Композиція суміші для немовлят, яка містить підвищену кількість альфа-лактальбуміну

1. Композиція суміші для немовлят, яка містить кількість коров'ячого молока, яка забезпечує 1,0-1,2 грама білка на 100 доступних кілокалорій, і кількість матеріалу сироватки коров'ячого молока, яка забезпечує 1,0-1,2 грама білка на 100 доступних кілокалорій, причому вказаний матеріал сироватки коров'ячого молока має вміст альфа-лактальбуміну від 28 % до 40 % і вміст бета-лактоглобуліну від 8 % до 33 % спільного білка. 2. Композиція за п. 1, в якій вказаний матеріал сироватки коров'ячого молока має вміст альфалактальбуміну від 28 % до 36 % і беталактоглобуліну від 10 % до 29 % спільного білка. 3. Композиція за п. 1, в якій вказаний матеріал сироватки коров'ячого молока додатково характеризується: C2 2 (11) 1 3 81903 на тому, щоб краще імітувати склад грудного молока. Коров'яче молоко використовували в суміша х для немовлят протягом більш вісімдесяти років. Крім того, білкові комплекси людського молока і коров'ячого молока істотно відрізняються, як кількісно, так і якісно. Помітні кількісні відмінності полягають в більш низькому загальному вмісті білка людського молока (11г/л) в порівнянні з коров'ячим молоком (33г/л) і у відношенні сироваткових білків до казеїну, яке становить 18:82 в коров'ячому молоці і 60:40 в людському молоці. Увага в цій області сфокусувалася на помітних кількісних відмінностях між коров'ячим молоком і людським молоком, - за вмістом в них окремих сироваткових білків, конкретно, альфалактальбуміну і бета-лактоглобуліну. Альфалактальбумін, білок, виявлений в молоці всіх ссавців, є основним білком людського молока. Бета-лактоглобулін в людському молоці відсутній. Вміст білка в сироватці коров'ячого молока становить приблизно 50%-55% беталактоглобуліну і приблизно 18% альфалактальбуміну. Відношення бета-лактоглобуліну до альфалактальбуміну в сироватці коров'ячого молока знаходиться в інтервалі між 2,5:1 і 4:1. Крім того, відомо, що зменшення вмісту або видалення беталактоглобуліну з коров'ячого молока підвищує загальний вміст альфа-лактальбуміну з 18% до 40% від спільного вмісту білків сироватки коров'ячого молока, [de Wit J. N. "Nutritional and Functional Characteristics of Whey Proteins in Food Products", Journal of Dairy Science 81: 597-608 (1998)]. Бета-лактоглобулін особливо багатий необхідними амінокислотами валіном і треоніном. Альфа-лактальбумін особливо багатий необхідними амінокислотами триптофаном, лізином і цистином в порівнянні з іншими білками коров'ячого молока, [Jarvenpaa, A.L., N.C. Raiha, et al., "Milk protein quality and quality in the term infant. I. Metabolic responses and effects on growth", Pediatrics 70(2): 214-20 (1982)]. Внаслідок різної кількості специфічних білків сироватки в коров'ячому молоці і людському молоці і амінокислотного складу цих білків, коров'яче молоко і людське молоко істотно відрізняються за своїми амінокислотними характеристиками, [Rudloff, S. and C. Kunz, "Protein and nonprotein nitrogen components in human milk, bovine milk, and infant formula: quantitative and qualitative aspects in infant nutrition", J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr. 24(3): 328-44 (1997)]. Ця відмінність зберігається в молочних сумішах для немовлят, виготовлених з коров'ячою молочною сироваткою, в якій склад специфічного сироваткового білка не був модифікований. Як відмічено вище, видалення або зменшення вмісту бета-лактоглобуліну в суміша х на основі коров'ячого молока підвищує вміст альфалактальбуміну. Така зміна повинна істотно підвищувати рівні необхідних амінокислот, цистеїну, триптофану, тирозину і фенілаланіну, і 4 знижувати вміст необхідної амінокислоти треоніну до рівня, більш близького до рівня в людському молоці. Тому поліпшений амінокислотний склад повинен дозволити зниження спільного вмісту білка в суміші для немовлят. [De Wit, de Wit, J. N., "Nutritional and Functional Characteristics of Whey Proteins in Food Products" Journal of Dairy Science 81: 597-608 (1998)], описують дослідження, сфокусовані на регулюванні як білкового, так і амінокислотного складу молока, і конкретно, на збагаченні коров'ячого молока альфа-лактальбуміном, бетаказеїном і лактоферином для отримання оптимальної харчової композиції, зокрема відносно її амінокислотного складу. Запропонована харчова композиція, яка містить збіднені бета-лактоглобуліном білки молочної сироватки, бета-казеїн і лактоферин в знесоленому коров'ячому молочному розчині. Встановлено, що такий препарат має білковий склад більш близький до складу людського молока, ніж існуючі суміші для немовлят. Молочна технологія сфокусувалася на процесах фракціонування білків сироватки для селективного видалення по суті всіх беталактоглобулінів з сироватки або виділення збагачених альфа-лактальбуміном фракцій, по суті позбавлених бета-лактоглобуліну, для використання в харчових продуктах, в тому числі в сумішах для дитячого харчування. В [патенті США №5/455/331] описаний спосіб використання незнежиреної, ультрафільтрованої сироватки для отримання матеріалу з високим вмістом альфалактальбуміну і, за загальним осаджуваним білком, з менше 5% бета-лактоглобуліну. Спосіб передбачає термоосадження альфа-альбуміну з незнежиреної, ультрафільтрованої сироватки від сироробного виробництва з рН4,2. Багатий альфалактальбуміном осад освітлюють, промивають, нейтралізують, піддають ультрафільтруванню і розпилювальному сушінню з отриманням сироваткової фракції, причому білок в ній є переважно альфа-лактальбуміном, по суті позбавлений бета-лактоглобуліну і включає ліпідовмісні компоненти сироватки. У [патенті США №5/420/249] описано застосування знежиреної сироватки і зв'язуючої кальцій смоли для отримання сироватки для сепарування, і переважної альфа-лактальбумінової фракції, що містить, щонайменше, 60% білка у вигляді альфалактальбуміну, і не більше 10% білка у вигляді бета-лактоглобуліну. Описана фракція, збагачена альфа-лактальбуміном, що містить 13% білка у вигляді бета-лактоглобуліну. Однак дана фракція містила 74% білка у вигляді альфа-лактальбуміну, при відношенні бета-лактоглобуліну до альфалактальбуміну 1:6. Інші збагачені альфалактальбуміном фракції мали відношення беталактоглобуліну до альфа-лактальбуміну від 1:4 до 1:7. У [патенті США №5/436/020] описана суміш для немовлят, позбавлена білка необробленого коров'ячого молока, яка виготовлена з матеріалу, що складається із звільненого від лактози і деіонізованого діалізату молочної сироватки як 5 81903 джерела небілкового азоту, сполученого з фракціонованою молочною сироваткою, підданою ультрафільтрації для видалення казеїнових глікомакропептидів і жиру. У [патенті США №5/169/666] описане коров'яче молоко, перероблене для видалення або істотного зниження рівня альфа-в-казеїну і для зниження рівня бета-лактоглобуліну до 4% або менше, як процента від вмісту білка, для того, щоб отримати «олюднений» матеріал з коров'ячого молока для дитячого харчування для грудного віку. Даний винахід відноситься до композиції суміші для немовлят, яка добре ними переноситься. Композиція суміші для немовлят згідно з винаходом складається з фракції сироватки, в якій 40% або менше від вмісту спільного білка у фракції сироватки складає альфа-лактальбумін і більше 8% від вмісту спільного білка у фракції сироватки складає беталактоглобулін, за умови, що процент альфалактальбуміну у фракції сироватки більше процента бета-лактоглобуліну. Даний винахід, крім того, відноситься до повноцінної в поживному відношенні суміші для немовлят, що містить коров'яче молоко в кількості, достатній для забезпечення приблизно від 1,0 до приблизно 1,2 грама білка на 100 доступних кілокалорій, і матеріалу сироватки коров'ячого молока, достатнього для забезпечення приблизно від 1,0 до приблизно 1,2 грама білка на 100 доступних кілокалорій, причому матеріал з сироватки коров'ячого молока має вміст альфалактальбуміну від близько 28% до близько 40%, і вміст бета-лактоглобуліну від близько 8% до близько 33% від спільного вмісту білка. Переважно, матеріал сироватки має вміст альфалактальбуміну від близько 28% до близько 36%, а вміст бета-лактоглобуліну від близько 10% до близько 29% спільного білка. У даних молочних сумішах процент альфа-лактальбуміну більше процента бета-лактоглобуліну в сироватковій фракції. Переважно, вміст бета-лактоглобуліну в сироватковій фракції більше, ніж процент альфалактальбуміну в сироватковій фракції мінус 7%. Переважно, модифікована сироваткова композиція з конкретним вмістом альфалактальбуміну і бета-лактоглобуліну згідно з винаходом має вміст небілкового азоту близько 15% або менше від спільного вмісту азоту; загальний вміст білка від близько 12,5 до близько 95%; вміст жиру близько 15% або менше; і зольний залишок близько 4,5% або менше (всі проценти - вагові). Переважно, загальний вміст білка в модифікованій сироватці складає від близько 35% до близько 80% і, ще переважніше, від близько 73% до близько 77%. Матеріал сироватки коров'ячого молока, використаний в композиції згідно з винаходом, має мінімальний вміст наступних амінокислот в грамах на 100 грам спільного білка: аргініну 3,1; цистеїну 1,4; гістидину 1,6; ізолейцину 1,0; лейцину 5,3; лізину 3,9; метіоніну 0,3; фенілаланіну 1,2; треоніну 3,2; триптофану 1,5; тирозину 0,9 і валіну 1,0. Відповідно, не є необхідним, щоб суміш для 6 немовлят згідно з винаходом містила додані амінокислоти. Дана суміш для немовлят може містити інші корисні в харчовому відношенні інгредієнти, відомі в даній області, наприклад, олії, що забезпечують жирні кислоти з довгим поліненасиченим ланцюгом, такі як арахідонова кислота і докозагексанова кислота. Суміш для немовлят згідно з винаходом може додатково містити вітаміни, мінерали, селен, природні каротиноїди, нуклеотиди, таурин і інші поживні речовини. Таким чином, в одному з варіантів, винахід пропонує повноцінну в поживному відношенні композицію суміші для немовлят, яка містить 2,02,4 грами білка на 100 доступних кілокалорій, причому цей білок утворений з по суті рівних кількостей білка немодифікованого коров'ячого молока і білка сироватковій фракції, збагаченої альфа-лактальбуміном. Дана суміш для немовлят може бути отримана змішуванням у відповідних кількостях збагаченого альфа-лактальбуміном сироваткового білкового концентрату зі збираним молоком, лактозою, рослинними оліями і жиророзчинними вітамінами в деіонізованій воді. Переважно, дані матеріали змішують разом в кількостях, достатніх для отримання кінцевої концентрації приблизно 240 грам/літр. Потім до суміші можуть бути додані мінеральні солі перед стадією високотемпературної/короткочасної пастеризації. Відповідні мінеральні соли включають хлорид кальцію, карбонат кальцію, цитрат натрію, гідроксид калію, бікарбонат калію, хлорид магнію, сульфат заліза, цитрат калію, сульфат цинку, гідроксид кальцію, сульфат міді, сульфат магнію, йодид калію, селеніт натрію і т.д. Суміш потім гомогенізують і охолоджують. Потім до суміші можуть бути додані термочутливі вітаміни і мікроелементи. Потім суміш стандартизують за допомогою деіонізованої води до кінцевої загальної концентрації сухих речовин, що складає від близько 120 до близько 135, а переважно, близько 123 грам на літр, що еквівалентно приблизно 670ккал на літр. Молочна суміш може бути стерилізована з використанням загальноприйнятої надвисокої температури або стандартного процесу автоклавування. Стерилізований матеріал потім вміщують у відповідну упаковку. Фахівцеві в даній області буде очевидно, що можна використати інші відомі способи виробництва і стерилізації для приготування даної суміші для немовлят. Дана суміш для немовлят може також виготовлятися у вигляді концентрованого рідкого продукту, що вимагає розбавлення рівним об'ємом води перед годуванням немовляти. Крім того, така суміш для немовлят може бути зневоднена, наприклад, розпилювальним сушінням, з отриманням стабільної порошкової суміші для немовлят, яка забезпечує переваги стабільності і економічність транспортування, причому вказаний порошок вимагає розведення водою перед годуванням немовляти. 7 81903 Суміш для немовлят згідно з винаходом переважна в тому, що вона має амінокислотний профіль композиції, який не вимагає додання додаткових необхідних амінокислот, щоб відповідати стандартам Європейського Союзу [директива 91/321ЕЕС] або перевершувати їх відносно амінокислот в суміші для немовлят. Вказаний амінокислотний профіль дозволяє знизити загальний вміст білка до 2,1 грама на 100 доступних кілокалорій, що ближче до спільного вмісту білка в людському молоці. Іншою перевагою є те, що суміш для немовлят перевершує вимоги по білках, що пред'являється законодавством США до молочних сумішей. Додатковою перевагою є те, що суміш для немовлят містить середню кількість альфалактальбуміну, що виявляється в людському молоці. Ще однією додатковою перевагою є те, що суміш для немовлят містить альфа-лактальбумін як головний білок сироватки. Ще однією додатковою перевагою є те, що суміш для немовлят містить омега-3 і омега-6 поліненасичені жирні кислоти з довгим ланцюгом на бажаних для харчування рівнях. Коров'яче молоко є основою більшості сумішей для годування грудних дітей. Незважаючи на те, що загальна концентрація білка в ньому в три рази вище, ніж в людському молоці, коров'яче молоко містить менше половини кількості альфалактальбуміну, яка міститься в людському молоці. Людське молоко не містить якої-небудь кількості бета-лактоглобуліну. Навпаки, сироватка коров'ячого молока найбільш багата беталактоглобуліном (таблиця 1). Більшість сучасних сумішей для годування грудних дітей, виготовлени х з немодифікованого коров'ячого молока як єдиного джерела білка, містять приблизно 15-16г/л білка, є сумішами з переважанням казеїну і містять тільки 0,5г/л альфа-лактальбуміну (таблиця 1). Сучасні суміші для немовлят, виготовлені з сироватковим білком, не модифікованим відносно білкового складу, містять 15г/л білка. Демінералізована сироватка дає половину білка в цих суміша х. Ці суміші містять 1,2г/л альфа-лактальбуміну, приблизно половину того, що міститься в рівному об'ємі людського молока (таблиця 1). Білок, г/л (Ν*6,38) Білок в цілому Білок сиров атки Альфа-лактальбумін Бета-лактальбумін Людське молоко 11 6,0 2,3 немає Коров 'яче молоко 33-35 6,3-7,0 1,1 3,1 Приклад 1 Для використання в даних сумішах приготовляли концентрат білка молочної сироватки, збагачений альфа-лактальбуміном, але який містить бета-лактоглобулін на значному рівні. Даний концентрат мав наступний склад, включаючи мінерали і співвідношення сироваткових білків. 8 Таблиця 2 Речов ина, що аналізується Жир Волога Білок Зольний залишок α-лактальбумін β-лактоглобулін α/β Фосфор Магній Кальцій Натрій Калій Хлорид Одиниця в имірюв ання % % % % %* %* мг % мг % мг % мг % мг % мг % 14,1 4,2 73,7 3,44 31,6 16,1 1,96 372 5,90 40,5 138 1,7 352 * грамів на 100 грамів білка Пропорції альфа-лактальбуміну і беталактоглобуліну в сироватковій білковій фракції визначали кількісно після відновлення 2меркаптоетанолом з використанням методу гельпроникної хроматографії (ГПХ) з 6М гуанідином НСI як рухомої фази і розчинника. Хроматографічну колонку упаковували Progel TSK G3000 SW XL. Дві колонки компонували в серії із запобіжною колонкою SW XL. Рухому фазу приготовляли розчиненням 573,18г гуанідину НСI в 600мл води якості для ВЕРХ. Додавали базовий буфер, 100мл, і розчин нагрівали і перемішували до досягнення повного розчинення. рН доводили до 7,5 50% розчином гідроксиду натрію. Після фільтрування розчин розбавляли до 1 літра. Базовий буфер готували шляхом розчинення 56,6г Na2HPO4, 3,5г NaH2PO4 і 2,9г етилендіамінтетраоцтової кислоти в 1000мл води придатної для ВЕРХ якості і доведення до рН7,5 соляною кислотою. Умови хроматографії включали наступне: швидкість потоку 0,5мл/хв., час протікання 60хв.; об'єм завантаження 50 мікролітрів; температура кімнатна; і детектор УФ 280нм. Зразки отримували відважуванням кількості, еквівалентної 10мг білка, в колбу об'ємом 10мл. До даного об'єму додавали рухому фазу і вміст колби добре перемішували. Розчин обробляли ультразвуком протягом 20 хвилин. Приблизно Таблиця 1 один мілілітр даного розчину переносили в пробірку для 10 Стандартна суміш для вприскування, сучасна суміш для Стандартна додавали мікролітрів 2-меркаптоетанолуоснов і сироватки і розчин немов лят на основ і молока немов лят на перемішували на вихровій мішалці протягом 10 15-16 15 секунд. Потім зразок впорскували9,0 систему для 2,9-3,2 в 1,2 ВЕРХ.0,5 1,4-1,6 4,2 Еталонні зразки приготовляли шляхом відважування приблизно 25мг коров'ячого альфалактальбуміну і бета-лактоглобуліну окремо, і розчинення їх у воді якості для ВЕРХ в 10мл колбі. Еталон для калібрування отримували відмірюванням піпеткою 1,0мл кожного еталонного зразка в 10мл колбу і розбавленням до об'єму рухомою фазою. Приблизно один мілілітр кожного калібрувального стандартного розчину переносили в пробірку для уприскування, додавали 10 мікролітрів 2-меркаптоетанолу і 9 81903 розчин перемішували за допомогою вихрової мішалки протягом 10 секунд. Стандартний зразок потім впорскували в систему для ВЕРХ. Приклад 2 Сироватковий білковий концентрат за прикладом 1 перемішували з деякою кількістю збираного молока, що містить рівну кількість білка, щоб забезпечити відношення сироваткових білків до казеїну 60:40. Альфа-лактальбумін, як виявлено, є переважаючим сироватковим білком в цій білковій суміші. Дану суміш використали для отримання поліпшеної суміші для немовлят із вмістом білка нижче його вмісту в стандартній суміші для годування грудни х дітей на основі сироватки і ближче до вмісту, що виявляється в людському молоці. Вміст білка, вміст сироваткового білка, рівень альфа-лактальбуміну і рівень беталактоглобуліну у вказаній суміші представлені в таблиці 3. Кількість альфа-лактальбуміну у вказаній суміші було більшим кількості беталактоглобуліну. Кількість альфа-лактальбуміну у вказаній суміші по суті дорівнювала кількості альфа-лактальбуміну в людському молоці. 10 вмістом білка і вистачала для отримання 28кг білка. 221г таурину розчиняли в гарячій воді і додавали в змішувальний резервуар. Наступні мінеральні речовини розчиняли або диспергували окремо в гарячій воді і додавали в змішувальний резервуар при інтенсивному перемішуванні: карбонат кальцію, 679г; гідроксид кальцію, 262г; гідроксид калію, 143г; хлорид магнію, 507г; хлорид кальцію, 292г; хлорид калію, 552г; сульфа т заліза, 151г; йодид калію, 31,6г 1% тритурату в лактозі; 250г 44,6% розчину сульфату цинку; 367г 2,5% розчину сульфату міді; 5,08г 2,5% розчину сульфату марганцю і 12,5г 0,3% тритурату селеніту натрію в бікарбонаті калію. Суміш нагрівали до 96±2°С, витримували протягом 30 секунд і потім охолоджували до 66±2°С. Потім суміш гомогенізували в двостадійному гомогенізаторі при 2500фунт/дюйм 2 на першій стадії і 500фунт/дюйм 2 на другій стадії. Гомогенізовану суміш потім охолоджували до 510°С, використовуючи пластинчатий теплообмінник. Пробу суміші аналізували на жир, рН і загальний вміст сухи х речовин в цілому. Додавали відповідну кількість деіонізованої води, скільки Таблиця 3 необхідно, щоб отримати 80% загальне розбавлення і дане завантаження перемішували. Людське Суміш на основ і Відбирали пробу для аналізу на загальний згідно Стандартні сучасні суміші на Стандартна суміш вміст Білок, г/л (N* 6,38) молоко молока основ і і рН. Розраховуваливинаходом води, з кількість сухи х речовинсиров атки «Білок» в цілому 11 15-16 15 14 необхідну для розбавлення. Частину води для Сиров атковий білок 6,0 2,9-3,2 розбавлення 9,0використали для 8,4 розчинення Альфа-лактальбумін 2,3 0,5 1,2 2,2-2,5 нуклеотидів і 4,2 водорозчинних вітамінів перед їх Бета-лактоглобулін немає 1,4-1,6 1,3-2,1 доданням до суміші. Наступні нуклеотиди розчиняли в теплій воді і додавали до суміші: Чотири партії готових для годування рідких цитидин-5'-монофосфат, 63,7г; аденозин-5'сумішей, що містять дану білкову суміш, були монофосфат, 18,6г; уридин-5'-монофосфат, виготовлені в 4000-літрових кількостях таким динатрієва сіль, 32,4г; інозин-5'-монофосфат, чином. динатрієва сіль, 13,0г і гуанозин-5'-монофосфат, Суміш жирів для кожної партії готували динатрієва сіль, 11,2г. об'єднанням 43,54кг рандомізованого пальмового Приготовану відповідним чином попередню олеїну, 35,2л соняшникової олії або сафлорової суміш водорозчинних вітамінів розчиняли в теплій олії з високим вмістом олеїну, 34,6л кокосової олії, воді і даний розчин додавали до суміші. 251г 28,1л соєвої олії, 1,36кг соєвого лецитину, 1,37кг холінхлориду і 104г міо-інозитолу розчиняли у воді дистильованих моногліцеридів, 1,19кг олії, що і додавали до суміші. 812г аскорбінової кислоти містить 38% жирних кислот, у вигляді арахідонової розчиняли в теплій воді і повільно додавали 462г кислоти (ARASCO, Martek, Columbia, MD) і 0,74кг бікарбонату калію, щоб нейтралізувати олії, 38% жирних кислот якої складала аскорбінову кислоту. Нейтральний розчин докозагексаенова кислота (DHASCO, Martek, аскорбату потім додавали в суміш. Суміш Columbia, MD). перемішували протягом 30 хвилин. Дану суміш Потім в суміші жирів диспергували стандартизували до вмісту сухи х речовин в цілому жиророзчинні вітаміни, вітамін А (вітаміну А приблизно 123г на літр. пальмітат і природні змішані каротиноїди), вітамін Через двадцять чотири години після первинної D (холекальциферол), вітамін Ε (d1-альфагомогенізації суміш знов гомогенізували і токоферолу ацетат) і вітамін К (фітонадіон). стерилізували за допомогою системи для Для отримання партії поліпшеної суміші, деяку асептичної переробки Stork UHT (надвисока кількість нагрітого рідкого збираного молока або температура) і асептично розливали її в 250 гнучкі порошкового збираного молока, достатню для контейнери. отримання 28кг білка, додавали до теплої Контрольна суміш деіонізованої води в змішувальному резервуарі, в Контрольні партії готових для годування рідких який додавали 723г цитрату натрію і 404г сумішей для немовлят, виготовлені з бікарбонату калію, розчинених в гарячій воді. У демінералізованою сироваткою (звичайно 13,5% змішувальний резервуар відмірювали суміш жирів. білка, 85% лактози, 1% жиру і вміст золи менше Через лійку едуктору для порошків додавали 1,5%) виготовляли в 4000-літрових кількостях основні сухі інгредієнти, лактозу і концентрат наступним способом. Деяку кількість нагрітого сироваткових білків. Кількість доданого рідкого збираного молока, достатню для концентрату сироваткового білка варіювала за 11 81903 отримання 30кг білка, додавали в теплу деіонізовану воду в змішувальному резервуарі, в який були додані цитрат натрію і цитрат калію, розчинені в гарячій воді. Збагачену жиророзчинними вітамінами суміш жирів відміряли в змішувальний резервуар. Через лійку едуктору для порошків додавали основні сухі інгредієнти, лактозу і демінералізовану сироватку. Кількість доданої демінералізованої сироватки варіювала за вмістом білка і вистачала для отримання 30кг білка. Таурин розчиняли в гарячій воді і додавали в змішувальний резервуар. Наступні мінеральні речовини розчиняли або диспергували окремо в гарячій воді і об'єднували, і додавали в змішувальний резервуар при інтенсивному перемішуванні: бікарбонат калію, хлорид кальцію, хлорид калію, хлорид натрію, цитрат кальцію, сульфат заліза, йодид калію, сульфат цинку, сульфат міді, сульфат марганцю і селеніт натрію. Контрольну суміш обробляли нагріванням, гомогенізували і доповнювали нуклеотидами і водорозчинними вітамінами, заздалегідь змішаними таким же чином, що і для суміші згідно з винаходом, описаним вище. Суміш контрольної рецептури суміші повторно гомогенізували і стерилізували за допомогою Stork UHT (ультрависока температура) системи для асептичної обробки і розливали в 250мл гнучкі контейнери. Основні інгредієнти двох сумішей даного прикладу є наступними: Контрольна суміш Електродіалізов ана сиров атка Рослинні олії (пальмов а, соєв а, кокосов а і з високим вмістом олеїнової кислоти, соняшников а олія або сафлоров а олія) Збиране молоко Лактоза Емульгатори (соєв ий лецитин, моногліцериди) Олії, що містять дов голанцюгов і поліненасичені жирні кислоти Гаурин Цитидин-5'-монофосфат Цинатрій уридин-5'- монофосфат Ді-альфа-токоферолу ацетат Аденозин-5'-монофосфат Цинатрій інозин-5 '-монофосфат Цинатрій гуанозин-5'-монофосфат Мінеральні інгредієнти в двох суміша х були наступними: Таблиця 5 Контрольна суміш Хлорид кальцію Бікарбонат калію Хлорид натрію Гідроксид калію Сульфат заліза Цитрат калію Сульфат цинку Цитрат кальцію Сульфат міді Суміш згідно з в инаходом Цитрат натрію Карбонат кальцію Гідроксид калію Хлорид магнію Хлорид кальцію Хлорид калію Гідроксид кальцію Сульфат заліза Сульфат цинку 12 Хлорид калію Сульфат марганцю Йодид калію Селеніт натрію Йодид калію Сульфат міді Сульфат марганцю Селеніт натрію Вітамінні інгредієнти в двох сумішах були наступними: Таблиця 6 Контрольна суміш Суміш згідно з в инаходом Вітамін С (аскорбінов а Вітамін С (аскорбінова кислота) кислота) Вітамін Ε (ді-альфаХолінхлорид токоферолу ацетат) Аскорбілпальміт ат Інозит Вітамін Ε (ді-альфаНіацин (нікотинамід) токоферолу ацетат) Пантотенов а кислота Ніацин (нікотинамід) Вітаміну А пальміт ат Аскорбілпальміт ат Тіаміну гідрохлорид Пантотенов а кислота Вітамін В6 Вітаміну А пальміт ат Рибофлав ін Рибофлав ін Бета-каротин Тіаміну гідрохлорид Фолієв а кислота Вітамін В6 Вітамін К (фітонадіон) Природні змішані каротиноїди Біотин Фолієв а кислота Вітамін D Вітамін К (фітонадіон) (холекальциферол) Вітамін В-12 Біотин Вітамін D (холекальциферол) Вітамін В-12 Склад поживних речовин суміші для немовлят згідно з винаходом і контрольній Таблиця 4 суміші представлений в таблиці 7. Суміш згідно з в инаходом Збагачена альфа-лактальбуміном фракція сиров атки Таблиця 7 Рослинні олії (пальмов а, соєв а, кокосов а і з в исоким вмістом олеїнової кислоти, соняшников аКонтрольна олія або Суміш за Пожив олія) сафлоров ана речовина (од/л) в инаходом суміш Збиране молокоцінність (ккал) Енергетична 672 672 Лактоза (г) Білок 14 15 Емульгатори (соєв ий лецитин, моногліцериди) Вуглев оди (г) 73 72 Олії, що містять дов голанцюгов і поліненасичені жирні Жир (г) 36 36 кислоти A (ME) Вітамін 2200 2200 Гаурин Бета-каротин (ME) 400 400 Дитидин-5'- монофосфат Вітамін D (ME) 425 425 Цинатрій уридин-5'- монофосфат Вітамін Ε (ME) 11 11 Ді-альфа-токоферолу ацетат Вітамін K (мкг) 67 67 Аденозин-5'-монофосфат Вітамін В1 (мкг) 1000 1000 Цинатрій інозин-5'-монофосфат Вітамін В2 (мкг) 1500 1500 Цинатрій гуанозин-5'-монофосфат 600 Вітамін В6 (мкг) 600 Вітамін В12 (мкг) 2 2 Ніацин (мкг) 5000 5000 Фолієв а кислота (мкг) 80 80 Пантотенов а кислота (мкг) 3000 3000 Біотин (мкг) 20 20 Вітамін С (мг) 90 90 Холін (мг) 100 100 Інозит (мг) 45 45 Таурин (мг) 47 47 Кальцій (мг) 420 460 Фосфор (мг) 240 333 Магній (мг) 45 64 Залізо (мг) 8 8 Цинк (мг) 6 6 Марганець (мкг) 50 50 Мідь (мкг) 560 333 13 81903 14 яких годують сучасною сумішшю, часто мають рівні амінокислот в плазмі, які перевищують рівні, що виявляються у дітей, які знаходяться на грудному вигодовуванні, за винятком триптофану. Рівні триптофану в плазмі у гр удних ді тей, яких годують сумішшю, часто значно нижче, ніж у дітей 16,5 16,5 на грудному вигодовуванні, [Fazzolari-Nesci et al., 5,0 5,0 "Tryptophan Fortification of Adapted Formula 4,0 4,0 Increasing Plasma Tryptophan Concentrations to 2,0 2,0 Levels Not Different from Those Found in Breast-Fed 2,0 2,0 Infants", Journal of Fed. Gastro and Nut., 14: 456-459 (1992)]. Триптофан є попередником Рівні кальцію і фосфору в суміші згідно з нейромедіатора серотоніну, [Fernstrom et al., "Brain винаходом ближче, ніж в стандартних сумішах, до Serotonin Content: Physiological Regulation by рівнів, що виявляються в людському молоці. Plasma Neutral Amino Acids", Science, 178: 414-415 Людське молоко містить в середньому 254мг/л (1972)]. Підвищені рівні серотоніну пов'язані з кальцію і 139мг/л фосфору. поліпшеним часом засинання (більш швидке Приклад 3 настання сну). Додавання триптофану гр удним Були виготовлені чотири окремих партії суміші дітям скорочує період засинання, [Yogman et al., для немовлят згідно з винаходом. Кожну партію "Dietal Sleep Patterns in Newborn Infants", New аналізували на амінокислотний склад England Journal of Medicine, 309(19): 1147-9(1983)]. стандартними методами високоефективної Триптофан конкурує за ту ж транспортну рідинної хроматографії. Середні рівні амінокислот, систему, що і великі нейтральні амінокислоти необхідні для дитини грудного віку в білці в (ВНАК). Таким чином, якщо присутні відносно поліпшеній суміші, представлені в таблиці 8. Дана високі концентрації ВНАК, триптофан менш суміш має амінокислотний склад, більш близький ефективно переноситься через клітини. Щоб до складу людського молока, ніж у стандартних забезпечити оптимальний транспорт триптофану сумішей на основі сироватки (таблиця 8). Джерело через кишечник, а також в мозок, бажано відносно білка даної суміші має більш високий вміст високе відношення триптофану/ВН АК. У порівнянні триптофану, лізину і цистеїну і більш низький вміст з сучасною сумішшю для немовлят суміш згідно з треоніну, ніж стандартні суміші на основі молочної винаходом має краще відношення сироватки. триптофану/ВН АК, тобто більш близьке до цього Європейський Союз (ЄС) встановив відношення в людському молоці. специфічний амінокислотний склад людського Цистин є компонентом глютатіону, трипептиду молока, з яким повинен порівнюватися склад з важливими метаболічними функціями. Глютатіон сумішей для дитячого харчування [Директива є істотно важливим як антиоксидант, а також для 91/321/ЕЕС]. ЄС вимагає, щоб амінокислотний забезпечення оптимальної імунної функції. Суміш склад повинен мати 100% значення ЄС для згідно з винаходом містить підвищені рівні цистину людського молока за об'ємом в мг/100ккал. в порівнянні з сучасними сумішами на основі Коефіцієнт, що використовується для сироватки і казеїну. перетворення мг/100ккал в мг/л, дорівнював Амінокислотний склад суміші згідно з 676ккал/л. винаходом дозволяє знизити загальний вміст білка до рівня, більше близького до вмісту Таблиця в білка 8 людському молоці, при відповідності вимогам ЄС до амінокислотного людському Склад необхідних амінокислот в мг/л для поліпшеної суміші, в складу. молоці, згідно з додатком V Єв ропейського Союзу і вПрикладсуміші на основ і сиров атки сучасній 4 Поліпшену суміш і контрольну суміш за Додаток V Єв ропейського Союзу, прикладом 2 з в инаходом Стандартна суміш на Амінокислота Суміш згідно оцінювали в перспективному, людське молоко основ і з контролем, багатоцентровому, рандомізованому,сиров атки Аргінін 466 490 560 кольоровим кодуванням, з паралельними групами Цистин 162 250 230 клінічно здорових пацієнтів немовлят, що Гістидин 304 360 380 народили в термін. Немовлят вибирали Ізолейцин 487 750 870 випадковим чином для отримання 1410 однієї з ними Лейцин 1055 1340 двох сумішей і потім спостерігали за ними Лізин 825 1140 3 протягом 12 тижнів. Метіонін 196 290 360 Немовлята були здоровими, що народилися в Фенілаланін 419 610 620 строк, з вагою і довжиною, яка відповідала віку. Треонін 541 710 810 Відношення ваги до довжини складало між 10 і 90 Триптофан 203 290 230 Тирозин 399 процентилями для віку відповідно до карт 590 540 Валін 541 фізичного розвитку, наданих Національним 840 870 центром медичної статистики (NCHS). Суміш згідно з винаходом має більш високий При включенні в групу для дослідження, вміст триптофану, - необхідної ароматичної немовлята були у віці не більше 14 днів. Вага і ріст амінокислоти, ніж людське молоко або сучасна все ще були між 10 і 90 процентилями для віку молочна суміш на основі сироватки. Грудні діти, Йод (мкг) Натрій (мг) Калій (мг) Хлориди (мг) Селен (мкг) Нуклеотиди ЦМФ (мг) УМФ (мг) АМФ (мг) ГМФ (мг) ІМФ (мг) 100 160 650 433 14 100 160 700 433 14 15 81903 відповідно до карт розвитку NCHS. Немовлят годували виключно сумішшю, що вивчається. Годування сумішшю, що вивчається, починали в день візиту, що є точкою відліку. З 193 немовлят, які увійшли до групи для дослідження, 98 немовлят отримували суміш згідно з винаходом, і 95 немовлят отримували контрольну суміш. Немовля могло бути виключене з дослідження через непереносимість молочної суміші, через отримання видів годування, що не вивчаються, протягом більше 5 послідовних днів або більше 7 сукупних днів, через отримання грудного молока, дитячого харчування або іншої твердої їжі, або через незгоду з методикою дослідження. Лікар або батьки могли виключити немовлят з дослідження довільно в будь-який час за будь-якої причини. З 98 немовлят, яким була прописана експериментальна суміш (згідно з винаходом), 72 (73,5%) залишилися до кінця дослідження. З 95 немовлят, яким була прописана контрольна суміш, тільки 62 (65,3%) залишилися до кінця дослідження. У восьми немовлят (8,2%) в експериментальній групі і чотирьох немовлят (4,2%) в контрольній групі дослідження було перерване через порушення протоколу. У п'яти немовлят в експериментальній групі і чотирьох немовлят в контрольній групі дослідження було перерване через те, що вони не повернулися (не представили звіт). З немовлят, що залишилися, у 72, або 85%, з експериментальної групи і у 62, або 71%, з групи, що отримувала контрольну суміш, дослідження було завершене. Дослідження було перерване через побічні явища у більшого числа немовлят в контрольній групі (20/95 або 21%), ніж у гр упи, що отримувала поліпшену суміш (15/98 або 15,3%). Таблиця 9 Включення немов лят в дослідження і в иключення з нього Експери- Контрольментальна на суміш суміш (N=98) (N=95) Статус Причина N в иключення Ув ійшло 98 Не пов ернулися 5 Порушення 8 протоколу Інформативне 85(100%) число Зав ершили 72(85%) Виключені в наслідок: Побічних яв ищ 15 Вимога лікаря, сім'ї Інші причини 2 Усього (N=193) N N 95 4 193 9 4 12 87(100%) 172(100%) 62(71%) 134(%) 20 35 3 5 * Багато які причини для перерив ання дослідження були можлив і в даному дослідженні Первинними оцінками ефективності були вага немовляти (г), ріст (см) і окружність голови (см), які 16 реєстрували на початковий момент і на 4, 8 і 12 тиждень. Оцінки повинні були здійснюватися термінами до трьох днів до включення в дослідження і в межах ±3 дні від інших термінів. Значення в початковий момент за віком, ростом і окружністю голови були схожими між двома досліджуваними групами. На початку дослідження середній вік становив 10,1 дні і 10,5 днів, середній зріст (довжина) становив 51,5см і 51,3см, і середня окружність голови дорівнювала 35,4см і 35,5см для експериментальної і контрольної груп, відповідно. Існувала статистично значуща відмінність за вагою між двома досліджуваними на початку дослідження (р=0,04). Немовлята в експериментальній групі були тро хи важчими, в середньому, ніж немовлята в контрольній групі (3536,4г в порівнянні з 3458,5г). Обидві суміші були ефективні відносно сприяння росту. Немовлята, яких годували будьякою з досліджуваних сумішей, зростали до схожих величин протягом дослідження. Після початку дослідження не було статистично значущи х відмінностей між групами по певній суміші за будь-якій з оцінок зростання (вага, ріст або окружність голови). Антропометричні дані показали значне зростання за оцінками за 12тижневий період, причому в середньому дитина набирала приблизно 2700г ваги, 10см по росту і 5см по окружності голови. Не було статистично значущої відмінності між групами, які годували експериментальною і контрольною сумішами на 4, 8 і 12 тижні. Z-оцінки для середньої ваги, набраної від початку дослідження до 12 тижня були вище в групі, що отримувала поліпшену суміш (+0,49) в порівнянні з контрольною групою (+0,183). У групі, що отримувала поліпшену суміш, також було годування, що менше не вивчається, ніж в контрольній групі (35,7% в порівнянні з 42%, відповідно). Побічні явища і прийнятність і переносимість суміші, що вивчається, реєстрували при візитах на 4, 8 і 12 тижні і при контактах по телефону на 2, 6 і 10 тижні. Оцінки здійснювали в межах 3 днів до або після контрольного терміну. Дані про переносимість збирали шляхом інтерв'ю. Побічне явище визначали як будь-який несприятливий медичний вияв у немовляти, якому давали випробуваний препарат при клінічному випробуванні; вияв необов'язково мав причинний зв'язок з випробуваною сумішшю. Побічне явище могло бути будь-якою несприятливою і непередбаченою ознакою (включаючи ненормальний лабораторний показник), симптомом або захворюванням, пов'язаним за часом з використанням суміші, що вивчається, чи вважали його пов'язаним з сумішшю, що вивчається чи ні. Менше за половину немовлят в експериментальній і контрольній групах мали побічні явища, що розглядаються як пов'язані зі сумішшю (42 [42,9%] і 44 [46,3%], відповідно). Найбільш звичайними пов'язаними із сумішшю побічними явищами для всіх немовлят був метеоризм (34 немовляти), запор (30 немовлят) і блювання (26 немовлят). Пов'язаний зі сумішшю 17 81903 запор виникав більше часто у немовлят в експериментальній групі (19), ніж у немовлят в контрольній групі (11). Пов'язане зі сумішшю блювання виникало у 12 немовлят в групі, що отримувала експериментальну суміш, і у 14 немовлят в гр упі, що отримувала контрольну суміш. У в два рази більшого числа немовлят в контрольній групі, в порівнянні з експериментальною групою, була пов'язана зі сумішшю діарея (8 в порівнянні з 4). У жодного з немовлят, що отримували суміш згідно з винаходом, не було пов'язаних із сумішшю побічних явищ з боку ди хальної системи, і у трьох немовлят (3,2%) в контрольній групі були такі вияви. Загалом характер побічних явищ для двох сумішей, що вивчаються, був схожим. Білковий статус (сироватковий альбумін, азот сечовини крові (BUN, AMK) і креатинін) представляв вторинні граничні показники безпеки, що визначаються на початку дослідження і на 12 тижні. Група, яку годували сумішшю згідно з винаходом, отримувала більш низьку кількість білка (1,4 грами білка/100мл), ніж контрольна група (1,5 грами білка/100мл). Обидві випробувані групи мали схожий адекватний білковий статус в кінці 12 тижня дослідження, що визначено по рівнях сироваткового альбуміну (4,1мг/дл в обох групах). Порівнянне зростання і статус по сироватковому альбуміну показують адекватне білкове харчування при багатій альфалактальбуміном молочній суміші, незважаючи на більш низький загальний вміст білка. По закінченні дослідження експериментальна група мала більш низькі рівні АМК, ніж контрольна група (8,2мг/дл в порівнянні з 9,3мг/дл), що вказує на більш високу якість джерела білка і знижену необхідність видалення надлишку білка. Дані про прийнятність і переносимість підсумовані в таблиці 10. Як експериментальна, так і контрольна суміші були прийнятні і добре переносилися більшістю немовлят на всіх контрольних термінах дослідження. У всі контрольні терміни після 2 тижня прийнятність і переносимість були дещо більше у немовлят, які отримували суміш згідно з винаходом. Процент немовлят, для яких загалом прийнятність і переносимість суміші, що вивчається, була задовільною, знаходився в межах від 90% на другому тижні до 100% на 10 і 12 тижні для немовлят, які отримували поліпшену суміш, і знаходився в інтервалі від 85,9% на 4 тижні до 98,4% на 10 тижні для немовлят, які отримували контрольну суміш. Неприйнятні оцінки знаходилися в інтервалі від 0 до 10% в групі, що отримувала поліпшену суміш (в середньому 4,1%), і від 1,6 до 14,1% в контрольній групі (в середньому 7,0%). Дані показують, що поліпшена суміш забезпечує посилене білкове харчування і прийнятність суміші. Таблиця 10 Сумарні дані по прийнятності і переносимості суміші, що в ив чається Контрольний термін Експериментальна Контрольна 18 суміш (N=98) Загальна прийнятність і переносимість Тиждень 2 Задов ільна Незадов ільна Тиждень 4 Задов ільна Незадов ільна Тиждень 6 Задов ільна Незадов ільна Тиждень 8 Задов ільна Незадов ільна Тиждень 10 Задов ільна Незадов ільна Тиждень 12 Задов ільна Незадов ільна суміш (N=95) n (%)* N (%)* 81 9 (90,0) (10,1) 82 4 (95,3) (4,7) 81 8 (91,0) (9,0) 73 12 (85,9) (14,1) 77 2 (97,5) (2,5) 61 5 (92,4) (7,6) 75 2 (97,4) (2,6) 64 8 (88,9) (11,1) 69 0 (100,0) (0,0) 61 1 (98,4) (1,6) 72 0 (100,0) (0,0) 61 2 (96,8) (3,2) Проценти при кожному в ізиті розраховув али за числом немов лят, по яких представ лені дані в цей контрольний термін · контрольний термін Даний винахід може бути модифікований без відходу від об'єму його суті і істотних ознак, що визначається відповідно прикладеною формулою винаходу, а не попереднім описом.