Спосіб та композиція для боротьби з бур’янами (варіанти)
Номер патенту: 116093
Опубліковано: 12.02.2018
Автори: Ван Дафу, Фіннессі Джон Дж., Тао Ненгбінг, Капур Махак, Адер Даніель, Лі Чжаолун, Шан Ронак Хасмукх
Формула / Реферат
1. Спосіб контролю за ростом бур’янистої рослини, який включає місцеве застосування до поверхні бур’янистої рослини композиції, що містить полінуклеотид і агент перенесення, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена протопорфіриноген ІХ (ППГ-оксидази) або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена ППГ-оксидази, де вказану послідовність гена ППГ-оксидази вибирають із групи, яка складається з SEQ ID NOs: 7-12, 14, 15, 17, 20, 29-34, 36-57, 59 і 61-71, де вказаний агент перенесення готує вказану поверхню вказаної бур’янистої рослини для проникнення вказаного полінуклеотиду, внаслідок чого ріст, розвиток або репродуктивна здатність вказаної бур’янистої рослини знижується, або вказана рослина стає сприйнятливішою до гербіциду, що є інгібітором ППГ-оксидази, порівняно з необробленою бур’янистою рослиною.
2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вказаний агент перенесення являє собою кремнійорганічну поверхнево-активну композицію або кремнійорганічну сполуку, що міститься в ній.
3. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид складається зі щонайменше 18 безперервних нуклеотидів, щонайменше 19 безперервних нуклеотидів, щонайменше 20 безперервних нуклеотидів або щонайменше 21 безперервного нуклеотиду у довжину.
4. Спосіб за п. 3, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид вибирають із групи, що містить смислову одноланцюгову ДНК (олДНК), антисмислову олДНК, смислову одноланцюгову РНК (олРНК), антисмислову олРНК, дволанцюгову РНК (длРНК) і дволанцюгову ДНК (длДНК) і гібрид длДНК/РНК.
5. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вказану рослину вибирають із групи, що складається з Amaranthus albus, Amaranthus graecizans, Amaranthus hybridus, Amaranthus lividus, Amaranthus palmeri, Amaranthus rudis, Amaranthus spinosus, Amaranthus thunbergii, Amaranthus viridis, Ambrosia trifida, Chenopodium album, Commelina diffusa, Conyza canadensis, Digitaria sanguinalis, Euphorbia heterophylla, Kochia scoparia і Lolium multiflorum.
6. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вказана композиція додатково містить вказаний гербіцид, який є інгібітором ППГ-оксидази.
7. Спосіб за п. 6, який відрізняється тим, що вказана композиція додатково містить один або декілька гербіцидів, відмінних від вказаного гербіциду, що є інгібітором ППГ-оксидази.
8. Спосіб за п. 3, який відрізняється тим, що вказана композиція містить будь-яку комбінацію з двох або більше вказаних полінуклеотидів.
9. Композиція для місцевого застосування на поверхні бур’янистої рослини, яка містить полінуклеотид та агент перенесення, яка відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена ППГ-оксидази або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена ППГ-оксидази, де вказану послідовність гена ППГ-оксидази вибирають із групи, яка складається з SEQ ID NOs: 7-12, 14, 15, 17, 20, 29-34, 36-57, 59 і 61-71, де вказаний агент перенесення готує вказану поверхню вказаної бур’янистої рослини для проникнення вказаного полінуклеотиду, внаслідок чого ріст або розвиток, або репродуктивна здатність вказаної бур’янистої рослини зменшується, або вказана рослина внаслідок використання композиції, що містить полінуклеотид, стає сприйнятливішою до гербіциду, який є інгібітором ППГ-оксидази, або гербіциду, що є інгібітором мітозу, порівняно з необробленою рослиною.
10. Композиція за п. 9, яка відрізняється тим, що вказаний агент перенесення являє собою кремнійорганічну композицію.
11. Композиція за п. 9, яка відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид складається зі щонайменше 18 безперервних нуклеотидів, щонайменше 19 безперервних нуклеотидів, щонайменше 20 безперервних нуклеотидів або щонайменше 21 безперервного нуклеотиду у довжину.
12. Композиція за п. 9, яка відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид вибирають із групи, що складається з SEQ ID NOs: 72-75, 84, 85, 88, 89, 96, 97, 102-105, 116, 117, 120-129, 132, 133, 138, 139, 142, 143, 146-149, 158, 159, 162, 163, 166-171, 178-181, 184-425, 428-431, 436, 437, 440-523, 530, 531, 534, 535, 542, 543, 548-551, 554, 555, 560-565, 568, 569, 572-579, 584-587, 592-595, 602, 603, 608-611, 618, 619, 626, 627, 630-733, 736-747, 750-1305 і 1308-1381.
13. Композиція за п. 9, яка відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид вибирають із групи, що складається з SEQ ID NOs: 1382-1413, 1415-1452, 1454, 1456-1465, 1467-1470, 1472-1483, 1485-1523, 1525-1564, 1566-1574, 1576-1594, 1596-1602, 1604-1630, І632-1656, 1658-1676, 1678-1717, 1719-1735, 1737, 1738, 1740-1813, 1815-1865, 1867-1963, 1965-1978, 1980-2010, 2012-2088, 2090 і 2092-2213.
14. Композиція за п. 9, яка додатково включає вказаний гербіцид, що є інгібітором ППГ-оксидази.
15. Композиція за п. 14, яка відрізняється тим, що вказаний інгібітор ППГ-оксидази вибирають із групи, що складається з таких речовин як: ацифлуорфен натрію, біфенокс, хлометоксифен, хлорнітрофен, етоксифен-етил, флуороглікофен-етил, фомесафен, галосафен, лактофен, оксифлуорфен, флуазолат, пірафлуфен-етил, цинідон-етил, флуміоксазин, флуміклорак-пентил, флутіацет-метил, тидіазимін, оксадіазон, оксадіаргіл, піраклоніл, флуфенпір-етил, азафенідин, карфентразон-етил, сафлуфенацил, сульфентразон, пентоксазон, бензфендизон, бутафенацил, піразогіл і профлуазол.
16. Композиція за п. 14, яка додатково включає сумісний гербіцид.
17. Спосіб зниження експресії гена ППГ-оксидази у бур’янистої рослини, що включає місцеве застосування до поверхні бур’янистої рослини композиції, яка містить полінуклеотид та агент перенесення, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена ППГ-оксидази або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена ППГ-оксидази, де вказану послідовність гена ППГ-оксидази вибирають із групи, яка складається з SEQ ID NOs: 7-12, 14, 15, 17, 20, 29-34, 36-57, 59 і 61-71, де вказаний агент перенесення готує вказану поверхню вказаної бур’янистої рослини для проникнення вказаного полінуклеотиду, внаслідок чого вказана експресія вказаного гена ППГ-оксидази зменшується порівняно з необробленою бур’янистою рослиною.
18. Спосіб за п. 17, який відрізняється тим, що вказаний агент перенесення являє собою кремнійорганічну сполуку.
19. Спосіб за п. 17, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид складається зі щонайменше 19 безперервних нуклеотидів, щонайменше 20 безперервних нуклеотидів або щонайменше 21 безперервного нуклеотиду у довжину.
20. Спосіб за п. 17, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид вибирають із групи, що містить смислову олДНК, антисмислову олДНК, смислову олРНК, антисмислову олРНК, длРНК, длДНК і гібрид длДНК/РНК.
21. Мікробна касета експресії, яка містить полінуклеотид, що складається зі щонайменше 18 безперервних нуклеотидів, щонайменше 19 безперервних нуклеотидів, щонайменше 20 безперервних нуклеотидів або щонайменше 21 безперервного нуклеотиду у довжину, ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена ППГ-оксидази, вибраної із групи, яка складається з SEQ ID NOs: 7-12, 14, 15, 17, 20, 29-34, 36-57, 59 і 61-71.
22. Спосіб отримання полінуклеотиду, який включає: а) трансформацію мікробної касети експресії за п. 21 у мікроб, б) вирощування вказаного мікроба, в) збирання полінуклеотиду з вказаного мікроба.
23. Спосіб визначення полінуклеотидів для модуляції експресії гена ППГ-оксидази при зовнішній обробці бур’янистої рослини, який включає: а) надання декількох полінуклеотидів, що містять ділянку, ідентичну або комплементарну до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена ППГ-оксидази, вибраної із групи, яка складається з SEQ ID NOs: 7-12, 14, 15, 17, 20, 29-34, 36-57, 59 і 61-71; б) місцеве застосування до поверхні бур’янистої рослини композиції, яка містить один або більше полінуклеотидів і агент перенесення; в) аналіз вказаної бур’янистої рослини або екстракту бур’янистої рослини для модуляції експресії гена ППГ-оксидази, де вказаний агент перенесення готує вказану поверхню вказаної бур’янистої рослини для проникнення вказаних одного або більше полінуклеотидів; г) завдяки яким у бур’янистої рослини, обробленої вказаною композицією, ріст або розвиток, або репродуктивна здатність регулюється, пригнічується або сповільнюється, або вказана бур’яниста рослина внаслідок використання композиції, що містить полінуклеотид, стає сприйнятливішою до гербіциду, що є інгібітором ППГ-оксидази, або гербіциду, що є інгібітором мітозу, порівняно з необробленою рослиною.
24. Спосіб за п. 23, який відрізняється тим, що вказану бур’янисту рослину вибирають із групи, яка складається з Amaranthus albus, Amaranthus graecizans, Amaranthus hybridus, Amaranthus lividus, Amaranthus palmeri, Amaranthus rudis, Amaranthus spinosus, Amaranthus thunbergii, Amaranthus viridis, Ambrosia trifida, Chenopodium album, Commelina diffusa, Conyza canadensis, Digitaria sanguinalis, Euphorbia heterophylla, Kochia scoparia і Lolium multiflorum.
25. Спосіб за п. 23, який відрізняється тим, що експресія гена ППГ-оксидази знижується порівняно з бур’янистою рослиною, яка не була оброблена вказаною композицією.
26. Спосіб за п. 23, який відрізняється тим, що вказаний агент перенесення являє собою кремнійорганічну сполуку.
27. Сільськогосподарська хімічна композиція для місцевого застосування на поверхні бур’янистої рослини, що містить полінуклеотид, гербіцид, що є інгібітором ППГ-оксидази, агент перенесення та сумісний гербіцид, яка відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена ППГ-оксидази або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена ППГ-оксидази, де вказану послідовність гена ППГ-оксидази вибирають із групи, яка складається з SEQ ID NOs: 7-12, 14, 15, 17, 20, 29-34, 36-57, 59 і 61-71, де вказаний агент перенесення готує вказану поверхню вказаної бур’янистої рослини для проникнення вказаного полінуклеотиду, внаслідок чого ріст, розвиток або репродуктивна здатність вказаної бур’янистої рослини зменшується, або вказана рослина внаслідок використання композиції, що містить полінуклеотид, стає сприйнятливішою до гербіциду, який є інгібітором ППГ-оксидази, або гербіциду, що є інгібітором мітозу, порівняно з необробленою рослиною.
28. Сільськогосподарська хімічна композиція за п. 27, яка відрізняється тим, що сумісний гербіцид вибирають із групи, яка включає амідні гербіциди, миш'якові гербіциди, гербіциди на основі бензотіазолу, гербіциди на основі бензоїлциклогександіону, гербіциди на основі бензофуранілалкілсульфонату, гербіциди на основі циклогексеноксиму, гербіциди на основі циклопропілізоксазолу, гербіциди на основі дикарбоксиміду, гербіциди на основі динітроаніліну, гербіциди на основі динітрофенолу, гербіциди на основі дитіокарбамату, гербіциди на основі гліцину, галогеновані аліфатичні гербіциди, гербіциди на основі імідазолінону, неорганічні гербіциди, нітрильні гербіциди, фосфорорганічні гербіциди, гербіциди на основі оксадіазолону, гербіциди на основі оксазолу, феноксигербіциди, гербіциди на основі фенілендіаміну, гербіциди на основі піридазину, гербіциди на основі піридазинону, піридинові гербіциди, гербіциди на основі піримідиндіаміну, гербіциди на основі піримідинілоксибензиламіну, четвертинні амонієві гербіциди, гербіциди на основі тіокарбамату, гербіциди на основі тіокарбонату, гербіциди на основі тіосечовини, триазинові гербіциди, гербіциди на основі триазинону, гербіциди на основі триазолону, гербіциди на основі триазолопіримідину, гербіциди на основі урацилу і гербіциди на основі сечовини.
29. Сільськогосподарська хімічна композиція для місцевого застосування на поверхні бур’янистої рослини, що містить полінуклеотид та гербіцид, що є інгібітором ППГ-оксидази, агент перенесення і пестицид, яка відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена ППГ-оксидази або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена ППГ-оксидази, де вказану послідовність гена ППГ-оксидази вибирають із групи, яка складається з SEQ ID NOs: 7-12, 14, 15, 17, 20, 29-34, 36-57, 59 і 61-71, де вказаний агент перенесення готує вказану поверхню вказаної бур’янистої рослини для проникнення вказаного полінуклеотиду, внаслідок чого ріст або розвиток, або репродуктивна здатність вказаної бур’янистої рослини зменшується, або вказана бур’яниста рослина внаслідок використання вказаної композиції, що містить полінуклеотид, стає сприйнятливішою до гербіциду, який є інгібітором ППГ-оксидази, або гербіциду, що є інгібітором мітозу, порівняно з необробленою бур’янистою рослиною.
30. Сільськогосподарська хімічна композиція за п. 29, яка відрізняється тим, що вказаний пестицид вибирають із групи, яка включає інсектициди, фунгіциди, нематоциди, бактерициди, акарициди, регулятори росту, хемостерилізатори, хімічні сигнальні речовини, репеленти, атрактанти, феромони, стимулятори поїдання і біопестициди.
31. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид є ідентичним або комплементарним до щонайменше 18 суміжних нуклеотидів вказаного РНК-транскрипту вказаної послідовності гена ППГ-оксидази.
32. Спосіб за п. 17, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид є ідентичним або комплементарним до щонайменше 18 суміжних нуклеотидів вказаного РНК-транскрипту вказаної послідовності гена ППГ-оксидази.
Текст
Реферат: UA 116093 C2 (12) UA 116093 C2 Винахід стосується способу контролю за ростом бур’янистої рослини, який включає місцеве застосування до поверхні бур’янистої рослини композиції, що містить полінуклеотид, ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена протопорфіриноген ІХ (ППГ-оксидази) або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена ППГ-оксидази, де вказану послідовність гена ППГ-оксидази вибирають із групи, яка складається з SEQ ID NO: 7-12, 14, 15, 17, 20, 29-34, 36-57, 59 і 61-71, і агент перенесення, який готує вказану поверхню вказаної бур’янистої рослини для проникнення вказаного полінуклеотиду, внаслідок чого ріст, розвиток або репродуктивна здатність вказаної бур’янистої рослини знижується, або вказана рослина стає сприйнятливішою до гербіциду, що є інгібітором ППГоксидази, порівняно з необробленою бур’янистою рослиною; композиції, яка містить вказаний полінуклеотид та вказаний агент перенесення. 5 10 15 20 СПОСОБИ ТА КОМПОЗИЦІЇ ДЛЯ БОРОТЬБИ З БУР'ЯНАМИ Відповідно до § 119 (e) розділу 35 Кодексу США (35 U.S.C.) у цій заявці заявляється пріоритет за попередньою заявкою на видачу патенту США із серійним номером 61/534,086, поданої 13 вересня 2011 року, розкриття якої включене в цей документ у вигляді посилання в повному обсязі. Перелік послідовностей, що міститься у файлі з ім'ям "40_21(58640)B seq listing.txt", розмір якого складає 862,548 байт (виміряний в операційній системі MS-Windows) і який був створений 4 вересня 2012 року, приведений та включений в цей документ у вигляді посилання. При цьому Таблиця 1 приведена, як частина цієї заявки на видачу патенту США за допомогою системи шифрування даних EFS Відомства США з патентів і товарних знаків (USPTO) у файлі з ім'ям "40_21(58640)Btable 1.doxc", розмір якого складає 61,788 байт (виміряний в операційній системі MS-Windows®). Таблиця 1 (файл "40_21(58640)Btable1.doxc" містить 71 послідовність і включена в цей документ у вигляді посилання в повному обсязі. При цьому Таблиця 2 приведена, як частина цієї заявки на видачу патенту США за допомогою системи шифрування даних EFS Відомства США з патентів і товарних знаків (USPTO) у файлі з ім'ям "40_21(58640)Btable2.doxc", розмір якого складає 161,884 байт (виміряний в операційній системі MS-Windows®). Таблиця 2 (файл "40_21(58640)Btable2.doxc" містить 1268 послідовностей і включена в цей документ у вигляді посилання в повному обсязі. При цьому Таблиця 3 приведена, як частина цієї заявки на видачу патенту США за допомогою системи шифрування даних EFS Відомства США з патентів і товарних знаків (USPTO) у файлі з ім'ям "40_21(58640)Btable3.txt", розмір якого складає 41,120 байт (виміряний в операційній системі MS-Windows®). Таблиця 3 (файл "40_21(58640)Btable3.txt" містить 832 послідовності і включена в цей документ у вигляді посилання в повному обсязі. UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ГАЛУЗЬ ВИНАХОДУ Способи та композиції в цілому належать до галузі боротьби з бур'янами. Зокрема, належать до генів протопорфириноген IX оксидази (ППГ-оксидази) у рослин і композицій, що містять полінуклеотидні молекули для модуляції і/або регуляції їх експресії. Нижче наводяться способи та композиції, що використовуються для боротьби з бур'янами. РІВЕНЬ ТЕХНІКИ Бур'яни являють собою рослини, що конкурують з культурними рослинами в агрономічних умовах і коштують фермерам мільярди доларів щорічно у зв'язку з втратами урожаю і витратами на спроби утримати бур'яни під контролем. Бур'яни також є хазяїнами носіями хвороб сільськогосподарських культур та комах-шкідників. Збитки, заподіяні бур'янами в умовах сільськогосподарського виробництва, включають зниження врожайності, погіршення якості урожаю, підвищення витрат на зрошування, збільшення витрат на збір урожаю, зниження вартості землі, спричинення шкоди для худоби та пошкодження урожаю шкідниками і хворобами, які несуть бур'яни. Основними засобами, за допомогою яких бур'яни викликають ці наслідки, є: 1) конкуренція із культурними рослинами за воду, поживні речовини, сонячне світло та інші невід'ємні умови для росту та розвитку, 2) виділення токсичних або дратівливих хімічних речовин, які викликають проблеми зі здоров'ям у людей або тварини, 3) утворення величезної кількості насіння або вегетативних репродуктивних органів або і тих, і інших, які засмічують сільськогосподарську продукцію і назавжди зберігаються в сільськогосподарських землях, та 4) утворення на сільськогосподарських і несільськогосподарських землях величезної кількості рослинності, що підлягає знищенню. Гербіцидостійкі бур'яни є проблемою при використанні майже усіх гербіцидів; існує необхідність ефективної боротьби з цими бур'янами. Нині більше ніж 365 біотипів бур'янів визначаються як стійкі до одного або декількох гербіцидів згідно з Комітетом з попередження виникнення стійкості до дії гербіцидів (HRAC), Північноамериканським комітетом з попередження виникнення стійкості до дії гербіцидів (NAHRAC) і Американським науковим суспільством з дослідження бур'янів (WSSA). ПЕРЕЛІК ФІГУР КРЕСЛЕННЯ Наступні креслення утворюють частину цього опису і включені для додаткової демонстрації деяких способів, композицій або результатів цього винаходу. Вони можуть бути краще зрозумілі з посиланням на один або декілька з цих креслень у поєднанні з детальним описом конкретних варіантів реалізації винаходу, приведених в цьому документі. Цей винахід може бути краще зрозумілий завдяки наступному опису фігур: Фігура 1. ілюструє обробку Amaranthus palmeri тригерними полінуклеотидами олДНК та гербіцидом, що є інгібітором ППГ-оксидази, флуміоксазином. Фігура 2. ілюструє обробку Amaranthus palmeri тригерними полінуклеотидами олДНК та гербіцидом, що є інгібітором ППГ-оксидази, фомесафеном. Фігура 3. ілюструє обробку Amaranthus palmeri змішаними олігонуклеотидами та тригерними полінуклеотидами олДНК, та гербіцидом, що є інгібітором ППГ-оксидази, Reflex® (фомесафен). СУТЬ ВИНАХОДУ У одному аспекті цей винахід належить до способу контролю за ростом рослин, що включає зовнішню обробку рослини композицією, яка містить полінуклеотид та агент перенесення, в якій полінуклеотид практично ідентичний або практично комплементарний послідовності гену ППГоксидази або її фрагменту, або РНК-транскрипту вказаної послідовності гену ППГ-оксидази або її фрагменту, в якій вказану послідовність гену ППГ-оксидази обирають із групи, що складається з SEQ ID NO: 1-71 або фрагмента полінуклеотиду, внаслідок чого ріст або розвиток, або репродуктивна здатність смітної рослини знижується, або смітна рослина стає сприйнятливішою до гербіциду, що є інгібітором ППГ-оксидази в порівнянні із смітною рослиною, яка не оброблена вказаною композицією. Таким чином, рослини, які стали стійкими до застосування гербіцидів, що містять інгібітор ППГ-оксидази, можна зробити сприйнятливішими до гербіцидних дій гербіциду, що містить інгібітор ППГ-оксидази, тим самим посилюючи дію гербіциду. Фрагмент полінуклеотиду, який складається з щонайменше 18 безперервних нуклеотидів, щонайменше 19 безперервних нуклеотидів, щонайменше 20 безперервних нуклеотидів або щонайменше 21 безперервних нуклеотидів у довжину і щонайменше на 85 відсотків ідентичний послідовності гену ППГ-оксидази, обраній із групи, що складається з SEQ ID NO: 1-71 та агента перенесення, являє собою кремнійорганічну композицію або сполуку. Фрагмент полінуклеотиду також може бути смисловою або антисмисловою молекулою олДНК або олРНК, длРНК або длДНК, або гібридами длДНК/РНК. Композиція може містити більше ніж один фрагмент полінуклеотиду та композиція може містити гербіцид, що є інгібітором ППГ-оксидази і/або інші гербіциди, які підвищують дію композиції для боротьби з бур'янами. UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Інший аспект винаходу розкриває молекули полінуклеотиду та способи модуляції експресії гену ППГ-оксидази у видів смітних рослин. Спосіб знижує, пригнічує або іншим чином уповільнює експресію гену ППГ-оксидази у смітної рослини, що включає зовнішню обробку рослини композицією, яка містить полінуклеотид та агент перенесення, в якій полінуклеотид практично ідентичний або практично комплементарний послідовності гену ППГ-оксидази або її фрагменту, або РНК-транскрипту вказаної послідовності гену ППГ-оксидази або її фрагменту, в якій нуклеотидну послідовність гену ППГ-оксидази обирають із групи, що складається з SEQ ID NO: 1-71 або фрагмента полінуклеотиду. Фрагмент полінуклеотиду, який складається з щонайменше 18 безперервних нуклеотидів, щонайменше 19 безперервних нуклеотидів, щонайменше 20 безперервних нуклеотидів, щонайменше 21 безперервних нуклеотидів у довжину і щонайменше на 85 відсотків ідентичний нуклеотидній послідовності гену ППГоксидази, обраній із групи, що складається з SEQ ID NO: 1-71 та агента перенесення, являє собою кремнійорганічну композицію. Фрагмент полінуклеотиду також може бути смисловою або антисмисловою молекулою олДНК або олРНК, длРНК або длДНК, або гібридами длДНК/РНК. У додатковому аспекті композицію, що містить полінуклеотидну молекулу, можна змішати з іншими гербіцидними сполуками, щоб забезпечити додатковий контроль за небажаними рослинами на полі із культурними рослинами. У додатковому аспекті композицію полінуклеотидної молекули можна змішати з будь-яким одним або декількома додатковими агрохімікатами, такими як, інсектициди, фунгіциди, нематоциди, бактерициди, акарициди, регулятори росту, хемостерилізатори, хімічні сигнальні речовини, репеленти, атрактанти, феромони, стимулятори поїдання, біопестициди, мікробні пестициди або інші біологічно активні сполуки для отримання багатокомпонентного пестициду, що надає ще ширший спектр захисту сільськогосподарської продукції. ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ Пропонуються способи та композиції, що містять полінуклеотид, який забезпечує регуляцію, репресію або уповільнення експресії гену ППГ-оксидази (протопорфириноген IX оксидази), а також поліпшений контроль за смітними видами рослин і особливо за біотипами бур'янів, стійкими до інгібіторів ППГ-оксидази. Аспекти способу можуть застосовуватися для контролю за ростом різних смітних рослин в агрономічних та інших культурних середовищах. Наступні визначення та способи пропонуються для того, щоб краще визначити цей винахід і спрямувати фахівців цієї галузі техніки на практику цього винаходу. Якщо не вказане інше, терміни, використані в цьому винаході, мають ті ж значення, які зазвичай відомі фахівцеві із загальною підготовкою в галузі техніки, до якої належить цей винахід. Якщо термін приведений в однині, автори цього винаходу також мають на увазі множину цього терміну. Під полінуклеотидами, що "не транскрибуються", мають на увазі, що полінуклеотиди не містять повної одиниці транскрипції полімерази II. Використовуваний тут термін "розчин" належить до однорідних сумішей і до неоднорідних сумішей, таких як суспензії, колоїди, міцели та емульсії. Смітними рослинами є рослини, які конкурують з культурними рослинами, найбільш важливі з яких включають, без обмеження ними, такі важливі інвазивні та шкідливі бур'яни, а також стійкі до дії гербіциду біотипи в рослинництві, як Amaranthus вид - A. albus, A. blitoides, A. hybridus, A. palmeri, A. powellii, A. retroflexus, A. spinosus, A. tuberculatus, та A. viridis; Ambrosia вид - A. trifida, A. artemisifolia; Lolium вид - L. multiflorum, L. rigidium, L perenne; Digitaria вид - D. insularis; Euphorbia вид - E. heterophylla; Kochia вид - K. scoparia; Sorghum вид - S. halepense; Conyza вид - C. bonariensis, C. canadensis, C. sumatrensis; Chloris вид - C. truncate; Echinochola вид - E. colona, E. crus-galli; Eleusine вид - E. indica; Poa вид - P. annua; Plantago вид - P. lanceolata; Avena вид - A. fatua; Chenopodium вид - C. album; Setaria вид - S. viridis, Abutilon theophrasti, Ipomoea вид, Sesbania вид, Cassia вид, Sida вид, Brachiaria вид та Solanum вид. Додаткові види смітних рослин, знайдені на посівних площах включають Alopecurus myosuroides, Avena sterilis, Avena sterilis ludoviciana, Brachiaria plantaginea, Bromus diandrus, Bromus rigidus, Cynosurus echinatus, Digitaria ciliaris, Digitaria ischaemum, Digitaria sanguinalis, Echinochloa oryzicola, Echinochloa phyllopogon, Eriochloa punctata, Hordeum glaucum, Hordeum leporinum, Ischaemum rugosum, Leptochloa chinensis, Lolium persicum, Phalaris minor, Phalaris paradoxa, Rottboellia exalta, Setaria faberi, Setaria viridis var, robusta-alba schreiber, Setaria viridis var, robusta-purpurea, Snowdenia polystachea, Sorghum sudanese, Alisma plantago-aquatica, Amaranthus lividus, Amaranthus quitensis, Ammania auriculata, Ammania coccinea, Anthemis cotula, Apera spica-venti, Bacopa rotundifolia, Bidens pilosa, Bidens subalternans, Brassica tournefortii, Bromus tectorum, Camelina microcarpa, Chrysanthemum coronarium, Cuscuta campestris, Cyperus difformis, Damasonium minus, Descurainia sophia, Diplotaxis tenuifolia, Echium plantagineum, Elatine triandra var, pedicellata, Euphorbia heterophylla, Fallopia convolvulus, Fimbristylis miliacea, UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Galeopsis tetrahit, Galium spurium, Helianthus annuus, Iva xanthifolia, Ixophorus unisetus, Ipomoea indica, Ipomoea purpurea, Ipomoea sepiaria, Ipomoea aquatic, Ipomoea triloba, Lactuca serriola, Limnocharis flava, Limnophila erecta, Limnophila sessiliflora, Lindernia dubia, Lindernia dubia var, major, Lindernia micrantha, Lindernia procumbens, Mesembryanthemum crystallinum, Monochoria korsakowii, Monochoria vaginalis, Neslia paniculata, Papaver rhoeas, Parthenium hysterophorus, Pentzia suffruticosa, Phalaris minor, Raphanus raphanistrum, Raphanus sativus, Rapistrum rugosum, Rotala indica var, uliginosa, Sagittaria guyanensis, Sagittaria montevidensis, Sagittaria pygmaea, Salsola iberica, Scirpus juncoides var, ohwianus, Scirpus mucronatus, Setaria lutescens, Sida spinosa, Sinapis arvensis, Sisymbrium orientale, Sisymbrium thellungii, Solanum ptycanthum, Sonchus asper, Sonchus oleraceus, Sorghum bicolor, Stellaria media, Thlaspi arvense, Xanthium strumarium, Arctotheca calendula, Conyza sumatrensis, Crassocephalum crepidiodes, Cuphea carthagenenis, Epilobium adenocaulon, Erigeron philadelphicus, Landoltia punctata, Lepidium virginicum, Monochoria korsakowii, Solanum americanum, Solanum nigrum, Vulpia bromoides, Youngia japonica, Hydrilla verticillata, Carduus nutans, Carduus pycnocephalus, Centaurea solstitialis, Cirsium arvense, Commelina diffusa, Convolvulus arvensis, Daucus carota, Digitaria ischaemum, Echinochloa crus-pavonis, Fimbristylis miliacea, Galeopsis tetrahit, Galium spurium, Limnophila erecta, Matricaria perforate, Papaver rhoeas, Ranunculus acris, Soliva sessilis, Sphenoclea zeylanica, Stellaria media, Nassella trichotoma, Stipa neesiana, Agrostis stolonifera, Polygonum aviculare, Alopecurus japonicus, Beckmannia syzigachne, Bromus tectorum, Chloris inflate, Echinochloa erecta, Portulaca oleracea та Senecio vulgaris. Вважається, що усі рослини містять у своєму геномі ген протопорфириноген IX оксидази, послідовність якого можна виділити та отримати полінуклеотиди відповідно до способів цього винаходу, які застосовуються для регуляції, пригнічення або уповільнення експресії гену-мішені ППГ-оксидази в рослинах і росту або розвитку оброблених рослин. Деякі культурні рослини також можуть бути смітними рослинами, якщо вони зустрічаються в небажаному середовищі. Трансгенні культури, стійкі до одного або декількох гербіцидів потребують спеціалізованих способів управління для боротьби з бур'янами та самопосівними сільськогосподарськими культурами і для виявлення трансгену, що надає стійкість до гербіциду, при необхідності, щоб дозволити обробленим рослинам стати сприйнятливими до гербіциду. "Тригер" або "тригерний полінуклеотид" являє собою молекулу полінуклеотиду, яка гомологічна або комплементарна полінуклеотиду гена-мішені. Молекули тригерного полінуклеотиду модулюють експресію гену-мішені при місцевому нанесенні на поверхню рослин за допомогою агента перенесення, завдяки якому ріст або розвиток, або репродуктивна здатність рослини, обробленої вказаною композицією, регулюється, пригнічується або сповільнюється, або вказана рослина стає сприйнятливішою до гербіциду, що є інгібітором ППГоксидази або гербіциду, що є інгібітором мітозу в результаті використання вказаної композиції, яка містить полінуклеотид, у порівнянні з рослиною, яка не оброблена композицією, що містить тригерну молекулу. Передбачається, що композиція згідно цього винаходу міститиме декілька полінуклеотидів та гербіцидів, які включають, без обмеження ними, тригерні полінуклеотиди гену ППГ-оксидази і гербіцид, що є інгібітором ППГ-оксидази, і будь-який один або декілька додаткових тригерних полінуклеотидів гену-мішені гербіциду і відповідних гербіцидів, і будь-який один або декілька додаткових тригерних полінуклеотидів основного гену. Основні гени являють собою гени в рослині, які кодують ключові ферменти або інші білки, наприклад, фермент біосинтезу, метаболізуючий фермент, рецептор, білок-переносник сигналу, структурний продукт гену, фактор транскрипції або транспортний білок; або регулюючі РНК, такі як, мікроРНК, які важливі для росту або виживання організму або клітини, або беруть участь в нормальному рості і розвитку рослин (Meinke із співавторами, Trends Plant Sci. 2008 Sep; 13(9):483-91). Пригнічення основного гену посилює дію гербіциду, що впливає на функцію продукту гена, відмінну від пригніченого основного гену. Композиції згідно цього винаходу можуть містити різні тригерні полінуклеотиди, які модулюють експресію основного гену, відмінного від гену ППГ-оксидази. Гербіциди, до яких трансгени рослин проявили стійкість і можна застосувати спосіб згідно цього винаходу, включають, без обмеження ними: ауксиноподібні гербіциди, гліфосат, глюфосинат, сульфонілсечовини, імідазолінони, бромоксиніл, делапон, дикамбу, циклогександіон, інгібітори протопорфириноген оксидази, гербіциди, що є інгібітором 4гідроксифеніл-піруват диоксигенази. Наприклад, трансгени та їх полінуклеотидні молекули, які кодують білки, що відповідають за стійкість до гербіцидів, відомі в цій галузі техніки, і включають, без обмеження нею, 5-енолпірувілшикімат-3-фосфат синтазу (EPSPS), наприклад, що детальніше описана в патентах США за номерами 7,807,791 (SEQ ID NO: 5); 6,248,876 B1; 5,627,061; 5,804,425; 5,633,435; 5,145,783; 4,971,908; 5,462,910; 5,188,642; 4,940,835; 5,866,775; UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6,225,114 B1; 6,130,366; 5,460,667; 4,535,060; 4,769,061; 5,633,448; 5,510,471; патенті США за номером Re. 36,449; патентах США за номерами RE 37,287 E; і 5,491,288; стійкість до сульфонілсечовини і/або імідазолінону, наприклад, що детальніше описана в патентах США за номерами 5,605,011; 5,013,659; 5,141,870; 5,767,361; 5,746,180; 5,304,732; 4,761,373; 5,346,107; 5,928,937; і 5,378,824; і міжнародній заявці WO 96/33270; стійкість до гербіцидів, що є інгібіторами гідроксифенілпіруватдіоксигенази в рослинах, описана в патентах США за номерами 6,245,968 B1; 6,268,549; і 6,069,115; публікаціях патенту США 20110191897 і US7,462,379 SEQ ID NO: 3; US7,935,869; US7,304,209, SEQ ID NO: 1, 3,5 та 15; полінуклеотиди арілоксиалканоат диоксигенази, які надають стійкість до 2,4-D та інших гербіцидів на основі феноксиауксину, а також до гербіцидів на основі арілоксифеноксипропіонату, що описані, наприклад, в WO2005/107437; US7,838,733 SEQ ID NO: 5;) і полінуклеотиди, стійкі до дикамби, що описані, наприклад, в Herman із співавторами (2005) J. Biol. Chem. 280: 24759-24767. Інші приклади ознак стійкості до гербіциду включають ті, які обумовлені полінуклеотидами, які кодують екзогенну фосфінотріцин ацетилтрансферазу, що описані в патентах США за номерами 5,969,213; 5,489,520; 5,550,468; 5,874,265; 5,919,675; 5,561,236; 5,648,477; 5,646,024; 6,177,616; та 5,879,903. Рослини, що містять екзогенну фосфінотріцин ацетилтрансферазу можуть проявляти підвищену стійкість до гербіцидів на основі глюфосинату, які інгібують фермент глутамін синтетазу. Крім того, стійкі до гербіцидів полінуклеотиди включають ті, які обумовлені полінуклеотидами, що обумовлюють змінену дію протопорфириноген оксидази (протокс), як описане в патентах США за номерами 6,288,306 B1; 6,282,837 B1; та 5,767,373; та WO 01/12825. Рослини, які містять такі полінуклеотиди, можуть проявляти стійкість до будьякого з безлічі гербіцидів, що націлені на фермент протопорфириноген оксидази (протокс) (також позначені як протокс інгібітори). Полінуклеотиди, які кодують гліфосат оксидоредуктазу та гліфосат-N-ацетил трансферазу (GOX описаний в патенті США 5,463,175 та GAT описаний в публікації патенту США 20030083480, дикамба монооксигенази в публікації патенту США 20030135879, усі з яких включені в цей документ у вигляді посилання); молекула полінуклеотиду, яка кодує бромоксиніл нітрилазу (Bxn описана в патенті США за номером 4,810,648 щодо стійкості до бромоксинілу, який включений в цей документ у вигляді посилання); молекула полінуклеотиду, яка кодує фітоен десатуразу (crtI), описана у Misawa із співавторами, (1993) Plant J. 4:833-840 та у Misawa із співавторами, (1994) Plant J. 6:481-489 щодо стійкості до норфлуразону; молекула полінуклеотиду, яка кодує синтазу ацетогідроксикислот (AHAS, aka ALS), описана у Sathasiivan із співавторами (1990) Nucl. Acids Res. 18:468-2193 щодо стійкості до гербіцидів групи сульфонілсечовини; та ген bar, описаний у DeBlock із співавторами (1987) EMBO J. 6:2513-2519 щодо стійкості до глюфосинату та біалафосу. Трансгенні кодуючі області і регуляторні елементи генів стійкості до гербіцидів являють собою мішені, в яких тригерні полінуклеотиди і гербіциди можуть бути включені в композиції згідно цього винаходу. Композиція містить компонент, який являє собою гербіцид, що є інгібітором ППГ-оксидази, що включає, без обмеження ними, ацифлуорфен натрію, біфенокс, хлометоксифен, флуороглікофен-етил, фомесафен, галосафен, лактофен, оксифлуорфен, флуазолат, пірафлуфен-етил, цинідон-етил, флуміоксазин, флуміклорак-пентил, флутіацет-метил, тидіазимін, оксадіазон, оксадіаргіл, азафенідин, карфентразон-етил, сульфентразон, пентоксазон, бензфендизон, бутафенацил, піразогіл та профлуазол. Доступні численні додаткові гербіциди з аналогічними або різними механізмами дії (надалі позначені як сумісні гербіциди), які можна додати до композиції, наприклад, представники сімейства гербіцидів, що включають, без обмеження ними, амідні гербіциди, гербіциди на основі ароматичних кислот, миш'якові гербіциди, гербіциди на основі бензотіазолу, гербіциди на основі бензоїлциклогександіону, гербіциди на основі бензофураніл алкілсульфонату, гербіциди на основі карбамату, гербіциди на основі циклогексеноксиму, гербіциди на основі циклопропілізоксазолу, гербіциди на основі дикарбоксиміду, гербіциди на основі динітроаніліну, гербіциди на основі динітрофенолу, гербіциди на основі дифенілового ефіру, гербіциди на основі дитіокарбамату, галогеновані аліфатичні гербіциди, гербіциди на основі імідазолінону, неорганічні гербіциди, нітрильні гербіциди, фосфорорганічні гербіциди, гербіциди на основі оксадиазолону, гербіциди на основі оксазолу, феноксигербіциди, гербіциди на основі фенілендиаміну, піразольні гербіциди, гербіциди на основі піридазину, гербіциди на основі піридазинону, піридинові гербіциди, гербіциди на основі піримідиндиаміну, гербіциди на основі піримідинілоксибензиламіну, четвертинні амонієві гербіциди, гербіциди на основі тіокарбамату, гербіциди на основі тіокарбонату, гербіциди на основі тіосечовини, триазинові гербіциди, гербіциди на основі триазинону, гербіциди на основі триазолу, гербіциди на основі триазолону, гербіциди на основі триазолопіримідину, гербіциди на основі урацилу і гербіциди на основі сечовини. Зокрема, норми витрати додаткових гербіцидів в композиціях, що містять UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 полінуклеотиди, можна зменшити. Скорочення норм витрат додаткових гербіцидів може складати 10-25 відсотків, 26-50 відсотків, 51-75 відсотків або може бути більшим, та очікується підвищення активності полінуклеотидів і композиції гербіциду. Типові сумісні гербіциди сімейств включають, без обмеження ними, ацетохлор, ацифлуорфен, ацифлуорфен натрію, аклоніфен, акролеїн, алахлор, алоксидим, аліловий спирт, аметрин, амікарбазон, амідосульфурон, амінопіралід, амітрол, сульфамат амонію, анілофос, асулам, атратон, атразін, азимсульфурон, BCPC, бефлубутамід, беназолін, бенфлуралін, бенфуресат, бенсульфурон, бенсульфуронметил, бенсулід, бентазон, бензфендізон, бензобіциклон, бензофенап, біфенокс, біланафос, біспірібак, біспірібак натрію, бура, бромацил, бромобутид, бромоксиніл, бутахлор, бутафенацил, бутаміфос, бутралін, бутроксидим, бутилат, какодилову кислота, хлорат кальцію, кафенстрол, карбетамід, карфентразон, карфентразон-етил, CDEA, CEPC, хлорфлуренол, хлорфлуренолметил, хлоридазон, хлорімурон, хлорімурон-етил, хлороцетову кислоту, хлоротолурон, хлорпрофам, хлорсульфурон, хлортал, хлортал-диметил, цинідон-етил, цинметилін, циносульфурон, цисанілід, клетодим, клодинафоп, клодинафоп-пропаргіл, кломазон, кломепроп, клопіралід, клорансулам, клорансулам-метил, CMA, 4-CPB, CPMF, 4CPP, CPPC, крезол, кумілурон, цианамід, цианазин, циклоат, циклосульфамурон, циклоксидим, цигалофоп, цигалофоп -бутил, 2,4-D, 3,4-DA, даімурон, далапон, дазомет, 2,4-DB, 3,4-DB, 2,4DEB, десмедіфам, дикамбу, дихлобеніл, орто-дихлорбензол, пара-дихлорбензол, дихлорпроп, дихлорпроп-П, диклофоп, диклофоп-метил, диклосулам, дифензокват, дифензоквату метилсульфат, дифлуфенікан, дифлуфензопір, димефурон, димепіперат, диметахлор, диметаметрин, диметенамід, диметенамід-П, диметипін, диметиларсинову кислоту, динітрамін, динотерб, дифенамід, дикват, диквату дибромід, дитіопір, діурон, DNOC, 3,4 -DP, DSMA, EBEP, ендотал, ЕРТС, еспрокарб, еталфлуралін, етаметсульфурон, етаметсульфурон-метил, етофумезат, етоксифен, етоксисульфурон, етобензанід, феноксапроп-П, феноксапроп-П-етил, фентразамід, сульфат заліза, флампроп-M, флазасульфурон, флорасулам, флуазіфоп, флуазіфоп-бутил, флуазіфоп-П, флуазіфоп-П-бутил, флукарбазон, флукарбазон натрію, флуцетосульфурон, флухлоралін, флуфенацет, флуфенпір, флуфенпір-етил, флуметсулам, флуміклорак, флуміклорак-пентил, флуміоксазин, флуометурон, флуороглікофен, флуороглікофен-етил, флупропанат, флупірсульфурон, флупірсульфурон-метил натрію, флуренол, флурідон, флуорохлоридон, флуороксипір, флуртамон, флутіацет, флутіацет-метил, фомесафен, форамсульфурон, фосамін, глуфозинат, глуфозинат амонію, гліфосат, галосульфурон, галосульфурон-метил, галоксифоп, галоксифоп-П, HC-252, гексазінон, імазаметабенз, імазаметабенз-метил, імазамокс, імазапік, імазапір, імазаквін, імазетапір, імазосульфурон, інданофан, йодометан, йодосульфурон, йодосульфурон-метил натрію, іоксиніл, ізопротурон, ізоурон, ізоксабен, ізоксахлортол, ізоксафлутол, карбутилат, лактофен, ленацил, лінурон, MAA, МАМА, МСРА, МСРА-тіоетил, МСРВ, мекопроп, мекопроп-П, мефенацет, мефлуїдид, мезосульфурон, мезосульфурон-метил, мезотріон, метам, метаміфоп, метамітрон, метазахлор, метабензтіазурон, метиларсонову кислоту, метилдімрон, метилізотіоцианат, метобензурон, метолахлор, С-метолахлор, метосулам, метоксурон, метрибузін, метсульфурон, метсульфурон-метил, МK-66, молінат, монолінурон, MSMA, напроанілід, напропамід, напталам, небурон, нікосульфурон, нонанову кислоту, норфлуразон, олеїнову кислоту (жирні кислоти), орбенкарб, ортосульфамурон, оризалін, оксадиаргіл, оксадиазон, оксасульфурон, оксацикломефон, оксифлуорфен, паракват, дихлоріду паракват, пебулат, пендиметалін, пеноксулам, пентахлорфенол, пентанохлор, пентоксазон, петоксамід, нафтові олії, фенмедифам, фенмедифам-етил, піклорам, піколінафен, піноксаден, піперофос, арсеніт калію, азид калію, претілахлор, примісульфурон, примісульфурон-метил, продиамін, профлуазол, профоксидім, прометон, прометрин, пропахлор, пропаніл, пропаквізафоп, пропазін, профам, пропізохлор, пропоксикарбазон, пропоксикарбазон натрію, пропизамід, просульфокарб, просульфурон, піраклоніл, пірафлуфен, пірафлуфен-етил, піразолінат, піразосульфурон, піразосульфурон-етил, піразоксифен, пірибензоксим, пірибутикарб, піридафол, піридат, пірифталід, піримінобак, піримінобак-метил, піримісульфан, піритіобак, піритіобак натрію, квінклорак, квінмерак, квінокламін, хізалофоп, хізалофоп-П, римсульфурон, сетоксидім, сидурон, симазин, симетрин, SMA, арсеніт натрію, азид натрію, хлорат натрію, сулкотрион, сульфентразон, сульфометурон, сульфометурон-метил, сульфосат, сульфосульфурон, сірчану кислоту, дігтярну олію, 2,3,6-TBA, TCA, TCA-натрію, тебутіурон, тепралоксидим, тербацил, тербуметон, тербутилазін, тербутрин, тенілхлор, тіазопір, тіфенсульфурон, тіфенсульфурон-метил, тіобенкарб, тіокарбазил, топрамезон, тралкоксидим, триалат, триасульфурон, триазифлам, трибенурон, трибенурон-метил, трикамбу, триклопір, триетазин, трифлоксисульфурон, трифлоксисульфурон натрію, трифлуралін, трифлусульфурон, трифлусульфурон-метил, тригідрокситриазин, тритосульфурон, [3-[2-хлор-4 UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 флуоро-5-(-метил-6-трифлуорометил-2,4-диоксо-,2,3,4-тетрагідропіримідин-3-іл)фенокси]-2піриділокси] етиловий ефір оцтової кислоти (CAS RN 353292-3-6), 4-[(4,5-дигідро-3-метокси-4метил-5-оксо)-H-,2,4-триазол-ілкарбоніл-сульфамоїл]-5-метилтіофен-3 карбонової кислоти (BAY636), BAY747 (CAS RN 33504-84-2), топрамезон (CAS RN 2063-68-8), 4-гідрокси-3-[[2-[(2метоксиетокси)метил]-6-(трифлуоро-метил)-3-піридиніл]карбоніл]-біцикло[3.2.]окт-3-ен-2-ону (CAS RN 35200-68-5), і 4-гідрокси-3-[[2-(3-метоксипропіл)-6-(дифлуорометил)-3піридиніл]карбон-іл]-біцикло[3.2.]окт-3-ен-2-ону. Додаткові композиції гербіцидів з невказаними механізмами дії описані в CN101279950A, CN101279951A, DE10000600A1, DE10116399A1, DE102004054666A1, DE102005014638A1, DE102005014906A1, DE102007012168A1, DE102010042866A1, DE10204951A1, DE10234875A1, DE10234876A1, DE10256353A1, DE10256354A1, DE10256367A1, EP1157991A2, EP1238586A1, EP2147919A1, EP2160098A2, JP03968012B2, JP2001253874A, JP2002080454A, JP2002138075A, JP2002145707A, JP2002220389A, JP2003064059A, JP2003096059A, JP2004051628A, JP2004107228A, JP2005008583A, JP2005239675A, JP2005314407A, JP2006232824A, JP2006282552A, JP2007153847A, JP2007161701A, JP2007182404A, JP2008074840A, JP2008074841A, JP2008133207A, JP2008133218A, JP2008169121A, JP2009067739A, JP2009114128A, JP2009126792A, JP2009137851A, US20060111241A1, US20090036311A1, US20090054240A1, US20090215628A1, US20100099561A1, US20100152443A1, US20110105329A1, US20110201501A1, WO2001055066A2, WO2001056975A1, WO2001056979A1, WO2001090071A2, WO2001090080A1, WO2002002540A1, WO2002028182A1, WO2002040473A1, WO2002044173A2, WO2003000679A2, WO2003006422A1, WO2003013247A1, WO2003016308A1, WO2003020704A1, WO2003022051A1, WO2003022831A1, WO2003022843A1, WO2003029243A2, WO2003037085A1, WO2003037878A1, WO2003045878A2, WO2003050087A2, WO2003051823A1, WO2003051824A1, WO2003051846A2, WO2003076409A1, WO2003087067A1, WO2003090539A1, WO2003091217A1, WO2003093269A2, WO2003104206A2, WO2004002947A1, WO2004002981A2, WO2004011429A1, WO2004029060A1, WO2004035545A2, WO2004035563A1, WO2004035564A1, WO2004037787A1, WO2004067518A1, WO2004067527A1, WO2004077950A1, WO2005000824A1, WO2005007627A1, WO2005040152A1, WO2005047233A1, WO2005047281A1, WO2005061443A2, WO2005061464A1, WO2005068434A1, WO2005070889A1, WO2005089551A1, WO2005095335A1, WO2006006569A1, WO2006024820A1, WO2006029828A1, WO2006029829A1, WO2006037945A1, WO2006050803A1, WO2006090792A1, WO2006123088A2, WO2006125687A1, WO2006125688A1, WO2007003294A1, WO2007026834A1, WO2007071900A1, WO2007077201A1, WO2007077247A1, WO2007096576A1, WO2007119434A1, WO2007134984A1, WO2008009908A1, WO2008029084A1, WO2008059948A1, WO2008071918A1, WO2008074991A1, WO2008084073A1, WO2008100426A2, WO2008102908A1, WO2008152072A2, WO2008152073A2, WO2009000757A1, WO2009005297A2, WO2009035150A2, WO2009063180A1, WO2009068170A2, WO2009068171A2, WO2009086041A1, WO2009090401A2, WO2009090402A2, WO2009115788A1, WO2009116558A1, WO2009152995A1, WO2009158258A1, WO2010012649A1, WO2010012649A1, WO2010026989A1, WO2010034153A1, WO2010049270A1, WO2010049369A1, WO2010049405A1, WO2010049414A1, WO2010063422A1, WO2010069802A1, WO2010078906A2, WO2010078912A1, WO2010104217A1, WO2010108611A1, WO2010112826A3, WO2010116122A3, WO2010119906A1, WO2010130970A1, WO2011003776A2, WO2011035874A1, WO2011065451A1, усі з яких включені в цей документ у вигляді посилання. Агрономічні поля, які потребують контролю за ростом рослин, обробляють нанесенням композиції безпосередньо на поверхню зростаючих рослин, наприклад, за допомогою спрею. Наприклад, спосіб застосовується для боротьби з бур'янами на полі культурних рослин за допомогою розпилення композиції на полі. Композиція може бути надана у вигляді бакової суміші, послідовної обробки компонентів (зазвичай композиціями, які містять полінуклеотид, після застосування гербіциду) або одночасної обробки, або змішування одного або більше компонентів композиції з окремих контейнерів. Обробка поля може проводитися в міру необхідності для забезпечення боротьби з бур'янами, а компоненти композиції можна скорегувати для боротьби з конкретними видами смітних рослин або сімействами бур'янів за допомогою використання конкретних полінуклеотидів або полінуклеотидних композицій, здатних вибірково охоплювати конкретні види або сімейства рослин, з якими належить боротися. Композицію можна використовувати з ефективною робочою концентрацією залежно від часу обробки поля, наприклад, передпосівне внесення, при посадці, після посадки, після збору урожаю. Гербіциди, що є інгібіторами ППГ-оксидази, можна використовувати на полі, виходячи з норми від 100 до 500 грамів аі/га (активного інгредієнту на гектар) або більше. Полінуклеотидні композиції можна використовувати, виходячи з норми від 1 до 30 грамів на акр, залежно від кількості тригерних молекул, необхідних для охоплення бур'янів на цьому полі. Культурні рослини, які потребують боротьби з бур'янами включають, без обмеження ними, UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 такі рослини, як: а) кукурудза, соя, бавовна, рапс, цукровий буряк, люцерна, цукрова тростина, рис і пшениця; б) овочеві рослини, включаючи, без обмеження ними, томат, солодкий перець, гострий перець, диня, кавун, огірок, баклажан, цвітна капуста, броколі, салат, шпинат, лук, горох, морква, солодка кукурудза, пекінська капуста, цибуля-порей, кріп, гарбуз, кабачок або пляшковий гарбуз, редька, брюссельська капуста, фізаліс овочевий, стручкова квасоля, зріла квасоля або бамія; в) зелень, включаючи, без обмеження ними, базилік, петрушка, кава або чай; або г) плодові рослини, включаючи, без обмеження ними, яблуко, груша, вишня, персик, слива, абрикос, банан, плантан, столовий виноград, винний виноград, цитрусові, авокадо, манго або ягоди; д) дерева, які вирощуються для декоративного або комерційного використання, включаючи, без обмеження ними, фруктові або горіхоплодні дерева; або е) декоративні рослини (наприклад, квітучі декоративні рослини або чагарники, або рулонний газон). Способи та композиції, приведені в цьому документі, також можна застосовувати до рослин, отриманих за допомогою живцювання, клонування або прищепи (тобто до рослин, які виросли не з насіння), у тому числі до плодових дерев і рослин, які включають, без обмеження ними, цитрусові, яблука, авокадо, помідори, баклажани, огірки, дині, кавуни, виноград, а також різні декоративні рослини. Суміші пестицидів Полінуклеотидні композиції можуть також використовуватися у сумішах з різним агрохімікатами і/або інсектицидами, акарицидами і фунгіцидами, пестицидними і біопестицидними засобами. Приклади включають, без обмеження ними, азинфос-метил, ацефат, ізоксатіон, ізофенфос, етіон, етримфос, оксидеметон-метил, оксидепрофос, хіналфос, хлорпірифос, хлорпірифос-метил, хлорфенвінфос, цианофос, диоксабензофос, дихлофос, дисульфотон, диметилвінфос, диметоат, сульпрофос, диазинон, тіометон, тетрахлорвінфос, темефос, тебупіримфос, тербуфос, налед, вамідотіон, піраклофос, піридафентіон, піриміфосметил, фенитротіон, фентіон, фентоат, флупиразофос, протіофос, пропафос, профенофос, фоксим, фозалон, фосмет, формотіон, форат, малатіон, мекарбам, месульфенфос, метамідофос, метидатіон, паратіон, паратіон-метил, монокротофос, трихлорфон, EPN, ізазофос, ізамідофос, кадусафос, диамідафос, дихлорфентіон, тіоназин, фенаміфос, фостіазат, фостіетан, фосфокарб, DSP, етопрофос, аланікарб, алдікарб, ізопрокарб, етіофенкарб, карбаріл, карбосульфан, ксилілкарб, тіодикарб, піримікарб, фенобукарб, фуратіокарб, пропоксур, бендиокарб, бенфуракарб, метоміл, метолкарб, XMC, карбофуран, алдоксикарб, оксаміл, акрінатрин, алетрин, есфенвалерат, емпентрин, циклопротрин, цигалотрин, гаммацигалотрин, лямбда-цигалотрин, цифлутрин, бета-цифлутрин, циперметрин, альфациперметрин, зета-циперметрин, силафлуофен, тетраметрин, тефлутрин, дельтаметрин, тралометрин, біфентрин, фенотрин, фенвалерат, фенпропатрин, фураметрин, пралетрин, флуцитринат, флувалінат, флуброцитринат, перметрин, ресметрин, етофенпрокс, картап, тіоциклам, бенсультап, ацетаміприд, імідаклоприд, клотіанидин, динотефуран, тіаклоприд, тіаметоксам, нітенпірам, хлорфлуазурон, дифлубензурон, тефлубензурон, трифлумурон, новалурон, новифлумурон, бистрифлуорон, флуазурон, флуциклоксурон, флуфеноксурон, гексафлумурон, луфенурон, хромафенозид, тебуфенозид, галофенозид, метоксифенозид, діофенолан, циромазін, пірипроксифен, бупрофезин, метопрен, гідропрен, кінопрен, триазамат, ендосульфан, хлорфенсон, хлорбензилат, дикофол, бромопропілат, ацетопрол, фіпроніл, етіпрол, піретрин, ротенон, сульфат нікотину, агент BT (Bacillus Thuringiensis), спіносад, абамектин, ацеквіноцил, амідофлумет, амітраз, етоксазол, хінометіонат, клофентезин, фенбутатіну оксид, дієнохлор, цигексатин, спіродиклофен, спіромезіфен, тетрадіфон, тебуфенпірад, бінапакрил, біфеназат, піридабен, піримідифен, феназахін, фенотіокарб, фенпіроксимат, флуакрипірим, флуазінам, флуфензин, гекситіазокс, пропаргіт, бензомат, полінактиновий комплекс, мілбемектин, луфенурон, мекарбам, метіокарб, мевінфос, халфенпрокс, азадірахтін, діафентіурон, індоксакарб, бензоат емамектину, олеат калію, олеат натрію, хлорфенапір, толфенпірад, піметрозин, феноксикарб, гідраметилнон, гідроксипропіл крохмаль, піридаліл, флуфенерим, флубендиамід, флонікамід, метафлумізол, лепімектин, TPIC, альбендазол, оксибендазол, оксфендазол, трихламід, фенсульфотіон, фенбендазол, левамізолу гідрохлорид, морантель тартрат, дазомет, метам натрію, триадімефон, гексаконазол, пропіконазол, іпконазол, прохлораз, трифлумізол, тебуконазол, епоксиконазол, дифеноконазол, флусилазол, триадіменол, ципроконазол, метконазол, флухінконазол, бітертанол, тетраконазол, тритіконазол, флутриафол, пенконазол, диніконазол, фенбуконазол, бромуконазол, імібенконазол, сімеконазол, міклобутаніл, хімексазол, імазаліл, фураметпір, тифлузамід, етрідіазол, окспоконазол, окспоконазолу фумарат, пефуразоат, протіоконазол, пірифенокс, фенарімол, нуарімол, бупіримат, мепаніпірим, ципродиніл, піриметаніл, металаксіл, мефеноксам, оксадиксіл, беналаксіл, тіофанат, тіофанат-метил, беноміл, карбендазим, фуберідазол, тіабендазол, манзеб, пропінеб, зінеб, метірам, манеб, зірам, тіурам, хлороталоніл, UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 етабоксама, оксикарбоксин, карбоксин, флутоланіл, силтіофам, мепроніл, диметоморф, фенпропідин, фенпропіморф, спіроксамін, тридеморф, додеморф, флуморф, азоксистробін, крезоксим-метил, метоміностробін, орисастробін, флуоксастробін, трифлоксистробін, димоксистробін, піраклостробін, пікоксистробін, іпродіон, процимідон, вінклозолін, хлозолінат, флусульфамід, дазомет, метил ізотіоцианат, хлорпікрин, метасульфокарб, гідроксиізоксазол, гідроксиізоксазол калію, ехломезол, D-D, карбам, основний хлорид міді, основний сульфат міді, нонілфенолсульфонат міді, оксин міді, DBEDC, безводий сульфат міді, міді сульфат пентагідрат, гідроксид міді, неорганічна сірка, сірка, що змочується, сірчисте вапно, сульфат цинку, фентін, гідрокарбонат натрію, гідрокарбонат калію, гіпохлорит натрію, срібло, едифенфос, толклофос-метил, фосетіл, іпробенфос, дінокап, піразофос, карпропамід, фталід, трициклазол, пірохілон, диклоцимет, феноксаніл, касугаміцин, валідаміцин, поліоксини, бластицидін С, окситетрациклін, мілдіоміцин, стрептоміцин, рапсова олія, машинне мастило, бентіавалікарбізопропіл, іпровалікарб, пропамокарб, диетофенкарб, флуороімід, флудиоксаніл, фенпіклоніл, хіноксифен, оксолінова кислота, хлороталоніл, каптан, фолпет, пробеназол, ацибензолар-С-метил, тіадиніл, цифлуфенамід, фенгексамід, дифлуметорим, метрафенон, пікобензамід, прохіназид, фамоксадон, циазофамід, фенамідон, зоксамид, боскалід, цимоксаніл, дитіанон, флуазінам, дихлофлуанід, трифорін, ізопротіолан, ферімзон, дикломезин, теклофталам, пенцикурон, хіномеіионат, іміноктадину ацетат, іміноктадину албесілат, амбам, полікарбамат, тіадіазін, хлоронеб, диметилдитіокарбамат нікелю, гуазатин, додецилгуанідинацетат, квінтозен, толілфлуанід, анілазін, нітроталізопропіл, фенітропан, діметірімол, бентіазол, білок гарпін, флуметовер, мандіпропамід та пентіопірад. Полінуклеотиди Як використовується в цьому документі, термін "ДНК", "молекула ДНК", "полінуклеотидна молекула ДНК" належить до одноланцюгової ДНК (олДНК) або дволанцюгової ДНК (длДНК) молекули геномного або синтетичного походження, наприклад, полімеру з дезоксирібонуклеотидних основ або полінуклеотидної молекули ДНК. Як використовується в цьому документі, термін "послідовність ДНК", "нуклеотидна послідовність ДНК" або "полінуклеотидна послідовність ДНК" належить до нуклеотидної послідовності молекули ДНК. Як використовується в цьому документі, термін "РНК", "молекула РНК", "полінуклеотидна молекула РНК" належить до одноланцюгової РНК (олРНК) або дволанцюгової РНК (длРНК) молекули геномного або синтетичного походження, наприклад, полімер з рібонуклеотидних основ, які складають одно- або дволанцюгові ділянки. Якщо не вказане інше, то нуклеотидні послідовності в тексті цього опису читаються зліва направо в напрямку від 5' до 3'. Номенклатура, яка використовується в цьому документі, приведена згідно з вимогами Розділу 37 Зводу нормативних актів федеральних органів виконавчої влади США § 1,822 і представлена в таблицях згідно стандарту ВОІВ (Всесвітня організація інтелектуальної власності) ST.25 (1998), Додаток 2, Таблиці 1 та 3. Як використовується в цьому документі, "полінуклеотид" належить до молекули ДНК або РНК, що містить декілька нуклеотидів і зазвичай належить як до "олігонуклеотидів" (молекула полінуклеотиду зазвичай з 50 або менше нуклеотидів у довжину), так і до полінуклеотидів з 51 або більше нуклеотидів. Варіанти реалізації включають композиції, які складаються з олігонуклеотидів довжиною 18-25 нуклеотидів (18-мер, 19-мер, 20-мер, 21-мер, 22-мер, 23-мер, 24-мер або 25-мер), наприклад, олігонуклеотиди Таблиці 3 (SEQ ID NO: 1382-2221) або їх фрагменти, або полінуклеотиди середньої довжини, довжина яких складає 26 або більше нуклеотидів (полінуклеотиди з 26, 27, 28, 29, 30, 46, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, близько 65, близько 70, близько 75, близько 80, близько 85, близько 90, близько 95, близько 100, близько 110, близько 120, близько 130, близько 140, близько 150, близько 160, близько 170, близько 180, близько 190, близько 200, близько 210, близько 220, близько 230, близько 240, близько 250, близько 260, близько 270, близько 280, близько 290 або близько 300 нуклеотидів), наприклад, олігонуклеотиди Таблиці 2 (SEQ ID NO: 72-1381) або їх фрагменти, або полінуклеотиди більше ніж близько 300 нуклеотидів (наприклад, полінуклеотиди від близько 300 до близько 400 нуклеотидів, від близько 400 до близько 500 нуклеотидів, від близько 500 до близько 600 нуклеотидів, від близько 600 до близько 700 нуклеотидів, від близько 700 до близько 800 нуклеотидів, від близько 800 до близько 900 нуклеотидів, від близько 900 до близько 1000 нуклеотидів, від близько 300 до близько 500 нуклеотидів, від близько 300 до близько 600 нуклеотидів, від близько 300 до близько 700 нуклеотидів, від близько 300 до близько 800 нуклеотидів, від близько 300 до близько 900 нуклеотидів або близько 1000 нуклеотидів у довжину, або навіть більше ніж близько 1000 нуклеотидів у довжину, наприклад, досягають загальної довжини генумішені, у тому числі з кодуючими або некодуючими, або як кодуючими, так і некодуючими UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ділянками гену-мішені), наприклад, полінуклеотиди Таблиці 1 (SEQ ID NO: 1-71), в якій обрані полінуклеотиди або їх фрагменти, які гомологічні або комплементарні SEQ ID NO: 1-71, пригнічують, стримують або іншим чином уповільнюють експрессію гену-мішені ППГ-оксидази. Ген-мішень містить будь-яку молекулу полінуклеотиду в клітині рослини або її фрагменті, для якої модуляція експресії гену-мішені забезпечується способами та композиціями. Якщо полінуклеотид є дволанцюговим, його довжина може бути аналогічним чином описана відповідно до пар основ. Олігонуклеотиди і полінуклеотиди можна зробити практично ідентичними або практично комплементарними суміжним генетичним елементам гену, наприклад, такими, що охоплюють місце з’єднання інтрону та екзону, місце з’єднання промотору та області, що транскрибується, місце з’єднання 5'-лідерної і кодуючої послідовності, з’єднання 3'-нетрансльованої області і кодуючої послідовності. Композиції полінуклеотидів, використовувані в різних варіантах реалізації, включають композиції, які містять олігонуклеотиди або полінуклеотиди, або суміші їх обох, у тому числі РНК або ДНК, або гібриди РНК/ДНК, або хімічно модифіковані олігонуклеотиди або полінуклеотиди, або їх суміші. У деяких варіантах реалізації полінуклеотид може являти собою сполучення рібонуклеотидів і дезоксирібонуклеотидів, наприклад, синтетичні полінуклеотиди, що складаються переважно з рібонуклеотидів, але з одним або декількома кінцевими дезоксирібонуклеотидами або синтетичними полінуклеотидами, що складаються переважно з дезоксирібонуклеотидів, але з одним або більше кінцевими дидезоксирібонуклеотидами. У деяких варіантах реалізації полінуклеотид містить неканонічні нуклеотиди, такі як інозин, тіоуридин або псевдоуридин. У деяких варіантах реалізації полінуклеотид містить хімічно модифіковані нуклеотиди. Приклади хімічно модифікованих олігонуклеотидів або полінуклеотидів добре відомі в цій галузі техніки; дивися, наприклад, публікацію патенту США 20110171287, публікацію патенту США 20110171176 та публікацію патенту США 20110152353, публікацію патенту США 20110152346, публікацію патенту США 20110160082, які включені в цей документ у вигляді посилання. Наприклад, ті, які включають, без обмеження ним, фосфодиефірний остов олігонуклеотиду або полінуклеотиду, який зустрічається в природі, можуть бути частково або повністю модифіковані за допомогою міжнуклеотидних зв'язків, модифікованих фосфоротіоатом, фосфородитіоатом або метилфосфонатом, модифіковані нуклеозидні основи або модифіковані цукри можуть використовуватися у синтезі олігонуклеотидів або полінуклеотидів, та олігонуклеотиди або полінуклеотиди можуть бути помічені флуоресцентним фрагментом (наприклад, флуоресцеїн або родамін) або іншою міткою (наприклад, біотин). Полінуклеотиди можуть бути одно- або дволанцюговою РНК або одно- або дволанцюговою ДНК, або дволанцюговими ДНК/РНК гібридами або їх модифікованими аналогами та можуть мати довжини, як у олігонуклеотида або більше. У більш конкретних варіантах реалізації полінуклеотиди, які забезпечують одноланцюгову РНК в клітині рослини, обирають із групи, що складається з (а) одноланцюгової молекули РНК (олРНК), (б) одноланцюгової молекули РНК, яка самостійно гибридизується з утворенням дволанцюгової молекули РНК, (в) дволанцюгової молекули РНК (длРНК), (г) одноланцюгової молекули ДНК (олДНК), (д) одноланцюгової молекули ДНК, яка самостійно гибридизується з утворенням дволанцюгової молекули ДНК, і (е) одноланцюгової молекули ДНК, яка містить модифікований ген Pol III, який транскрибується в молекулу РНК, (є) дволанцюгової молекули ДНК (длДНК), (ж) дволанцюгової молекули ДНК, яка містить модифікований ген Pol III, який транскрибується в молекулу РНК, (з) дволанцюгової, гибридизированої молекули РНК/ДНК або їх комбінацій. У деяких варіантах реалізації ці полінуклеотиди містять хімічно модифіковані нуклеотиди або неканонічні нуклеотиди. У деяких варіантах реалізації винаходу олігонуклеотиди можуть бути з тупими кінцями або можуть мати 3'-виступ з 1-5 нуклеотидів, щонайменше одного або обох ланцюгів. Інші конфігурації олігонуклеотиду відомі в цій галузі техніки та розглядаються в цьому документі. У варіантах реалізації способу полінуклеотиди містять дволанцюгову ДНК, утворену внутрішньомолекулярною гібридизацією, дволанцюгову ДНК, утворену міжмолекулярною гібридизацією, дволанцюгову РНК, утворену внутрішньомолекулярною гібридизацією або дволанцюгову РНК, утворену міжмолекулярною гібридизацією. У одному варіанті реалізації полінуклеотиди містять одноланцюгову ДНК або одноланцюгову РНК, яка самостійно гібридизується і утворює шпилькову структуру з щонайменше частковою дволанцюговою структурою, що містить щонайменше один сегмент, який буде гібридизуватися з РНК, яка транскрибується з гену-мішені з метою пригнічення. У разі, якщо не передбачається зв'язування яким-небудь механізмом, вважають, що такі полінуклеотиди є або утворюватимуть одноланцюгову РНК з щонайменше одним сегментом, який буде гібридизуватися з РНК, яка транскрибується з гену-мішені з метою пригнічення. У деяких інших варіантах реалізації UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 полінуклеотиди додатково містять промотор, зазвичай промотор, що функціонує в рослині, наприклад, промотор pol II, промотор pol III, промотор pol IV або промотор pol V. Термін "ген" належить до компонентів, які включають хромосомну ДНК, плазмідну ДНК, кДНК, інтрон та екзон ДНК, штучну полінуклеотидну ДНК або іншу ДНК, яка кодує пептид, поліпептид, білок або молекулу РНК-транскрипту, а також генетичні елементи, які фланкують кодуючу послідовність, які беруть участь в регуляції експресії, наприклад, промоторна область, 5'-лідерна область, 3'-нетрансльована область, які можуть існувати як природний ген або трансген в геномі рослини. Ген або його фрагмент ізолюють і піддають дії способів секвенування полінуклеотидів, що визначає порядок нуклеотидів, які містять ген. Будь-який з компонентів гену являє собою потенційну мішень для тригерного олігонуклеотиду і полінуклеотидів. Молекули тригерного полінуклеотиду, призначені для модуляції експресії за допомогою індукції регуляції або пригнічення ендогенного гену ППГ-оксидази в рослині і призначені, щоб їх нуклеотидна послідовність була практично ідентичною або практично комплементарною нуклеотидній послідовності ендогенного гену ППГ-оксидази в рослині або послідовності РНК, яка транскрибується з ендогенного гену ППГ-оксидази рослини, включаючи трансген в рослині, який забезпечує стійкий до гербіциду фермент ППГ-оксидази, який може бути кодуючою послідовністю або некодуючою послідовністю. Ефективні молекули, які модулюють експресію, називають "тригерною молекулою або тригерними полінуклеотидами". Під "практично ідентичними" або "практично комплементарними" мають на увазі, що тригерні полінуклеотиди (або щонайменше один ланцюг дволанцюгового полінуклеотиду або його ділянки, або ділянки одноланцюгового полінуклеотиду) призначені для гібридизаціі з ендогенним геном некодуючої послідовності або з РНК, що транскрибується (відома як інформаційна РНК або РНКтранскрипт) з ендогенного гену для здійснення регуляції або пригнічення експресії ендогенного гену. Тригерні молекули визначають за допомогою "перекриття" генів-мішеней зондами, які частково перекриваються, або зондами, які не перекриваються, антисмислових або смислових полінуклеотидів, які практично ідентичні або практично комплементарні нуклеотидній послідовності ендогенного гену. Декілька послідовностей-мішеней можуть співпадати та області послідовності з однаковою гомологією, відповідно до способів, визначають як потенційні тригерні молекули для декількох мішеней. Декілька тригерних молекул різної довжини, яка складається з, наприклад, 18-25 нуклеотидів, 26-50 нуклеотидів, 51-100 нуклеотидів, 101-200 нуклеотидів, 201-300 нуклеотидів або більше можна об'єднати в пул з декількох способів для дослідження полінуклеотидних молекул, які охоплюють ділянку генної послідовності (наприклад, ділянка кодуючої області в порівнянні з ділянкою некодуючої області, або 5'-ділянка гену в порівнянні з 3'-ділянкою гену) або усю генну послідовність, включаючи кодуючу і некодуючу область гену-мішені. Полінуклеотидні молекули тригерних молекул, об'єднаних в пул, можна розділити на дрібніші пули або одиночні молекули, щоб визначити тригерні молекули, які забезпечують бажаний ефект. Полінуклеотидні молекули РНК та ДНК гену-мішені (Таблиця 1, SEQ ID NO: 1-71) секвенують будь-якою кількістю доступних способів і устаткування. Деякі з технологій секвенування є у продажу, наприклад, платформа для секвенування за допомогою гібридизації від компанії Affymetrix Inc. (Саннівейл, штат Каліфорнія) і платформи для секвенування за допомогою синтезу від компаній 454 Life Sciences (Бредфорд, штат Коннектікут), Illumina/Solexa (Хейуорд, штат Каліфорнія), і Helicos Biosciences (Кембрідж, штат Массачусетс), а також платформа секвенування за допомогою лігування від компанії Applied Biosystems (Фостер Сіті, штат Каліфорнія), як описане нижче. На додаток до секвенування одиночної молекули, виконаного з використанням секвенування за допомогою синтезу від компанії Helicos Biosciences, інші технології секвенування одиночної молекули здійснюються за допомогою способу і включають технологію SMRT™ компанії Pacific Biosciences, технологію Ion Torrent™ і нанопорове секвенування, розроблені, наприклад, компанією Oxford Nanopore Technologies. Ген-мішень ППГ-оксидази, що містить ДНК або РНК, може бути виділений з використанням праймерів або зондів практично комплементарних або практично гомологічних SEQ ID NO: 1-71 або їх фрагменту. Полімеразну ланцюгову реакцію (ПЛР) фрагменту гену можна отримати за допомогою використання праймерів практично комплементарних або практично гомологічних SEQ ID NO: 1-71 або їх фрагменту, що доцільно для виділення гену ППГ-оксидази з геному рослини. SEQ ID NO: 1-71 або їх фрагменти можуть використовуватися в різних технологіях захоплення послідовності для виділення додаткових послідовностей гену-мішені, наприклад, включаючи, без обмеження ними, Roche NimbleGen® (Медісон, штат Вісконсін) та стрептавідинзв'язані Dynabeads® (Life Technologies, Гранд Айленд, штат Нью-Йорк), та US20110015284, які включені в цей документ у вигляді посилання в повному обсязі. UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Комплементарність послідовностей варіантів реалізації функціональних одноланцюгових полінуклеотидів має бути не 100 відсотковою, а щонайменше достатньою, щоб дозволити гібридизацію з РНК, яка транскрибується з гену-мішені або ДНК гену-мішені з утворенням дуплексу, щоб дозволити механізм пригнічення експресії генів. Таким чином, у варіантах реалізації фрагмент полінуклеотиду призначений бути практично ідентичним або практично комплементарним послідовності з 18 або більше безперервних нуклеотидів як в послідовностімішені гену ППГ-оксидази, так і в інформаційній РНК, що транскрибується з гену-мішені. Під "практично ідентичними" мають на увазі 100 відсоткову ідентичність послідовності або щонайменше близько 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 або 99 відсоткову ідентичність послідовності в порівнянні з послідовністю з 18 або більше безперервних нуклеотидів як в гені-мішені, так і в РНК, що транскрибується з гену-мішені; під "практично комплементарними" мають на увазі 100 відсоткову комплементарність послідовності або щонайменше близько 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 або 99 відсоткову комплементарність послідовності в порівнянні з послідовністю з 18 або більше безперервних нуклеотидів як в гені-мішені, так і в РНК, що транскрибується з гену-мішені. У деяких варіантах реалізації молекули полінуклеотиду мають 100 відсоткову ідентичність послідовності з компліментарністю до однієї алелі або до одного представника сімейства цього гену-мішені (кодуюча або некодуюча послідовність гену); у інших варіантах реалізації молекули полінуклеотиду мають 100 відсоткову ідентичність послідовності з комплементарністю до декількох алелей або представників сімейства цього гену-мішені. Послідовності тригерних полінуклеотидів в переліку SEQ ID NO: 1-2221 або Таблицях 1, 2 або 3 можуть бути комплементарними або гомологічними ділянці послідовності гену-мішені ППГ-оксидази. У деяких варіантах реалізації полінуклеотиди, використовувані в композиціях, які практично ідентичні або практично комплементарні гену-мішені або транскрипту, міститимуть домінуючу нуклеїнову кислоту в композиції. Таким чином, в деяких варіантах реалізації полінуклеотиди, які практично ідентичні або практично комплементарні гену-мішені або транскрипту, міститимуть щонайменше близько 50%, 75%, 95%, 98% або 100% нуклеїнових кислот, приведених в композиції в масовій або молярній концентрації. Проте, в деяких варіантах реалізації полінуклеотиди, які практично ідентичні або практично комплементарні гену-мішені або транскрипту, можуть містити щонайменше від близько 1% до близько 50%, від близько 10% до близько 50%, від близько 20% до близько 50% або від близько 30% до близько 50% нуклеїнових кислот, приведених в композиції в масовій або молярній концентрації. Також розкриваються композиції, в яких полінуклеотиди практично ідентичні або практично комплементарні генумішені або транскрипту можуть містити щонайменше від близько 1% до 100%, від близько 10% до 100%, від близько 20% до близько 100%, від близько 30% до близько 50% або від близько 50% до 100% нуклеїнових кислот, приведених в композиції в масовій або молярній концентрації. "Ідентичність" належить до міри схожості двох послідовностей полінуклеїнових кислот або білків. Вирівнювання двох послідовностей виконується за допомогою відповідної комп'ютерної програми. Комп'ютерною програмою для виконання вирівнювання послідовностей, яка широко використовується і прийнята до використання являється CLUSTALW v1.6 (Thompson, із співавторами Nucl. Acids Res., 22: 4673-4680, 1994). Кількість схожих основ або амінокислот ділять на загальну кількість основ або амінокислот та множать на 100, щоб отримати відсоток ідентичності. Наприклад, якщо у двох послідовностей з 580 пар основ було б 145 схожих основ, вони були б ідентичними на 25 відсотків. Якщо дві порівнювані послідовності мають різну довжину, кількість збігів ділять на найменшу з двох довжин. Наприклад, якщо з 200 і 400 амінокислот білку є 100 схожих амінокислот, вони ідентичні на 50 відсотків по відношенню до коротшої послідовності. Якщо коротша послідовність становить менше ніж 150 основ або 50 амінокислот у довжину, кількість збігів ділять на 150 (для основ нуклеїнових кислот) або на 50 (для амінокислот) і множать на 100, щоб отримати відсоток ідентичності. Тригерні молекули для конкретних представників сімейства генів можна визначити з кодуючих і/або некодуючих послідовностей сімейств генів рослини або декількох рослин за допомогою вирівнювання і вибору 200-300 фрагментів полінуклеотиду з найменш гомологічних областей серед вирівняних послідовностей і оцінити за допомогою місцево застосованих полінуклеотидів (таких, як смислова або антисмислова олДНК або олРНК, длРНК або длДНК), щоб визначити їх відносну ефективність в стимулюванні фенотипу стійкості до гербіцидів. Ефективні сегменти у свою чергу ділять на 50-60 фрагментів полінуклеотиду з відданням переваги найменш гомологічним і повторно оцінюють за допомогою місцево застосованих полінуклеотидів. 50-60 ефективних фрагментів полінуклеотиду ділять на 19-30 фрагментів полінуклеотиду з відданням переваги найменш гомологічним і знову оцінюють для стимулювання виходу/якості фенотипу. Після оцінки відносної ефективності фрагменти UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 використовують окремо або знову оцінюють в комбінації з одним або декількома іншими фрагментами для визначення складу тригеру або суміші тригерних полінуклеотидів для забезпечення виходу/якості фенотипу. Тригерні молекули для широкого спектру дій можна визначити з кодуючих і/або некодуючих послідовностей сімейств генів рослини або декількох рослин за допомогою вирівнювання і вибору 200-300 фрагментів полінуклеотиду з найменш гомологічних областей серед вирівняних послідовностей і оцінити за допомогою місцево застосованих полінуклеотидів (таких, як смислова або антисмислова олДНК або олРНК, длРНК або длДНК), щоб визначити їх відносну ефективність в стимулюванні виходу/якості фенотипу. Ефективні сегменти ділять на 50-60 фрагментів полінуклеотиду з відданням переваги більш гомологічним і повторно оцінюють за допомогою місцево застосованих полінуклеотидів. 50-60 ефективних фрагментів полінуклеотиду ділять на 19-30 фрагментів полінуклеотиду з відданням переваги більш гомологічним і знову оцінюють для стимулювання виходу/якості фенотипу. Після оцінки відносної ефективності фрагменти використовують окремо або в комбінації з одним або декількома іншими фрагментами для визначення складу тригеру або суміші тригерних полінуклеотидів для забезпечення виходу/якості фенотипу. Способи отримання полінуклеотидів добре відомі в цій галузі техніки. Способи і композиції хімічного синтезу, синтезу in vivo та синтезу in vitro відомі в цій галузі техніки і включають різні вірусні елементи, мікробні клітини, модифіковані полімерази і модифіковані нуклеотиди. Комерційний синтез олігонуклеотидів часто забезпечує два дезоксирібонуклеотиди на 3'-кінці смислового ланцюга. Довгі молекули полінуклеотиду можна отримати за допомогою комерційно доступних наборів, наприклад, у наборах Applied Biosystems/Ambion (Остін, штат Техас) ДНК лігується на 5'-кінці в мікробній касеті експресії, яка містить бактерійний промотор полімерази Т7, що робить ланцюги РНК, які можна зібрати в длРНК, і наборів, що постачаються різними виробниками, які включають T7 RiboMax Express (Promega, Медісон, штат Вайомінг), AmpliScribe T7-Flash (Epicentre, Медісон, штат Вайомінг) та TranscriptAid T7 High Yield (Fermentas, Глен Берні, штат Меріленд). Молекули длРНК можна отримати з мікробних касет експресії у бактерійних клітинах (Ongvarrasopone із співавторами ScienceAsia 33:35-39; Yin, Appl. Microbiol. Biotechnol 84:323-333, 2009; Liu із співавторами, BMC Biotechnology 10:85, 2010), у яких регульована або недостатня активність ферменту РНКази III або із використанням різних вірусних векторів для отримання достатньої кількості длРНК. Фрагменти гену ППГ-оксидази поміщають в мікробні касети експресії в такому положенні, в якому фрагменти швидко формують олРНК або длРНК, які використовуються в способах, описаних в цьому документі, для регуляції експресії гену-мішені ППГ-оксидази. Довгі молекули полінуклеотиду можна також зібрати з декількох фрагментів РНК або ДНК. У деяких варіантах реалізації розрахункові параметри, такі як індекс Рейнольдса (Reynolds із співавторами Nature Biotechnology 22, 326330 (2004), правила Тушля (Pei та Tuschl, Nature Methods 3(9): 670-676, 2006), алгоритм i-score (Nucleic Acids Res 35: e123‚ 2007), програма i-Score Designer tool і пов'язані алгоритми (Nucleic Acids Res 32: 936-948‚ 2004. Biochem Biophys Res Commun 316: 1050-1058‚ 2004, Nucleic Acids Res 32: 893-901‚ 2004, Cell Cycle 3: 790-5‚ 2004, Nat Biotechnol 23: 995-1001‚ 2005, Nucleic Acids Res 35: e27‚ 2007, BMC Bioinformatics 7: 520‚ 2006, Nucleic Acids Res 35: e123‚ 2007, Nat Biotechnol 22: 326-330‚ 2004) відомі в цій галузі техніки і можуть використовуватися при виборі полінуклеотидних послідовностей, ефективних для пригнічення експресії генів. У деяких варіантах реалізації проводять скринінг послідовності полінуклеотиду проти геномної ДНК цільової рослини, щоб мінімізувати неумисне пригнічення експресії інших генів. Композиції тригерних молекул полінуклеотиду і олігонуклеотиду використовуються в композиціях, наприклад, в рідинах, які містять ці молекули полінуклеотиду, при низьких концентраціях, окремо або в комбінації з іншими компонентами, наприклад, однією або декількома молекулами гербіциду або в тій же рідині, або в окремо взятих рідинах, які також забезпечують агент перенесення. Хоча не існує ніякої верхньої межі концентрацій і дозувань молекул полінуклеотиду, які можуть використовуватися в цих способах, для ефективності зазвичай треба буде знайти нижню межу ефективних концентрацій і дозувань. Концентрації можна скорегувати з урахуванням об'єму спрею або обробки, яка застосовується до листя рослини або інших частин поверхні рослини, таких як квіткові пелюстки, стебла, бульби, фрукти, пильовики, пилок або насіння. У одному варіанті реалізації необхідна обробка трав'янистих рослин з використанням 25-мерної олігонуклеотидної молекули вимагає близько 1 наномоль (нмоль) молекул олігонуклеотидів на рослину, наприклад, від близько 0,05 до 1 нмоль на рослину. Інші варіанти реалізації для трав'янистих рослин включають необхідні діапазони концентрації від близько 0,05 до близько 100 нмоль або від близько 0,1 до близько 20 нмоль, або від близько 1 нмоль до близько 10 нмоль полінуклеотидів на рослину. Дуже великі рослини, UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 дерева або лози можуть потребувати відповідно більшої кількості полінуклеотидів. При використанні довгих молекул длРНК, які можна перетворити в декілька олігонуклеотидів, можна використати нижчі концентрації. Щоб продемонструвати деякі варіанти реалізації, відносно олігонуклеотидних молекул для зазначення обробки 0,8 нмоль молекули полінуклеотиду на рослину умовно використовують фактор 1Х; 10Х для 8 нмоль молекули полінуклеотиду на рослину; і 100Х для 80 нмоль молекули полінуклеотиду на рослину. Полінуклеотидні композиції використовуються в композиціях, наприклад, в рідинах, які містять молекули полінуклеотиду, окремо або в комбінації з іншими компонентами, або в тій же рідині, або в окремо взятих рідинах, які також забезпечують агент перенесення. Як використовується в цьому документі, агент перенесення являє собою агент, який у поєднанні з полінуклеотидом в композиції, яка місцево застосовується до поверхні рослини-мішені, дозволяє полінуклеотиду потрапити в клітину рослини. У деяких варіантах реалізації агент перенесення являє собою агент, який кондиціонує поверхню тканини рослини, наприклад, листя, стебла, корені, квіти або фрукти для потрапляння за допомогою молекул полінуклеотиду в клітини рослини. Перенесення полінуклеотидів в клітини рослини може бути полегшене за допомогою попереднього або одночасного застосування агенту перенесення полінуклеотиду до тканини рослини. У деяких варіантах реалізації агент перенесення застосовують після нанесення полінуклеотидної композиції. Агент перенесення полінуклеотиду забезпечує полінуклеотидам шлях через воскові бар'єри серозної оболонки, пори і/або стінки клітини або мембранні бар'єри в клітини рослини. Відповідні агенти перенесення для полегшення перенесення полінуклеотиду в клітину рослини включають агенти, які покращують проникність зовнішньої поверхні рослини або які покращують проникність олігонуклеотидів або полінуклеотидів в клітини рослини. Такі агенти для полегшення перенесення композиції в клітину рослини містять хімічну речовину або фізичну речовину, або їх комбінації. Хімічні речовини длякондиціонування або перенесення містять: (а) поверхнево-активні речовині, (б) органічний розчинник або водний розчин, або водні суміші органічних розчинників, (в) окисники, (г) кислоти, (д) луги, (е) олії, (є) ферменти або їх комбінації. Варіанти реалізації способу можуть необов'язково включати етап інкубації, етап нейтралізації (наприклад, щоб нейтралізувати кислоту, лугу або окисник або інактивувати фермент), етап обполіскування або їх комбінації. Варіанти реалізації агентів або обробки для кондиціонування рослини з метою проникнення полінуклеотидів включають емульсії, зворотні емульсії, ліпосоми та інші міцелоподібні композиції. Варіанти реалізації агентів або обробки для кондиціонування рослини з метою проникнення полінуклеотидів містять протиіони або інші молекули, які, як відомо, пов'язують з молекулами нуклеїнових кислот, наприклад, неорганічні іони амонію, іони алкіламонію, іони алкіллітію, поліаміни, такі як спермін, спермідин або путресцин та інші катіони. Органічні розчинники, які використовуються в кондиціонуванні рослини з метою проникнення полінуклеотидів, містять DMSO, DMF, піридин, N-піролідин, гексаметилфосфорамід, ацетонітрил, диоксан, поліпропіленгліколь, інші розчинники, здатні змішуватися з водою або які розчинятимуть фосфонуклеотиди в неводних системах (наприклад, які використовуються в реакціях синтезу). Можуть використовуватися природні або синтетичні олії з додаванням або без поверхнево-активних речовин або емульгаторів, наприклад, олії рослинного походження, th олії з насіння (наприклад, можна використати ті, які є в переліку 9 Compendium of Herbicide Adjuvants, у відкритому доступі всесвітньої мережі (Інтернет) на сайті herbicide.adjuvants.com, наприклад, парафінові олії, ефіри жирної кислоти і багатоатомного спирту або олії з молекулами з коротким ланцюгом, модифіковані амідами або поліамінами, такі як поліетиленімін або N-піролідин. Агенти перенесення містять, без обмеження ними, кремнійорганічні препарати. Ліганди можуть бути прив’язані до полінуклеотиду, наприклад, длРНК, олРНК, длДНК або олДНК. Ліганди в цілому можуть містити модифікатори, наприклад, для поліпшення поглинання; діагностичні сполуки або репортерні групи, наприклад, для моніторингу розподілу; зшиваючі агенти; фрагменти, які надають стійкість до нуклеази; і природні або нестандартні нуклеїнові основи. Звичайні приклади включають ліпофіли, ліпіди (наприклад, холестерин, жовчна кислота або жирні кислоти (наприклад, літохолевий олеїл, лауроїл, докозеніл, стеароїл, пальмитоїл, міристоїлу олеоїл, лінолеоїл)), стероїди (наприклад, уваол, гецигенін, диосгенін), терпени (наприклад, тритерпени, наприклад, сарсасапогенін, фриеделін, літохолева кислота, дериватизирована епифріделанолом), вітаміни (наприклад, фолієва кислота, вітамін А, біотин, піридоксаль), вуглеводи, білки, агенти, що зв'язують білок, молекули, спрямовані на інтегрин, полікатіони, пептид, поліаміни і пептидоміметики. Ліганд може також бути рекомбінантною або синтетичною молекулою, такою як синтетичний полімер, наприклад, поліетиленгліколь (ПЕГ), ПЕГ-40K, ПЕГ-20K та ПЕГ-5K. Інші приклади лігандів включають ліпофільні молекули, такі як, UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 холестерин, холева кислота, адамантан оцтової кислоти, 1-пірен масляна кислота, дигідротестостерон, гліцерин (наприклад, складні ефіри та їх прості ефіри, наприклад, С 10, С11, C12, C13, C14, C15, C16, C17, C18, C19 або С20 алкіл; наприклад, лауроїл, докозеніл, стеароїл, олеоїл, лінолеоїл, 1,3-біс-O(гексадецил)гліцерину, 1,3-біс-O(октадецил)гліцерину, геранілоксигексильна група, гексадецилгліцерин, борнеол, ментол, 1,3-пропандіол, гептадецильна група, пальмітинова кислота, міристинова кислота, O3-(олеоїл)литохолевої кислоти, O3(олеоїл)холенової кислоти, додеканоїл, літохоліл, 5β-холаніл, N,N-дистеарїл-літохоламід, 1,2ди-О-стеароїлгліцерид, диметокситритіл або феноксазин) та ПЕГ (наприклад, ПЕГ-5K, ПЕГ-20K, ПЕГ-40K). Переважні ліпофільні фрагменти містять ліпід, холестерини, олеїл, ретиніл або холестерильні залишки. З'єднання ліганду з длРНК може поліпшити її клітинну абсорбцію, ліпофільні сполуки, які були з’єднані з олігонуклеотидами, містять 1-пірен масляну кислоту, 1,3-біс-O(гексадецил)гліцерин та ментол. Одним з прикладів ліганду для рецепторно-опосередкованого ендоцитозу є фолієва кислота. Сполуки длРНК, які містять фолієву кислоту, можна було б ефективно транспортувати в клітину за допомогою фолат-рецепторно-опосередкованого ендоцитозу. Інші ліганди, які були з’єднані з олігонуклеотидами, включають поліетиленгліколі, вуглеводні кластери, зшиваючі агенти, кон'югати порфірину, транспортні пептиди та ліпіди, такі як холестерин. В деяких випадках з'єднання катіонного ліганду з олігонуклеотидом призводить до поліпшення стійкості до дії нуклеази. Типовими прикладами катіонних лігандів є пропіламонію та диметилпропіламонію. Цікаво, що повідомлялося, що антисмислові олігонуклеотиди зберігають свою високу афинність зв'язування з іРНК після того, як катіонний ліганд розподілили по усьому олігонуклеотиду. Дивися M. Manoharan Antisense & Nucleic Acid Drug Development 2002, 12, 103 та посилання в ньому. Біологічна доставка може бути здійснена різними способами, включаючи, без обмеження ними, (1) завантаження ліпосом молекулою длРНК, описаною в цьому винаході і (2) утворення комплексу молекули длРНК з ліпідами або ліпосомами з отриманням комплексів "нуклеїнова кислота-ліпід" або "нуклеїнова кислота-ліпосома". Ліпосома може складатися з катіонних та нейтральних ліпідів, зазвичай використовуваних для трансфекції клітин in vitro. Катіонні ліпіди можуть вступати в реакції комплексоутворення (наприклад, з перенесенням заряду) з негативно зарядженими нуклеїновими кислотами з утворенням ліпосом. Прикладами катіонних ліпосом є, без обмеження ними, ліпофектин, ліпофектамін, ліпофектак та DOTAP. Способи отримання ліпосом добре відомі фахівцям в цій галузі техніки. Ліпосомні композиції можна отримати, наприклад, з фосфатидилхоліну, диміристоїлфосфатидилхоліну, дипальмітоїлфосфатидилхоліну, диміристоїлфосфатиділгліцерину, диолеїлфосфатиділетаноламіну або ліпосом, що містять дигідросфінгоміелін (DHSM). Багато ліпофільних агентів є комерційно доступними, включаючи Lipofectin.RTM. (Invitrogen/Life Technologies, Карлсбад, штат Каліфорнія) та Effectene™ (Qiagen, Валенсія, штат Каліфорнія). Крім того, способи системної доставки можуть бути оптимізовані з використанням комерційно доступних катіонних ліпідів, таких як DDAB або DOTAP, кожен з яких може бути змішаний з нейтральним ліпідом, таким як DOPE або холестерин. В деяких випадках можуть використовуватися ліпосоми, наприклад, описані в публікації Templeton із співавторами Nature Biotechnology, 15:647-652 (1997). У інших варіантах реалізації для доставки in vivo та ex vivo можуть використовуватися полікатіони, такі як поліетиленімін (Boletta із співавторами, J. Am Soc. Nephrol. 7:1728, 1996). Додаткову інформацію, що належить до використання ліпосом для доставки нуклеїнових кислот, можна знайти в патенті США за номером 6,271,359, в публікації заявки PCT WO 96/40964 та в публікації Morrissey, D. із співавторами, 2005, Nature Biotechnol. 23(8):1002-7. У деяких варіантах реалізації кремнійорганічний препарат, який є комерційно доступним, як поверхнево-активна речовина Silwet® L-77 під номером CAS 27306-78-1 та номером EPA: CAL.REG.NO. 5905-50073-AA і нині поставляється компанією Momentive Performance Materials, Олбані, штат Нью-Йорк, можна використовувати для отримання полінуклеотидної композиції. У деяких варіантах реалізації, в яких кремнійорганічний препарат Silwet L-77 використовується для попередньої обробки (перед розпиленням) листя рослини або інших поверхонь рослини, свіжоприготовані концентрації в діапазоні від близько 0,015 до близько 2 відсотків по вазі (мас. %) (наприклад, близько 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045, 0,05, 0,055, 0,06, 0,065, 0,07, 0,075, 0,08, 0,085, 0,09, 0,095, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,5 мас. %) є ефективними в підготовці листа або іншої поверхні рослини до перенесення молекул полінуклеотиду в клітини рослини при місцевому застосуванні на поверхні. У деяких варіантах реалізації способів та композицій, приведених в цьому винаході, використовується або надається композиція, яка містить полінуклеотидну UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 молекулу і кремнійорганічний препарат, який містить Silwet L-77 в діапазоні від близько 0,015 до близько 2 відсотків по вазі (мас. %) (наприклад, близько 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045, 0,05, 0,055, 0,06, 0,065, 0,07, 0,075, 0,08, 0,085, 0,09, 0,095, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,5 мас. %). У деяких варіантах реалізації будь-який з комерційно доступних кремнійорганічних препаратів, що надаються під наступними товарними знаками: Breakthru S 321, Breakthru S 200 Cat# 67674-67-3, Breakthru OE 441 Cat#68937-55-3, Breakthru S 278 Cat #27306-78-1, Breakthru S 243, Breakthru S 233 Cat#134180-76-0, виробництва компанії Evonik Goldschmidt (Німеччина), Silwet® HS 429, Silwet® HS 312, Silwet® HS 508, Silwet® HS 604 (виробництва компанії Momentive Performance Materials, Олбані, штат Нью-Йорк), може використовуватися як агент перенесення у полінуклеотидній композиції. У деяких варіантах реалізації, в яких кремнійорганічний препарат використовується для попередньої обробки (перед розпиленням) листя рослини або інших поверхонь рослини, свіжоприготовані концентрації в діапазоні від близько 0,015 до близько 2 відсотків по вазі (мас. %) (наприклад, близько 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045, 0,05, 0,055, 0,06, 0,065, 0,07, 0,075, 0,08, 0,085, 0,09, 0,095, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,5 мас. %) є ефективними в підготовці листа або іншої поверхні рослини до перенесення молекул полінуклеотиду в клітини рослини при місцевому застосуванні на поверхні. У деяких варіантах реалізації способів та композицій, приведених в цьому винаході, використовується або надається композиція, яка містить полінуклеотидну молекулу і кремнійорганічний препарат в діапазоні від близько 0,015 до близько 2 відсотків по вазі (мас. %) (наприклад, близько 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045, 0,05, 0,055, 0,06, 0,065, 0,07, 0,075, 0,08, 0,085, 0,09, 0,095, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,5 мас. %). Кремнійорганічні препарати, використовувані в способах та композиціях, приведених в цьому винаході, можуть містити одну або більше ефективних кремнійорганічних сполук. Як використовується в цьому документі, вираз "ефективна кремнійорганічна сполука" використовується для опису будь-якої кремнійорганічної сполуки, яка міститься в кремнійорганічному препараті, який дозволяє полінуклеотиду потрапити в клітину рослини. У деяких варіантах реалізації ефективні кремнійорганічні сполуки можуть дозволити полінуклеотиду потрапити в клітину рослини таким чином, щоб дозволити полінуклеотидоопосередковане пригнічення експресії гену-мішені в клітині рослини. В цілому, ефективні кремнійорганічні сполуки включають, без обмеження ними, сполуки, які можуть містити: i) трисилоксанову головну групу, сполучену ковалентним зв'язком з, ii) алкільним лінкером, який включає, без обмеження ним, н-пропіловий лінкер, сполучений ковалентним зв'язком з, iii) полігліколевим ланцюгом, сполученим ковалентним зв'язком з, iv) кінцевою групою. Трисилоксанові головні групи таких ефективних кремнійорганічних сполук включають, без обмеження ним, гептаметилтрисилоксан. Алкільні лінкери можуть включати, без обмеження ним, н-пропіловий лінкер. Полігліколеві ланцюги включають, без обмеження ними, поліетиленгліколь або поліпропіленгліколь. Полігліколеві ланцюги можуть містити суміш, яка забезпечує середню довжину ланцюга "n" близько "7,5". У деяких варіантах реалізації середня довжина ланцюга "n" може варіюватися від близько 5 до близько 14. Кінцеві групи можуть включати, без обмеження ними, алкільні групи, такі як метильная група. Вважається, що ефективні кремнійорганічні сполуки включають, без обмеження ними, трисилоксанетоксиліровані поверхнево-активні речовини або поліалкіленоксид, модифікований гептаметилтрисилоксаном. (Сполука I: поліалкіленоксид гептаметилтрисилоксан, середня довжина n=7.5). У деяких варіантах реалізації кремнійорганічний препарат, що містить кремнійорганічну сполуку, включаючу трисилоксанову головну групу, використовується в способах та композиціях, приведених в цьому винаході. У деяких варіантах реалізації кремнійорганічний препарат, що містить кремнійорганічну сполуку, включаючу гептаметилтрисилоксанову головну групу, використовується в способах та композиціях, приведених в цьому винаході. У деяких UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 варіантах реалізації кремнійорганічна композиція, яка містить Сполуку I, використовується в способах та композиціях, приведених в цьому винаході. У деяких варіантах реалізації кремнійорганічна композиція, яка містить Сполуку I, використовується в способах та композиціях, приведених в цьому винаході. У деяких варіантах реалізації способів та композицій, приведених в цьому винаході, використовується або надається композиція, яка містить полінуклеотидну молекулу та одну або більше ефективну кремнійорганічну сполуку в діапазоні від близько 0,015 до близько 2 відсотків по вазі (мас. %) (наприклад, близько 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045, 0,05, 0,055, 0,06, 0,065, 0,07, 0,075, 0,08, 0,085, 0,09, 0,095, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,5 мас. %. Композиції включають, без обмеження ними, компоненти, в яких один або більше полінуклеотидів практично ідентичні або практично комплементарні послідовності гену ППГоксидази (промотор, інтрон, екзон, 5'-нетрансльована область, 3'-нетрансльована область), агент перенесення, який забезпечує полінуклеотиду потрапляння в клітину рослини, гербіцид, який доповнює дію полінуклеотиду, один або декілька додаткових гербіцидів, які додатково посилюють гербіцидну дію композиції або забезпечують додатковий механізм дії, відмінний від механізму дії доповнюючого гербіциду, різні солі та стабілізуючи агенти, які збільшують корисність композиції у вигляді домішки компонентів композиції. Способи включають одно або декілька застосувань полінуклеотидної композиції та одно або декілька застосувань агента, який покращує проникність для кондиціонування з метою проникнення полінуклеотидів. Якщо агент для кондиціонування з метою проникнення являє собою кремнійорганічну сполуку або сполуку, що міститься в нім, варіанти реалізації полінуклеотидних молекул являють собою дволанцюгові РНК олігонуклеотиди, одноланцюгові РНК олігонуклеотиди, дволанцюгові РНК полінуклеотиди, одноланцюгові РНК полінуклеотиди, дволанцюгові ДНК олігонуклеотиди, одноланцюгові ДНК олігонуклеотиди, дволанцюгові ДНК полінуклеотиди, одноланцюгові ДНК полінуклеотиди, хімічно модифіковані РНК або ДНК олігонуклеотиди або полінуклеотиди або їх суміші. Композиції та способи використовують для модуляції експресії ендогенного гену ППГоксидази (наприклад, патент США за номером 7,838,263; 6,084,155) або трансгенного гену ППГоксидази (патент США за номером 7,842,856; 7,485,777; публікація патенту США 20070050863) в клітині рослини. У різних варіантах реалізації ген ППГ-оксидази містить кодуючу (білоккодуючу або трансльовану) послідовність, некодуючу (нетрансльовану) послідовність або як кодуючу, так і некодуючу послідовність. Композиції можуть містити полінуклеотиди та олігонуклеотиди, призначені для виявлення декількох генів або декількох сегментів одного або більше генів. Ген-мішень може містити декілька послідовних сегментів гену-мішені, декілька непослідовних сегментів гену-мішені, декілька алелей гену-мішені або декілька генів-мішені з одного або більше видів. Розкривається спосіб для модуляції експресії гену ППГ-оксидази в рослині, який включає: (а) кондиціонування рослини для проникнення полінуклеотидів та (б) обробку рослини полінуклеотидними молекулами, в якій полінуклеотидні молекули містять щонайменше один сегмент з 18 або більше безперервних нуклеотидів, клонованих або іншим чином отриманих з гену-мішені ППГ-оксидази в антисмисловій або смисловій орієнтації, при якій полінуклеотидні молекули потрапляють всередину рослини та стимулюють модуляцію гену-мішені. Кондиціонування та застосування полінуклеотиду можна виконати окремо або за один етап. Коли кондиціонування та застосування полінуклеотиду виконують на окремих етапах, кондиціонування може передувати або може виконуватися після застосування полінуклеотиду впродовж декількох хвилин, годин або днів. У деяких варіантах реалізації на одній і тій же рослині може здійснювати більше ніж один етап кондиціонування або застосовувати більше ніж одну молекулу полінуклеотиду. У варіантах реалізації способу сегмент можна клонувати або отримати з (а) кодуючої (білок-кодуючої), (б) некодуючої (промотор та інші молекули, які стосуються генів) або (в) і кодуючих, і некодуючих частин гену-мішені. Некодуючі частини включають ДНК, наприклад, промоторні області або РНК, що транскрибується за допомогою ДНК, яка забезпечує регуляторні молекули РНК, включаючи, без обмеження ними: інтрони, 5'або 3'-нетрансльовані області та мікроРНК, транс-діючі міРНК, природні антисмислові міРНК та інші малі РНК з регуляторною функцією або РНК, виконуючі структурну або ферментативну функцію, включаючи, без обмеження ними: рібозими, рібосомні РНК, тРНК, аптамери та рібосвітчі. Усі публікації, патенти та патентні заявки включені в цей документ у вигляді посилання так, як якби кожна окрема публікація або патентна заявка була б конкретно і окремо включена за допомогою окремого посилання. UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Наступні приклади включені для демонстрації прикладів деяких переважних варіантів реалізації. Фахівцями в цій галузі техніки повинне оцінитися те, що технології, розкриті в прикладах, відповідають підходам, які винахідники успішно застосували на практиці, і, отже, можуть розглядатися як зразки переважних варіантів реалізації для його практичного застосування. Проте, фахівці в цій галузі техніки, відповідно до цього опису, повинні оцінити можливість виконання багатьох змін в конкретних варіантах реалізації, які були розкриті і все ж таки отримати схожий або аналогічний результат без відхилення від суті і обсягу цього винаходу. ПРИКЛАДИ Приклад 1. Полінуклеотиди, що належать до нуклеотидних послідовностей гену ППГоксидази. Полінуклеотидні молекули-мішені ППГ-оксидази в природі зустрічаються в геномі Amaranthus albus, Amaranthus graecizans, Amaranthus hybridus, Amaranthus lividus, Amaranthus palmeri, Amaranthus rudis, Amaranthus spinosus, Amaranthus thunbergii, Amaranthus viridis, Ambrosia trifida, Chenopodium album, Commelina diffusa, Conyza canadensis, Digitaria sanguinalis, Euphorbia heterophylla, Kochia scoparia, Lolium multiflorum та включають молекули, пов'язані з експресією поліпептиду, який визначається як ППГ-оксидаза, що містить регуляторну молекулу, кДНК, яка містить кодуючу і некодуючу область гену ППГ-оксидази і його фрагменту, як показано в Таблиці 1. Полінуклеотидні молекули екстрагують з цих видів рослин за допомогою стандартних для цієї галузі техніки способів, наприклад, тотальну РНК екстрагують з використанням реагенту Trizol (Invitrogen Corp, Карлсбад, штат Каліфорнія, Cat. No. 15596-018) з дотриманням фахівцями в галузі екстракції полінуклеотиду протоколу виробника або його модифікацій, що може поліпшити відновлення або чистоту екстрагованої РНК. Коротко, розпочинають з 1 граму подрібнених тканин рослини для екстракції. Заздалегідь розподіляють на аліквоти 10 мілілітрів (мл) реагенту Trizol в 15 мл конічні пробірки. Додають подрібнений порошок в пробірки і струшують, щоб гомогенізувати. Інкубують гомогенізовані зразки впродовж 5 хвилин (хв) при кімнатній температурі (КТ) та потім додають 3 мл хлороформу. Енергійно трясуть пробірку вручну впродовж 15-30 секунд (сек) і інкубують при КТ впродовж 3 хв. Центрифугують пробірку при 7000 оборотах за хвилину (об/хв) впродовж 10 хв при 4 °C. Переливають водну фазу в нову 1,5 мл пробірку і додають 1 об'єм холодного ізопропанолу. Інкубують зразки впродовж 20-30 хв при КТ і центрифугують при 10000 об/хв впродовж 10 хв при 4 °С. Промивають гранули 80 відсотковим етанолом Sigma-класу. Видаляють супернатант і швидко висушують гранули на повітрі. Розчиняють РНК гранулу приблизно в 200 мікролітрах води, очищеної діетилпірокарбонатом. Недовго нагрівають при 65 °С, щоб розчинити гранулу і перемішують на вортексі або відміряють піпеткою, щоб ресуспендувати РНК гранулу. Корегують концентрацію РНК до 1-2 мікрограмів/мікролітр. ДНК екстрагують за допомогою набору EZNA SP Plant DNA Mini kit (Omega Biotek, Норкросс, штат Джорджія, Cat#D5511) і пробірок Lysing Matrix E (Q-Biogen, Cat#6914) з дотриманням фахівцями в галузі екстракції полінуклеотиду протоколу виробника або його модифікацій, що може поліпшити відновлення або чистоту екстрагованої ДНК. Коротко, до аліквоти подрібненої тканини в пробірці Lysing Matrix E на сухому льоді додають 800 мкл Buffer SP1 в кожен зразок, гомогенізують за допомогою руйнуючого клітини міні-гомогенізатора типу beadbeater впродовж 35-45 сек, інкубують на льоду впродовж 45-60 сек, центрифугують при ≥ 14000 об/хв впродовж 1 хв при КТ, додають 10 мікролітрів РНКази А в лізат, інкубують при 65 °С впродовж 10 хв, центрифугують впродовж 1 хв при КТ, додають 280 мкл Buffer SP2 і вортекс в суміш, інкубують зразки на льоду впродовж 5 хв, центрифугують при ≥ 10000 об/хв впродовж 10 хв при КТ, переносять супернатант в колонку-гомогенізатор в 2 мл пробірці для збору зразків, центрифугують при 10000 об/хв впродовж 2 хв при КТ, переносять очищений лізат в 1,5 мл мікроцентрифужну пробірку, додають 1,5 об'єму Buffer SP3 до очищеного лізату, негайно перемішують на вортексі для отримання гомогенної суміші, переносять до 650 мкл супернатанту до колонки Hi-Bind, центрифугують при 10000 об/хв впродовж 1 хв, повторюють, застосовують 100 мкл 65 °С Elution Buffer до колонки, центрифугують при 10000 об/хв впродовж 5 хв при КТ. Секвенсори ДНК нового покоління, такі як 454-FLX (Roche, Бренфорд, штат Коннектікут), SOLiD (Applied Biosystems), а також Genome Analyzer (HiSeq2000, Illumina, Сан-Дієго, штат Каліфорнія) використовують, щоб забезпечити екстракцію з тканин рослини полінуклеотидної послідовності ДНК та РНК. Первинні дані секвенування збирають в контиги. Послідовність контигів використовують для визначення тригерних молекул, які можуть застосовуватися до рослин, щоб дозволити регуляцію експресії генів. UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Послідовність ДНК-мішені виділяють з геномної (гДНК) та кодуючої ДНК (кДНК) з різних видів смітних рослин для гену ППГ-оксидази, і зібрані контиги представляють в SEQ ID NO: 1-71 та в Таблиці 1 (дивися додатковий додаток 40_21(58640)Btable1.doxc). Приклад 2. Полінуклеотиди, що належать до тригерних молекул Послідовності генів та фрагментів з Таблиці 1 розділяють на довжини по 200 полінуклеотидів (200-мер) з 25 полінуклеотидними областями, що перекриваються, і показують в Таблиці 2, SEQ ID NO: 72-429. Ці полінуклеотиди випробовують, щоб вибрати найбільш ефективні тригерні області по усій довжині кожної послідовності-мішені. Тригерні полінуклеотиди виконують у вигляді смислової або антисмислової олДНК або олРНК, длРНК або длДНК, або длДНК/РНК гібридів і об'єднують з агентом перенесення на кремнійорганічній основі, щоб забезпечити створення полінуклеотидного препарату. Полінуклеотиди об'єднують в набори з від двох до трьох полінуклеотидів в наборі, використовуючи по 4-8 нмоль кожного полінуклеотиду. Кожен набір полінуклеотидів обробляють агентом перенесення і застосувують до рослини або поля рослин в комбінації з гербіцидом, що містить інгібітор ППГ-оксидази, або з подальшою обробкою інгібітором ППГ-оксидази на перший-третій день після застосування полінуклеотиду, щоб визначити вплив на сприйнятливість рослини до інгібітору ППГ-оксидази. Вплив визначають як затримку росту і/або знищення рослини та визначають на 8-14 день після обробки набором полінуклеотиду і інгібітором ППГ-оксидази. Виявляють найбільш ефективні набори і випробовують окремі полінуклеотиди тими ж способами, як і набори та виявляють окремий 200-мерний найбільш ефективний полінуклеотид. 200-мерну послідовність розділяють на дрібніші послідовності з 50-70-мерних областей з 10-15 полінуклеотидними областями, що перекриваються, і випробовують полінуклеотиди в індивідуальному порядку. Найбільш ефективний 50-70-мерний полінуклеотид додатково розділяють на дрібніші послідовності з 25мерних областей з 12-13 полінуклеотидними областями, що перекриваються, і випробовують на ефективність в комбінації з обробкою інгібітором ППГ-оксидази. За допомогою цього способу можна визначити олігонуклеотид або декілька олігонуклеотидів, які є найбільш ефективними тригерними молекулами для впливу на сприйнятливість рослини до інгібітору ППГ-оксидази або на модуляцію експресії гену ППГ-оксидази. Модуляцію експресії гену ППГ-оксидази визначають за допомогою виявлення міРНК молекул ППГ-оксидази, характерних для гену ППГ-оксидази, або за допомогою вивчення зменшення кількості РНК-транскрипту ППГ-оксидази, що виробляється, в порівнянні з необробленою рослиною, або за допомогою простого вивчення очікуваного фенотипу застосування тригеру з гербіцидом, що містить інгібітор ППГ-оксидази. Виявити міРНК можна, наприклад, з використанням наборів, таких як mirVana (Ambion, Остін, штат Техас) і mirPremier (Sigma-Aldrich, Сент-Луїс, штат Міссурі). Послідовність ДНК-мішені, виділена з геномної (гДНК) та кодуючої ДНК (кДНК) з різних видів смітних рослин для гену ППГ-оксидази, та зібрані контиги, представлені в SEQ ID NO: 1-71, розділяють на полінуклеотидні фрагменти, як показано в Таблиці 2 (дивися додатковий додаток 40_21(58640)Btable2.docx) і представлено в SEQ ID NO: 72-1381. Послідовності генів та фрагментів з Таблиці 1 порівнюють та виявляють 21-мерні безперервні полінуклеотиди з гомологією по усіх різних послідовностях гену ППГ-оксидази. Мета полягає в тому, щоб визначити тригерні молекули, які застосовуються як гербіцидні молекули або в комбінації з гербіцидом, що є інгібітором ППГ-оксидази, до широкого діапазону видів бур'янів. Послідовності, приведені в Таблиці 3, являють собою 21-мери, які були присутні в гені ППГ-оксидази щонайменше восьми видів бур'янів з Таблиці 1. Передбачається, що додаткові 21-мер можна обрати з послідовностей Таблиці 1, які є характерними для одного виду бур'янів або декількох видів бур'янів в межах роду, або тригерних молекул, які становлять щонайменше 18 безперервних нуклеотидів, щонайменше 19 безперервних нуклеотидів, щонайменше 20 безперервних нуклеотидів або щонайменше 21 безперервних нуклеотидів у довжину і щонайменше на 85 відсотків ідентичні послідовності гену ППГ-оксидази, обраної із групи, яка складається з SEQ ID NO: 1-71 або їх фрагменту. За допомогою цього способу можна визначити олігонуклеотид або декілька олігонуклеотидів, які є найбільш ефективними тригерними молекулами для впливу на сприйнятливість рослини до інгібітору ППГ-оксидази або на модуляцію експресії гену ППГоксидази. Модуляцію експресії гену ППГ-оксидази визначають за допомогою виявлення міРНК молекул ППГ-оксидази, характерних для гену ППГ-оксидази, або за допомогою вивчення зменшення кількості РНК-транскрипту ППГ-оксидази, що виробляється, в порівнянні з необробленою рослиною. Виявити міРНК можна, наприклад, з використанням наборів, таких як mirVana (Ambion, Остін, штат Техас) і mirPremier (Sigma-Aldrich, Сент-Луїс, штат Міссурі). Послідовність ДНК-мішені, виділена з геномної (гДНК) та кодуючої ДНК (кДНК) з різних видів смітних рослин для гену ППГ-оксидази, і зібрані контиги, представлені в SEQ ID NO: 1-71, UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 розділяють на фрагменти, як показано в Таблиці 3 (дивися додатковий додаток 40_21(58640)Btable3.docx) і представлено в SEQ ID NO: 1382-2221. Приклад 3. Способи, використовувані для обробки рослин або частин рослин сумішами тригерних молекул зовнішнього застосування. Щирицю Палмера (A. palmeri R-22), сприйнятливу до гліфосату, вирощують в теплиці (30/20 С денна/нічна температура (T); при довжині світлового дня в 14 годин) у 4 дюймових квадратних 3 горщиках із земляною сумішшю Sun Gro® Redi-Earth та 3,5 кг/м добрива Osmocote® 14-14-14. Щирицю Палмера висотою від 5 до 10 см заздалегідь обробляють сумішшю коротких (24-25мер) одноланцюгових антисмислових оліго ДНК полінуклеотидів (олДНК), спрямованих на кодуючі або некодуючі області ППГ-оксидази при 16 нмоль, які додають до складу 10мілімолярного натрій-фосфатного буферу (рН 6,8), що містить 2% сульфату амонію і 0,5% Silwet L-77. Рослини обробляють вручну шляхом капання піпеткою по 10 мкл розчину полінуклеотиду на чотири повністю зрілих розкритих листа, усього використовують 40 мкл розчину на одну рослину. Через двадцять чотири і сорок вісім годин рослини обробляють фомесафеном (Reflex) в концентрації 22 грамів аі/га і флуміоксазином (Valor) в концентрації 4 грамів аі/га, до гербіциду також додають 1% маслянистого концентрату, який знижує ушкодження рослин-мішеней при обробці гербіцидом (COC). Склад контрольної композиції являє собою буфер та ад'ювант без полінуклеотидів ДНК. Кожну обробку повторюють чотири рази. Висоту рослини вимірюють безпосередньо перед обробкою олДНК та з інтервалом до чотирнадцяти днів (дн) після обробки гербіцидом для визначення ефективності обробок олігонуклеотидом та гербіцидом. Результати, проілюстровані на Фіг. 1 та Фіг. 2, показують, що обробка олігонуклеотидом посилює гербіцидну активність як фомесафену, так і флуміоксазину. Пул, що складається з восьми антисмислових олДНК олігонуклеотидів, приведений в Таблиці 4, використовують так, як описано в протоколі для обробки щириці Палмера, та випробовують на ефективність окремі олігонуклеотиди та різні комбінації олігонуклеотидів. Дивно, але знадобилося 3 олігонуклеотидних пули (оліго3, 5 і 7) з 8 олігонуклеотидів, щоб повторити ефект, який спостерігався в 8 олігонуклеотидному пулі і лише 2 з 3 комбінацій олігонуклеотидів виявилися неефективними для забезпечення поліпшеної сприйнятливості до гербіциду. На Фіг. 3 проілюстрований результат впливу на щирицю Палмера, ті ж 3 олігонуклеотиди вплинули на споріднений вид, щирицю смітну (Amaranthus rudis). UA 116093 C2 Таблиця 4 Антисмислова олДНК олігонуклеотиду ППГ-оксидази ОЛІГО1 ОЛІГО2 ОЛІГО3 ОЛІГО4 ОЛІГО5 ОЛІГО6 ОЛІГО7 ОЛІГО8 5 10 15 20 25 30 35 40 45 SEQ ID NO: 2214 SEQ ID NO: 2215 SEQ ID NO: 2216 SEQ ID NO: 2217 SEQ ID NO: 2218 SEQ ID NO: 2219 SEQ ID NO: 2220 SEQ ID NO: 2221 GTGATATTACCTCCAACACGAT ATAGTAAGCACAGGATCGGAG CTTTCAATCCACTGTCAACCG ATCAAGCGTTCGAAGACCTCAT CAGCAATGGCGGTAGGTAACA GCAATTGCCCGAATCCTTTTA TAGCTCAAtATCAAGGTCCTA TCATAAGCACCCTCTATACAC Приклад 4. Спосіб боротьби з бур'янами на полі Спосіб для боротьби з бур'янами на полі включає використання тригерних полінуклеотидів, які можуть модулювати експресію гену ППГ-оксидази в одному або декількох видах смітних рослин-мішеней. У Таблиці 3 (SEQ ID NO: 1381-2221) аналіз послідовностей гену ППГ-оксидази сімнадцяти видів рослин забезпечив збір 21-мер полінуклеотидів, які можна використати в композиціях для здійснення впливу на ріст або розвиток, або сприйнятливість до гербіциду, що є інгібітором ППГ-оксидази, для регулювання зростання декількох видів бур'янів на полі. Композиція, що містить 1 або 2, або 3, або 4, або більше полінуклеотидів з Таблиці 3, забезпечує широкий спектр дій композиції відносно декількох видів бур'янів, які зустрічаються у середовищі поля. Спосіб включає створення композиції, яка містить компоненти, які включають щонайменше один полінуклеотид з Таблиці 3 або будь-який інший полінуклеотид, що ефективно модулює експресію гену, практично ідентичний або практично комплементарний SEQ ID NO: 1-71 або її фрагменту, агент перенесення, яке мобілізує полінуклеотид в клітину рослини, і гербіцид, що є інгібітором ППГ-оксидази, і необов'язково полінуклеотид, який модулює експресію основного гену, і необов'язково гербіцид з відмінним механізмом дії у порівнянні з інгібітором ППГоксидази. Полінуклеотид композиції містить длРНК, олДНК або длДНК, або їх комбінацію. Робоча концентрація композиції, що містить полінуклеотид, може бути від близько 1 до 30 грамів або більше на акр залежно від розміру полінуклеотиду і кількості полінуклеотидів в композиції. Композиція може містити один або більше додаткових гербіцидів, кількість яких потрібна для забезпечення ефективної боротьби з бур'янами декількох видів. Поля культурних рослин, що потребують боротьби із смітними рослинами, обробляють шляхом розпилення композиції. Композиція може бути надана у вигляді бакової суміші, послідовної обробки компонентів (зазвичай композиціями, які містять полінуклеотид, після застосування гербіциду), одночасної обробки або змішування одного або більше компонентів композиції з окремих контейнерів. Обробка поля може проводитися в міру необхідності для забезпечення боротьби з бур'янами, а компоненти композиції можна скорегувати для боротьби з конкретними видами бур'янів або сімействами бур'янів. Приклад 5. Гербіцидні композиції, що містять пестицидні агенти Розкривається спосіб боротьби з бур'янами і шкідниками рослин, і патогенними мікроорганізмами на полі культурних рослин, стійких до інгібітору ППГ-оксидази, що включає застосування композиції, яка містить тригерний олігонуклеотид ППГ-оксидази, композицію інгібітору ППГ-оксидази і домішку агенту для боротьби із шкідниками. Наприклад, домішка містить інсектициди, фунгіциди, нематоциди, бактерициди, акарициди, регулятори росту, хемостерилізатори, хімічні сигнальні речовини, репеленти, атрактанти, феромони, стимулятори поїдання або інші біологічно активні сполуки або біологічні агенти, такі як, мікроорганізми. Наприклад, домішка містить фунгіцидну сполуку для застосування до культурних рослин, стійких до інгібітору ППГ-оксидази, для запобігання або боротьби з хворобами рослин, які викликані грибковим патогеном рослин. Фунгіцидна сполука домішки може бути системним фунгіцидом або фунгіцидом контактної дії, або сумішшю кожного з них. Конкретніше, фунгіцидна сполука містить, але не обмежується такими елементами хімічних груп, як стробілурини, триазоли, хлоронітрили, карбоксаміди та їх суміші. Композиція може додатково містити домішку з інсектицидною сполукою або агентом. Бакову суміш тригерного полінуклеотиду ППГ-оксидази та інгібітору ППГ-оксидази (наприклад, фомесафен) з фунгіцидами, інсектицидами або і тим, і іншим випробовують на сої та кукурудзі відносно боротьби з листяними захворюваннями і шкідниками. Випробування UA 116093 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 проводять для розробки способу використання складу сумішей тригерних олігонуклеотидів і фомесафена, і різних комерційно доступних фунгіцидів для боротьби з бур'янами і шкідниками. Польові ділянки засаджують соєю або кукурудзою. Близько 3 тижнів після посадки на усіх ділянках здійснюють післяпосівне внесення "тригеру ППГ-оксидази + фомесафен". Суміші "тригер + фомесафен" або "тригер + фомесафен + фунгіцид + інсектицид" використовують для обробки ділянки на стадії R1 розвитку сої (перше цвітіння) або стадії волоті у кукурудзи. Збирають дані для контролю відсотка бур'янів на 7 і 21 день після обробки R1, захищеності сої (% некрозу, хлорозу, швидкість зростання): через 5 днів після обробки рейтинг захворювань, рейтинг шкідників і розхід (витрати) (бушелів/акр). Ці суміші і обробку розробляють з метою забезпечення одночасної боротьби з бур'янами і шкідниками, такої як боротьба з грибами і шкідниками, наприклад, листова іржа; а також боротьба з комахами-шкідниками, наприклад, попелиця, гусінь, п'ядун, жуки, щитники і цикадки. Надаються агрохімікати в контейнерах, придатних для безпечного зберігання, транспортування і реалізації, із стійким хімічним складом, що змішуються з розчинниками і йдуть з інструкціями по застосуванню. Контейнер з сумішшю містить тригерний олігонуклеотид + гербіцид + фунгіцидну сполуку або суміш тригерного олігонуклеотиду + гербіцидну сполуку і інсектицидну сполуку або тригерний олігонуклеотид + гербіцидну сполуку і фунгіцидну сполуку і інсектицидну сполуку (наприклад, лямбда-цигалотрин, Warrier®). У контейнері можуть додатково міститися інструкції по ефективному використанню суміші. Контейнери згідно цього винаходу можуть бути виготовлені з будь-якого матеріалу, придатного для зберігання хімічної суміші. Контейнери згідно цього винаходу можуть бути виготовлені з будь-якого матеріалу, придатного для транспортування хімічної суміші. Цей матеріал може бути з картону, пластику, металу або композиту цих матеріалів. Об'єм контейнеру може складати 0,5 літра, 1 літр, 2 літри, 3-5 літрів, 5-10 літрів, 10-20 літрів, 20-50 літрів або більше залежно від необхідності. Надається бакова суміш "тригерний олігонуклеотид + гербіцидна сполука і фунгіцидна сполука", способи нанесення на культури для досягнення ефективного дозування кожної сполуки відомі фахівцям в цій галузі техніки і можуть бути поліпшені і додатково розроблені залежно від культури, погодних умов, а також устаткування для нанесення суміші. Інсектициди, фунгіциди, нематоциди, бактерициди, акарициди, регулятори росту, хемостерилізатори, хімічні сигнальні речовини, репеленти, атрактанти, феромони, стимулятори поїдання або інші біологічно активні сполуки можна додати до тригерного олігонуклеотиду, щоб утворити багатокомпонентний пестицид, який надає ширший спектр сільськогосподарського захисту. Приклади таких сільськогосподарських засобів захисту, з якими сполуку згідно цього винаходу можна виготовити, включають: інсектициди, такі як абамектин, ацефат, азинфосметил, біфентрин, бупрофезин, карбофуран, хлорфенапір, хлорпірифос, хлорпірифос-метил, цифлутрин, бета-цифлутрин, цигалотрин, лямбда-цигалотрин, дельтаметрин, діафентіурон, диазинон, дифлубензурон, диметоат, есфенвалерат, феноксикарб, фенпропатрин, фенвалерат, фіпроніл, флуцитринат, тау-флувалінат, фонофос, імідаклоприд, ізофенфос, малатіон, метальдегід, метамідофос, метідатіон, метоміл, метопрен, метоксихлор, метил 7-хлор-2,5дигідро-2-[[N-(метоксикарбоніл)-N-[4-(трифторметокси)феніл]аміно]карбоніл]індено[1,2е][1,3,4]оксадиазин-4a(3H)-карбоксилат (DPX-JW062), монокротофос, оксаміл, паратіон, паратіон-метил, перметрин, форат, фозалон, фосмет, фосфамідон, піримікарб, профенофос, ротенон, сульпрофос, тебуфенозид, тефлутрин, тербуфос, тетрахлорвінфос, тіодикарб, тралометрин, трихлорфон та трифлумурон; переважно сполуку інгібітору ППГ-оксидази змішують з фунгіцидною сполукою або комбінацією фунгіцидів, таких як азоксистробін, беноміл, бластицидін-С, суміш Бордо (триосновний сульфат міді), бромуконазол, каптафол, каптан, карбендазим, хлоронеб, хлороталоніл, оксихлорид міді, солі міді, цимоксаніл, ципроконазол, ципродиніл (CGA 219417), дикломезин, дихлоран, дифеноконазол, диметоморф, диніконазол, диніконазол-М, додін, едифенфос, епоксиконазол (BAS 480F), фамоксадон, фенарімол, фенбуконазол, фенпіклоніл, фенпропідин, фенпропіморф, флуазінам, флухінконазол, флусилазол, флутоланіл, флутріафол, фолпет, фосетіл алюмінію, фуралаксіл, гексаконазол, іпконазол, іпробенфос, іпродіон, ізопротіолан, касугаміцин, крезоксим-метил, манкозеб, манеб, мепроніл, металаксіл, метконазол, S-метил-7-бензотіазолкарботіоат (CGA 245704), міклобутаніл, нео-азоцин (метанарсонат заліза), оксадиксіл, пенконазол, пенцикурон, пробеназол, прохлораз, пропіконазол, пірифенокс, пірохілон, хіноксифен, спіроксамін (KWG4168), сірка, тебуконазол, тетраконазол, тіабендазол, тіофанат-метил, тірам, триадімефон, триадіменол, трициклазол, трифлоксистробін, тритіконазол, валідаміцин та вінклозолін; загальноприйняті комбінації фунгіцидів, наприклад, ципроконазол та азоксистробін, дифеноконазол и металаксіл-М, флудіоксоніл та металаксіл-М, манкозеб та металаксіл-М, гідроксид міді та металаксіл-М, ципродиніл та флудіоксоніл, ципроконазол та пропіконазол; UA 116093 C2 5 10 комерційно доступні фунгіцидні композиції для контролю за азіатською іржею на сої включають, без обмеження ними, Quadris® (Syngenta Corp), Bravo® (Syngenta Corp), Echo 720® (Sipcam Agro Inc), Headline® 2.09EC (BASF Corp), Tilt® 3.6EC (Syngenta Corp), PropiMax™ 3.6EC (Dow AgroSciences), Bumper® 41.8EC (MakhteshimAgan), Folicur® 3.6F (Bayer CropScience), Laredo® 25EC (Dow AgroSciences), Laredo™ 25EW (Dow AgroSciences), Stratego® 2.08F (Bayer Corp), Domark™ 125SL (Sipcam Agro USA) та Pristine®38%WDG (BASF Corp), їх можна змішати з композиціями інгібітору ППГ-оксидази, як описане в цьому винаході, щоб забезпечити поліпшений захист від грибкових захворювань; нематоциди, такі як алдоксикарб та фенаміфос; бактерициди, такі як стрептоміцин; акарициди, такі як амітраз, хінометіонат, хлорбензилат, цигексатин, дикофол, дієнохлор, етоксазол, феназахін, фенбутатіну оксид, фенпропатрин, фенпіроксимат, гекситіазокс, пропаргіт, піридабен та тебуфенпірад; та біологічні агенти, такі як Bacillus thuringiensis, Bacillus thuringiensis дельта-ендотоксин, бакуловірус та ентомопатогенні бактерії, віруси та гриби. Таблиця 1 SEQ ID NO Вид Тип Довжина 1 Щириця біла кДНК Контиг 1200 2 Щириця біла кДНК Контиг 487 Послідовність GGAATCCTTGATTTGAAGATAGGATAACCAGAGAGAG TGCGAGAGAGATGAGTGCGATGGCGTTATCGAGCAG CATTCTACAATGTCCGCCGCACTCCGACATCTCGTTC CGCTTTTTTGCTCATACACGAACCCACTCCCCCATCTT CTTCAGAAGACCACGAAAATTATCATATATCCATTGTT CCACAAGCTCAAGCTCAACTGCCAATTACCAGAACAC GATTACGAGCCAAGGAGAAGGAGAAAAAGTATTAGAT TGTGTAATTGTTGGAGCTGGTATCAGTGGACTTTGCA TTGCTCAGGCTCTTTCTACCAAACACATTCAATCCAAT CTCAATTTCATTGTCACTGAAGCTAAACATCGTGTTGG AGGTAATATCACTACCATGGAGTCCGATGGCTATATC TGGGAAGAGGGTCCTAATAGTTTCCAACCCTCCGATC CTGTGCTTACTATGGCGGTTGACAGTGGATTGAAAGA CGATTTGGTCTTGGGAGATCCTAATGCCCCTCGTTTC GTGCTGTGGAATGGTAAATTAAGGCCTGTTCCTTCCA AACCTACGGACCTTCCCTTTTTTGATCTCATGAGCTTT CCTGGTAAGATTAGGGCTGGTCTTGGTGCACTTGGTC TTCGTCCTCCTCCTCCTCCTTCTTCTTATGAGGAATCC GTTGAAGAATTTGTGCGCCGTAATCTCGGCGATGAGG TCTTCGAACGCTTGATTGAACCCTTTTGTTCTGGTGTC TATGCTGGTGATCCTGCAAAGTTGAGTATGAAAGCTG CATTTGGAAAGGTCTGGACCTTAGAGCAAAAGGGTG GTAGTATCATCGCCGGTACACTCAAAACTATTCAGGA AAGGAAGAATAATCCTCCACCCCCTCGAGACCCCCG CCTTCCTAAACCTAAGGGCCAGACTGTTGGATCCTTT AGGAAAGGACTCATTATGTTACCTACCGCCATTGCTG CTAGGCTTGGCAGTAAAGTCAAACTATCGTGGACACT TTCTAATATTGATAAGTCGCTCAATGGTGAATACAATC TCACATATCAAACACCCGATGGACCGGTTTCTGTTAG GACCAAAGCGGTTGTCATGACTGTCCCTTCATACATT GCAAGTAGCCTGCTTCGTCCGCTCTCAGATGTTGCTG CAGATTCTCTTCTAAATTTACTATCCTCCAGTCGCAGC AGTGTCCCTT TAGGACCTTGATCTTGAGCTACATTGGAGGTGCTACA AATCTTGGCATATTACAAAAGAGTGAAGATGAACTTG CGGAGACAGTTGATAAGGATCTCAGAAAAATTCTGAT AAATCCAAATGCGAAAGGCAGCCGTGTTCTGGGAGT GAGAGTATGGCCAAAGGCAATCCCCCAATTTTTAGTT GGTCACTTTGATCTGCTAGATGCTGCAAAAGCTGCTT TGGCAAATGCTGGGCTAAAGGGGTTGTTTCTTGGTGG TAATTATGTATCAGGTGTTGCCTTGGGGAGGTGTATA GAGGGTGCTTATGACTCTGCATCTCAGGTAGTGGATT TCCTCTCACAGTACAAAGACAAGTAGTCAGTAGGGCT CCAGCATCCTGGTTAAGTAACTTTTTGTAGCTGTTGTA ATTCAGATATAAAATAGCCCACAGTCAAACAAGTTTGG AAAGATGTAAAAGCATGAGATACAGTCGGTGTTCATT GAGAG UA 116093 C2 Таблиця 1 SEQ ID NO Вид Тип Довжина 3 Щириця маскована кДНК Контиг 1847 4 Щириця гібридна кДНК Контиг 1170 Послідовність GTGCGAGAGAGATGAGTGCGATGGCGTTATCGAGCA GCATTCTACAATGTCCGCCGCACTCCGACATCTCGTT CCGCTTTTTTGCTCATACACGAACCCACTCCCCCATC TTCTTCAGAAGACCACGAAAATTATCATATATCCATTG TTCCACAAGCTCAAGCTCAACTGCCAATTACCAGAAC ACGATTACGAGCCAAGGAGAAGGAGAAAAAGTATTAG ATTGTGTAATTGTTGGAGCTGGTATCAGTGGACTTTG CATTGCTCAGGCTCTTTCTACCAAACACATTCAATCCA ATCTCAATTTCATTGTCACTGAAGCTAAACATCGTGTT GGAGGTAATATCACTACCATGGAGTCCGATGGCTATA TCTGGGAAGAGGGTCCTAATAGTTTCCAACCCTCCGA TCCTGTGCTTACTATGGCGGTTGACAGTGGATTGAAA GACGATTTGGTCTTGGGAGATCCTAATGCCCCTCGTT TCGTGCTGTGGAATGGTAAATTAAGGCCTGTTCCTTC CAAGCCTACGGACCTTCCCTTTTTTGATCTCATGAGC TTTCCTGGTAAGATTAGGGCTGGTCTTGGTGCACTTG GTCTTCGTCCTCCTCCTCCTCCTTCTTCTTATGAGGAA TCCGTTGAAGAATTTGTGCGCCGTAATCTCGGCGATG AGGTCTTCGAACGCTTGATTGAACCCTTTTGTTCTGG TGTCTATGCTGGTGATCCTGCAAAGTTGAGTATGAAA GCTGCATTTGGAAAGGTCTGGACCTTAGAGCAAAAGG GTGGTAGTATCATCGCCGGTACACTCAAAACTATTCA GGAAAGGAAGAATAATCCTCCACCCCCTCGAGACCC CCGCCTTCCTAAACCTAAGGGCCAGACTGTTGGATCC TTTAGGAAAGGACTCATTATGTTACCTACCGCCATTG CTGCTAGGCTTGGCAGTAAAGTCAAACTATCGTGGAC ACTTTCTAATATTGATAAGTCGCTCAATGGTGAATACA ATCTCACATATCAAACACCCGATGGACCGGTTTCTGT TAGGACCAAAGCGGTTGTCATGACTGTCCCTTCATAC ATTGCAAGTAGCCTGCTTCGTCCGCTCTCAGATGTTG CTGCAGATTCTCTTTCTAAATTTTACTATCCTCCAGTC GCAGCAGTGTCCCTTTCTTATCCCAAAGAAGCAATTA GACCAGAATGCTTGATCGATGGAGAACTAAAAGGATT CGGGCAATTGCATCCCCGCAGCCAGGGTGTGGAAAC CTTGGGAACAATTTATAGTTCATCTCTTTTCCCTGGTC GAGCACCACCCGGTAGGACCTTGATCTTGAGCTACAT TGGAGGTGCTACAAATCTTGGCATATTACAAAAGAGT GAAGATGAACTTGCGGAGACAGTTGATAAGGATCTCA GAAAAATTCTGATAAATCCAAATGCGAAAGGCAGCCG TGTTCTGGGAGTGAGAGTATGGCCAAAGGCAATCCC CCAATTTTTAGTTGGTCACTTTGATCTGCTAGATGCTG CAAAAGCTGCTTTGGCAAATGCTGGGCTAAAGGGGTT GTTTCTTGGTGGTAATTATGTATCAGGTGTTGCCTTG GGGAGGTGTATAGAGGGTGCTTATGACTCTGCATCTC AGGTAGTGGATTTCCTCTCACAGTACAAAGACAAGTA GTCAGTAGGGCTCCAGCATCCTGGTTAAGTAACTTTT TGTAGCTGTTGTAATTCAGATATAAAATAGCCCACAGT CAAACAAGTTTGGAAAGATGTAAAAGCATGAGATACA GTCGGTGTTCATTGAGAGGATAGATGCAAATAACTTG GACGGAAAAGTACTAGTTCCCCATTGTTT GAAGCTAAACATCGTGTTGGAGGTAATATCACTACCA TGGAGTCCGATGGCTATATCTGGGAAGAGGGTCCTA ATAGTTTCCAACCCTCTGATCCTGTGCTTACTATGGC GGTTGACAGTGGATTGAAAGACGATTTGGTCTTGGGA GATCCTAATGCCCCTCGTTTCGTGCTCTGGAATGGTA AATTAAGGCCTGTTCCTTCCAAACCTACGGACCTTCC CTTTTTTGATCTCATGAGCTTTCCTGGTAAGATTAGGG CTGGTCTTGGTGCACTTGGTCTTCGTCGTCCTCCTCC TCCTTCTTCTTATGAGGAATCTGTTGAAGAATTTGTGC GCCGTAATCTCGGCGATGAGGTCTTCGAACGCTTGAT CGAACCCTTTTGTTCTGGTGTGTATGCTGGTGATCCT ACAAAGTTGAGTATGAAAGCTGCATTTGGAAAGGTCT GGACCTTAGAGCAAAAGGGTGGTAGTATCATCGCCG UA 116093 C2 Таблиця 1 SEQ ID NO 5 Вид Щириця синювата Тип кДНК Контиг Довжина 2344 Послідовність GTACACTCAAAACTATTCAGGAAAGGAAGAATAATCC TCCACCCCCTCGAGACCCCCGCCTTCCTAAACCTAAG GGCCAGACTGTTGGATCCTTTAGGAAAGGGCTCATTA TGTTACCTACCGCCATTGCTGCTAGGCTTGGCAGTAA AGTCAAACTATCGTGGACACTTTCTAATATTGATAAGT CGCTCAATGGTGAATACATTCTCACTTATCAAACACCC GATGGACCGGTTTCTGTTAGGACCAAAGCGGTTGTCA TGACTGTCCCTTCATACATTGCAAGTAGCCTGCTTCG TCCGCTCTCAGATGTTGCTGCAGATTCTCTTTCTAAGT TTTACTATCCACCAGTCGCAGCAGTGTCCCTTTCTTAT CCCAAAGAAGCAATTAGACCAGAATGCTTGATCGATG GAGAACTAAAAGGATTCGGGCAATTGCATCCCCGCA GCCAGGGTGTGGAAACCTTGGGAACAATTTATAGTTC ATCTCTTTTCCCTTGGTTCGAGCACCACCCGGTAGGA CCTTGATCTTGAGCTACATTGGAGGTGCTACAAATGT TGGAATATTACAAAAGAGTGAAGATGAACTTGCGGAT ACAGTTGATAAGGATCTCAGAAAAATTCTGATAAATCC AAATGCGAAAGGCAGCCGTGTTCTGGGAGTGAGAGT ATGGCCAAAGGCAATCCCCC TAGATTGTTGAGAGGGAATGGGCAATTAAGTGGAATC CCATTTCCTTAAACTCAGCTGGTGTATGTAATGGTGTC TTTCCACCTTCAATCATGTTTGCAATTCTCAAACCTTT AACATCTCTAACAACCTCTTTTAGCTCTTCTATGTTGG CTGGTGCCTCAACAAATGTGGCATCAGCCCCTGCCTC TCTGTAAAGATTAGCACGTCTAATAGCTTCTTGAAGAC CGTGAGGTGCACGAGCATCAGTCCTTGCAACCAAGA AGAAATCAGATTCACCAATGGCTTCCCTTGCTGCAGC GATCTTAAGGGCGTGCTCCTCTGCAGGAACAACTGC CTTACCACGCATGTGACCACACTTCTTTGGCCATACT TGATCCTCAAGGAAAACACCCTTGGCACCAGCTGCGA TCAAGTCTTTGATGAACCTTTGAACATTAAGAGGACCA CCACCACCGGTGTCTCCGTCAACAATAACACACAAAC TAGGAGCAGCTGCCGTAATTCTGCGAACAACATCTAC CACTTCTGCAGTTGTAAGCAAGCCAAAGTCGGGCAAG CCAAGAAGAGCAGCGGAAACACCAAAACCGGAGACA AAGCAAGCTTTGAAGCCGGTTTTAGCGCAAATGGCG GCGGAGAAAGCGTCTTGGATTCCGGGCATTAAAATTG GTCCCTCCTCGGCGATCAGACGGTGCATTGTGGTCTT TCCGACTGCCTCAAGAGAACCCATTTTTGTTTCTAATA ATACAATTTAGGAATTAAGGAAGGAGGTGATGATGAG TTGATAGAACTACTTAGTGTGTAATTGTTGGAGCTGGT ATCAGTGGACTTTGCATTGCGCAGGCTCTTTCTACCA AACACATTCAATCCAATCTCAATTTCATTGTCACTGAA GCTAAACATCGTGTTGGAGGTAATATTACTACCATGG AGTCCGATGGCTATATCTGGGAAGAGGGTCCTAATAG TTTCCAACCCTCTGATCCTGTGCTTACTATGGCGGTT GACAGTGGATTGAAAGACGATTTGGTTTTGGGAGATC CTGATGCCCCTCGTTTCGTGCTCTGGAATGGTAAATT AAGGCCTGTTCCTTCTAAACCTACGGACCTTCCCTTTT TTGATCTCATGAGCTTTCCTGGTAAGATTAGGGCTGG TCTTGGTGCACTTGGTCTTCGTCCTCCTCCTCCTCCT CCTTCTTATGAGGAATCTGTTGAAGAATTTGTGCGCC GTAATCTCGGCGATGAGGTCTTCGAACGCTTAATCGA ACCCTTTTGTTCTGGTGTGTATGCTGGTGATCCTACA AAGTTGAGTATGAAAGCTGCATTTGGAAAGGTCTGGA CCTTAGAGCAAAAGGGTGGTAGTATCATCGCCGGTAC ACTCAAATCTATTCAGGAAAGGAAGAATAATCCTCCA CCCCCTCGAGACCCCCGCCTTCCTAAACCTAAGGGC CAGACTGTTGGATCCTTTAGGAAAGGGCTCATTATGT TACCTACCGCCATTGCTGCTAGGCTTGGCAGTAAAGT CAAACTATCGTGGACACTTTCTAATATTGATAAGTCGC TCAATGGTGAATACAATCTCACTTATCAAACACCCGAT GGACCGGTTTCTGTTAGGACCAAAGCGGTTGTCATGA UA 116093 C2 Таблиця 1 SEQ ID NO 6 Вид Щириця Палмера Тип кДНК Контиг Довжина 1866 Послідовність CTGTACCTTCATACATTGCAAGTAGCCTGCTTCGTCC ACTCTCAGATGTTGCTGCAGATTCTCTTTCTAAGTTTT ACTATCCACCAGTCGCAGCAGTGTCCCTTTCTTATCC CAAGGAAGCAATTAGACCAGAATGCTTGATCGATGGA GAACTAAAAGGATTCGGGCAATTGCATCCCCGCAGC CAGGGTGTGGAAACCTTGGGAACAATTTATAGTTCAT CTCTTTTCCCTGGTCGAGCACCACCCGGTAGGACCTT GATCTTGAGCTACATTGGAGGTGCTACAAATGTTGGA ATATTACAAAAGAGTGAAGATGAACTTGCGGAGACAG TTGATAAGGATCTCAGAAAAATTCTGATAAATCCAAAT GCGAAAGGCAGCCGTGTTCTGGGAGTGAGAGTATGG CCAAAGGCAATCCCCCAATTTTTAGTTGGTCACTTTGA TCTGCTAGATGCTGCAAAAGCTGGTTTGGCAAATGCT GGGCTAAAGGGGTTGTTTCTTGGTGGTAATTATGTAT CAGGTGTTGCCTTGGGGAGGTGTATAGAGGGTGCTT ATGACTCTGCATCTCAGGTAGTGGATTTCCTCTCACA GTACAAAGACAAGTAGTCAATAGGGCTCCACCTTCCT GGTTAACTAACTTTTTGTAGCTGTTGTAATTTGTATCA TGTAATATTATTCAGATGTAAAAGCATGAGATACAGTC GGTAT AATCCTTGATTTGAAGATAGGATAACCAGAGAGAGTG CAAGAGAGATGAGTGCCATGGCGTTATCGAGCAGCA TTCTACAATGTCCGCCGCACTCCGACATCTCTTTCCG CTTTTCTGCTTATACACCAACCCGCTCCCCCATCTTCT TCGGAAGACCTCGAAAATTATCATATATCCATTGTTCC ACAAGCTCAAGCTCAACTGCCAATTACCAGAACACGA TTACGACCCAAGGAGAAGGAGATAAAGTATTGGATTG TGTAATTGTTGGAGCTGGTATCAGTGGACTTTGCATT GCTCAGGCTCTTTCTACCAAACACATTCAATCCAATCT CAATTTCATTGTCACTGAAGCTAAAAATCGTGTTGGAG GTAATATCACTACCATGGAGTCCGATGGCTATATCTG GGAAGAGGGTCCTAATAGTTTCCAACCCTCCGATCCT GTGCTTACTATGGCGGTTGACAGTGGATTGAAAGATG ATTTGGTCTTGGGAGATCCTAATGCTCCTCGTTTTGT GCTCTGGAATGGTAAATTAAGGCCTGTTCCTTCCAAA CCTACGGACCTTCCCTTTTTTGATCTCATGAGCTTTCC TGGTAAGATTAGGGCTGGTCTTGGTGCACTTGGTCTT CGTCCTTCTCCTCCTCCTCCTTCTTATGAGGAATCTGT TGAAGAATTTGTGCGCCGTAATCTCGGCGATGAGGTC TTCGAACGCTTGATCGAACCCTTTTGTTCTGGTGTGT ATGCTGGTGATCCTTCAAAGTTGAGTATGAAAGCTGC ATTTGGAAAGGTCTGGACCTTAGAGCAAAAGGGTGGT AGTATCATCGCCGGTACACTCAAAACTATTCAGGAAA GGAAGAATAATCCTCCACCGCCTCGAGACCCCCGCC TTCCTAAACCTAAGGGCCAGACTGTTGGATCCTTTAG GAAAGGGCTCATTATGTTACCTACCGCCATTGCTGCT AGGCTTGGCAGTAAAGTCAAACTATCGTGGACACTTT CTAATATTGATAAGTCGCTCAATGGTGAATACAATCTC ACTTATCAAACACCCGATGGACCGGTTTCTGTTAGGA CCAAAGCGGTTGTCATGACTGTCCCTTCATACATTGC AAGTAGCCTGCTTCGTCCGCTCTCATGATGTTGCTGC AGATTCTCTTTCTAAATTTTACTATCCACCAGTCGCAG CAGTGTCCCTTTCTTATCCCAAAGAAGCAATTAGACC AGAATGCTTGATCGATGGAGAACTAAAAGGATTCGGG CAATTGCATCCCGCAGCCAGGGTGTGGAAACCTTGG GAACAATTTATAGTTCATCTCTTTTCCCTGGTCGAGCA CCACCTGGTAGGACCTTGATCTTGAGCTACATTGGAG GTGCTACAAATGTTGGCATATTACAAAAGAGTGAAGA TGAACTTGCGGAGACAGTTGATAAGGATCTCAGAAAA ATTCTGATAAATCCAAATGCGAAAGGCAGCCGTGTTC TGGGAGTGAGAGTATGGCCAAAGGCAATCCCCCAAT TTTTAGTAGGTCATTTTGATCTGCTAGATGCTGCAAAA GCGGGTTTGGCAAATGCTGGACTAAAGGGGTTGTTTC UA 116093 C2 Таблиця 1 SEQ ID NO Вид Тип Довжина 7 Щириця Палмера кДНК Контиг 1066 8 Щириця Палмера кДНК Контиг 294 9 Щириця Палмера гДНК Контиг 6448 Послідовність TTGGTGGTAATTATGTATCAGGTGTTGCCTTGGGGAG GTGTATAGAGGGTGCTTATGACTCTGCATCTCAGGTT GTGGATTTCCTCTCACAGTACAAAGACAAGTAGTCAT CCTGATTAACTAACTTTTTGTAGCTGTTGTAATTTGTAT CATGTAATATTATTATTTATTCAGATGTAAAAGCATGAT ATACAGTCGGTGTTCTTTGAGAGGATAGATGCAAATA ACTTGGACGGTAAAGTACTAGTTCCTGTCTCTTATACA CATCT CATGTGGTGGAGATCCTCAATCGCTATCTATGCACCA TACATTTCCCGACGTATGGAATGTTGAAAAAAGGTTT GGCTCTGTGTTTGCTGGACTAATTCAATCAACATTGTT ATCTAAGAAGGAAAAGGGTGGAGGGAAAATGCTTCTA TCAAGAAGCCTCGTGTACGCGGTTCATTTTCATTCCA TGGTGGAATGCAGACACTTGTTGACACAATGTGCAAA CAGCTTGGTGAAGATGAACTCAAGCTCCAGTGTGAG GTGCTGTCCTTGTCATACAACCAGAAGGGGATCCCTT CATTAGGGAATTGGTCAGTCTCTTCTATGTCAAATAAT ACCAGTGAAGATCAATCTTATGATGCTGTGGTTGTCA CTGCTCCAATTCGCAATGTCAAAGAAATGAAGATTAT GAAATTTGGAAATCCATTTTCACTTGACTTTATTCCAG AGGTGACTTACGTACCCCTTTCCGTTATGATTACTGC ATTCAAGAAGGATAAAGTGAAGAGACCTCTCGAGGGC TTCGGAGTTCTTATCCCGTCTAAAGAGCAACATAATG GACTGAAGACTCTTGGTACTTTATTTTCGTCTATGATG TTTCCTGATCGTGCTCCATCTGATATGTGTCTTTTTAC CACATTTGTCGGAGGAAGCAGAAATAGAAAACTTGCA AACGCTTCAACGGATGAATTGAAGCAAATAGTTTCTTC TGACCTTCAGCAGCTGTTGGGCACTGAGGACGAACC TTCATTTGTCAATCATCTCTTTTGGAGCAATGCATTCC CGTTGTATGGGCACAATTACGATTCTGTTTTGACAGC AATAGACAAGATGGAAAAGGATCTTCCTGGATTTTTTA TGCAGGTAACCATAAGGGTGGACTTTCAGTAGGAAAA GCGATGGCCTCCGGATGCAAGGCTGCGGAACTTGTA ATATCCTATCTGGACTCTCATTTATATGTGAAGATGGA TGAGAAGACCGCGTAATCTTTCTGAAATTCCTTCACT GTAACCAAGCGTGTGAAGCCCCTGATTTTGCGTCTGT ATATCCGATGATATATCGCTGGAT GGGGAGCGGGTTGCTGGATAACCAGAGAGAGTGCAA GAGAGATGAGTGCCATGGCGTTATCGAGCAGCATTCT ACAATGTCCGCCGCACTCCGACATCTCTTTCCGCTTT TCTGCTTATACACCAACCCGCTCCCCCATCTTCTTCG GAAGACCTCGAAAATTATCATATATCCATTGTTCCACA AGCTCAAGCTCAACTGCCAATTACCAGAACACGATTA CGACCCAAGGAGAAGGAGATAAAGTATTGGATTGTGT AATTGTTGGAGCTGGTATCAGTGGACTTTGCATTG GGTGTTTATTTGGGCATGGCCTTATGTGTGATGTTGG TAAATTTTGTGGCTTCGTCCACTAATCTGATGTATCGG ATCTGTTAAAGGGAGCCCTCTCATCCTATGCTTATCAA TGACTTTTTCATATGCCTATCAAACAGATCAGATTGGA TCGGGTTCGAGTTCAGGTCATATATAAACATGTCAGC AAACCCTTGACCCATACCCAACCCATTTAGTTAATTGG CTTGAAAATCACAACCTTAATTCGACCAGCGACAGAT CAGGTTGACCTGATTTCGACCCACTTAACCCATTTATA ATTTTTTTTTCGATTTAAGTTTTTTAACATTGATTAAATC TAATTTTTTAGGCTTTAATTTTAATTTTATGTTTTTTTGT TTAATTTGTATTTACTATGAAAAATAAGAAACTATTATA TGAACTGAGTTTAGCTTACACTTATTAATTTAACTCGA AATTAACACATTTAATTAAATGGTTATATAGGGTTTTTT AGTTTTAAAATTTCAACCTGAACCTAATCTATTTAATAA AAAGATCAGATCTGATCAACCCATATAATTAATTGGGT CAAAATCTCAACTCAAACCCATTTATTTCGAATTAAATT CAGATCAAATTAGCAGGTCGGATCAACTAGCGCTAAT TTTTCCTCTCAAGTTTTTTCATATGATGCCCCTTGTTTT UA 116093 C2 Таблиця 1 SEQ ID NO Вид Тип Довжина Послідовність CTTTGAATAAAATTCACCAATTTAAAATCCCTGCCCTT GATCCGTTGGTATTGGTATTTGGTAAAGCACATATGG TAAATTCTACTCCATTGTTATCTGTAGTTTTGGTTCTAA ACCCCAAACAAATCCTACTCCTAGCACCACTAATCCT CATTACTTTCTGTTTGCTGTCTTTCTCTACATTCCTACT AAATTAAGACCTAGATGCAGTGTTATTCTGTTCGAGGT TGCCGAAAACGGTACAATAGTTGCCTAATTTGCAATT CATGTTTGTTCTTGCGTTTTCTACATTGTTTACTCTATT GGAACAAAGGTTGAACTTTCAGCCTTTCAGGGAGTAT TTTGATTTTTCTGTCAAATTACCTTGCCAGATTTATTTG GCTATTTTGATTGTGTGTATTTCTTTGTCCCTTGTTTC CATGGGGCTAAACTCCTTTTGGTTAATCTTAAACATTT CTTCTAATTTTGAATTGCAGTGGTATGAAGTGTTGTTT AATATACAATCAATTTTTCTGAACTGGGTTAATGAAGA GAAGCATTGTAGACATGAGGAATGTGTTCAAGCATCT CAAAACAACCAAATTAATCCCAAATGGGATCTTCAACT GTAATAGAGGTAAATCACATATATTCTCATTTAATGGT TATTGTTTTATTTTAAGGATGTTATTATGTTGTTATCAA TGATAGAAATAAGAGAAGCTTGAGCATTCAAATGTATC TATCACTCACTGGTTGTGGACATCTAAAATATGGACC AAGAGTTTTCTTCATTTCTTGTACCAGAATTTGCAAAT GTATGATTAAAGTTTAGGTTGGAGTTGCAATAAAATTT CATTACCCCGACGCTATTAAGTGGCTCACACTGAGGC GGGGTTTGAGGGTCGGATGGTGCAACCTTCAGGAGA GGTTCTAAGCATTTTCAACATGTTCAACCGCAGAGGG TCCCGTAAAATTGGAGGCTTCAATATTAAATTATGTAG TATGTGTTAAGTGTTTAAAGATATAAAAATGTTAATGA ATACATAATTTTTAAAATTGCACAGGGCTTTCAAAGAA ATTTTTGATTTTGCTCCGCCCATGGCAACCTTTGGCAA ATCTGGATAGAATTAGAGAAATTTACTTTTATGTATGT ATAATCTGATGAATGAATGAATGAACAATGAAGTTCAT TTCTGAGTCAATGACCTATATACTATCGAGGTTTCGTT AAATAGGATATATAAATAAAATTAGAGACATCTTTTATC CCTAATGTTGTCTGTTTTCTTTTCTGGGCGAGACTGTT TTTGGAGAAAAACGTTATGTTGAATGCTTGATTTACTC AGAACTGATGCAAACAGATGGATAAAAAATGGTGTTT TCCTAGTGTTTATGTTTCATAAAAGGATTTCAAATTCC AATCGTATGAAGTTTGAAATACTGCTTTTTGTTTTTGTA GCTTCGTGTTTTGCTTTCCTTCACTCTTCACCAGGGAA CGTTGTTGAAGTTTGTTCCAAGAAGCAAGAAGTCGTA ATTGCAATCGGGAGCAATGTTGGTGACAGATTAGAAA ATTTCAACCAAGCTCTGCAACAAATGAAGAAATTAGG CATAGACATCACAAGGCATGGTTGTTTATATGAGACG GAACCTGCATACGTGACTGATCAACCGAAGTTTCTTA ACTCTGCTTTAAGAGGCTTTACAAGACTTGGACCTCA TGAATTATTAGGGGTATTGAAGAAAATTGAGAAGGAT ATGGGTAGAACCAAGGGAATAAGGTATGGTCCTAGG CCAATTGACTTGGACATACTATTTTATGGGAAGTTTAG GGTGAGCTCTGAGAGCCTCACTATCCCCCATGAAAG GATATGGGAAAGACCATTTGTGATGGCACCATTGATT GATTGTATTGGGTCTGATGTAGAAAATGACACTATTTG TACGTGGCATTCATTATCAAATTTTTCGGGTGGAATCT TTGAAGCATGGGGTAAACTCGGTGGAAGCTCCCTAAT CGGGAAGGATGGAATGAAAAGGGTTTTGCCCGTTGG AAATCTCTTATGGGATTGGTCTCATAAAACCTCTGTTA TGGGAGTCTTGAACTTGACTCCTGATAGCTTTAGTGA TGGCGGAAGTTTTCAATCTGTCAATACTGCGGTTGCT AAGGTTCGTCAGATGATCTCAGATGGGGCAGATATAA TTGACATCGGGGCACAATCAACCAGACCCATGGCAA CTAGAATTTCGGCTGAAGAAGAGCTAGCAAGAGTAGT ACCTGTATTAGAAGCTGTCAAGGATTTGATCGAGGAA GAAGGAAGAATCTTGTCAGTGGATACGTTTTATTCTAA AGTTGCTTTGGAGGCCGTCAAGAAGGGGGCACACAT UA 116093 C2 Таблиця 1 SEQ ID NO Вид Тип Довжина Послідовність TGTGAATGATGTCTCTAGTGGTAAACTCGATTCCGAG ATGTTTAATGTTGTTGCGGACCTTAAAGTTCCTTATAT AGCAATGCACATGCGAGGAGATCCGACTTCAATGCAA AACTCTGAGAACTTGACCTACAATGATGTTTGTAAGCA AGTGGCTTCGGAGTTGAGTTCTAGGGTCATAGATGCA GAATTATCGGGAATTCCTGCTTGGAGGATAGTTATTG ATCCCGGCATCGGATTTTCTAAGAATACGAATCAAAAT TTGGAAATTCTTAGTGGTTTACAAAAGATACGGGAAG AGATAGCTAAGAAGAGTTTGGCGGTGGCTCATTGCCC CTTGCTAATTGGACCTTCAAGAAAGAGGTTTCTGGGC GAGATTTGTGAGCGCCCTGTAGCAGCTGACAGGGAT CCTGCTACCATTGCTTCTATAACTGCTGGAGTTTTAG GTGGTGCAAACATTGTAAGAGTACATAATGTTAGGGA TAACCTTGATGCTGTCAAGTTATGTGATGCCATACTC GGAAAAACTGATTAACTGCTTGTTTGTACCACCTTGTG AATGATGTCTAGTGGAAGGTTCGATTGGGATTATGAT GAAGTCCGTTAGTTTGCTCGAAAGAAGAGCTTTAGCC CGTAAGGTTATAGTTCTTACAGATGTAGAATCATTGGC TATTTGCCTATTTCTGCTTAGAAGATCATAGCATTGAT CCAGACTTTGGATTCCATGTAGAATTATGTTGCGACT CATGGTCGAATTGGCCCTTTGAGGAATTGTTGAAGTT CCTTGAGTCTATGGTTCAATCGGCTCGGTTCGATGAA GGTTGGACTGTGTCGAGACAAGATGGGTCAAAGAGA CCAATGGACAAGAAGTCGACCTTGGGCAAGCTTGATC AAGTTACTTGGACGAGCAGATAACAGCAGGCTCTGG CGAGCATTAGACATACATATCATTTGTTTTTTGAAGTC AGATCTGCAATCAATCAGTTGCAATGGACAGACCATA TACGGTTGTTAGTTGTTCCTGTCACTCTTTGAGTTGAA TTAGATCATGCAAACACTGTAAGAGTCTTGATTTTGTG AAGCTATGTGATACTGTACTTCTCAAAATGAAATCTTT GATATGATGTTAGCTTCAAGAGTTGTTTTTCCCCCCCT CACATTCTGTTCTATGTTGTATTGTTGTGTGCTTTTTG GAATTGTATTCCTGTAATTAGAATTATTCCTGCAAAAT GGTATTCCTTTATATCATCAAAGGAGTTTTTGTACTTC TAATCATTGATCTTTAGATGCAAAACTGAATTAATACA AGTGTTCTTGATGAAGGCTTATTGAAGAACTCACTTTT TATTTATGTCTAAACTTGTTAAAGATGTTCTGCTTCCG CCCTTGCCACGGGATGTCGGGATTGACTAAGGGTGG TAATCGAGGGATTCCTATGCTTGAATTGACTCGTTTAA GATTTTGCGTTGATTTTAAGTCAAATGTTTTGCTAAGC ATAAACTATTCTAGCTCGACTTGAATAATGAAGTTTTC GAGTCAAGTCCGAGCTGTTCTGTAAGTTTATGTATCTT GAAGCTTCTTAGTTCTTACTTCTTATCCTTATTTGTTTG ACACATTGAACCGCGTTGATGCTTGCTTGACTCAACC CGTTAAAGTCTTGAATTCATCACGAATTCGAGTCGAG CAAGTTTAAACCCAACATTAACTAAGCTCTCGAGGCTT AATGAGGCAGGGGTAGCTCAAGTTTGTTATTCAAGCA ACTTACCATAGTATTCTTTTAAAAGGCATATAGTCAGT TAGTTATTTGTTAATTTCAGTAGAACGAAAGAAGTACA TTATTAAACTTGGCCATTGATGCTTGAGCTAGAGAGC TTCGGTTGTGATCGAAACGAATCCTGATTTCGCTCTT GATCTTTGATGTGAAGTGACAAGGCCTTCATAAAACT CCTTTATTCTTCAGCAGTGCATACAAAAATCATGTGTG CCCAGCTCCTAGCTCACATACCGCGTTTTTCCCCTAA TCTAGTGTGGTCAAATAAAAACAGCAAGATGTGTTGA TGTCATGTGCAATAGTAATTATCAGGTGAAGTAATGCA ATATGTAGCCAGTCACCTCATATCAAAAAAATGTTGG GAGGAAAACGTATTCGTTCATCACTAAACCTGTGTTTA TACATCTAACTGATCGATCAGGGTTTCAAAATCCAAAT TAATACAATGGCATTTGACGAAGATATCCAGAACACAT CCCCCTTGTTTCTGCTAGATAATCAACTATTCTGATTC TGCTGTAATACCTCAGCTTCGGCCCTAGCCATGGGAT CGTCCTCTTTTTCTCCTTCACGCTCCTCGGCCAGTTT
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethods and compositions for weed control
Автори англійськоюAder, Daniel, Finnessy, John, J., Kapoor, Mahak, Li, Zhaolong, Shan, Ronak, Hasmukh, Tao, Nengbing, Wang, Dafu
Автори російськоюАдер Даниэль, Финнесси Джон Дж., Капур Махак, Ли Чжаолун, Шан Ронак Хасмукх, Тао Нэнгбинг, Ван Дафу
МПК / Мітки
МПК: C12N 15/82
Мітки: бур'янами, композиція, спосіб, варіанти, боротьби
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/844-116093-sposib-ta-kompoziciya-dlya-borotbi-z-buryanami-varianti.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб та композиція для боротьби з бур’янами (варіанти)</a>
Спосіб та композиція для боротьби з бур’янами (варіанти)
Номер патенту: 116089
Опубліковано: 12.02.2018
Автори: Шах Ронак Хасмукх, Фіннессі Джон Дж., Лі Чжаолун, Лю Хонг, Тао Ненгбінг, Адер Даніель, Масуччі Джеймс Даніель, Ван Дафу
МПК: C12N 15/82
Мітки: боротьби, варіанти, бур'янами, спосіб, композиція
Формула / Реферат:
1. Спосіб боротьби з ростом бур’янистої рослини, який включає місцеве нанесення на поверхню бур’янистої рослини композиції, яка містить полінуклеотид і агент перенесення, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена фітоендесатурази (PDS) або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена PDS, де вказану послідовність гена PDS вибирають із групи,...
Спосіб та композиція для боротьби з бур’янами (варіанти)
Номер патенту: 116090
Опубліковано: 12.02.2018
Автори: Адер Даніель, Діммік Метт У., Тао Ненгбінг, Ван Дафу, Лі Чжаолун, Саммонс Роберт Дуглас, Шах Ронак Хасмукх
МПК: C12N 15/82
Мітки: спосіб, бур'янами, композиція, боротьби, варіанти
Формула / Реферат:
1. Спосіб боротьби з ростом бур’янистої рослини, який включає місцеве нанесення на поверхню бур’янистої рослини композиції, яка містить полінуклеотид і агент перенесення, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена ацетил-КоА-карбоксилази (АККази) або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена АККази, де вказану послідовність гена АККази...
Спосіб та композиція для боротьби з бур’янами (варіанти)
Номер патенту: 116088
Опубліковано: 12.02.2018
Автори: Тао Ненгбінг, Тейлор Дженніфер Чоу, Ван Дафу, Ян Хепін, Фіннессі Джон Дж., Шах Ронак Хасмукх, Лі Чжаолун, Капур Махак, Адер Даніель, Масуччі Джеймс Д.
МПК: C12N 15/82
Мітки: бур'янами, боротьби, варіанти, композиція, спосіб
Формула / Реферат:
1. Спосіб контролю за ростом бур’янистої рослини, який включає місцеве застосування до поверхні бур’янистої рослини композиції, яка містить полінуклеотид і агент перенесення, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена 4-гідрофенілпіруватдіоксигенази (HPPD) або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена HPPD, де вказану послідовність гена HPPD...
Спосіб та композиція для боротьби з бур’янами (варіанти)
Номер патенту: 116092
Опубліковано: 12.02.2018
Автори: Фіннессі Джон Дж., Тао Ненгбінг, Адер Даніель, Шах Ронак Хасмукх, Тейлор Крістіна Марі, Тейлор Дженніфер Чоу, Лі Чжаолун
МПК: C12N 15/82
Мітки: композиція, варіанти, спосіб, бур'янами, боротьби
Формула / Реферат:
1. Спосіб боротьби з бур’янистими рослинами, який включає місцеве нанесення на поверхню бур’янистої рослини композиції, яка містить полінуклеотид і агент перенесення, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена 7,8-дигідроптероатсинтази (DHPS) або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена DHPS, при тому, що вказану послідовність гена DHPS...
Спосіб та композиція для боротьби з бур’янами (варіанти)
Номер патенту: 115535
Опубліковано: 27.11.2017
Автори: Тао Ненгбінг, Лі Чжаолун, Шах Ронак Хасмукх, Фіннессі Джон Дж., Тейлор Дженніфер Чоу, Масуччі Джеймс Д., Адер Даніель
МПК: C07H 21/02, C07H 21/04, A01H 1/06
Мітки: бур'янами, варіанти, композиція, спосіб, боротьби
Формула / Реферат:
1. Спосіб боротьби з рослинами, який включає місцеве нанесення на поверхню рослини композиції, яка містить полінуклеотид і агент перенесення, який відрізняється тим, що вказаний полінуклеотид ідентичний або комплементарний до щонайменше 18 безперервних нуклеотидів послідовності гена глутамінсинтетази (GS) або РНК-транскрипту вказаної послідовності гена GS, де вказану послідовність гена GS вибирають із групи, яка складається з SEQ ID NO: 1-4,...
Попередній патент: Спосіб та композиція для боротьби з бур’янами (варіанти)
Наступний патент: Панелі з деревноволокнистої плити середньої щільності
Випадковий патент: Спосіб вдосконалення визначення загального вмісту пігментів в конині фотометричним методом