Спосіб виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин
Номер патенту: 69170
Опубліковано: 16.08.2004
Автори: Волошин Микола Анатолійович, Григор'єва Олена Анатоліївна
Завантажити PDF файл.
Формула / Реферат
Спосіб виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин шляхом підготовки гістологічного препарату тимусу, проведення гістохімічної реакції, виготовлення препарату і світлової мікроскопії, який відрізняється тим, що гістохімічну реакцію проводять з пектином зав'язі пшениці (WGA).
Текст
Винахід стосується медицини., а саме, гістології і анатомії, і може бути використаним у вивченні морфології тимусу лабораторних тварин. Існує багато способів виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу, але вони недостатньо специфічні, що викликало необхідність у розробці нових способів. Відомий спосіб виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу, який полягає у фарбуванні гістологічних препаратів (парафінових зрізів) гематоксиліном і еозином (Аминова Г.Г. Цитоархитектоника разных зон тимуса крыс // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. -1987. -№11. -С.73-76). Спільною суттєвою ознакою аналога і винаходу, що заявляється, є така: - підготовка гістологічних препаратів; - заготовлення препарату; - мікроскопія. Цей спосіб є недостатньо ефективним, тому що не дозволяє специфічно виявляти епітеліоретикулоцити тимусу. Найбільш близьким за технічною сутністю та результатом, що досягається, є спосіб, який полягає у визначенні активності сукцінтдегідрогенази епітеліоретикулоцитів тимусу (Клименко О.М., Хомич В.Т. Метод виявлення епітеліоцитів у паренхімі тимуса ссавців та птахів // Методичні рекомендації. - Київ, 2000. -10с.). Спільними суттєвими ознаками прототипу і винаходу, що заявляється, є такі: - підготовка гістологічних препаратів тимусу; - проведення гістохімічної реакції; - заготовлення препарату; - мікроскопія. Цей спосіб є недостатньо ефективним, тому що сукцінтдегідрогеназа не є специфічним ферментом тільки для епітеліоретикулоцитів тимусу. Її активність достатньо висока у дендритних клітинах та макрофагах, що не дозволяє відрізняти ці клітини від епітеліоретикулоцитів, та викликає кількісні помилки при аналізі цитоархітектоніки тимусу. В основу винаходу поставлено задачу удосконалення способу виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин шляхом постановки гістохімічної реакції з лектином зав’язі пшениці (WGA) для виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу щурів, що дозволяє підвищити ефективність специфічного виявлення цих клітин. Поставлена задача вирішується тим, що у способі, який включає підготовку гістологічних препаратів, проведення гістохімічної реакції, заготовлення гістологічних препаратів та їх світлову мікроскопію, новим є те, гістохімічну реакцію проводять з пектином зав'язі пшениці (WGA). Причинно-наслідковий зв’язок між сукупністю ознак, що заявляються, та технічним результатом полягає у такому. Постановка гістохімічної реакції з пектином зав'язі пшениці (WGA) для виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин дозволить зменшити помилки при підрахунку цих клітин в гістологічних препаратах тимусу. Запропонований спосіб дозволяє вибірково диференціювати епітеліоретикулоцити коркової і мозкової речовини тимусу щурів. Ця специфічна гістохімічна реакція дозволить аналізувати функціональний стан епітеліоретикулоцитів тимусу завдяки періодичній зміні експресії WGA+ - рецепторів на мембранах та в цитоплазмі цих клітин. Таким чином, сукупність вищезазначених позитивних моментів дозволить підвищити якість оцінки цитоархітектоніки тимусу. Спосіб здійснюють таким чином. Для гістохімічного дослідження тимус щурів фіксують в рідині Буєна. Шматочки обезвожують в висхідній батареї спиртів, починаючи з 50%. Отримують парафінові зрізи товщиною 5-6мкм. Гістохімічне визначення рецепторів до пектину зав'язі пшениці (WGA) проводять з використанням прямої реакції з кон'югатами і пероксідазою хріну. Рецептори до пектину виявляють по відкладенню бензидинової мітки. Морфометричний підрахунок клітин, які мають на своїй поверхні пігментну бензидинові мітку, кон'юговану з пектином зав'язі пшениці (WGA), проводять за допомогою окулярної сітки при імерсійному збільшенні мікроскопу. Приклад. Тонкі відрости WGA+ -епітеліоретикулоцитів коркової речовини й субкапсулярної зони тимусу, забарвлені бензидином, створюють дрібнопетельну WGA+ - сітку. В мозковій речовині відростки помічених бензидином епітеліоретикулоцитів короткі й потовщені. Епітеліоретикулоцити мозкової речовини розташовуються поодиноко або створюють невеликі скупчення. Цитоплазматичні відростки епітеліоретикулоцитів мозкової речовини формують великопетельну WGA+ -сітку.
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for detecting the thymus epithelial reticulocytes in experimental animals
Автори англійськоюVoloshyn Mykola Anatoliiovych, Hryhorieva Olena Anatoliivna
Назва патенту російськоюСпособ обнаружения эпителиальных ретикулоцитов тимуса у лабораторных животных
Автори російськоюВолошин Николай Анатольевич, Григорьева Елена Анатольевна
МПК / Мітки
МПК: G01N 21/00
Мітки: спосіб, тимусу, виявлення, лабораторних, тварин, епітеліоретикулоцитів
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/1-69170-sposib-viyavlennya-epitelioretikulocitiv-timusu-u-laboratornikh-tvarin.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин</a>
Попередній патент: Спосіб виготовлення та відновлення лопатки вентилятора
Наступний патент: Пристрій для виготовлення багатошарового волокнистого матеріалу
Випадковий патент: Композиція вакцини та спосіб її одержання