Тютюновий матеріал, ароматизатор і відновлений тютюновий матеріал з ослабленою подразнювальною дією і гостротою на стадії куріння, спосіб одержання тютюнового матеріалу і спосіб одержання ароматизатора

1. Тютюновий матеріал, подразнювальна дія і гострота якого ослаблені на стадії куріння шляхом зменшення вмісту забарвленої кислотної водорозчинної полімерної речовини, яка має молекулярну масу від 10000 до 60000 Дальтон. 2. Тютюновий матеріал за п. 1, який містить тютюн Берлей. 3. Ароматизатор тютюну, що містить рідкий тютюновий екстракт, в якому зменшено вміст компонента, що викликає подразнювальну дію і надає гостроту, за допомогою зменшення вмісту забарвленої C2 2 88651 1 3 88651 4 полімерної речовини. незадовільними з точки зору ефективності та варКрім того, п'ятий об'єкт винаходу торкається тості (журнал Tobacco Reporter, липень 2003, стор. 64-70). способу одержання ароматизатора, в якому зменВважається, що, якби можна було хімічним шено вміст забарвленої кислотної водорозчинної способом визначити компонент, що спричиняє полімерної речовини з водного рідкого екстракту з подразнення і надає гостроту, у натуральному натурального тютюнового матеріалу. тютюновому матеріалі, особливо - у тютюні БерКороткий опис ілюстрацій лей, то можна було б ефективно поліпшити ароФіг. 1 - хроматограма, одержана при рідинній мат і смак натурального тютюнового матеріалу гель-фільтраційній хроматографії високого роздішляхом відповідної обробки для зменшення вмісту лення забарвленої кислотної водорозчинної полімерної речовини (компонента, що спричиняє поданих компонентів. дразнення і надає гостроту); Відповідно до цього завдання даного винаходу Фіг. 2 - спектр поглинання в ультрафіолетовій і полягає в забезпеченні, за допомогою виявлення в видимій областях забарвленої кислотної водорознатуральному тютюновому матеріалі, особливо - у чинної полімерної речовини (компонента, що тютюні Берлей, хімічним шляхом компонента, що спричиняє подразнення і надає гостроту); спричиняє подразнення і надає гостроту, зменФіг. 3 - спектр поглинання в інфрачервоній обшення вмісту компонента, що спричиняє подразласті, забарвленої кислотної водорозчинної полінення і надає гостроту, з урахуванням зміни фізичних і хімічних властивостей цього компонента при мерної речовини (компонента, що спричиняє покурінні, для поліпшення аромату і смаку натуральдразнення і надає гостроту). Даний винахід детальніше описаний нижче. ного тютюнового матеріалу. Автори даного винаходу фракціонували водДля виявлення хімічним способом компонента, ний рідкий екстракт після екстрагування тютюну що спричиняє подразнення і надає гостроту натуБерлей, використовуючи різні види хроматографії, ральному тютюновому матеріалу, особливо - тюі виготовляли сигарети з використанням кожної з тюновому матеріалу Берлей, тютюновий матеріал фракцій. Потім очищали компонент, що спричиняє Берлей піддавали екстрагуванню водним розчинподразнення і надає гостроту, на основі органолеником для одержання рідкого екстракту. Екстракптичної оцінки подразнювальної дії і гостроти. У ційний осад складається по суті з волокон. З екстрезультаті було виявлено, що компонент, що ракційного осаду утворювали суспензію звичайним спричиняє подразнення і надає гостроту (який далі способом, і з суспензії виготовляли відновлене називається також просто "зазначеним компоненполотно, яке подрібнювали для одержання кришитом"), є забарвленою кислотною водорозчинною ва відновленого тютюну. полімерною речовиною, що міститься у водному З іншого боку, згаданий вище рідкий екстракт рідкому екстракті. У процесі очищення при фракціпропускали через ультрафільтраційну мебрану, онуванні були виявлені фізичні і хімічні властивоспроникної для частинок з молекулярною масою 10000 Дальтон, для одержання фракції з молекуті, що призводять до розвитку способу зменшення лярною масою нижчою за 10000 Дальтон та іншої вмісту зазначеного компонента. У зв'язку з цим, фракції з молекулярною масою не нижчою за автори вважають, що, оскільки зазначений компо10000 Дальтон. Фракцію з молекулярною масою нент є нелетким, то сам по собі він не є подразнюнижчою за 10000 Дальтон концентрували і потім вальним, але при курінні з цього компонента утвододавали у відновлене тютюнове кришиво, згадарюються речовини, що спричиняють подразнення і не вище, після чого виготовляли сигарети з виконадають гостроту. Даний винахід обґрунтований на цих встановлених явищах. ристанням одержаного тютюнового кришива. СиКонкретніше, перший об'єкт винаходу торкагарети піддавали органолептичному обстеженню і ється тютюнового матеріалу, у якого ослаблені одержували оцінку, яка полягала в тому, що смак подразнювальна дія і гострота на стадії куріння при курінні помітно поліпшився, що виражалося в шляхом зменшення вмісту забарвленої кислотної тому, що подразнювальна дія і гострота були таводорозчинної полімерної речовини. кими, що ледве відчуваються порівняно з сигареДругий об'єкт винаходу торкається ароматизатами, виготовленими з використанням відновленотора тютюну, що містить рідкий тютюновий екстго тютюнового кришива, в яке був доданий рідкий екстракт у тому вигляді, в якому він був одержаракт зі зменшеним вмістом компонента, що сприний. За цими результатами був зроблений висночиняє подразнення і надає гостроту, шляхом вок про те, що зазначений компонент повинен був зменшення вмісту забарвленої кислотної водорозміститися у водорозчинній полімерній фракції з чинної полімерної речовини. молекулярною масою не нижчою за 10000 ДальТретій об'єкт винаходу торкається відновленотон. го тютюнового матеріалу, що являє собою полотно Однак, оскільки найбільша частина аромативідновленого тютюну, що містить волокна, які є зуючих і смакових компонентів, наприклад, цукру, екстракційним осадом, одержаним при екстрагуамінокислот і глікозидів, була видалена з фракції з ванні натурального тютюнового матеріалу, в який доданий ароматизатор, що містить водний рідкий молекулярною масою не нижчою за 10000 Дальекстракт, одержаний при екстрагуванні натуральтон, то неможливо оцінити сигарети, виготовлені з ного тютюнового матеріалу; при цьому зазначений відновленого тютюнового кришива, згаданого виароматизатор є ароматизатором за винаходом. ще, в яке була додана певна фракція. У такій сиЧетвертий об'єкт винаходу торкається способу туації були проведені органолептичні випробуванодержання тютюнового матеріалу, в якому змення за оцінкою сигарет, виготовлених окремо з шено вміст забарвленої кислотної водорозчинної додаванням фракції з молекулярною масою не 5 88651 6 чином, для екстрагування натурального тютюновонижчою за 10000 Дальтон. У результаті були одержані сигарети з вираженими подразнювальною го матеріалу використовували водний розчин сладією і гостротою, подібними до тих, які спостерігабко кислотної солі (ацетату натрію). Температуру ли у сигарет із тютюну Берлей, що підтверджувало екстрагування встановлювали на рівні кімнатної 0 оцінки, наведені вище. температури (близько 25°С), 6O C і 90°С, і було Ґрунтуючись на вищезазначених дослідженвиявлено, що рідкий екстракт, одержаний внаслінях, кожну фракцію піддавали ультрафільтраційній док екстрагування при кімнатній температурі, мав обробці з відділенням частинок із молекулярною найбільш сильну подразнювальну дію і гостроту. масою 10000 Дальтон у кожній із наступних стадій (2) Як показано вище, при виконанні фракціонування з використанням мембрани для ультрафіочищення для проведення досліджень за оцінкою льтрації, що має проникність 10000 Дальтон, фравпливу компонентів із молекулярною масою не кцією, що має подразнювальну дію і гостроту, була нижчою за 10000 Дальтон. визнана фракція з молекулярною масою не нижКрім того, були виготовлені сигарети для оцінчою за 10000 Дальтон. ки з використанням кожної фракції, описані нижче, і проведені органолептичні випробування за оцін(3) На відміну від полісахаридів, зазначений кою сигарет, для забезпечення можливості продокомпонент адсорбувався смолами зі зворотною фазою адсорбції, і його елюювали складом водавження фракціонування, із виразом як показника метанол і т.ін. подразнювальної дії і гостроти. (4) Зазначений компонент адсорбувався аніоСпосіб органолептичної оцінки фракцій нообмінною смолою, наприклад, діетиламіноетилСигарети для оцінки, в які була додана кожна целюлозою (DEAE-целюлоза), і він мав властивосфракція, піддали органолептичній оцінці, виконаній ті кислоти. групою з 10 експертів, із метою визначення того, (5) На відміну від протеїнів і полісахаридів зачи були виражені подразнювальна дія і гострота, значений компонент не осаджувався під впливом порівняно з контрольними зразками сигарет, в які змішаного розчинника з метанолу і води (при об'була додана тільки очищена вода. Як сигарети для ємному співвідношенні 9:1), і зазначений компооцінки використали сигарети, подібні до сигарет, нент був присутнім у частині, розчиненій у змішащо є в продажу з дуже малим вмістом нікотину і ному розчиннику. смол (1 мг смоли і 0,1 мг нікотину), за винятком (6) Типові ароматизатори, що були присутніми того, що в них не додавали ароматизатор. Ці сигав тютюні, не викликають подразнювальної дії і не рети мали невеликий смаковий ефект відносно мають гостроту, але мають тенденцію до з'єднанкількості доданих у них приправ, по суті не вплиня з полімером і є забарвленими. Таким чином, вали на смак самих сигарет і тому дозволяли дісароматизатори видаляли як заважаючі компонентати достовірну оцінку смакового ефекту, що зати (адсорбцією на полівінілпіролідоні). безпечується кожною фракцією. Кожну фракцію Нижче представлена детальніше, обґрунтовадодавали шляхом розчинення фракції, виділеної з на на попередніх дослідженнях, описаних вище, 20 г тютюнового матеріалу Берлей, в 1 мл очищесхема виділення чистої речовини шляхом фракціної води, і з використанням шприца вводили 10 мкл розчину (що відповідав фракції, виділеній із онування, згідно з якою були одержані найкращі 0,2 г тютюнового матеріалу) у сигарету для оцінки. результати. Кількість тютюнового кришива на одну сигарету Схема очищення при фракціонуванні компоскладала близько 0,6 г, і кожну фракцію додавали нента тютюнового матеріалу Берлей, що спричив кількості, що відповідала приблизно 1/3 кількості няє подразнення і надає гостроту тютюнового кришива. Середні жилки листя (черешок листа, товсті Попереднє вивчення очищення при фракціочастини жилок листа) тютюну Берлей мають слабнуванні ко виражений смак і помітну подразнювальну дію і Досліджували різні способи очищення при гостроту і, з цієї причини, їх використали як об'єкт фракціонуванні водорозчинних полімерів у спробі дослідження. здійснення очищення при фракціонуванні зазначеСередні жилки листя тютюнового матеріалу ного компонента. Однак зі самого початку було Берлей подрібнювали і піддавали екстрагуванню складно проводити систематичне фракціонування при перемішуванні при кімнатній температурі прочерез те, що полімери були переведені в нерозтягом 30 хвилин у 0,1 молі водного розчину ацетачинну форму або були безповоротно адсорбовані ту натрію, який був у 10 раз більшим за об'ємом, на смолі і т.д., через зміну значення рН або іонної ніж середні жилки листя. Рідкий екстракт фільтрували і потім піддавали розділенню в центрифузі сили, викликаної операцією фракціонування. У для видалення сильно подрібненого матеріалу. такій ситуації інформацію, одержану в різних одиЦей рідкий екстракт подавали в колонку з адсорничних операціях фракціонування, випрямляли і буючим матеріалом зі зворотною фазою і колонку досліджували сполучення одиничних способів промивали водою. Темно-коричневий розчин, вифракціонування. Інформація, одержана внаслідок виконання тягнутий з адсорбенту за допомогою складу водаодиничних операцій фракціонування метанол або вода-ацетонітрил, конкретніше - во(1) Зазначений компонент краще розчинявся у да-метанол (при співвідношенні 6:4), звільняли від водному сольовому розчині, ніж в очищеній воді, а органічного розчинника шляхом концентрації при також краще розчинявся в лужному середовищі, зниженому тиску з подальшим додаванням невеніж у кислому. Однак зазначений компонент міг би ликої кількості полівінілпіролідону, подальшим вступати в реакції або зазнавати розкладання, перемішуванням і фільтрацією для видалення якби водний розчин був сильно лужним. Таким поліфенолів. Потім оброблену рідину піддавали 7 88651 8 іонообмінній хроматографії, використовуючи харчових продуктів із точки зору їхнього кольору/, DEAE-целюлозу. Колонку промивали водою для зібрано Kazuhiko Takamiya, стор. 183-191 (2004); видалення нейтральних і основних компонентів, а Science of Starch /Дослідження крохмалю/, том 38, елюювання проводили водним розчином гідрокси№ 1, стор. 73-79 (1991). ду натрію. Елюат піддавали ультрафільтрації (при З іншого боку, забарвлений компонент, що міпроникності не більше за 10000 Дальтон) для виститься в тютюновому матеріалі Берлей, називають коричневим пігментом, і він має схожість з далення компонентів із малою молекулярною маданим компонентом за хімічними властивостями. сою, промивали водою і піддавали ліофілізації. Потім ліофілізований матеріал піддавали фракційПроводили хімічні дослідження коричневого пігменому осадженню з використанням складу метанолнту. У матеріалах Arch. Biochem. Biophys. (apxiвнi видання Біохімія, Біофізика), 86, 94-101 (1960) і вода (при співвідношенні 9:1), а після цього піддаArch. Biochem. Biophys., 93, 580-590 (1961) є відовали розділенню в центрифузі для видалення мості про те, що коричневий пігмент є полімерним осаджених полісахаридів і протеїнів. Надосадову компонентом, утвореним з окиснювально полімерідину концентрували при зниженому тиску і підризованого матеріалу (ферментативна реакція з давали ліофілізації, та одержували кінцевий очипоявою коричневого кольору) поліфенолів (хлорощений продукт. Кінцевий очищений склад зазнагенової кислоти і рутину), пов'язаних із протеїнами, ченого компонента був одержаний із сировинного іонами заліза і т.д. У подальших дослідженнях матеріалу з виходом близько 0,2%. Було підтвербуло з'ясовано, що коричневий пігмент, що місджено всіма 10 експертами групи, що вони відчули титься в тютюні, можна класифікувати, розділивши подразнювальну дію і гостроту, характерну для на декілька видів, які відрізняються один від однотютюну Берлей, при курінні сигарет для оцінки, в го за хімічним складом (див. журнал Agric. Food які не був доданий ароматизатор, але був доданий Chem. /Хімія сільськогосподарських харчових прокінцевий очищений продукт із концентрацією блидуктів/, 26 (1978), стор. 380-385). зько 400 м.д. Крім того, в японській заявці на патент № 11На Фіг. 1 представлена рідинна гель83827, зареєстрованій на ім'я КОКАІ, запропонофільтраційна хроматограма високого розділення ваний аналітичний метод дослідження коричневозазначеного компонента (див. Приклад 1 нижче). го пігменту, що міститься в листі тютюну, а також Як очевидно з Фіг. 1, зазначений компонент мав вибірковий спосіб вибору нормального листа і лимолекулярну масу від 10000 до 60000 Дальтон, а ста зниженої якості, при якому використовують його пікова молекулярна маса становила 16000 аналітичний метод. У цьому аналітичному методі Дальтон. Як сказано вище, зазначений компонент необроблений рідкий екстракт із листового тютюну є кислотною речовиною, а його водний розчин має піддавали зворотній фазі рідинної хроматографії, колір від коричневого до темно-коричневого, завикористовуючи розчинник вода-ацетонітрил, в лежно від його концентрації (див. видимий в ультякому частку ацетонітрилу послідовно збільшуварафіолетовій області спектр поглинання, показали, для відділення компонентів коричневого пігмений на Фіг. 2). Також, на відміну від пектину, нту, які відрізняються полярністю. Розрізнення протеїнів і т.ін., тобто від інших водорозчинних нормального листа і листа зниженої якості провополімерів, що містяться в тютюні, зазначений комдили на основі співвідношення компонентів коричпонент є розчинним у водовмісному спирті. невого пігменту. Колір являє собою чинник для На Фіг. 3 представлений спектр поглинання визначення сорту сировинного матеріалу - листозазначеного компонента в інфрачервоній області. вого тютюну. У цьому значенні компонент коричЯк показано на Фіг. З, зазначений компонент має максимальні значення поглинання при хвильових невого пігменту, що представляє основну структучислах 3423, 2935, 1618, 1411, 1261, 1070 і ру кольору, є важливим. Однак немає звіту про 534 см-1. дослідження, що стосуються безпосереднього смакового ефекту компонента коричневого пігменРезультати елементного аналізу зазначеного ту. компонента були такими: За цих обставин було вперше встановлено, С-36,2%; Н-4,70%; N-4,09%; зола-12,6%. що компонент забарвленого кислотного полімеру Особливість видимого в ультрафіолетовій об(зазначений компонент), що міститься в натуральласті спектра поглинання зазначеного компонента ному тютюновому матеріалі, особливо - у тютюномає схожість із коричневим полімером, що назвавому матеріалі Берлей, викликає подразнювальну ний "меланоїдином", що міститься у звичайних дію і надає гостроту, характерні для тютюну Берхарчових продуктах. Меланоїдин, що міститься в лей. Було також встановлено, що хімічні властивохарчових продуктах, піддавали різним дослідженсті зазначеного компонента мають подібності з ням. Вважається, що для утворення меланоїдину повинна мати місце реакція Мейларда (неферменхімічними властивостями меланоїдину і компонентативна поява коричневого кольору) цукру та аміта, названого компонентом коричневого пігменту нокислот, і окиснювальна реакція полімеризації тютюну. Із цього випливає, що подразнювальну дію і (ферментативна реакція з появою коричневого гостроту можна зменшити для ефективного поліпкольору) поліфенолів, викликана ферментом. Одшення аромату і смаку тютюну шляхом зменшення нак, оскільки відповідні компоненти відрізняються вмісту зазначеного компонента в натуральному один від одного залежно від вигляду харчового тютюновому матеріалі, особливо - у тютюновому продукту, меланоїдин має різний хімічний склад і властивості і, з цієї причини, загальна хімічна струматеріалі Берлей. Таким чином, використовуючи ктура меланоїдину досі не підтверджена (див. Sciданий винахід, можна створювати тютюновий маence of Food as Viewed from Color /Дослідження теріал, подразнювальна дія і гострота якого на 9 88651 10 стадії куріння зменшені шляхом зменшення вмісту тюнових компонентів, наприклад, пектину, і оскільзабарвленої кислотної водорозчинної полімерної ки зазначений компонент є кислотною водорозречовини. чинною полімерною речовиною. Способи Рідкий екстракт, одержаний шляхом витягання зменшення вмісту зазначеного компонента далі зазначеного компонента з екстракту, одержаного описані більш детально. У зв'язку з цим, способи шляхом екстрагування натурального тютюнового одержання рідкого екстракту з натурального тюматеріалу екстрагуючим водним розчинником, тюнового матеріалу є такими самими, як і описані може бути використаний в одержаному вигляді вище. або після концентрації або ліофілізації як аромаСпосіб зменшення вмісту зазначеного компотизатора тютюну, подразнювальна дія і гострота нента за допомогою ультрафільтрації і т.д. якого ослаблені. Крім того, відновлений тютюноРідкий екстракт, одержаний із натурального тютюнового сировинного матеріалу, піддають ульвий матеріал можна одержувати шляхом додавантрафільтрації, використовуючи напівпроникну ня ароматизатора тютюну у відновлене тютюнове мембрану або порожнисте волокно для видалення полотно, виготовлене звичайним способом із виполімерних компонентів, що мають молекулярну користанням волокнистого матеріалу, що є осамасу не нижчу за 1000 Дальтон, переважно - не дом, одержаним внаслідок екстрагування. Можна використати листя, кришиво, середні нижчу за 10000 Дальтон. Операцію видалення жилки листя, стебла і коріння тютюну, а також їхню можна також виконувати шляхом діалізу або шлясуміш як натуральний тютюновий матеріал, який хом фільтрування гелю. Фракцію, що має молекупіддають екстрагуванню. Водний розчинник можна лярну масу, нижчу за 1000 Дальтон, переважно використати як екстрагуючий розчинник. Водний нижчу за 10000 Дальтон, можна використати як розчинник, наприклад, вода, може бути лужним ароматизатор тютюну. або кислим. Іонообмінний спосіб зменшення вмісту зазнаСуміш води та органічного розчинника, що ченого компонента змішується з водою, можна використати як екстраРідкий екстракт, одержаний із натурального гуючий розчинник. До числа прикладів таких оргатютюнового сировинного матеріалу, піддають адсорбуванню, використовуючи аніонообмінну смонічних розчинників відносяться спирти, наприклад, лу, наприклад, DEAE-целюлозу (DEAE Cellulofine етанол. У цих екстрагуючих розчинниках можна розчиняти неорганічну сіль, наприклад, хлорид торгова марка), а потім смолу видаляють, напринатрію. Екстрагування можна проводити звичайклад, фільтрацією. Вміст зазначеного компонента ним способом при температурі від кімнатної (близменшений у результуючому фільтраті. Цей філь0 0 трат можна використати як ароматизатор тютюну. зько 25 C) до 100 C протягом приблизно від 5 хвиУ цій операції можна також використати іонооблин до 6 годин. мінну мембрану. Після завершення екстрагування екстраговану Спосіб зменшення вмісту зазначеного компосуміш піддають операції розділення, наприклад, за нента за допомогою використання адсорбуючої допомогою фільтрації під тиском для розділення смоли і т.д. суміші на рідкий екстракт і осад (волокно). АромаРідкий екстракт, одержаний із натурального тизатор тютюну за винаходом можна одержувати тютюнового сировинного матеріалу, піддають адшляхом зменшення вмісту зазначеного компоненсорбуванню, використовуючи активоване вугілля, та в рідкому екстракті. Ароматизатор тютюну можадсорбційну смолу (наприклад, співполімер поліна використати в одержаному вигляді або після стиролу і дивінілбензолу або адсорбент зворотної концентрації, або після ліофілізації. фази (репрезентативних прикладів стосуються: З іншого боку, готували суспензію, використооктадециловий силікагель (ODS) і т.д.), із подальвуючи осад, одержаний внаслідок екстрагування, і шим розділенням адсорбенту для одержання обвиготовляли відновлене тютюнове полотно. Відробленої рідини. Адсорбент промивають водою, новлене тютюнове полотно могло бути повністю змішаним складом вода-спирт або подібним склаабо частково сформоване з осаду, одержаного дом, і промивальний склад додають в оброблену внаслідок екстрагування. Крім того, осад, що викорідину. Цю оброблену рідину можна використати ристовується, одержаний внаслідок екстрагування, як ароматизатор тютюну. міг бути осадом, одержаним внаслідок екстрагуСпосіб зменшення вмісту зазначеного комповання, безпосередньо призначеним для одержання ароматизатора тютюну за винаходом, або міг нента кислотним осадженням бути осадом, одержаним внаслідок екстрагування Оскільки зазначений компонент є полімерною натурального тютюнового матеріалу, призначеним речовиною, що має кислотні властивості, його модля інших цілей. жна відділяти шляхом пониження значення рН Нижче описані більш специфічні способи витя(концентрації іонів водню) розчину для перевегання зазначеного компонента з рідкого екстракту. дення його в нерозчинний стан (див. процедури, У способах витягання безпосередньо використоописані в журналі Agric. Food Chem. /Хімія сільсьвують фізичні і хімічні властивості зазначеного когосподарських харчових продуктів/, 26 (1978), стор. 380-385, згаданому вище). компонента. Це означає, що аромат і смак можуть Конкретніше, у рідкий екстракт, одержаний із бути поліпшені шляхом ефективного зменшення вмісту зазначеного компонента шляхом викориснатурального тютюнового матеріалу, додають нетання фізичних і хімічних властивостей речовини, органічну кислоту (наприклад, сірчану кислоту або оскільки компонентом є полімерна речовина, що ортофосфорну кислоту) або органічну кислоту має молекулярну масу 10000-60000 Дальтон, у (наприклад, щавлеву кислоту) для зниження значення рН переважно до 2 або менше. Після видаякої полярність мала порівняно з полярністю тю 11 88651 12 лення осаджень за допомогою фільтрації або роздів. Приклад 1 ділення в центрифузі, додають лужний матеріал (наприклад, гідроксид кальцію) для доведення Аналітичний спосіб зменшення вмісту зазназначення рН зворотно до початкової величини. У ченого компонента разі використання щавлевої кислоти при обробці Як індекс зменшення вмісту зазначеного комгідроксидом кальцію утвориться водонерозчинний понента, був створений простий аналітичний спооксалат кальцію, який можна видаляти, наприклад, сіб зменшення вмісту зазначеного компонента, що розділенням у центрифузі. Оброблену таким чиполягає у використанні рідинної хроматографії ном рідину можна використати як ароматизатор високого розділення. Подрібнювали 1,0 г тютюнотютюну. вого матеріалу Берлей (у разі використання рідкоСпосіб зменшення вмісту зазначеного компого екстракту, розпилювали рідкий екстракт, підданента за допомогою осадження розчинником вали ліофілізації в кількості, що відповідала 1,0 г На відміну від інших полісахаридів і протеїнів, тютюнового матеріалу), до нього додавали 10 мл зазначений компонент є розчинним у змішаному 0,1 моля водного розчину ацетату натрію. Суміш розчиннику вода-метанол (при об'ємному співвідперемішували при кімнатній температурі протягом ношенні 1:9), але не розчинний у розчиннику, що ЗО хвилин, фільтрували і піддавали розділенню у має меншу полярністю. Використовуючи конкретні центрифузі. Надосадову рідину пропускали через властивості зазначений компонент можна відділяекстрагуючий картридж із зворотною твердою фа3 ти від інших компонентів. Як розчинники, що мазою (Oasis HLB /6 см , 500 мг/ компанії Waters Inc.), промивали водою і елюювали з використанють меншу полярність, спирти, специфічні аліфаням 10 мл ацетонітрилу і води (при співвідношенні тичні спирти, наприклад, метанол (100%), етанол 6:4). Елюат концентрували при зниженому тиску та ізопропанол, або ароматичні спирти, наприклад, для видалення ацетонітрилу; пропускали через бензиловий спирт, або інші розчинники, розчинні у міні-колонку полівінілпіролідону (Polycler VT комводі, наприклад, ацетон, метилетилкетон і ацетопанії Wako Junyaku К.К.), а потім - через екстрагунітрил, можна використати окремо або у вигляді ючий картридж з аніонообмінною речовиною в змішаного розчинника. У цьому випадку розчинник, що не змішується з водою, наприклад, гексан, твердій фазі (BondElute DEA /500 мг/ компанії Varможна також використати тому, що його можна ian Inc.), та елюювали з використанням 4 мл 0,4N розчиняти в розчиннику, який містить спирт, або у гідроксиду натрію після промивання водою. Елюат схожому складі. Крім того, вигляд розчинника мов одержаному вигляді піддавали ультрафільтрації жна змінювати східчасто для проведення фракційу центрифузі та обміну буферного розчину (0,1 ного осадження, і фракції можна видаляти або моля фосфатного буферного розчину /рН 6,8/), що викидати, основуючись на аналітичному значенні містив 0,1 моля столової солі) із використанням зазначеного компонента. пристрою для ультрафільтрації (Amicon Ultra-4 Спосіб зменшення вмісту зазначеного компо/проникність частинок розміром за молекулярною нента за допомогою сполучення способів обробки, масою не більше за 10000 Дальтон/ компанії описаних вище Millipore Inc.). Нарешті, розмір зразка збільшували до 5 мл додаванням того самого буферного розДля зменшення вмісту зазначеного компоненчину в зразок, і зразок піддавали аналізу з викорита в тютюнових матеріалах, можна використати станням рідинної хроматографії високого роздіспособи зменшення вмісту, описані вище, окремо лення. або в сполученні. Також, зменшення вмісту кількоУмови проведення аналітичного дослідження сті компонента можна регулювати шляхом вибору Використали рідинний хроматограф високого умов, і відділені компоненти можна додавати у відповідній кількості у відновлене тютюнове полорозділення: тип 1100, компанії Agilent Inc. Колонка: протеїнова проба 125 (компанії Waтно. ters Inc.) Можна також змішувати, принаймні, два види Розчинник: 0,1 моля фосфатного буферного ароматизаторів тютюну, одержаних із використанням способів зменшення вмісту, описаних вище. розчину (рН 6,8), що містив 0,1 моля столової солі. Витрата розчинника: 1,0 мл/хвилину. Як сказано вище, можна ослабляти подразнюДетектор: діодна матриця, за допомогою якої вальну дію і гостроту готового тютюнового продуквимірювали довжину хвилі до 410 нм. ту на стадії куріння шляхом видалення забарвлеНа Фіг. 1 представлена типова хроматограма. ної кислотної водорозчинної полімерної речовини Інтегроване значення піка в області довжини хвилі з натурального тютюнового матеріалу (або його 410 нм на хроматограмі використали як індекс рідкого екстракту). У цьому випадку бажано, щоб зменшення вмісту зазначеного компонента. вміст забарвленої кислотної водорозчинної поліВидимий в ультрафіолетовій області спектр мерної речовини був зменшений до вмісту, що поглинання був таким, як це показано на Фіг. 2, складає не менше за 10% (до 100%), більш бажаспектр поглинання в інфрачервоній області був но - не менше за 50%, а найбільш бажано - не метаким, як це показано на Фіг. 3. Результати елеменше за 80%) початкової кількості (кількості, присунтного аналізу були такими, як це описано вище. тньої в натуральному тютюновому матеріалі, або Еталонний приклад кількості, присутньої в рідкому екстракті, при екстОдержання відновленого тютюнового листа рагуванні з використанням екстрагуючого водного 75 г тютюнового матеріалу Берлей (масове розчинника), із метою ослаблення подразнювальспіввідношення середніх жилок листа і листових ної дії і гостроти. пластинок - 1:1) занурювали в 0,75 л теплої води Даний винахід нижче описаний конкретніше з 0 при температурі 60 C і витримували протягом 30 використанням Прикладів і Порівняльних прикла 13 88651 14 хвилин; фільтрували під тиском для розділення го матеріалу), одержаний в Еталонному прикладі, суміші на фільтрат (рідкий екстракт) і осад (волокпіддавали розділенню у центрифузі (3000 но). Із волокна звичайним способом готували суоб/хвилину, 10 хвилин) для видалення нерозчинспензію, з якої формували відновлене тютюнове ної частини і додавали 50 мл (об'єм мокрої смоли) полотно. Маса відновленого тютюнового полотна аніонообмінної смоли (DEAE Cellulofme, що постапісля кондиціонування становила 20,6 г. Відновлечається компанією Seikagaku Kogyo К.К.) для проне полотно різали для одержання тютюнового ведення адсорбції при перемішуванні, із подалькришива. шою фільтрацією. Оброблену рідину З іншого боку, фільтрат (близько 0,5 л) концеконцентрували при зниженому тиску, і всю кільнтрували до об'єму 50 мл або менше при знижекість концентрованої рідини наносили розпиленному тиску і наносили розпиленням на тютюнове ням на тютюнове кришиво, одержане в Еталоннокришиво, яке потім сушили. Висушений матеріал му прикладі, для одержання відновленого піддавали кондиціонуванню (витримували при потютюнового кришива. Відновлене тютюнове кристійній температурі і постійній вологості до досягшиво використали для виготовлення сигарет, як і в нення рівноважної вологості) для одержання відЕталонному прикладі. Приклад 4 новленого тютюнового кришива. Потім Фільтрат (0,5 л, що відповідав 75 г сировинновиготовляли вручну сигарети (кількість тютюнового матеріалу), одержаний в Еталонному прикладі, го кришива в одній сигареті складала близько піддавали розділенню у центрифузі (3000 0,6г). об/хвилину, 10 хвилин) для видалення нерозчинПриклад 2 ної частини і вводили в колонку адсорбуючої смоФільтрат (0,5 л, що відповідав 75 г сировинноли зворотної фази (Oasis HLB; кількість смоли 6 г х го матеріалу), одержаний в Еталонному прикладі, 2, компанії Waters Inc.) для адсорбування забарвпіддавали розділенню у центрифузі (3000 леного компонента. Оброблену рідину концентруоб/хвилину, 10 хвилин) для видалення нерозчинвали при зниженому тиску, всю кількість концентної частини, а потім піддавали ультрафільтрації з рованої рідини наносили розпиленням на використанням ультрафільтраційного диска, де тютюнове кришиво, одержане в Еталонному призастосовували напівпроникну мембрану, виготовкладі, для одержання відновленого тютюнового лену з регенерованої целюлози, що мала фраккришива. Відновлене тютюнове кришиво викорисційну проникність частинок молекулярною масою тали для виготовлення сигарет, як і в Еталонному не більше за 10000 Дальтон (ультрафільтраційний прикладі. диск Ultracell PLGC компанії МШіроге Inc., номінаАналітична величина та оцінка смаку зразків, льна проникність частинок молекулярною масою одержаних в Еталонному прикладі і Прикладах 2-4 не більше за 10000 Дальтон). Вихід розчиненої Були одержані аналітичні величини (площа піречовини і концентрованої рідини після ліофілізака в області довжини хвилі 410 нм на рідинній ції становив 12,8 г і 2,1 г, відповідно. Ліофілізовахроматограмі, на яку було зроблене посилання в ний матеріал із розчиненої речовини розчиняли в Прикладі 1; відносна величина). До того ж оцінка 50 мл води, і всю кількість одержаного у результаті розчину наносили розпиленням на тютюнове криослаблення подразнювальної дії і гостроти була виражена рядом експертів із групи з 10 експертів, шиво, одержане в Еталонному прикладі, для які зазначили, що подразнювальна дія і гострота одержання відновленого тютюнового кришива. були явно ослаблені в порівнянні з сигаретами Відновлене тютюнове кришиво використали для Еталонного прикладу. Результати наведені в Табвиготовлення сигарет, як і в Еталонному прикладі. лиці 1. Приклад 3 Фільтрат (0,5 л, що відповідав 75 г сировинноТаблиця 1 1 2 3 Аналітична величина Оцінка ослаблення позазначеного комподразнювальної дії і госнента в рідкому ексттроти. ракті. Еталонний приклад (без обробки; контрольний) 454,8 Приклад 2 (ультрафільтрація) 27,5 10/10 4 Коментарі при оцінці смаку тютюну. Подразнювальна дія і гострота були сильними і зберігалися у роті після куріння. Гострота відповідала тютюну Берлей, неприємний запах і специфічний смак були сильними. По суті була відсутня подразнювальна дія і гострота, відчуття у роті після куріння було ослабленим. Неприємний запах і специфічний смак були ослабленими, так що куріння стало приємнішим. 15 88651 16 Таблиця 1 1 2 3 Приклад 3 (іонообмінна обробка). 81,0 6/10 Приклад 4 (обробка з використанням смоли із зворотною фазою). 23,0 10/10 Хоча даний винахід описаний із посиланням на конкретні варіанти виконання і Приклади, але він не обмежується цими варіантами і Прикладами. Компонент, що спричиняє подразнення і надає гостроту, уперше виявлений автором даного винаходу, міститься в тютюні Берлей і може міститися в інших видах тютюну (наприклад, у тютюні вогневого сушіння, тютюні східного типу і тютюні кустарного виробництва). Не доводиться і говорити про те, що даний винахід можна широко використати для обробки цих видів тютюну і натуральних тю 4 Подразнювальна дія і гострота були ослабленими. Відчуття у роті після куріння в деякій мірі зберігалося. Гострота поменшала, але кислий запах у деякій мірі посилився. По суті була відсутньою подразнювальна дія і гострота, відчуття у роту після куріння було ослабленим. Спостерігався деякий сморід. тюнових матеріалів, включаючи всі ці види тютюну. Як сказано вище, подразнювальну дію і гостроту тютюнового матеріалу можна ослабити за винаходом шляхом зменшення вмісту забарвленої кислотної водорозчинної полімерної речовини, що міститься у водорозчинній частині тютюнових матеріалів без додавання різних ароматизаторів і без використання стадії процесу, що застосовувалася в минулому для поліпшення смаку тютюнового матеріалу. 17 Комп’ютерна верстка Д. Шеверун 88651 Підписне 18 Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601