Спосіб визначення компенсаторних можливостей центральної нервової системи в експерименті

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к экспресс-способам оценки компенсаторных возможностей центральной нервной системы (ЦНС) животных в ответ на стрессорное воздействие. Оценка компенсаторных функций ЦНС проявляющихся в ответ на стрессорные раздражители различной природы осуществляется различными методами, основными из которых является определение активности ГАМК-эргической системы головного мозга координирующего и реализующего ответные реакции организма в целом. Наиболее близким техническим решением к заявляемому способу является биохимическое определение содержания глутаминовой кислоты и ГАМК [1] при стресс-реакции и в ходе процесса адаптации. Установлено, что при воздействии стресс-факторов различной природы в организме, в частности в ЦНС, реализуется неспецифическая реакция, в результате которой наблюдается резкое снижение глутаминовой кислоты, что свидетельствует об активизации ГАМК-эргической системы выражающейся в увеличении в 2 раза активности ГАМК-трансаминазы, соответственно содержание глутамата, превращающегося в ГАМК, уменьшается в 3 раза, а содержание ГАМК - примерно на одну треть. Данная картина биохимических реакций наблюдалась спустя 8-ми часов после моделирования эмоционального болевого стресса (ЭБС). Автором для оценки содержания аминокислот мозга использовалась методика бумажной хроматографии, включающей нижеследующие этапы. Головной мозг извлекается на холоду. Нервная ткань гомогенизируется с дальнейшим определением в спиртово-водной экстракции свободных аминокислот с последующей хроматографией на бумаге. Метод включает в себя ряд промежуточных стадий-центрифугирование, выпаривание, элюирование, определение оптической плотности и т.д. Затрата времени на биохимический анализ аминокислот мозга исчисляется в 4-5 суток, что определяется трудоемкостью его промежуточных стадий. Как указывалось ранее, определение аминокислот в головном мозге осуществляется при декапитации животных и тем самым выведением последних из пролонгированных экспериментов. Последнее обстоятельство требует достаточное количество животных (при получении статистически достоверных данных) для каждого из этапов хронического эксперимента. Целью изобретения является упрощение и ускорение способа. Указанная цель достигается тем, что в качестве критерия компенсаторных возможностей ЦНС экспериментальных животных используют время условно-рефлекторной реакции активного избегания. В результате проведенного исследования установлена корреляционная связь между соотношением ГК/ГАМК и поведенческой реакцией; условно-рефлекторной реакцией активного избегания. Способ реализуют следующим образом. Животное (крыса Вистар) помешают в "челночную камеру" (камера поделена перегородкой, в центральной части которой имеется отверстие). В качестве условного раздражителя используют звуковой сигнал, через 5 секунд после которого подают на электродный пол камеры электрический ток (безусловно раздражитель) силой 5А и напряжением 20В. При этом регистрируют латентный период реакции избегания. Установленная высокая отрицательная корреляционная зависимость (г=0,78 при р < 0,05) между временем реакции избегания и отношением ГЛ/ГАМК позволяет с помощью уравнения регрессии К = 5,0938-1,0754х, где х - время реакции избегания, 1,0754 - коэффициент, 5,0938 свободный член уравнения регрессии рассчитать диагностический коэффициент (К). При К = 4 усл.единиц и более активация ГАМК-эргической системы не происходит, соответственно и механизм компенсаторных реакций на стресс воздействие в ЦНС не реализуется. Аналогичное значение К могут наблюдаться и при отсутствии стрессорного агента (т.е. у интактных животных). При значениях К = 3 усл.ед. происходит активация ГАМК эргической системы. При значениях К=2 усл.ед. активность ГАМК-эргической системы наивысшая, соответственно и степень компенсаторных функций ЦНС, В данных условиях преобладает расцепление глутаминовой кислоты и накопление ГАМК, вызывающей значительный тормозной эффект, направленный на защиту органов и систем от повреждения. При использовании заявляемого способа время на определение биохимических показателей мозга сокращается с 4-5 суток до 20-30 минут, при этом следует обратить внимание, что метод бескровный (исключает декэпитацию животных) и позволяет использовать его в пролонгированных экспериментах.