Спосіб внутрішньомозкового введення речовини дрібним лабораторним тваринам

Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к физиотерапии, и может найти применение при изучении воздействия на мозг труднодоступных для введения в него препаратов в низких дозах, как при однократном воздействии, так и в условиях хронического режима их применения. Наиболее близким по технической сущности является способ внутримозгового введения веществ с помощью микроэлектронной техники, позволяющий вводить вещества в малых дозах в глубинные нейроструктуры (Ople H.-R., Kollta W.P. Inhibition of nigral and neocortiral cells by ghydroxybutyrale. - Eur. J. Pharmacol, 1989, v.53, №4, 359 - 364). Однако вживление инородного тела в желаемые нейроструктуры практически всегда повреждает не только их целостность, но и соседние структуры, что может отрицательно отразиться на их функциональном состоянии. Кроме того всегда необходим морфометрический контроль вживленных в нейроструктуру микроэлектродов. В основу изобретения поставлена задача усовершенствования способа внутримозгового введения вещества мелким лабораторным животным, в котором благодаря созданию условий для проведения эндозонального электрофореза, возможно обеспечение преодоления гематоэнцефалического барьера без повреждения мозговых структур для проникновения в глубинные нейроструктуры труднодоступных для мозга веществ, и за счет этого возможно целенаправленно воздействовать на метаболизм и функционирование нервной ткани. Поставленная задача достигается в способе внутримозгового введения вещества мелким лабораторным животным путем вживления инородного тела, в котором согласно изобретению производят канюлирование носового хода и после заживления раневой поверхности осуществляют эндоназальный электрофорез, при этом активный электрод и форетируемое вещество размещают в канюле, а пассивный электрод на затылочной области. Доказательством причинно-следственной связи между совокупностью существенных признаков заявляемого изобретения и достигаемым техническим результатом служит следующее. Канюлирование носового хода экспериментального животного позволяет преодолеть анатомические особенности наружных носовых ходов крысы для проведения эндоназального электрофореза. Размещение активного электрода и форетируемого вещества в канюле, а пассивного электрода на затылочной области крысы позволяет технически осуществить электрофорез. Проведение электрофореза через три дня после канюлирования носового хода позволяет проводить процедуру нестрессированным и ненаркотизированным животным, что очень важно при изучении эффектов нейроактивных препаратов. Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Канюлирование носового хода производится под тиопенталовым наркозом (35мг/кГ массы животного, внутрибрюшинно) в течение 5 минут. Материалом для канюли служит пластмассовая трубка длиной 10мм, диаметром 3мм. Шовным материалом для закрепления канюли на коже служит атравматическая шелковая нить (3 шва). После операции в течение двух суток рану и канюлю обрабатывают слабым раствором пенициллина. Животных используют в опыт на 3 сутки после канюлирования носового хода. Активный электрод изготовлен из серебряной проволоки длиной 5мм. Пассивный электрод площадью 2см2. Активный электрод и форетируемое вещество для проведения электрофореза размещают в канюле, пассивный электрод размещается на выстриженном участке затылка на влажной марлевой прокладке. В зависимости от вида электрофореза (гальваническим, импульсным либо другими видами тока) применяются различные приборы, например "Поток-1" для гальванизации. Во время эндоназального электрофореза крыса спокойно находится в руках экспериментатора. Пример конкретного выполнения способа. Крыса линии Вистар, массой 0,2кг, половозрелая. Проведено канюлирование носового хода, правой ноздри. В течение двух суток при обработке раны раствором пенициллина произошло заживление. На 3 - и сутки после канюлирования проводился зндоназальный электрофорез 14C ГАМК (5 g) одноразово. Для проведения электрофореза в канюлю вводили 20мкл вещества, активный электрод. На затылочной области, предварительно выстриженной, размещался на марлевой прокладке, смоченной водой, пассивный электрод. Электрофорез проводился током 0,5мА в течение 10 минут от прибора "Поток-1". После сеанса эндоназального электрофореза крысу декапитируют, извлекают головной мозг, отбирают 5мл крови из раны, отделяют обонятельные луковицы, кору, ствол и мозжечок. Каждую часть мозга гомогенизируют и определяют радиоактивность на газопроточном счетчике марки 21 05 М "Протока". Радиоактивность рассчитывают по формуле где Б - количество импульсов за 100сек на 1г массы тела животного, В - количество импульсов за 100сек на 1г ткани. В результате введения 14C-ГАМК с помощью эндоназального электрофореза относительная радиоактивность составила: в крови - 0,009% в обонятельных луковицах - 0,005% в коре - 0,001% в стволе - 0,004% в мозжечке - 0,003%. Таким образом, большее количество относительной радиоактивности обнаружено в крови и обонятельных луковицах, что логично, учитывая возможность аксонального транспорта ГАМК по структурам ольфакторного пути, с одной стороны, и возможности интенсивного транспорта ГАМК в эндотелий капилляров, с другой стороны.