будезоніду, ефедрину сульфату, епінефрину гідрохлориду, флунізоліду, флутиказону пропіонату, нафазоліну гідрохлориду, оксиметазоліну гідрохлориду, фенілефрину гідрохлориду, тетрагідрозоліну гідрохлориду, триамцинолону ацетоніду, 89481 52 ксилометазоліну гідрохлориду. (Див., наприклад, с.с. 1041-97 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні одні із місцевих протиінфекційних засобів можуть вибиратись із ацикловіру, амфотерицину В, крему із азелаїнової кислоти, бацитрацину, бутоконазолу нітрату, кліндаміцину фосфату, клотримазолу, еконазолу нітрату, еритроміцину, гентаміцину сульфату, кетоконазолу, мафеніду ацетату, метронідазолу (місцевого), міконазолу нітрату, мупіроцину, нафтифіну гідрохлориду, неоміцину сульфату, нітрофуразону, ністатину, сульфадіазину срібла, тербинафіну гідрохлориду, терконазолу, тетрацикліну гідрохлориду, тіоконазолу, толанафлату. Принаймні одні зі скабіцидів або ліків проти педикульозу можуть вибиратись із кротамітону, ліндану, перметрину, піретринів. Принаймні одні із кортикостероїдів місцевого призначення можуть вибиратись із бетаметазону дипропіонату, бетаметазону валерату, клобетазолу пропіонату, дезоніду, дезоксиметазону, дексаметазону, дексаметазону натрію фосфату, дифлоразону діацетату, флуоцинолону ацетоніду, флуоциноніду, флурандреноліду, флутиказону пропіонату, гальціоніду, гідрокортизону, гідрокортизону ацетату, гідрокортизону бутирату, гідрокортизону валерату, мометазону фуроату, триамцинолону ацетоніду. (Див., наприклад, с.с. 1098-1136 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Принаймні одні із вітамінів або мінералів можуть вибиратись із вітаміну А, комплексу вітамінів В, ціанокобаламіну, фолієвої кислоти, гідроксокобаламіну, лейковорину кальцію, ніацину, ніацинаміду, піридоксину гідрохлориду, рибофлавіну, тіаміну гідрохлориду, вітаміну С, вітаміну D, холекальциферолу, ергокальциферолу, аналогу вітаміну D, доксекальциферолу, партикальцитолу, вітаміну Е, аналогу вітаміну К, фітонадіону, фториду натрію, фториду натрію (місцевого), слідових елементів, хрому, міді, йоду, магнію, селену, цинку. Принаймні одні із калорійних препаратів можуть вибиратись із амінокислотних інфузій (кристалічних), амінокислотних інфузій у декстрозі, амінокислотних інфузій з електролітами, амінокислотних інфузій з електролітами у декстрозі, амінокислотних інфузій для печінкової недостатності, амінокислотних інфузій для сильного метаболічного стресу, амінокислотних інфузій для ниркової недостатності, декстрози, жирових емульсій, тригліцеридів з середньою довжиною ланцюга. (Див., наприклад, с.с. 1137-63 роботи Nursing 2001 Drug Handbook). Антитіло ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або поліпептидні композиції даного винаходу можуть також включати принаймні одну із будь-якої придатної та/або ефективної кількості композицію або фармацевтичну композицію, котра включає принаймні один білок або антитіло ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла до клітини, тканини, органу, тварини або пацієнта, що потребує такої модуляції, лікування або терапії, включає також, при потребі, принаймні один, вибраний із принаймні одного TNF антагоніста (наприклад, але не обмежуючись цим, TNF хімічного або білкового антаго 53 ніста, TNF моноклонального або поліклонального антитіла або фрагмента, розчинного TNF рецептора (наприклад, р55, р70 або р85) або фрагмента, його злитих поліпептидів, або TNF антагоніста з малою молекулою, наприклад, TNF зв'язувального білка І або II (ТВР-1 або ТВР-ІІ), нерелімонмаб, інфліксимаб, ентерасепт, CDP-571, CDP-870, афелімомаб, ленерсепт, і таке подібне), протиревматичний засіб (наприклад, метотрексат, ауранофен, ауротіоглюкозу, азатіоприн, етанерсепт, золото-натрій тіомалат, гідроксихлорокін сульфат, лефлуномід, сульфасалзин), м'язовий релаксант, наркотичний, нестероїдний протизапальний засіб (NSAID), анальгетик, анестетик, седативний, .засіб, місцевий анестетик, нервово-м'язовий блокатор, протимікробний засіб (наприклад, аміноглікозид, протигрибковий засіб, протипаразитний засіб, противірусний засіб, карбапенем, цефалоспорин, флуорохінолон, макролід, пеніцилін, сульфонамід, тетрациклін, інший протимікробний засіб), протипсоріатичний засіб, кортикостероїд, анаболічний стероїд, зв'язаний з діабетом агент, мінерал, ліки, що пов'язані з харчуванням, тіреоїдний агент, вітамін, зв'язаний з кальцієм гормон, ліки проти діареї, протикашльові ліки, протиблювотний засіб, противиразкові ліки, проносний засіб, антикоагулянт, еритропоетин (наприклад, епоетин альфа), філграстим (наприклад, G-CSF, Neupogen), сарграмостим (GM-CSF, лейкін), імунізаційний засіб, імуноглобулін, імунодепресант (наприклад, базиліксимаб, циклоспорин, дацлізумаб), гормон росту, ліки, що замінюють гормони, модулятор естрогенного рецептора, мідриатичний засіб, циклоплегічний засіб, алкілуючий агент, антиметаболітний засіб, міотичний інгібітор, радіофармацевтичний засіб, антидепресант, агент проти маніакального стану, антипсихотичні ліки, анксиолітики, гіпнотичні засоби, симпатоміметик, стимулятор, донепезил, такрин, протиастматичні ліки, бета агоніст, інгаляційний стЕПОїд, лейкотрієновий інгібітор, метилксантин, кромолін, епінефрин або аналог, дорназ альфа (пульмозим), цитокін або цитокіновий антагоніст. Приклади, що не вносять будь-яких обмежень, таких цитокінів включають, проте не обмежуючись цим, будь-який із IL-1 - IL-23. Придатні дози добре відомі у даній галузі. Дивись, наприклад, роботи Wells et.al., eds., Pharmacotherapy Handbook, 2nd Edition, Appleton and Lange, Stamford, CT (2000); PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000, Deluxe Edition, Tarascon Publishing, Loma Linda, CA (2000), на кожну із яких у даній заявці зроблені посилання. Такі композиції можуть також містити молекули токсину, котрі асоційовані, зв'язані, скомпоновані або сумісно застосовуються з принаймні одним антитілом чи поліпептидом даного винаходу. Даний токсин, при потребі, селективно вбиває патологічну клітину або тканину. Даною патологічною клітиною може бути рак або інша клітина. Такі токсини можуть бути, проте не обмежуючись цим, очищеними або рекомбінантними токсинами, або фрагментами токсинів, що містять принаймні один функціональний цитотоксичний домен токсину, наприклад, вибраний із принаймні одного токсину 89481 54 із рицину, дифтерійного токсину, отрутного токсину, або бактеріального токсину. Термін токсин також включає як ендотоксини, так і екзотоксини, що продукуються будь-якими природними, мутантними або рекомбінантними бактеріями чи вірусами, котрі можуть спричинити будь-який патологічний стан у людей та інших ссавців, включаючи токсиновий шок, котрий може спричинити смерть. Такі токсини можуть включати, проте не обмежуючись цим, ентеротоксигенний Е. coli, термолабільний ентеротоксин (LT), теплостійкий ентеротоксин (ST), цитотоксин Shigella, ентеротоксин Aeromonas, токсин-1 синдрому токсичного шоку (TSST-1), стафілококовий ентеротоксин A (SEA), В (SEB), або С (SEC), стрептококові ентеротоксини і таке подібне. Такі бактерії включають, проте не обмежуючись цим, штамми виду ентеротоксигенної Е. coli (ЕТЕС), ентерогеморагічної Е. coli (наприклад, штамми серотипу 0157:Н7), стафілокок виду (наприклад, Staphylococcus aureus, Staphylococcus pyogenes), виду Shigella (наприклад, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella boydii, та Shigella sonnei), виду Salmonella (наприклад, Salmonella typhi, Salmonella cholera-suis, Salmonella enteritidis), виду Clostridium (наприклад, Clostridium perfringens, Clostridium diflcile, Clostridium. botulinum), виду Camphlobacter (наприклад, Camphlobacter jejuni, Camphlobacter fetus), виду Heliobacter (наприклад, Heliobacter pylori), виду Aeromonas (наприклад, Aeromonas sobria, Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae), Pleisomonas shigelloides, Yersina enterocolitica, виду Vibrios (наприклад, Vibrios cholerae, Vibrios parahemolyticus), виду Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa, та Streptococci. Дивись, наприклад, роботи Stein, ed., INTERNAL MEDICINE, 3rd ed., pp. 1-13, Little, Brown and Co., Boston, (1990); Evans et al., eds., Bacterial Infections of Humans: Epidemiology and Control, 2d. Ed., pp. 239-254, Plenum Medical Book Co., New York (1991); Mandell et al., Principles and Practice of Infections Diseases, 3d. Ed., Churcill Livingstone, New York (1990); Berkow et al., eds.,. The Merck Manual, 16th edition, Merck and Co., Rahway, N.J., 1992; Wood et al., FEMS Microbiology Immunology, 76:121-134 (1991); Marrack et al., Science, 248:705-711 (1990), на кожну із яких у даній заявці зроблені повні посилання. Композиції даного винаходу на основі ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту можуть додатково включати принаймні одну із будь-яких допоміжних речовин, таких як, проте не обмежуючись цим, розріджувач, зв'язувальна речовина, стабілізатор, буфери, солі, ліпофільні розчинники, консерванти, ад'юванти або таке подібне. Перевага віддається фармацевтично прийнятним допоміжним речовинам. Приклади, що не вносять будь-яких обмежень, та способи приготування таких стерильних розчинів добре відомі у даній галузі, такі як, проте не обмежуючись цим, Gennaro, Ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Co. (Easton, PA) 1990. Фармацевтично прийнятні носії можуть, звичайно, вибиратись у такий спосіб, щоб бути придатними до способу застосування, розчинності та/або стійкості даної 55 композиції на основі ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла, як це добре відомо у даній галузі або як описано у даній заявці. Фармацевтичні наповнювачі та добавки, корисні у даній композиції, включають, проте не обмежуючись цим, білки, пептиди, амінокислоти, ліпіди та вуглеводні (наприклад, цукри, включаючи моносахариди, ди-, три-, тетра- та олігосахариди; дериватизовані цукри, такі як алдитоли, альдонові кислоти, етерифіковані цукри і таке подібне; та полісахариди або цукрові полімери), котрі можуть включатись окремо або у комбінації, як 1-99,99% за вагою або об'ємом. Ілюстративні білкові наповнювачі включають сироватковий альбумін, такий як сироватковий альбумін людини (HSA), рекомбінантний альбумін людини (rНА), желатин, казеїн і таке подбне. Репрезентативні компоненти амінокислота/ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант, котрі можуть також діяти як буфери, включають аланін, гліцин, аргінін, бетаїн, гістидин, глутамінову кислоту, аспарагінову кислоту, цистеїн, лізин, лейцин, ізолейцин, валін, метіонін, фенілаланін, аспартам і таке подібне. Однією із амінокислот, якій віддається перевага, є гліцин. Вуглеводневі наповнювачі, придатні для використання у даному винаході, включають, наприклад, моносахариди, такі як фруктоза, мальтоза, галактоза, глюкоза, D-маноза, сорбоза і таке подібне; дисахариди, такі як лактоза, цукроза, трегалоза, целобіоз і таке подібне; полісахариди, такі як рафіноза, мелецитоза, мальтодекстрини, декстрани, крохмалі і таке подібне; та альдитоли, такі як маніт, ксиліт, мальтит, лактат, ксиліт сорбіт (глюцит), міоінозитол і таке подібне. Вуглеводневі наповнювачі, яким у даному винаході віддається перевага, включають маніт, трегалозу та рафінозу. Композиції на основі ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла можуть також включати буфер або агент, що регулює величину рН; типово, даний буфер являє собою сіль, що одержана із органічної кислоти або основи. Репрезентативні буфери включають солі органічної кислоти, такі як солі лимонної кислоти, аскорбінової кислоти, глюконової кислоти, карбонової кислоти, винної кислоти, бурштинової кислоти, оцтової кислоти або фталевої кислоти; Tris, трометамін гідрохлорид або фосфатні буфери. Буфери, яким віддається перевага у даних композиціях, включають солі органічної кислоти, такі як цитрат. Крім того, композиції даного винаходу на основі ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту можуть включати полімерні наповнювачі/добавки, такі як полівінілпіролідони, фіколи (полімерний цукор), декстрани (наприклад, циклодекстрини, такі як 2-гідроксипропіл-b-циклодекстрин), поліетиленгліколі, ароматизатори, протимікробні агенти, підсолоджувачі, антиоксиданти, антистатики, поверхнево-активні речовини (наприклад, полісорбати, такі як "TWEEN 20" та "TWEEN 80"), ліпіди (наприклад, фосфоліпіди, жирні кислоти), стероїди (наприклад, холестерин), та хелатуючі агенти (наприклад, EDTA). 89481 56 Ці та додаткові відомі фармацевтичні наповнювачі та добавки, придатні для використання у композиціях даного винаходу на основі ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла, відомі у даній галузі, наприклад, як перелічено книзі "Remington: The Science & Practice of Pharmacy", 19th ed., Williams & Williams, (1995) та у книзі "Physician's Desk Reference", 52nd ed., Medical Economics, Montvale, NJ (1998), на які у даній заявці зроблені повні посилання. Матеріали носіїв або наповнювачів, яким віддається перевага, включають вуглеводні (наприклад, сахариди та алдитоли) та буфери (наприклад, цитрат) або полімерні агенти. Препарати Як зазначалось вище, даний винахід запроваджує стабільні препарати, котрі можуть, краще, включати придатний буфер з сольовим розчином або вибраною сіллю, так само, при потребі, як і консервовані розчини та препарати, що містять консервант, так само як і консервовані препарати багатоцільового призначення, котрі придатні для фармацевтичного або ветеринарного застосування, включаючи принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, у фармацевтично прийнятній композиції. Консервовані препарати містять принаймні один відомий консервант або вибраний, при потребі, із групи, яка складається із принаймні одного фенолу, m-крезолу, р-крезолу, о-крезолу, хлорокрезолу, бензилового спирту, фенілртутного нітрату, феноксиетанолу, формальдегіду, хлоробутанолу, хлориду магнію (наприклад, гексагідрату), алкілпарабену (метил, етил, пропіл, бутил і такого подібного), бензалконій хлориду, бензетоній хлориду, натрій дегідроацетату та тимерозалу, або їх суміші у водному розріджувачі. Може використовуватись будь-яка придатна концентрація, як відомо у даній галузі, така як 0,001-5%, або будьякий діапазон, або значення із зазначеної області, наприклад, але не обмежуючись цим, 0,001, 0,003, 0,005, 0,009, 0,01, 0,02, 0,03, 0,05, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4,0, 4,3, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9 або інше значення із цієї області. Приклади, які не вносять будьяких обмежень, включають, без консерванту, 0,12% m-крезолу (наприклад, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,9, 1,0%), 0,1-3% бензилового спирту (наприклад, 0,5, 0,9, 1,1, 1,5, 1,9, 2,0, 2,5%), 0,001-0,5% тимерозалу (наприклад, 0,005, 0,01), 0,001-2,0% фенолу (наприклад, 0,05, 0,25, 0,28, 0,5, 0,9, 1,0%), 0,00051,0% алкілпарабену(нів) (наприклад, 0,00075, 0,0009, 0,001, 0,002, 0,005, 0,0075, 0,009, 0,01, 0,02, 0,05, 0,075, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,5, 0,75, 0,9, 1,0%) і таке подібне. Як зазначалось вище, даний винахід запроваджує виріб, що включає пакувальний матеріал та принаймні одну ампулу, яка містить розчин принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, з приписаними буферами та/або консервантами, при потребі, з водним розріджувачем, де зазначений пакувальний матеріал включає 57 етикетку, котра зазначає, що даний розчин може зберігатись протягом періоду 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, 18, 20, 24, 30, 36, 40, 48, 54, 60, 66, 72 годин або більше. Даний винахід також включає виріб, що включає пакувальний матеріал, першу ампулу, яка містить ліофілізовані принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант, та другу ампулу, яка містить водний розріджувач приписаного буфера або консерванту, де зазначений пакувальний матеріал включає етикетку, що інструктує пацієнта як відтворити принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірносерцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант у даному водному розріджувачі з одержанням розчину, котрий може зберігатись протягом 24 годин або більше. Зазначені принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначена частина, або варіант, що використовуються згідно з даним винаходом, можуть бути одержані за допомогою рекомбінантних засобів, включаючи із кліитин ссавця або трансгенних препаратів, або можуть бути виділені із інших біологічних джерел, як описано у даному тексті або як відомо у даній галузі. Інтервал кількостей принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту у продущі даного винаходу включає вихідні кількості після відтворення, у вигляді вологої/сухої системи, з концентраціями від приблизно 1,0мкг/мл до приблизно 1000мг/мл, хоча робочими також є й менші та більші концентрації, у залежності від передбачуваної системи доставки, наприклад, склади розчинів будуть відмінними від складів для препарату трансдермального петча, пульмонарних, трансмукозальних або осмотичних чи мікропомпових способів. Краще, коли водний розріджувач, при потребі, містить також фармацевтично прийнятний консервант. Консерванти, яким віддається перевага, включають такі, що вибираються із групи, яка включає фенол, m-крезол, р-крезол, о-крезол, хлорокрезол, бензиловий спирт, алкілпарабен (метил, етил, пропіл, бутил і таке подібне), бензалконій хлорид, бензетоній хлорид, натрій дегідроацетат та тимерозал або їх суміші. Концентрація консерванту, який застосовується у даному препараті, є концентрацією, що достатня для забезпечення протимікробного ефекту. Такі концентрації залежать від вибраного консерванту і легко визначаються фахівцем у даній галузі. При потребі, та краще, коли до даного розріджувача додаються інші наповнювачі, наприклад, агенти ізотонічності, буфери, антиоксиданти, консервуючі енхансери. Агент ізотонїчності, такий як гліцерин, звичайно використовується при відомих концентраціях. Для запровадження поліпшеного рН контролю додається, краще, фізіологічно толерантний буфер. Дані препарати можуть покривати широкий діапазон рН, такий як від приблизно рН 4 до приблизно рН 10, краще, від приблизно рН 5 до приблизно рН 9, і найкраще, від приблизно рН 6,0 до приблизно рН 8,0. Краще, коли препарати даного винаходу мають рН від приблизно 6,8 до при 89481 58 близно 7,8. Буфери, яким віддається перевага, включають фосфатні буфери, найкраще, фосфат натрію, особливо, фосфатний буферний сольовий розчин (PBS). Інші добавки, такі як фармацевтично прийнятні солюбілізатори, такі як Tween 20 (поліоксиетилен (20) сорбітан монолаурат), Tween 40 (поліоксиетилен (20) сорбітан монопальмітат), Tween 80 (поліоксиетилен (20) сорбітан моноолеат), Pluronic F68 (блок-сополімери поліоксиетиленполіоксипропілену) та PEG (поліетиленгліколь) або неіонні поверхнево-активні речовини, такі як полісорбат 20 або 80, або полоксамер 184 чи 188, Pluronic Ò поліли, інші блок-сополімери, та хелатуючі агенти, такі як EDTA та EGTA, можуть, при потребі, додаватись до даних препаратів або композицій для зниження агрегації. Ці добавки особливо корисні, якщо для застосування даного препарату використовують помпу або пластиковий контейнер. Присутність фармацевтично прийнятної поверхнево-активної речовини знижує схильність даного білка до агрегації. Препарти даного винаходу можуть готуватись з використанням процесу, котрий включає змішування принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту та консерванту, що вибирається із групи, яка влючає фенол, m-крезол, р-крезол, окрезол, хлорокрезол, бензиловий спирт, алкілпарабен (метил, етил, пропіл, бутил і таке подібне), бензалконій хлорид, бензетоній хлорид, натрій дегідроацетат та тимЕПОзал або їх суміші у водному розріджувачі. Змішування принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту та консерванту у даному водному розріджувачі проводиться з використанням звичайних процедур розчинення та змішування. Для приготування придатного препарату, наприклад, відмірена кількість принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту у буферному розчині об'єднується з потрібним консервантом у буферному розчині у кількостях, що достатні для запровадження білка та консерванту у потрібних концентраціях. Варіанти цього процесу зрозумілі звичайному фахівцеві у даній галузі. Наприклад, порядок додавання компонентів, коли використовуються допоміжні добавки, температура та рН, при яких готується даний препарат, є чинниками, котрі можуть бути оптимізовані відносно даної концентрації та використаних засобів застосування. Заявлені препарати можуть бути запроваджені пацієнтам у вигляді прозорих розчинів або у вигляді подвійних ампул, що включають ампулу ліофілізованого принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, котрі відтворюються за допомогою другої ампули, яка містить воду, консервант та/або наповнювачі, краще, фосфатний буфер та/або сольовий розчин і вибрану сіль, у водному розріджувачі. Як ампула з одним розчином, так і подвійна ампула, що потребує відтворення, можуть бути використані багато разів, і це може бути достатнім для проведення одного циклу 59 або множини циклів лікування пацієнта, що запроваджує більш зручну схему лікування, ніж є у теперішній час. Заявлені вироби корисні для застосування протягом періоду від негайного застосування до 24 годин або більше. Відповідно, заявлені тут вироби пропонують значні переваги пацієнту. Препарати даного винаходу можуть, при потребі, безпечно зберігатись при температурах від приблизно 2 до приблизно 40°С і зберігають біологічну активність білка протягом тривалих періодів часу, що дає можливість зазначати на етикетці, що даний розчин може зберігатись та/або застосовуватись протягом періоду 6, 12, 18, 24, 36, 48, 72 або 96 годин, або більше. Якщо використовується консервований розріджувач, така етикетка може зазначати застосування до принаймні 1-12 місяців, протягом півроку, півтора років та/або двох років. Розчини принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту можуть готуватись з використанням процесу, котрий включає змішування принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту у водному розріджувачі. Змішування проводиться з використанням звичайних процедур розчинення та змішування. Для приготування придатного препарату, наприклад, відмірена кількість принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту у воді чи буфері об'єднується з потрібним консервантом у кількостях, що достатні для запровадження білка та, при потребі, консерванту або буфера у потрібних концентраціях. Варіанти цього процесу зрозумілі звичайному фахівцеві у даній галузі. Наприклад, порядок додавання компонентів, коли використовуються допоміжні добавки, температура та рН, при яких готується даний препарат, є чинниками, котрі можуть бути оптимізовані відносно даної концентрації та використаних засобів застосування. Заявлені продукти можуть бути запроваджені пацієнтам у вигляді прозорих розчинів або у вигляді подвійних ампул, що включають ампулу ліофілізованого принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, котрі відтворюються за допомогою другої ампули, яка містить водний розріджувач. Як ампула з одним розчином, так і подвійна ампула, що потребує відтворення, можуть бути використані багато разів, і це може бути достатнім для проведення одного циклу або множини циклів лікування пацієнта, що запроваджує більш зручну схему лікування, ніж є у теперішній час. Заявлені продукти можуть запроваджуватись пацієнтам опосередковано, тобто шляхом запровадження в аптеки, клініки або інші такі, установи та заклади прозорих розчинів або подвійних ампул, що включають ампулу ліофілізованого принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, котрі відтворюються за допомогою другої ампули, яка містить водний розріджувач. Прозорий розчин у цьому випадку може бути у кількості до одного літра або більше, запроваджу 89481 60 ючи великий резервуар, із якого можуть братись один раз або багато разів менші порції розчину принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірносерцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, для перенесення у менші ампули та постачатись аптекою або клінікою своїм покупцям та/або пацієнтам. Визнані пристрої, що містять зазначені одноампульні системи, включають перові інжекційні пристрої для доставки розчину, такі як HumajectÒ, NovoPenÒ, B-DÒPen, AutoPenÒ та OptiPenÒ. Визнані пристрої, що містять зазначені двохампульні системи, включають перові інжекційні системи для відтворення ліофілізованих ліків у картриджах для доставки відтвореного розчину, такі як HumatroPenÒ. Продукти, що тут заявлені, включають пакувальний матеріал. Даний пакувальний матеріал запроваджує, окрім інформації, яка подається на вимогу контрольних агенцій, інформацію щодо умов застосування даного продукту. Пакувальний матеріал даного винаходу запроваджує інструкції для пацієнта, як відтворити принаймні одне ΕΠΟ міметичне шарнірно-серцевинне міметитіло або визначену частину, або варіант у водному розріджувачі для одержання розчину та застосування даного розчину протягом періоду 2-24 години або більше для двохампульного вологого/сухого продукту. Для одноампульного продукту у вигляді розчину етикетка вказує, що такий розчин може застосовуватись протягом періоду 2-24 години або більше. Заявлені тут продукти придатні для фармацевтичного застосування людиною. Препарати даного винаходу можуть готуватись з використанням процесу, котрий включає змішування принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту та вибраного буферу, краще, фосфатного буферу, що містить сольовий розчин або вибрану сіль. Змішування принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту та буферу у водному розчиннику проводиться з використанням звичайних процедур розчинення та змішування. Для приготування придатного препарату, наприклад, відмірена кількість принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту у воді чи буфері об'єднується з потрібним буфером у воді у кількостях, що достатні для запровадження білка та буфера у потрібних концентраціях. Варіанти цього процесу зрозумілі звичайному фахівцеві у даній галузі. Наприклад, порядок додавання компонентів, коли використовуються допоміжні добавки, температура та рН, при яких готується даний препарат, є чинниками, котрі можуть бути оптимізовані відносно даної концентрації та використаних засобів застосування. Заявлені стійкі або консервовані препарати можуть бути, запроваджені пацієнтам у вигляді прозорих розчинів або у вигляді подвійних ампул, що включають ампулу ліофілізованого принаймні одного ΕΠΟ міметичного шарнірно-серцевинного міметитіла або визначеної частини, або варіанту, котрі відтворюються за допомогою другої ампули,