Спосіб якісного та/або кількісного виявлення аналітів (варіанти), засіб для використання в ньому та магнітно маркіроване сполучення (варіанти), спосіб виявлення феромагнітних або феримагнітних речовин (варіанти

1 Спосіб якісного та/або КІЛЬКІСНОГО виявлення аналітів, який відрізняється тим, що стабільні або квазістабільні феромагнітні або феримагнітні речовини використовують як визначувані магнітні маркуючі речовини в гетерогенних імунних методах, а залишкове намагнічування проби визначають як величину, що вимірюється 2 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що речовинами, які мають специфічну структуру, є антитіла, фрагменти антитіл, біотин або речовини, що специфічно зв'язують біотин, агоністи, що специфічно зв'язуються з рецепторами, або антагоністи рецепторів, авідин або стрептавідин, специфічні пептиди та протеїни, рецептори, ензими, субстрати ензимів, нуклеотиди, рибонуклеїнові кислоти, дезоксирибонуклеїнові кислоти, вуглеводи або ліпопротеши 3 Спосіб за п 1 або 2, який відрізняється тим, що пробу під час замірювання переміщують і, тим самим, модулюють сигнал проби 4 Спосіб за одним з пп 1-3, який відрізняється тим, що як сенсори магнітного поля використовують включені у вигляді градієнтометру індукційні котушки, магнетометр Fluxqate, сенсори GiantMaqnetoresistance або магніторезистивні перетворювачі 5 Спосіб за одним з пп 1-4, який відрізняється тим, що як магнітні сенсори використовуються Su perconductmq Quantum Interference Devices (SQUIDs) 6 Спосіб за одним з пп 1-5, який відрізняється тим, що завдяки ступеневому намагнічуванню проби, що вимірюється, проводять одночасне визначення декількох різних аналітів 7 Спосіб за п 6, який відрізняється тим, що для одночасного КІЛЬКІСНОГО визначення аналітів застосовують різні феромагнітні або феримагнітні речовини з дискретними коерцитивними силами поля 8 Спосіб за одним з пп 1-7, який відрізняється тим, що внутрішній час релаксації за методом Неєля феромагнітних та феримагнітних речовин, що використовуються, більше часу замірювання 9 Спосіб за п 8, який відрізняється тим, що час релаксації за методом Неєля феромагнітних та феримагнітних речовин, що використовуються, при 20°С є більш тривалим, ніж 10 4 секунд 10 Спосіб за п 8, який відрізняється тим, що час релаксації за методом Неєля феромагнітних речовин і феримагнітних речовин при 20°С є більш тривалим, ніж 1 секунда 11 Спосіб за одним з пп 1-10, який відрізняється тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини мають розмір часток в діапазоні 1-1000нм 12 Спосіб за одним з пп 1-11, який відрізняється тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини мають розмір часток в діапазоні 2-500нм 13 Спосіб за одним з пп 1-12, який відрізняється тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини стабілізовані оболонкою з олігомерних або полімерних вуглеводів, протеїнів, пептидів, нуклеотидів, тензидів, синтетичних полімерів та/або ЛІПІДІВ 14 Спосіб за одним з пп 1-13, який відрізняється тим, що його застосовують для визначення репродуктивної здатності, пстосумісності, а також в алергологи, інфекцюлопі, ГІГІЄНІ, генетиці, вірусологи, бактеріологи, токсикологи, патологи, аналітиці навколишнього середовища та медичній діагностиці 15 Спосіб якісного та/або КІЛЬКІСНОГО виявлення аналітів в гетерогенних імунних методах, який відрізняється тим, що зв'язані магнітні маркери до часу вимірювання у всій своїй сукупності діють на залишкове намагнічування проби, в той час як О (О (О ю 51646 намагнічування також присутніх у пробі незв'язамають розмір часток в діапазоні 2-500нм них магнітних маркерів до часу вимірювання у всій 30 Спосіб за одним з пп 15-29, який відрізняєтьсвоїй сукупності затухло внаслідок зовнішнього ся тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини супермагнетизму стабілізовані оболонкою з олігомерних або полімерних вуглеводів, протеїнів, пептидів, нуклеоти16 Спосіб за п 15, який відрізняється тим, що дів, тензидів, синтетичних полімерів та/або ЛІПІДІВ маркують феримагнітними або феромагнітними речовинами аналіти, що визначаються, а до проб, 31 Спосіб за одним з пп 15-30, який відрізняєтьщо вимірюються, додають речовини, які мають ся тим, що його застосовують для визначення респецифічну структуру продуктивної здатності, пстосумісності, а також в алергологи, інфекцюлопі, ГІГІЄНІ, генетиці, вірусо17 Спосіб за п 15 або 16, який відрізняється тим, логи, бактеріологи, токсикологи, патологи, аналітищо речовинами, які мають специфічну структуру, є ці навколишнього середовища та медичній діагноантитіла, фрагменти антитіл, біотин або речовини, стиці що специфічно зв'язують біотин, авідин або стрептавідин, агоністи, що специфічно зв'язуються з 32 Спосіб якісного та/або КІЛЬКІСНОГО виявлення рецепторами, або антагоністи рецепторів, специаналітів в гетерогенних імунних методах, який фічніпептиди та протеїни, рецептори, ензими, відрізняється тим, що субстрати ензимів, нуклеотиди, рибонуклеїнові (I) спочатку маркують речовини, що мають специкислоти, дезоксирибонуклеїнові кислоти, вуглевофічну структуру, або аналіти, що зв'язуються реди або ліпопротеши човинами, які мають специфічну структуру, феримагнітними або феромагнітними речовинами, а 18 Спосіб за одним з пп 15-17, який відрізняєтьпотім ся тим, що речовини зі специфічною структурою мають сталу зв'язування в діапазоні 10-10 1 5 (II) вказані речовини зі специфічною структурою (моль/л)1 додають до вимірюваної проби, 19 Спосіб за одним з пп 15-17, який відрізняєть(III) пробу, що вимірюється, намагнічують за допося тим, що речовини зі специфічною структурою могою магнітного поля відповідної сили, яке примають сталу зв'язування в діапазоні 10-10 1 5 кладається ззовні, та (моль/л)1 (IV) після відключення зовнішнього поля вимірю20 Спосіб за одним з пп 15-19, який ють залишкову магнітну індукцію намагнічування відрізняється тим, що пробу під час замірювання колоїдальних часток за допомогою сенсорів магніпереміщують і, тим самим, модулюють сигнал тного поля, при цьому вимірюють залишкову магпроби нітну індукцію, що виникає внаслідок специфічного зв'язування, та и величину залучають до аналізу 21 Спосіб за одним з пп 15-20, який відрізняється тим, що як сенсори магнітного поля використо33 Спосіб за п 32, який відрізняється тим, що вують включені у вигляді градієнтометру індукційні маркують феримагнітними або феромагнітними котушки, магнетометр Fluxqate, сенсори Giantречовинами аналіти, що визначаються, а до проб, Maqnetoresistance або магніторезистивні перетвощо вимірюються, додають речовини, які мають рювачі специфічну структуру 22 Спосіб за одним з пп 15-21, який відрізняєть34 Спосіб за п 32 або 33, який відрізняється тим, ся тим, що як магнітні сенсори використовуються що речовинами, які мають специфічну структуру, є SQUIDs антитіла, фрагменти антитіл, біотин або речовини, що специфічно зв'язують біотин, авідин або стреп23 Спосіб за одним з пп 15-22, який відрізняєтьтавідин, агоністи, що специфічно зв'язуються з ся тим, що завдяки ступеневому намагнічуванню рецепторами, або антагоністи рецепторів, специпроби, що вимірюється, проводять одночасне вифічні пептиди та протеїни, рецептори, ензими, значення декількох різних аналітів субстрати ензимів, нуклеотиди, рибонуклеїнові 24 Спосіб за п 23, який відрізняється тим, що кислоти, дезоксирибонуклеїнові кислоти, вуглеводля одночасного КІЛЬКІСНОГО визначення аналітів ди або ліпопротеши застосовують різні феромагнітні або феримагнітні речовини з дискретними коерцитивними силами 35 Спосіб за одним з пп 32-34, який відрізняєтьполя ся тим, що речовини зі специфічною структурою мають постійну зв'язування в діапазоні 10 -1015 25 Спосіб за одним з пп 15-24, який відрізняєть(моль/л)1 ся тим, що внутрішній час релаксації за методом Неєля феромагнітних та феримагнітних речовин, 36 Спосіб за одним з пп 32-34, який відрізняєтьщо використовуються, більше часу замірювання ся тим, що речовини зі специфічною структурою мають постійну зв'язування в діапазоні 10 -1015 26 Спосіб за п 25, який відрізняється тим, що час (моль/л)1 релаксації за методом Неєля феромагнітних та феримагнітних речовин, що використовуються, 37 Спосіб за одним з пп 32-36, який при 20°С є більш тривалим, ніж 10 4 секунд відрізняється тим, що пробу під час замірювання переміщують і, тим самим, модулюють сигнал 27 Спосіб за п 25, який відрізняється тим, що час проби релаксації за методом Неєля феромагнітних речовин і феримагнітних речовин при 20°С є більш 38 Спосіб за одним з пп 32-37, який відрізняєтьтривалим, ніж 1 секунда ся тим, що як сенсори магнітного поля використовують включені у вигляді градієнтометру індукційні 28 Спосіб за одним з пп 15-27, який відрізняєтькотушки, магнетометр Fluxqate, сенсори Giantся тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини Maqnetoresistance або магніторезистивні перетвомають розмір часток в діапазоні 1-1000нм рювачі 29 Спосіб за одним з пп 15-28, який відрізняється тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини 39 Спосіб за одним з пп 32-38, який відрізняєть 51646 53 Сполучення за п 52, яке відрізняється тим, ся тим, що як магнітні сенсори використовуються що воно складається з комбінацій стабільних або SQUIDs квазістабільних феримагнітних або феромагнітних 40 Спосіб за одним з пп 32-39, який відрізняєтьречовин з речовинами, що мають специфічну ся тим, що завдяки ступеневому намагнічуванню структуру проби, що вимірюється, проводять одночасне визначення декількох різних аналітів 54 Сполучення за п 52, яке відрізняється тим, що речовинами, які мають специфічну структуру, є 41 Спосіб за п 40, який відрізняється тим, що антитіла, фрагменти антитіл, агоністи, що специдля одночасного КІЛЬКІСНОГО визначення аналітів фічно зв'язуються з рецепторами, цитокши, лімфозастосовують різні феромагнітні або феримагнітні кіни, ендотеліни або їх антагоністи, ІНШІ специфічні речовини з дискретними коерцитивними силами пептиди та протеїни, рецептори, ензими, субстраполя ти ензимів, нуклеотиди, рибонуклеїнові кислоти, 42 Спосіб за одним з пп 32-41, який відрізняєтьдезоксирибонуклеїнові кислоти, вуглеводи, ліпопся тим, що внутрішній час релаксації за методом ротеїни Неєля феромагнітних та феримагнітних речовин, що використовуються, більше часу замірювання 55 Сполучення для використання в одному зі спо43 Спосіб за п 42, який відрізняється тим, що час собів за пп 1-48, яке відрізняється тим, що ферелаксації за методом Неєля феромагнітних та ромагнітними або феримагнітними речовинами є феримагнітних речовин, що використовуються, стабільні або квазістабільні колоїдальні частки з 4 при 20°С є більш тривалим, ніж 10 секунд окисів заліза, фериту барію, фериту стронцію, чистого заліза, двоокису хрому, нікелю, кобальту, а 44 Спосіб за п 42, який відрізняється тим, що час також окисів заліза з додаванням марганцю, МІДІ, релаксації за методом Неєля феромагнітних речонікелю або кобальту вин і феримагнітних речовин при 20°С є більш тривалим, ніж 1 секунда 56 Засіб для використання в одному зі способів за 45 Спосіб за одним з пп 32-44, який відрізняєтьпп 6, 7, 21, 22, 36, 37, який відрізняється тим, що ся тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини він містить декілька феромагнітних або феримагмають розмір часток в діапазоні 1-1000 нм нітних речовин з різними коерцитивними силами поля 46 Спосіб за одним з пп 32-45, який відрізняється тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини 57 Спосіб виявлення феромагнітних або феримамають розмір часток в діапазоні 2-500 нм гнітних речовин, введених до людського організму або нанесених на людське тіло, який відрізняєть47 Спосіб за одним з пп 32-46, який відрізняється тим, що залишкову магнітну індукцію намагнічуся тим, що феромагнітні та феримагнітні речовини вання феромагнітних або феримагнітних речовин стабілізовані оболонкою з олігомерних або полівизначають після відключення поля, що намагнімерних вуглеводів, протеїнів, пептидів, нуклеотичує дів, тензидів, синтетичних полімерів та/або ЛІПІДІВ 48 Спосіб за одним з пп 32-47, який відрізняєть58 Спосіб за п 57, який відрізняється тим, що як ся тим, що його застосовують для визначення ресенсори магнітного поля використовують SQUIDs, продуктивної здатності, пстосумісності, а також в індукційні котушки, магнетометр Fluxqate, сенсори алергологи, інфекцюлопі, ГІГІЄНІ, генетиці, вірусоGiant-Maqnetoresistance або магніторезистивні логи, бактеріологи, токсикологи, патологи, аналітиперетворювачі ці навколишнього середовища та медичній діагно59 Спосіб виявлення феромагнітних або феристиці магнітних речовин, внесених до людського організму або нанесених на людське тіло, який 49 Магнітно марковане сполучення для викоривідрізняється тим, що спочатку стання в одному зі способів за пп 1-48, яке відрізняється тим, що феромагнітні та фери(I) маркують речовини, що мають специфічну магнітні частки мають час релаксації при темпераструктуру, феримагнітними або феромагнітними 4 турі 20°С за методом Неєля, який більше ніж 10 речовинами, а потім секунд (II) ці магнітно марковані речовини зі специфічною 50 Сполучення за п 49, яке відрізняється тим, структурою вводять до живого організму або нанощо воно складається з комбінацій стабільних або сять на організм, квазістабільних феримагнітних або феромагнітних (III) об'єм організму, що цікавить, намагнічують за речовин з речовинами, що мають специфічну допомогою магнітного поля, що прикладається структуру ззовні, та 51 Сполучення за п 50, яке відрізняється тим, (IV) після відключення зовнішнього поля вимірющо речовинами, які мають специфічну структуру, є ють залишкову індукцію намагнічування магнітних антитіла, фрагменти антитіл, агоністи, що специмаркерів за допомогою сенсорів магнітного поля фічно зв'язуються з рецепторами, цитокши, лімфо60 Спосіб за п 59, який відрізняється тим, що як кіни, ендотеліни або їх антагоністи, ІНШІ специфічні речовини, що мають специфічну структуру, застопептиди та протеїни, рецептори, ензими, субстрасовують антитіла, фрагменти антитіл, агоністи, що ти ензимів, нуклеотиди, рибонуклеїнові кислоти, специфічно зв'язуються з рецепторами, або антадезоксирибонуклеїнові кислоти, вуглеводи, ліпопгоністи рецепторів, специфічні пептиди та протеїротеїни ни, рецептори, ензими, субстрати ензимів, нуклеотиди, рибонуклеїнові кислоти, 52 Сполучення для використання в одному зі сподезоксирибонуклеїнові кислоти, вуглеводи, ліпопсобів за пп 1-48, яке відрізняється тим, що феротеїни ромагнітні та феримагнітні речовини мають час релаксації при температурі 20°С за методом 61 Спосіб за п 60, який відрізняється тим, що Неєля, який більше ніж 1 секунда агоністами або антагоністами, які специфічно зв'я зуються з рецепторами, є цитокши, лімфокши, ендотеліни або їх антагоністи 62 Спосіб за одним з п 60 або 61, який відрізняється тим, що речовини зі специфічною структу5 15 рою мають сталу зв'язування в діапазоні 10 -10 1 (моль/л) 63 Спосіб за одним з п 60 або 61, який відрізняється тим, що речовини зі специфічною структу7 15 рою мають сталу зв'язування в діапазоні 10 -10 1 (моль/л) 64 Спосіб за одним з пп 59-63, який відрізняється тим, що як сенсори магнітного поля використовують (SQUIDs), індукційні котушки, магнетометр Fluxqate, сенсори Giant-Maqnetoresistance або магніторезистивні перетворювачі 65 Спосіб за одним з пп 59-64, який відрізняється тим, що в ньому використовують з'єднання за одним з пп 44-50 66 Застосування феримагнітних або феромагнітних речовин як маркерів у способі за п 57 67 Сполучення для використання в способі за одним з пп 59-65, яке відрізняється тим, що час релаксації за методом Неєля феромагнітних або Винахід стосується предмету, охарактеризованого в формулі винаходу, тобто способу якісного і/або КІЛЬКІСНОГО виявлення аналітів у рідких та твердих фазах за допомогою вимірювання залишкового магнетизму, придатних для цього з'єднань та їх застосування в аналітиці Далі, відомо, що КІЛЬКІСНІ методи імунного аналізу, а також ІНШІ методи аналізу зв'язування (наприклад, методи блокування рецептора) дозволяють визначати в пробах з різним вмістом дуже великої КІЛЬКОСТІ речовин, які можуть мати також біологічну значимість Однак, як правило, при одному аналізі визначається лише один параметр на пробу Актуальний огляд різних способів дає Т Chard [An Introduction to Radio-immunoassay and Related Techiques Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, 4 ed , Elsevier Science Publishers, Amsterdam (1990)] Основою всіх аналізів зв'язування є висока чутливість індикації маркірованих ізотопами або іншим чином з'єднань у комбінації з великою специфічністю рецепторних реакцій ліганд У способі, розкритому в публікації JP3220442A, проводиться визначення титру антигену шляхом заміру величини передаючої антитіла агрегації (аглютинації) за допомогою розкритого в публікації способу вимірювання розмірів агломерованих магнітних часток Спосіб визначення розміру часток полягає у включенні магнітного поля, яке пронизує стаціонарну седиментовану пробу, та в замірі залишкової магнітної густини потоку агломерованих магнітних часток З публікації US-4,661,408 ВІДОМІ ферофлюїди, які містять суперпарамагнітні частки з двоокису хрому з приєднаними до них антитілами Тут вимагається, щоб ці частки мали дуже невеликий внутрішній час релаксації, тому вони не відповідають вимогам по застосуванню замірів залишкового 51646 8 феримагнітних речовин при 20°С є більш трива4 лим, ніж 10 секунд 68 Сполучення за п 67, яке відрізняється тим, що воно містить суміш різних феримагнітних або феромагнітних речовин з речовинами, що мають специфічну структуру 69 Сполучення за п 68, яке відрізняється тим, що феромагнітними або феримагнітними речовинами є окиси заліза або окиси заліза з додаванням марганцю, МІДІ, нікелю або кобальту 70 Сполучення для використання в способі за одним з пп 57-65, яке відрізняється тим, що час релаксації за методом Неєля феромагнітних або феримагнітних речовин при 20°С є більш тривалим, ніж 1 секунда 71 Сполучення за п 70, яке відрізняється тим, що вони містять суміш різних феримагнітних або феромагнітних речовин з речовинами, що мають специфічну структуру 72 Сполучення за п 70, яке відрізняється тим, що феромагнітними або феримагнітними речовинами є окиси заліза або окиси заліза з додаванням марганцю, МІДІ, нікелю або кобальту магнетизму ВІДОМІ способи проведення аналізу мають, однак, такі недоліки Способи одночасного визначення різних анаЛІТІВ в одній і тій ж пробі базуються на прив'язуванні по-різному маркованих радіологічно, флюоресцентно або ензимолопчно зондів до аналітів При цьому, як правило, після наступної сепарації та промивання замірюється активність незв'язаного або ж зв'язаного , зонду для КІЛЬКІСНОГО визначення аналізу При цьому КІЛЬКІСТЬ використаних різних мічених атомів зонду сильно обмежена Так, наприклад, у випадку різних радіоізотопів для, зондового маркування виступають так звані перекриваючі феномени, які приводять до швидкої втрати кількісної точності індивідуальних сигналів Комбінація різних ензимів як мічених атомів зонду є причиною зіставлених проблем, причому здійсненність тут утруднена додатково необхідним пошуком умов реакції, які дозволяють проводити одночасне визначення ензимних реакцій в одній системі Чутливість способів обмежена, наприклад, неспецифічними взаємодіями між матрицею та зондом або ж лімітованою можливістю маркування зонду (мала питома активність) Успішне здійснення способів часто припускає переробку одержаного матеріалу проб (наприклад, приготування сиворотки або плазми з цільної крові, екстракцію проб за допомогою органічних розчинників, збагачення аналіту за допомогою хроматографічних способів і так далі) Для успішного здійснення способів недопустимі операції сепарації та промивання, які служать для розділення зв'язаних та незв'язаних рецепторів або ж ліганд Для здійснення радюімунних аналізів потрібне використання дорогих випромінюючих нуклідів, які 51646 10 лоїдальних часток, які вільно переміщуються, після відключення зовнішнього поля, що намагнічує, в межах часу заміру релаксує за допомогою другого механізму При цьому починається обертання всієї колоїдальної частки всередині рідини, яка її оточує, причому постійна часу залежить від гідродинамічного діаметра часток, а також оболонки, в'язкості рідини-носія і температури Цей параметр в основному визначається середовищем, що оточує частку Цей механізм позначається як релаксація за методом Брауна або ЗОВНІШНІЙ суперпарамагнетизм Засіб якісного та/або КІЛЬКІСНОГО виявлення аналітів у рідких та твердих фазах здійснюється таким чином (I) спочатку маркірують речовини, що мають специфічну структуру, феримагнітними або феромагнітними речовинами, а потім (II) ці магнітно маркіровані речовини зі специфічною структурою додають до проби, що заміряється, (III) пробу, що зміряється, намагнічують за допомогою поля відповідної сили, яке прикладається ззовні, та (IV) після відключення зовнішнього поля заміряють залишкову магнітну індукцію намагнічування колоїдальних часток (магнітних маркіруючи речовин) за допомогою сенсорів магнітного поля, причому залишкова магнітна індукція, що виникає шляхом питомого зв'язування та и величина залучаються до аналізу Можливе у способах ВІДПОВІДНО ДО рівня техніки лише у виключних випадках розрізнення між зв'язаними га незв'язаними маркерами стаз можливим у способі згідно винаходу завдяки використанню зникаючої залишкової магнітної індукції (тобто зовнішнього супермагнітизму) незв'язаних магнітних маркерів у рідкий фазі І, навпаки, сукупність зв'язаних магнітних маркерів показує залишкову магнітну індукцію, що виміряється, - залежну від матеріалу часток Отже, при замірі залишковой магнітної індукції визначуваної проби захоплюється тільки частина зв'язаних магнітних маркерів Тому спосіб нижче визначається також як вимірювання залишковой магнітной індукції зв'язування та базується на кількісному виявленні зв'язанних Суттєва основа винаходу полягає в тому, що маркерів зі специфічною структурою залежність намагнічування феромагнітних та фе пов'язані з великими витратами при роботі з ними Зберігання маркерів, що використовувались до цього, на практиці часто створює проблеми, оскільки вони або нестабільні (радюімунні аналізи) і тому повинні постійно заново створюватись, або ж чутливо реагують на вплив навколишнього середовища Задача даного винаходу тому полягає в тому, щоб розробити нові способи та речовини, які перевершили б рівень техніки Ця задача вирішується за допомогою цього винаходу Було виявлено, що якісне і/або кількісне виявлення аналітів у рідкій і/або твердій фазі вдається, якщо стабільні або квазістабільні феромагнітні або феримагнітні речовини використовуються як індиЦІЮЮЧІ магнітні маркіруючі речовинне імунних аналізах або в аналізах зв'язування, і визначається залишковий магнетизм проби як вимірюваний параметр Нижче спочатку описують способи, які долають недоліки відомих способів Способи, згідно винаходу, основані на використанні колоїдальних феромагнітних або феримагнітних речовин, які також нижче називаються магнітними маркіруючими речовинами, які комбінуються з речовинами, що ІНДИЦІЮЮТЬСЯ, нижче позначаються також аналітами, - або з речовинами зі специфічною структурою Подібні комбінації з магнітних маркіруючих речовин з аналітами або з речовинами, що маютьспецифічну структуру, нижче називаються магнітними маркерами За рахунок використання поняття колоїдальні речовини можна описати як діапазон розмірів часток або речовин у діапазоні величин колоїдів, тобто, діапазон від 1нм до приблизно ЮООнм, так і їх застосування як диспергованої фази у відповідному дисперсійному середовищі, яке у більшості випадків є водним Колоїдальні речовини, які нижче позначаються як частки, з метою покращення здатності до зберігання або транспортування можуть бути присутніми у висушеній або замороженій формі, в той час як для проведення замірів вони все ж присутні, будучи дисперговані у рідкій фазі римагнітних колоїдальних речовин після відключення зовнішнього намагнічуючого поля дуже відчутно залежить від матеріалу та форми (постійна анізотропія використаного матеріалу часток), об'єму та температури використаних часток Причиною цього є поворот внутрішнього вектора намагнічування всередині часток Цей механізм називають релаксацією за методом Неєля Якщо намагнічування часток відбувається у межах часу виміру, то це позначається як внутрішній супермагнетизм Частки, час релаксації яких за методом Неєля суттєво довший за час спостереження, позначаються як залишкові частки або також як стабільні частки Частки, час релаксації яких за методом Неєля дорівнює порядку часу спостереження, позначаються як квазістабільні частки Наступна істотна основа винаходу полягає у тому, що намагнічування сукупності стабільних або квазістабільних феро- або феримагнітних ко Іншими словами, виявлення аналіту може відбуватися без дорогої операції сепарації та промивання, оскільки тільки специфічно прив'язані до аналіту стабільні або квазістабільні феромагнітні або феримагнітні речовини (які скомбіновані з метою надання специфічності за допомогою речовин, що мають специфічну структуру) є причиною залишкової магнітної індукції, всупереч чому намагнічування присутніх одночасно в пробі, надмірних, незв'язаних стабільних або квазістабільних феромагнітних або феримагнітних речовин (які також скомбіновані з речовинами зі специфічною структурою) затухає вже перед початком заміру зовнішнього супермагнетизму У наступній формі виконання винаходу спосіб модифікований таким чином, що замість речовин зі специфічною структурою самі аналіти комбінують стабільними або квазістабільними феромагнітними або феримагнітними речовинами, як це 12 11 51646 аналогічним чином часто використовується при ти поля постійного струму dc (наприклад, SQUIDs, проведенні конкурентних радіологічних імунних магнітометр Fluxqate, сенсори Giantметодів аналізу До проб повинна бути додана ще Maqnetoresistance або магніторезистивні перетвой речовина зі специфічною структурою рювачі), можливо також вимірювання залишкової магнітної індукції після попереднього намагнічуАле спосіб може здійснюватися також і як мування проби, яка при цьому не рухається льтианалітний метод досліджень, який дозволяє проводити безпосереднє одночасне визначення ВІДПОВІДНИЙ вимірювальний пристрій зображемножини різних аналітів у рідинах або твердих но, наприклад, на фіг 1 Подібний пристрій було речовинах Для цього потрібно маркірувати аналіти використано в наступних прикладах спочатку різними феромагнітними чи феримл нітНаступний аспект винаходу стосується з'єдними колоїдальними речовинами з досить дискренань для вимірювання залишкової магнітної індуктними значеннями коерцитивної сили поля Піц час ції зв'язування ВІДПОВІДНІ з'єднання складаються з зв'язування магнітних маркерів прикладається колоїдальних суспензій феримагнітних чи фероманамагнічуюче поле (первинне намагнічуюче поле), гнітних речовин і які мають специфічну структуру яке веде до вирівнювання усіх магнітних маркерів, речовин чи аналітів що знаходяться у пробі, вздовж їх легкої осі Після Під речовинами зі специфічною структурою, в цього визначається залишкова магнітна індукція межах винаходу, треба розуміти, зокрема, всі репрсби На наступних етапах проба піддається печовини, які специфічно прив'язанні до бажаної ремагнічуванню за допомогою ЗОВНІШНІХ ПОЛІВ, ЩО структури, як, наприклад антитіла, фрагменти анобертаються зустрічно (у протилежність первинтитіл, біотин або зв'язуючі біотин речовини, як наному полю намагнічування), які за своєю силою приклад, авідін або стрептавідін, агоністи, що спеприведені у ВІДПОВІДНІСТЬ з коерцитивними силами цифічно зв'язуються з рецепторами, як наприклад, поля магнітних маркіруючих речовин В результаті цитокіни, лімфокши, ендотеліни або їх антагоністи, цього стає можливим цілеспрямовано переорієнспецифічні пептиди та протеїни, рецептори, ензитувати завжди тільки ті маркіруючі речовини, коерми, субстрати ензимів, нуклеотиди, рибонуклеїнові цитивні поля яких менші за прикладене намагнікислоти, дезоксирибонуклеїнові кислоти, вуглевочуюче поле Між окремими етапами ди, ліпопротеши, т ін перемагнічування залишкова магнітна індукція При цьому перевага надається речовинам, що проби визначається ВІДПОВІДНО заново мають постійну зв'язування у діапазоні від 105 до 1015(моль/ л) \ зокрема, придатними є речовини, З усіх заміряних значень залишкової магнітної які мають постійну зв'язування від 107 до індукції проби при кожному окремому етапі пере1015(моль/л)1 магнічування таким чином може визначатись КІЛЬКІСТЬ частини різних зв'язаних магнітних маркерів Як феромагнітні та феримагнітні колоїдальні речовині застосовуються всі колоїдальні речовини, Завдяки цьому способу є можливість одночасвнутрішній час релаксації яких за методом Неєля но визначати декілька аналітів у кожній пробі більше або дорівнює часу замирювання та які є, Спосіб згідно винаходу, а також варіанти спотаким чином, стабільними або квазістабільними собу можуть знаходити застосування визначені у репродуктивної здатності, пстосумісності, а також Особливо придатними є всі феромагнітні або в алергологи, інфекцюлопі, ГІГІЄНІ, генетиці, вірусоферимагнітні речовини, час релаксації яких при логи, бактеріологи, токсикологи, патологи, аналіти20°С є більш тривалим,, ніж 10 ' Зокрема, придатці навколишнього середовища та медичній діагноними є всі феромагнітні або феримагнітні речовистиці ни, час релаксації яких більше 1 секунди Виявлення залишкової магнітної індукції зв'яФеромагнітні чи феримагнітні речовини мозування відбувається за допомогою відомих, прижуть бути, переважно, стабілізовані оболонкою з датних для цього вимірювальних пристроїв, як, олігомерних або полімерних вуглеводів, протеїнів, наприклад, Superconducting Quantum Interference пептидів, нуклеотидів, тензидів, синтетичних поліDevices (SQUIDs), причому спочатку проводиться мерів та/або ЛІПІДІВ намагнічування за допомогою ВІДПОВІДНОГО магнітРозміри часток феромагнітних і феримагнітних ного поля, а потім, після відключення поля, за доречовин складають, переважно, від 1нм до ЮООнм помогою чутливих сенсорів магнітного поля проЗокрема, переважно, розміри часток складають від водиться вимірювання залишкової магнітної 2нм до 500нм (Дані щодо величини часток відноіндукції намагніченої речовини зі специфічною сяться до гідродинамічного діаметру) структурою або залежних від нього сигналів Як феромагнітні або феримагнітні речовини, зокрема, є придатними стабільні або квазістабільні Під час заміру проба, переважно, може рухаколоїдальні частки з окисів заліза (РегОз, у-^егОз), тися фериту барію, фериту стронцію, чистого заліза, Зокрема, переважним чином, модуляція сигдвоокису хрому, нікелю, кобальту, а також окисів налу відбувається за рахунок вібрації або оберзалізу з додаванням марганцю, МІДІ, нікелю або тання проби Таким чином, реалізується перетвокобальту (як приклад, описано в патенті ФНР-DE рення вимірювального сигналу постійного струму ЗО 27 012та в патенті ФНР-DE 41 16 093) (dc) у більш високий діапазон частоти Для вимірювання можуть використовуватись Одержання з'єднань, що використовуються разом з названими SQUIDs - також і переключені у ВІДПОВІДНО до винаходу, які складаються зі стабівигляді градюметра індукційні котушки, магнітольних або квазістабільних феромагнітних або феметр Fluxqate, сенсори Giant-Maqnetoresitance або римагнітних речовин, які пов'язанні з речовинами, магніторезистивні перетворювачі що мають специфічну структуру, або аналогами, відбувається за допомогою способів, які застосоПри використанні сенсорів, які можуть заміря 14 13 51646 вуються в галузі імунної, пептидної та білкової Наступний аспект винаходу стосується, таким хімії При цьому речовина зі специфічною структучином, засобів для вимірювання залишкової магнірою чи аналіт зв'язана через ковалентні зв'язки з тної індукції зв'язування, які містять феромагнітні речовинами, які утворюють стабілізуючу оболонку або феримагнітні колоїдальні речовини у відповідферомагнітних або феримагнітних речовин Щодо ному суспензійному середовищі стабілізованої оболонки мова йде, наприклад, про Як суспензійні середовища у розрахунок привуглеводи, пептиди, нуклеотиди, ЛІПІДИ, тензиди чи ймаються всі рідини, в яких колоїдальні частки полімери Особливо придатними методами зв'язумають можливість вільного руху Якщо вимірюванвання є, наприклад, активування та зв'язок за доня проводяться без операцій сепарації та промипомогою карбодммідів [Jakoby and Wilchek, eds вання, то в'язкість використовуваного суспензійно(1974) Methods Enzymol, 34], утворення Шиффого середовища повинна бути приведена у вих основ після впливу перюдатів на з'єднання, що ВІДПОВІДНІСТЬ з часом релаксації за методом Неєля містять вуглеводи (Wichek and Bayer, eds, Methферомагнітних та феримагнітних речовин і часом ods Enzym 184 177), які далі - при необхідності замірювання, оскільки суспензійне середовище ще і підлягають відновленню для подальшої стасуттєво визначає часову постійну релаксації за білізації, та зв'язок за допомогою глютардіальдепметодом Броуна У іншому випадку, наприклад, да [Heitzmaim and Richards, Proc Natl Acad Sci при використанні часток з коротким часом релакUSA 71 (1974)3537], утворення МІСТКІВ МІЖ бромасації (наприклад, 0,01сек) у високов'язких суспенцетилованими частками з тюлілованими речовизійних середовищах (наприклад, 80% гліцеролу)та нами [Anqerer et al , Cell 9 (1976)81], а також віднокоротким часом виміру (наприклад 0,0001 секунд влювальне алкілювання [Bayer et al після відключення зовнішнього поля) релаксація J Histochem24 (1976)933] за методом Броуна (ЗОВНІШНІЙ супермагнетизм) уповільнюється так, що не можна більше встаноМожуть бути також одержані феромагнітні або вити різницю між зв'язаними та незв'язаними марферимагнітні колоїдальні частки з стабілізуючою керами, які мають специфічну структуру У загальоболонкою з речовини, що має специфічну струкному та цілому, переважно використовувати туру, або з самого аналіту, при цьому частки після суспензійне середовище, що має в'язкість менше одержання вводяться безпосередньо у розчин ЮОмПас речовини, що має специфічну структуру, або аналіту, при необхідності у присутності інших допоміОсобливо придатними як суспензійне середожних речовин, як, наприклад, протеїнів, вуглевовище є вода, водні розчини поверхнево-активних дів, а також натуральних, синтетичних або допоміжних речовин, як наприклад, тензиди або частково синтетичних поверхнево-активних речоолігомерні або полімерні вуглеводи чи білки, а вин і т ш або ж одержують безпосередньо у притакож суміші з води зі спиртами, як наприклад, сутності речовин, що мають специфічну структуру, гліцерол та поліетиленгліколь, при цьому з метою або аналітів ІН'ЄКЦІЙ перевага віддається ВІДПОВІДНІЙ ВОДІ Суспензійні середовища можуть додатково містити З метою проведення методів дослідження муДОПОМІЖНІ речовини, що міняють осмотичний тиск, льтианаліту можуть використовуватись також суяк, наприклад, поварену сіль Далі, можуть містиміші сполук, які складаються з багатьох різних матись буферні речовини, що визначають рівень рН, гнітних маркерів, причому різні магнітні маркери як наприклад, фосфати складаються з комбінацій різних речовин, що мають специфічну структуру, або аналітів, що підляНаступним предметом винаходу є застосувангають виявленню, з різними феромагнітними або ня сполук у способі згідно винаходу для виміру феримагнітними речовинами Основою цього зазалишкової магнітної індукції зв'язування стосування комбінацій різних магнітних маркерів На основі визначення зв'язування, заснованозгідно винаходу є те, що як магнітну маркіруючі го на фізичних механізмах, можуть бути виключені речовин для ВІДПОВІДНИХ речовин, що мають спенеспецифічні сигнали вимірювання (феномени цифічну структуру, або аналітів, що підлягають матриці) Специфічність способу залежить, таким виявленню, застосовуються феромагнітні або фечином, лише від «справжньої» специфічності реримагнітні речовини з розрізняльними коерцитивчовини, що має специфічну структуру (перехресна ними силами (Не), причому параметри коерцитивреактивність антитіл, неспецифічне зв'язування ної сили (Не) та залишковий магнетизм (MR) ДЛЯ ліганд) різних магнітних маркірувань відомим чином виНа основі високої чутливості способу згідно значаються попередньо окремо і, таким чином, є винаходу без ускладнень знижуються звичайні граничні значення детектування методів зв'язуВІДОМИМИ вання Речовини, що мають специфічну структуру, маркіровані феромагнітними або феримагнітними У протилежність вже відомим способам (JPколоїдальними речовинами, можуть бути присут235774 та WO 91/15243) у способі згідно винаходу німи також і у висушеній формі (наприклад, у вивимірюється не статичне намагнічування у присутгляді люфілізатів), при необхідності в комбінації з ності зовнішнього намагнічуючого поля, а залишіншими допоміжними речовинами, які полегшують, кова магнітна індукція зв'язування у відсутності наприклад, сушіння або підвищують стабільність магнітного поля або залежні від них сигнали Тільвисушеного продукту Одержання готових до викоки завдяки цьому стає доступною інформація про ристання засобів з подібних люфілізатів відбувастан зв'язування маркерів ється за рахунок ресуспендування у відповідному Далі, в результаті цього виключається дія сигсуспензійному середовищі безпосередньо перед налу виміру за рахунок діа- або парамагнітних застосуванням компонентів і ВІДПОВІДНО забруднення, що сприяє 16 15 51646 подальшому збільшенню чутливості вимірювання зображення тромбів, атеросклеротичних бляшок, запальних реакцій, ревматичних або ревматоїдних Способи вимірювання залишкової магнітної змін, причому ВІДПОВІДНО переважно використовуіндукції зв'язування згідно винаходу можуть далі ються комбінації згідно винаходу зі стабільних або бути використані для того, щоб виявити місцезнаквазістабільних феромагнітних або феримагнітних ходження феромагнітних або феримагнітних речоречовин зі специфічними речовинами, що мають вин у живому організмі Особлива перевага при відповідну патологічну структуру, як магнітними цьому надається тому, що для визначення залишмаркерами кової магнітної індукції зв'язування можуть бути застосовані феромагнітні або феримагнітні речоВимірювання на живому об'єкті просторового вини, тим самим, можна уникнути особливо критирозподілення введених у людину стабільних або чного використання на людині радіоактивних ІЗОквазістабільних маркерів може здійснюватись згідТОПІВ, при цьому чутливість способу згідно но винаходу у двох варіантах винаходу досягає чутливості традиційних способів 1 Утворенням по можливості гомогенного марадіаційної медицини - гамма сцинтиграфм або гнітного поля у регіоні організму, що викликає інпозитронно-емісійної томографії Крім того, попетерес, відключенням поля та вимірюванням просреднє відділення циркулюючих у крові незв'язаних торового розподілення залишкової магнітної маркерів є зайвим, оскільки воно (у протилежність індукції зв'язування за допомогою багатоканальнорадюдіагностичним методам) не є причиною «сигго сенсора SQUID, який використовується для бюналу перешкод» і, тим самим, не впливає на промагнітних досліджень [див D Drunq, IEEE цес виявлення специфічно зв'язаного маркера Trans Appl Supercond , 5 (1995) 2112-2117] Він повинен по можливості повністю охоплювати об'Згідно винаходу для цього пацієнту дається єкт вимірювання Для створення достатньої інфосуспензія стабільних або квазістабільних феромармації про вимірювання переважним є багаторагнітних або феримагнітних речовин Як шлях ввезове проведення вимірювань при послідовному дення виступають локальне нанесення, пероральрастрируванні об'єкту вимірювання не введення та всі форми парентерального введення Особливо придатними є форми внутрі2 Послідовним формуванням просторово обшньосудинного введення меженого локального поля, відключенням поля та вимірюванням просторової залишкової магнітної Колоїдальні речовини розподіляються в оргаіндукції зв'язування за допомогою одноканального нізмі, при цьому рисунок розподілення у ТІЛІ залесенсора Застосування мультиканального сенсора жить від шляху введення, а також різних інших є також можливим фармакокшетичних параметрів Визначення залишкової магнітної індукції зв'язування, що окремо При використанні обох методів для отримання сприймається по місцю, у різний час після введенмаксимальної інформації слід віддавати перевагу ня стабільних або квазістабільних феромагнітних як намагнічуванню об'єкта виміру, так і вимірюванабо феримагнітних речовин може служити встаноню результуючого магнітного поля в усіх трьох вленню патологічних станів у ТІЛІ, ЯКІ характеризупросторових напрямках ються як незвичайним збагаченням, так і відсутнісОбробка даних вимірів може проходити шлятю виникнення збагачення хом ВІДПОВІДНОГО способу апроксимації Так, наприклад, в основу може бути покладена модель Особливо прийнятним для зображення патомагнітного диполя, мультиполя або мультилогічних структур у людському ТІЛІ може бути видиполя Спеціальні параметри моделі, зокрема, користання ВІДПОВІДНО до винаходу стабільних або місцеположення диполів або мультиполів, визнаквазістабільних феро- або феримагнітних речовин чають ВІДПОВІДНИМ методом апроксимації, який (магнітних маркерів), скомбінованих з речовинами, зводить до мінімуму відхилення між даними виміщо мають специфічну структуру Для цього сперами та параметрами моделі Ці параметри доцифічна прив'язка магнітних маркерів до патологізволяють ВІДПОВІДНИМ чином визначати просторочної структури веде до специфічного сигналу, який ве розподілення намагнічених часток ВІДПОВІДНО до винаходу може бути визначений за допомогою способів визначення залишкової магніАналогічна технологія відома та доводить на тної індукції зв'язування на живому організмі, опиДІЛІ придатність її для аналізу магнітних полів біосаних для проведення методів аналізу зв'язуванелектричних потоків ня Для вимірювання залишкової магнітної індукції Як приклад застосування згідно винаходу стазв'язування на живому організмі придатні, в оснобільних або квазістабільних феромагнітних або вному, ті ж речовини - або приготовлені з них заферимагнітних речовин в комбінації зі способами соби - які використовуються у дослідженнях на вимірювання залишкової магнітної індукції зв'язуживому організмі вання слід назвати визначення пухлин у ТІЛІ ШЛЯОсобливо придатним для використання на жиХОМ використання специфічних для пухлин магнітвому об'єкті є магнітні маркіруючи речовини, які них маркерів Специфічними для пухлин можуть біологічно розщеплюватись і є біологічно маркерами можуть бути, наприклад, комбінації переносимими Це стосується, зокрема, магнітних стабільних або квазістабільних феромагнітних або маркіруючих речовин, які складаються з окисів феримагнітних речовин зі специфічними для пухзаліза або з комбінацій окисів заліза з марганцем лин речовинами, як, наприклад, антитіла, фрагмеабо кобальтом Магнітні частки, до яких ВІДПОВІДНО нти антитіл, пептиди, рецептори, протеїни, нуклеїдо названих способів можуть бути прив'язані ренові кислоти, олігонуклеотиди, мономерні, човини, що мають специфічну структуру, знахоолігомерні або полімерні вуглеводи дять застосування, наприклад, в ядерній спінтомографм та описуються, крім усього іншого, в WO Іншими прикладами можливого застосування є 18 17 51646 92/12735, WO 92/22586, а також в ЕР 0 186 616 рази розчином повареної солі з буферними власІнший аспект винаходу стосується, таким чином, тивостями фосфату, який містить 0,1% Tween 20 застосування магнітних маркіруючих речовин у (нижче називається PBST), для вимивання фіксоспособі вимірювання в живому організмі залишкованого Collaqen В ємність, призначену для проб, вої магнітної індукції зв'язування додають потім 5мкл маг-анти-Collaqen III у 200мкл PBST Інкубують 1 годину при кімнатній темпераПід речовинами зі специфічною структурою у турі Потім пробу намагнічують у магнітно екранозв'язку з застосуванням вимірювання залишкової ваній камері в полі з напруженістю 2мТ 4см під магнітної індукції зв'язування у живому організмі детектором Squid (див фіг 1 ) Після відключення слід розуміти, зокрема, всі речовини, які специфічмагнітного поля проводять вимірювання проби но зв'язуються структурами людського організму, Для цього пробу під час процесу вимірювання вищо ідентифікуються Особливо придатними є андаляють з котушки намагнічування 3 різниці встатитіла, фрагменти антитіл, агоністи або їх антагоновлених значень густини магнітних потоків - після ністи, які специфічно зв'язуватися з рецепторами, відключення магнітного поля - до і після видаленспецифічні пептиди та протеїни, рецептори, ензиня проби з поля заміру одержують залишкову магми, субстрати ензимів, нуклеотиди, рибонуклеїнові нітну індукцію У цьому прикладі можна визначити кислоти дезоксирибонуклеїнові кислоти вуглеводі лише, залишкову магнітну індукцію або ліпопротеши 3 агоністів, що зв'язуються з рецепторами прийнятими, зокрема, цитокши, лімПРИКЛАД 2 фокіни або ендотеліни Розчин 5мкг Сома Collaqen V у 20мкл PBS буДобре придатними є всі речовини зі специфічферного розчину рН7,4 інкубують в ємності з поліною структурою які мають постійну зв'язування у стиролу, призначеній для проб Потім скидають діапазоні від 10 - 1015(моль/л)1 Зокрема, придатрідку фазу Ємність, призначену для проб, проминими є всі речовини зі специфічною структурою вають три рази PBST промивочним буферним які мають постійну зв'язування в діапазоні від 10 розчином, який має рН7,4 До проби додають 5мкл -10 1 5 (моль/л) 1 маг-анти-Collaqen III, приготованого у ВІДПОВІДНОСТІ з прикладом 1, в 200мкл PBST Інкубують 1 годину Приведені нижче приклади служать для більш при кімнатній температурі Потім пробу намагнічудетального пояснення предмету винаходу, але він ють в магнітно екранованій камері в полі з напруними не обмежується женістю 2мТ 4см під детектором Squid (див фіг 1 ) ПРИКЛАДІ Після відключення магнітного поля пробу заміряЮОмкг моноклонального антитіла, направлеють Пробу під час процесу вимірювання видаляного проти Colladen III, яке називається нижче анють на котушки намагнічування На пробах, які ти-Collaqen III, розчиняють в 500мкл 0,1 М розчину містять Collaqen V, неможливо встановити наявбікарбонату натрію 1мл суспензії магнетиту з доність залишкової магнітної індукції бавкою декстрану (Meilto Sanqyo) з 1моль Fe/л та розміром часток приблизно 40нм (гідродинамічний ПРИКЛАДЗ діаметр) пропускають через колону «Sephadex» З Юмл розчину, 1,9мг/мл Collaqen III в PBS (Pharmacia PD 10) з 0,1 М бікарбонату натрію з на(рН7,4) одержують ВІДПОВІДНО 5мл приведених данням розчину буферних властивостей До сунижче розбавлених розчинів спензії додають 0,5мл Юммоль розчину періодату 1000нг/мл, 100нг/мл, 10нг/мл натрію Розчин залишають настоюватися у темряві З кожного розбавленого розчина у трубочку з протягом 2 годин Потім через PD 10 проводять полістиролу крапають з піпетки три рази по 1мл вимивання 0,1 М розчину бікарбонату натрію До (ємність 2,5МЛ) ВСІ три трубочки інгібують 1 годисуспензії додають розчин анти-Collaqen III Суміш ну при 37°С Після ЦЬОГО ВМІСТ трубочок скидають настоюють протягом 3 годин при 4°С в темряві Трубочки промивають 3 рази кожного разу по 1мл Після ЦЬОГО додають 5мг ІЧаВЬЦ у вигляді твердої PBST В кожну трубочку додають 1мл розбавленоречовини і трохи покачують Суміш настоюють 8 го у співвідношенні 1 100 розчину маркірованого годин при 4°С у темряві Після цього маркірувані магнетитом антитіла, одержаного по прикладу 1 магнетитом анти- Collaqen III (нижче називаються Трубочки залишають протягом 1 години при кімнамаг-анти- Collaqen III) елююлоть через колонку PD тній температурі Після ЦЬОГО проби намагнічують10 з розчином повареної солі, яка має буферні ся за допомогою вимірювального пристрою, схевластивості фосфату (нижче це - PBS, рН7,4) матичне зображення якого надається на фіг 1, (2мТ), та після відключення намагнічуючого поля Розчин 5мкг Collaqen Ш у 200мкл буфера [розпроводять вимірювання проб Для цього під час чин повареної солі з буферними властивостями ( замирювання проби видаляються з котушки намаPBS)] шкубують в ємності з полістіролу, яка пригнічування Визначення виміряних сигналів є мізначена для проб (Ємність, призначена для проб, рою для залишкової магнітної індукції зв'язування служить при цьому твердою фазою, на якій фіксута дає залежність, зображену на фіг 2 ється частина Collaqen) Потім скидають рідку фазу Ємність, призначену ДЛЯ проб, промивають три 19 20 51646 Детектор X 1 - Котушка намагнічування Проби видаляється п збереженням виміру Фіг 1 10' віт і 10 Т" 10 0 10 00 Концентрація (нг/мл) Фіг 2 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044)456-20 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71