Лікарський засіб у формі таблеток на основі кріоактивованого порошку плодів аронії

Реферат: Винахід належить до галузі медицини та хіміко-фармацевтичної промисловості і стосується лікарського засобу у формі таблеток, що як діючу речовину містить кріогенно подрібнений порошок плодів аронії, а як фармацевтично прийнятні носії - МКЦ 112, натрію кроскармелозу, сорбіт, аеросил, натрію стеарилфумарат у визначеному співвідношенні компонентів. Засіб за винаходом здатний корегувати імунний статус та проявляє стресопротекторну і гепатозахисну дію. UA 98593 C2 (12) UA 98593 C2 UA 98593 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Винахід належить до медицини та хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема до створення, виробництва та впровадження в клінічну практику лікувально-профілактичних засобів на основі лікарської рослинної сировини, і стосується розробки препарату на основі відомої лікарської рослини Aronia melanocarpa для використання за новим призначенням як лікарського засобу з імуностимулюючими, гепатозахисними та стресопротекторними властивостями. Стрімке зростання числа факторів, що чинять патогенний вплив на організм, в т. ч. забруднення навколишнього середовища, техногенні аварії та катастрофи, підвищення напруженості життя, часті емоційні потрясіння, визначають питання фармакокорекції імунологічної реактивності, метаболічних зсувів в тканині печінки, а також стресу як одні з найбільш пріоритетних для сучасної медицини та фармації [10, 11]. На жаль, номенклатуру сучасних препаратів складають, перш за все, синтетичні засоби, на фоні застосування яких ймовірна різноспрямована побічна дія [7, 8]. В останні роки пильну увагу фармакологів, фітохіміків та педіатрів привертає аронія, все зростаючий інтерес до якої пов'язаний, перш за все, з високою та багатогранною активністю. Так, препарати на її основі мають гіпотензивну, капілярозміцнюючу, радіозахисну, протизапальну, протипухлинну, анаболічну та антимікробну дію, а розробка лікарських засобів на основі горобини чорноплідної є перспективним напрямком створення ліків багатовекторної дії [8]. Відомі плоди аронії (ТОВ "Аура-Фарм", Росія, ТОВ "Трави Башкирії", Росія), що позиціонуються на фармацевтичному ринку, перш за все, як полівітамінний засіб. Існує тонізуючий засіб "Біоарон С" (AT "Фітофарм Кленка", Польща), що застосовується при інфекціях верхніх дихальних шляхів, відсутності апетиту. Як прототип використано таблетки "Аронія+С", що містять комбінацію вітаміну С та плодів аронії (ЗАТ "ВИФИТЕХ", Росія) та рекомендовані як лікарський засіб для підвищення імунного статусу, а також при артеріальній гіпертензії, авітамінозі, атеросклерозі, кровотечах різної етіології, цукровому діабеті, тиреотоксикозі. До недоліків прототипу належить наступне: 1. Під час виробництва препарату відбувається втрата значної частини біологічно активних речовин аронії, в першу чергу, вмісту Р-вітамінного комплексу, аскорбінової кислоти, органічних кислот. 2. Остаточний рівень діючих речовин в таблетках порівняно з аналогічним показником в свіжій лікарській сировині не здатен забезпечити бажану ефективність препарату [2-4, 9]. Задача винаходу: розробити та експериментально довести багатовекторну фармакотерапевтичну ефективність та безпечність таблетованого лікарського засобу, що містить кріогенно подрібнений порошок плодів аронії, здатний корегувати імунний статус, проявляти стресопротекторну та гепатозахисну дію, для подальшого застосування в клінічній, в тому числі в педіатричній практиці. Суть винаходу полягає в тому, що як активну речовину таблетований лікарський засіб містить кріогенно подрібнений порошок плодів аронії, а як фармацевтично прийнятні носії - МКЦ 112, натрію кроскармелозу, сорбіт, аеросил, натрію стеарилфумарат при такому співвідношенні компонентів в розрахунку на 1 таблетку, г: кріопорошок аронії 0,250 МКЦ 112 0,130 натрію кроскармелоза 0,060 сорбіт 0,050 аеросил 0,005 натрію стеарилфумарат 0,005. Застосування таблетованого лікарського засобу, що містить кріогенно подрібнений порошок плодів аронії, для фармакотерапії імунного статусу базується на введенні щуренятам протягом двох тижнів внутрішньошлунково в дозі 3,0 г/кг розробленого препарату [1, 5, 6]. Дослідження впливу таблеток аронії на показники імунної системи щурів віком 1 місяць з нормальним імунним статусом свідчать про виражені імуностимулюючі властивості препарату. Найбільшу здатність стимулювати утворення антитіл таблетки аронії реалізують у дозі 3,0 та 4,0 г/кг, достовірно збільшуючи титри антитіл у сироватці імунізованих тварин (табл. 1). 50 1 UA 98593 C2 Таблиця 1 Вплив таблеток аронії на гуморальний імунітет щуренят з нормальним імунним статусом Групи тварин Інтактна Референтна Дослідна Доза, г/кг 1,0 2,0 3,0 4,0 Титри ГА, Log2 (Ме (LQ; UpQ) 13 (13;13) 13 (13;13) 14 (13;17)*/** 15 (14;17)*/** 15 (14;16) АУК на селезінку 18022±1404 15678±957* 24622±2193** 29493±2359*/** 29485±2341*/** Примітки: * - різниця, вірогідна порівняно з групою інтактних тварин; ** - різниця, вірогідна порівняно з референтною групою. 5 Отримані у попередніх дослідженнях дані щодо імуностимулюючої дії таблеток аронії на тварин з нормальним імунним статусом послужили обґрунтуванням визначення ефективності засобів за умов імунодефіциту у щурів, який моделювали введенням гідрокортизону ацетату (табл. 2, 3). 10 Таблиця 2 Динаміка масових коефіцієнтів органів імуногенезу щуренят з імунодефіцитом Групи тварин Масові коефіцієнти селезінки тимуса Доза, г/кг 1 серія Інтактна Контрольна Референтна Дослідна 1,0 3,0 Інтактна Контрольна Референта Дослідна 0,70±0,09 0,35±0,05* 0,41±0,06*/** 0,42±0,03*/** 1,0 4,0 0,26±0,01 0,05±0,01* 0,07±0,01* 0,07±0,01* 0,93±0,07 0,52±0,05 0,67±0,12 0,65±0,07 0,36±0,01 0,10±0,02* 0,18±0,04*/** 0,18±0,05*/** 2 серія Примітки: * - різниця, вірогідна порівняно з групою інтактних тварин; ** - різниця, вірогідна порівняно з контрольною групою. Таблиця 3 Вплив таблеток аронії на титри ГА у сироватці крові щуренят з імунoдeфiцитом Групи тварин Інтактна Контрольна Референтна Дослідна Інтактна Контрольна Референтна Дослідна Доза, г/кг 1 серія 1,0 3,0 2 серія 1,0 4,0 Титри ГА, Log2 (Мe (Q25-Q75) 8 (6; 9) 4 (3; 5)* 6 (5; 7)*/** 6 (5; 8)*/** 10,5 (10; 11) 9 (9; 10)* 13 (10; 13)*/** 14 (10; 14)*/** 15 Примітки: * - різниця, вірогідна порівняно з групою інтактних тварин; ** - різниця, вірогідна порівняно з контрольною групою. 2 UA 98593 C2 5 10 15 Профілактичне ж введення таблеток аронії сприяє відновленню імунореактивності у тварин. Під впливом препарату у дозі 3,0 г/кг реєструється відновлення масових коефіцієнтів селезінки та тимуса на 10 та 20 %, відповідно. Вплив засобу на антитілогенез проявляється відновленням значень аналізованого показника до рівня інтактних щуренят. Таким чином, аналіз отриманих даних дозволяє констатувати, що застосування таблеток аронії чорноплідної реалізується підсиленням імунної відповіді як у здорових тварин, так і у щуренят в умовах імунодефіциту. Застосування таблетованого лікарського засобу, що містить кріогенно подрібнений порошок плодів аронії, як гепатопротекторного засобу базується на введенні щурам протягом 10 днів внутрішньошлунково в дозі 250 мг/кг (в перерахунку на діючу речовину) розробленого препарату у формі таблеток. Було доведено, що застосування пропонованого лікарського засобу протягом 10 днів дозволяє відновити показники прооксидантно-антиоксидантного гомеостазу тварин з тетрахлорметановим гепатитом у різні терміни спостереження (креслення та табл. 4) [5]. Показано, що препарат дозволяє відновити рівень компонентів систем антиоксидантного захисту - рівня сульфгідрильних груп та активності супероксиддисмутази та каталази та тлі пригнічення утворення та накопичення основних продуктів ліпідпереокислення - ТБК-продуктів та дієнових кон'югатів. 20 Таблиця 4 Вплив таблеток аронії на стан компонентів антиоксидантної системи у щурів з токсичним гепатитом Група тварин Інтактна Контроль Силібор Аронія чорноплідна Інтактна Контроль Референтна Дослідна Інтактна Контроль Референтна Дослідна Стат. показник 1 Строки дослідження 7 14 Сульфгідрильні групи (ммоль/г) М ±m М 1,61* ±m 0,24 М ±m М ±m СОД (Мкат/г) М ±m М 30,83* ±m 3,32 М ±m М ±m Каталаза (Мкат/г) М ±m М 51,62* ±m 7,73 М ±m М ±m Примітки: * - різниця, вірогідна порівняно з групою інтактних тварин; ** - різниця, вірогідна порівняно з групою контролю. 3 4,52 0,30 1,48* 0,18 3,31*/** 0,35 3,93** 0,27 1,42* 0,09 3,72** 0,39 4,43** 0,29 61,67 3,27 31,67* 3,02 48,33 5,31** 58,33** 2,10 44,17* 3,32 55,00 4,32 60,83** 3,66 94,07 8,20 53,28* 7,55 74,93** 4,83 83,25** 8,16 69,10* 7,95 81,59 7,63 97,40 10,89 UA 98593 C2 Результати вивчення стану енергетичного гомеостазу при токсичному ураженні печінки на тлі курсового застосування препарату на основі кріопорошку з плодів аронії представлено в таблиці 5. Таблиця 5 Вплив таблеток аронії на вміст аденілових нуклеотидів у щурів з токсичним ураженням печінки тетрахлорметаном Група тварин Стат. показник 1 Термін дослідження (доба) 7 14 АТФ Інтактна Контроль Силібор Аронія чорноплідна М ±m М ±m М ±m М ±m 1012,88* 94,58 2022,10 147,83 1218,19* 40,54 1587,75*/** 81,99 1907,13** 113,03 1222,76* 72,28 1679,00** 79,55 1843,23** 92,47 1432,50 70,81 843,75* 54,46 1059,38** 69,80 1239,38** 77,82 1033,13* 49,80 1143,75* 68,73 1443,75**/*** 71,85 1116,28 69,98 1920,10* 85,91 1534,31**/* 76,56 1295,44**/*** 59,49 1837,50* 77,96 1451,63*/** 50,11 1130,66**/*** 53,52 АДФ Інтактна Контроль Силібор Аронія чорноплідна М ±m М ±m М ±m М ±m 890,63* 102,46 АМФ Інтактна Контроль Силібор Аронія чорноплідна М ±m М ±m М ±m М ±m 1901,81* 145,81 5 Примітки: * - різниця, вірогідна порівняно з групою інтактних тварин; ** - різниця, вірогідна порівняно з групою контролю. 10 15 20 Доведено, що застосування лікарського засобу на основі кріопорошку аронії з лікувальнопрофілактичною метою істотно запобігає порушенням в системі АМФ-АДФ-АТФ в умовах токсичного ураження печінки, що можна розцінювати як одну із центральних, вперше встановлених, сторін фармакодинаміки аронії чорноплідної. Застосування таблетованого лікарського препарату, що містить кріогенно подрібнений порошок плодів аронії, як стресопротекторного засобу базується на введенні щурам протягом 10 днів внутрішньошлунково в дозі 150 мг/кг (в перерахунку на діючу речовину) розробленого лікарського засобу у формі таблеток. При дослідженні стресопротекторної дії оригінального препарату у тесті "відкрите поле" на попередньому етапі за оцінкою поведінкових реакцій усі тварини були розподілені на стресостійких та стресонестійких, враховуючи той факт, що поведінка тварин в нових умовах середовища є адекватним критерієм оцінки їх індивідуальної стресореактивності. Тестування тварин відбувалося у жорстко визначений час доби з 9:00 до 12:00 години [5]. Результати дослідження психоемоційного статусу тварин, що отримували на тлі формування стресу кріопорошок аронії чорноплідної, представлені в табл. 6. 4 UA 98593 C2 Таблиця 6 Вплив таблеток аронії на показники психоемоційного статусу тварин при гіпокінетичному стресі Група тварин Стат. показ. Інтактна Контроль Референтна Дослідна М±m М±m М±m М±m Інтактна Контроль Фенібут Аронія чорноплідна М±m М±m М±m Інтактна Контроль Фенібут Аронія чорноплідна Інтактна Контроль Фенібут Аронія чорноплідна 5 10 15 20 25 М±m Терміни дослідження (доба) 5 10 Горизонтальна активність Стресостійкий тип реагування тварин 78,16±6,04 10,08*±0,15 12,61*±0,78 17,58*±1,28 12,44*±0,66 17,67*±1,93 30,72*/**/***±3,52 52,91*/**/***±9,66 Стресонестійкий тип реагування тварин 201,23±6,51 8,21*±0,40 8,06*±0,39 8,50*±0,60 8,25*±0,38 9,16*±1,00 1 13,72*/***±1,72 М±m М±m М±m М±m 3,94*/***±0,56 31,17*±5,19 14,66**/**±1,17 75,66**/***±4,89 11,33*±0,84 8,33*/**±0,84 17,33*/**/***±1,85 30,50*/**/***±4,05 Час латентного переходу з центрального квадрата Стресостійкий тип реагування тварин М±m 2,26±0,16 М±m 12,52*±0,47 5,61*±0,56 5,16*±0,99 М±m 8,56*/**±0,58 9,25*/**±0,79 М±m 15 2,17**/***±0,16 5,16*±0,47 14,66*/**±1,17 1,33*/**/***±0,33 Стресонестійкий тип реагування тварин 6,05±0,5 13,85*±0,56 5,72±0,58 5,08±1,17 10,28*/**±1,18 27,91±1,27 6,33±0,55 12,83*/**±0,84 3,78*/**/***±0,54 1,50*/**/***±0,22 2,16*/**±0,38 Примітки: * - достовірно (р