Спосіб визначення чутливості бактерій до дії антибіотиків та вимірювальний інструмент для його здійснення

С 12 M 1/00 , Спосіб визначення чутливості бактерій до дії антибіотиків та вимірювальний інструмент для його здійснення Винаходи відносяться до галузі медицини а саме до галузі , мікробіологічної діагностики при визначенні чутливості патогенних мікроорганізмів до антибіотиків. Відомий спосіб визначення чутливості бактерій до дії антибіо тиків, який включає розміщення в чашку ЇІетрі розплавленого агаро вого середовища, витримування останньої до згущення засів її по, верхні культурою патогенних мікроорганізмів розміщення на поверхню » отриманого середовища дисків які просочені антибіотиком виро, , щування в термостаті культури та проведення виміру діаметрів зон затримки росту бактерій за допомогою міліметрової лінійки шляхом візуального суміщення її шкали з центром диска та відліку кількості поділів, які укладаються в цьому діаметрі (див. Определение ус тойчивости к антибиотикам Методическое письмо. Министерство здра. воохранения УССР. Киевский институт инфекционных болезней Соста. витель - проф. А.Б.Черномордик, Киев, 1971, ее.5-9). Однак при такому способі визначення чутливості бактерій до дії антибіотиків точність виміру діаметрів зон затримки росту бак терій за допомогою міліметрової лінійки невелика внаслідок незруч _ 9 ності візуального находження центра диска особливо при проведенні , великої кількості замірів При цьому, лаборант змушений нахилятися . над досліджуваним матеріалом внаслідок малої ціни ділення(1 мм), що небезпечно при дослідженні патогенних мікроорганізмів в період епидеміологічного спалаху захворювань - Крім того, зона затримки росту бактерій може бути еліпсовидною що також збільшує погріш , ність визначення чутливості бактерій до дії антибіотиків . Відомий вимірювальний інструмент для здійснення способу виз начення чутливості бактерій до дії антибіотиків який містить , планку з сукупністю відміток та цифр з ціною ділення в 1 мм у вигляді міліметрової лінійки (див. Определение устойчивости к антиби отикам. Методическое письмо. Министерство здравоохранения УССР. Киевс кий инст итут инф екци онн ых бо лез ней Сос тави тель - п роф. . А.Б.Черномордик, Киев, 1971, ее.5-9). Однак при використанні такого вимірювального інструмента не обхідність візуального находження центра диска мала ціна ділення , (і мм) та перекручування, які виникають в результаті заломлювання світла при його проходженні крізь корпус інструмента (застосову ється, як правило, вимірювальний інструмент корпус якого викона, ний із органічного скла) вимагають напруження зору, що підвищує утомливість персоналу негативно впливає на вірогідність значень , , які отримують. В основу винаходу поставлено завдання по удосконаленню способу визначення чутливості бактерій до дії антибіотиків та вимірю вального інструмента для його здійснення шляхом зміни послідовності ДІЙ при виеначенні чутливості бактерій до дії антибіотиків , а -зтакож зміни конструкції вимірювального інструмента для його здійс нення, що дозволить забезпечити зміну процеса проведення виміру зони затримки росту бактерій в бік спрощення та отримати конструк цію вимірювального інструмента з більшою відстанню між діленнями та можливістю виміру двох взаємо перпендикулярних діаметрів зони затримки росту бактерій , що відповідно дозволить спростити процес здійснення виміру, дозволить зменшити утомливість персоналу змен, шити ризик зараження персоналу патогенними мікроорганізмами а та, кож підвищит вірогідність одержаних результатів досліджень . Поставлене завдання вирішується тим , що в способі визначення чутливості бактерій до ді ї антибіотиків який включає' розміщення в , чашку Петрі розплавленого агарового середовища, витримування до згущення останнього, засіп його поверхні культурою патогенних мік роорганізмів, розміщення на поверхню середовища дисків які просо, чені антибіотиком, та вирощування в термостаті культури з наступ ним проведенням виміру діаметрів зон затримки росту бактерій , згідно винаходу проводять замір двох взаємно перпендикулярних діа метрів зони затримки росту бактерій за допомогою спеціального ви мірювального інструмента у вигляді шаблона , причому замір першого діаметра зони затримки росту бактерій проводять шляхом одночасного візуального суміщення крайньої межі зони затримки росту бактерій з межею вікна шаблона , при цьому перший діаметр зони затримки росту бактерій визначають по шкалам які розташовані по краям вікна шаб , лона, причому до уваги приймають ділення які знаходяться у сере , дині візуального контакту крайньої межі зони затримки росту бакте рій з межею вікна шаблона а замір другого діаметра зони затримки , росту бактерій проводять за допомогою двох паралельних обмежуваль них планок шляхом переміщення та візуального суміщення їх меж з - 4 — діаметрально протилежними межами другого діаметра зони затримки росту бактерій, причому другий діаметр зони затримки росту бакте рій визначають за допомогою обмежувальних планок по двом паралель ним шкалам, які розташовані по краям шаблона, при цьому ступінь чутливості бактерій до дії антибіотиків визначають по середньому діаметру зони затримки росту бактерій який одержують шляхом усе , реднення розмірів першого та другого діаметрів зони затримки росту бактерій. Крім того, поставлене завдання розв'язується тим що вимірю, вальний інструмент для здійснення способу визначення чутливості бактерій до дії антибіотиків який містить корпус з розмірними ді , леннями, згідно винаходу корпус виконаний у вигляді шаблона прямо кутної форми з V-подібним вікном, причому останнє виконано з двома шкалами по краям кутом "Ам між ними в 22 ... 24 градуси, та роз, ташовано таким чином що бісектриса кута "А" перпендикулярна двом , протилежним бокам шаблона, крім того на інших двох протилежних бо ках шаблона виконані напрямні під установлення двох паралельних обмежувальних планок з можливістю їх роздільного паралельного пе реміщення та дві перпендикулярні обмежувальним планкам шкали ціна , ділення "В" яких зв'язана з ціною ділення "С" шкал по краям V-noдібного вікна наступною залежністю : 2 у 1 - cos A А - кут, який утворений шкалами по краям V-подібного вікна ; В ціна ді лен ня шка л, які пе рпе нди кул ярн і о бме жув аль ним планкам; С - ціна ділення шкал по краям V-подібного вікна. -5Проведення виміру двох взаємно перпендикулярних діаметрів зо ни затримки росту бактерій за допомогою спеціального вимірювально го інструменту у вигляді шаблона причому проведення виміру першо , го діаметра зони затримки росту бактерій шляхом одночасного візу ального суміщення крайньої межі зони затримки росту бактерій з ме жею вікна шаблона , при цьому визначення першого діаметра зони зат римки росту бактерій здійснюють по шкалам , які розташовані по кра ям вікна шаблона, причому до уваги приймають ділення, які знаходяться у середині візуального контакту крайньої межі зони затримки росту бактерій з межею вікна шаблона дозволяє проводити вимір діа метра зони затримки росту бактерій без візуального пошуку центра диска, що значно спрощує процедуру проведення виміру, дозволяє зменшити утомливість персоналу , зменшує ризик зараження персоналу патогенними мікроорганізмами , а також підвищується вірогідність результатів досліджень , які одержують . Проведення виміру другого діаметра зони затримки росту бакте рій за допомогою двох паралельних обмежувальних планок шляхом пе реміщення та візуального суміщення їх меж з діаметрально протилеж ними межами другого діаметра зони затримки росту бактерій , причому другий діаметр зони затримки росту бактерій визначають за допомо гою обмежувальних планок по двом паралельним шкалам , які розташо вані по краям шаблона, дозволяє одночасно з заміром першого діа метра проводити замір другого діаметра зони затримки росту бакте рій з одного встановлення шаблона , що спрощує процедуру проведення виміру та збільшує вірогідність результатів досліджень , які отримують. Визначення ступеня чутливості бактерій до дії антибіотиків по середньому діаметру зони затримки росту бактерій , який одержують шляхом усереднення розмірів першого та другого діаметрів зони зат римки росту бактерій, дозволяє максимально полічити нлощу зони затримки росту бактерій, що підвищує вірогідність результатів дос ліджень, які отримують. Виконання корпусу вимірювального інструмента у вигляді шаблона прямокутної форми з V-подібним вікном з двома шкалами по краям , кутом "А" між ними, якій дорівнює 22 ... 24 градусам, причому Vподібне вікно розташовано таким чином, що бісектриса кута "А" перпендикулярна двом протилежним бокам шаблона , дозволяє одержати інструмент, який максимально спрощує процес проведення виміру зони затримки росту бактерій що підвищує ефективність використання , інструмента, дозволяє зменшити утомливість персоналу зменшує ри, зик зараження персоналу патогенними мікроорганізмами а також під, вищує вірогідність результатів досліджень які отримують. , Виконання на інших двох протилежних боках шаблона напрямних під установлення двох паралельних обмежувальних планок з можливістю їх роздільного паралельного переміщення та двох перпендикулярних обмежувальним планкам шкал дозволяє з одного встановлення робити вимір двох взаємно перпендикулярних діаметрів зони затримки росту бактерій, що спрощує процедуру проведення виміру зони затримки росту бактерій та збільшує вірогідність результатів досліджень , які отримують. Виконання ціни ділення "С" шкал по краям V-подібного вікна в залежності з ціною ділення "В" шкал, які перпендикулярні обмежу вальним планкам, з наступним виразом: 2 V 1 - co s A A - кут, який утворений шкалами по краям V-подібного вікна ; В - ціна ділення шкал, які перпендикулярні обмежувальним планкам; С - ціна ділення шкал по краям V-подібного вікна , дозволяє спростити процес зчитування результатів виміру , зменшити утомливість персоналу , зменшити ризик зараження персоналу патоген ними мікроорганізмами , а також збільшити вірогідність результатів досліджень, які отримують. Вказане вище сприяє удосконаленню процесу проведення виміру зони затримки росту бактерій без візуального пошуку центру диска , який просочений антибіотиком , а також сприяє отриманню конструкції вимірювального інструмента з збільшеною ціною ділення та можливіс тю виміру двох взаємно перпендикулярних діаметрів зони затримки росту бактерій з єдиного встановлення шаблона , що відповідно дозволить спростити процес проведення виміру та зчитування його результату, дозволяє зменшити утомливість персоналу , зменшить ризик зараження персоналу патогенними міїфоорганізмами , а також збільшить вірогідність результатів досліджень по визначенню чутливості бактерій до дії антибіотиків. На фіг.1 зображений вимірювальний інструмент для здійснення способу визначення чутливості бактерій до дії антибіотиків , який заявляється, загальний вигляд; на фіг.2 - вид Б на фіг.1; на фіг.З - переріз Е-Е на фіг.2. -8Вимірювальний інструмент дл я здійснення спосо бу визначення чутливості бактерій до дії антибіотиків містить корпус 1, який виконаний у вигляді прямокутника , шкали 2 і 3, які нанесені на корпусі 1 та утворюють V-подібне вікно з кутом "А" між шкалами 22 ... 24 градуса, напрямні 4, 5 і шкали б , 7, які нанесені на корпусі 1 та розташовані уздовж великих боків шаблона , обмежувальні планки 8 | і 9, які установлені в напрямних 4 і 5 з можливістю паралельного : переміщення, причому V-подібне вікно розташовано таким чином , що \ бісектриса кута "Ам перпендикулярна меншим бокам шаблона , а шкали * б і 7 розташовані перпендикулярно обмежувальним планкам 8 і 9. Ціна ділення шкал 8 і 9 виконана в 1 мм, а ціна ділення шкал 2 і З зв'язана з ціною ділення шкал 8 і 9 наступною залежністю: В / 1 + cos A С ---- * / -------- , Де: 2 у 1 - cos A А - кут, який утворений шкалами 2 і 3 по краям V-подібного вікна, град; В - ціна ділення шкал 8 і 9, які перпендикулярні обмежуваль ним планкам, мм; С - ціна ділення шкал 2 і 3 по краям V-подібного вікна, мм. Визначають чутливість бактерій до дії антибіотиків наступним чином. В чашку Петрі поміщають розплавлене агарово середовище вит, римують останнє до згущення , підсушують , засівають його поверхню культурою патогенних мікроорганізмів і поміщають на поверхню ага рового середовища диски , які просочені антибіотиком, причому для підвищення вірогідності результатів дослідження для кожного виду антибіотика застосовують по три диска Далі здійснюють вирощування . культури на протязі 18 - 24. годин в термостаті при температурі 37 — Q _ градусів. По завершенню процесу вирощування культури проводять за мір діаметрів зон затримки росту бактерій ва допомогою шаблона . Для цього на перевернуту чашку Петрі встановлюють шаблон та ким чином, щоб зона затримки росту бактерій переглядалася у V-подібному вікні між шкалами Z та 3, і домагаються одночасного візу ального контакту останніх з межею зони затримки росту бактерій. Далі шляхом переміщення обмежувальних планок 8 та 9 візуально су міщають їх межі з протилежними межами зони затримки росту бакте рій, які знаходяться на бісектрисі кута "А". Зчитування першого результату виміру проводять по шкалам 2 та З, приймаючи до уваги ділення які знаходяться в середині візуаль , ного контакту крайньої межі зони затримки росту бактерій з межею вікна шаблона , а другого результату виміру по шкалам 6 та 7, приймаючи до уваги кількість поділів шкал б та 7, які знаходяться між обмежувальними планками 8 та 9. Ступінь чутливості бактерій до дії антибіотиків визначають по середньому значенню результатів цих двох замірів . Таким же чином проводять замір діаметрів зон затримки росту бактерій навколо інших дисків . -( О Спос/ 5 оизиоиення ЦутпиВост! бактерій до да анти&іотикіВ го Вимірюіопьнциі /нструме нт для його здіснення &ud В Е / г. г Фіг. / Е- Е А Г/'t 7 / / / / / / . / 5 Гамкрєл і дзе О Ю.