Засіб для інгібування ендометріозу

1. Применение соединения, имеюще го формулу 0CH2CH2-R' О где R1 и R3 независимо обозначают атом О и водорода, метил, -C-fC^Cg алкил) или О и -С-Аг, где Аг - необязательно замещенный фенил; R2 выбирают из группы, состоящей из пирролидино-и пиперидино-; или фармацевтически приемлемой соли или сольвата в качестве средства для ингибирования эндометриоза. 2. Применение по п. 1, о т л и ч а ющееся тем, что соединение присутст вует в виде его хлористоводородной соли. 3. Применение по п. 1, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что указанное назна чение является профилактическим. 4. Применение по п. 1, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что указанное соеди нение имеет формулу /—v у .0CH,C»v-N О: или представляет его хлористоводородную соль. Эндометриозом называют состояние острой дисменореи, которая сопровождает ся острой болью, кровотечением во внутриматочные массы или в брюшную по с 26930 лость и часто приводит к бесплодию. Причиной появления симптомов этого состояния является гетеротонический рост эндометриоидной ткани, который неадекватно отвечает нормальному гормональному контролю и происходит в неподходящих тканях. Вследствие неправильного места эндометриоидного роста, ткани, видимо, начинают посылать сигналы, напоминающие отклик на воспаление, что вызывает макрофаговую инфильтрацию и целый каскад событий, приводящих к инициированию болезненной реакции. Точная этиология этого заболевания еще не вполне ясна и его лечение посредством гормональной терапии весьма разнообразно, плохо охарактеризовано и, как отмечается, сопровождается нежелательными и возможно опасными побочными эффектами. Один из способов лечения этого заболевания состоит в использовании небольших доз эстрогена для подавления роста эндометриоидной ткани за счет обратного негативного воздействия на централизованное выделение гонадотропина, вызывающего последующее воспроизводство эстрогена яичниками; однако иногда для осуществления контроля за симптомами приходится использовать эстроген непрерывно Такое применение эстрогена часто приводит к нежелательным побочным эффектам и даже сопряжено с риском развития рака эндометриоидных тканей. Другой способ лечения заключается в продолжительном назначении прогестинов, которые вызывают аменорею и могут привести к регрессии роста эндометриоидных тканей за счет подавления выделения эстрогена яичниками Применение хронической терапии с использованием прогестина* часто сопровождается нежелательным побочным влиянием прогестинов на центральную нервную систему и часто приводят к бесплодию вследствие нарушения функции яичников. Третий способ лечения состоит в назначении слабых андрогенов, которые эффективны для контроля эндометриоза; однако они обладают сильным маскулинизующим действием. Некоторые случаи подобного лечения сопровождались при длительной терапии некоторой потерей костной массы. Таким образом, желательно находить новые способы лечения эндометриоза. Настоящее изобретение обеспечивает подавление эндометриоза, путем назначения человеку, который нуждается в по добном лечении, эффективного количества соединения формулы I и водорода, метил, С~(С1-С6 алкил) или осн2сн2- R (О 15 где R1 и R3 независимо обозначают атом О и -С-Аг, где Аг - необязательно замещенный фенил; R2 выбирают из группы, включающей пирролидино-группу и пиперидино-группу; 25 и его фармацевтически приемлемой соли и его сольвата. Изобретение основано на обнаружении того факта, что выбранная группа 2фенил-3-ароилбензотиофенов (бензотио30 фенов), а именно соединений по формуле 1, полезна для ингибирования эндометриоза. Способы лечения, основанные на настоящем изобретении, осуществляют на практике, назначая человеку, у которого 35 необходимо подавить эндометриоз, дозу соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли или его сольвата, которая необходима и достаточна для ингибирования эндометриоза. Термин 40 ингибирование используется в его обыч- * ном понимании, которое включает профилактическое лечение человека, у которого развивается эндометриоз, осуществление контроля и/или лечение уже развившего45 ся эндометриоза. В этом смысле настоящий способ лечения, в зависимости от необходимости, включает как медицинское терапевтическое, так и профилактическое воздействие. 50 В общем случае для получения лечебного состава соединение смешивают с обычными наполнителями, разбавителями или носителями и спрессовывают в виде таблеток, или готовят в виде эликси55 ров или растворов, удобных для орального назначения или вводят внутримышечно или внутривенно. Соединения можно вводить через кожу или же готовить в виде дозировочных форм для постепенного высвобождения препарата и т.п. 26930 Соединения, используемые в настоящем изобретении, могут быть получены по известным методикам, например, детально описанным в Патентах США № 4133814, № 4418068 и № 4380635, которые проводятся здесь для справки. В общем случае синтез начинают, исходя из бензо(Ь)тиофена, имеющего 6-гидроксильную группу и 2-(4-гидроксифенильную) группу. Исходное соединение защищают, алкилируют и удаляют защиту, получая соединения формулы I. Примеры получения указанных соединений приведены в Патентах США, приведенных выше. Замещенный фенил включает фенил, замещенный один раз или дважды (С1-С6) алкилом. (С1-С4)алкокси-группой, гидроксильной группой, нитро-группой, атомом хлора, атомом фтора или три(хлор или фтор)метилом. Соединения, используемые в настоящем изобретении образуют фармацевтически приемлемые соли присоединения с кислотой или основанием с широким кругом органических и неорганических кислот и оснований и включают физиологически приемлемые соли, которые часто используются в фармацевтической химии. Такие соли также являются частью настоящего изобретения. Типичными неорганическими кислотами, которые используются для образования таких солей, включают хлористоводородную, бромистоводородную, иодистоводородную, азотную, серную, фосфорную, гипофосфорную кислоту и т.п. Могут также использоваться соли, получаемые из неорганических кислот, таких как алифатические моно и дикарбоновые кислоты, фенилзамещенные алкановые кислоты, гидроксиалкановые кислоты и гидроксиалкандикарбоновые кислоты, ароматические кислоты, алифатические и ароматические сульфокислоты. Указанные фармацевтически приемлемые соли, таким образом, включают ацетаты, фенилацетагы, трифторацетаты, акрилаты, соли аскорбиновой кислоты, бензоаты, хлорбензоаты, динитробензоаты, гидроксибензоаты, метоксибензоаты, метилбензоаты, о-ацетоксибензоаты, соли нафатлин-2-бензойной кислоты, бромиды, изобутираты, фенилбутираты, бетаоксибутираты, соли бутин-1,4-дионовой кислоты, соли гексин-1,4-дионовой кислоты, соли каприновой кислоты, соли каприловой кислоты, хлориды, соли коричной кислоты, цитраты, формиаты, фумараты, соли гликолевой кислоты, соли гептанопой кислоты, соли гиппуровой кислоты, соли молочной кислоты, соли яблочной кислоты, соли малейновой кислоты, соли оксималеиновой кислоты, соли малоновой кислоты, соли миндальной кислоты, соли мезитилосюй кислоты, соли никоти5 новой кислоты, соли изо-никотиновой кислоты, нитраты, оксалаты, фталаты, терефталаты, фосфаты, моногидрофосфаты, дигидрофосфаты, метафосфаты, пирофосфаты, соли пропиоловой кислоты, соли про10 пионовой кислоты, соли фенилпропионовой кислоты, соли салициловой кислоты, соли себациновой кислоты, соли янтарной кислоты, соли пробковой кислоты, сульфаты, бисульфаты, пиросульфаты, 15 сульфиты, бисульфиты, сульфонаты, бензолсульфонаты, п-бромфенилсульфонаты, хлорбензолсульфонаты, этансульфонаты, 2-оксиэтансульфонаты, метансульфонаты, нафталин-1 -сульфонаты, нафталин-2-суль20 фонаты, п-толуолсульфонаты, ксилолсульфонаты, соли винной кислоты и т.д. Предпочтительными солями являются хлориды Фармацевтически приемлемые кислотноаддитивные соли обычно получают 25 взаимодействием соединения формулы f с эквимолярным или избыточным количеством кислоты. Реагенты обычно смешивают в подходящем для обоих компонентов растворителе, таком как диэтило30 вый эфир или бензол. Соль обычно выпадает в осадок из раствора в течение приблизительно от одного часа до 10 час и может быть выделена фильтрованием или же растворитель удаляют обычными спо35 собами. Основаниями, которые обычно используют для образования солей, являются гидроокись аммония и гидроксиды, карбонаты и бикарбонаты щелочных и щелочно40 земельных металлов, а также алифатические и первичные,вторичные и третичные амины, алифатические диамины и гидроксиалкиламины. Основания, особенно полезные для получения солей присоеди45 нения, включают гидроокись аммония, карбонат калия, бикарбонат натрия, гидроокись кальция, метиламин, диэтиламин, этилендиамин, циклогексиламин и этаноламин. 50 Фармацевтически приемлемые соли обычно имеют большую растворимость по сравнению с соединением, из которого они были образованы, и зачастую более полезны для приготовления составов в ви95 де жидкостей или эмульсий. Фармацевтические составы могут быть приготовлены известными способами. Например, соединения можно смешивать с обычными наполнителями, разбавителями, носителями и сформировать в виде таб 26930 леток, капсул, суспензий, порошков и т.п. Примерами связующих, разбавителей и носителей, пригодных для приготовления таких составов, являются следующие: связующие и инертные наполнители, такие 5 как крахмал, сахара, маниит и производные кремневой кислоты; связующие, такие как карбоксиметилцеллюлоза и другие производные целлюлозы, альгинаты, желатин и поливинилпирролидон; увлаж- 10 няющие средства, такие как глицерин; разрыхлители, такие как карбонат кальция и бикарбонат натрия; средства, замедляющие растворение, такие как парафин; вещества, способствующие быстрому вса- 15 сыванию, такие как четвертичные аммониевые соединения; поверхностно-активные вещества, такие как цетиловый спирт и моностеарат глицерина; сорбентные носители, такие как каолин и бентонит; сма- 20 зывающие средства, применяемые при приготовлении таблеток, такие как тальк, стеараты кальция и магния и полиэтиленгликоли. 25 Соединения можно также использовать для получения составов в виде эликсиров или растворов, пригодных для орального назначения или растворов для парентерального назначения, например, 30 внутримышечного, подкожного или внутривенного. Далее, соединения удобны для приготовления дозировочных форм, обеспечивающих медленное высвобождение препарата и т.п. Подобные составы могут 35 быть приготовлены таким образом, что они высвобождают активные ингредиенты в определенном месте желудочно-кишечного тракта или через определенный промежуток времени. Покрытия, оболочки и за- 40 щитные матрицы для них могут быть изготовлены, например, из полимерных веществ или восков. Конкретная доза соединения по формуле I, необходимая для ингибирования 45 эндометриоза, в соответствии с настоящим изобретением, будет зависеть от степени тяжесги состояния, пути введения и других связанных с этим факторов и будет определена лечащим врачом. В об- 50 щем случае допустимая и эффективная дневная доза составляет приблизительно от 0,1 до приблизительно 1000 мг/день, более типично приблизительно от 50 до приблизительно 200 мг/день. Эти дозы 55 могут быть назначены пациенту, которому необходимо подобное лечение, от одного до трех раз ежедневно или более часто для более эффективного ингибирования эндометриоза. 8 Предпочтительнее обычно назначать соединение по формуле І в виде кислотно-аддитивной соли, что является обычным при введении фармацевтических средств, содержащих группу, обладающую свойствами основания, например, пиперидиновое кольцо. Пожилым людям (например, женщинам после наступления климакса) предпочтительно также принимать указанное соединение орально. Для этого имеются следующие дозировочные формы. В представленных далее составах "активный ингредиент" означает соединение по формуле I. С о с т а в 1 Желатиновые капсулы Ингредиент К-во, Активный ингредиент Крахмал (чистота соответствует добавлениям к американской фармакопее) Способный течь порошок крахмала Кремнийорганическая жидкость с вязкостью 350 сСт м г/капсула 0,1-1000 0-650 0-650 0-15 Ингредиенты смешивают, просеивают через сито 45 меш и заполняют в оболочки из твердого желатина. Примерами приготовленных конкретных составов в виде капсул соединения формулы І, в которых R обозначает пиперидино-группу (ралоксифен), представлены ниже. С о с т а в 2 Ралоксифеновая капсула Ингредиент К-во, м г/капсула Ралоксифена 1 гидрохлорид Крахмал (чистота * соответствует добавлениям к американской 112 фармакопее) Способный течь порошок крахмала 225,3 Кремнийорганическая жидкость с вязкостью 1,7 350 сСт 26930 С о ст а в Ралоксифеновая капсула Ингредиент К-во, мг/капсула 5 Ралоксифена гидрохлорид Крахмал (чистота соответствует добавлениям к американской фармакопее) Способный течь порошок крахмала Кремнийорганическая жидкость с вязкостью 350 сСт 10 Конкретные составы, представленные выше, могут быть изменены в соответствующих пределах. Составы в виде таблеток готовят, ис5 пользуя приведенные ниже ингредиенты. С о с т а в 6 Таблетки to Ингредиент К-во, мг/таблетка 108 225,3 1,7 С ос та в Ралоксифеновая капсула К-ВО, Ингредиент мг/капсула Активный ингредиент Микрокристаллическаяя 15 целлюлоза Плавленный диоксид кремния Стеариновая кислота 0,1-1000 0-650 0-650 0-15 20 Компоненты смешивают и спрессовывают для образования таблетки. По другому способу таблетки, содержащие от 0,1 до 1000 мг активного ингредиента, 25 готовят следующим образом. С о с т а в Ралоксифена 7 Таблетки 10 гидрохлорид Крахмал (чистота соответствует добавлениям к американской фармакопее) Способный течь порошок крахмала Кремнийорганическая жидкость с вязкостью 350 сСт 30 Ингредиент К-во, мг/таблетка 103 225,3 1,7 С о с т а в Ралоксифеновая капсула Ингредиент К-во, мг/капсула Ралоксифенова 50 гидрохлорид Активный ингредиент Крахмал (чистота • соответствует добавлениям к 150 американской фармакопее) Способный течь порошок 397 крахмала Кремнийорганическая жидкость с вязкостью 3.0 350 сСт Ралоксифен гидрохлорид 35 Крахмал Микрокристаллическая целлюлоза Поливинилпирролидон 40 (в виде 10%-ного раствора в воде) Натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы Стеарат магния 45 Тальк 0,1-1000 45 35 4 4,5 0,5 1 Активный ингредиент, крахмал, тальк и целлюлозу просеивают через сито 45 50 меш и тщательно перемешивают. К полученной смеси порошков прибавляют раствор поливинилпирролидона и вновь просеивают через сито 14 меш. Полученные гранулы высушивают при 50-60°С и просеивают через сито 18 меш. К получен ным 55 гранулам прибавляют натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы, стеарат магния и тальк, предварительно просеянные через сито 60 меш и после смешения прессуют на специальной машине, получая таблетки. 11 26930 12 Начиная со следующего дня после Суспензии, каждая из которых содерпроведения операции животные из первой жит 0,1-1000 мг медицинского средства в и второй группы в течение 14 дн полу5-миллилитровой дозе, получают следуючают внутрибрюшинно инъекции воды, в щим образом. 5 то время как животные из третьей группы С о ст а в в течение этого же периода получают внут8 Суспензии рибрюшинно инъекции соединения по насИнгредиент К-во, тоящему изобретению в количестве 1,0 мг содерна килограмм веса тела. Через 14 дн 10 животных убивают и извлекают экспланжание в танты эндометриоидных тканей, надпочеч5 мл ники, оставшиеся части матки и яичника, Активный ингредиент 0,1-1000 мг у тех животных, у которых они сохраниНатриевая соль лись, и подготавливают их для проведе15 ния гистологических исследований. Яичкарбоксиметилцеллюлозы 50 мг ники и надпочечники взвешивают. Тест Патока 1,25 мг 2. Раствор бензойной В качестве подопытных животных искислоты 0,10 мл пользуют от двенадцати до тридцати взОтдушка g.v. 20 рослых женских особей крыс из CD поКраситель g/v. томства. Их делят на две равные группы. Очищенная вода В колиСледят за эстронным циклом всех животных. При наступлении проэстронного дня честве, каждую женскую особь подвергают хинеобходимом 25 рургической операции. Животным из каждля доведой группы удаляют левый отросток матдения объки, рассекают на небольшие квадраты и ема до 5 мл свободно вшивают эти квадраты в различных местах, примыкающих к мезентеЛекарство просеивают через сито 45 30 риальному кровяному потоку. Приблизительно через 50 дн после меш и смешивают с натриевой солью карпроведения животные, отнесенные к пербоксиметилцеллюлозы и патокой до обвой группе, получают внутривенно инъекразования однородной пасты. Добавляют ции воды в течение 21 дн, в то время как при перемешивании раствор бензойной кислоты, отдушку и краситель, разбавлен- 35 животные второй группы в течение этого же периода получают внутрибрюшинно инные небольшим количеством воды. Затем ъекции соединения по настоящему изобприбавляют достаточное количество воды ретению в количестве 1,0 мг на килогдля получения нужного объема. рамм веса тела. Через 21 дн проведения Методики испытаний. В Тестах 1 и 2 изучают влияние вве- 40 испытаний животных убивают, удаляют и взвешивают эксплантанты эндометриоиддения в течение 14 и 21 дн соединения ных тканей и надпочечники. Проводят запо настоящему изобретению на рост экспмеры эксплантантов в качестве свиделантантов эндометриоидных тканей, вытельства роста. Следят за экстронным цикращенных вне организма. 45 лом. Тест 1. Тест 3. В качестве подопытных животных исА. Хирургическое инициирование эндопользуют от двенадцати до тридцати взметриоза. рослых женских особей крыс из CD потомства. Их делят на три группы с равАутотрансплантанты эндометриоидных ным количеством животных в каждой груп- 50 тканей используют для инициирования эндометриоза у крыс и/или кроликов. пе. Следят за эстронным циклом всех животных. При наступлении проэстронноЖенские особи животных, способных даго дня каждую женскую особь подвергают вать потомство, подвергают двухстороннней овариэктомии и вводят экзогенно эстхирургической операции. Животным из каждой группы удаляют левый отросток 55 роген, поддерживая специфический и посматки, рассекают на небольшие квадраты тоянный уровень гормона. Аутогенные эндометриоидные ткани имплантируют в и свободно вшивают эти квадраты в различных местах, примыкающих к мезентебрюшину 5-150 животных и вводят эстрориальному кровяному потоку. Далее у крыс ген, вызывая рост имплантированных тканей. Проводят обработку соединением по второй группы удаляют яичники. 26930 13 настоящему изобретению, которое ежедневно в течение 3-16 нед вводят с помощью орошения в желудок, затем имплантанты удаляют и взвешивают для оценки прироста или регрессии. После того, как животных забивают, неповрежденный отросток матки удаляют и оценивают состояние эндометрия. В. Имплантация эндометриоидных тканей человека голым мышам. Патологические эндометриоидные ткани человека имплантируют в брюшину достигших половой зрелости кастрированных женских особей голых мышей. Вводят экзогенный эстроген для инициирования роста эксплантированных тканей В некоторых случаях перед имплантацией выделенные клетки эндометриоидных тканей предварительно выращивают в условиях tn vitro. Проводят обработку соединением по настоящему изобретению, которое ежедневно в течение 3-16 нед вводят с помощью орошения в желудок, затем имплантанты удаляют и взвешивают для оценки прироста или регрессии После того, как животных забивают, матки удаляют и оценивают состояние неповрежденного эндометрия Тест 4. А. Патологические эндометриоидные ткани человека отбирают и хранят в усло 14 виях in vitro в качестве первичных нетрансформированных культур. Хирургические образцы продавливают через стерильную ячеистую сетку или сито или каким5 либо иным путем получают препарат окружающих тканей для получения кнеточной суспензии. Клетки хранят в средг содержащей 10% сыворотки и антибиотики. Определяют скорости роста в при10 сутствии и в отсутствии эстрогена. Определяют способность клеток продуцировать компонент СЗ и их реакцию на действие факторов роста и гормона роста У культур, которые хранят в условиях in vitro 15 исследуют пролиферативную реакцию в процессе последующей обработки прогестинами. GnRH, соединением по настоящему изобретению и носителем Еженедельно изучают уровни рецепторов сте20 роидного гормона с целью установить, поддерживаются ли важнейшие характеристики клетки в условиях in vitro Используют клетки, полученные у 5-25 пациентов. 25 Активность, проявляемая в любом из указанных испытаний, свидетельствует о том, что соединения по настоящему изобретению полезны для лечения эндомет 30 риоза. Упорядник Техред М. Келемеш Коректор М.Куль Замовлення 540 Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, Київ-53, Львівська плм 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101