Спосіб діагностики ступеня вроджених пороків серця у дітей

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для оценки степени тяжести врожденных пороков сердца (ВПС) у детей. Известен способ клинико-биохимической диагностики указанной патологии у детей, раскрывающий особенности мембранно-метаболических процессов при ВПС в раннем возрасте, путем определения продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), активности фермента супероксиддисмутазы (СОД), генетически лимитирующего этот процесс, и липидного спектра мембран эритроцитов (фосфолипидов), функционально тесно связанного с ПОЛ, выбранный нами за прототип [1]. Недостатком указанного способа является отсутствие количественно-качественных характеристик взаимосвязи выраженности нарушений процессов ПОЛ и дезинтеграции биомембран с тяжестью клинического течения ВПС у детей раннего возраста. Целью изобретения является повышения точности способа диагностики ВПС у детей с учетом степени выраженности мембранных и метаболических нарушений при данной патологии, определяющих выбор комплекса консервативной терапии. Указанная цель достигается путем проведения клинико-инструментальных и биохимических исследований, отличающихся тем, что исследуют в крови содержание малонового диальдегида (МДА) и активность супероксиддисмутазы (СОД) с последующим расчетом их соотношения (в %). Заявляемый способ предполагает устранить недостатки прототипа, рассчитывая отношение показателя концентрации МДА к показателю активности СОД и при его значении меньше или равном 1,5 судят о компенсированной степени порока, при значении от 1,6 до 2,5 - о субкомпенсированной степени тяжести и при значении более 2,5 - о декомпенсированной степени ВПС у детей. Способ осуществляется следующим образом. У больных детей с ВПС определяют уровень МДА, активность СОД в крови и их соотношение (в %). Для этого к 1,0 мл гепаринизированной венозной крови добавляют 2,0 мл 10%-го раствора трихлоруксусной кислоты, перемешивают, центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин, 2,5 мл супернатанта смешивают с 1,25 мл 0,8%-го водного раствора тиобарбитуровой кислоты, инкубируют 10 мин при 100 градусах С, охлаждают и определяют оптическую плотность при 532 нм против контрольной пробы, содержащей вместо 1,0 мл сыворотки 1,0 мл буферного раствора. Количество МДА рассчитывают по формуле: МДА= Ε · Р/е · q, где Ε разность экстинций пробы и контроля; е - коэффициент молярной экстинций, равный 1,56×10 в 5-й степени; q оптический путь; Ρ - разведение образца. В кювету спектрофотометра, содержащую 3,0 карбонатного буфера (ph - 10,2) добавляют 0,1 мл 0,1%-го раствора адреналина, в течение 10 сек перемешивают и строго через 40 сек фотометрируют при 480 нм. Контролем служит бикарбонатный буфер. Затем в другую кювету, содержащую 2,9 мл бикарбонатиого буфера и 0,1 очищенного гемолизата эритроцитов исследуемой крови (1 объем эритроцитов + 1 объем этанола с хлороформом в соотношении 2:1), добавляют 0.1 мл 0,1%-го раствора адреналина, перемешивают 10 сек и фотометрируют при 480 нм через 40 сек. При этом в гемолизате определяют гемоглобин гемоглобинцианидным методом. Активность СОД (усл. ед. на 1 грамм гемоглобина) = где Ео - экстинция окисленного адреналина без СОД; Ε1 - экстинция опыта; 53,33 - коэффициент перерасчета; Егем - экстинция гемоглобина. Соотношение уровня МДА и активности СОД вычисляют по формуле где А - соотношение изучаемых показателей; В - уровень МДА в крови; С - активность СОД в крови. При значении соотношения меньше либо равном 1,5 судят о компенсированной степени тяжести ВПС у детей, от 1,6 до 2,5 - о субкомпенсированной тяжести ВПС и при значении более 2,5 - о декомпенсированной степени тяжести ВПС. Пример 1. В клинику для обследования постудил мальчик Андрей К., возраста 10 мес. по поводу грубого систолического шума, выслушиваемого в области сердца. Из анамнеза - шум выслушивается с рождения, рос и развивался соответственно возрасту. При осмотре: активный, кожа обычной окраски, частота ды ханий - 30 в 1 мин, пульс - 144 в 1 мин., над областью сердца во всех точках больше над верхушкой выслушивается грубый систолический шум. При эхоскопии сердца в В-режиме - небольшой дефект межжелудочковой перегородки (ДМЖП). в мышечной ее части, стенки желудочков не изменены. При лабораторнобиохимическом обследовании: напряжение кислорода в крови и тканях - соответственно 11,2 и 8,7 кПа, что приближается к норме (12,64 ± 0,26 и 9,36 ± 0,32 кПа); рН крови 7,361 (норма - 7,3 ± 0,021), концентрация МДА 2,3 мкмоль/л (норма - 2,05 мкмоль/л), активность СОД - 190 усл. ед /гНь (норма - 182 ±22 усл. ед.); соотношение ΜДА/СОД×100=1,211. Клинический диагноз, врожденный порок сердца - ДМЖП (болезнь Толочинова-Роже) без признаков недостаточности кровообращения. По предлагаемому способу компенсированная степень тяжести ВПС. Состояние не потребовало назначения сердечных гликозидов, после проведенного курса кардиотрофических препаратов (рибоксин, панангин, оротат калия) был выписан домой под наблюдение участкового врача и кардиоревматолога поликлиники. Пример 2. В клинику поступила девочка Оксана В, с жалобами матери на кашель, высокую температуру, стонущее дыхание. При клинико-инструментальном обследовании диагностирована очаговая пневмония, ВПС (септальные дефекты). При лабораторно-биохимическом обследовании: напряжение кислорода в крови и тканях снижено - соответственно 9,1 и 6,2 кПа; рН крови 7,325 (умеренный ацидоз); концентрация МДА - 3,5 мкмоль/л (значительно повышена); активность СОД - 171 усл. ед./г Нв (нет адекватного повышения); соотношение МДА/СОД · 100 - 2,047. По предлагаемому способу - субкомпенсированная тяжесть ВПС. Состояние ребенка потребовало назначение, помимо антибиотиков и дезинтоксикационных препаратов (гемодез, реополиглюкин), сердечных гликозидов (диогоксин в дозе насыщения 0,05 мг/кг массы) и мочегонных средств (лазикс 1 мг/кг с верошпироном) Без указанных препаратов одна лишь кардиотрофическая терапия была неэффективна. Через 2-3 недели лечения состояние больной улучшилось и девочка была выписана домой с рекомендацией последующего лечения в кардиохирургиче-ском центре. Пример 3. В клинику поступил мальчик Максим Д., возраста 2,5 мес в крайне тяжелом состоянии с общим цианозом кожи, тахипноэ, сменяющимся брадипноэ, тахикардией свыше 200 в мин. При клиникоинструментальном обследовании у ребенка диагностирован сложный порок сердца синего типа с тотальной (лево- и правожелудочковой) сердечной недостаточностью и гипотрофией. При лабораторно-биохимическом обследовании: напряжение кислорода в крови и тканях соответственно 6,4 и 4.3 кПа (резко выраженные гипоксемия и тканевая гипоксия); рН крови - 7,264 (глубокий ацидоз); концентрация МДА - 3,6 мкмоль/л; активность СОД - 112 усл. ед./г Нb (угнетена); соотношение МДА/СОД · 100 = 3,214. По прилагаемому способу - декомпенсированная тяжесть ВПС. Несмотря на проводимое интенсивное лечение (оксигенотерапия, сердечные микозиды, мочегонные, кардиотрофические препараты, бетаблокаторы и др.), через 16 часов после поступления в клинику ребенок умер, При патологоанатомическом исследовании: комбинированный порок сердца (гипоплазия желудочков, дефект межпредсердной перегородки, персистирующий артериальный проток), внутри утробная гипотрофия. Таким образом, способ позволяет достоверно и объективно оценить и различить компенсированную, субкомпенсированную и декомпенсированную степени тяжести врожденных пороков сердца у детей. Метод не требует дорогостоящего оборудования и реактивов, доступен практическому здравоохранению.