Спосіб зберігання вакцини, яка містить ад’ювант на основі алюмінію

Реферат: Винахід стосується контейнера для зберігання і/або введення вакцинної композиції, де даний контейнер (і) містить вакцинну композицію, що містить антиген вірусу гепатиту В, адсорбований на ад'юванті у вигляді оксигідроксиду алюмінію, і закритий пристроєм, який діє як пробка, де поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покрита фторполімером. UA 113049 C2 (12) UA 113049 C2 UA 113049 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Даний винахід стосується способу зменшення і/або сповільнення десорбції антигену, який був адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, а також його продукту, а саме поєднання вакцинної композиції, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, і контейнера для цієї композиції, вказаний контейнер має конкретні характеристики. Велике число антигенів здатне до адсорбції на ад'юванті на основі алюмінію, зокрема, при нейтральному значенні pH або значенні pH близькому до нейтрального, яке є тим значенням pH, яке необхідне для композицій, призначених для введення ссавцям, включаючи людину. За умови, що кількість ад'юванта є такою, що антиген може фактично адсорбуватися на ад'юванті в оптимальній кількості при змішуванні двох хімічних сполук разом, максимальний ступінь адсорбції досягається дуже часто. Однак з плином часу залежно від умов навколишнього середовища процент адсорбованого антигену (індекс адсорбції) може знижуватися, і ця десорбція може ставати фактором нестабільності. Відомі умови навколишнього середовища, які можуть вплинути на процент адсорбованого антигену (індекс адсорбції), включають в себе, наприклад, коливання значення pH (навіть незначні коливання) і додавання одного або декількох компонентів середовища або одного або декількох додаткових антигенів, які можуть конкурувати з першим антигеном за ділянки адсорбції на ад'юванті. Як правило, готові до застосування багатодозові вакцинні композиції вміщують у флакони, наприклад, скляні флакони, закриті пластиковою пробкою. Аналогічно, разова доза вакцинної композиції може бути вміщена в однодозову ампулу або готовий до ін'єкції шприц, як правило, що складається з резервуара, який містить вакцину, плунжера, що закриває резервуар з його дистального кінця, і пристрою для введення, такого як голка, прикріпленого до його проксимальному кінця. Відповідно до альтернативного стандартного способу наповнення доза вакцини може також бути вміщена в безголковий шприц, до якого під час ін'єкції практикуючий лікар додає окремо упаковану голку. Резервуар шприца, як правило, виготовляється або зі скла або з пластику, а плунжер або пробка просто виготовляються з пластику, такого як хлорбутиловий або бромбутиловий полімер, без спеціального ламінування. Стандартні скляні або пластикові шприци постачаються на ринок, наприклад, компаніями Becton-Dickinson; Gerresheimer AG, Schott AG, Німеччина; Nuova Ompi srl, Італія; і West Pharma/Daykio. Для того, щоб полегшити ковзання, плунжер або пробка можуть бути навантажені в емульсію силікону у воді, так щоб на їх поверхні утворювалася силіконова плівка. Стандартні плунжери/пробка постачаються на ринок, наприклад, компаніями Helvoet, Stelmi і West Pharma; деякі з них продаються вже покриті силіконовою плівкою (номер B2 від West Pharma). Незалежно від контейнера, що використовується для зберігання і пристрою, що використовується для закривання контейнера, введення під час ін'єкції складається з використання шприца і ковзання плунжера або комбінації пробка/плунжер так, щоб здійснити доставку вакцини. Суть винаходу Авторами даного винаходу було виявлено, що матеріал самого контейнера, а також матеріал пристрою для закривання контейнера, може впливати на індекс адсорбції. Автори даного винаходу відмітили, що вакцинна композиція, яка містить поверхневий антиген вірусу гепатиту В (HBsAg) з доданим як ад'ювант ад'ювантом на основі алюмінію, і вміщена у вигляді разової дози в стандартний шприц закритий стандартною пробкою, мала різний індекс адсорбції при зберіганні в однакових умовах і протягом однакового періоду часу (від декількох днів до декількох місяців) залежно від того, чи зберігався шприц у вертикальному або горизонтальному положенні. Те ж явище спостерігалося і у випадку флаконів. Практичним висновком із зберігання в різних положеннях є те, що вакцина, яка знаходиться в резервуарах, що зберігаються вертикально, не контактувала з пробкою, в той час як в резервуарах, що зберігаються горизонтально, контакт між композицією і пробкою мав місце. Після певного періоду часу автори даного винаходу виміряли рівень адсорбції HBsAg і встановили, що рівень адсорбції HBsAg в резервуарах, що зберігаються горизонтально, був набагато нижчим. Це вказує на те, що матеріал стандартної пробки (хлорбутиловий або бромбутиловий полімер) є причиною зниження адсорбції. Розв'язанням цієї проблеми є або запобігання контакту між вакцинною композицією, що містить ад'ювант, і пробкою, виготовленою з матеріалу, який сприяє зниженню адсорбції, або застосування пробки, виготовленої з матеріалу, який не сприяє зниженню адсорбції. У одному варіанті здійснення даний винахід стосується способу і пристрою, що використовує пробку ™ ™ покриту плівкою з фторполімеру, такого як Teflon або Teflon -подібна речовина (така як ™ ™ Omniflex від Helvoet Pharma або Fluorotec від West Pharma), які зменшують або усувають десорбцію, що викликається пробкою. 1 UA 113049 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Докладний опис винаходу У одному аспекті даний винахід стосується першого способу зменшення і/або сповільнення десорбції антигену, спочатку адсорбованого на ад'юванті на основі алюмінію, під час зберігання, даний спосіб включає в себе (i) наповнення контейнера вакцинною композицією, що містить антиген, спочатку адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію; і (ii) закривання цього контейнера пристроєм, який діє як пробка, поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покривається фторполімером. Іншими словами, даний винахід стосується першого способу наповнення і зберігання композиції, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, який включає в себе (i) наповнення контейнера вакцинною композицією; і (ii) закривання цього контейнера пристроєм, який діє як пробка, поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покривається фторполімером. Аналогічним чином, даний винахід також стосується застосування пристрою, діючого як пробка, для закривання контейнера, що містить вакцинну композицію, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покривається фторполімером. Контейнер може являти собою, наприклад, флакон або резервуар шприца. Це також стосується всіх інших аспектів даного винаходу, описаних нижче. Вакцинна композиція може бути рідкою або твердою, наприклад, ліофілізованою. Ліофілізована композиція може бути у вигляді порошку. Під час ін'єкції пацієнту ліофілізовану композицію відновлюють відповідним фармацевтичним розчинником. Це також стосується всіх інших аспектів даного винаходу, описаних нижче. Відповідно до техніки, що склалася в даній галузі для вказаних цілей практикою, потрібно розуміти, що термін "адсорбований антиген" або "спочатку адсорбований" не передбачає того, що 100 % кількості антигену є фактично адсорбованими. Це також стосується всіх інших аспектів даного винаходу, описаних нижче. Як указано вище, пристрій може являти собою пластиковий пристрій, виготовлений, наприклад, з хлорбутилового або бромбутилового полімеру. Цей стандартний пристрій обробляють фторполімером; зокрема, він може бути підданий обробці поламінарним потоком фторполімеру, ця обробка ламінарним потоком проводиться відносно всього пристрою або щонайменше відносно поверхні пристрою, що контактує з композицією. Обробка поламінарним потоком робить можливою нанесення дуже тонкого шару (наприклад, плівки) фторполімеру. Як буде зрозуміло, площа покритої поверхні може бути більшою площі, що контактує з композицією. Крім того, в одному варіанті здійснення винаходу всю поверхню пристрою покривають фторполімером. Використовуваний в даному винаході фторполімер може являти собою, наприклад, політетрафторетилен (ПТФЕ), політетрафторпропілен (ПТФП), фторований етилен-пропілен (ФЕП, співполімер гексафторпропілену і тетрафторетилену), поліхлортрифторетилен (ПХТФЕ), перфторалкокси-співполімер (ПФА), полі(етилен-тетрафторетилен-співполімер) (ЕТФЕ), полі(етиленхлортрифторетилен) (ЕХТФЕ), полівінілфторид (ПВФ) або полівініліденфторид (ПВДФ). Розкриті в даній заявці спосіб/застосування дозволяють зменшити швидкість десорбції антигену, адсорбованого на ад'юванті на основі алюмінію, і/або процент десорбції (або індекс десорбції) після певного часу зберігання при даній температурі. Індекс десорбції може бути виражений таким чином: (кількість неадсорбованого антигену)/(загальна кількість антигену, що міститься в композиції). Як правило, індекс десорбції може бути оцінений шляхом центрифугування вакцинною композиції (зразків, відібраних у час Т=0 і в кінці експерименту); відбору супернатанту, який містить десорбований антиген; і потім кількісного визначення десорбованої фракції шляхом визначення антигену в супернатанті і в цілій вакцині за допомогою відповідного способу, вибраного відповідно до природи антигену. Процент десорбції (індекс десорбції) може розрізнюватися у різних антигенів залежно від сили/слабкості взаємодії між антигеном і ад'ювантом. Проте, вважається, що процент десорбції (або індекс десорбції) може бути зменшений на 10-15 і 20 % в порівнянні зі стандартним способом наповнення із застосуванням стандартних пробок вказане зменшення вимірюється через 1 або 2 місяці після дати наповнення. Протягом цього періоду часу зберігання здійснюється при температурі від +5 до 25 °C. Легко зрозуміти, що процент адсорбції (індекс адсорбції) можна легко обчислити, знаючи процент десорбції (або індекс десорбції). Коли пристрій застосовується не тільки для закривання контейнера, але також для доставки композиції, що міститься в контейнері, наприклад, шляхом ковзання плунжера шприца, то рекомендується силіконізувати внутрішню поверхню контейнера. 2 UA 113049 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Однак було виявлено, що силікон в деяких випадках може негативно впливати на адсорбцію. Крім того, індекс десорбції, що спостерігається в композиціях, які зберігаються в шприцах, стандартно силіконізованих шляхом простої обробки поверхні емульсією силікону у воді, може бути вищим, ніж індекс десорбції, що спостерігається в композиціях, які зберігаються в несиліконізованих контейнерах. Автори даного винаходу передбачили, що хоча силікон приєднується до внутрішньої поверхні контейнера, він залишається у вільній формі, і після струшування або перемішування може відділятися від внутрішньої поверхні і перейти у вміст контейнера (вакцинну композицію). Авторами даного винаходу було виявлено, що ця вищезгадана проблема може бути вирішена шляхом використання контейнера, у якого внутрішні поверхні покриті полімеризованим силіконом. Такий контейнер може бути отриманий шляхом обробки внутрішньої поверхні контейнера емульсією силікону у воді з подальшим нагріванням контейнера, наприклад, при температурі від 270 до 330 °C протягом 30 хвилин. Після нагрівання силікон полімеризується на внутрішній поверхні контейнера і тому більше не може змішуватися з композицією. Полімеризація силікону дозволяє зменшити поверхневу енергію силікону, до якої може бути чутлива вакцинна композиція. Крім того, процедура силіконізації, що включає в себе етап полімеризації, (i) є більш точною і більш однорідною, ніж стандартна процедура силіконізації; і (ii) дозволяє зменшити кількість використовуваного силікону (тобто, контейнера, що наноситься на внутрішню поверхню) приблизно в 10 разів без втрати мастильного ефекту. Наприклад, при стандартному процесі силіконізації від 400 до 1000 мкг силікону використовується для шприца, призначеного для доз 0,5-1 мл (загальна площа внутрішньої поверхні резервуара 0,5-1 мл шприца становить 2 приблизно 8 см , в даному прикладі ця поверхня відповідає кількості силікону від приблизно 50 2 до 125 мкг/см ), в той час як від 40 до 100 мкг силікону є достатнім для того ж шприца 2 (приблизно від 5 до 12 мкг/см ), якщо силікон наноситься на внутрішню поверхню контейнера і потім полімеризується, наприклад, шляхом нагрівання. Той факт, що внутрішня поверхня шприца покрита невеликою кількістю полімеризованого силікону в більш однорідному вигляді в порівнянні з невеликою кількістю вільного силікону, забезпечує гладке ковзання несиліконізованих плунжерів, в той час як такі плунжери непрацездатні в шприцах, покритих невеликою кількістю вільного силікону. Це є причиною того, чому даний винахід також стосується другого способу зменшення і/або сповільнення десорбції антигену, адсорбованого на ад'юванті на основі алюмінію, даний спосіб включає в себе наповнення контейнера вакцинною композицією, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, де внутрішня поверхня контейнера покрита полімеризованим силіконом. Іншими словами, даний винахід стосується другого способу наповнення і зберігання вакцинною композиції, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, даний спосіб включає в себе наповнення контейнера композицією, де внутрішня поверхня контейнера покрита полімеризованим силіконом. Аналогічним чином, даний винахід також стосується застосування контейнера, що має внутрішню поверхню, покриту полімеризованим силіконом, для зберігання вакцинною композиції, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію. Переважно, контейнер, що має внутрішню поверхню, покриту полімеризованим силіконом, виготовлений з пластику або скла. Переважно, контейнер являє собою резервуар шприца. Кількість полімеризованого силікону, що наноситься на внутрішню поверхню контейнера, 2 2 складає від 3 до 25 мкг/см ; переважно, від 5 до 20 мкг/см ; більш переважно, від 5 до 15 2 мкг/см . Як можна легко зрозуміти, контейнер, що використовується в першому способі даного винаходу, також може бути покритий полімеризованим силіконом, як описаний вище. У іншому аспекті даний винахід стосується: А - Контейнеру, (i) який містить вакцинну композицію, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію; і, (ii) який закритий пристроєм, який діє як пробка, де поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покрита фторполімером; В - Контейнеру, (i) що має внутрішню поверхню, покриту полімеризованим силіконом; і (ii) що містить вакцинну композицію, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію; і С - Контейнеру, (i) що має внутрішню поверхню, покриту полімеризованим силіконом; (ii) що містить вакцинну композицію, яка містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію; і (iii) закритому пристроєм, який діє як пробка, де поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покрита фторполімером. 3 UA 113049 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Іншими словами, даний винахід стосується вакцинною композиції, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, яка знаходиться і зберігається в контейнері, (i) що має внутрішню поверхню, покриту полімеризованим силіконом; і/або (ii) закритому пристроєм, який діє як пробка, де щонайменше поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покрита фторполімером. Вакцинні композиції, що зберігаються в контейнерах відповідно до даного винаходу, включають в себе: Вакцинну композицію, що містить антиген, в якій мінімальна кількість антигену, необхідна для цільового застосування (наприклад, у вигляді дози для введення людині), адсорбована на ад'юванті на основі алюмінію; Вакцинну композицію, що містить антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, де дана вакцинна композиція, вміщена в контейнер для застосування в даному винаході, має процент адсорбції щонайменше: (a) 65-70 % від загальної кількості антигену, що знаходиться в композиції, коли безпосередньо після розфасування композиція зберігається при температурі (i) 5±3 °C протягом 2-3 років; або при температурі (ii) 25±3 °C протягом 2-3 місяців; або (b) 80-90 % від загальної кількості антигену, що знаходиться в композиції, коли безпосередньо після розфасування композиція зберігається при температурі 5±3 °C протягом 18 місяців; і Вакцинну композицію, що містить ад'ювант на основі алюмінію і антиген, здатний адсорбуватися на ад'юванті на основі алюмінію, в якій процент антигену, адсорбованого на ад'юванті на основі алюмінію щонайменше на 5 або 10 % більше, ніж процент, що спостерігається коли та ж вакцинна композиція міститься в стандартному контейнері, що має непокриті внутрішні поверхні або внутрішні поверхні, покриті неполімеризованим силіконом, порівняння між процентами адсорбції антигену проводиться після зберігання контейнерів, що містять вакцину, при температурі 25 °C протягом 2 місяців, починаючи від дня наповнення контейнерів. Для цілей даного винаходу контейнер може являти собою резервуар будь-який типу, такий як флакони або шприци, і може містити декілька доз (багатодозовий контейнер) або одну дозу (однодозовий контейнер). Наприклад, контейнер може являти собою шприц або частину шприца, що має резервуар, який містить вакцину, закриту пристроєм, який діє як пробка і як система для вивільнення вакцини під час введення (наприклад, за допомогою плунжера). Пристрій, який діє як пробка, може бути плунжером. Пробки і/або плунжери для застосування в даному винаході постачаються на ринок, ™ ™ наприклад, компаніями Helvoet Pharma (Omniflex технологія) і West Pharma (Fluorotec технологія). Скляні резервуари шприців, покриті полімеризованим силіконом, для застосування в даному винаході постачаються на ринок, наприклад, компаніями Nuova Ompi srl, BectonDickinson і Gerresheimer (технологія запікання). Антиген і ад'ювант на основі алюмінію можуть являти собою будь-який антиген і будь-який ад'ювант на основі алюмінію, зрозуміло, при умові, що вони обидва здатні взаємодіяти один з одним. Крім того, потрібно розуміти, що даний винахід представляє особливий інтерес для пари антиген-ад'ювант на основі алюмінію, що має відносно слабку силу взаємодії; ця сила взаємодії, можливо, залежить від умов навколишнього середовища. Цю силу взаємодії можна оцінити за допомогою різних тестів. Наприклад, ад'ювант на основі алюмінію може бути використаний для утворення різних пар антиген-ад'ювант (антиген змінюється в кожній парі, а ад'ювант залишається тим же самим). Потім додається велика кількість хімічної сполуки, здатної конкурувати з антигеном за взаємодію з ад'ювантом. Різні препарати центрифугують і відбирають супернатанти. На закінчення, визначають кількість десорбованого антигену в супернатантах, і в результаті можна провести порівняння антигенів по силі їх взаємодії з ад'ювантом. Відносно слабкою силою взаємодії є сила взаємодії, що приводить до адсорбції, на яку може вплинути негативний чином стандартне наповнення композицією, що містить комплекс антиген-ад'ювант на основі алюмінію. Різні елементи, залучені до виробництва контейнера, такі як, наприклад, латекс, антиоксиданти, силікон і іони металів (наприклад, цинку і вольфраму), можуть дестабілізувати антиген-ад'ювантний комплекс. Термін "адсорбція", як правило, означає будь-яке явище, спрямоване на утворення антигенад'ювантного комплексу, що включає в себе крім іншого сили електростатичної взаємодії, гідрофобні взаємодії або лігандний обмін. Таким чином, антиген може бути приєднаний до поверхні сітчастої структури ад'юванта на основі алюмінію або впроваджений всередину її після спільного осадження з ад'ювантом на основі алюмінію. 4 UA 113049 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Використовуваний в даному винаході ад'ювант на основі алюмінію може являти собою оксигідроксид алюмінію (AlOOH), такий як продукт, що поставляється на ринок компаніями Brenntag AG (Superfos) або Reheis Corp.; і гідроксифосфат алюмінію (AlOHPO4), такий як продукт, що поставляється на ринок компанією Alphos. Щоб вакцинна композиція була ефективною, мінімальна кількість антигену, необхідна для адсорбції на ад'юванті на основі алюмінію, істотно залежить від самого антигену, і вона може бути легко визначена фахівцями в даній галузі техніки. У конкретному варіанті здійснення винаходу антиген може являти собою поверхневий антиген вірусу гепатиту В (HBsAg). Особливо переважним є адсорбція HBsAg на AlOOH, оскільки HBsAg має ізоелектричну точку (ІЕТ) менше 7 (приблизно, 4-5), а AlOOH має точку нульового заряду (ТНЗ) більше 7 (приблизно, 9-11). Вакцинна композиція для застосування в даному винаході може містити один або декілька антигенів щонайменше один з них адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, при цьому інші антигени можуть також бути адсорбовані, або знаходитися в неадсорбованому стані. Відповідно до одного варіанту здійснення винаходу композиція для застосування в даному винаході включає в себе HBsAg, адсорбований на AlOOH (комплекс AlOOH-HBsAg), і другий антиген, який являє собою полірибозилрибітолфосфат (ПРФ) Haemophilus influenzae (HiB антигенний епітоп), переважно у вигляді кон'югату з білком-носієм (С), який може являти собою, крім іншого, ДТ або СТ. Відповідно до іншого конкретного варіанту здійснення винаходу у випадку, коли антиген, адсорбований на ад'юванті на основі алюмінію, являє собою HBsAg, вакцинна композиція може також містити як додаткові антигени один або декілька з наступних антигенів: дифтерійний анатоксин (ДТ) (дифтерійний антигенний епітоп); правцевий анатоксин (СТ) (правцевий антигенний епітоп); знешкоджений токсин (Ptdx), фімбрії, філаментний гемаглютинін (ФГА) і/або пертактин (69 кДа антиген) Bordetella pertussis (антигенний епітоп коклюшу); інактивований вірус поліомієліту серотипу 1, 2 або 3 (поліовірусний антигенний епітоп); і полірибозилрибітолфосфат (ПРФ) Haemophilus influenzae (HiB антигенний епітоп), переважно у вигляді кон'югату з білкомносієм (С), який може являти собою, крім іншого Dt або Tt. Як приклад, композиція може містити HBsAg, ДТ, СТ, Pt і ФГА, адсорбовані на AlOOH (комплекс AlOOH-HBsAg-ДТ-СТ-Pt-ФГА), поліовірусний антигенний епітоп і ПРФ-С, практично неадсорбований на AlOOH. Загалом, даний винахід є особливо ефективним, коли вакцинна композиція містить декілька антигенних епітопів, наприклад, 2, 3, 4, 5, 6 або більше, кожний з яких представлений одним або декількома антигенами (2, 3, 4 або 5), декілька антигенів адсорбовані на ад'юванті на основі алюмінію. Фактично, при стандартному способі наповнення, чим більша кількість антигенів/антигенний епітопів адсорбовано на ад'юванті на основі алюмінію, тим більш критичним виявляється явище дестабілізації, що викликається контейнером. Сила взаємодії між антигеном і ад'ювантом часто розрізняється у різних антигенів в композиціях, що містять декілька антигенів, антиген з найслабшою силою взаємодії виявляє найвищу схильність до десорбції в несприятливих умовах. Приклади і експериментальні результати А - нерозфасовану вакцинну композицію, що містить поверхневий антиген вірусу гепатиту В, дифтерійний анатоксин, правцевий анатоксин і антигенний епітоп коклюшу, кожний з яких був адсорбований на оксигідроксиді алюмінію, а також поліовірусний і неадсорбований Haemophilus influenzae В (HiB) антигенні епітопи, розподіляли на три категорії в однодозові шприци, характеристики яких були наступними: (1) стандартно силіконізовані скляні шприци зі стандартними пробками/плунжерами, виготовленими з неламінованого пластику; (2) стандартно силіконізовані скляні шприци з покритими фторполімером ™ пробками/плунжерами (West Pharma; Fluorotec технологія); і (3) шприци, внутрішня поверхня яких покрита полімеризованим силіконом (шприцева система Luercone™ фірми Gerresheimer, виготовлена по технології запікання), з покритими ™ фторполімером пробками/плунжерами (West Pharma; Fluorotec технологія). Нерозфасовану композицію розподіляли на 0,5 мл разові дози, кожна доза містила 10 мкг HBsAg, 30 Lf ДТ, 10 Lf СТ, 25 мкг Pt, 25 мкг ФГА, 40 DU (Д-антигенна одиниця) іПВ1, 8 DU іПВ2, 32 DU іПВ3, 12 мкг ПРФ (в ПРФ-СТ кон'югованій формі), 0,6 мг Al, 55 mM фосфату-іонів, 20 mM карбонату-іонів і тріс-сахарозний буфер 2,5 mM, 2,125 % при значенні pH 6,8-7,2. Всі шприци трьох категорій зберігали горизонтально при температурі 25 °C протягом двох місяців (прискорене старіння). Десорбцію HBsAg вимірювали у кожної категорії в Т=0 (відразу після розфасування в шприци) і потім через два місяці. 5 UA 113049 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Десорбцію оцінювали шляхом центрифугування вмісту шприців і подальшого вимірювання кількості десорбованого HBsAg, присутнього в супернатанті, за допомогою ІФА (сендвіч-ІФА, що включає в себе мишачі анти-HBsAg моноклональні антитіла (IgM), для покриття і захоплення, другі мишачі анти-HBsAg моноклональні антитіла (IgG) і треті антимишачі IgG поліклональні антитіла пов'язані з пероксидазою (Sigma, номер A3673), які виявляли шляхом додавання тетраметилбензидину). У час Т=0 рівень адсорбції HBsAg був однаковим у всіх трьох категоріях (98 % від загальної кількості HBsAg було адсорбовано). При Т=2 місяця десорбція спостерігалася у всіх категоріях, але процент десорбції відрізнявся залежно від категорії. Найвищий процент десорбції був виявлений в категорії (1) (при Т=1 і 2 місяці було адсорбовано 55 і 50 % від загальної кількості HBsAg, відповідно), в той час як найнижчий процент був виявлений в категорії (3) (при Т=1 і 2 місяці було адсорбовано 72 і 69 % від загальної кількості HBsAg, відповідно). В - нерозфасовану вакцинну композицію, описану в А, розподіляли на дві категорії в однодозові 1 мл шприци, характеристики яких були наступними: (1) стандартно силіконізовані скляні шприци (вільний силікон); і (2) несиліконізовані шприци. Нерозфасовану композицію розподіляли на 0,5 мл разові дози, кожна доза містила 10 мкг HBsAg, 30 Lf ДТ, 10 Lf СТ, 25 мкг Pt, 25 мкг ФГА, 40 DU (Д-антигенна одиниця) ІПВ1, 8 DU ІПВ2, 32 DU ІПВ3, 12 мкг ПРФ (в ПРФ-СТ кон'югованій формі), 0,6 мг Al, 55 mM фосфату-іонів, 20 mM карбонату-іонів і тріс-сахарозний буфер 2,5 mM, 2,125 % при значенні pH 6,8-7,2. Всі шприци двох категорій зберігали вертикально при температурі 25 °C протягом двох місяців (прискорене старіння). Десорбцію HBsAg вимірювали в кожній з двох категорій в Т=0 (відразу після розфасування в шприци) і потім через два місяці, як описано вище в А. У час Т=0 рівень адсорбції HBsAg був однаковим в обох категоріях (98 % від загальної кількості HBsAg було адсорбовано). При Т=2 місяця десорбція спостерігалася у всіх категоріях, але процент десорбції відрізнявся залежно від категорії. Найвищий процент десорбції був виявлений в категорії (1) (при Т=1 і 2 місяці було адсорбовано 69 і 68 % від загальної кількості HBsAg, відповідно), в той час як найнижчий процент був виявлений в категорії (2) (при Т=1 і 2 місяці було адсорбовано 73 % від загальної кількості HBsAg). Це чітко вказує на те, що адсорбція антигену чутлива до вільного силікону. С - нерозфасовану вакцинну композицію, описану в А, розподіляли по трьох типах однодозових 1 мл шприців, характеристики яких були наступними: (1) слабко силіконізовані скляні шприци (50-100 мкг вільного силікону на шприц); ™ (2) стандартно сильно силіконізовані скляні шприци (RTF шприц Luercone фірми Gerresheimer: від 800 мкг до 1 мг вільного силікону на шприц); і (3) шприци, що мають внутрішню поверхню, покриту полімеризованим силіконом (50-100 мкг на шприц). Шприци категорії (1) є працездатними тільки в тому випадку, якщо плунжер, що використовується для ін'єкції, також силіконізований, оскільки кількість силікону, нанесена на внутрішню поверхню шприца, дуже мала, щоб сама по собі забезпечити ковзання. Всі шприци (типи 1-3) закривали несиліконізованими пробками одного типу. Нерозфасовану вакцину розподіляли на 0,5 мл разові дози, кожна доза була такою, як описано в А і В. Всі шприци трьох типів зберігали вертикально при температурі 25 °C протягом двох місяців (прискорене старіння). Десорбцію HBsAg вимірювали в кожному з трьох типів в Т=0 (відразу після розфасування в шприци) і потім через два місяці, як описано вище в А. У час Т=0 рівень адсорбції HBsAg був однаковим у всіх трьох типах (94 % від загальної кількості HBsAg було адсорбовано). При Т=2 місяця десорбція спостерігалася у всіх шприцах, але процент десорбції відрізнявся залежно від типу. Найвищий процент десорбції був виявлений у типу (2) (при Т=1 і 2 місяці було адсорбовано 60 і 58 % від загальної кількості HBsAg, відповідно), в той час як у типів (1) і (3) процент десорбції виявився схожим, і він, однозначно, був значно нижчим, ніж у типу (2): У типу (1), при Т=1 і 2 місяці було адсорбовано 73 % і 68 % від загальної кількості HBsAg, відповідно. У типу (3), при Т=1 і 2 місяці було адсорбовано 69 % і 66 % від загальної кількості HBsAg, відповідно. Знову це чітко вказує на те, що (i) адсорбція антигену на ад'юванті на основі алюмінію чутлива до вільного силікону, нанесеного в кількості, необхідній для ковзання, і (ii) полімеризація силікону дозволяє вирішити цю проблему. D - Дослідження стабільності було проведене при температурі 5±3 °C протягом 18 місяців. Для цього дослідження були використані наповнені шприци, описані в А (3). Щонайменше 80 6 UA 113049 C2 90 % від загальної кількості HBsAg все ще знаходилося в адсорбованому стані в кінці 18місячного періоду. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 5 10 15 20 25 30 1. Контейнер для зберігання і/або введення вакцинної композиції, де даний контейнер містить вакцинну композицію, що містить антиген вірусу гепатиту В, адсорбований на ад'юванті у вигляді оксигідроксиду алюмінію, і закритий пристроєм, який діє як пробка, де поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покрита фторполімером. 2. Контейнер за п. 1, де вакцинна композиція знаходиться в рідкій або ліофілізованій формі. 3. Контейнер за будь-яким з попередніх пунктів, де фторполімер вибраний з групи, що складається з політетрафторетилену (ПТФЕ), політетрафторпропілену (ПТФП), фторованого етилен-пропілену (ФЕП, співполімер гексафторпропілену і тетрафторетилену), поліхлортрифторетилену (ПХТФЕ), перфторалкокси-співполімеру (ПФА), полі(етилентетрафторетилен-співполімеру) (ЕТФЕ), полі(етиленхлортрифторетилену) (ЕХТФЕ), полівінілфториду (ПВФ) і полівініліденфториду (ПВДФ). 4. Контейнер за будь-яким з попередніх пунктів, де внутрішні поверхні покриті полімеризованим силіконом. 5. Контейнер за будь-яким з попередніх пунктів, де даний контейнер являє собою резервуар шприца, який закритий плунжером. 6. Контейнер за будь-яким з попередніх пунктів, де вакцинна композиція додатково містить дифтерійний антигенний епітоп, правцевий антигенний епітоп, антигенний епітоп коклюшу, поліовірусний антигенний епітоп і HiB антигенний епітоп. 7. Застосування контейнера, закритого пристроєм, який діє як пробка, де поверхня цього пристрою, що контактує з композицією, покрита фторполімером, для зберігання вакцинної композиції, що містить антиген вірусу гепатиту В, адсорбований на ад'юванті у вигляді оксигідроксиду алюмінію. 8. Застосування за п. 7, де внутрішні поверхні покриті полімеризованим силіконом. 9. Застосування за п. 7, де вакцинна композиція додатково містить дифтерійний антигенний епітоп, правцевий антигенний епітоп, антигенний епітоп коклюшу, поліовірусний антигенний епітоп і НіВ антигенний епітоп. Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 7