Спосіб виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин

Номер патенту: 69170

Опубліковано: 16.08.2004

Автори: Волошин Микола Анатолійович, Григор'єва Олена Анатоліївна

Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Спосіб виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин шляхом підготовки гістологічного препарату тимусу, проведення гістохімічної реакції, виготовлення препарату і світлової мікроскопії, який відрізняється тим, що гістохімічну реакцію проводять з пектином зав'язі пшениці (WGA).

Текст

Винахід стосується медицини., а саме, гістології і анатомії, і може бути використаним у вивченні морфології тимусу лабораторних тварин. Існує багато способів виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу, але вони недостатньо специфічні, що викликало необхідність у розробці нових способів. Відомий спосіб виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу, який полягає у фарбуванні гістологічних препаратів (парафінових зрізів) гематоксиліном і еозином (Аминова Г.Г. Цитоархитектоника разных зон тимуса крыс // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. -1987. -№11. -С.73-76). Спільною суттєвою ознакою аналога і винаходу, що заявляється, є така: - підготовка гістологічних препаратів; - заготовлення препарату; - мікроскопія. Цей спосіб є недостатньо ефективним, тому що не дозволяє специфічно виявляти епітеліоретикулоцити тимусу. Найбільш близьким за технічною сутністю та результатом, що досягається, є спосіб, який полягає у визначенні активності сукцінтдегідрогенази епітеліоретикулоцитів тимусу (Клименко О.М., Хомич В.Т. Метод виявлення епітеліоцитів у паренхімі тимуса ссавців та птахів // Методичні рекомендації. - Київ, 2000. -10с.). Спільними суттєвими ознаками прототипу і винаходу, що заявляється, є такі: - підготовка гістологічних препаратів тимусу; - проведення гістохімічної реакції; - заготовлення препарату; - мікроскопія. Цей спосіб є недостатньо ефективним, тому що сукцінтдегідрогеназа не є специфічним ферментом тільки для епітеліоретикулоцитів тимусу. Її активність достатньо висока у дендритних клітинах та макрофагах, що не дозволяє відрізняти ці клітини від епітеліоретикулоцитів, та викликає кількісні помилки при аналізі цитоархітектоніки тимусу. В основу винаходу поставлено задачу удосконалення способу виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин шляхом постановки гістохімічної реакції з лектином зав’язі пшениці (WGA) для виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу щурів, що дозволяє підвищити ефективність специфічного виявлення цих клітин. Поставлена задача вирішується тим, що у способі, який включає підготовку гістологічних препаратів, проведення гістохімічної реакції, заготовлення гістологічних препаратів та їх світлову мікроскопію, новим є те, гістохімічну реакцію проводять з пектином зав'язі пшениці (WGA). Причинно-наслідковий зв’язок між сукупністю ознак, що заявляються, та технічним результатом полягає у такому. Постановка гістохімічної реакції з пектином зав'язі пшениці (WGA) для виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин дозволить зменшити помилки при підрахунку цих клітин в гістологічних препаратах тимусу. Запропонований спосіб дозволяє вибірково диференціювати епітеліоретикулоцити коркової і мозкової речовини тимусу щурів. Ця специфічна гістохімічна реакція дозволить аналізувати функціональний стан епітеліоретикулоцитів тимусу завдяки періодичній зміні експресії WGA+ - рецепторів на мембранах та в цитоплазмі цих клітин. Таким чином, сукупність вищезазначених позитивних моментів дозволить підвищити якість оцінки цитоархітектоніки тимусу. Спосіб здійснюють таким чином. Для гістохімічного дослідження тимус щурів фіксують в рідині Буєна. Шматочки обезвожують в висхідній батареї спиртів, починаючи з 50%. Отримують парафінові зрізи товщиною 5-6мкм. Гістохімічне визначення рецепторів до пектину зав'язі пшениці (WGA) проводять з використанням прямої реакції з кон'югатами і пероксідазою хріну. Рецептори до пектину виявляють по відкладенню бензидинової мітки. Морфометричний підрахунок клітин, які мають на своїй поверхні пігментну бензидинові мітку, кон'юговану з пектином зав'язі пшениці (WGA), проводять за допомогою окулярної сітки при імерсійному збільшенні мікроскопу. Приклад. Тонкі відрости WGA+ -епітеліоретикулоцитів коркової речовини й субкапсулярної зони тимусу, забарвлені бензидином, створюють дрібнопетельну WGA+ - сітку. В мозковій речовині відростки помічених бензидином епітеліоретикулоцитів короткі й потовщені. Епітеліоретикулоцити мозкової речовини розташовуються поодиноко або створюють невеликі скупчення. Цитоплазматичні відростки епітеліоретикулоцитів мозкової речовини формують великопетельну WGA+ -сітку.

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Method for detecting the thymus epithelial reticulocytes in experimental animals

Автори англійською

Voloshyn Mykola Anatoliiovych, Hryhorieva Olena Anatoliivna

Назва патенту російською

Способ обнаружения эпителиальных ретикулоцитов тимуса у лабораторных животных

Автори російською

Волошин Николай Анатольевич, Григорьева Елена Анатольевна

МПК / Мітки

МПК: G01N 21/00

Мітки: спосіб, тимусу, виявлення, лабораторних, тварин, епітеліоретикулоцитів

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/1-69170-sposib-viyavlennya-epitelioretikulocitiv-timusu-u-laboratornikh-tvarin.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб виявлення епітеліоретикулоцитів тимусу у лабораторних тварин</a>

Подібні патенти