Транслегенева ліпосома для регулювання доставки лікарського засобу

Реферат: Винахід належить до галузі медицини та стосується ліпосоми для легеневого введення, в якій поверхня модифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом. UA 100375 C2 (12) UA 100375 C2 UA 100375 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ГАЛУЗЬ ВИНАХОДУ Даний винахід стосується ліпосоми, яка є чудовим засобом для регулювання доставки лікарських речовин або генів і придатна для легеневого введення. Крім того, даний винахід стосується ліпосомального препарату, в якому лікарські речовини або гени інкапсульовані в ліпосоми. ПЕРЕДУМОВИ ВИНАХОДУ Ліпосома являє собою замкнений пухирець, що має двошарову ліпідну структуру. Ліпосома може включати лікарські речовини або гени, ізолюючи їх від зовнішнього оточення за допомогою бімолекулярної мембрани, і, таким чином, може захищати інкапсульовані лікарські речовини або гени від розкладання або метаболізму. Крім того, регулюючи склад ліпосомальної мембрани, можна прикріпити ліпосому до клітинної мембрани і слизової оболонки, і, отже, є можливість доставки включених лікарських речовин або генів в клітини. Завдяки такій захисній функції і функції доставки, ліпосоми привертають увагу як носії для лікарських речовин або генів. Взагалі, потрібно доставити застосовні для лікування захворювань лікарські речовини і гени до наміченого місця дії і здійснити намічену фармакологічну дію в даному місці. Застосування ліпосом є спробою поліпшити характеристики доставки лікарських речовин або генів до наміченого місця дії. Запропоновані способи регулювання видів, співвідношення і поверхневих зарядів складових ліпідів з метою надання ліпосомам функції селективного транспортування до наміченого місця дії. Однак способи прототипів, що згадуються вище, не можуть адекватно регулювати характеристики доставки ліків в даних обставинах. Зокрема, лікарські речовини і гени, що застосовуються для легеневої тканини, потребують суворого регулювання поведінки лікарських речовин або генів in vivo в залежності від способу їх дії, тобто, в деяких випадках потрібне утримання на поверхні легеневої тканини (наприклад, на бронховезикулярній поверхні) і в інших випадках потрібне включення всередину легеневої тканини. Однак методики регулювання поведінки лікарських речовин і генів in vivo в легеневій тканині поки не створені. Тим часом, описуються методики модифікації поверхні ліпосом за допомогою макромолекул, таких як полімери (наприклад, непатентні документи 1 і 2). Однак методики регулювання поведінки лікарських речовин або генів in vivo в легеневій тканині за допомогою модифікації поверхні ліпосом недостатньо відомі. [Непатентний документ 1] Takeuchi Н et al., "Effektiveness of submicron-sized, chitosan-coated liposomes in oral administration of peptide drags", Int J Pharm., 2005 Oct. 13; 303(1-2):160-170. [Непатентний документ 2] Takeuchi Н і інш. "Evaluation of circulation liposomes coated with hydrophilic polymers having different molecular weights in rats", J Control Release, 2001 Jul 10; 75(1-2):83-91. РОЗКРИТТЯ ВИНАХОДУ Технічна задача Таким чином, задачею винаходу є розв'язання описаних вище проблем, властивих рішенням, відомим з рівня техніки. Конкретно, задачею винаходу є створення ліпосоми, яка є чудовим засобом для регулювання доставки лікарських речовин або генів і придатної для легеневого введення, і ліпосомальний препарат для легеневого введення, в якому лікарські речовини або гени інкапсульовані в ліпосоми. Крім того, іншою задачею винаходу є забезпечення способу лікування захворювання легеневої тканини із застосуванням вказаного ліпосомального препарату. Способи розв'язання проблеми Автори даного винаходу провели інтенсивні дослідження для досягнення вказаної вище задачі і виявили, що при модифікації поверхні ліпосоми з використанням термінально гідрофобізованого полівінілового спирту і/або хітозану, утримання включених в ліпосому лікарських речовин або генів на поверхні легеневої тканини і перенесення лікарських речовин або генів в легеневу тканину або клітини легеневої поверхні можна модулювати належним чином і, таким чином, регулювати поведінку лікарських речовин або генів in vivo. Винахід виконаний за допомогою додаткового поліпшення, зробленого на основі цих відкриттів. Зокрема даний винахід стосується наступних варіантів. Абзац 1. Ліпосома для легеневого введення, де поверхня ліпосоми модифікована щонайменше одним полімером, вибраним з групи, що включає термінально гідрофобізовані полівінілові спирти і хітозан. Абзац 2. Ліпосома для легеневого введення згідно з абзацом 1, яка містить фосфоліпід як складовий компонент ліпосомальної мембрани. 1 UA 100375 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Абзац 3. Ліпосома для легеневого введення згідно з абзацом 1, яка містить як складові компоненти ліпосомальної мембрани фосфатидилхолін, холестерин і діалкілфосфатний ефір. Абзац 4. Ліпосома для легеневого введення згідно з абзацом 1, в якій поверхня ліпосоми модифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом, і цільовими ділянками для ліпосом є поверхня легеневої тканини або клітини поверхні. Абзац 5. Ліпосома для легеневого введення згідно з абзацом 1, в якій поверхня ліпосоми модифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом, і ліпосома являє собою ліпосому з уповільненим вивільненням для легеневого введення. Абзац 6. Ліпосома для легеневого введення згідно з абзацом 1, в якій поверхня ліпосоми модифікована хітозаном, і цільовими ділянками для ліпосом є поверхня і внутрішня частина легеневої тканини. Абзац 7. Ліпосома для легеневого введення згідно з абзацом 1, в якій поверхня ліпосоми модифікована хітозаном, і ліпосома являє собою швидкодіючу ліпосому для легеневого введення. Абзац 8. Ліпосома для легеневого введення згідно з абзацом 1, де поверхня ліпосоми модифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом, в якому гідрофобна група являє собою алкільну групу, що має від 1 до 30 атомів вуглецю, алкоксигрупу, що має від 1 до 30 атомів вуглецю, карбоксіалкільну групу, що має від 1 до 30 атомів вуглецю, або тіоалкільну групу, що має від 1 до 30 атомів вуглецю. Абзац 9. Ліпосомальний препарат для легеневого введення, в якому лікарська речовина або ген включені в ліпосому для легеневого введення згідно з абзацом 1. Абзац 10. Ліпосомальний препарат для легеневого введення згідно з абзацом 9, в якому поверхня ліпосоми модифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом, і цільовими ділянками для ліпосомального препарату є поверхня легеневої тканини або клітини поверхні. Абзац 11. Ліпосомальний препарат для легеневого введення згідно з абзацом 9, в якому поверхня ліпосоми модифікована хітозаном, і цільовими ділянками для ліпосомального препарату є поверхня і внутрішня частина легеневої тканини. Абзац 12. Спосіб одержання ліпосомального препарату для легеневого введення, що включає наступні стадії (i) і (ii): (i) змішування лікарської речовини або гена з складовим компонентом або компонентами ліпосомальної мембрани з одержанням ліпосоми, що інкапсулює лікарську речовину або ген, і (ii) змішування одержаних на попередній стадії (i) ліпосом, що інкапсулюють лікарську речовину або ген щонайменше з одним полімером, вибраним з групи, що включає термінально гідрофобізовані полівінілові спирти і хітозан, для модифікації поверхні ліпосоми полімером. Абзац 13. Застосування щонайменше одного полімеру, вибраного з групи, що включає термінально гідрофобізовані полівінілові спирти і хітозан, для виробництва ліпосоми для легеневого введення. Абзац 14. Застосування термінально гідрофобізованого полівінілового спирту для одержання ліпосоми з уповільненим вивільненням для легеневого введення. Абзац 15. Застосування хітозану для одержання швидкодіючої ліпосоми для легеневого введення. Абзац 16. Спосіб лікування захворювання легеневої тканини, що включає стадію введення в легеню пацієнта, страждаючого від захворювання легеневої тканини, терапевтично ефективної кількості ліпосомального препарату згідно з абзацом 9. РЕЗУЛЬТАТИ ВИНАХОДУ Ліпосома для транслегеневого введення за винаходом може повідомляти лікарським речовинам або генам, призначеним для застосування в легеневій тканині, необхідну поведінку in vivo, завдяки чому можна регулювати утримання на поверхні легеневої тканини лікарських речовин або генів, інкапсульованих в ліпосоми, і перенесення лікарських речовин або генів в легеневу тканину, модулюючи кількість термінально гідрофобізованого полівінілового спирту і/або хітозану. Отже, на основі ліпосоми для легеневого введення можна ефективно здійснювати фармакологічну дію, зумовлену інкапсульованими лікарськими речовинами або генами, на цільовій ділянці впливу в легеневій тканині. Вважають, що ліпосома для легеневого введення за винаходом має порівняно високу безпеку, оскільки термінально гідрофобізований полівініловий спирт і хітозан, що застосовується для модифікації поверхні ліпосоми для легеневого введення за винаходом, мають характеристики біосумісності або біоразкладання. Крім того, на основі ліпосоми для легеневого введення за винаходом можна захистити ліпосому за допомогою термінально гідрофобізованого полівінілового спирту і/або хітозану, яким поверхнево модифікована 2 UA 100375 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ліпосома, тим самим можна покласти край руйнуванню інкапсульованих лікарських речовин або генів. Таким чином, ліпосома для легеневого введення за винаходом також має перевагу з точки зору високої стабільності інкапсульованих лікарських речовин або генів. КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕННЯ На фіг. 1 представлений графік, що демонструє результати оцінок контрольного прикладу 1, в якому визначають поведінку полімермодифікованих ліпосом прикладів 1 і 2 і немодифікованої ліпосоми порівняльного прикладу 2 в легенях щурів. ПЕРЕВАЖНИЙ СПОСІБ ЗДІЙСНЕННЯ ВИНАХОДУ Нижче винахід описаний детально. У ліпосомі для легеневого введення за винаходом кількість ліпідних подвійних шарів спеціально не обмежена доти, поки ліпосома являє собою замкнений пухирець, що має ліпідну двошарову мембранну структуру. Він може бути будь-яким маленьким одношаровим пухирцем (SUV), великим одношаровим пухирцем (LUV) і багатошаровим пухирцем (MLV). У ліпосомі для легеневого введення за винаходом компонент, що складає ліпідний подвійний шар, спеціально не обмежений доти, поки він використовується звичайним чином як складовий компонент ліпосомальної мембрани. Зокрема, приклади складових компонентів ліпосомальної мембрани включають ліпіди, стабілізатори мембран, заряджену речовину, антиоксиданти і мембранні білки. Ліпід, який є складовим компонентом ліпосомальної мембрани, являє собою істотний компонент в ліпосомальній мембрані, і його приклади включають фосфоліпіди, гліколіпіди, стерини і насичені або ненасичені жирні кислоти. Конкретні приклади фосфоліпідів включають фосфатидилхоліни, такі як дилауроїлфосфатидилхолін, диміристоїлфосфатидилхолін, дипальмітоїлфосфатидилхолін, дистеароїлфосфатидилхолін, діолеоїлфосфатидилхолін, диленолеоїлфосфатидилхолін, міристоїлпальмітоїлфосфатидилхолін, міристоїлстеароїлфосфатидилхолін і пальмітоїлстеароїлфосфатидилхолін; фосфатиділгліцерини, такі як дилауроїлфосфатиділгліцерин, диміристоїлфосфатиділгліцерин, дипальмітоїлфосфатиділгліцерин, дистеароїлфосфатиділгліцерин, діолеоїлфосфатиділгліцерин, диленолеоїлфосфатиділгліцерин, міристоїлпальмітоїлфосфатиділгліцерин, міристоїлстеароїлфосфатиділгліцерин і пальмітоїлстеароїлфосфатиділгліцерин; фосфатиділетаноламіни, такі як дилауроїлфосфатиділетаноламін, диміристоїлфосфатиділетаноламін, дипальмітоїлфосфатиділетаноламін, дистеароїлфосфатиділетаноламін, діолеоїлфосфатиділетаноламін, диленолеоїлфосфатиділетаноламін, міристоїлпальмітоїлфосфатиділетаноламін, міристоїлстеароїлфосфатиділетаноламін і пальмітоїлстеароїлфосфатиділетаноламін; фосфатиділсерин; фосфатидну кислоту; фосфатиділінозит; сфінгомієлін; кардіоліпін; лецитин яєчного жовтка; соєвий лецитин і продукти його гідрування. Конкретні приклади гліколіпідів включають гліцерогліколіпіди, такі як диглікозилдигліцерид, дигалактозилдигліцерид, галактозилдигліцерид і глікозилдигліцерид; глікосфінголіпіди, такі як галактозилцереброзид і гангліозид; стеарилглюкозид і етерифекований стеарилглікозид. Конкретні приклади стеринів включають холестерин, холестерилгемісукцинат, ланостерин, дигідроланостерин, десмостерин, дигідрохолестерин, фітостерин, стигмастерин, зимостерин, ергостерин, ситостерин, кампестерин і брассикастерин. Зокрема, стерин здійснює стабілізацію ліпосомальної мембрани і модулювання текучості ліпосомальної мембрани, і, таким чином, переважно, щоб він містився як якладовий ліпіду ліпосомальної мембрани. Конкретні приклади насичених або ненасичених жирних кислот включають насичені або ненасичені жирні кислоти, що мають від 10 до 22 атомів вуглецю, такі як деканова кислота, міристинова кислота, пальмітинова кислота, стеаринова кислота, арахідонова кислота, олеїнова кислота і докозанова кислота. Ці ліпідні компоненти ліпосомальної мембрани можна використовувати по одному або можна використовувати два або декілька їх видів в комбінації. Серед цих складових ліпідів ліпосомальної мембрани переважною є комбінація фосфоліпіда(ів) і стерину, і більш переважною є комбінація фосфатидилхоліну і холестерину. Якщо фосфоліпід(и) і стерин використовують в комбінації, то співвідношення обох компонентів спеціально не обмежене, і кількість стерину становить, наприклад, від 1 до 100 моль, переважно від 5 до 50 моль і більш переважно від 10 до 30 моль на 100 моль фосфоліпіда(ів). Вміст складового ліпіду ліпосомальної мембрани спеціально не обмежений і дорівнює, наприклад, від 1 до 100%, переважно від 60 до 95% і більш переважно від 70 до 90% від загальної кількості складових компонентів ліпосомальної мембрани в молярному відношенні. 3 UA 100375 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Щоб модулювати електричний заряд ліпосомальної мембрани, підмішують заряджену речовину і необов'язково використовують її як складовий компонент ліпосомальної мембрани. Використовуваний тут вираз «заряджену речовину» означає складовий компонент мембрани, що має електричний заряд і відмінний від фосфоліпіду, гліколіпіду і стерину. Електричний заряд ліпосомальної мембрани можна модулювати, застосовуючи як ліпід, що є складовим компонентом ліпосомальної мембрани, іонними фосфоліпіди, такими як холестерилгемісукцинат, фосфатиділсерин, фосфатиділінозит і фосфатидна кислота, і також можна модулювати, використовуючи замість іонних фосфоліпідів заряджену речовину або використовуючи заряджену речовину в комбінації з іонними фосфоліпідами. Конкретні приклади зарядженої речовини, які повідомляють позитивний заряд, включають аліфатичні первинні аміни, такі як лауриламін, міристиламін, пальмітиламін, стеариламін і олеїламін. Приклади заряджених речовин, які повідомляють негативний заряд, включає ефіри діалкіл(C1418)фосфати, наприклад, дицетилфосфат. Серед цих заряджених речовин придатними для застосування в ліпосомі для легеневого введення за винаходом, є ефіри діалкілфосфати, зокрема, дицетилфосфат, оскільки використання таких заряджених речовин може давати негативно заряджену ліпосому, тим самим ефективно модифікуючи поверхню ліпосоми. Пропорція зарядженої речовини, що міститься в ліпосомальній мембрані, спеціально не обмежена і становить, наприклад, від 0 до 5%, переважно від 5 до 40% і більш переважно від 10 до 25%, від загальної кількості складових компонентів ліпосомальної мембрани в молярному відношенні. Для запобігання окисленню ліпосомальної мембрани в ній може міститися антиоксидант і необов'язково використовуватися як складовий компонент ліпосомальної мембрани. Приклади антиоксидантів, що застосовуються як складовий компонент ліпосомальної мембрани, включають бутилований гідрокситолуол, пропілгалат, токоферол, токоферолацетат, суміш, збагачену токоферолом, вітамін Е, аскорбінову кислоту, L-аскорбілстеарат, аскорбілпальмітат, гідросульфіт натрію, сульфіт натрію, едетат натрію, ериторбову кислоту і лимонну кислоту. Пропорція антиоксиданту, що міститься в ліпосомальній мембрані, спеціально не обмежена і становить, наприклад, від 0 до 40%, переважно від 5 до 20% і більш переважно від 2,5 до 10% від загальної кількості складових компонентів ліпосомальної мембрани в молярному відношенні. Можна підмішувати мембранний білок з метою додання функцій ліпосомальній мембрані або стабілізації структури ліпосомальної мембрани і необов'язково використовувати його як складовий компонент ліпосомальної мембрани. Приклади мембранного білка включають поверхневий мембранний білок, інтегральний мембранний білок, альбумін і рекомбінантний альбумін. Пропорція мембранного білка, що міститься в ліпосомальній мембрані, спеціально не обмежена і становить, наприклад, від 0 до 20%, переважно від 2,5 до 10% і більш переважно від 5 до 8% від загальної кількості складових компонентів ліпосомальної мембрани в молярному відношенні. З точки зору виконання ефективної і інтенсивної модифікації хітозаном, переважно включати як складовий компонент ліпосомальної мембрани компонент, що має негативний заряд. Ліпосома переважно містить як складовий компоненти мембрани фосфоліпіди, стерин і заряджену речовину, здатну додати негативний заряд, і більш переважно фосфатидилхолін, холестерин і діалкілфосфатний ефір. На основі ліпосоми, що містить такі мембранні складові компоненти, можна ефективно і інтенсивно провести модифікацію поверхні ліпосоми і також можна ефективно регулювати утримання на поверхні легеневої тканини і перенесення в легеневу тканину. Діаметр часток що використовуються в ліпосомі для легеневого введення за винаходом (тобто, діаметр часток ліпосоми в стані, коли поверхня не модифікована), можна встановити відповідним чином відповідно до вигляду ліпіду і полімеру, що застосовуються для модифікації поверхні, і діаметр становить, наприклад, приблизно від 20 до 1000 нм, переважно приблизно від 50 до 500 нм і більш переважно приблизно від 100 до 200 нм. Діаметр часток ліпосоми визначають методом динамічного розсіювання світла. Ліпосому можна одержати, застосовуючи, наприклад, відомі способи, такі як спосіб гідратації тонких мембран, спосіб обробки ультразвуком, спосіб з ін'єкцією етанолу, спосіб з ін'єкцією простого ефіру, спосіб випарювання в оберненій фазі, спосіб із застосуванням ПАВ, спосіб заморожування/танення і спосіб ультразвукової гідратації тонких мембран. Діаметр часток ліпосоми можна модулювати відомими способами, такими як спосіб екструзії, спосіб із застосуванням френч-преса і спосіб гомогенізації. 4 UA 100375 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 У ліпосомі для легеневого введення за винаходом модифікують поверхню ліпосоми, застосовуючи щонайменше один полімер, вибраний з групи, що включає термінально гідрофобізовані полівінілові спирти і хітозан (тут далі іноді означається як полімер для модифікації поверхні). У ліпосомі для легеневого введення за винаходом модифікують поверхню ліпосоми, приєднуючи полімер для модифікації поверхні на поверхні ліпосоми через гідрофобний зв'язок, водневий зв'язок або електростатичний зв'язок. Вираз «термінально гідрофобізований полівініловий спирт» означає тут полімер, в якому гідрофобна група пов'язана з кінцем полівінілового спирту. Конкретні приклади термінально гідрофобізованого полівінілового спирту включають полімери, в яких гідрофобна група, вибрана з алкільної групи, алкоксигрупи, карбоксіалкільної групи і тіоалкільної групи, зв'язана з кінцем полівінілового спирту. Серед цих полімерів переважний полімер, в якому гідрофобна група являє собою тіоалкільну групу. Можна використовувати алкільні групи, алкоксигрупи, карбоксіалкільні групи і тіоалкільні групи, які являють собою гідрофобні групи, що мають приблизно від 1 до 30 атомів вуглецю, переважно приблизно від 5 до 25 атомів вуглецю і більш переважно приблизно від 10 до 20 атомів вуглецю. Алкільні групи, алкоксигрупи, карбоксіалкільні групи і тіоалкільні групи, які являють собою гідрофобні групи, можуть бути лінійними або розгалуженими і переважно є лінійними. Переважною гідрофобною групою термінально гідрофобізованого полівінілового спирту, що застосовується в даному винаході, є тіоалкільна група, що має від 1 до 30 атомів вуглецю, більш переважна лінійна тіоалкільна група, що має від 5 до 25 атомів вуглецю, і особливо переважна лінійна тіоалкільна група, що має від 10 до 20 атомів вуглецю. Термінально гідрофобізований полівініловий спирт для застосування в даному винаході може бути будь-яким полівініловим спиртом, що має гідрофобну групу, зв'язану з термінальним атомом вуглецю полівінілового спирту. Наприклад, якщо гідрофобна група являє собою тіоалкільну групу, то атом сірки тіоалкільной групи може бути ковалентно зв'язаний з термінальним атомом вуглецю полівінілового спирту. Міра омилення полівінілового спирту в термінально гідрофобізованому полівініловому спирті становить від 70 до 95 мольн.%, переважно від 80 до 95 мольн.% і більш переважно від 82 до 93 мольн.%. Крім того, міра полімеризації полівінілспиртового компонента термінально гідрофобізованого полівінілового спирту становить від 100 до 1000, переважно від 200 до 800 і більш переважно від 300 до 600. У даному винаході ці термінально гідрофобізовані полівінілові спирти можна використовувати по одному, або можна використовувати два їх види або більше в комбінації. Термінально гідрофобізований полівініловий спирт є відомою сполукою і доступний комерційно або одержується відомим способом одержання. Хітозан являє собою полісахарид, в якому глюкозамінний залишок зв'язаний через β 1-4 зв'язок. Міра полімеризації хітозану, що використовується для модифікації поверхні ліпосоми, становить від 2 до 1000, переважно від 50 до 900 і більш переважно від 100 до 800 (приблизно від 20000 до 150000 в одиницях молекулярної маси). Також міра деацетилування хітозану спеціально не обмежена і становить, наприклад, 60% або більше, переважно від 70 до 100% і більш переважно від 80 до 100%. Якщо на поверхні ліпосоми є більше термінально гідрофобізованого полівінілового спирту, то стає можливим утримання на поверхні легеневої тканини (наприклад, на бронховизикулярній поверхні) протягом більш тривалого часу, тим часом, якщо на поверхні ліпосоми є більше хітозану, то стає можливим швидке перенесення в легеневу тканину. Отже, якщо на поверхні ліпосоми є більше термінально гідрофобізованого полівінілового спирту, речовини, включені в ліпосому, можуть діяти на поверхні легеневої тканини або клітинах поверхні більш ефективно. Якщо на поверхні ліпосоми є більше хітозану, можна підвищити перенесення в легеневу тканину речовин, інкапсульованих в ліпосоми. Таким чином, ліпосома поверхневомодифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом, придатна як ліпосома з уповільненим вивільненням для легеневого введення або ліпосома, дія якої націлена на поверхню легеневої тканини або клітини поверхні. Крім того, ліпосома, поверхневомодифікована хітозаном, придатна як швидкодіюча ліпосома для легеневого введення або ліпосома для легеневого введення, дія якої націлена на поверхню або всередину легеневої тканини, зокрема, як ліпосома для легеневого введення, дія якої націлена на внутрішню частину легеневої тканини. Вид полімеру для модифікації поверхні в ліпосомі для легеневого введення за винаходом можна встановити відповідним чином на основі передбачуваної внутрішньолегеневої поведінки, беручи до уваги вказане вище перенесення в легеневу тканину і утримання на поверхні легеневої тканини. У даному винаході можна модифікувати ліпосомальну поверхня або 5 UA 100375 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом, або хітозаном, або комбінацією обох полімерів. Кількість полімеру для модифікації поверхні в ліпосомі для легеневого введення за винаходом також можна встановити відповідним чином на основі передбачуваної внутрішньолегеневої поведінки, беручи до уваги згадуване перенесення вище в легеневу тканину і утримання на поверхні легеневої тканини. Наприклад, можна використовувати полімер для модифікації поверхні в пропорції від 1 до 300 масових частин, переважно від 5 до 250 масових частин і більш переважно від 10 до 200 масових частин на 100 масових частин загальної кількості складових компонентів ліпосомальної мембрани. Модифікацію поверхні ліпосоми полімером для модифікації поверхні проводять при достатньому перемішуванні полімеру для модифікації поверхні з ліпосомою в очищеній воді або буфері. Конкретно, ліпосома, модифікована полімером для модифікації поверхні, утворюється при змішуванні рівних кількостей водного розчину, що містить приблизно від 0,1 до 10% мас. полімеру для модифікації поверхні, і водного розчину, що містить приблизно від 1 до 10% мас. ліпосоми, з подальшим перемішуванням при 4-10°С протягом 0,5-1 години. Крім того, ліпосому, модифіковану полімером для модифікації поверхні, можна повторно диспергувати в очищеній воді або буфері після розділення твердої речовини і рідини. Ліпосома для легеневого введення за винаходом інкапсулює лікарську речовину(и), яка необхідна для вироблення фармакологічної дії в легеневій тканині, або гену(ів) для генної терапії в легеневій тканині і застосовується як носій для легеневого введення. У даному винаході ген(и) включає нуклеїнові кислоти, такі як siРНК, мРНК, рРНК, миРНК (мікро РНК), рибозими, антисмисловий олігонуклеотид, мічений олігонуклеотид, плазмідну ДНК, пептидну нуклеїнову кислоту, триплекс-утворюючий олігонуклеотид (TFO), аптамер і виділену ДНК. Кількість лікарської речовини(речовин) або гена(ів), включеної в ліпосому, можна визначити відповідним чином на основі вигляду лікарської речовини(речовин) або гена(ів) і дозування. Крім того, відомі способи включення лікарської речовини(речовин) або гена(ів) в ліпосому, модифіковану полімером для модифікації поверхні, і можна застосовувати спосіб, який звичайно застосовують в даній галузі. Зокрема, лікарська речовина(и) або ген(и) включають в ліпосому при утворенні ліпосоми з використанням розчину, що містить лікарську речовину(а) або ген(и) і складові компоненти ліпосомальної мембрани. Більш конкретно, можна одержати ліпосомальний препарат для легеневого введення, в якому лікарська речовина(и) або ген(и) інкапсульований в ліпосоми для легеневого введення за винаходом, здійснюючи наступні стадії (i) і (ii): (i) стадію змішування лікарської речовини(речовин) або гена(ів) з складовими компонентами ліпосомальної мембрани з одержанням ліпосоми з інкапсульованою лікарською речовиною(ами) або геном(ами), і (ii) змішування одержаної таким чином ліпосоми, що включає лікарську речовину(и) або ген(и), з полімером для модифікації поверхні з метою модифікації поверхні ліпосоми полімером для модифікації поверхні. Крім того, також можна одержати ліпосомальний препарат для легеневого введення, в якому лікарська речовина(и) або ген(и) інкапсульовані в ліпосоми для легеневого введення за винаходом, змішуванням лікарської речовини(речовин) або гена(ів), складових компонентів ліпосомальної мембрани і полімеру, що модифікує поверхню. Ліпосомальний препарат для легеневого введення, в якому лікарська речовина(и) або ген(и) інкапсульовані в ліпосоми для легеневого введення за винаходом, використовують при введенні в легені, застосовуючи такий спосіб введення як трансбронхіальне введення або глибоке назальне введення. Конкретно, терапевтично ефективна кількість ліпосомального препарату, що містить лікарську речовину(и) або гени, ефективні для лікування захворювання легеневої тканини, вводять в легеню пацієнта, який страждає від захворювання легеневої тканини, проводячи таким чином лікування захворювання легеневої тканини. ПРИКЛАДИ Тепер даний винахід буде описаний детально на основі прикладів і подібного, але даний винахід не обмежений цим. Приклад 1 Одержання ліпосоми, модифікованої термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом. Ліпосому, яка має наступний ліпідний склад: дистеароїлфосфатидилхолін:холестерин:дицетил фосфат=8:1:2 (молярне співвідношення) і містить холестерилантрацен-9-карбоксилат (CA) як флуоресцентно-мічену речовину, одержують ультразвуковим способом гідратації мембран. Конкретно, дистеароїлфосфатидилхолін (103,2 мг), холестерин (6,3 мг), дицетилфосфат (17,9 мг) і CA (1 мг) розчиняють в хлороформі і потім одержують тонку ліпідну мембрану в умовах застосування 6 UA 100375 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 випарника при 40°С протягом 2 годин. Потім мембрану сушать при зниженому тиску протягом ночі і далі одержують ліпосому гідратацією за допомогою 6,4 мл 100 мМ ацетатного буфера. Одержана таким чином ліпосома поверхнево-модифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом (міра омилення 88%, міра полімеризації 480, гідрофобна група C 16H33S-). Конкретно, змішують в рівних частках 100 мМ ацетатного буфера, що містить 20 г/л термінально гідрофобізованого полівінілового спирту, і 100 мМ ацетатного буфера, що містить 20,1 г/л одержаних вище ліпосом. Потім, одержану таким чином суміш інкубують протягом однієї години при 10°С, одержуючи ліпосому, модифіковану термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом. Приклад 2 Одержання ліпосоми, модифікованої хітозаном. Хітозанмодифіковану ліпосому одержують аналогічно одержанню прикладу 1, за винятком того, що використовують хітозан (молекулярна маса 150000, міра деацетилування 85%) замість термінально гідрофобізованого полівінілового спирту. Однак при змішуванні рівних кількостей суспензії ліпосом і буфера, що містить розчинений в ньому хітозан, збільшується діаметр частинок, і тому після змішування проводять ультразвукову обробку. Тестовий приклад 1 Оцінка внутрішньолегеневої поведінки у щурів Самцям щурів Wistar (7 тижневого віку) вводять трансбронхіально полімермодифіковану ліпосому прикладу 1 або 2 (15,63 мкг CA/щур). Через п'ять тижнів після введення розраховують залишкове співвідношення доз (% дози), вимірюючи концентрацію CA в легеневій тканині, рідині бронхоальвеолярного лаважа (BALF) і клітинах бронхоальвеолярного лаважа (BALC), використовуючи спектрофлуориметр (HITACHI F3010). Для порівняння проводять тест, аналогічно наведеному вище опису, за винятком того, що використовують ліпосому, яка не модифікована полімером (склад мембрани і вміст CA аналогічні відповідним величинам прикладу 1), замість полімермодифікованої ліпосоми (порівняльний приклад 1). Результати показані на фіг. 1. Як зрозуміло з результатів, показаних на фіг. 1, в полімермодифікованій ліпосомі прикладу 1 детектують в BALF більш сильну флуоресценцію від CA в порівнянні з порівняльним прикладом 1. Таким чином, підтверджено, що полімермодифіковані ліпосоми прикладу 1 придатні для здійснення фармакологічної дії на поверхні або в клітинах поверхні легеневої тканини, оскільки вони здатні утримуватися на поверхні легеневої тканини протягом тривалого періоду часу. Для полімермодифікованої ліпосоми прикладу 2 показано, що в легеневу тканину переноситься більше ліпосом, оскільки у випадку полімермодифікованої ліпосоми прикладу 2 спостерігають більш сильну флуоресценцію від CA в порівнянні з порівняльним прикладом 1. Отже, виявлено, що полімермодифікована ліпосома прикладу 2 може ефективно перенестися в легеневі тканини за короткий час, і, таким чином, можлива ефективна доставка в легеневу тканину лікарських речовин, наприклад, речовин, які нелегко переносяться в легеневу тканину. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 1. Ліпосома для легеневого введення, в якій поверхня ліпосоми модифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом. 2. Ліпосома для легеневого введення за п. 1, яка містить фосфоліпід як складовий компонент ліпосомальної мембрани. 3. Ліпосома для легеневого введення за п. 1, яка містить як складові компоненти ліпосомальної мембрани фосфатидилхолін, холестерин і діалкілфосфатний ефір. 4. Ліпосома для легеневого введення за п. 1, де поверхня легеневої тканини або клітини поверхні є цільовими ділянками для ліпосоми. 5. Ліпосома для легеневого введення за п. 1, де ліпосома являє собою ліпосому з уповільненим вивільненням для легеневого введення. 6. Ліпосома для легеневого введення за п. 1, в якій поверхня ліпосоми модифікована термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом, в якому гідрофобна група являє собою алкільну групу, що має від 1 до 30 атомів вуглецю, алкоксигрупу, що має від 1 до 30 атомів вуглецю, карбоксіалкільну групу, що має від 1 до 30 атомів вуглецю або тіоалкільну групу, що має від 1 до 30 атомів вуглецю. 7. Ліпосомальний препарат для легеневого введення, в якому лікарська речовина або ген інкапсульовані в ліпосоми для легеневого введення за п. 1. 8. Ліпосомальний препарат для легеневого введення за п. 7, в якому поверхня легеневої тканини або клітини поверхні є цільовими ділянками для ліпосомального препарату. 7 UA 100375 C2 5 10 9. Спосіб одержання ліпосомального препарату для легеневого введення, що включає наступні стадії (і) і (іі): (і) змішування лікарської речовини або гена зі складовим компонентом або компонентами ліпосомальної мембрани з одержанням ліпосоми, що інкапсулює лікарську речовину або ген, і (іі) змішування одержаної на попередній стадії (і) ліпосоми, що інікапсулює лікарську речовину або ген, з термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом для модифікації поверхні ліпосоми термінально гідрофобізованим полівініловим спиртом. 10. Застосування термінально гідрофобізованого полівінілового спирту для одержання ліпосоми для легеневого введення. 11. Застосування термінально гідрофобізованого полівінілового спирту для одержання ліпосоми з уповільненим вивільненням для легеневого введення. 12. Спосіб лікування захворювання легеневої тканини, який включає стадію введення в легеню пацієнта, що страждає на захворювання легеневої тканини, терапевтично ефективної кількості ліпосомального препарату за п. 7. Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 8