Спосіб запобігання діареї мандрівників

Реферат: Винахід стосується способу запобігання виникненню діареї мандрівників у людини, який включає пероральне введення вказаній людині ефективної кількості композиції, що містить суміш галактоолігосахаридів. UA 104469 C2 (12) UA 104469 C2 UA 104469 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Галузь винаходу Даний винахід стосується способу запобігання виникненню і/або зниженню тривалості гострої діареї, особливо у мандрівників, шляхом перорального введення олігосахаридної композиції, зокрема, незасвоюваної олігосахаридної композиції. Композиція переважно включає суміш галактоолігосахаридів. Галактоолігосахариди являють собою незасвоювані вуглеводи, які стійкі до шлунково-кишкових травних ферментів ссавців, але ферментуються особливими бактеріями товстого кишечнику. Передумови винаходу Діарея мандрівників, особливо гостра діарея, являє собою один зі звичайних станів, що спостерігаються у індивідуумів, які подорожують за кордон в зарубіжні країни, особливо в країни, що розвиваються. Діарея мандрівників, що далі позначається як діарея мандрівників або TD, характеризується поширеністю від 20 до 50%, і встановлено, що це порушення може вражати більше одинадцяти мільйонів людей щорічно. У 90% пацієнтів, хворих на TD, симптоми виявляються в перші два тижні подорожі. Показано, що бактерії і деякі віруси є найпоширенішими причинними факторами TD, причому ентеротоксигенна Escherichia coli (ETEC) являє собою бактеріальну причину 50% випадків TD. До даного часу лікування TD основувалося на лікуванні стану із застосуванням антибіотика і протидіарейних лікарських препаратів, таких як фторхінолони, ципрофлоксацин, рифаміксин і лоперамід. Однак ці засоби потенційно можуть також чинити вплив на склад симбіотичної кишкової мікрофлори. Кишкова мікрофлора людини містить патогенні, нейтральні і корисні роди мікроорганізмів. Переважання перших може приводити до кишкових порушень, які можуть бути як гострими, такими як діарея мандрівників, так і хронічними, такими як запальне захворювання кишечнику. Робили спроби впливати на баланс кишкової мікрофлори на користь корисних мікроорганізмів, таких як біфідобактерії, шляхом додавання одного або декількох штамів таких мікроорганізмів у прийнятний харчовий носій, такий як йогурт. Такі харчові добавки з живими мікроорганізмами відомі як пробіотики. Однак гарантувати виживання живих бактерій в їжі, а також після перетравлювання, складно. Альтернативний підхід до харчового впливу на кишкову мікрофлору полягає в застосуванні пребіотиків. Пребіотики визначають як незасвоювані харчові інгредієнти, які благотворно впливають на організм-носій шляхом вибіркової стимуляції росту і/або активності однієї або обмеженої кількості бактерій в товстому кишечнику, і які, таким чином, поліпшують здоров'я організму-носія. Одна група сполук, які належать до антибіотиків, являє собою галактоолігосахариди. Це олігосахариди, що містять галактозу форми Glc 1-4 [Gal 1-6]n, де n = від 2 до 5, які отримують з сиропу лактози із застосуванням трансгалактозилазної активності ферменту -галактозидази (Chrittenden, (1999) Probiotics: А Critical Review, Tannock, G (ed) Horizon Scientific Press, Wymondham, pp.141-156). У EP 1644482 розкритий новий штам Bifidobacterium bifidum, який виявляє активність ферменту галактозидази, що конвертує лактозу в нову суміш галактоолігосахаридів. Показано, що ця суміш галактоолігосахаридів має пребіотичні властивості і збільшує популяцію корисних бактерій: біфідобактерій і молочнокислих бактерій. Суть винаходу У подвійному сліпому рандомізованому дослідженні з плацебо-контролем, проведеному на людині, автори даного винаходу несподівано виявили, що пероральне введення олігосахаридної композиції приводить до запобігання виникненню і/або зниженню тривалості/тяжкості гострої діареї, особливо у мандрівників. Даний спосіб має перевагу, яка полягає в безпеці діючого начала і в тому, що його можна додавати до напою або їжі. У одному з аспектів даний винахід включає пероральне введення харчової композиції, яка знижує частоту виникнення і/або тяжкість гострої діареї, особливо у мандрівників. Докладний опис переважних варіантів здійснення Даний винахід стосується способу запобігання виникненню і/або зниженню тривалості/тяжкості гострої діареї, де вказаний спосіб включає пероральне введення композиції ссавцеві, де вказана композиція включає ефективну кількість олігосахариду. Олігосахаридна композиція може включати суміш галактоолігосахаридів, таку як суміш галактоолігосахаридів, розкритих в EP 1644482. Ця суміш включає дисахариди Gal-Gal, трисахариди Gal-Gal-Glc, тетрасахарид Gal-Gal-Gal-Glc і пентасахарид Gal-Gal-Gal-Gal-Glc, де Gal являє собою залишок галактози, а Glc являє собою залишок глюкози. 1 UA 104469 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Переважно, суміш галактоолігосахаридів включає дисахариди Gal Gal ( 1-3)-Glc; Gal ( 1-3)Gal; Gal ( 1-6)-Gal; Gal ( 1-6)-Gal; трисахариди Gal ( 1-6)-Gal ( 1-4)-Glc; Gal ( 1-3)-Gal ( 14)-Glc; тетрасахарид Gal ( 1-6)-Gal ( 1-6)-Gal ( 1-4)-Glc і пентасахарид Gal ( 1-6)-Gal ( 1-6)Gal ( 1-6)-Gal ( 1-4)-Glc. Цю суміш галактоолігосахаридів реалізують в промислових масштабах під назвою Bimuno (зареєрований товарний знак), і вона доступна в Clasado Ltd (Мільтон Кейнс, Великобританія). Bimuno містить 49% мас./мас. галактоолігосахариду. Залишок композиції може містити неактивні компоненти, такі як глюкоза, лактоза, гуміарабік і лимонна кислота. Композиція може бути представлена в формі ліофілізованого порошку або в формі сиропу. Переважний щоденний пероральний прийом. Композиція переважно містить від 1,35 г до 9,6 г олігосахариду у від 2,75 г до 20 г порошкової композиції, переважно від 1,96 г до 4,9 г олігосахариду у від 4 г до 10 г порошку, найбільш переважно 2,7 г олігосахариду в 5,5 г композиції. Композицію можна приймати у вигляді однократної дози або у вигляді двох окремих доз через декілька годин. Композицію можна додавати до напою, переважно до гарячого напою, або посипати їжу. Для запобігання розвитку і/або зниженню тривалості/тяжкості гострої діареї під час подорожі в іншу країну мандруючим індивідуумам переважно щодня приймати композицію за декілька діб перед відправленням в іншу країну. Переважно композицію потрібно приймати за сім діб до відправлення і потім кожну добу протягом перебування в іншій країні. Приклад 1 Ліофілізована порошкова композиція, що упакована в пакетики 'stick-pack' і містить на 5,5 г кінцевого продукту: Суміш галактоолігосахаридів (GOS) 2,67 г Лактоза 1,44 г Моносахариди (глюкоза, галактоза) 0,68 г Осушувач 0,24 г Зола 0,23 г Білок 0,05 г Волога 0,19 г Приклад 2 Ефективність галактоолігосахаридів в запобіганні розвитку і/або зниженні тривалості гострої діареї у мандрівників. Матеріали і способи Дослідження було плацебо-контрольованим, рандомізованим, подвійним сліпим з паралельними групами, і цільовою групою були здорові добровольці, які подорожували і залишалися в країні з низьким або високим ризиком TD протягом мінімум 14 діб і максимум 60 діб. Місця з високим ризиком розвитку TD включали Азію, Близький Схід, Африку, Мексику, Центральну і Південну Америку, в той час як області з низьким ризиком включали Туреччину, Південну Африку і Карибські острови, як указано Центром по контролю і профілактиці захворювань (CDC, 2008). Набір суб'єктів дослідження проводили шляхом розміщення оголошень в місцевій і центральній пресі. З тими, що відповіли на оголошення, зв'язувалися по телефону і пояснювали їм суть дослідження. Їм задавали серію відбіркових питань про їх відпустку, минулий і даний стан здоров'я, деталі подорожі і історію TD і препарати комплексної терапії, якщо такі були. Критерії включення і виключення приведені в таблиці 1. Лікарські засоби, заборонені на період дослідження, включали антидепресанти, наркотичні анальгетики, антихолінергічні засоби, протисудомні засоби для захворювань травного тракту, імунодепресивні лікарські засоби і анти-фактори некрозу пухлини. Однак у випадку достовірного інфікування дозволяли застосування антибіотиків, протидіарейних засобів (таких як лоперамід) і проносних засобів як лікарських засобів "екстреної терапії". Індивідуумам, які відповідали критеріям відбору, висилали брошури з інформацією для добровольців і просили ретельно вивчити її перед участю. Тих, хто погоджувався брати участь, у випадковому порядку розподіляли по групах з однаковою імовірністю отримання одного з двох способів лікування. Це забезпечувало однакову кількість призначених в кожну групу лікування індивідуумів після розподілу по групах. Після призначення номерів учасників їм висилали набір добровольця, який включав: брошуру з інформацією для добровольців (для довідок), форму заяви про виявлення згоди, форму журналу для записів, форму клінічного звіту (для заповнення у випадку розвитку діареї), інструкції по прийому композиції, пояснювальний лист для іміграційної служби і досліджуваний засіб або плацебо. Засіб, що застосовується в даному дослідженні, являв собою 2 UA 104469 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 пребіотик B-GOS (Bimuno, RTM) (Clasado Ltd, Мільтон Кейнс, Великобританія), упакований в пакетики (5,5 г) для прийому один раз на добу, B-GOS являє собою суміш галактоолігосахаридів, що в цей час продаються в Європі, які, як правило, визнають безпечним (GRAS), як визначено Управлінням по контролю харчових продуктів і лікарських засобів США (FDA) (FDA, 2008). Вміст галактоолігосахариду в B-GOS становить 48% (мас./мас.), і його композиція відносно ступеня полімеризації (DP) і сахаридними зв'язками приведена вище. Плацебо являв собою мальтодекстрин (олігосахарид без пребіотичного ефекту), упакований в пакетики (5,5 г), для прийому один раз на добу. Засоби були в білих пакетиках з алюмінієвої фольги, помічених прихованим кодом. 30 таких пакетиків містили паперові вставки, на яких була вказана вся необхідна інформація, така як опис застосування і контактна інформація дослідників, надана добровольцям на початку дослідження. За сім діб перед досягненням кінцевого пункту призначення добровольці починали щодня приймати композицію і щодня записували частоту випорожнення кишечнику і середню консистенцію калу (оформлений, рідкий, з водою або з кров'ю), а також випадки виникнення шлунково-кишкового дискомфорту, метеоризму, здуття живота або блювання. Добровольці продовжували приймати лікування протягом всієї відпустки. Показники результатів, які використовували для періоду відпустки, належали до: - частота випорожнення кишечнику, - консистенція калу (1 = оформлений, 2 = рідкий, 3 = з водою, 4 = з кров'ю), - біль в животі (0 = відсутній, 1 = присутній, але добре переноситься, 2 = присутній і заважає повсякденній активності, але не перешкоджає їй, 3 = перешкоджає нормальній повсякденній активності), - метеоризм (0 = відсутній, 1 = присутній, але добре переноситься, 2 = присутній і заважає повсякденній активності, але не перешкоджає їй, 3 = перешкоджає нормальній повсякденній активності), - здуття живота (0 = відсутній, 1 = присутній, але добре переноситься, 2 = присутній і заважає повсякденній активності, але не перешкоджає їй, 3 = перешкоджає нормальній повсякденній активності), - блювання (0 = відсутність, 1 = наявність). У випадку виникнення діареї доброволець заповнював клінічний звіт, описуючи ознаки, симптоми і тривалість стану, історію госпіталізації, історію появи і розвитку стану і прогрес розвитку діареї. Порівнювали розвиток TD у індивідуумів, що приймали пребіотик, і індивідуумів, що приймали плацебо, з урахуванням віку, статі і місця подорожі. Після закінчення дослідження добровольців також просили заповнити короткий опитний лист ВООЗ для оцінки якості життя (WHO-QOL-BREF) (опитний лист для аналізу результатів). Він складався з 22 питань, що стосувалися того, як вони оцінювали якість свого життя, здоров'я або інші сфери свого життя за останні чотири тижні. Застосовували систему оцінки, і бали для кожної групи розраховували на основі спеціальних оцінок, як описано в WHOQOL-BREF (WHO, 2004). Питання, що стосувалися різних аспектів якості життя індивідуумів під час їх відпустки, були розділені на чотири групи. Група 1 стосувалася фізичного здоров'я (повсякденна активність, залежність від лікарських засобів і медичної допомоги, біль і дискомфорт, сон і відпочинок), група 2 в основному стосувалася їх психологічного стану (позитивні/негативні відчуття, самоповага), тоді як група 3 стосувалася соціальних відношень (особисті відношення, соціальна підтримка). Нарешті, група 4 стосувалася їх загального відчуття здоров'я з урахуванням впливу навколишнього середовища під час перебування за кордоном (фізична безпека, участь і можливість участі в оздоровчих/розважальних заходах). Заповнені журнали для записів збирали для вивчення поряд з усіма невикористаними пакетиками. Небажані реакції також розглядали нарівні з використаними препаратами комплексної терапії. Етика Приведені тут процедури узгоджувалися з етичними стандартами Експертного комітету по етиці проведення дослідження Редингського університету по проведенню експериментів за участю людини і з Заключним Актом Хельсінкі 1975 р., з поправками 1983 р. Етичне схвалення дослідження було надане Експертним комітетом по етиці проведення дослідження Редингського університету в липні 2007 р. (реєстраційний номер: 07/21). Це дослідження продовжувалося 9 місяців. Статистика Для зручності розрахунків ми передбачили, що 50% індивідуумів будуть страждати на діарею, і що GOS може знизити цю частку на 20%. Для 80% статистичної сили і 5% достовірності це давало 93 індивідуумів на експериментальну групу (MGH Biostatistics Software, 3 UA 104469 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Головний Госпіталь Массачусетса, Бостон, MA). Статистичний аналіз проводили із застосуванням пакету програм для обробки статистичних даних GENSTAT version 10,0 (VSN International Ltd). Значення Р