Вакцинний штам clostridium novy “з-96/135″, який використовується для виготовлення вакцин проти анаеробних інфекцій сільськогосподарських тварин

Винахід відноситься до ветеринарної і медичної мікробіології та імунології, зокрема, до біотехнології і може бути використаний для виготовлення асоційованої інактивованої концентрованої вакцини проти брадзоту, злоякісного набряку, інфекційної ( анаеробної ) ентеротоксемії овець, некротичного гепатиту овець та дизентерії ягнят, вакцини "Некросан " ( проти некробактеріозу, некротичного гепатиту, злоякісного набряку, інфекційної (анаеробної) ентеротоксемії тварин) та вакцини "Пневмомастисан" (проти пневмоентеригів і маститів тварин).[4] Вакцинний штам Clostridium novy "3-96/135" використовується в якості антигену для асоційованих концентрованих інактивованих вакцин проти анаеробних інфекцій тварин, так як має добре виражені імуногенні властивості. Представлений штам є класичним збудником злоякісного набряку тварин. Метою даного винаходу є вакцинний штам Clostridium novy "3-96/135", який володіє добре вираженими характерними для виду та типу В стабільними морфологічними, культуральними, біохімічними і патогенними для тварин властивостями. Штам був виділений з трупу корови з типовими клінічними ознаками злоякісного набряку. Прототип винаходу: у вітчизняній ветеринарній практиці немає штаму Clostridium novy , який був би задепонований для виробництва вакцин проти анаеробних інфекцій. Це затрудняє розробку засобів специфічної профілактики проти таких соціально-економічно значимих захворювань, як брадзот, злоякісний набряк, некробактеріоз, тощо. Штам Clostridium novy "3-96/135" задепонований в офіційній колекції мікроорганізмів Державного науковоконтрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів і має реєстраційний номер 135 (свідоцтва від 5.09.2002р.). Культурально-морфологічні властивості - облігатний анаероб, досить великі прямі чи трохи зігнуті палички з заокругленими кінцями. В молодих культура х бактерії рухливі, при доступі кисню рухливість швидко втрачається. Добре фарбується по Граму - грампозитивні. Формує круглі та овальні спори , розміщені переважно субтермінально. В мазках культур і мазках-відбитках із органів палички розміщуються короткими ланцюжками по 3-5 клітин.[1, 2] Оптимум росту 37°С, рН7,8. На м'ясопечінкових середовищах бур хливий ріст із повним помутнінням та незначним газоутворенням. Через 48год. бульйон просвітлюється і на дні формується осад у вигляді пластівців. На поверхні глюкозо-кров'яного агару в анаеробних умовах спостерігається ріст шороховатих, сірого кольору плоских колоній з нерівними краями та відгалуженнями.Колонії обмежені зоною гемолізу. [1, 2, 3] Мозкове середовище не чорніє. Звертання молока повільне, супроводжується випадінням дрібних пластівців, пептонізація не спостерігається. [1] Біохімічні властивості. Цукролітичні властивості Clostridium novy "3-96/135" виражені слабо.Ферментує глюкозу, мальтозу, фруктозу. Розкладає гліцерин. Розріджує желатину повільно. [3] Патогенні властивості. Штам Clostridium novy "3-96/135" при рості на елективних середовищах та в організмі тварин синтезує досить активний складний токсин. При підшкірному введенні в ділянці черева добової бульйонної культури Clostridium novy "3-96/135" морським свинкам масою 350-400г в дозі 0,7см 3 в концентрації 0,5×104 мікробних клітин в 1см 3 спостерігається їх загибель протягом 48год. На місці введення культури збудника шерсть випадає, шкіра відшаровується, виявляється желатинозно-серозний набряк, м'язи рожево-червоного кольору, наповнені серозною рідиною з міхурцями газу. Лімфатичні вузли геморагічно-інфільтровані. Кишечник вздутий. Судини наповнені кров'ю. [2] Імуногенні властивості. Двічі парантерально щеплені білі миші анакультурою Clostridium novy "3-96/135" в об'ємі 0,5см 3 захищає від контрольного зараження вірулентною культурою цього ж штаму в 90% випадків. Винахід ілюструється наступними прикладами. Приклад 1. Білих мишей в кількості 10 голів масою 16-18г щепили анакультурою штаму Clostridium novy "396/135" ігідпікірно та 10 голів внутрішньочеревне в об'ємі 0,5см 3. Щеплення проводили двічі з інтервалом 12 діб. На 14 добу після 2-го щеплення проводили зараження мишей вірулентною культурою цього ж штаму. В якості контролю були неімунізовані білі миші. Встановлено, що коефіцієнт ефективності імунізації тварин склав 90% при 100% загиблих білих мишей контрольної групи. Приклад 2. Морських свинок масою 400г імунізували анакультурою Clostridium novy "3-96/135" в кількості 10 голів внутрішньом'язево в ділянці внутрішньої поверхні стегна в об'ємі 1,0см 3. Щеплення проводили двічі з інтервалом 12 діб. На 14 добу після другого щеплення проводили зараження вірулентною культурою цього ж штаму .В якості контролю були не імунізовані морські свинки. Було встановлено, що коефіцієнт ефективності імунізації тварин склав 90% при 100% загиблі морських свинок контрольної групи. Проведені дослідження підтверджують, що запропонований штам володіє високою патогенністю і придатний до виробництва вакцини асоційованої інактивованої концентрованої проти брадзоту, злоякісного набряку, інфекційної (анаеробної) ентеротоксемії, некротичного гепатиту та дизентерії ягнят, вакцини "Некросан " (проти некробактеріозу, некротичного гепатиту, злоякісного набряку, інфекційної (анаеробної) ентеротоксемії тварин) та вакцини "Пневмомастисан" (проти пневмоентеритів і маститів тварин). Список літератури. 1. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные инфекции. Справочник /Сост.Б-И.Антонов, В.В.Борисова, П.М.Волкова и др.; Под ред.Б.И.Антонова - М.:Агропромиздат,1986 - С.37-44. 2. Львов В.М.Лабораторная диагностика анаеробних инфекций сельскохозяйственных животных. - М.: Сельхозгиз, 1951 - 91с. 3. Определитель бактерий Берджи в 2-х томах. Т.2 Пер.с англ. / Под ред. Дж.Хоулта, Н. Крига, П.Снита, Дж. Стейли, С.Уильямса. - М.: Мир, 1997. - 432с. 4. Риженко В.П., Марченко О.М., Бондар Т.О., Галка І.В., Риженко І.В., Кравцова О.Л., Черніков О.О.Актуальні питання профілактики анаеробних інфекцій людини і тварин //Бюлетень " Ветеринарна біотехнологія" IBM УААН, Київ, 2002. - №2 - С.199-204.