Композиція наночастинок срібла у воді

1. Композиція срібла у воді, що включає загальну концентрацію срібла від близько 5 до близько 40 частин на мільйон, причому зазначене срібло знаходиться у формі наночастинок срібла, що мають внутрішню частину з елементного срібла і поверхню щонайменше з одного оксиду срібла, де більшість частинок срібла мають максимальний діаметр менше ніж 0,015 мікрометрів, і де більшість частинок колоїдного срібла мають мінімальний діаметр більше ніж 0,005 мікрометрів, і де композиція проявляє антимікробні властивості. 2 (19) 1 3 Галузь винаходу Даний винахід у цілому відноситься до нових сумішей срібло/вода (які іноді знаходяться у формі наночастинок срібла, що дисперговані у воді), і більш детально до нових композицій і/або морфологій сумішей срібло/вода, гідрогелів срібла, новим композиціям срібла, що комбіновані із сучасними антибіотиками і різними лігандами, які зв'язані з іонами срібла, гелями срібла, що основані на певних початкових сумішах срібло/вода, іонах срібла і/або металі(ах), зв'язаному з тим, що міститься у певних клатратах, таких як глини і/або цеолітні матеріали, і до методів створення і застосування названих композицій як агентів проти різних мікроорганізмів (включаючи деякі віруси), небезпечних для здоров'я і нормального самопочуття людей і/або тваринних або інших організмів. Більш того, у даному винаході також розкриваються інші метали в доповненні до срібла і можуть бути застосовані взаємозамінно щодо срібла у багатьох випадках. Також розкриваються різні комбінації і концентрації композицій за даним винаходом. Опис рівня техніки Добре відомо, що певні препарати срібла виявляють бактерицидні властивості. Срібло застосовувалось як бактерицидний засіб і як антибіотик до того, як розробили сучасні антибіотики. У попередніх сторіччях, споживачі зскрібали частки срібла у свою питну воду або занурювали цілий шматок срібла у питну воду, для того, щоб споживати усередину срібло з питною водою. Імовірно, що звичай приймати їжу зі срібних наборів (а саме, зі столового срібла) може брати свій початок у вірі в оздоровлюючі властивості срібла. Існує багато причин того, чому введення срібла, суспендованого у розчині, буде поліпшувати здоров'я індивідууму. Можливо, що такі розчини інгібують ріст бактерій, вірусів і інших небажаних організмів, а також знищують існуючі бактерії, віруси й інші організми. Також можливо, що композиція срібла може мати протизапальні ефекти, достатні для зниження, наприклад, набрякання, опікових ускладнень і певних симптомів астми. Перший варіант здійснення даного винаходу описує застосування композиції срібла у воді для лікування певних захворювань людини (або, наприклад, тварин). Один варіант застосування винаходу містить композицію срібла, що включає наночастинки срібла (а саме, велика частина яких складає 10-50 нанометрів у діаметрі) і яка, у кращому варіанті здійснення, може містити внутрішню частину з металевого срібла і зовнішню оболонку або поверхню, відмінну від зазначеної внутрішньої частини (а саме, покриття іонного срібла, покриття з одного або декількох оксидів срібла, наприклад, різні композиції і/або різні фази і т.і.), частинки яких суспендовані у воді (а саме, очищеній воді). У наступному кращому варіанті здійснення, щонайменше, 90% таких частинок мають діаметр 10-50 нанометрів. Кращий варіант здійснення винаходу включає композицію срібла, що містить частинки срібла (включаючи деякі частинки срібла, покриті оксидом срібла), де більш ніж 50% кількості частинок мають розмір менше, ніж 0,015 мікрометрів, і 91209 4 частинки є колоїдно суспендованими (а саме, не осідають) у воді. Інший кращий варіант здійснення винаходу включає частинки, де близько 95% частинок мають діаметр 10-40 нанометрів. У наступному варіанті здійснення близько 95% частинок мають діаметр 10-30 нанометрів. Короткий опис винаходу Даний винахід у цілому відноситься до застосування срібла, на рівні від 5 до 40 ppm у воді (але в деяких випадках менше, ніж 5 ppm), для або знищення, або інактивації мікроорганізмів (включаючи певні віруси), що небезпечні для людей і/або тваринних або інших живих організмів. Також даний винахід специфічно стосується композицій, що включають наночастинки срібла, зазначені частинки, у кращому варіанті здійснення, включають, наприклад, внутрішню частину елементарного срібла і зовнішнє покриття або часткове покриття або шар, наприклад, одного або декількох оксидів (оксиду) срібла (наприклад, іонний оксид срібла, оксиди срібла, такі як Ag2O, Ag, Ag4O4 і т.і.), зазначені покриття оксидів бувають у різних фазових станах (наприклад, Ag2O буває моноклінічним і/або тетрагональним) і воду, де частки срібла розташовані в суспензії (наприклад, колоїдній суспензії) у воді на рівні 5-40 ppm загальної кількості. Один варіант здійснення даного винаходу включає наночастинки срібла (далі в описі винаходу необхідно розуміти, що застосування терміна "частинка(и) срібла" або подібні у випадку, якщо вони отримані у відповідності електрохімічним технологіям, розкритим у даному описі, відноситься не тільки до елементарного срібла, але також до частинок елементарного срібла, що можуть мати часткове або, в більшому ступені, повне покриття з одного або декількох композицій, таке (такі) покриття, що включають один або більш оксидів срібла на, щонайменше, частині їх) є присутнім у воді (переважно очищеній воді, що обговорюється в даному описі нижче), у концентрації 5-40 ppm, де більш ніж 50% частинок срібла має максимальний розмір менше, ніж 0,015 мікрометрів. У кращому варіанті здійснення, більшість частинок мають 1040 нм у діаметрі. У більш кращому варіанті здійснення більшість частинок мають 10-30 нм у діаметрі. Композиція срібла у воді (а також частки срібла, що виділені як практично окремі частки із сумішей срібло/вода, зроблених відповідно до композиції), а також суміші срібло/вода, зроблені відповідно до технологій даного винаходу і пізніше введені до складу гелю, пудри, або глини цеоліту (як обговорюється в кращих варіантах здійснення нижче в даному описі), відповідно до технологій за даним винаходом, є, наприклад, дуже ефективним протимікробним агентом(ами) і противірусним агентом(ами) (і в деяких випадках також протипаразитним). Даний винахід також стосується композицій срібла, 5-40 ppm срібло у воді і які, відповідно до способів застосування зазначених композицій срібло/вода, розкритих тут, є дуже ефективними як протимікробні агенти при використанні зазначених композицій у такий спосіб: (1) прийом усередину живими організмами; (2) застосування зовнішньо живими організмами, а також зовнішньо (або усередину) на різні поверхні, як тверді, так і пористі 5 91209 6 (наприклад, кухонні столи, поверхні готування їжі, відуальну подачу напруги), як описано в Патенті устаткування для готування їжі, поверхні в лікар'299. Напруги, що значно більші, ніж десять тисяч нях, медичні інструменти, водопроводи (металеві вольт, мають тенденцію до виробництва розчину, і/або пластикові), прилади фільтрації повітря і що може мати значну кількість іонного срібла, розт.д.); і (3) додавання срібла або композицій срібчиненого в ньому. Дана композиція містить у надло/вода до забрудненої води (наприклад, обробка лишку 97% частинок металевого срібла, що присустічних вод, водяного резервуару, забруднених тнє у кількості 5-40 ppm, по суті, с маленькою водяних ємностей, водопроводів і т.і., що, переваприсутністю або відсутністю вільного іонного срібжно, мали великі тверді частки, вилучені з них пела в розчині срібло/вода. ред зазначеним додаванням для здійснення проКонцентрація срібла визначається способами, цесу очищення води. що пояснюються нижче. По суті, 75 галонів прилаОдин кращий варіант здійснення даного винаду для одержання композиції срібло/вода привоходу стосується композицій срібла у воді, що дяться в рух безупинно і зразки з приладу аналіотримані з використанням модифікації приладу зують доти, поки досягають бажаної ppm і/або способів, описаних у Патенті США №6214299 концентрації срібла у воді. Виявлено, що при умо("Патент '299"), що спеціально включений у даний вах проведення, описаних у даному описі, 10 ppm опис за допомогою посилання. Також композиції композиції срібло/вода вимагає приблизно одного інших металів, таких як, наприклад, мідь (і сплави або півтора днів одержання; 22 ppm композиції міді), цинк, платина і титан, а також їхні сплави і срібло/вода вимагає приблизно трьох днів одерсуміші) можуть бути використані для створення жання, і 32 ppm композиції срібло/вода вимагає інших бажаних метал/композицій, відповідно до приблизно шість днів одержання. Швидкість форспособів даного винаходу, що також мають неспомування частинок срібла в композиціях срібдівану ефективність. ло/вода виявляється тим повільніше, чим вище Прилад і спосіб за Патентом '299 були модиконцентрації частинок срібла бажають одержати. фіковані й удосконалені для забезпечення компоКоли бажано, щоб концентрації срібла в композизиції срібла за даним винаходом, процес якого ціях срібло/вода були вище 50 ppm, беруть відноописаний у даному описі нижче дуже детально. По сно тривалий проміжок часу для досягнення, досуті, прилад з восьми срібних/одного звичайного тримуючи виробничих параметрів, описані нижче, електрода, як описано у Патенті '299, був модифінайвищою концентрацією, що досягає значень кований і відмасштабований для відповідності біблизько 50 ppm при необхідному проміжку часу. льшому (наприклад, 75-85 галонів) водяному реЯкщо необхідно, можливі більш високі концентразервуару. Для здійснення процесу одержання ції частинок срібла. Проте, ефективність більш композиції срібло/вода в ємності 75-85 галонів, низьких концентрацій частинок срібла проти різних приблизно 70-75 галонів щодо чистої води (наприпатогенів була настільки значною, що більш високі клад, фільтрованої води, води із системи зворотконцентрації частинок срібла не є необхідними в ного або осмосу води, що не містить великих кільданий момент. костей потенційних забруднювачів і т.і.), що Наночастинки срібла в композиціях срібзвичайно містить менше, ніж 2 ppm загальної кільло/вода усі мають подібний загальний розмір часкості нерозчинних твердих частинок, або навіть тинок і характеристики форми, що описані нижче в більш переважно, менше, ніж 1 ppm загальної кічастині характеристики більш детально, і не схожі лькості нерозчинних твердих частинок, поміщають на будь-які стандартні композиції "колоїдного срібу резервуар. До цього додають, у кращому варіанті ла", ці композиції срібло/вода повністю безбарвні і здійснення, приблизно п'ять галонів композиції значно стабільні відносно помірних змін світла і срібло/вода, отриманої на попередньому етапі температури, без необхідності застосування будьвиробництва. Це "попередня обробка" із приблизяких добавок для підтримки стабільності (які вимано 5 галонами є допоміжною, але не обов'язковою. гають і/або використовують будь-які відомі з рівня Попередня обробка, по суті, забезпечує присуттехніки типи колоїдного срібла). Припускають, що ність необхідної кількості провідних частинок срібкомпоненти і етапи комерційного процесу, що зала так, щоб струм міг текти між різними електростосовуються, роблять композицію срібло/вода, дами, коли необхідна напруга/струм доступна що відрізняється від інших продуктів, відомих як протягом відносно короткого проміжку часу. Така "колоїдне срібло" таким чином, визначає більш "попередня обробка" також призводить до небагависоку ефективність композицій срібло/вода. Деякі то менших початкових "конусів Тейлора", що обгохарактерні відмінності фізичних властивостей (наворюються нижче в даному описі. Резервуар води приклад, розмір частинок, композиція, патерн спеоснащений входом повітря (звичайно локалізовактроскопії і т.і.) нових композицій срібло/вода даним біля дна водяного резервуару), що дозволяє ного винаходу обговорюються більш детально потоку пухирців повітря текти через рідину вонижче в даному описі. да/срібло протягом її одержання. Виявлено, що Композиції срібло/вода відповідно до винаходу цей підхід призводить до очевидно удосконаленотакож, по суті, є нереактивними відносно багатьох го змішування у порівнянні з лопатевим змішуваматеріалів, що до них додають, включаючи, начем, який описаний у Патенті '299, що доведено приклад, або окремо, або в комбінації, (1) перекис певними підвищеними ефективностями. водню, (2) динатрій EDTA (динатрій етилендіамінЕлектродний прилад(и) приводиться в дію при тетраоцтової кислоти), що дійсно можуть діяти як напрузі (щонайменше, спочатку) порядку приблизпідсилювачі композицій срібло/вода (наприклад, но десять тисяч вольт перемінного струму (з кожможуть робити композиції срібло/вода навіть ним положенням срібного електрода, що має індибільш ефективними), (3) йод (наприклад, йод пові 7 91209 8 дон, що у деяких випадках може виявляти середступну хімічну формулу: (CH2N(CH2COOH)CH2 ню реактивність), що може допомагати композиціCOONa)22H2O. В іншому переважному варіанті ям срібло/вода бути навіть більш патогенними здійснення винаходу, маленька кількість (наприпроти різних патогенів і (4) різні комерційно достуклад, 0,5-10 ppm, або більш переважно 0,5-5 ppm, пні антибіотики (які дійсно можуть призводити до або навіть більш переважно близько 0,5 ppm) дипевних синергетичних ефектів, що проявляються натрій EDTA додають до або постачають композиміж композиціями срібло/вода і антибіотиками, у ції срібло/вода відповідно до даного винаходу. У такий спосіб призводять до того, що може реалізуцьому варіанті здійснення, здається, що нібито ватися потенціал для нових і бажаних комбіновадодавання маленької кількості динатрію EDTA них терапій). Відповідно, різні додаткові матеріали збільшує силу (наприклад, збільшує бактерицидні, або речовини можуть бути використані в комбінації дезинфікуючі і/або протимікробні властивості) з (наприклад, добавлений до або постачений) нокомпозиції срібло/вода. Без бажання зв'язати з вими композиціями срібло/вода даного винаходу будь-якою окремою теорією або поясненням, мождля збільшення, синергетичним чином бажаних ливо, що динатрій EDTA може збільшувати прониефектів, що можуть виявляти будь-який матеріал кність клітинної стінки, що може підсилювати загасамостійно. Специфічно, у багатьох випадках (нальні ефективності композицій срібло/вода приклад, комбінації антибіотиків), отримані комбівідповідно до даного винаходу. Інший переважний новані ефекти є синергетичними і перевищують варіант здійснення даного винаходу - це застосуіндивідуальні додаткові ефекти будь-якого матерівання і спосіб застосування композицій, що вклюалу або речовини окремо, якщо вони комбіновані чають 10-40 ppm срібла і 0,5-10 ppm динатрій (наприклад, 2+2=6). Звичайно, деякі з можливих EDTA у воді в якості протимікробного агента, бакдопоміжних речовин, що будуть покривати нові терицидного агента і/або дезинфікуючого засобу. композиції, придатні тільки як місцеве або зовнішІнший приклад допоміжної речовини, що пранє лікування через їхню потенційну внутрішню токцює переважно з композиціями срібло/вода даного сичність у біологічному організмі (наприклад, для винаходу - це йод-повідон. Йод є добре відомим людей і тварин). Кількість необхідних допоміжних профілактичним засобом у медицині для лікування речовин може варіювати в залежності від багатьох широкого спектра патогенів. Йод є комерційно дообставин, включаючи часткове ураження (наприступним у різних концентраціях, але звичайно виклад, вірусом, бактерією, паразитом і т.і.) або інкористовується, і переважною є концентрація 10%. фекцію, кількість інших матеріалів, присутня на У цьому переважному варіанті здійснення винахододаток до допоміжних речовин і т.д. Незважаючи ду синергетична комбінація, що включає близько на це, точна кількість необхідної допоміжної речо25-50% по об'єму суміші срібло/вода, витісняє 10% вини буде визначатися методикою експеримента розчин йоду. Поки можливі деякі реакції між суміспеціалістом у даній області. Крім того, концентшшю срібло/вода і йодом, з експериментальних рації суміші срібло/вода можуть також впливати на результатів, що обговорювались нижче, стає зрокількість необхідної допоміжної речовини, також зуміло, що синергетична комбінація срібло/вода з визначатися методикою експерименту спеціалісйод-повідоном може функціонувати як місцевий том даної області. дезинфікуючий засіб (наприклад, мазь) і/або як Один приклад бажаної допоміжної речовини профілактичний засіб проти інфекції в порізах, це перекис водню. Перекис водню є відомим дезиопіках і/або зскрібках і т.і. Інший переважний варінфікуючим агентом. Виявили, що перекис водню ант здійснення даного винаходу - це застосування має синергетичну взаємодію зі знайденими компоі спосіб застосування композиції, що включає 10зиціями срібло/вода відповідно до винаходу. Пе40 ppm срібла і йод-повідону у воді в якості протирекис водню доступний у концентраціях, напримікробного агента, бактерицидного агента, протиклад, 30% по вазі (% ваги на об'єм або об'єм на вірусного агента і/або дезинфікуючого засобу. ваговий відсоток) або навіть вище. Незважаючи на Інший переважний варіант здійснення винахоте, що високі концентрації є прийнятними, переваду застосовує композиції срібло/вода даного винажні концентрації для використання з композиціями ходу у комбінації з різними доступними антибіотисрібло/вода даного винаходу виявляються 30% ками в підході, відомому як комбінована терапія. або нижче і переважніше, падають до діапазону 1Комбінована терапія становить великий інтерес, 5% по вазі. тому що в останніх двох десятиліттях широко поОдин переважний варіант здійснення даного ширилася резистентність до антибіотиків і тому є винаходу відноситься до композицій, що включапредметом глобальної проблеми. Інфекції, виклиють 5-40 ppm частинок срібла, 1-3 ваг. % перекису кані грамнегативними бактеріями, такими як водню, а інше - вода (наприклад, фільтрована або Escherichia coli, Klebsiella, Proteus, Shigella і суттєво очищена вода). Інший переважний варіант Pseudomonas, викликають все більший інтерес, здійснення даного винаходу - це застосування і тому що ці організми набули множинну лікарську спосіб застосування композицій, що включають 10резистентність до антибіотиків. Недавні дослі40 ppm срібла і 1-3 ваг. % перекису водню у воді у дження з вивчення схеми резистентності грамнеякості протимікробних агентів. гативних клінічних ізолятів, що викликають госпіІнший приклад допоміжної речовини, що пратальні інфекції, показали, що більшість ізолятів цює переважно з композиціями срібло/вода даного були резистентними до звичайних антибіотиків винаходу - це динатрій етилендіамінтетраоцтова подібних до ампіциліну, гентаміцину, хлорамфенікислота, також відомий як "Натрій EDTA" або "диколу, котримоксазолу, і першому і другому поконатрій EDTA" (посилання на кожний з них іноді лінню цефалоспоринів. Також приблизно 70% цих зустрічається в літературі) і який може мати наізолятів були резистентними до ципрофлоксацина. 9 91209 10 У цьому варіанті здійснення винаходу, суміші срібвиявляє обмежуючої дії стосовно протимікробних ло/вода (або комбіновані як рідина, або висушені і властивостей наночастинок срібла відповідно до додані як тверді речовини, таким чином, формуюданого винаходу. Крім того, ці гідрогелі функціочи, наприклад, порошок, на який іноді посилаються нують як високоефективні очисники рук і шкіри, як на "Sildust"), у випадку, коли вони комбіновані з також як і шкірні захисні засоби (наприклад, нанерізними антибіотиками, виявляли синергізм скорісення гідрогелю на руку(и) для того, щоб у випадку ше, ніж просто властивості допоміжної речовини. контакту рук(и) з патогенами, гелевий шкірний заАналізи методом «шахівниці» показали, що певні хисний засіб може допомагати запобігти інфекції антибіотики при комбінуванні із сумішами срібчерез, наприклад, порізи або садни, тому вони ло/вода дають у результаті антибіотики, що у кільфункціонують як профілактичні засоби), у такий ка разів більш ефективні, ніж срібло окремо (наспосіб це робить гелі широко використовуваними у приклад, суміші срібло/вода, комбіновані з сфері охорони здоров'я або підтримки гарного саамікацином і цефоперазоном, показали FIC індекс мопочуття. близько 0,1875, у порівнянні з двома антибіотикаЗокрема вважають, що чисті руки є найважлими, використаними в комбінації один з одним, що вішим фактором у запобіганні поширення небездавало FIC індекс 0,625, якщо дві комбінації викопечних мікроорганізмів і резистентності до антибіристовували проти, наприклад, MRSA (резистентотиків у підтримці здоров'я. Найбільш гігієнічні ного до метициліну Staphylococcus aureus)), що засоби для миття рук, що застосовуються в сучасобговорюється більш детально нижче в описі. Інних медичних умовах, основані на спирті і мають ший переважний варіант здійснення даного винаряд обмежень. Перше місце серед обмежень є ходу - це застосування і спосіб застосування компорушення шкіри, що викликається повторним позицій, що включають 10-40 ppm срібла і різні нанесенням продуктів, основаних на спирті. У деантибіотики як протимікробний агент і/або бактеяких випадках відзначають (1) подразнюючим конрицидний агент і/або противірусний агент для спотактний дерматит також як і (2) алергійний контаксобів лікування, на які посилаються як на "комбітний дерматит. Це знижує задоволення від новані терапії". Точна кількість (і концентрація) застосування гігієнічних продуктів для рук працівсумішей срібло/вода за даним винаходом, що мониками охорони здоров'я. же бути доданою до традиційних способів терапії Інший фактор, що викликає незадоволення антибіотиками, визначається методикою експериефективністю гігієни рук, є той факт, що, продукти менту. Зокрема, специфічна хвороба, яку лікують гігієни рук, які є рідинами, звичайно нерухомо заспецифічним курсом антибіотика (а також ефектифіксовані над умивальниками або раковинами. Це вність антибіотика проти патогену) буде впливати призводить до того, що медперсонал пересувана кількість і концентрацію необхідної суміші срібється від ліжка пацієнта до умивальника і повертало/вода. ється до наступного пацієнта. Якщо засіб для Незважаючи на велику кількість аналізів, що очищення рук буде доступним у якості "натирання, застосовуються для розчинів срібло/вода окремо що наноситься", то цю проблему можна обійти, або в комбінації з різними допоміжними речовинатим самим, забезпечивши краще задоволення від ми, представлених нижче, також в описі показано, його використання. Показано, що гідрогелеві прощо певні наповнювачі можуть значно поліпшити дукти даного винаходу значно знижують кількість результати, отримані від розчинів срібло/вода в бактерій контрольних організмів, протягом пролонрізних ситуаціях. Специфічно виявлено, що склагованих періодів часу, що обговорюється більш дання водяної композиції срібло/вода як напівтведетально в описі, тим самим забезпечуючи конкурдий гідрогель (іноді нижче в описі на нього посирентний альтернативний продукт гігієни для рук. лаються як на "Silgel" або за іншою версією як Відповідно, що гідрогелеві продукти даного вина"Silderm"), або навіть шматочки такого матеріалу, ходу також продемонстрували широке застосузначно збільшує її ефективність для певних типів вання як "шкірні захисні засоби", захищаючи норвведення. Гидрогелі є типово гідрофільними гелямальну здорову шкіру від різних патогенних ми, отриманими шляхом додавання певних гідроматеріалів у профілактичних цілях. фільних органічних полімерів до водяного розчину В іншому переважному варіанті здійснення ви- у даному випадку розчин, що містить заявлений находу, продукт, що оснований на сріблі, може, розчин срібло/вода. Проте, очікували, що інші розщонайменше, частково, або в деяких випадках, по чини "колоїдного срібла" можуть також входити до суті, повністю, бути заміщеним композиціями срібскладу гідрогелів, відповідно до методик, описало/вода відповідно до даного винаходу. Специфічними тут, і хоча такі гідрогелі можуть і не бути нано було виявлено, що срібло EDTA (або AgEDTA) стільки ефективними, як гідрогелі відповідно до саме по собі має значні протимікробні характерисданого винаходу, ці гідрогелі можуть, проте, мати тики. Зокрема, як вказувалося вище, динатрій певне бажане застосування. Відповідно, даний EDTA застосовують як допоміжну речовину для винахід також направлений на розкриття певних композицій срібло/вода відповідно до даного винааспектів цих гідрогелів. Як і передбачалося, гідроходу. Проте, EDTA (етилендіамінтетраоцтова кисгель поліпшує утримання срібла на площі поверхлота) є чудовим синтетичним хелатуючим агенні, такої як рана на площі поверхні шкіри. Для дотом. EDTA (C10-H16-N2-O8) можна гляду за раною гідрогель або покриваючий використовувати в їжу людини, і його часто додаматеріал також мають значну перевагу для захисють у безалкогольні напої як консервант. EDTA ту тканин, що оточують рану і попередження виситакож використовується в терапії хелатування вахання, ці фактори звичайно сприяють загоєнню жких металів для людини. Проте, не розглядалося рани. Більш значно те, що гідрогель практично не застосування AgEDTA у якості протимікробного 11 91209 12 засобу (наприклад, окремо або в комбінації з іннесподівану ефективність. Крім того, у доповненні шими терапіями, такими, що розкриті в описі). Тодо срібла, включеному усередину або на структуру вари масового споживання, такі як м'ясна або білоксидного шару (наприклад, глини) і сітку (наприкова продукція й обробна промисловість, клад, цеоліти) можуть бути використані силікати, виробництво мила, виробництво детергентів (нафосфати й оксиди, такі як гідроталцити. Крім того, приклад, індивідуальні і побутові продукти), сільсьбажані сімейства глини або слюди, які можна викогосподарська або тваринницька галузь і галузь користовувати в даному винаході, (і які здатні мати охорони здоров'я можуть бути придатними для різні поверхневі заряди і/або різні відстані між шапорошкоподібної форми стабільного срібла, що рами) включають, наприклад, іліти, монтморілоніможе забезпечити високий рівень здоров'я і самоти, хлорити і вермикуліти. почуття (наприклад, як терапевтично, так і профіГлини і слюди, також як і цеоліти, дуже необлактично). Зокрема, AgEDTA на даний момент є хідні як носії іона металу(ів) для різних цілей, доступним і відносно простим у виробництві, збевключаючи частинки, що багато існують в природі реженні і транспортуванні. Цей варіант здійснення або легко одержуються, можуть підтримуватися в винаходу визначає нове застосування для необхідному діапазоні колоїдного розміру, що покAgEDTA, тобто, застосування порошку AgEDTA ривають їх, наприклад, суспендовані в рідинах для здоров'я або гарного самопочуття людей, рос(наприклад, воді), і звичайно є біологічно прийнятлин і/або тварин і/або лікування певних порушень ними (наприклад, невеликі побічні ефекти або їх у тварин і людей (наприклад, може використовувавідсутність). У цьому відношенні, коли срібло потися як терапевтичний засіб і/або профілактичміщають, наприклад, усередину або на глину, або ний). Akzo-Nobel постійно робить прийнятний цеоліт, молекули потім нагрівають до помірних AgEDTA. Інші срібло-хелатуючі або комплексотемператур (наприклад, 100-200°С) для фіксуванутворюючі агенти, такі як, наприклад, EDDS срібня срібла на поверхні або усередині клатрату. Усі ла, куркумінат срібла, берберин срібла і тетрацикці матеріали можуть бути виготовлені в широкому лін срібла, що також виявляють протимікробні діапазоні в'язкостей від плинної форми до дуже властивості і застосування цих матеріалів для в'язкої. здоров'я і гарного самопочуття людей або тварин, Загалом, електронні рівні в таких елементах, також є новими і невизначеними у рівні техніки. як катіони, при будь-якій заданій валентності, моРізні інші органічні структури можуть бути викорисжуть змінюватися, коли катіон елементу координутані для переносу і/або доставки срібла і/або іонів ється різними аніонами. Зокрема, чим більше срібла до різних ефективних ділянок у або на біоутвориться ковалентних зв'язків, тим більше змілогічні структури. Ще раз кількість необхідного нюються енергетичні рівні. Дуже імовірно, що зміAgEDTA буде варіювати, у залежності від необхідни від малих до середніх в електронній структурі них конкретних біологічних задач (наприклад, висрібла будуть спостерігатися, коли срібло оточене моги лікування і/або профілактика). (або скоординоване) різною кількістю оксидів-іонів. Ця зміна в електронній структурі для таких катіоВ іншому переважному варіанті здійснення винів, як катіони срібла, повинна відбуватися в будьнаходу, додаткові неорганічні продукти, що оснояких з різних структур оксиду срібла. Крім цього, вані на сріблі, можуть бути, щонайменше, часткоіснує більш загальний спосіб, за допомогою якого во, або в деяких випадках, по суті, цілком срібло може займати місце в кисневому клатраті заміщеними композиціями срібло/вода відповідно або решітці. У цьому відношенні шляхом обміну, до даного винаходу. Специфічно, срібло (напринаприклад, катіона натрію в структурі, з катіоном клад, іони срібла, метал срібла, Ag+) може контсрібла, потім в обмінних або поглиблених просторольовано приєднуватися або фіксуватися, наприрах можуть знаходитись іони натрію (наприклад, клад, на або між шарами глини і/або усередині або на або між шарами глини, або всередині сіток решітки цеолітів. Така фіксація може проходити цеолітів). Загалом, здатність одного матеріалу шляхом контролювання заряду, наприклад, силіобмінювати катіони, називають "СЕС" або "здатнікатного шару, заряду цеолітної решітки, також як і стю обмінювати катіони". Одиницями для CEC відстані між шарами або розміром цеолітної решіттипово є «мек/100 грам» або міліеквіваленти на ки. У цьому відношенні, срібло може приєднуватисто грамів. Загалом, чим вище число СЕС, тим ся або тісно, або зв'язуватися відносно вільно у вище здатність матеріалу приєднувати катіони залежності від окремого випадку здоров'я або за(наприклад, катіони срібла). Відповідно, сполуки гального стану і точка взаємодії між сріблом і біосрібла, що координують кисень, можуть служити логічним матеріалом (наприклад, на поверхні біопереносником срібла (або інших металів) і бути, логічного матеріалу, або у внутрішній частині, або таким чином, здатними функціонувати як терапевкомбінації внутрішніх частин і т.і.). Відповідно, тичні агенти самостійно або в комбінації з іншими отримані продукти можуть включати продукти, що терапевтичними агентами. є досить плинними, і тому питними або такими, що Крім того, срібло-метал або срібло-іони, що розбризкуються; також як і продукти, що є гелеовбудовані в силікагель шляхом дифузії і сушіння, є подібними або пастоподібними і легко намазуютьтакож бажаними механізмами для доставки метася на поверхні, як гелі або пасти. лу(ів) відповідно до даного винаходу. Будь-який з цих металів, що обговорюється в В іншому переважному варіанті здійснення виописі, може утримуватися усередині кристалічного находу комбінації вищезгаданих частинок, органічй аморфного клатрату одного або декількох атомні і/або неорганічні структури можуть бути викориних шарів кисню або кисневмісних молекул. Покастані для позитивного впливу на здоров'я і зано, що певні структури метал/клатрат мають самопочуття людей і тварин. Специфічно, частки 13 91209 14 металу, відповідно до винаходу, можуть бути вимованих у композиціях срібло/вода, сформованих користані окремо, як описано вище. Крім того, часвідповідно до даного винаходу. тки металу можуть комбінуватися з, наприклад, Фігури 7a-7d показують ТЕМ фотомікрографії, органічними речовинами, що обговорювались вищо створені в різних ТЕМ, і з застосуванням різних ще (наприклад, AgEDTA). Крім того, іони металу технік з тих, що були використані для створення відповідно до даного винаходу можуть комбінуваФігур 1-6; і Фігура 7е показує EDS (енергорозсіюютися з будь-якими неорганічними речовинами (нача рентгенівська спектроскопія) (EDAX (енергодиприклад, глинами або цеолітами). Крім того, іони сперсійний рентгенівський аналіз)) спектр частинок металу даного винаходу можуть комбінуватися як срібла, узятих з композиції срібло/вода відповідно з органічними молекулами (наприклад, AgEDTA), до даного винаходу. так і з неорганічними молекулами (наприклад, глиФігура 8 показує електронну дифрактограму, нами або цеолітами). Ця комбінація системи досотриману від частки срібла з композиції срібтавки металів срібла або іону срібла може бути ло/вода відповідно до даного винаходу. сконструйована таким чином, щоб, наприклад, Фігура 9 включає три SEM (скануючий електвнутрішнє споживання будь-якої вищезгаданої ронний мікроскоп) фотомікрографії, що разом посистеми доставки срібла може призводити до того, казують можливе ушкодження електронним прощо вони доставляються до різних частин, наприменем на частках срібла, узятих з композиції клад, організму. Зокрема, наприклад, в організмах срібло/вода відповідно до даного винаходу. людей, певне срібло може абсорбуватися у роті, Фігура 10 показує SEM фотомікрографію новочерез кишку, також як і через товстий і/або тонкий го срібного електрода перед його використанням у кишечник і т.і. Крім того, у залежності від, наприпроцесі відповідно до даного винаходу. клад, кількості глин(и) або цеоліту(ів) відносно Фігури 11, 12 і 13 показують EDS елементарводи (також як і різні желеутворюючі речовини, ний аналіз областей 1, 2 і 3, відповідно, показаних описані тут) отриманий продукт(и) може бути від на Фігурі 10. дуже рідкого (низька в'язкість) до дуже в'язкого Фігура 14 показує SEM фотомікрографію кінця (висока в'язкість). У цьому відношенні, загалом, електрода, що застосовується для одержання чим більше глини або цеоліту забезпечується відкомпозицій срібло/вода відповідно до даного винаносно води (також як і желеоутворюючий агент), ходу. тим більше в'язким є кінцевий продукт. Фігури 15 і 16 показують EDS елементарний Детальний опис винаходу аналіз областей 1 і 2 відповідно, показаних на ФіНаступний опис забезпечує можливість кожгурі 14. ному спеціалісту в даній області зробити і викориФігура 17 показує - це SEM фотомікрографія, стовувати винахід, і викладає кращі способи, пещо взята приблизно при 3500Х кінця срібного елередбачені винахідником по проведенню даного ктроду, що застосовується. винаходу. Різні модифікації, проте, будуть очевидФігури 18а і 18b - це ТЕМ фотомікрографії часні для спеціалістів у даній області, тоді як основні тинок срібла, узятих з GNC Liquid Silver Dietary принципи даного винаходу визначені специфічно в Supplement (25 ppm). даному описі для забезпечення поліпшеної компоФігури 19а і 19b - це ТЕМ фотомікрографії часзиції срібло/вода (іноді в даному описі її називають тинок срібла, узятих із продукту колоїдного срібла, наночастинки срібла, що дисперговані у воді), яка відомого як "Silverado". може бути використана самостійно або в комбінаФігури 20а і 20b - це ТЕМ фотомікрографії часції з (наприклад, змішаною з або в супроводі з, по тинок срібла, узятих із продукту колоїдного срібла, суті, сполученими) іншими розкритими матеріалавідомого як Vitamin World Bioorganic Advanced ми, і яка може бути складена в різні гідрогелеві Colloidal Minerals (3 ppm). або пастоподібні композиції, усі з яких виявляють Фігура 21 - це порівняння, що перекривається, значні здібності вбивати патогени людини і/або п'яти ТЕМ фотомікрографій частинок срібла, дві з тварин як in vivo, так і in vitro. який від частинок срібла з даного винаходу і три з Загалом, даний винахід представляє новий піяких від частинок срібла, узятих з комерційно досдхід у знищенні або інактивації мікроорганізмів, що тупних типів колоїдного срібла. небезпечні для людських істот і/або тварин, шляФігури 22а і 22b показують сім різних спектра хом застосування наночастинок срібла у воді, при Рамана, три з яких відповідають композиціям срібконцентрації 5-40 ppm срібла; або активні частки ло/вода відповідно до даного винаходу, один відсрібла, що містяться в, наприклад, AgEDTA, і/або повідає чистій воді, один відповідає деіонізованій інших речовинах, розкритих в описі. У залежності воді і два відповідають комерційно доступним від способу введення і/або присутності допоміжних продуктам колоїдного срібла. речовин, композиція срібло/вода може застосовуФігура 23 а показує два спектри Рамана, що ватися внутрішньо або зовнішньо. У залежності від відповідають композиціям срібло/вода за даним способу введення, композиція срібло/вода може винаходом; і Фігура 23b показує три спектри Раматакож містити різні бажані допоміжні речовини, на, що відповідають трьом комерційно доступним багато з яких не перераховані специфічно в описі, продуктам колоїдного срібла. але для спеціаліста в даній області очевидно їх Фігура 23 с показує інший спектр Рамана, що застосування. відповідає композиціям срібло/вода за даним виКороткий опис графічних матеріалів находом. Фігури 1-6 показують ТЕМ (трансмісійний елеФігура 24а показує спектр Рамана композиції ктронний мікроскоп) фотомікрографії, що отримані срібло/вода відповідно до даного винаходу; і Фігупри різних збільшеннях від частинок срібла, сфор 15 91209 16 ра 24b показує три спектри Рамана композицій Фігури 45а і 45b - це EDS (EDAX) аналізи, що срібло/вода, цинк/вода і мідь/вода. відповідають фотомікрографіям 44а і 44b, відповіФігура 25 показує діаграму потенційних взаєдно. модій у диско-дифузійному аналізі для бактеріальФігура 46 - це SEM фотомікрографія нової суної сигнергічності. міші цеоліт/срібло, виготовленої відповідно до даФігура 26 показує тарування методом «шахівного винаходу. ниці» і графіки, що відбивають допоміжну речовиФігура 47 - це EDS (EDAX) аналіз цеоліту Linde ну, синергетичні й антагоністичні ефекти в комбі4A, що містить заміщене їм срібло, і виготовлене нованій терапії. відповідно до даного винаходу. Фігура 27 показує фотографії чутливості MDR Фігура 48а показує спектр ультрафіолетової і (стійких до ряду лікарських засобів) ізолятів до 10 видимої області спектра (UV-Vis) 10 ppm розчину ppm суміші срібло/вода. срібло/вода і 32 ppm розчину срібло/вода при діаФігура 28 показує фотографії комбінацій антипазоні довжини хвилі 190 нм - 400 нм (обидва прибіотиків для MRSA. готовлені відповідно до даного винаходу); і Фігура Фігура 29 показує фотографії комбінацій анти48b показує спектр ультрафіолетової і видимої біотиків для Е. coli. області спектра тих же зразків при діапазоні 190 Фігура 30 показує фотографії комбінацій антинм - 250 нм. біотиків для Pseudomonas. Переважні варіанти здійснення Фігура 31 показує графік "поточної" прикладеНижче представлені переважні варіанти здійсної напруги, і поточної концентрації срібла як фуннення, що не обмежують: кції тривалості процесу, протягом якого відбуваКомпозиція, що включає наночастинки срібла, ється процес формування композиції срібло/вода. колоїдно-суспендовані у воді, при цьому загальний Фігура 32 показує графік поточної концентрації вміст срібла складає 5-40 ppm, зазначена компосрібла як функції тривалості процесу з викорисзиція убиває або інактивує мікроорганізми, що нетанням атомної абсорбційної спектроскопії і метобезпечні для людей і/або тварин. дик, що вимірюють електропровідність, відповідно. Композиція, що включає наночастинки срібла, Ця Фігура також показує концентрацію срібла після колоїдно-суспендовані у воді, при цьому загальний 32 годин одержання, і після гомогенізації. вміст срібла складає близько 10+2 ppm, зазначена Фігура 33 показує графік поточної прикладеної композиція убиває або інактивує мікроорганізми, напруги, фактора сили і концентрації срібла як що небезпечні для людей і/або тварин. функції тривалості процесу, протягом якого відбуКомпозиція, що включає наночастинки срібла, вається процес формування заявленої композиції колоїдно-суспендовані у воді, при цьому загальний срібло/вода. вміст срібла складає близько 22+2 ppm, зазначена Фігура 34 - це графік, що показує втрату волокомпозиція убиває або інактивує мікроорганізми, ги SILDERM. що небезпечні для людей і/або тварин. Фігура 35 - це графік, що показує вбирання воКомпозиція, що включає наночастинки срібла, логи SILDERM. колоїдно-суспендовані у воді, при цьому загальний Фігура 36 - це фотографія, що показує антибавміст срібла складає близько 32±3 ppm, зазначена ктеріальну активність хелатів срібла (AgEDTA, композиція убиває або інактивує мікроорганізми, вироблений Akzo-Nobel) проти Pseudomonas що небезпечні для людей і/або тварин. aeruginosa (MDR). Гідрогелева композиція, виготовлена з вихідФігура 37 - це фотографія, що показує антибаної композиції срібло/вода, що включає наночасктеріальну активність хелатів срібла (AgEDTA, тинки срібла, колоїдно-суспендовані у воді, при вироблений Alpha Chemicals) проти pseudomonas цьому загальний вміст срібла у вихідному матеріaerugimosa (MDR). ал складає, переважно близько 32+3 ppm (але Фігура 38 - це фотографія, що показує чутлиможе бути більше або менше), зазначена гідрогевість SILDUST проти Е. coli (MDR). лева композиція убиває або інактивує мікроорганіФігура 39 - це графік, що показує противірусну зми, що небезпечні для організму людини і функактивність SILDUST як функцію часу експозиції. ціонує як, наприклад, очисник шкіри, засіб, що Фігура 40 - це фотографія центральної аналізагоює рани, і/або шкірний захисний засіб або шкізованої чашки Петрі, що показує ріст стерильних рний дезинфікуючий засіб. плям. Необхідно взяти до уваги, що визначення заФігура 41 - це фотографія аналізованої чашки гальної кількості наночастинок срібла в композиції Петрі, що показує відсутність стерильних плям срібло/вода не цілком визначає матеріал. Тому що після трьох годин, і таким чином, показує антибакнаночастинки, що включають композицію, вигототеріофагальну активність SILDUST. вляються меншими, отримана концентрація срібла Фігура 42 показує чотири дифракційні рентгебуде представляти більшу кількість частинок. Крім нограми 200 ppm заявленої композиції срібтого, загальна площа поверхні для отриманої конло/вода; і чотири стандартних рентгенодифракційцентрації срібла буде збільшуватись. Таким чині накладені ряди (а саме, Ag, Ag2CO3, Ag і Ag2O). ном, розміри частинок і діапазони розмірів частиФігура 43 показує "TGA" аналіз (термогравіменок є важливими параметрами для визначення тричний аналіз) Ag4O4, також як і "DTA" аналіз ефективної заявленої композиції срібло/вода. Крім (диференційно-термічний аналіз) Ag4O4. того, покриття, такі як оксидні покриття (наприФігури 44а і 44b - це SEM фотомікрографії, що клад, часткові або майже повні) на зазначених відповідають заявленій суміші каолініт/срібло, вичастинках срібла можуть також впливати на ефекготовленої відповідно до даного винаходу. тивність композицій срібло/вода за даним винахо 17 91209 18 дом, такі покриття по своїй суті походять від вироми при і навколо поверхні розділу електрод/вода) і бничих умов винаходу. Проте, очікується, що подіможуть бути дуже важливими для загальної ефекбні покриття на частках срібла, що отримані іншитивності композицій срібло/вода за даним винахоми процесами (також як і метали, відмінні від дом. Точну композицію покриття на сьогоднішній срібла, такі як цинк, мідь, сплави міді, титан, пламомент важко визначити, але експериментальна тина, а також їхні сплави і суміші), також знаходеталізація забезпечувалася в розділі характерисдяться в межах даного винаходу і зв'язані з ним. тики нижче в даному описі. Відповідно, також як срібло, на яке посилаються в Наступний клас варіантів здійснення - це комданому описі, застосування різних альтернативних бінація будь-яких описаних вище варіантів здійсметалів, що обговорюються у даному описі, також нення срібло/вода з перекисом водню при 1-3 ваг. повинне розглядатися як виявлена ймовірна ефе% перекису водню в кінцевому продукті. ктивність, у залежності від окремих біологічних Наступний клас варіантів здійснення - це комумов (наприклад, залучені специфічні патогени). бінація будь-яких описаних вище срібло/вода варіНаступний клас варіантів здійснення - це будьантів здійснення з динатрій EDTA, при 0,5-10 ppm яка з вищеописаних композицій, де більш ніж 50% у кінцевому продукті. наночастинок срібла мають максимальний розмір Наступний клас варіантів здійснення - це комменше, ніж 0,015 мікрометрів. бінація будь-яких описаних вище варіантів здійсНаступний клас варіантів здійснення - це будьнення срібло/вода, де близько 50-75% по об'єму яка з вищеописаних композицій, де більш ніж 75% заміщено 10% йод-повідоном, що займає близько наночастинок срібла мають максимальний розмір 25-50% суміші срібло/вода в кінцевому продукті. менше, ніж 0,015 мікрометрів. Наступний клас варіантів здійснення - це комНаступний клас варіантів здійснення - це будьбінація будь-яких описаних вище варіантів здійсяка з вищеописаних композицій, де більш ніж 90% нення срібло/вода з різними комерційно доступнинаночастинок срібла мають максимальний розмір ми антибіотиками (або в рідкій формі, або у формі менше, ніж 0,02 мікрометрів. порошку) для одержання синергетичних ефективНаступний клас варіантів здійснення - це будьних комбінованих терапій. яка з вищеописаних композицій, де більш ніж 75% Наступний клас варіантів здійснення - це спонаночастинок срібла мають мінімальний розмір соби застосування всіх описаних вище композицій більше, ніж 0,005 мікрометрів. проти людських і тваринних патогенів, як: (1) внутНаступний клас варіантів здійснення - це будьрішніх, (2) зовнішніх або (3) як внутрішніх, так і яка з вищеописаних композицій, де більш ніж 90% зовнішніх. наночастинок срібла мають мінімальний розмір Наступний клас варіантів здійснення включає більше, ніж 0,005 мікрометрів і менше, ніж 0,040 застосування AgEDTA для здоров'я або самопомікрометрів. чуття людини і/або тварин. Наступний клас варіантів здійснення - це будьНаступний клас варіантів здійснення включає яка з вищеописаних композицій, де наночастинки застосування інших агентів срібла, таких як, насрібла включають срібло з валентністю нуль, тобприклад, EDDS срібла, куркумінат срібла, бербето в металевому окисленому стані (Ag(O)) у їхньорим срібла і тетрациклін срібла. му ядрі або центральній частині, і, щонайменше, Наступний клас варіантів здійснення включає одне покриття срібла в іонному окислюванні, вибзастосування інших металів, таких як цинк, мідь, ране з групи, що включає Ag(I), Ag(II), і Ag(III), з сплави міді, титан, платина і їхні сплави або суміпокриттям з Ag, Ag2O, і/або Ag4O4, які, швидше за ші, взаємозамінні зі сріблом як для готування, так і все, присутні на, щонайменше, частині (або, по для проведення способів введення, розкритих в суті, на усьому) металевому срібному ядрі. описі. Для стислості, в описі переважно посилалиНаступний клас варіантів здійснення - це будься на срібло, проте, необхідно розуміти, що інші яка з вищеописаних композицій, де частинки срібметали, розкриті в описі, можуть бути рівною міла включають срібло з валентністю нуль, тобто в рою сприятливими. металевому окисленому стані (Ag(O)) і покриття з В іншому переважному варіанті здійснення виоксиду срібла зі стехіометрією Ag або Ag2O або находу, додаткові, основані на сріблі неорганічні іншою відомою стехіометрією, що є стабільною в продукти, можуть бути, щонайменше, частково, умовах процесу, що використовуються для одерабо в деяких випадках, по суті, цілком заміщеними жання Ag2O нових композицій срібло/вода відповідля композицій срібло/вода відповідно до даного дно до винаходу. винаходу. Специфічно, срібло (наприклад, іони Подальше експериментальне дослідження посрібла, Ag+, метал срібла) може бути контрольоказує, що спочатку срібні оксидні покриття, що вано прикріпленим або фіксованим, наприклад, спостерігаються на, щонайменше, частині частиміж шарами глини і/або в решітках у цеолітах. Таке нок даного винаходу, є, щонайменше, частково у фіксування може виникати при контролюванні заформі, наприклад, Ag4O4, тобто, оксиду срібла II. У ряду, наприклад, силікатного шару, заряду цеолимолекулі цього матеріалу два з атомів срібла може тної решітки, також як і відстані між шарами або + бути в 1 стані (срібло І), у той час як інші дві морозміром цеолітної решітки. У цьому відношенні, лекули срібла можуть бути в 3+ стані (срібло III). срібло може прикріплюватися або зв'язуватися Крім того, за певних умов срібло може бути присуміцно або відносно вільно, у залежності частково тнім у 2+ (срібло II) стані, утворюючи, щонайменвід стану здоров'я і самопочуття, і точки взаємодії ше, часткові покриття, наприклад, Ag2O. Ці покритміж сріблом і біологічним матеріалом (наприклад, тя спочатку визначаються виробничими умовами на поверхні біологічного матеріалу, або у внутрішвинаходу (наприклад, такими умовами, створениній частині, або комбінації внутрішніх частин і т.д.). 19 91209 20 Відповідно, отримані продукти можуть включати води (також як і різні желеутворюючі речовини, продукти, що досить плинні, і є, тому, питними або описані тут) отриманий продукт(и) може бути від тими, що піддаються розбризкуванню; також як і дуже рідкого (низька в'язкість) до дуже в'язкого продукти, що є гелеподібними або пастоподібними (висока в'язкість). У цьому відношенні, взагалі, чим і легко намазуються на поверхні, як гелі або пасти. більше глини або цеоліту забезпечується відносно Будь-який з металів, що тут описується, може води (також як і желеоутворюючий агент), тим бітриматися усередині кристалічного або аморфного льше в'язким є кінцевий продукт. клатрату одного або декількох атомних шарів кисПриклади ню або кисневмісних молекул. Показано, що певні Складання композиції структури метал/клатрат мають несподівану ефекКомпозиції срібло/вода можуть бути виготовтивність. Крім того, у доповненні до срібла, вклюлені відповідно до процедур, викладеними в патеченому всередину або на структуру оксидного шанті США № 6214299, об'єкт винаходу якого специру (наприклад, глини) і сітку (наприклад, цеоліти) фічно включений в опис за допомогою посилання. можуть бути використані силікати, фосфати й окПереважний спосіб одержання композиції, що сиди, такі як гідроталцити. Крім того, бажані сімейвключає срібло відповідно з даним винаходом, ства глини або слюди, які можна використовувати застосовує електроди, що містять електрохімічну в даному винаході, (і які здатні мати різні поверхкомірку, і включає етапи, на яких: неві заряди і/або різні відстані між шарами) вклю(а) поміщають, щонайменше, два срібних елечають, наприклад, іліти, монтморілоніти, хлорити і ктрода в контакті з кількістю високо очищеної вовермикуліти. ди; Глини і слюди, так як і цеоліти, дуже необхідні (b) подають електричний струм через срібні як носії іона металу(ів) для різних цілей, включаюелектроди для відділення, таким чином, частинок чи існуючі в природі або ті, що легко одержуються, срібла від зазначеного срібного електрода в такочастинки можуть підтримуватися в необхідному му ступені, який достатній для викликання одердіапазоні колоїдного розміру, що покривають їх, жання суспендованих частинок срібла у воді; і наприклад, суспендуючись в рідинах (наприклад, (с) перемішують воду протягом зазначеного вода) і є типово біологічно дуже прийнятними (наодержання суспендованих частинок срібла для приклад, невеликі побічні ефекти або їх відсутдиспергування, таким чином, частинок срібла в ність). У цьому відношенні, коли срібло поміщають, більш уніфікованій концентрації з зазначеною вонаприклад, всередину або на глину, або цеоліт, дою так, щоб висока кількість і суттєво уніфіковамолекули потім нагрівають до помірних темпераний розподіл суспендованих частинок срібла може тур (наприклад, 100-200°С) для фіксування срібла бути зроблено на партію. до або всередині клатрату. Усі ці матеріали моІнший переважний спосіб одержання композижуть бути виготовленими у широкому діапазоні ція, що включає композиції срібло/вода, викорисв'язкостей від плинного стану до дуже в'язкого. товує електрохімічну комірку і включає етапи, на Крім того, срібло-метал або срІбло-іони, що яких: вбудовані в силікагель шляхом дифузії і сушіння, є (а) утворюють електричний ланцюг, що склатакож бажаними механізмами для доставки іонів дається з джерела струму, і першого провідника, металу відповідно до даного винаходу. електрично з'єднаного з зазначеним джерелом В іншому переважному варіанті здійснення виструму, і другого провідника, електрично з'єднанонаходу комбінації вищезгаданих частинок, органічго з зазначеним джерелом струму, при цьому зані і/або неорганічні структури можуть бути викоризначений перший провідник розташований на відсстані для позитивного впливу на здоров'я і тані від зазначеного другого провідника, і де, самопочуття людей і тварин. Специфічно, частки щонайменше, один із провідників зроблений з металу, відповідно до винаходу, можуть бути виелементарного срібла, або альтернативно, цинку, користані окремо, як описано вище. Крім того, часміді, мідних сплавів, титана, платини і їх сплавів тки металу можуть комбінуватися з, наприклад, або сумішей; органічними речовинами, що обговорювались ви(b) замикають ланцюг шляхом розміщення ще (наприклад, AgEDTA). Крім того, іони металу, першого провідника і другого провідника в сполуці відповідно до даного винаходу, можуть комбінуваз пневмоопором; тися з будь-якими неорганічними речовинами (на(с) керують джерелом струму так, щоб забезприклад, глинами або цеолітами). Крім того, іони печити перемінний струм одночасно першому металу даного винаходу можуть комбінуватися як провіднику і другому провіднику так, щоб напруга з органічними молекулами (наприклад, AgEDTA), підвищувалася і знижувалася в першому і другому так і з неорганічними молекулами (наприклад, глипровіднику в перемінній послідовній сполуці для нами або цеолітами). Ця комбінація системи достого, щоб викликати виділення частинок срібла тавки металів срібла або іона срібла може бути (або іншого металу) з першого електрода і надхосконструйована таким чином, щоб, наприклад, дження в пневмоопір і розташування їх у суспензії внутрішнє споживання будь-якої вищезгаданої з зазначеним пневмоопором; і системи доставки срібла може призводити до того, (d) селективно настроюють електроди шляхом що вони доставляються до різних частин, наприперенесення їх у напрямку до пневмоопору для клад, організму. Зокрема, наприклад, в організмах компенсації зниження довжини електрода, що вилюдей, певне срібло може абсорбуватися в роті, кликана поступовим виділенням частинок срібла з через кишку, також як і через товстий і/або тонкий них для запобігання дугового пробою між електрокишечник і т.і. Крім того, у залежності від, напридами і зазначеним пневмоопором і для підтримки клад, кількості глин(и) або цеоліту(ів) відносно бажаної щільності струму на кінці електродів. 21 91209 22 Кожний водяний резервуар або бак, що вирочасу (див, наприклад, Фігуру 31). Відповідно, елекбляють композиції срібло/вода, мають енергозатроди, що витрачаються, розташовують типово безпечення, що складається з восьми трансфорнижче для більш близького контакту з поверхнею маторів (придатним трансформатором для води, наприклад, можливо тільки 1-2 мм вище позастосування в даному винаході є Franceformer, верхні. Простіше кажучи, конуси Тейлора будуть Part No. 48765), розрахований на 120 VAC (напрупотім набагато менше через меншу різницю в елега перемінного струму) на вході і на 10,500 VAC ктропровідності між електродами і водою (напримаксимально на виході при 30 міліамперах. Кожен клад, є присутнім менше поле). Загалом, електротрансформатор був переважно оснащений 45ди, що витрачаються, і/або рівень води повинні мікрофарадним конденсатором (такий як Aerovox, бути набудовані в такий спосіб відповідно протяPart No. M24P3745MP2), зв'язаним паралельно гом усього виробничого процесу для підтримки напроти вхідного кінця трансформатора. початкової геометрії. Незважаючи на те, що конуКомбінація трансформатора і конденсатора си Тейлора стають менше протягом цього процесу може виявитися сприятливою в деяких випадках і (таким чином, представляючи, наприклад, частки дуже бажаною в інших. Зокрема, трансформатор металу, що виходять у розчин), малі конуси Тейсприяє приходу напруги і гармонійних хвиль струлора будуть усе-таки бути присутнім наприкінці му АС сили у фазі один з одним. Ступінь, у якій процесу. Воду в кожнім баці перемащують з повітнапруга і струми знаходяться у фазі один з одним, рям протягом усього процесу для підтримки гомовідома як фактор сили. Чим ближче фактор сили генності. до 1,0, тим ближче фази вирівнюються між вольКоли досягають бажану або цільову конценттами й амперами і тим більше сила подається на рацію ppm срібла в розчині срібло/вода, продукт електроди (наприклад, сила типово визначається може бути потім продавлений, якщо бажано або за допомогою множення вольтів на ампери). необхідно, через фільтр 1 мікрон в один з декільКожен бак фільтрують через прозоре покриткох дуже великих, наприклад, місткістю 2,300тя, зроблене з, наприклад, полімеру, що підхо6,500 галонів, тимчасових баків, і аналізується дить, і сконструйованого таким чином, щоб вийшперед бутилюванням і транспортуванням. Аналіз ло вісім електродних наборів. Кожен електродний проводять шляхом процесу розщеплення з застонабір включає фіксований електрод, зроблений з, суванням тепла й азотної кислоти, і аналіз провонаприклад, срібної пластини товщиною 18 калібру, дять із застосуванням Perkin-Elmer Analyst 300 що стосується двох витрачуваних електродів, Атомного Абсорбційного Спектрофотометра. зроблених з, наприклад, 18 калібру срібного дроту Отримана композиція срібло/вода потім може бути (.9999 чистоти). Електроди переважно згинають комбінована з іншими інгредієнтами для утворення навпіл на середині, а кінці перекручують між собою гідрогелю, листового матеріалу, або може бути в подвійну спіраль для одержання бажаної комбібутильованою сама по собі, або може бути комбінації напруги і щільності сили. Кожний електроднованою (наприклад, або як рідина, або висушена ний набір живить трансформатор. і додана як порошок) з іншими допоміжними речоТак як кожен бак фільтрують для виробництва, винами, як описано в даному описі. електроди настроюють так, щоб фіксовані електПосилаючись на Фігуру 31, що показує дійсне роди були в гарному контакті з водою (наприклад, убування напруги в часі і дані концентрації срібла щонайменше, 1/3-1/2 пластин були занурені), і як функція часу, відповідно до процесу формуванелектроди, що витрачаються, були над водяною ня заявлених композицій срібло/вода. Дійсно з поверхнею. Коли подається енергозабезпечення, плином процесу напруга падає, а концентрація вода піднімається і формує конічну структуру насрібла росте. Також відзначалося відповідне знивколо кожного електрода, що витрачається. Ця ження розміру конусів Тейлора на кожному електконічна структура відома в літературі як "конус роді, що витрачається. Дані концентрації срібла на Тейлора". Спочатку вода є дуже чистою і тому цьому графіку не повинні братися як кількісні, тільволодіє високим електричним опором. Відповідно, ки як репрезентативні, через варіант добору вибірпри використанні, наприклад, постійного струму кових зразків і змішування (наприклад, суміш сріб10,000 вольт трансформатора, прикладена напруло/вода може бути не цілком гомогенною в га через електроди може бути спочатку дуже високожному з моментів вибіркового добору зразків). кою, наприклад, близько 6500-8500 вольт, і електПосилаючись на Фігуру 32, що показує два роди, що витрачаються, можуть бути 5-10 мм над графіки концентрацій срібла для кожного періоду, водяною поверхнею, тим самим досягається батакож як і деякі точки на графіку додаткової концежана напруга і бажана щільність струму на електнтрації. Сіра лінія з квадратом позначає поточну родах, що витрачаються. Це призводить до відноконцентрацію срібла (як визначено за допомогою сно великого конуса Тейлора через низьку атомної абсорбційної спектроскопії), заснована на електропровідність води щодо високої електропзразку 60 мл, отриманій розкапуванням з піпетки з ровідності електрода (наприклад, утворене велике приблизно середньої глибини бака і біля половини поле). Продукт наночастинок срібла, сформований відстані між центром і стінкою бака. Чорна лінія з як частинки срібла, переносить з електродів, що зірочками позначає поточну концентрацію срібла витрачаються, на границі розподілу повітря-водаяк грубо округлений за допомогою попередньо срібний електрод. Так вода поглинає все більше і відкаліброваного приладу, що вимірює електричбільше частинок срібла, електричний опір суміші ний опір вищезгаданої аліквоти 60 мл рідини. У вода/срібло убуває. При постійному струмі або термінах опорів даних метода вода спочатку (а струмі обмеженого порядку прикладена напруга саме, час=нуль) мала електричний опір близько буде потім убувати або знижуватися як функція 175 кілоом/сантиметр. На відміну від цього, на 23 91209 24 відмітці 31-годинного періоду суміш вода/срібло матеріалу (в основному, пляшка) із щільно пригнамала опір близько 62,7 кілоом/сантиметр. ною кришкою. Розмір 30-100 мл є переважним. Відразу нижче експериментальних точок кон2. мікропіпеткою або дозатором, додають 0,1 центрація/опір на відмітці 32-години окрема експемл азотної кислоти, реагент розташовується на риментальна точка представлена як "квадрат". Ця композиції срібла в пляшці. експериментальна точка визначає концентрацію 3. Щільно прикрутивши пробку, нагрівають срібла, визначену атомною абсорбційною спектрокомпозицію срібла до, щонайменше, близько 80°С, скопією після вимикання високої напруги, але що і переважно близько 90°С-100°С з невеликим збодозволяє діяти барботеру/мішалці протягом інших втуванням протягом часу, який достатній для роз20 годин для гомогенізації суміші. чинення срібла - розчинення відбувається практиОдин висновок, який можна зробити з Фігури чно моментально. 32, це те, що срібло спочатку може не бути гомо4. Дозволяють отриманій суміші охолонути при генно розподіленим по баку, поки формується срікімнатній температурі, поки кришка залишається бло, незважаючи на присутність барботена місці. Ретельно трясуть пляшку. Ця процедура ра/мішалки, що діє протягом усього періоду розщеплення також розчиняє будь-який оксид сріпроцесу. Скоріше може бути визначений час запізбла поверхневого шару, що може бути присутнім нювання після завершення додавань срібла в чан на частках срібла. до того, як барботер/мішалка може "надолужити 5. Використовують атомну абсорбційну спектвтрачене", і гомогенно розподілити срібло у воді. роскопію, ICP/AES, або еквівалентну засобу для Фігура 33 - це інший графік поточної напруги і аналізу вмісту срібла в суміші срібла. Переважно, концентрації срібла як функція часу, протягом якобудуть використані свіжоприготовлений стандарт го відбувається одержання срібло/вода. Цей граабо стандарти, переважно приготовлених відповіфік більш того показує поточний "фактор сили" дно до інструкцій виробника устаткування, із притрансформатора живлення. Таким чином, фактор йнятним розведенням при необхідності. сили починається при приблизно 0,8, зростає до 6. При викладі результатів необхідно прийняти максимуму близько 0,97 приблизно 6 годин, і знидо уваги, що всі розведення протягом готування, жується до низького значення близько 0,6 через включаючи 1% розведення, викликалося додаванприблизно 30 годин. Крім того, дані напруга/час ням азотної кислоти. математично відповідали рівнянню у=Концентрація срібла композицій срібло/вода 2.1333Ln(x)+8.7057, де у відповідає напрузі і x відданого винаходу, що відповідає даним на Фігурах повідає часу, ppm срібла у воді представлено тер31, 32, 33 і т.д., визначалася з використанням міном "квадрати" і складає близько 1 ppm і досягає Perkin Elmer AAnalyst 300 атомного абсорбційного максимуму при приблизно (наприклад, через те, (АА) спектрометра. Зразки заявлених композицій що вода не була цілком чистою після фільтрації) срібло/вода були розщеплені відповідно до проце11 ppm через близько 30 годин. дури, описаної вище. Фізична характеристика Принципова установка Аналіз вмісту срібла в композиціях срібла відСистема Perkin Elmer AAnalyst 300 складаєтьповідно до винаходу може бути проведений за ся з високо ефективної системи пальника з розпидопомогою (ацетилен) полум'яної атомної абсорблювачем Universal GemTip і атомним абсорбційційної спектроскопії (FAAS), індуктивно сполученої ним спектрометром. Система пальника забезпечує плазми (ІСР), атомної емісійної спектроскопії термічну енергію, необхідну для дисоціації хіміч(AES) або іншої методики, відомої спеціалісту в них речовин, забезпечуючи вільні атоми, що анаданій області як чуттєвої до срібла у відповідному лізуються, для того, щоб відбулася атомна абсордіапазоні концентрації. Якщо частки срібла компобція. Спектрометр вимірює кількість легко зиції малі й уніфіковані в розмірі (наприклад, 0,01 абсорбованих при специфічній довжині хвилі з мікрометрів або менше), прийнятний точний аналіз застосуванням порожньої катодної лампи як перможе бути отриманий за допомогою протікання винного джерела світла, монохроматора і детекколоїду безпосередньо через атомну абсорбцію тора. Дугова лампа дейтерію коректує зворотну або ICP/AES. Це через те, що готування зразка абсорбцію, що викликана неатомними видами в для атомної абсорбційної спектроскопії іонізує атомній хмарі. практично все срібло, роблячи можливим своєчасАналіз фізичної/хімічної форми композицій не визначення. срібла і срібло/вода Якщо частки композицій є більш великими, ніж А. Ведення 0,2 мікрометрів, то переважною є процедура розЗразок композиції, що номінально містить 22 щеплення. Процедура розщеплення не є, безумоppm срібла у воді, був проаналізований за допомовно, ідеальною для композицій срібла, що можуть гою час-пролітної мас-спектроскопії вторинних бути зроблені або зберігатися в контакті з галогеіонів (TOF-SIMS) для визначення форми срібла в нідами або іншими видами аніонів, що можуть реакомпозиції. Висновком виявилося те, що основна гувати з остаточно розділеним сріблом, або комбічастина срібла існує як срібло (0) (тобто, металеве нуватися з білком або іншим желеутворюючим срібло) і існує поверхневе покриття, що існує на матеріалом. Варіант здійснення процедури розщесередній композиції у вигляді, наприклад, оксиду плення показаний нижче: срібла (II) (Ag). Як згадувалося вище оксид срібла 1. Беруть 10 мл аліквоти повністю перемішаної (II) є звичайно стехіометричною комбінацією срібперемішаної або збовтаної композиції срібла, яку ла (І) і срібла (III). треба проаналізувати, і поміщають її в чисту поліВ. Проведення експерименту карбонатну пляшку або іншу ємність із придатного 25 91209 26 Декілька крапель 22 ppm заявленої композиції Ці властивості визначаються умовами виробництсрібла випарювали до висушування на силіконова, як описано вище. вому субстраті при кімнатній температурі. Осад Цифровий аналіз композиції показав, що існує аналізували за допомогою TOF-SIMS (чассередній діаметр частинок 0,0106 мікрометрів з пролітна мас-спектроскопія вторинних іонів), і поздіапазоном від 0,005 мікрометрів до 0,0851 мікроначали його як зразок. Стандартний матеріал окметрів. Проте, аналіз розподілу розміру показує, сиду срібла (II) (Ag) був проаналізований поміщенщо більш ніж 95% частинок мають розмір близько ням декількох частинок стандартного порошку, 0,005 мікрометрів - 0,015 мікрометрів у діаметрі. отриманого від виробника, на силіконовий субПодальший аналіз частинок був проведений страт, і позначався як стандарт. за допомогою SEM, EDS (EDAX) і ТЕМ. Зокрема, Час-пролітна мас-спектроскопія вторинних іокомпозиції срібло/вода були висушені і поміщені нів (TOF-SIMS) заснована на принципі бомбардуна ЕМ решітку і досліджують у SEM (а саме, Скавання твердого зразка пульсаційним, остаточно нуючий Електронний Мікроскоп) і двома різними сфокусованим променем первинних іонів, і потім ТЕМ (а саме, Трансмісійні Електронні Мікроскопи). аналізуванням вторинних іонів, отриманих з повеЦі аналітичні засоби дозволяють визначити розпорхні зразка шляхом час-пролітної масділи розміру частинок у діапазоні 10-30 нм. Проте, спектроскопії. Ця аналітична методика є поверходеяка оцінка розміру частинок була необхідна в во чуттєвою, що одержує свою інформацію від деяких отриманих фотомікрографіях, тому що часшару, що віддалений на приблизно 20-40 А (один тки мали тенденцію збиратися в групи або утвоАнгстрем=1x10-4 мікрометрів) нижче поверхні. рювати агломерати при висушуванні. Розмір виTOF-SIMS методика звичайно застосовується як сушених агломератів був між 50-100 нм. Фігури 1-6 каротажа для визначення композиції невідомих показують різні ТЕМ фотомікрографії частинок зразків. Кількісне визначення можливо, якщо в срібла, висушених з композицій срібло/вода відпонаявності є прийнятні мікроаналітичні стандарти відно до даного винаходу. Фігури 7а-7d показують для калібрування.Цей аналіз був проведений вирізні ТЕМ фотомікрографії частинок срібла, отрикористанням стандартних умов мас-спектрометра маних відповідно до даного винаходу, при цьому ці з високою розрішуючою властивістю. фотомікрографії були отримані різною методикою. С. Результати Зокрема, композиції срібло/вода даного винаходу Негативна іонна маса була отримана для були поміщені на С-плівку і проаналізовані за доAg(II)O стандартного матеріалу і зразка продукту, помогою кріо-ТЕМ (а саме, ТЕМ, відмінний від того відповідно. Mac-спектральна ділянка для обох ТЕМ, що застосовувався для одержання Фігур 1спектрів показувала присутність більш ніж одного 6), при температурі біля -100°С. Композиція срібвиду оксиду срібла, що більш ймовірно є присутнім ло/вода за даним винаходом була, таким чином, як, щонайменше, часткове покриття на частках практично моментально заморожена. Крио-ТЕМ срібла. Ці дані свідчать про те, що срібло (II) - це використовували при біля -100°С і при рівні сили середній окислений стан срібла, що знаходиться приблизно 100 кв, і отримані фотомікрографії пона поверхні частинок зразка. Сигнали оксиду срібказані у Фігурах 7а, 7b, і 7с. Ці Фігури 7а-7с точно ла (наприклад, Ag) виявляють істотно більш висопоказують, що середній розмір частинок є менше, ку інтенсивність відносно зразка, у порівнянні зі ніж 20 нанометрів. Крім того, Фігура 7d показує зразком продукту, що відбувається через те, імовіТЕМ аналіз у модифікації "SAD". Загалом, ці ТЕМ рно, що металеве срібло домінує в зразку. Передфотомікрографії (Фігури 7а-7с) показують, що макбачали, що так як середній розмір частинки у зразсимальні розміри частинок не згрупованих частику зменшується, рівновага срібла до оксиду срібла нок срібла складають 15 нанометрів або менше, і буде також зменшуватися, чим більше оксиду срідеякі більш маленькі частки в діапазоні 3,5-5 набла буде знаходитись. нометрів. Дифракційний аналіз, що показаний на Аналіз розміру/морфології/композиції Фігурі 7d, визначає, що частинки являють собою Імовірно, незвичайна ефективність препаратів переважно металеве срібло, багаторазово згрупосрібло/вода, описана в описі, обумовлена відновані по двоє, і є практично чистими. Існує припушенням між поверхневими властивостящення на цих фотомікрографіях можливості напими/внутрішніми властивостями (наприклад, оклювання або покриття. Фігура 7е показує EDAX сид/метал) частинок і/або розподілу розміру спектр (а саме, Energy Dispersion Spectrum або наночастинок срібла і/або морфологією наночас"EDS") частинок срібла, узятих з композиції срібтинок срібла. Чим менше середній розмір частки, ло/вода відповідно до даного винаходу. Фігура 7е тим більше площа поверхні і більше внесок частпоказує повну відсутність металевих забруднююкової хімії поверхні. Проте, якщо частки занадто чих домішок (наприклад, Au, Pt і т.д.) у сріблі. Мідь малі, може мати місце втрата стабільності і/або присутня у формі, що вимагає устаткування мікроінших взаємодій, що може мати негативну дію на скопа. Спостерігали значну кількість присутнього продукт. Композиції срібло/вода даного винаходу є кисню, який може бути присутнім у міді, також як і чудовими, тому що вони стабільні в істотно чистій може бути присутнім як покриття на, принаймні, воді без поверхнево-активних речовин і т.і. (напричастині частинок срібла. клад, багато типів "колоїдного" срібла з рівня техФігура 8 показує картину дифракції електронів, ніки мають потребу в білках для підтримки частиузятих з частинок срібла за даним винаходом. Ці нок срібла в суспензії). Також, композиції дані говорять про присутність, щонайменше, односрібло/вода є, по суті, безбарвними, тоді як інші го виду оксиду срібла. Ці дані є предметом деякої препарати колоїдного срібла (зокрема, з великими інтерпретації, так як Фігура 9 показує, наприклад, розмірами частинок) звичайно виявляють кольори. можливе ушкодження електронним променем, що 27 91209 28 має місце на частках срібла протягом процесу срібла (Ag2O) також спостерігався при ступені збору даних. Це ушкодження електронним промеприблизно 38. Крім того, сильний пік оксиду срібла нем не є очевидним, коли проводять дослідження (Ag) спостерігався при ступені близько 37, у комбіколоїдного срібла, отриманого іншими виробниканації з відносно сильним піком карбонату срібла ми (що обговорюються нижче в описі). Таким чи(Ag2CO3). Також відзначено, що пік оксиду срібла ном, збір даних з використанням SEM і ТЕМ мето(Ag) відповідав однієй з тетрагональних фаз оксидики є досить важким, тому що енергія ду срібла. Стає зрозумілим з розгляду отриманих електронних променів здатна ушкоджувати (і тим даних рентгенівської дифракції і порівняння їх з самим змінювати) будь-які поверхневі композиції, файлами існуючої бази даних, що одна або більш що цікавлять. Таким чином, для одержання й анаоксидних фаз срібла присутня в заявленій комполізу цих результатів була проявлена велика обезиції срібло/вода відповідно до даного винаходу. режність. Можливим є те, що комбінація оксидів присутня Фігура 42 показує результати також іншого завдяки новим методикам обробки відповідно до способу зняття характеристик. У даному випадку, даного винаходу. Відзначено, що ніякі зразки рентметодики порошкової рентгенівської дифракції генівської дифракції не були доступні для порівбули використані в спробі подальшої демонстрації няння з Ag4O4 на відміну від зразків рентгенівської наявності оксидних фаз. Зокрема, Фігура 42 покадифракції відповідно до даного винаходу. зує чотири зразки рентгенівської дифракції, узяті з Проте, Ag4O4 існує комерційно. У цьому відчотирьох різних локалізацій на висушеній компоношенні, зразок Ag4O4 був комерційно отриманий і зиції 200 ppm срібло/вода, що виконана відповідно TGA і DTA аналізи такого порошку представлений. до даного винаходу. Крім того, накладені на чотиЗокрема, Фігура 43 відноситься до TGA аналізу і ри зразки рентгенівської дифракції являють собою DTA аналізу, відповідно. Стає зрозуміло завдяки чотири зразки контрольної дифракції видів, відмінкривій DTA на Фігурі 43, що ендотерм для Ag4O4 них від чистого металевого срібла. Зокрема, коміснує близько 181°С. Даний ендотерм також віднопозиція 32 ppm срібло/вода, що виконана відповіситься до втрат маси, показаних на кривій TGA на дно до даного винаходу, була концентрована до Фігурі 43. Ці експериментальні виміри відносяться близько 200 ppm відповідно до стандарту зворотдо Ag4O4, що розкладається до Ag2O. Другий дуже ньоосмотичного способу фільтрації з водою. Зоксильний ендотерм показаний близько 403°С, тарема, заявлена композиція срібло/вода була прокож як і друга відповідна утрата ваги. Дані дві експущена через зворотньоосмотичну систему периментальні точки відповідають Ag2O, що розкфільтрації, при цьому "відпрацьована" вода з зволадається до металу Ag. ротньоосмотичної системи фільтрації містить знаФігура 10 показує SEM фотомікрографію новочно більше концентрованих компонентів срібла. го срібного електрода перед використанням у проОдин раз одержали 200 ppm розчин, цей розчин цесі відповідно до даного винаходу. EDS елеменвисушили в середовищі рідкого азоту таким чином, тарний аналіз був проведений на частинах щоб одержати порошок, що може бути підданим електрода, позначених як 1, 2 і 3. Ці три окремі рентгенівської дифракції. Зокрема, суміш срібаналізи показані на Фігурах 11, 12 і 13, відповідно. ло/вода помістили в ємність, ємність накрили плаЦі аналізи показали присутність суттєво чистого стиковою плівкою, після чого ввели азот в один срібла. кінець зборки ємність/пластикова плівка; і азот Фігура 14 показує SEM фотомікрографію завипустили з протилежного кінця зборки ємкінчення срібного електрода, що використовувавність/пластикова плівка. Температура в установці ся, після того, як він використовувався в процесі не перевищує приблизно 75-80°С для підтримки відповідно до даного винаходу. EDS елементарцілісності всіх компонентів у суміші срібло/вода. ний аналіз був проведений на частинах електрода, Достатня кількість висушеного порошку (а саме, позначених як 1 і 2. Ці два окремих аналізи покавиготовленого з 200 ppm розчину) було потім досзані на Фігурах 15 і 16, відповідно. Фігура 17 покатупною для аналізу рентгенівської дифракції. зує SEM фотомікрографію закінчення електрода, Отримані зразки рентгенівської дифракції чітко що використовувався, в більшому збільшенні показують наявність, щонайменше, чотирьох (приблизно 3500Х). Частини 4 і 5 були також досокремих видів. У цьому відношенні, мабуть, що ліджені за допомогою EDS елементарного аналізу, безліч піків карбонату срібла спостерігалися при і також знайшли, по суті, чисте срібло. ступені приблизно 18-22. Ці піки були найбільш Порівняння частинок срібла з комерційно досймовірними під час процедури. У цьому відношентупних типів колоїдного срібла ні, СО2 найбільше ймовірно був присутній у повітрі Для того, що зрозуміти відмінності в прояві навіть тоді, коли здійснювалися спроби утворення (наприклад, біологічної ефективності) композиції середовища азоту над 200 ppm розчином при просрібло/вода відповідно до даного винаходу, при цедурі сушіння. Крім того, ряд піків спостерігався порівнянні з відомими типами колоїдного срібла, при ступені приблизно 33. Проте, кожний з цих досліджували відмінності у фізичних властивостях. піків може бути віднесений до оксиду срібла (Ag), Фігури 18а і 18b - це ТЕМ фотомікрографії частикарбонату срібла (Ag2CO3), і/або оксиду одноваленок срібла, що відповідають частинкам срібла в нтного срібла (Ag2O). Таким чином, який вид предпершому типі колоїдного срібла, що отримане з ставлений, не цілком зрозуміло. Крім того, сильний General Nutrition Center Головного Центра Харчупік металу срібла спостерігався при ступені прибвання (General Nutrition Center) у 2004 і відомого в лизно 38. Цей сильний пік можна спостерігати в широкому продажі як GNC Дієтична Добавка Рідкожнім зразку рентгенівської дифракції. Відзначекого Колоїдного Срібла (25 ppm) ("GNC"). Фігури но, проте, що малий пік оксиду одновалентного 19а і 19b - це ТЕМ фотомікрографії частинок сріб 29 91209 30 ла, що відповідають другому типу колоїдного срібПоказано чіткі розходження між різними зразками. ла, відомому в широкому продажі як "Silverado". Наприклад, первинний режим розтягування (наФігури 20а і 20b - це ТЕМ фотомікрографії частиприклад, хвильові числа близько 3400-3500 1/см) у нок срібла, що відповідають третій групі колоїдноцих окремих розчинах вода/на водяній основі пого срібла, відомого в широкому продажі як Вітаказує значні відмінності. Крім того, коливальномінні, отримані з Біоорганічного Світу обертальні рухи нижче 500 1/см також показують Удосконалені Колоїдні Мінерали (3 ppm) чіткі розходження між зразками. Деякі розходжен(Bioorganic). Фігура 21 - це порівняння, що перекня можуть також бути помітними в режимах згиривається ТЕМ фотомікрографій частинок срібла нання близько 1600 1/см. Не вдаючись ні в яку від двох заявлених композицій срібло/вода (познадокладну теорію або пояснення, здається, що різні чених як "ASAP 20" і "ASAP 10") і від трьох відомих поведінки композицій срібло/вода за даним винау широкому продажі типів колоїдного срібла, відоходом можуть, наприклад, впливати або, щонаймих як "GNC", "Silverado" і "Bioorganic", описаних менше, допомагати пояснити, ефективність таких вище. Чіткі відмінності в розмірах частинок і форкомпозицій щодо інших досліджуваних зразків. мах отримані з цих фотомікрографій, таким чином, Секундна серія даних рамановської спектросіснують фізичні, структурні і потенційно хімічні відкопії отримана від окремої спектрографічної сисмінності між різними типами колоїдного срібла, що теми. Оскільки числа, що отримані від двох серій можуть допомогти у деякій мірі пояснити відмінноданих, різні (що переконливо підказує, що дані сті в біологічній ефективності між різними продукрамановської спектроскопії для води є функцією тами взагалі подібних хімічно. аналітичного пристрою, що застосовується), дані в Характеристика спектроскопії цій серії даних також показують значні розходженРАМАНІВСBКА СПЕКТРОСКОПІЯ ня між композиціями срібло/вода за даним винаНаступний аналіз сумішей срібло/вода виконуходом в порівнянні з іншими типами колоїдного вали за допомогою рамановської спектроскопії. срібла або іншими типами води. У цій серії вимірів Виконали ряд аналітичних повторювань на трьох рамановської спектроскопії застосовували рамарізних спектрометрах рамановського розсіювання. новський мікроскоп, що відбиває. Спектр одержаПричиною для застосування рамановської і резоли за допомогою лінзи Olympus 20 x (NA=0,4). нансної рамановської спектроскопії була думка CCD детектор центрували при чотирьох різних про те, що різні режими (і/або амплітуди) вібрації хвильових числах, а саме, 1600, 2500, 3400 і 4400 відзначаються у різних типах колоїдного срібла в 1/см. Лазерним джерелом для рамановської спекпорівнянні з композиціями срібло/вода за даним троскопії була хвиля довжиною 514,5 нм із близько винаходом, а також у порівнянні з "чистою" або 11,5 мв. Додаткову інформацію щодо спектра модеіонізованою водою. Крім того, ці різні режими жна знайти на кожній з Фігур 23а, 23b і 23с. Міченвібрації, що спостерігаються, у молекулах води ня зразків на цих Фігурах відповідає тексту вище. можуть допомогти краще визначити колоїдні сисОбидві серії даних рамановської спектроскопії петеми і пояснити біологічну ефективність різних реконливо підказують, що окремий молекулярний продуктів, що розрізняються, на основі срібла. рух існує в цих різних зразках, що можуть вносити У першій серії вимірів рамановської спектроссвій внесок у (або, щонайменше, свідчити про) копії застосовували конфокальний рамановський біологічну ефективність композицій срібло/вода за мікроскоп від Vitech (Ульм, Німеччина). Номер моданим винаходом. делі - CRM200. Спектр отримали за допомогою Третю серію рамановських даних одержали за імерсійної лінзи Nikon 60 x (ΝΑ=1) із тривалістю допомогою третього складного лазеру випромінюінтегрування на спектр 15 секунд (наприклад, три ючого конфокального рамановського мікроспектокремих 5 секундних експозиції). CCD центрували рографа Renishaw. Цю систему зібрали, щоб пропри хвильових числах приблизно 1,799. Краплю вести виміри, як над зразком, так і при зануренні в розчину помістили в невелику лунку на чашці Петнього. Установку розробили для дослідження знарі й опустили на неї імерсійну лінзу. Джерелом чення зразка, більшого в 100 разів - 1000 разів, ніж лазера для рамановської спектроскопії була хвиля описаний у першій серії вимірів. Мікроспектрогдовжиною 532 нм із близько 10 мв. Конфокальну раф, що відбиває, з мікроскопом Leica DL DM систему визначення застосовували з конфокальоснастили або водно-імерсійними 20 x (ΝΑ=0,5), ним значенням, що складає близько 0,3x0,3x0,75 або сухими лінзами 5 x (ΝΑ=.12). Задній отвір кожмкм (приблизно 7x10 Е-8 піколітрів). ної лінзи був розміром рівним або перевищуючим Фігури 22а і 22b представляють графічні рерозширений діаметр лазерного променя. Застосозультати даних, отриманих від 7 зразків. Два з вували дві лазерних частоти багатолінійного призразків були однаковими, навіть при тому, що позстрою 50 мв аргонового лазера при ½ потужності начено по-різному (10PR і 10PSU) і відповідали для 514,5 нм і 20 мв HeNe лазера при 633 нм. Рераніше згаданому "ASAP 10" (наприклад, 10 ppm шітки з високим розрішенням вставили в оптичну срібла композиції, що заявляється, срібло/вода). доріжку монохрометра, що дозволило провести "HPLC" відповідає високочистій воді (ультрачистий безупинний аналіз від 50 до 4000 хвильових чисел ступінь HPLC), отриманої від Alfa Aesar. "Dl" відпо(1/см). Застосовували тривалість інтегрування від відає деіонізованій воді. "GNC" відповідає GNC 10 до 20 секунд. Рідину зразку помістили в 50 мл рідкій біологічно активній добавці колоїдного срібсклянку під лінзою. Обидва лазери використовула (25 ppm). "AGX-32" відповідає 32 ppm композивали для дослідження резонансних смуг, у той час ції, що заявляється, срібло/вода. "VW" Означає як раніше згаданий лазер, насамперед, викорисвітамінні висоКУОфективні біоорганічні колоїдні товували для одержання рамановського спектра. мінерали (3 ppm) (раніше названа як біоорганіка). Розмір зразка складав близько 25 мл. Вимірюван 31 91209 32 ня із сухою лінзою 5 х виконали з об'єктивним поИ вольфрамовий "галоген", і водневі "D2" джезиціонуванням близько 5 мм вище рідини, щоб рела енергії застосовували як первинні джерела детально досліджувати обсяг близько 7 мм нижче енергії для MSV350. Оптичний шлях спектрометра водяного меніска. Імерсіонні вимірювання виконуустановили так, щоб дозволити потоку енергії провали з 20 x імерсионною лінзою, зануреною на ходити крізь зразки з фокусом, спрямованим до близько 4 мм у зразок, що дозволяє дослідження центра кювет зі зразком. Готування зразка обметого ж самого обсягу простору. Області спостережувалося заповненням і накриванням кювет і ження CCD детектора були індивідуально відрегувстановленням їх на тримачі кювет у цілком закрильовані для кожної лінзи, щоб максимізувати інтетій камері для зразків. Дані одержали і виразили як нсивність сигналу і співвідношення сигнал/шум. одиниці спектральної поглинаючої здатності (за Типовий спектр композиції срібло/вода за даним законом Беєра-Ламберта) стосовно довжини хвилі винаходом показаний на Фігурі 24а. Фігура 24b і частоти. Первинне розходження між зразками, показує рамановський спектр трьох різних розчищо відповідають двом спектрам, показаним на нів метал/вода, виготовлених за даним винахокожній з Фігур 48а і 48b, було в концентрації срібла дом. Графік 1 відповідає 13 ppm розчину срібв кожнім зі зразків. Особливо, більш високий грало/вода; Графік 2 відповідає 10 ppm розчину фік амплітуди на кожній з Фігур 48а і 48b відповіцинк/вода; а Графік 3 відповідає 11 ppm розчину дає 32 ppm розчину срібло/вода; а більш низький мідь/вода. графік амплітуди відповідає 10 ppm розчину срібОскільки, числа, отримані від трьох серій дало/вода. Довжина хвилі або положення частоти них, якимось чином відрізняються (що переконлипіків (наприклад, розташування піків і западин) во підказує, що дані рамановської спектроскопії досить подібні. для води є функцією аналітичного пристрою, що Як обговорювалося вище, срібло (наприклад, застосовується), дані в цих серіях даних показують іони срібла, металеве срібло, Ag+ і т.і.) можна конпомітні розходження між композиціями срібло/вода трольовано приєднати або зафіксувати, наприза даним винаходом в порівнянні з іншими типами клад, між і/або на шарах глини і/або в клітинах колоїдного або срібла іншими типами води. Усі цеолітів. Спосіб розміщення, наприклад, іонів срісерії даних рамановської спектроскопії переконлибла на глинах або у глинах, слюді або цеолітах, во припускають, що окремий молекулярний рух і повинен забезпечити види іонів срібла в стані роззв'язки присутні в цих окремих зразках, що можуть чину і ввести зазначені види в композицію глини вносити свій внесок у (або, щонайменше, свідчити або цеоліта або в суміш. Обмін, наприклад, іона про) ефективність композицій срібло/вода за дасрібла на інший позитивно заряджений іон, іноді ним винаходом. Крім того, розходження в раманазивають "ВЕС" або "СЕС" (абревіатурні назви, новських зразках для трьох різних розчинів мещо означають ємність катіонного обміну "систетав/вода, показані на Фігурі 24b, також ми"). У цьому відношенні, більшість каолінітових представлена можлива ефективність, що розрізматеріалів, як відомо, мають ємності катіонного няється. обміну в діапазоні 2-5 (наприклад, 2-5 мг-екв./100 UV-Vis Спектроскопія г). Монторилонітові глини, наприклад, мають ємНаступний аналіз сумішей срібло/вода виконуності катіонного обміну близько 100 мг-екв./100 р. вали за допомогою UV-Vis спектроскопії. UV-Vis Оскільки, цеоліти можуть мати ємності катіонного спектроскопія використовується на ряді з рамаобміну кілька сотень мг-екв./100 р. Наприклад, новською спектроскопією для вивчення додаткоємність катіонного обміну цеоліту, відомого як вих режимів, що розрізняються, і/або амплітуд "Linde 4A цеоліт", складає 400-500 мг-екв./100 р. вібрації в різних частинах спектра. Для збору даЗагалом, чим вище значення ВЕС або СЕС, тим них використовували окремий UV-Vis спектрометр. більше здатність матеріалу вміщати катіони. У цьому відношенні, спектр поглинання енергії Провели експериментальні процедури для виодержали за допомогою UV-Vis мікрозначення здатності каолінітів або цеолітів служити спектрофотометрії. Цю інформацію одержали за системами збереження/доставки срібла (або іншодопомогою двопроменевих монохрометровых сисго катіона(ів) металу). Зокрема, наступні етапи тем, що аналізують, здатних аналізувати довгохзастосовували для готування і, отже, аналізу зразвильовий діапазон від приблизно 190 нм до прибків срібло-глина, а також зразків срібло-цеоліт. лизно 100 нм. UV-Vis спектрометром, що У загальних словах, типові каолінітові і цеолізастосовується для збору спектра поглинання, був тові Linde 4A матеріали спочатку промили три рази Jasco MSV350. Апарат установили для виміру ріддеіонізованою водою для видалення можливої ких зразків з низькою концентрацією за допомогою домішки хлору, що могла б приводити деякі старкювети з плавленого кварцу 10 мм x 10 мм. Дані тові матеріали срібла (наприклад, іони срібла) до одержали по вищезгаданому діапазону довжини осадження (або небажано реагувати з ними), до хвилі за допомогою і фото електронного помножутого як стартові матеріали срібла могли б вишикувача (РМТ), і фото діодного детектора з наступниватися в/на каолінітові і/або цеолітові структури. ми робочими параметрами: збір смуги пропущення Потім ці промиті матеріали змішали з розчином 2 нм, роз рішення 0,5 нм; і водяний фон основи нітрату срібла (AgNO3) у прийнятних концентрацівіднімали зі зробленого спектра. У цьому відноях, що відповідають очікуваному або відомому шенні, UV-Vis характеристика для чистої води бу"СЕС" кожного представленого матеріалу. Потім ла віднята зі зробленого спектра, щоб показати отримані оброблені матеріали знову промили дебільш показові спектральні характеристики суміші іонізованою водою для видалення будь-якого несрібло/вода. використаного нітрату срібла. Зразки сушили протягом ночі в електричній сушильній печі з опором 33 91209 34 близько 120°С. Зокрема, процедура промивання в/на цеоліт. На Фігурі 47 представлений аналіз може бути наступною: EDS (EDAX) зразка, показаного на Фігурі 46. Знову Біля двох грам кожного каолінітового або цеоприсутні відносно високі амплітудні піки алюмінію і літового зразка помістили в центрифужну пробіркремнію, але також присутні надзвичайно високі ку. Потім додали деіонізовану воду. Суміш зразка і піки срібла (наприклад, у порівнянні з піками Ag у деіонізованої води потім збовтували на вібруючокаолініті, показаними на Фігурах 45а-45b). Ці дуже му шейкері близько 40 хвилин. Потім суміш високі піки срібла відповідають значно більш висоцентрифугували близько 30 хвилин при близько кій здатності цеоліту захоплювати срібло у свою 1000 RPM. Потім надлишок рідини декантували з структуру (наприклад, високий ВЕС) у порівнянні зі пробірки зі зразком. Етапи додавання деіонізоваструктурою каолінітів (наприклад, низький ВЕС), ної води, збовтування, центрифугування і деканщо показано на Фігурах 44а і 44b. тування повторили для всіх трьох промивань. Показання ефективності 22 ppm композиція Один раз початкові 2 грами зразка промили срібла на Bacillus subtilis для видалення можливої домішки хлору, ввели А. Ціль Приклада нітрат срібла в очищені каолінітовий і цеолітовий Ціль цього приклада полягає в демонстрації матеріали. Зокрема, близько 0,09 г нітрату срібла протимікробної активності композиції на основі ввели в каолінітову суміш і близько 4,25 г AgNO3 срібла за даним винаходом на бактеріальних енввели в цеоліт Linde 4A. Зокрема, обмірювані кільдоспорах від організму, що аналізується, Bacillus кості нітрату срібла додали в кожну пробірку, потім subtilis. Ціль досягай, виконуючи стандартний досдодали деіонізовану воду до наповнення пробірки, від залежності загибелі організмів від часу за допотім суміш збовтували на вібруючому шейкері помогою суспензії ендоспор В. subtilis. Звичайно, близько 40 хвилин, і після цього центрифугували бактеріальні ендоспори стійкі до загибелі. близько 30 хвилин при близько 1000 RPM. Потім В. Матеріал і способи рідину декантували. Цю процедуру додавання Організм, що аналізується. Суспензію, що нітрату срібла, додавання деіонізованої води, збоаналізується, яка містить ендоспори Bacillus втування на вібруючому шейкері, центрифугуванsubtilis (ATTC #19659), приготували з культури, ня і декантування повторили загальною складнісвирощеної на живильному агарі, до якого додаткотю три рази. Після промивання і введення нітрату во додали інгредієнти, що підсилюють споруляцію. срібла методики закінчили, зразки вилучили з Чашки наповнили стерильною водою, а ендоспори центрифужної пробірки і помістили в алюмінієвий очистили повторними центрифугуванням і пересу(Аl2О3) тигель і сушили протягом ночі при близько спендуванням у воді. Остаточно промивали в 70% 120°С в електричному сушильному термостаті з етанолі 30 хвилин для гарантії знищення усіх вегеопором. Отримані матеріали каолініт/срібло і цеотуючих бактерій. Спори пересуспендували у воді, літ/срібло потім характеризували за допомогою що містить 0,1% Tween 80 (торгова назва полісорSEM фотомікрографій і SEM EDS (EDAX) методик. батної поверхнево-активної речовини) для запобіФігури 44а і 44b представляють SEM фотомікроггання агрегації. рафії каолінітових зразків, отриманих за методиНейтралізатор. Суміш нейтралізаторів містила ками, описаним вище. З цих фотомікрографій чітко 12,7% Tween 80 (торгова назва полісорбату), видно, що "подібні до книги" або "подібні до листа" 6,0% Tamol SN (торгова назва натрієвої солі наструктури каолінітів (наприклад, шари Si2 і Аl2О3 фтален-формальдегідного конденсату), 1,7% левизначені як "X" і "Y" на Фігурі 44а) показують, що цитин, 1% пептон і 0,1% цистин. Цей розчин підкатіони срібла розташовані по "краях" матеріалів дали нейтралізації будь-якими хімікатами, що глини. Зрозуміло, що певний тип срібла приєднаістотно не впливають на ріст бактерій. ний або заміщений, як свідчать більш чіткі "подібні Процедура залежності загибелі організмів від до сторінки" ділянки цих фотомікрографій (примітчасу. ка: ділянки "X" і "Y" представляють інші "подібні до а) 9,9 мл аліквоти дезинфікуючої речовини книги" структури в зразку). Фігури 45а-45b показу(композиція срібла, що заявляється, 22 ppm, у воють EDS (EDAX) аналіз зразків, представлених на ді) помістили в стерильну 20 мм x 150 мм пробірку. Фігурах 45а і 45b, відповідно. Ці аналізи чітко покаПробірку урівноважили в 20°С водяній бані зують присутність алюмінію і кремнію, як очікуваb) 9,9 мл аліквоти дезинфікуючої речовини лося б для каолініту, а також деякої кількості тита(композиція срібла, що заявляється 22 ppm, у воді) ну (що свідчить про присутність рутилу). Можна помістили в стерильну 20 мм x 150 мм пробірку. також спостерігати дуже маленькі піки срібла, що Пробірку урівноважили в 20°С водяній бані. відповідають ВЕС числам для каоліну, які є віднос) Через 30 хвилин, 1 годину і 4 години 1 мл сно низькими 2-5. суспензії організм/дезинфікуюча речовина перенеФігура 46 представляє SEM фотомікрографію сли в пробірку, що містить 9 мл нейтралізатора. відповідних цеолітів, отриманих за методиками, Пробірку збовтали. описаними вище. Через більш високе число СЕС d) Через 2 хвилини нейтралізовану суспензію цеоліту (а саме, близько 500) подібні до куба струсерійно розбавили 1:10 фізіологічним сольовим ктури цеоліту на Фігурі 46, здаються "такими, що розчином (PSS). світяться" на фотомікрографії (див., наприклад, e) Ряд життєздатних організмів у пробірках з ділянку "А" на Фігурі 46). Це "світіння" наводить на обраним розведенням піддали мембранній фільтдумку, що відбувся суттєвий розподіл срібла в рації. 1 мл аліквот розмістили в чашки в двох поцеолітові структури і крізь них. У цьому відношенні, вторювань. Мембрани промили близько 100 мл якби були яскраві плями металу срібла, що окремо стерильного PSS і перенесли на чашки з живильсвітяться яскраво, то срібло не було б включене ним агаром. Чашки інкубували при 37°С 20 годин. 35 91209 36 f) Підрахували число колоній на кожнім фільтрі єю за допомогою 1 мл зразків у двох повторносі розрахували логарифм зниження числа. тях. Контролі: С. Результати а) Титри суспензій, що аналізуються, розрахуТитр Bacillus subtilis; вали, виконуючи дослідження мембранної фільтрації обраних 1:10 розведень аналізованих суТитр Bacillus subtilis спензій у PSS. b) Нейтралізаторний контроль виконували іноРозбавлення куляцією суміші 9 мл нейтралізатора і 1 мл дезин1:1х106 1:1х107 1:1x108 Число колофікуючого речовини з 100 мл розведення титру, ній TNTC 75 7 що містить 100 КУО. Це зробило близько 10 TNTC 58 8 КУО/мл у пробірці, що витримували протягом 20 хвилин до дослідження з мембранною фільтраціTNTC = занадто численні для підрахунку Розведення В. subtilus суспензії спора/дезинфікуюча речовина Час 30 хв 1 год 2 год 4 год L-1x101 TNTC TNTC 1:1x102 TNTC TNTC TNTC TNTC 1:1x103 TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC 88 69 1:1x104 TNTC TNTC TNTC TNTC 126 183 12 12 1:1x105 57 51 28 55 23 17 1:1x106 10 7 3 3 TNTC = занадто численні для підрахунку Контроль нейтралізації: 1:1x108 D. Обговорення Результати титру показали концентрацію життєздатних спор S. subtilis 6,65x108 спор на мл в оригінальній суспензії. Інокуляція 9,9 мл дезинфікуючої речовини з 100 мл цієї суспензії дала початкову концентрацію 6,65x10s спор на мл у досліджувальній пробірці. Результати цих методик дозволили розрахувати значення логарифма зниження числа (LR) і відсоток вбитих (РK). Вони приведені в таблиці нижче. Значення розрахували за допомогою формули: LR=-Log(S/So) і РK=(1-(S/So))x100; де S = концентрація організмів у певний час; a So = початкова концентрація організмів під час 0. Час 30 хв 1 год 2 год 4 год Log зниження числа 0,090 0,205 0,634 1,928 Процент вбитих організмів 18,8 37,6 76,8 98,8 Дані контролю нейтралізації показали, що дезинфікуюча речовина задовільно нейтралізована. Фактичні підрахунки відповідають отриманим від розведення без помітної загибелі. Препарат дезинфікуючої речовини, аналізованої в даному описі, показав гарну спороцидну активність проти спор В. subtilis. В. subtilis являє собою загальний вид, що застосовується у спороцидних аналізах, і належить того ж роду, що й організм, що викликає сибірську виразку. Через їхню генетичну подобу спор В. subtilis застосовували як непатогенний замінник для Bacillus anthracis, бактерії сибірської виразки. Отже, ре зультати відповідають сибірській виразці. Припускають, що більш тривала експозиція призвела б до додаткової загибелі. Показання ефективності композиції 10 ppm срібла і 1,0% Н2О2 та композиції 14 ppm срібла і 1,5% Н2О2 проти Bacillus subtilis А. Ціль приклада Ціль даного приклада показати протимікробну активність двох композицій на основі срібла за даним винаходом на бактеріальні ендоспори від аналізованого організму Bacillus subtilis. Цього досягли виконанням стандартних досвідів залежності загибелі організмів від часу за допомогою суспензії ендоспор В. subtilis. У порівнянні з попереднім прикладом (із застосуванням 22 ppm срібла) цей приклад встановлює ефект, що забезпечує, перекису водню (Н2О2) на протимікробні якості композицій срібла. Перекис водню стабільний у присутності композицій срібла за даним винаходом. Оскільки перекис водню сама володіє значними протимікробними якостями, вона часто руйнується каталазой або іншими мікробними ферментами. Однак, перекис водню здатна послабити стінки кліток бактерій і підсилити проникнення частинок срібла до того, як відбудеться яке-небудь руйнування перекису водню. В. Матеріал і способи 1. Організм, що аналізується. Аналізовану суспензію, що містить ендоспори Bacillus subtilis (ATTC #19659), приготували з культури, вирощеної на живильному агарі, до якого додатково додали інгредієнти, що підсилюють споруляцію. Чашки наповнили стерильною водою, а ендоспори очистили повторними центрифугуванням і пересуспендуванням у воді. Остаточно промивали в 70% етанолі 30 хвилин для гарантії знищен 37 91209 38 ня усіх вегетуючих бактерій. Спори пересуспенповторюваннях. Мембрани промили близько 100 дували у воді, що містить 0,1% Tween 80 (торгова мл стерильного PSS і помістили на чашки з жиназва полісорбату) для запобігання агрегації. вильним агаром. Чашки інкубували при 37°С 20 2. Нейтралізатор. Нейтралізаторна суміш мігодин. f) Підрахували число колоній на кожному фістила 12,7% Tween 80 (торгова назва полісорльтрі і розрахували логарифм зниження числа. бату), 6,0% Tamol SN (торгова назва натрієвої 4. Контролі: солі нафтален-формальдегідного конденсату), а) Титри суспензій, що аналізуються, розра1,7% лецитину, 1% пептону і 0,1% цистину. Цей хували, виконуючи дослідження мембранної фірозчин піддали нейтралізації будь-якими хімікальтрації обраних 1:10 розведень аналізованих тами, що суттєво не впливають на ріст бактерій. суспензій у PSS. 3. Процедура залежності загибелі організмів b) Нейтралізаторний контроль виконували від часу: інокуляцією суміші 9 мл нейтралізатора і 1 мл а) 9,9 мл аліквоти кожної з дезинфікуючих дезинфікуючої речовини з 100 мл 1:103 розверечовин (композиції колоїдного срібла, що заявдення титру. Це зробило близько 2000 КУО/мл у ляються: одна містить 14 ppm срібла і 15% Н2О2; пробірці, що витримували протягом 20 хвилин до інша містить 10 ppm срібла і 1,0% Н2О2) помістирозведення 1:10. Обидві пробірки аналізували ли в стерильну 20 мм x 150 мм пробірку. Пробірку мембранною фільтрацією за допомогою 1 мл урівноважили в 200С водяній бані. зразків у двох повторюваннях. Усі результати b) Кожну пробірку дезинфікуючої речовини представлені в таблицях 1а і 1b. інокулювали 100 мл суспензії аналізованих оргаС. Результати нізмів під час 0. с) Через 10 хвилин, 30 хвилин, 1 годину, 2 гоТитр спор Bacillus subtilis дини, 4 години, 6 годин і 8 годин 1 мл суспензії організм/дезинфікуюча речовина видалили в Розбавлення пробірку, що містить 9 мл нейтралізатора. Пробі1:1х106 1:1х107 1:1х108 рку збовтали. Число колоd) Через 2 хвилини нейтралізовану суспензію ній TNTC 36 5 серійно розбавили 1:10 фізіологічним сольовим TNTC 27 4 розчином (PSS). e) Ряд життєздатних організмів у пробірках з TNTC = занадто численні для підрахунку. обраним розведенням піддали мембранній фільтрації. 1 мл аліквот розмістили в чашки в двох Таблиця 1а Розчин, що містить 14 ppm срібла і 1,5% Н2О2 Розведення суспензії спора В. subtilis /дезинфікуюча речовина 1:1x101 59 57 0 3 1 1 Час 10 хв 30 хв 1 год 2 год 4 год 6 год 8 год 1:1x102 TNTC TNTC 3 5 0 0 0 0 TNTC = занадто численні для підрахунку. Контроль нейтралізації Нерозбавлений TNTC TNTC 1 1:1x10 195 210 TNTC = занадто численні для підрахунку. 1:1x103 TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC 207 237 1 1 0 0 0 0 1:1x104 TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC 29 24 1:1x105 227 265 258 273 55 33 39 91209 40 Таблиця 1b Розчин, що містить 10 ppm срібла і 1,0% Н2О2 Розведення суспензії спора S. subtilis/дезинфікуюча речовина 1 Час 2 1:1x10 TNTC TNTC 0 2 0 0 10 хв 30 хв 1 год 2 год 4 год 6 год 8 год 1:1x10 TNTC TNTC 72 77 0 0 0 0 3 1:1х10 TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC 5 5 0 0 0 0 4 1:1x10 TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC TNTC 64 71 5 1:1x10 230 287 254 260 146 124 TNTC = занадто численні для підрахунку. Контроль нейтралізації Нерозбавлений TNTC TNTC 1:1x101 200 184 TNTC = занадто численні для підрахунку. D. Обговорення Дані показали концентрацію життєздатних спор В. subtilis 2,59x108 спор на мл оригінальній суспензії. Інокуляція 9,9 мл дезинфікуючої речовини 100 мл цієї суспензії дала початкову концентрацію 2,59x105 спор на мл у пробірці дослідження. Результати цих методик дозволяють розрахувати значення логарифма зниження числа (LR) і відсотка загибелі (РK). Вони приведені в наступній таблиці. Значення розрахували за допомогою формули: LR=-Log(S/So) і РK=(1-(S/So))x100; де S = концентрація організмів у певний час; a So = початкова концентрація організмів під час 0. Оскільки не відбувалася значна загибель через 30 хвилин, дані 10 хвилин приймали за значення So. Експозиція 6 годинна і 8 годинна не давала досить високі значення, щоб вважати їх надійними. Отже, ці дані не застосовували в лінійних регресіях. Лінійні регресії виконували за значеннями логарифма зниження числа за допомогою графіків, підібраних кривих за допомогою програмного забезпечення Minitab statistical. Отримані рівняння зниження числа і час, необхідний для ефекту шести логарифмів зниження числа, показані поряд зі значеннями логарифма зниження числа і відсотка загибелі в наступній Таблиці 2. Таблиця 2 Час 30хв 1 год 2 год 4 год 14 ppm срібло + 1,5%Н2О2 Log зниження числа Процент вбитих організмів -0,03 -7,9 0,66 78,0 2,05 99,1 4,63 99,998 Аналіз зниження числа Рівняння для 14 ppm розрахованої лінії: Υ=0,66704+1,32936x. Рівняння для 10 ppm розрахованої лінії: Υ=-0,59690+1,03933x. Ці рівняння показують, що час для 6 логарифмів зниження числа складає 5,02 годин для 14 ppm композиції і 6,35 годин для 10 ppm композиції. Дані контролю нейтралізації показали, що дезинфікуюча речовина була задовільно нейтралізована. Очікувані цифри відповідають очікуваним цифрам від розведення. Експериментальні розчини дезинфікуючої речовини виявили значну спороцидну активність 10 ppm срібло + 1,0%Н2О2 Log зниження числа Процент вбитих організмів 0,003 0,6 0,28 47,8 1,58 97,4 3,54 99,97 проти спор В. subtilis. Штами В. subtilis, що застосовуються в цих оцінках, є такими ж, що визначаються в спороцидному аналізі АОАС. Спори цього організму представляють значну проблему для більшості дезинфікуючих речовин. Час, необхідний для ефекту шести логарифмів зниження числа, відповідає спороцидним властивостям, що заявляються, багатьох холодних засобів, що стерилізують. Показання ефективності 10 ppm композиції срібла як протимікробного засобу широкого спектра дії А. Способи 41 91209 42 Аналізи МІС (мінімальна інгібіторна концентсовували для контролю концентрації культури. рація) і МВС (мінімальна бактерицидна концентСерійні розведення кожного аналізованого антирація) проводили за стандартним способом мікбіотика виконали в живильному бульйоні. Розверорозведення живильного бульйону. МІС дення розрахували для покриття діапазонів чутвизначають як найнижчу концентрацію антибіотиливості для кожного організму для кожного ка, що буде інгібувати (in vitro) ріст інфекційного агента. Стандартну кількість аналізованої культуорганізму. Результати представлені в мкг на мл. ри додали в кожну пробірку, а пробірки помістили Для медичних антибіотиків інтерпретація даних in в інкубатор (37±2°С) для росту. Пробірки перевіvitro заснована на досягненні концентрацій лікаррили турбидометрично для визначення бактеріаського засобу в сироватці, що може варіювати в льного росту. Нижче концентрації МІС пробірки залежності від дози, способу введення, ступеня показали збільшення оптичної щільності згодом, білкового зв'язування, місця інфекції, віку і ваги що вказує на бактеріальний ріст. Найнижчою пацієнта й інших факторів. МВС визначають як концентрацією антибіотика, при якій ріст не спонайнижчу концентрацію протимікробного агента, стерігався, була МІС. Пробірки, де не спостеріганеобхідну для загибелі 99,9% початкового інокувся ріст, потім пересіяли на свіже середовище. люма організмів. Пробіркою, де не спостерігався ріст, з найнижчою Аналіз виконували, вирощуючи чисті культуконцентрацією антибіотика, у якій не спостерігаври кожного з організмів у рідкій культурі, що анася ріст при пересіванні, була МВС. Результати лізується. Турбидометричні вимірювання застопоказані в Таблиці 3. В. Результати: Таблиця 3 Організм S.pyogenes S.mutants S.gorgonii S.pneumoniae S.faecalis S.aureus P.aeruginosa E.coli E.aerogenes E.cloacae S.typhimurium S.arizona S.boudii K.pneumoniae K.oxytoca Тетрациклин 0,625/>5 0,625/>5 0,156/0,625 0,078/0,625 0,313/>5 0,313/>5 0,078/5 1,67/>5 >5 1,67/>5 1,25/>5 0,625/>5 1,25/>5 2,5/>5 1,25/>5 Офлоксацин 1,25/205 2,5/>5 2,5/5,0 2,5/2,5 1,25/5,0 0,417/0,625 0,156/0,313 0,104/0,156 0,078/0,156 0,156/0,156 0,078/0,156 0,078/0,078 0,078/0,156 0,417/0,625 10,104/0,156 Пеніцилін G >5,0 0,521/>5 0,009/0,039 0,019/0,019 5,0/>5 2,5/>5 0,13/>5 >5,0 >5,0 >5,0 >5,0 >5,0 >5,0 >5,0 >5,0 Дані представлені як МІС/МВС (мінімальна інгібіторна концентрація/мінімальна бактерицидна концентрація) у частинах на мільйон (ppm); ">" означає, що концентрація, яка необхідна для одержання МІС або МВС, була вище, ніж параметри аналізу, що були виміряні під час аналізу. Наприклад, найвища концентрація тетрацикліну, застосовувана для S. pyogene, склала 5 ppm. При цій концентрації усе ще спостерігався ріст при пересіванні пробірок, де не спостерігався ріст. Отже, МВС повинна бути > (більше, ніж) 5 ppm. МІС/МВС штаму Е. coli Ο157:H7, який зв'язують зі спалахами геморагічної діареї і коліту, визначали в наступному дослідженні. Визначили МІС - 2,5 ppm і визначили МВС - 5 ppm. С. Висновок Аналізували 10 ppm композицію срібла за даним винаходом і знайшли її як бактеріостатичну і бактерицидну для всіх аналізованих організмів. В інших дослідженнях цю композицію порівнювали з іншими комерційно доступними продуктами колоїдного срібла і знайшли, що вона має переважну активність у порівнянні з всіма іншими аналізованими препаратами (дані не по Цефаперазон 0,313/1,25 1,25/>5 1,25/1,25 0,313/0,313 >5,0 5,0/5,0 2,5/5,0 0,625/>5 2,92/>5 >5,0 1,25/2,5 0,833/>5 0,625/0,625 >5,0 1,25/>5 Еритроміцин 0,003/0,019 0,009/0,019 0,005/0,019 0,002/0,004 0,009/1,25 0,039/>5,0 2,5/>5,0 5,0/>5,0 >5,0 >5,0 5,0/>5,0 4,17/>5,0 5,0/>5,0 >5,0 >5,0 Срібло 2,5/5,0 2,5/10 2,5/10 2,5/2,5 10/10 5,0/5,0 1,67/5 2,5/2,5 2,5/2,5 2,5/5,0 2,5/5,0 2,5/5,0 1,25/1,2 5 2,5/2,5 1,25/1,25 казані). Найбільш цікаве спостереження складалося в широкому спектрі, яким володіла 10 ppm композиція срібла. Протимікробна активність, що спостерігається, була досить постійною незалежно від визначеного аналізованого організму. За винятком Streptococcus faecalis і Streptococcus aureus (значення МІС яких склало 10 ppm і 5 ppm, відповідно), значення МІС варіювали від 1,25 ppm і 2,5 ppm і в грампозитивних, і в грамнегативних організмів. Значення МВС змінювалися таким чином від 1,25 ppm до 5 ppm за винятком Streptococcus mutans, Streptococcus gordonii i Streptococcus faecalis (значення МВС яких склали 10 ppm). За даними припускають, що 10 ppm срібла за даним винаходом показують рівний або більш широкий спектр активності, ніж будь-який антибіотик, що аналізується. Антибактеріальні спектри антибіотиків звичайно обмежуються сприйнятливими організмами, але як показують дані, композиція срібла за даним винаходом однаково ефективна і проти грампозитивних, і проти грамнегативних організмів. Дані показують, що в зв'язку з низькою токсичністю, зв'язаною зі сріблом, загалом, і широким спектром протимікроб 43 91209 44 ної активності даної композиції срібла, цей прергійно збовтували, щоб досягти однорідності бакпарат можна ефективно використовувати як альтерій у розчині, і виконали серійні розведення в 9 тернативу антибіотикам. мл холостих пробах середовища LETH. РозведеD. Посилання для попереднього Приклада ні холості проби інкубували при 37±2°С. Остання 1. U.S. EPA IRIS Report for Silver-CASRN пробірка з ростом показувала logo титр організмів 7440-22-4. у носії. Для АОАС необхідно, щоб носії мали мі2. Fox CL, Modak SM. Mechanism of Silver німальні популяції 1x104 КУО/носій. Sulphadiazine Action on Burn Wound. Infections. Аналіз композиції срібла. За допомогою стеAntimicrobial Agents Chemother. 5:582-588. 1974. рильних скляних піпеток 10 мл аліквот приготов3. Furchner, JE, Richmond CR, and GA Drake. лених дезинфікуючих речовин помістили в стеComparative Metabolism of Radionuclides in рильні аналізовані пробірки і врівноважили в Mammals. IV. Retention of Silver-110m in the охолодженій водяній лазні при 20±2°С. Не торкаMouse, Rat, Monkey, and Dog. Health Phys. ючись сторін аналізованих пробірок, один забру15:505-514.1968. днений сухий носій додали з інтервалом у 30 се4. Grier, N. Silver and its Compounds in кунд у кожну пробірку композиції срібла і Disinfection, Sterilization, and Preservation. помістили назад у водяну баню. Для кожного ор(Seymour S. Block, ed.) 2nd Edn, pp 395-407. 1977. ганізму аналізували дезинфікуючу речовина про5. Hindler, JA, and JH Jorgensen. Procedure in ти 60 сухих забруднених носіїв з інтервалами Antimicrobial Testing in Diagnostic Microbiology. експозиції 5 і 10 хвилин. Після експозиції носії (CR Mahon and G Manuselis, eds.) pp 63-91.1995. видалили з дезинфікуючої речовини і перемістиПоказання ефективності 32 PPM композиції ли в пробірку з LETH. Пробірки з культурою інкусрібла проти Pseudomonas aeruginosa, salmonella бували при 37±2°С 2 дні і позначили їх як позитиcholeraesuis i Staphylococcus aureus вні (+) або негативні (0) для вирощування А. Способи досліджуваного організму. Pseudomonas aeruginosa ATTCC #15442, Контролі. Для кожного організму сухий заSalmonella choleraesuis ATTCC # 10708 і бруднений носій додали в пробірку з LETH як Staphylococcus aureus ATCC #6538 аналізували позитивний контроль. Пробірки з неінокульоваза допомогою АОАС (Association of Official ним середовищем служили негативними контроAnalytical Chemists AOC Methods, vol. 1, 15th лями. Після інкубації в усі негативні пробірки доedition, 1990, AOAC Arlington, VA) офіційних сподали 1-100 колонеутворюючих одиниць (КУО) собів 955.14, 95515 і 964.02. Пробірки з живильвідповідних організмів для демонстрації ефектиним бульйоном (NBAOAC) інокулювали матковою вності, що нейтралізує. Для демонстрації забезкультурою і пробірки інкубували при 37±2°С. Пепечення росту середовищем пробірки негативноренесення в пробірки зі свіжим живильним бульго контролю також інокулювали тими ж 1-100 КУО йоном виконали протягом трьох наступних днів всіх трьох організмів. Інокуляційні об'єми поміспри остаточному перенесенні, інкубували при тили в трьох повторюваннях на соя-казеїн37±2°С48-54 години. Культуру Pseudomonas дегідролизат-агар (SCDA) для перевірки інокуляційкантували у свіжу пробірку для видалення оболоних титрів. Пробірки і чашки інкубували при нок. Інші культури струшували 3-4 секунди і за37±2°С поки ріст не став помітним у всіх пробірлишили протягом 10 хвилин при кімнатній ках. температурі. Остаточно культури розбавили У нейтралізації P. aeruginosa початковий титр 1:100 лептонною водою (PEPW), до якої додали інокулюма, як визначили, склав >100 КУО, що сироватку коня, для одержання 5% усіх дослібуло занадто високим для протоколу. Оскільки джуваних організмів. Носії, що аналізуються, (304 всі оригінальні пробірки були зайняті, імітаційний 10 мм добре відполірованих циліндра з нержавіаналіз виконували з тією ж серією середовища, ючої сталі з 8 мм зовнішнім діаметром і 6 мм внуяк і в аналізі, поміщаючи носії в пробірки з дезитрішнім діаметром) занурили в досліджуваний нфікуючою речовиною для всіх трьох серій комрозчин на 15 хвилин, видалили, злили рідину і позицій срібла на 10 хвилин. Носії перенесли на сушили при 37±2°С 40±2 хвилини до застосуванхолості проби з LETH. У ці пробірки потім помісня. тили 1-100 КУО організму. Пробірки інкубували, Стійкість до фенолу. П'ять 1 мл аліквот кожяк зазначено раніше, і позначили "з ростом" або ного розведення фенолу, що аналізується, поміс"з відсутністю росту". Нові пробірки зі стерильним тили в стерильні аналізовані пробірки і зрівновасередовищем з тієї ж серії також інокулювали як і жили в 20±2°С водяній бані. З інтервалами 30 при перевірці забезпечення росту. секунд 0,5 мл кожної культури, що заражає, доВ. Результати дали до прийнятних розведень фенолу, збовтуПочатковий аналіз з використанням S. aureus вали і перенесли на водяну лазню. Після прийняпоказав придатні результати для зразків #1 і #2, а тного часу експозиції 5, 10 і 15 хвилин петлю зразок #3 був зіпсований. При дослідженні визнасуспензії брали з пробірок досліду і переміщали в чили, що зразок #3 зіпсований до використання. пробірки з летиновим бульйоном (LETH). ПробірВиготовили нову колбу з тієї ж серії, що і зразок ки з LETH інкубували при 37±2°С 2 дні. #3, нову колбу позначили як зразок #4. ДосліТитрування носія. Для титрування носіїв придження S. aureus повторили за допомогою зразка готували 10 мл холостої проби розчину лептонно#4. Критерії АОАС показують, що для будь-якої точки часу й організму, тільки 1 носій дозволяє го Tween (торгова назва полісорбату) (РЕРТ). ріст для кожної аналізованої серії. Два носії помістили в окремі пробірки, що представляють перше 1:10 розведення. Пробірки ене 45 91209 46 Позитивні контролі показали ріст, а негативні 25 мл 0,1% пептону і змішували протягом двох контролі не показали ріст для всіх серій, тимчахвилин у гомогенізаторі stomacher (Lab Bender сових точок і організмів. 400). Серійні розведення приготували і спірально Титрування носія виконали в двох повторювисіяли через 0 хвилин, 20 хвилин, 1 годину, 4 ваннях для всіх організмів. Повідомлений титр години і 24 години після обробки на селективні і являє собою середнє від повторювань. Для всіх відновлені середовища. трьох організмів середній титр, що спостерігаєтьБактеріальні Культури. Бактеріальні культури ся в носіях, варіював від 5,5x104 до 5,5x106 одержали з колекції маткових культур КанзассьКУО/носій. Для АОАС необхідно, щоб носії мали кого державного університету (KSU) і зберігали в мінімум 1,0x104 КУО/носій. системі збереження "Protected Bead". ЗастосовуДля P. aeruginosa 3/180 носіїв показали ріст у вали наступні культури для зразка Salmonella: S. 5 хвилинній точці аналізу, а 2/180 носіїв показали lille (UGA), S. montevideo (UGA), S. typhimurium ріст у 10 хвилинній точці аналізу. Для S. aureus (UGA), S. agona (KSU 05 від CDC інфекційного 16/180 носіїв показали ріст у 5 хвилинній точці ізоляту) і S. newport (KSU 06 CDC інфекційного аналізу, а 2/180 носіїв показали ріст у 10 хвилинізоляту). Наступні культури застосовувалися для ній точці аналізу. Для S. choleraesuis 6/180 носіїв зразка Escherichia coli: Ε. coli 0157:H7 (CDC 01 показали ріст у 5 хвилинній точці аналізу, а 1/180 ,03), Ε coli Ο157:H7 (USDA-FSIS 011-82 Rif носіїв показали ріст у 10 хвилинній точці аналізу. resistant 100 ppm), E. coli 0157:H7 (ATCC 43895 Культура Pseudomonas, що аналізується, поHUS, зв'язаний з токсинами типу І і II Rif. Res.) і Ε. казала ріст після 5, 10 або 15 хвилинних обробок coli АТСС#23740 (генотип K-12 прототрофний 1:90 фенолом і показала ріст після 5 або 10 хвилямбда). линної обробки 1:80 фенолом, але не було росту Маточні культури культивували, поміщаючи після 15 хвилинної обробки 1:80 фенолом. Кульодну просочену гранулу в 5 мл розчин Difco тура Staphylococcus показала ріст після 5, 10 або трипсиновий соєвий бульйон (TSB) і інкубуючи 24 15 хвилинних обробок 1:70 фенолом і показала години при 35°С. Потім петлею з 0,05 мл відповіріст після 5 або 10 хвилинної обробки 1:60 фенодної культури інокулювали в 5 мл розчину TSB і лом, але не було росту після 15 хвилинної обробінкубували 24 години при 35°С для одержання ки 1:60 фенолом. Культура Salmonella показала чистої культури. Після інкубації 1 мл відповідної ріст після 5, 10 або 15 хвилинних обробок 1:100 культури інокулювали в 49 мл TSB і інкубували 24 фенолом, але не було росту після 5, 10 або 15 години при 35°С. Після інкубації зразки центрихвилинних обробок 1:90 фенолом. фугували (15300 x g при 4°С), супернатантний Показання ефективності 32, 22 і 10 ppm срібматеріал декантували, а осад пересуспендували ла та 22 ppm срібла i 1,5% Н2О2 та 10 ppm срібла з 50 мл 0,1% пептону і центрифугували (15300 x i 10 ppm K2S2O8 проти Salmonella i Escherichia coli g при 4°С) останній раз. Пептон декантували, а у зразках свіжо інокульованої яловичини осад, що залишився, пересуспендували з 10 мл А. Ціль прикладу 0,1% пептону. П'ять 10 мл колб відповідної кульМетою даного прикладу є демонстрація протури змішали разом для одержання 50 мл коктимікробної активності композиції на основі срібтейлю, що містить 109 КУО/мл видів Salmonella. ла за даним винаходом на зразках порціонного Коктейль розбавили до 106 КУО/мл або 104 шматка яловичини, інокульованих на зовнішній КУО/мл за допомогою 0,1% пептону. Культури поверхні сумішшю п'яти штамів видів Salmonella підтвердили культивацією на селективних і диабо Escherichia coli Ο157:H7 з високим рівнем ференціальних середовищах і біохімічному анаінокулюма в розчині (1х10 КУО/см ) і окремо з лізі ймовірних колоній за допомогою набору API низьким рівнем інокулюма в розчині (1x10 КУО/см 20Е. ) (КУО = колонеутворююча одиниця). Спосіб інокуляції. Зразки порційного шматка В. Матеріал і способи яловичини (прямий м'яз живота) обрізали до 13x8 Зразки яловичини. Зразки яловичої тканини см (104 см2) і інокулювали коктейлем з п'яти одержали з бойні протягом 8 годин після вибою. штамів видів Salmonella або Escherichia coli Прямий м'яз живота відокремили від туші, що Ο157:H7 при високому рівні інокулюма в розчині висить у холодильнику, розсікаючи між 11ім і 12ім (106 log КУО/см2) і окремо при низькому рівні іноребрами, а потім розділили м'яз уздовж напрямку кулюма в розчині (104 log КУО/см2). Цей інокулюм м'язів. Стерильно отримані зразки помістили в розпилили на поверхню тканини за допомогою пластикові пакети і на лід, і відправили в той же пластикової колби, що розпилює, зі зразками, що день у лабораторію, де зразки негайно запакувамістяться в закритій камері для інокулюма. Конли в Multi-Vac (A-300) і помістили в холодильник центрація конкретних видів Salmonella на поверпри 4°С. Зразки, що використовуються для аналіхні м'яса склала приблизно 5,0 і 3,4 log КУО/см2 зу, мали рН від 5,8 до 6,0 і були терміном не для розчину з високим і низьким рівнем інокулюбільш ніж 36 годин після вибою. З довільно обрама, відповідно. Для Е. coli Ο157:H7 відповідні них прямих м'язів живота нарізали 13x8 см зразки рівні інокуляції поверхні м'яса склали 4,2 і 3,9 log 2 2 й обробили. Після обробки, застосовуючи 3,5 см КУО/см . стерилізований в полум'ї пристрій для узяття Потім зразки яловичини підвісили вертикальпроб з нержавіючої сталі і хірургічний скальпель, но на гаках з нержавіючої сталі, що прикріплені стерильно відрізали два серцевинних шматки до рухливої доріжки, що протягала зразки яловим'яса з інтервалом добору зразків для кожного чини крізь камеру тумана моделей (Канзасський зразка. Серцевинні шматки тканини помістили в державний університет, лабораторія безпеки хастерильний пакет для гомогенізатора stomacher з рчових продуктів), поки застосовували розпилю 47 91209 48 ючі обробки. Застосовували обробки яловичини зареєстровані наступні логарифми зниження чикомпозиціями срібла за даним винаходом або сла: 0,24 за 0 хвилин, 0,24 за 20 хвилин, 0,42 за деіонізованю водою при 20 psi на відстані 13 см у 60 хвилин і 0,61 за 240 хвилин Результати вказукамері промивання моделей під тиском протягом ють, що срібло 22 ppm варіанта даного винаходу 20 секунд. Розпилююча насадка (BETE NF0580 забезпечує ефективним бактерицидним ефектом 303) доставляла приблизно 20 мл розчину на Salmonella у біфштексі. поверхню зразка яловичини. Температура розчиРезультати зі сріблом у воді і 1,5 масового % нів і в кімнаті обробки складала приблизно 14°С. пероксиду водню. Для Salmonella для більш ниПісля обробка дві повторності 3,5 см2 центральзького початкового рівня бактерії (104), були заної частини зразків довільно відібрали з плоскої реєстровані наступні логарифми зниження числа: поверхні зразка яловичини через 0, 20, 60 і 240 0,34 за 0 хвилин, 0,33 за 20 хвилин, 0,36 за 60 хвилин. Зразки культивували і реєстрували на хвилин і 0,62 за 240 хвилин. Для більш високого селективному диференціальному і відновленому початкового рівня бактерії (106) були зареєстросередовищі. Логарифм зниження числа розрахувані наступні логарифми зниження числа: 0,28 за вали, віднімаючи Iog10 КУО/см2 інокульова0 хвилин, 0,14 за 20 хвилин, 0,30 за 60 хвилин і них/оброблених зразків за специфічний для зраз0,69 за 240 хвилин. Результати вказують, що сріків час (0, 20, 60 і 240 хвилин) від logio КУО/см2 бло 22 ppm з 1,5 масовим % пероксиду водню інокульованих/необроблених зразків при 0 хвиваріанта даного винаходу забезпечує ефективлин. Обробка зразків включала застосування 32 ний бактерицидний ефект для Salmonella у біфшppm срібла, 22 ppm срібла і 10 ppm композицій тексі. срібла за даним винаходом. Окремо аналізували Е. Результати з 10 ppm композицією срібла комбінації 22 ppm Ag з 1,5 вагових % перекису Результати зі сріблом у воді. Для Salmonella водню і 10 ppm Ag з 10 ррга пероксидисульфату при низькому початковому рівні бактерій (104) (K2S2O8). були зареєстровані наступні логарифми зниженС. Результати з композицією срібла 32 ppm ня числа: 0,38 за 0 хвилин, 0,41 за 20 хвилин, Застосування композиції срібла 32 ppm за 0,39 за 60 хвилин і 0,61 за 240 хвилин. Для більш даним винаходом викликає зниження бактерій у високого початкового рівня бактерії (106) були біфштексі. У нижченаведеному це зниження визареєстровані наступні логарифми зниження чиражено як log10 відношення числа бактерій при сла: 0,24 за 0 хвилин, 0,21 за 20 хвилин, 0,41 за контролі при часі 0 до кількості бактерій в оброб60 хвилин і 0,54 за 240 хвилин. Результати вкаленому зразку при часі спостереження (тобто, зують, що срібло 10 ppm варіанта даного винахолікування). ду забезпечує ефективний бактерицидний ефект Для Salmonella, на більш низькому початкодля Salmonella у біфштексі. вому рівні бактерій (104), були зареєстровані наРезультати з композицією срібла у воді з 10 ступні логарифми зниження числа: 0,78 за 0 хвиppm K2S7O8. Для Salmonella при низькому початлин, 1,11 за 20 хвилин, 1,08 за 60 хвилин і 1,23 за ковому рівні бактерій (104) були зареєстровані 240 хвилин. Таким чином, за 4 години (240 хвинаступні логарифми зниження числа: 0,26 за 0 лин), відношення початкового рахунку бактерії в хвилин, 0,28 за 20 хвилин, 0,35 за 60 хвилин і контролі бактерії в зразку, обробленому 32 ppm 0,58 за 240 хвилин. Для більш високого початкосріблом є 101,23. Для більш високого початкового вого рівня бактерії (106) були зареєстровані на6 рівня бактерії (10 ) були зареєстровані наступні ступні логарифми зниження числа: 0,03 за 0 хвилогарифми зниження числа: 0,86 за 0 хвилин, лин, 0,16 за 20 хвилин, 0,21 за 60 хвилин і 0,36 за 0,95 за 20 хв, 0,98 за 60 хв і 1,17 за 240 хв. Ре240 хвилин. Результати вказують, що срібло 10 зультати вказують, що срібло 32 ppm варіанта ppm з 10 ppm пероксидисульфатом калію даного винаходу показує ефективний бактерици(K2S7O8) варіанти даного винаходу забезпечує дний ефект для Salmonella у біфштексі. Буде оціефективний бактерицидний ефект для Salmonella нено, що дезінфекція поверхні м'яса є вкрай суму біфштексі. нівною для будь-якого дезінфектанту. Доказ ефективності срібла 10 ppm при лікуДля Е. coli для більш низького початкового ванні захворювань людей рівня бактерії (104) були зареєстровані наступні А. Призначення прикладу логарифми зниження числа: 1,03 за 0 хвилин, Призначення даного прикладу - демонстру1,28 за 20 хвилин, 1,42 за 60 хвилин і 1,58 за 240 вати корисність композицій, заснованих на сріблі, хвилин. Для більш високого початкового рівня варіантів даного винаходу для лікування різних бактерії (10б) були зареєстровані наступні логазахворювань людей. Дослідження в цьому розділі рифми зниження числа: 0,65 за 0 хвилин, 0,60 за були виконані в Ghana, West Africa, у Air Force 20 хвилин, 0,83 за 60 хвилин і 0,87 за 240 хвилин. Station Hospital під керівництвом Dr. Kwabiah, у Результати вказують, що срібло 32 ppm варіанта Korie-Bu Teaching під керівництвом Sr. Sackey і в даного винаходу показує ефективний бактерициJustab Clinic/Maternity Hospital під керівництвом дний ефект проти патогенної Е. coli у біфштексі. Dr. Abraham. Всього п'ятдесят вісім (58) пацієнтів D. Результати з композицією срібла 22 ppm були вилікувані, застосовуючи композицію срібРезультати зі сріблом у воді. Для Salmonella ло/вода даного винаходу, включаючи срібло 10 при низькому початковому рівні бактерій (104) ppm. Композиція застосовувалася і внутрішньо, і були зареєстровані наступні логарифми знижензовні як альтернатива традиційним антибіотикам. ня числа: 0,41 за 0 хвилин, 0,43 за 20 хвилин, Хвороби, що лікувалися, включали малярію, вер0,48 за 60 хвилин і 0,68 за 240 хвилин. Для більш хні інфекції дихальних шляхів, інфекції сечових високого початкового рівня бактерії (106) були шляхів, синусит, інфекційна молочниця, інфекції 49 91209 50 ока, носа і вуха, порізи, грибкові шкірні інфекції і повідна реакція. Кожний із двох патентів лікувахвороби, що передаються статевим шляхом, такі лися десятьма мл (дві чайні ложки) композиції як гонорея. даного винаходу тричі в день. У пацієнтів зникли В. Способи лікування і результати симптоми протягом шести днів. Біль у животі і діарея. Спосіб включає крок Малярія. Спосіб включає крок введения комвведення приблизно 5-25 мл композиції срібла позиції срібла від одного до п'яти ратів у день від одного до п'яти разів у день перорально, поки перорально пацієнту, поки була відповідна реакбула відповідна реакція. Один пацієнт лікувався ція. Одинадцять пацієнтів лікувалися при першоприблизно 10 мл (біля двох чайних ложок) компому вивченні десятьма мл (дві чайні ложки) кожної зиції даного винаходу три рази в день. Пацієнт композиції даного винаходу тричі в день. Пацієнвидужав за один день. ти показали зникнення симптомів протягом п'яти Бронхіт. Спосіб включає крок введення прибднів. Більш докладно протоколи малярії обговолизно 2-25 мл композиції срібла перорально, від рювалися в даному описі пізніше. одного до п'яти разів у день поки була відповідна і гінгівіт. Спосіб включає крок введення комреакція. Двоє пацієнтів лікувалися приблизно 5 позиції срібла від одного до п'яти разів у день як мл (біля однієї чайної ложки) кожної композиції рідина для полоскання рота, поки була відповідна даного винаходу два рази в день протягом двох реакція. Кожний із двох пацієнтів лікувалися комднів. Пацієнти видужали за три дні. позицією як рідиною для полосканні рота. Повне Молочниця (Candida), Спосіб включає крок зникнення симптомів було протягом трьох днів введення приблизно 5-25 мл композиції срібла (гінгівіт) і протягом одного дня (галітоз). від одного до п'яти разів у день як піхвовий душ, Запалення органів таза. Спосіб включас крок поїш була відповідна реакція. П'ятеро пацієнтів введення приблизно 5-25 мл композиції срібла лікувалися приблизно 10 мл (біля двох чайних від одного до п'яти разів у день як вагінальньїй ложок) кожної композиції даного винаходу два душ, поки була відповідна реакція. Один пацієнт рази в день протягом двох днів. Пацієнти видулікувався приблизно 5 мл (приблизно одна чайна жали протягом шести днів, ложка) композиції даного винаходу двічі в день. Кон’юктивіт. Спосіб включає крок введения Симптоми папістів зникли прогягом п'яти днів. приблизно декількох крапель композиції срібла Фарингіт. Спосіб включас крок введення комвід одного до п'яти разів у день у заражене око, позиції срібла від одного до п'яти разів у день у поки була відповідна реакція. Двоє пацієнтів лікувигляді полоскання, поки була відповідна реакція. валися приблизно декількома краплями композиКожний і чотирьох пацієнт лікувалися приблизно ції даного винаходу в кожне з заражених очей десятьма мл (дві чайні ложки) композиції даного два рази в день. Пацієнти видужали за один винаходу тричі в день Симптоми пацієнтів зникли день. протягом шести днів. Зовнішні поранення й інфекція (включаючи Ретровірусна інфекція (HlV). Спосіб включає Staphylocоccuc шкірні інфекції, септичні виразки й крок введення композиції срібла, що включає від інфіковані нариви). Спосіб включає крок введе5 до 40 ppm срібла, від одного до п'яти разів у нии композиції срібла від одного до п'яти разів на день перорально, поки була відповідна реакція. день до зараженої площі, поки була звороша реОдин пацієнт, що виявляє HIV (вірус імунодефіакція. Шість пацієнтів приймали приблизно 5 мл циту людини), лікувався приблизно 5 мл (прибли(біля однієї чайної ложки) кожної композиції за зно одна чайна ложка) композиції даного винаходаним винаходом двічі в день. Пацієнт видужали ду двічі в день. Симптоми пацієнтів зникли прогягом трьох днів. протягом п'яти днів. Зовнішній отит. Спосіб включає крок введенСинусит і риніт. Спосіб включає крок введення композиції срібла від одного до п'яти разів на ня композиції срібла від одного до п'яти разів у день у заражене вухо, поки була відповідна реакдень у ніс, поки була відповідна реакція. Шестеро ція. Шість пацієнтів лікувалися приблизно двома пацієнтів з назальними інфекціями (чотири із сикраплями композиції даного винаходу в заражені нуситом і два з ринітом) лікувалися приблизно уші тричі а день. Пацієнти видужали протягом двома композиції даного винаходу для носових чотирьох днів. проходів тричі в день. Пацієнти видужали протяСередній отит. Спосіб включає крок введення гом чотирьох днів. композиції срібла від одного до п'яти разів на Тонзиліт. Спосіб включає крок введення комдень у заражене вухо, поки була відповідна реакпозиції срібла від одного до п'яти разів у день у ція. Один паціатг лікувався приблизно двома кравигляді полоскання, поки була відповідна реакція. плями композиції даного винаходу в інфекційне Один пацієнт лікувався композицією даного вивухо тричі в день. Пацієнт видужав протягом чонаходу тричі в день. Пацієнти видужали протягом тарьох днів. семи днів. Грибкова шкірна інфекція. Спосіб включат Інфекція верхніх дихальних шляхів. Спосіб крок введения композиції срібла від одного до включає крок введення композиції срібла від одп'яти разів на день до зараженої площі, поки була ного до п'яти разів у день перорально, поки була відповідна реакція. Двоє пацієнтів лікувалися відповідна реакція. Двоє пацієнтів лікувалися приблизно десятьма мл (дві чайні ложки) кожної приблизно 5 мл (приблизно одна чайна ложка) композиції даного винаходу тричі в день. Пацієнкомпозиції даного винаходу тричі в день. Пацієнти видужали протягом восьми днів. ти видужали протягом шести днів. Гонорея. Спосіб включає крок введення комІнфекція сечовивідних шляхів. Спосіб вклюпозиції срібла до зараженої площі, поки була відчає крок введення композиції срібла від одного 51 91209 52 до п'яти разів у день перорально, поки була відввечері. Пацієнти лікувалися розчином срібповідна реакція. Троє пацієнтів лікувалися прибло/вода протягом перших п'яти (5) днів повного лизно десятьма мл (дві чайні ложки) композиції 15-денного іспиту, або якщо паразит був не цілданого винаходу від двох до трьох разів у день. ком знищений за п'ять днів, лікування срібПацієнти видужали протягом шести днів. лом/водою продовжувалося, поки паразит не Ці результати сумісні з різними аналізами in буде знищений, або до 15 дня, до початку досліvitro, як повідомлено в даному описі. По суті, комдження. позиція срібла надзвичайно ефективна проти У випадку пацієнта, де паразит був цілком великої кількості мікробів in vitro. Проте, аналізи знищений за два або три дні, срібло/воду продовказують, що ця ефективність залишається навжували давати до п'ятого дня, а в записах привіть у присутності великої кількості органічного мітка була зроблена, коли паразит був цілком матеріалу. Композиція срібла дуже ефективне in знищений. vivo, де органічний фон надзвичайно високий. У випадку пацієнта, у якого все ще виявлявся Ряд інших дезинфікуючих агентів не ефективні в паразит після прийому срібла/води протягом 15 присутності великої кількості органічного матеріднів, іспит було закінчено як звичайно, а цей паалу і/або занадто їдкі або токсичні для застосуцієнт був зареєстрований як пацієнт із невдалим вання in vivo. лікуванням. Додаткове вивчення малярії в Гані, Африка Для пацієнта, що лікувався менше п'яти днів, Інше регламентоване вивчення також було була записана дата повного зникнення паразита, проведено в Ghana. Метою даного вивчення було пацієнт продовжував приймати срібло/воду до застосовувати дуже специфічний протокол і зоп'ятого дня, і продовжував іспит до 15 дня. середитися тільки на лікувальних властивостях Аналізи крові: 10 ppm композиції срібло/вода даного винаходу Аналізи крові, що застосовувались: Досліпацієнтів, у яких інфекційна малярія. джувалася присутність (або відсутність) паразитів Метою даного протоколу був винахід процеу крові або пацієнтів аналізом з акридиновим жодури, за допомогою якої 10 ppm розчин срібвтогарячим фарбуванням, або аналізом з барвло/вода був отриманий відповідно до способів, ником Гімза на товстих або тонких мазках крові що тут аналізувалися для своїх можливих лікувакожного пацієнта. Кров пацієнтів аналізувалася в льних властивостей при лікуванні пацієнтів, у день нуль (0) для встановлення, що вони дійсно, яких інфекційна малярія з будь-якими з чотирьох фактично, мали активний випадок малярії. Якщо (4) зразків Plasmodium. Загальний огляд протокоаналіз крові підтвердив активний випадок малялу представлений нижче: рії, потім цього пацієнта обстежували для прийнІспити проводилися в медичних клініках або яття іспиту. Обстеження включало запис даних, лікарнях медиками (MD), що були дуже знайомі з таких як ім'я, вік, пацієнт повідомив про початок захворюванням і його відхиленням здоров'я. хвороби, інформування пацієнта, що їм необхідно Усього було 16 досліджуваних пацієнтів на лікапротягом іспиту, що вони заплатять при повній ря, і пацієнтам було необхідно приймати продукт згоді, і той факт, що незгода приведе до усунення срібла двічі в день протягом п'яти днів, так само з іспиту без винагороди. Пацієнтам, що погодияк здати аналіз крові за один день до початку лися приєднатися до іспиту, були видані письмові іспиту, і потім щодня, поки аналіз крові показав, інструкції, у яких їм пропонувалося, як приймати що паразит був усунутий менше, ніж за два дні. продукт срібла щодня, куди ходити щодня для Пацієнтам би заплатили, якби вони цілком доздачі аналізів крові, і підкреслювалася необхідтримувались схеми прийому срібла і при одерність повного дотримання протоколу іспиту, а жанні щоденних аналізів крові. також порядок оплати за кожний день. Деталі протоколу: Вищеописаний протокол строго дотримувавЧисло медиків (MD), включених в аналіз: 2 ся при найновішому вивченні в Ghana, Africa. Усі Число пацієнтів, перевірених лікарем: 16-8 пацієнти одержали те ж саме дозування, і їхня чоловіків і 8 жінок кров перевірялася щодня для дослідження існуПовне число днів для іспиту: 15 вання паразитів Plasmodia. Нижченаведений спиДоза 10 ppm композиції срібло/вода була дасок порцій у таблиці 4 ранніх вивчень, обговорена для лікування пацієнтів: Повна щоденна доза них вище (вивчення 1 і вивчення 2), так само як і однієї унції розділена на дві еквівалентні дози; нове вивчення 3, що слідував за протоколом, половина унції (3 чайні ложки) приймається врарозташованим безпосередньо тут. нці і половина унції (3 чайні ложки) приймається Короткий опис Таблиця 4 Вивчення Кількість пацієнтів Вік Чоловіків/жінок Середнє щоденне дозування Найкоротший час відновлення 1 11 8-75 NA 10 мл 3 дні 2 16 2-90 NA 5мл 3 дні 3 16 3-61 8/8 15мл 2 дні 4 13 15-57 6/7 15мл Здні 53 Вивчення Найдовший час відновлення Середній час відновлення # пацієнти, що перевірені на plasmodia # пацієнти, w. plasmodia # невдале лікування 91209 1 7 днів 5 днів 0 0 0 54 Продовження таблиці 4 2 10 днів 6,3 дні 7 0 0 3 8 днів 4,3 дні 16 0* 0 4 6 днів 4 дні 13 0* 0 # Часи відновлення відмічали у пацієнтів, які не мали симптомів прояву хвороби, як планувалося лікарями. * Кожний з цих пацієнтів перевірявся щодня протягом 14 днів. Після закінчення шести днів, кожний з їх зразків крові аналізували на відсутність Plasmodia. Видно, що 10 ppm розчину срібло/вода за даним винаходом мав істотні позитивні ефекти проти паразита малярії. Доказ ефективності 100 ppm срібла проти малярії (in vitro) Введення У глобальному масштабі, малярія була і залишається головною проблемою охорони здоров'я. Хвороба викликана паразитичним протозоа роду Plasmodium. Цикл життя даного організму є складним із паразитизмом, при якому чергується полова репродуктивність в безхребетному (москіті) хазяїні з безстатевою репродуктивністю в хребетному хазяїні, птахи та рептилії також служать хазяїнами для малярійних паразитів. Частина циклу життя в москіті являє собою фазу спороутворення, що приводить до формування спорозоїдів, які вводяться вектором хребетному хазяїну під час харчування. Спорозоїди дають початок фазі шизонту зі швидким збільшенням паразитів в еритроцитних та екзоеритроцитних ділянках. Паразит є позаклітинним протягом своєї фази спороутворення, переходячи до внутрішньоклітинного розміщення протягом шизогонних стадій розвитку. In vitro культивування паразита вимагає умов моделювання у векторі москіта для фази спороутворення циклу життя і для шизогонної фази, умов, що забезпечують екзоеритроцитні та еритроцитні розміщення у хребетних хазяїнах. Малярія є однієї із самих всесвітньо розповсюджених паразитичних хвороб та є не менш ніж третьою в світі серед головних інфекційних хвороб за показниками смертності. Протозойний паразит, що викликає малярію, належить роду Plasmodium. Чотири види протозойного Plasmodium, що викликають малярію: Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium malariae та Plasmodium ovale. Передаються переважно Anopheles mosquito, інфекції малярії можуть також відбутися через контакт з зараженою кров'ю, наприклад, при переливаннях крові. Класичні симптоми малярії включають лихоманку, головні болі, озноб, блювоту, тремор і конвульсії. У деяких рідких формах falciparum malaria можуть бути відсутніми озноб і лихоманка, а пацієнт може знаходитися в маревному стані або у комі. Періоди ремісії можуть тривати від декількох тижнів до декількох місяців. Серйозну анемію часто приписують причині смерті від інфекції малярії. Plasmodium falciparum: Цей паразит має кілька важливих особливостей. Вони включають зростаючу форму гаметоциту, повільну швидкість росту останнього і розміщення пігменту навколо ядра (біляядерний розподіл), що відсутній у гаметоцитах малярійних паразитів іншого примата. P. falciparum також відрізняється від інших видів, що паразитують на людях, своєю більшою вірулентністю та летальними ефектами, оскільки шизогонія еритроцитних стадій у значній мірі обмежена капілярами і синусоїдами внутрішнього органа. Популярна назва хвороби, викликаної P. Falciparum, є "триденна блискавична малярія". Матеріали і способи Цитратний сольовий розчин: Хлорид натрію 9 г Цитрат натрію 20 г Дистильована вода 1000 мл Барвник Гімза: Сатиновий порошок Гімза 75 г Абсолютний спирт 75 мл, Гліцерол 25 мл. Барвник Філда: Розчин Филда # 1 1. Розчинити 1,6 г метиленового синього в 1 літрі дистильованої води. 2. Розчинити 2,6 г Na2HPO4 (безводний) у розчині з етапу 1. 3. Розчинити 1 г азура 1 у розчині з етапу 2. 4. Розчинити 2,6 г KН2РО4 у розчині з етапу 3. 5. Помістити на слабке полум'я з перемішуванням або збовтуванням від 45 хвилин до 1 години. 6. Залишити при кімнатній температурі на 24 години. 7. Відфільтрувати. Розчин Філда # 2 1. Розчинити 2 г Eosin Y у 1 літрі дистильованої води. 2. Розчинити 2,6 г Na2HPO4 у розчині з етапу 1. 3. Розчинити 2,6 г KН2РО4 у розчині з етапу 2. 4. Відфільтрувати. Барвник Райта: Порошок барвника Райта 6,0 г Порошок барвника Гімза 0,6 г Метанол 1,000 мл Перемішувати всю ніч і відфільтрувати до застосування. Людська сироватка/плазма крові групи АВ+ Людська сироватка/плазма крові групи А+ RPMI -1640 неповне середовище 55 91209 56 (Personal Communication Dr. Sutar, Haffkine мували в 10% розчині барвника Гімза близько 30Institute, Parel) 40 хвилин, потім промивали під водопровідною RРМІ -1640 повне середовище водою. (Personal Communication Dr. Sutar, Haffkine Паразитний індекс Institute, Parel) Паразитний індекс обчислювали шляхом роЗбір та обробка інфікованої крові зрахувати кількості паразитів на 100 еритроцитів Інфіковані паразитами еритроцити були у тонких кров'яних мазках. Мінімум 100 полів отримані шляхом збору 6 мл аліквот крові в1 мл 10000 RBCs були досліджені для цих цілей. лимоннокислого соляного розчину венопункцією Системи культур клінічно діагностованих хворих, інфікованих маКультури у чашках готували з 5% гематокрилярією Plasmodium vivax і Plasmodium Falciparum, том і близько 1% паризитемією. Чим нижче почащо спостерігаються в Kastruba Infections Disease ткова паразитемія, тим більше підвищення числа Hospital, Бомбей. Зразки крові були зібрані в 10 паразитів, що з'являються в процесі in vitro росту. мл стерильні пробірки. Зразки були перевірені Чутливість до препарату шляхом підготовки тонких мазків і фарбування 16 мм стерильні мікролункові планшети з цих мазків 10% барвником Гімза/Філда/Райта для пласким дном використовували для визначення виявлення і підтвердження зразків малярійного чутливості до препаратів. Кожний використовупаразита. Регістрували рівень або відсоток уравали для одного зразка. Перші дві лунки були ження паразитом. використані для контролю, до них помістили 50 Інфіковані паразитами кров'яні клітини двічі мкл ВММ пацієнтів або культуру та 50 мкл повнопромили один раз неповним і один раз повним го середовища RPMI і без препаратів. Для аналісередовищем та 6% суспензією приготували в зу 50 мкл культури або ВММ пацієнтів змішували повному середовищі. Культури розподілили у в лунці, що містить 50 мкл розроблених срібних чашки Петрі по 0,5 мл суспензії в кожну чашку. До наночастинок (ESNP) у різних концентраціях. них додали 1,5 повного середовища і чашки інкуМікролункові планшети накривали і інкубували бували в атмосфері 5% О2 і 14-17% СО2. Серепри температурі 37°С у контейнері близько 48 довище щодня мінялося шляхом видалення стагодин. Більшість паразитів увійшла до стадії широго середовища стерильною насосною піпеткою зонту наприкінці 48 годин інкубування. Після інкуі додавання 1,5 повного середовища. Культури бації за допомогою мікропіпетки витягали суперпідтримувалися додаванням свіжих клітин (груп натантне середовище, кров з кожної лунки крові А+ і АВ+; промивну і клітинну суспензію гобралася з метою виготовлення мазків і досліджутували таким самим способом) через тиждень із валася на предмет шизонтного розвитку. Аналіз промиванням 2 рази в тиждень доти, поки цільопроводили шляхом підрахунку кількості паразитів вий паразитний індекс досягав >1%. Якщо мініна пофарбованих плівках до і після інкубації і мальний паразитний індекс був менш 1%, тоді визначення ESPN інгібування шизонтоного утвосуміш кров'яного середовища використовували рення. Для правильного аналізу контрольна лунбезпосередньо для чутливості препарату (Thanh, ка повинна була показувати >10% шизонтної ма2001) і (Thanh,2002). турації. (Wemsdorfer and Wernsdorfer,1995). Виготовлення мазків і методика фарбування Культури промивалися двічі в тиждень. Для Результати промивання культури забирали з чашок і поміщали у центрифужні пробірки. Близько 5 мл неповЗразки % зниження паразитів ного середовища додавали в кожну центрифужну Plasmodium falciparum 94% пробірку і ретельно перемішували. Пробірки Plasmodium vivax 92% центрифугували при 1000-1500 оборотів/хв. блиPlasmodium berghei 90% зько 10 хвилин. Через 10 хвилин, пробірки витягали з центрифуги, а супернатантну рідину злиIn vitro аналіз, використовуваний для визнавали. Пізніше культури піддавали двом або більш чення протималярійної ефективності показав у однаковим промиванням: одно з неповним RPMIпідсумку, що ESPN 100 ppm здатно знижувати 1640, а інше з повним RPMI-1640 середовищем. кількість паразитів in vitro. Що дуже важливо, тоМазок готували з кожною культурою й офарблюму що паразити були зібрані у пацієнтів з ригіднівали барвником Гімза/Філда/Райта. Близько 1,5 стю, підвищеною температурою і класичними мл середовища додавали до кожної чашки, а симптомами малярійної інфекції. мазки перевіряли під оптичним мікроскопом на Визначення ефективності 10 ppm срібла пропредмет паразитичного індексу або відсотка пати Tuberculosis backteria разитимії, результати записували для кожної куА) Мета льтури. Свіжі еритроцити додавали до кожної Метою даного приклада є демонстрація ефечишки щотижня. ктивності композиції срібла, що є предметом даВиготовлення мазків ного винаходу проти бактерії, що викликає туберКраплю культури переносили з чашки на кульоз. Цей приклад описує методики для оцінки предметне мікроскло. Робили тонкий мазок і виданого винаходу на предмет протитуберкульозсушували на повітрі. Цей мазок фіксували шляної ефективності. Методологія базується на Анахом занурення предметного скла в судину для лізі Туберкульозної Активності, прийнятому ЕРА фарбування, наповнена чистим спиртом. Готува11 грудня 1985. ли 10% розчин барвника Гімза і використовували Б) Матеріали і методи. для фарбування мазків. Предметні стекла витри 57 91209 58 Матеріали. Композиція срібла, що є предмеведенням 10-6. Три 1 мл аліквоти відповідних ротом даного винаходу, включала 10 ppm срібла у зведень відфільтрували мембраною шляхом воді. Композиція срібла оцінювалася з викориспершого додавання 10-20 мл PHSS до основи танням рідини в рідкій матриці проти фільтра і потім додавання 1 мл аліквоти відповіMycobacterium bovis BCG (TMC 1028). Цей оргадного розведення. Фільтр споліскували приблизнізм викликає туберкульоз у тварин і може виклино 100 мл PHSS. Фільтри асептично видалили з кати туберкульоз у людей. Даний організм викооснови фільтра та помістили на чашки з агаром ристовувався як "замісник" для М. tuberculosis, 7Н11. Пластини інкубували в зволоженій камері головного збудника людського туберкульозу, при температурі 37±2°С 21 день. оскільки, як показали аналізи, сприйнятливість до Контроль фенолу. Щоб продемонструвати нього подібна сприйнятливості до туберкульозу мінімальну життєздатність і стійкість, культуру М. tuberculosis. Аналізований організм був піддаперевірили проти 0,8% фенольного розчину. 1 мл ний дії композиції срібла у двох повторностях аліквоту аналізованої культури організму помісчотири рази і кількісно використовуючи мембрантили в 9 мл розчину фенолу, урівноважений при ну фільтрацію. 25±0,5°С, і інкубували 20 хвилин. Після періоду Методика. Взяли та розморозили ампулу заекспозиції 1 мл розчину фенол/організм видалимороженої маткової культури. Рівний об'єм були і додавали до 9 мл NEUB. Десятикратні серійні ферного желатину (BUGE) додали до клітинної розведення приготували в холостих пробах розведення, що містять 9 мл NEUB з розведенням суспензії і гомогенізували Teflon (торгова марка 10-6. Три 1 мл аліквоти відповідних розведень політетрафтороетилену) тканинним гомогенізабули відфільтровані мембраною шляхом першого тором протягом 1 хвилини з витримуванням кульдодавання 10-20 мл PHSS до основи фільтра і тури при 0-4°С у крижаній ванні. Гомогенізовану потім додавання 1 мл аліквоти відповідного розклітинну суспензію змішали із сольовим розчином ведення. Фільтр споліскували приблизно 100 мл Tween 80 (торгова марка полісорбату) (ST80) PHSS. Фільтри асептично видалили з основи фідо приблизно 107 КУО/мл. льтра та помістили на чашки з агаром 7Н11. ЧаТитрування проб. Десятикратні послідовні шки інкубували в зволоженій камері при темперарозведення культур приготували в судинах для турі 37±2°С 21 день. розведення, що містять 9 мл нейтралізуючого Перевірка нейтралізації. 1 мл аліквоту дезибульйону з розчиненням 10-6. Три 1 мл аліквоти нфікуючого засобу додали до 8 мл NEUB. Дезивідповідних розведень відфільтрували мембранфікуючий засіб/нейтралізатор довели до тієї ною шляхом першого додавання 10-20 мл фізіосамої температурі, що і аналізовані зразки. 1 мл логічного сольового розчину (PHSS) до основи аналізованої культури організму додали до суміфільтра і потім додали 1 мл аліквоту відповідного ші та перемішали. Інкубування продовжили пророзведення. Потім фільтр споліскували приблизтягом часу, необхідного для фільтрування зразка. но 100 мл PHSS. Фільтри асептично видалили з Крім того, 1 мл аліквоту аналізованого організму основи фільтра та перенесли на агарові чашки додали до 9 мл NEUB та перемішали (1:10 роз7Н11. Чашки інкубували в зволоженій камері при ведення). Десятикратні серійні розведення обох температурі 37±2°С 21 день. пробірок приготували в холостих пробах для розПозитивний контроль. Приготували пробірку, ведення, що містять 9 мл NEUB з розведенням що містить 9 мл ST80, і врівноважили при 10-6. Три 1 мл аліквоти відповідних розведень 20±0,50°С. У час 0 1 мл аналізованої культури відфільтрували на мембрані першим додаванням організму додали до пробірки (з розведенням 10-20 мл PHSS до основи фільтра та потім дода1:10). Зразок витримували 60 хвилин. Десятикраванням 1 мл аліквоти відповідного розведення. тні серійні розведення приготували у холостих Фільтр промили приблизно 100 мл PHSS. Фільтри пробах розведення, що містять 9 мл NEUB з розасептично видалили з основи фільтра та помісведенням 10-6. Три 1 мл аліквоти відповідних ротили на чашки з агаром 7Н11. Чашки інкубували в зведень відфільтрували мембраною шляхом зволоженій камері при температурі 37±2°С 21 першого додавання 10-20 мл фізіологічного содень. льового розчину до основи фільтра, а потім доС) Результат давання 1 мл аліквоти відповідного розчину. ФіПочатковий титр випробуваної культури льтри промили приблизно 100 мл PHSS. Фільтри складав 4,7x107 КУО/мл. Титр позитивного контасептично видалили з основи фільтра і помістили ролю складав 6,5x107 КУО/мл. Середовище, вина чашки з агаром 7Н11. Чашки інкубували в звокористовуване в даному дослідженні, ефективно ложеній камері при температурі 37±2°С 21 день. демонструвало нейтралізацію з відсотком відноАналіз. Дві камери 25x150 мм, що містять 9 влення 95,2% у розчині дезінфікуючий замл аналізованого зразка були урівноважені при сіб/нейтралізатор, у порівнянні із холостою про20±0,5°С у водяній ванні. У кожну пробірку, що бою середовища. містить аналізований дезинфікуючий засіб (наДля аналізованих чашок очікувані підрахунки приклад, композицію срібла), додавали 1 мл анабули недооцінені і тому для представлених підлізованої культури організму. Вміст пробірки змірахунків використовується знак ">", щоб продешали закручуванням та помістили назад у водяну монструвати, що підрахунок виконали та його ванну. Через 15, 30, 45 та 60 хвилин 1,0 мл суточне значення лежить за межами виявлення для спензії клітин у дезинфікуючому засобі додавали висіяних розведень. до 9 мл NEUB і ретельно змішували. ДесятикратВ обчисленні логарифма і відсотка зниження ні серійні розведення приготовили в холостих числа М. bovis дезінфікуючи засобом, передбачупробах розведення, що містять 9 мл NEUB з роз 59 91209 60 ваний підрахунок, що мав значення "більше ніж", але зараз організм мутував до такого ступеня, що у підсумку був приведений як логарифм і відсоток виявляє абсолютну стійкість до пеніциліну. Назниження числа "менше ніж" "