Лікарський засіб для профілактики і лікування порушень ліпоїдного і холестеринового обміну речовин і спосіб профілактики і лікування цих порушень

1. Лекарственное средство для профилактики и лечения нарушений липоидного и холестеринового обмена веществ, включающее активный компонент, и, при необходимости, целевые добавки, отличающееся тем, что в качестве активного компонента содержит галактуроновую кислоту или ее производные общей формулы (I) 35566 где: R1=Н или СН 3, R2=Н, R3=Н либо R1=CH2-R4, R2=Н, R3=Н, либо R1=Н или СН 3, один из R2 и R3=CH2-R4, тогда оставшийся из R2 и R3=Н , либо R1=H или СН3, тогда R2 и R3 вместе образуют остаток -O-CHR4-O-, и R4 представляет собою группу формулы: , где: R5=Н , СН3, -[СН2]m-СНОН-СН3 или -[СН2]m СН3, R6=-[СН2]m -СН3, m=1-5, или производное полигалактуроновой кислоты формулы (II), где: R1= СН3-R4, R2=Н, R3=Н, R'1=R, или Н, R'2=Н, R'3=Н, либо R1=Н или СН 3, один из R2 и R3=CH2-R4, тогда оставшийся из R2 и R3=Н , R'1=R1, R'2=R2, R'3=R3, либo R1=Н или СН3, тогда R2 и R3 вместе образуют остаток -O-CHR4-O-, и R4 представляет собою группу формулы: , где: R5=Н, СН3 -[СН2]m -СНОН-СН3 или -[СН2]m-СН3, R6=-[СН2]m -СH3, m=1-5 или полигалактуроновую кислоту или ее производные общей формулы (II): , где: R5=Н , СН3, -[СН2]m-СНОН-СН3 или -[СН2]m СН3, R6=-[СН2]m-СН3, m=1-5. 6. Лекарственное средство по п. 1, отличающееся тем, что в качестве активного компонента содержит смесь производных галактуроновой кислоты, полученную путем ферментирования пектина. 7. Способ профилактики и лечения нарушений липоидного и холестеринового обмена веществ, включающий назначение пациенту лекарственного средства, отличающийся тем, что лекарственным средством является средство, содержащее в качестве активного компонента галактуроновую кислоту или ее производные общей формулы (I): , (II) где: R1=Н или СН 3, R2=Н, R3=Н , R'1=Н или СН 3, R'2=Н , R’3=Н, либо R1=CH2-R4, R2=Н, R3=Н , R'1=R1 или Н, R'1=Н , R'3=Н, либо R1=Н или СН 3, один из R2 и R3=CH2-R4, тогда оставшийся из R2 и R3=Н, R'1=R1, R'2=R2, R'3=R3, либо R1=Н или СН 3, тогда R2 и R3 вместе образуют остаток -O-CHR4-O-, и R4 представляет собою группу формулы: , где: R5=Н , СН3, -[CH2]m-CHOH-CH3 или -[СН2]m СН3, R6=-[СН2]m-СН3, m=1-5, или их смеси в эффективном количестве, и, при необходимости, целевые добавки. , (I) вания холестеринемии при богатом жирами питании нарушается, и это приводит к непрерывному повышению холестерина плазмы крови. Труднорастворимый холестерин располагается в сосудистых стенках аорты, в роговой оболочке глаза и в хрусталике глаза. Повышенные уровни холестерина в крови, по меньшей мере, частично несут ответственность за образование артериальных склерозов сосудов. Гиперхолестеринемия представляет гиперлипидемию, всегда сопровождающую нарушение обмана веществ, которое может быть очень ярко выражено, например, при сахарном диабете. Различные, с точки зрения патогенеза, имеющие похожие симптомы картины болезней гипертриглицеридемии-гиперлипидемии, т.е. помутнение сыворотки крови благодаря хиломикронам (богатые нейтральным жиром капельки с диаметром до 1 нм) и гиперхолестеринемии, т.е. повышение содержания холестерина в плазме крови до выше 200 мг объединяют под общим понятиями гиперлипопротеинемии или гиперлипидемии (ср. Pschyrembel, Клинический словарь). Изобретение относится к назначаемому орально лекарственному средству для лечения и профилактики нарушений обмена веществ, особенно для влияния на липоидный и холестериновий обмен веществ, т.е. гиперлипидемии и атеросклероза. Уже давно в западных промышленно-развитых странах наблюдается быстрый рост нарушений обмена веществ, особенно нарушений жирового обмена, основной причиной которых является усиленное питание при одновременной ограниченной подвижности. Постепенно образуются повышенные уровни определенных липидов в крови, которые увеличивают риск атеросклеротических сердечных и периферических заболеваний сосудов, при этом жиры переносятся циркуляцией крови в форме мельчавших капелек (хиломикроны), которые стабилизированы протеиновой пленкой (a- или b-глобулин). Обильное потребление мяса часто приводит к передозировке холестерина, так как этот стероид уже в достаточном количестве биосинтезируется в печени человека. Природный механизм регулиро 2 35566 Для лечения гиперлипопротеинемии до настоящего времени применяют преимущественно сложные этиловые эфиры a-(п-хлорфенокси)изомасляной кислоты, соли a-(п-хлорфенокси)изомасляной кислоты и никотиновую кислоту, а также производные никотиновой кислоты, искусственные анионообменные смолы и многочисленные комбинированные препараты. Искусственные анионообменные смолы по причине своих химических и физических свойств часто приводят к значительным желудочно-кишечным недугам. На основании своих анионообменных свойств они могут оказывать отрицательное влияние на рассасывание других лекарственных средств и природных минералов. Лекарственные средства на растительной основе, которые можно применять для лечения вышеназванных нарушений обмена, веществ, до сих пор не известны. Теперь неожиданно было найдено, что галактуроновая кислота показывает гипохолестеринемические действие. Хотя в описании к заявке Японии А-59206045 упоминается полезность полимеров галактуроновой кислоты для профилактики и лечения гиперлипидемии и атеросклероза. Но исключительно в сочетании с экстраполярным применением. При таком образе действий у пациента берут кровь, которую разделяют - вне органами - на клеточную фракцию и сыворотку. При этом сыворотку пропускают через адсорбционную колонну, где, в частности, адсорбируются липопротеины низкой плотности (LDL). Материалы колонны содержит носитель, заряженный полианионами, которые также могут представлять собой полигалактуроновые кислоты. При прохождении через колонну содержащиеся в сыворотке LDL связываются полигалактуроновыми кислотами и, таким образом, извлекаются из сыворотки. Очищенную таким образом сыворотку впоследствии опять смешивают с клеточным материалом и вливают пациенту. Согласно FR-A-2103290 волокнистые соединения полигалактуроновой кислоты, эстерефицированные метанолом, начинают работать с помощью 1,4 a-связи. Однако, предпринятое научное описание не является соответствующим. Волокнистая модификация, т.е. пектин, согласно объяснению самого изобретателя, в воде только набухает, а не растворяется, и практически не может быть переработана в терапевтические дозы. При помощи описанных ниже опытов было доказано, что прием галактуроновой кислоты или известных производных этой кислоты приводит к заметному снижению сывороточного холестерина, что, следовательно, это соединение или класс соединений очень хорошо пригодны для лечения гиперлипидемии. Таким образом, изобретение направлено прежде всего на лекарственное средство для профилактики и лечения нарушений липоидного и холестеринового обмена веществ которое в качестве активного компонента содержит эффективное количество галактуроновой кислоты или ее производное общей формулы (I): , (I) где: R1=Н или СН 3, R2=Н, R3=Н либо R1=CH2-R4, R2=Н, R3=Н, либо R1=Н или СН 3, один из R2 и R3=CH2-R4, тогда оставшийся из R2 и R3=Н , либо R1=H или СН3, тогда R2 и R3 вместе образуют остаток -O-CHR4-O-, и R4 представляет собою группу формулы: , где: R5=Н, СН3 -[СН2]m -СНОН-СН3 или -[СН2]m-СН3, R6=-[СН2]m -СH3, m=1-5 или полигалактуроновую кислоту или ее производные общей формулы (II): , (II) где: R1=Н или СН 3, R2=Н, R3=Н , R'1=Н или СН 3, R'2=Н , R’3=Н, либо R1=CH2-R4, R2=Н, R3=Н , R'1=R1 или Н, R'1=Н , R'3=Н, либо R1=Н или СН 3, один из R2 и R3=CH2-R4, тогда оставшийся из R2 и R3=Н, R'1=R1, R'2=R2, R'3=R3, либо R1=Н или СН 3, тогда R2 и R3 вместе образуют остаток -O-CHR4-O-, и R4 представляет собою группу формулы: , где: R5=Н , СН3, -[CH2]m-CHOH-CH3 или -[СН2]m СН3, R6=-[СН2]m-СН3, m=1-5. Особенно предпочтительным вариантом осуществления изобретения является применение подвергнутого ферментации пектина для указанной цели. Пектин можно также сравнительно просто преобразовывать ферментацией, в основном, до a-D-галактуроновой кислоты. Наконец, изобретение относится также ещё к способу профилактики и лечения нарушений липоидного и холестеринового обмена веществ, включающий назначение пациенту лекарственного средства содержащего эффективное количество галактуроновой кислоты или ее производное общей формулы (I): , (I) 3 35566 где: R1=Н или СН 3, R2=Н, R3=Н либо R1=CH2-R4, R2=Н, R3=Н, либо R1=Н или СН 3, один из R2 и R3=CH2-R4, тогда оставшийся из R2 и R3=Н , либо R1=H или СН3, тогда R2 и R3 вместе образуют остаток -O-CHR4-O-, и R4 представляет собою группу формулы: мономера галактуроновой кислоты снижающее холестерин действие в модели хомяка может приблизительно удваиваться. Следовало бы упомянуть также, что вместо aD-галактуроновой кислоты можно было бы применять также b-D-галактуроновую кислоту по изобретению. Однако последняя значительно дороже, так что, как правило, по изобретению применяют a-D-галактуроновую кислоту. Изложенные ниже опыты ясно доказывают, что прием галактуроновой кислоты приводит к значительному снижению концентраций холестерина и липидов, которые по меньшей мере частично несут ответственность за возникновение гиперлипидемии и/или атеросклероза. Приведенные ниже результаты опытов показывают, что все исследованные здесь вещества, которые содержат a-D-галактуроновую кислоту, являются эффективными. Метилирование кислотной группы галактуроновой кислоты лишь незначительно влияет на действие a-D-галактуроновой кислоты, a-D-галактуроновая кислота в качестве мономера, так и в качестве полимера имеет приблизительно одинаковую эффективность. В результате ферментации пектина также образуется, в основном, галактуроновая кислота, так что можно применять ферментированный пектин. Однако замещение анионо-обменной группы ещё раз определенно повышает эффективность. Это повышение обусловлено анионо-обменной емкостью третичного азота ДЕАЕ-боковой группы. Повышения эффективности наверняка достигают также другими, содержащими третичные или четвертичные амины анионо-обменными группами. По этим причинам очевидно, что все заявленные вещества как и гиполипидемические и антиатаросклеротические лекарственные средства являются эффективными. Фармакологическое испытание. Галактуроновая кислота и ее производные, как правило, хорошо переносимы. ЛД50 полимеров галактуроновой кислоты составляет значительно выше 10 г/кг у крыс, хомяков и кроликов. И другие вышеназванные соединения имеют подобную хорошую совместимость. Благодаря их родству или принадлежности к природным компонентам пищи гарантирована безопасность соединений. Предклиническое испытание. Опыт-1: По 20 золотистых хомяков мужского пола в 3 группах кормили 4 недели липидемической диетой (диета при содержании хомяков и 2% холестерина). Корм двух групп, которые лечили, обогащали дополнительно по 3% галактуроновой кислоты или ДЕАЕ-полигалактуроновой кислоты (ДЕАЕ и д = этиламиноэтил). Принимаемая доза составляло между 4 и 5 г/кг веса тела в сутки. Через 4 недели животных умерщвляли и измеряли концентрацию липида в сыворотке крови и в печени. Результаты анализов обобщены в таблица 1, 2 и 3. Галактуроновая кислота после четырехнедельного лечения значительно снижает в сыворотке крови концентрацию общего холестерина на 20%, HDL-холестерина на 20%, LDL-холестерина на 23%, VLDL- и LDL-холестерина на 20% и сво , где: R5=Н, СН3 -[СН2]m -СНОН-СН3 или -[СН2]m-СН3, R6=-[СН2]m -СH3, m=1-5 или полигалактуроновую кислоту или ее производные общей формулы (II): , (II) где: R1=Н или СН 3, R2=Н, R3=Н , R'1=Н или СН 3, R'2=Н , R’3=Н, либо R1=CH2-R4, R2=Н, R3=Н , R'1=R1 или Н, R'1=Н , R'3=Н, либо R1=Н или СН 3, один из R2 и R3=CH2-R4, тогда оставшийся из R2 и R3=Н, R'1=R1, R'2=R2, R'3=R3, либо R1=Н или СН 3, тогда R2 и R3 вместе образуют остаток -O-CHR4-O-, и R4 представляет собою группу формулы: , где: R5=Н , СН3, -[CH2]m-CHOH-CH3 или -[СН2]m СН3, R6=-[СН2]m-СН3, m=1-5. В противоположность чисто синтетическим медикаментам вышеназванные вещества принадлежат к природным компонентам пищи. Полимеры галактуроновой кислоты находятся в близкой связи с пектинами, которые встречаются почти во всех растительных компонентах. Соединения могут назначаться орально как грануляты, сироп или суспензии. Для лечения и предотвращения болезненных течений биоморфозы особенно липидного баланса, как нарушений обмена веществ и изменений в сосудах при атеросклерозе, изменений сосудов при диабете, нарушений кровоизлияния в сетчатку, назначают, в среднем, ежедневно около 10-50 г активного вещества по изобретению. Лекарства назначают перед основным приёмом пищи. В изложенных ниже опытах было доказано, что a-D-галактуроновая кислота, мономер пектина, показывает гипохолестеринемическое действие в сыворотке крови. Галактуроновая кислота в противоположность пектина хорошо растворима в воде и может поэтому, как упомянуто, не вызывать никаких проблем при приеме. Лечение холестеринемии при помощи a-D-галактуроновой кислоты почти не вызывает проблем. Токсические эффекты неизвестны, a-D-галактуроновая кислота представляет сахар, который очень часто встречается во многих растениях. В результате ацетальобразного связывания ДЕАЕ-анионо-обменной группы с двумя из трех С-О-групп пектинового 4 35566 Полигалактуроновая кислота снизила значительно в сыворотке крови после четырехнедельного лечения в противоположность контрольным животным общий холестерин на 13%, HDL-холестерин на 15% и свободный холестерин на 32%, а также общую концентрацию липидов на 14% и концентрацию фосфолипидов на 19% (p^0,05 таблица 4 и 5). Далее, лечение полигалактуроновой кислотой значительно снижало концентрацию холестерина в печени на 26% и концентрацию всего липида в печени на 25%. Сложный метиловый эфир полигалактуроновой кислоты после четырехнедельного лечения значительно снижал в сыворотке крови концентрацию общего холестерина (-24%), HDL - (-24%), LDL - (-23%), VLDL - (-44%), VLDL-плюс LDL - (22%) и свободного холестерина (41%) (таблица 4). Далее, сложный метиловый эфир полигалактуроновой кислоты значительно снижал в сыворотке крови концентрацию общих липидов на 13% и фосфолипидов на 23% (табл. 5). В печени сложный метиловый эфир полигалактуроновой кислоты значительно снижал концентрацию холестерина на29% и концентрацию всех липидов на 32%. Получение ферментативного пектина: Применяют 50 ммол NaH2PО4 - буферного раствора с рН 4,5, 60°С и 1 г пектиназы/л (пектиназа 5S, Serva Aspergillus niger, 0,66 единиц/мг). В этот раствор постепенно замешивают в течение нескольких часов пектин до конечной концентрации около 500 г/л и на 1 кг пектина добавляют 10 г пектиназы. Величина рН 4,5 устанавливается добавлением 5-молярного NaOH. Таблица 1 бодного холестерина на 19% (p£0,05). Кроме того, галактуроновая кислота значительно снижала в сыворотка крови общую концентрацию липида на 18% и концентрацию фосфолипида на 17%. Далее, была еще значительнопонижена общая концентрация липида в печени на 34%. ДЕАЕ-полигалактуроновая кислота после четырехнедельного лечения значительно снижала в сыворотке крови концентрацию всего холестерина на 43%, HDL-холестерина не 47%, LDL-холестерина на 46%, VLDL-холестерина на 24% и VLDLплюс LDL-холестерина на 41% по сравнению с контрольными животными. Кроме того, была еще значительно снижена общая концентрация липидов на 37% и концентрация фосфолипидов на 41 % по сравнению с контрольными животными. Концентрация холестерина в печени была значительно снижена у животных, которых лечили при помощи ДЕАЕ-полигалактуроновой кислоты, на 21% и общая концентрация липидов в печени на 44% в противоположность контрольным животным. Опыт 2: По 20 золотистых хомяков мужского пола в 3 группах лечили 4 недели как описанных в опыте 1. Группу 2 лечили при помощи 5%-ной полигалактуроновой кислоты, группу 3 лечили при помощи 5%-ного сложного метилового эфира полигалактуроновой кислоты в корме. Группа 1 была контролем липидемии. Концентрации липида в сыворотке крови и в печени после четырехнедельного лечения обобщены в таблице 4,5,6. Концентрация холестерина в сыворотке крови хомяка после четырехнедельного лечения (n=20/группа) Средние величины [мг/дл] ± стандартное отклонение (SD) Контроль Галактуроновая кислота Общий холестерин 340 271* ДЕАЕ-полигалактуроновая кислота 193* SD ±53 ±31 ±40 -20 -43 D HDL-холестерин 148 118* 79* SD ±23 ±21 ±13 -20 -47 LDL-холестерин 151 117* 82* SD ±42 ±24 ±24 D -23 -46 VLDL-холестерин D 42 36 32* SD ±10 ±12 ±8 -14 -24 D VLDL-+LDL-холестерин 192 153* 114* SD ±47 ±22 ±30 -20 -41 D 5 35566 Продолжение таблицы 1 Контроль Галактуроновая кислота Свободный холестерин 118 96* ДЕАЕ-полигалактуроновая кислота 103 SD ±28 ±19 +20 -19 -13 D D=разность в %, в пересчете на контрольною группу * значимость р£0,05. Таблица 2 Концентрация липидов в сыворотке крови хомяка после четырехнедельного лечения (n=20/группа) Средние величины [мг/дл] ± стандартное отклонение (SD) Контроль Галактуроновая кислота Общие липиды 1295 1060* ДЕАЕ-полигалактуроновая кислота 819* SD ±177 ±153 ±135 -18 -37 D Фосфолипиды 389 322* 228* SD ±48 ±40 ±31 -17 -41 D Триглицериды 202 216 188 SD ±76 ±82 ±53 +7 -7 D Таблица 3 Концентрация липидов в печени (мг/г мокрый вес) хомяков после четырехнедельного лечения (n=20/группа) Средние величины [мг/г мокрый вес] ± стандартное отклонение (SD) Контроль Галактуроновая кислота Холестерин 30 27 ДЕАЕ-полигалактуроновая кислота 24* SD ±3 ±6 ±8 -9 -21 Общие липиды 169 111* 94* SD ±22 ±25 ±33 -34 -44 D D D=разность в % в пересчете на контрольною группу * значимость р£0,05 Таблица 4 Концентрация холестерине в сыворотка крови хомяка после четырехнедельного лечения (n=20/группа) Средние величины [мг/дл] ± стандартное отклонение (SD) Общий холестерин 414 Сложный метиловый эфир полигалактуроновой кислоты 314* SD ±54 ±44 -24 -13 HDL-холестерин 175 135* 149* SD ±26 ±19 ±23 -24 -15 Контроль D D 6 Полигалактуроновая кислота 361* ±49 35566 Продолжение табл. 4 Контроль LDL-холестирин 193 Сложный метиловый эфир полигалактуроновой кислоты 153* SD ±63 ±36 ±38 -23 -18 VLDL-холестерин 50 28* 48 SD ±24 ±12 ±16 D D Полигалактуроновая кислота 163 -44 -4 VLDL - + LDL-холестерин 231 181* 212 SD ±47 ±41 ±42 -22 -8 D Свободный холестерин 117 69* 80* SD ±17 ±10 ±13 -41 -32 D D=разность в % в пересчете из контрольную группу * значимость р£0,05. Таблица 5 Концентрация липидов в сыворотке крови хомяка после четырехнедельного лечения (n=20/группа) Средние величины [мг/дл] ± стандартное отклонение (SD) Общие липиды 1563 Сложный метиловый эфир полигалактуроновой кислоты 1286* SD ±151 ±181 -13 -14 Фосфолипиды 474 365* 385* SD ±52 ±44 ±47 Контроль D D Полигалактуроновая кислота 1338* ±201 -23 -19 Триглицериды 270 265 269 SD ±59 ±80 ±89 -2 D Таблица 6 Концентрация липидов в печени (мг/г мокрый вес) у хомяков после четырехнедельного лечения (n=20/группа) Средние величины [мг/г] мокрый вес ± стандартное отклонение (SD) Холестерин 30,0 Сложный метиловый эфир полигалактуроновой кислоты 21,3* SD ±3,8 ±7,3 ±4,9 -29 -26 Контроль D Полигалактуроновая кислота 22,1* Общие липиды 89,4 60,4* 67,4* SD ±11,6 ±17,4 ±23,0 -32 -25 D D=разность в % в пересчете на контрольную группу * значимость р£0,05. 7 35566 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 8