Спосіб лікування раку передміхурової залози інгібітором тирозинкінази і засобом для хімічної стерилізації та їх композиція

1 Спосіб інгібування прогресування пухлини передміхурової залози у ссавців, який включає введення зазначеному ссавцю терапевтично ефективної КІЛЬКОСТІ шпбітора тирозинкінази і разом з ним введення зазначеному ссавцю терапевтично ефективної КІЛЬКОСТІ засобу для хімічної стерилізації, вибраного з групи, що складається з естрогену, агоністу ЛГ-РФ, антагоністу ЛГ-РФ і антиандрогену 2 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначеним ссавцем є людина 3 Спосіб за п 1, який в і д р і з н я є т ь с я тим, що терапевтично ефективна КІЛЬКІСТЬ шпбітора тирозинкінази і терапевтично ефективна КІЛЬКІСТЬ засобу для хімічної стерилізації інгібують зростання пухлини синергічним чином 4 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений інгібітор тирозинкінази являє собою trkA інгібітор, trkB інгібітор або trkC інгібітор 5 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений інгібітор тирозинкінази являє собою шдолокарбазол 6 Спосіб за п 5, згідно з яким індолокарбазол має о н Сполука 11-12 7 Спосіб за п 5, згідно з яким індолокарбазол має таку структуру О О Сполука 1 1 - 4 8 Спосіб за п 5, згідно з яким індолокарбазол має таку структуру таку структуру неї . НСІ Сполука 11-4|_ ДЕ о> (О 61970 9 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений інгібітор тирозинкінази являє собою конденсований піролокарбазол 10 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений інгібітор тирозинкінази вводиться перорально 11 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений інгібітор тирозинкінази вводиться парентерально 12 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений агоніст ЛГ-РФ являє собою ацетат леупроліду 13 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений антиандроген являє собою флутамід 14 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений засіб для хімічної стерилізації являє собою поєднання агоністу ЛГ-РФ і антиандрогену 15 Спосіб за п 14, який відрізняється тим, що зазначений агоніст ЛГ-РФ являє собою ацетат леупроліду і зазначений антиандроген являє собою флутамід 16 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений інгібітор тирозинкінази і зазначений засіб для хімічної стерилізації вводяться у вигляді роздільних композицій 17 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що зазначений інгібітор тирозинкінази і зазначений засіб для хімічної стерилізації вводяться разом у ВИГЛЯДІ ОДНІЄЇ КОМПОЗИЦІЇ 18 Композиція, яка містить інгібітор тирозинкінази і засіб для хімічної стерилізації, вибраний з групи, що складається з естрогену, агоністу ЛГ-РФ, антагоністу ЛГ-РФ і антиандрогену 19 Композиція за п 18, в якій інгібітор тирозинкінази являє собою trkA інгібітор, trkB інгібітор або trkC інгібітор 20 Композиція за п 18, в якій інгібітор тирозинкінази являє собою індолокарбазол 21 Композиція за п 20, при цьому, що індолокарбазол, який входить до неї, вибирають з групи, що складається з індолокарбазолу, що має структуру Н 4 індолокарбазолу, що має структуру н к M' e O Сполука 1 1 - 4 та індолокарбазолу, що має структуру Н ft HCJ Сполука 11-4NH2 - НС1 LAE 22 Композиція за п 18, в якій інгібітор тирозинкінази являє собою конденсований піролокарбазол 23 Композиція за п 18, яка відрізняється тим, що зазначену композицію складають для перорального введення 24 Композиція за п 18, яка відрізняється тим, що зазначену композицію складають для парентерального введення 25 Композиція за п 24, в якій агоніст ЛГ-РФ являє собою ацетат леупроліду 26 Композиція за п 24, в якій антиандроген являє собою флутамід 27 Композиція за п 18, яка відрізняється тим, що зазначений засіб для хімічної стерилізації являє собою поєднання агоністу ЛГ-РФ і антиандрогену 28 Композиція за п 19, в якій зазначений агоніст ЛГ-РФ являє собою ацетат леупроліду і антиандроген являє собою флутамід Сполука 11 12 Даний винахід належить до онкологи, ендокринологи, андрології і фармакології Рак передміхурової залози належить до найбільш часто діагностованого виду раку у ЧОЛОВІКІВ, ВІД якого в Сполучених Штатах щорічно помирає приблизно 41000 осіб (Parker, S L , et al (1996) СА Cancer J Chn , 65 5-27) На ранній стадії, будучи обмеженим одним органом, рак передміхурової залози часто піддається лікуванню хірургічним шляхом або променевою терапією, якщо пацієнт 61970 (НТ-4, NT-4) не помирає від інших, не повязаних з раком приВ патентах США №№5 516 771, 5 654 427 і 5 чин 650 407 розглядаються інгібітори тирозинкінази Карциноми, такі як рак молочної залози, рак індолокарбазоловоготипу і питання лікування раку товстої кишки і аденокарцинома, характеризуютьпередміхурової залози А в патентах США №№5 ся швидким клітинним поділом І, отже, їх можна 475 110, 5 591 855 і 5 594 009, а також в заявці WO лікувати хіміотерапевтичними засобами, які здатні 96/11933 розглядаються інгібітори тирозинкінази інгібувати швидкий клітинний поділ На відміну від піролокарбазолового типу та питання лікування них, для раку передміхурової залози не характерраку передміхурової залози ний швидкий клітинний поділ І в цьому зв'язку традиційні хіміотерапевтичні засоби звичайно деАвторами несподівано було виявлено, що інгімонструють низьку ефективність при використанні бітори тирозинкінази справляють свою протипухїх проти раку передміхурової залози линну дію при лікуванні раку передміхурової залози у ссавців за допомогою гормоннезалежного Рак передміхурової залози часто виявляє чутмеханізму Далі було показано, що поєднання ліливість до гормональних змін Нині схвалений мекування з використанням інгібітору тирозинкінази і тод лікування раку передміхурової залози включає лікування, спрямованого на пригнічення гормонахірургічну стерилізацію, хімічну стерилізацію або льної активності, дає синергічний ефект поєднання хірургічної і хімічної стерилізації Видалення яєчок, які є основним органом, що продукує На основі цих відкриттів, було розроблено метестостерон, знижує менше ніж до 5% від норми тод лікування раку передміхурової залози у ссаврівень циркулюючих андрогенів Таке зниження ців, наприклад, у людини, що складає суть даного рівня андрогенів інгібує зростання пухлини передвинаходу Метод включає введення терапевтично міхурової залози Незважаючи нате, що хірургічна ефективної КІЛЬКОСТІ інгібітору тирозинкінази ссавстерилізація діє безпосередньо на пухлину и процю при спільному введенні ссавцю засобу для хітипухлинний ефект може бути тимчасовим При мічної стерилізації При цьому інгібітор тирозинкіцьому хірургічна стерилізація часто веде до клонази і засіб для хімічної стерилізації можуть діяти нованої селекції андроген-незалежних пухлинних синергічно щодо інгібування зростання пухлини клітин передміхурової залози Це призводить до Більш прийнятні інгібітори тирозинкінази включапоновлення зростання пухлини передміхурової ють індолокарбазоли Більш прийнятні індолокарзалози, яка проліферує без стимуляції тестостебазоли включають такі сполуки роном або ДГТ (Isaacs et al (1981) Cancer Res 41 5070-5075, Crawford et al (1989) N Engi Med 321 419-424) Хімічну стерилізацію (яка називається також медичною стерилізацією) часто використовують як заміну хірургічної стерилізації на початковому етапі лікування Хімічна стерилізація може проводитись при введенні естрогенів, наприклад, діетилстилбестролу (ДЕС), аналогів ЛГ-РФ, наприклад, ацетату леупроліду (Лупрон®, LUPRON®) або ацетату гозереліну (Золадекс®, ZOLADEX®), стероїдних антиандрогенів, наприклад, ацетату ципротерону (ЦПА, СРА), нестероідних антиандрогенів, наприклад, флутаміду, нілутаміду або Казодекса® (CAZODEX®) або при певному поєднанні зазначених засобів Зв'язані з рецептором тирозинкінази являють собою трас-мембранні білки, що містять домен зв'язування з позаклітинним лігандом, трансмембранну ПОСЛІДОВНІСТЬ, і домен для цитоплазматичної тирозинкінази Функція тирозинкіназ полягає в трансдукції клітинного сигналу Проліферація клітин, їх диференціація, міграція, метаболізм і запрограмована смерть є прикладами клітинних реакцій, опосередкованих тирозинкіназою Тирозинкінази беруть участь в трансформації епітеліальних клітин передміхурової залози і в прогресуванні пухлини Тирозинкінази, що беруть участь в цих процесах, включають рецептори фактора росту фібробластів (ФРФ, FGF), рецептори епідермального фактора росту (ЕФР, EGF) і рецептори фактора росту, одержаного з тромбоцитів (ФРОТ, PDGF) Беруть участь також рецептори фактора росту нервової тканини (ФРНТ, NGF), рецептори нейротропного фактора, одержаного з мозку (НФОМ, BDINF), а також рецептори нейротропшу-3 (НТ-3, NT-3) і рецептори нейротропшу-4 61970 HI C NH: НС! Сполука II-4-LAE Сполука II-4-LAE являє собою складний ефір лізил-р-аланшу сполуки ІІ-4 або фармакологічно прийнятну сіль цього ефіру, наприклад, дипдрохлоридну сіль Сполуку 11-12 описано в патенті США №4 923 98 6 ("Сполука 20") Сполуку ІІ-4 описано в патенті США №5 4 61 14 6 Сполуку II-4-LAE описано в патенті США №5 650 407 (Приклад 14) Інгібітор тирозинкінази також може являти собою конденсований піролокарбазол Інгібітор тирозинкінази може вводитись у будь-який прийнятний спосіб, наприклад, перорально або парентерально Засоби хімічної стерилізації, які застосовуються в цьому винаході, включають естрогени, агоністи ЛГ-РФ, наприклад, ацетат леупроліду (Лупрон®, LUPRON®) та ацетат гозереліну (Золадекс®, ZOLADEX®), антагоністи ЛГ-РФ, наприклад, Антид® (ANTIDE®) (Ares-Serono) і Ганірелікс® (GANIRELIX®) (Akzo Nobel) і антиандрогени, наприклад, флутамід і нілутамід Інгібітор тирозинкінази і засіб для хімічної стерилізації можуть вводитися у вигляді окремих композицій Альтернативно, їх можна об'єднати і вводити у вигляді однієї композиції Даний винахід також стосується композиції, що містить інгібітор тирозинкінази та засіб для хімічної стерилізації Більш прийнятний інгібітор тирозинкінази в композиції являє собою trkA інгібітор, trkB інгібітор і trkC інгібітор Більш прийнятно, інгібітор тирозинкінази в композиції являє собою індолокарбазол Більш прийнятні індолокарбазоли являють собою HCt Сполука II-4-LAE. Альтернативно інгібітор тирозинкінази в композиції може являти собою конденсований піролокарбазол Композиція може бути приготована для перорального введення або парентерального введення Засіб для хімічної стерилізації може являти собою естроген, аналог ЛГ-РФ чи антиандроген, або комбінацію двох чи більше таких сполук Більш прийнятним для включення до цієї композиції аналогом ЛГ-РФ є ацетат леупроліду Більш прийнятним для включення до цієї композиції антиандрогеном є флутамід Засіб для хімічної стерилізації, що включається в композицію ВІДПОВІДНО до давного винаходу, може являти собою поєднання аналогу ЛГ-РФ і антиандрогену, наприклад, ацетат леупроліду і флутаміду В контексті даного опису термін "засіб для хімічної стерилізації" означає сполуку, яка 1) інгібує продукцію сироваткових андрогенів, 2) блокує зв'язування сироваткових андрогенів з рецепторами андрогену або 3) інгібує перетворення тестостерону на ДГТ, а також поєднання двох чи більше таких сполук Якщо особливо не визначене інше, всі технічні і наукові терміни, що використовуються в даному описі, мають узвичаєні значення в тій галузі техніки, до якої належить даний винахід Тоді як випадки можливих неоднозначних тлумачень в цьому описі особливо визначаються Всі публікації, патентні заявки та ІНШІ матеріали, що цитувалися, включено до цього винаходу в якості посилань Незважаючи на те, що всі методи і матеріали, подібні чи еквівалентні до наведених у цьому описі, можуть використовуватися для здійснення або перевірки даного винаходу, нижче будуть наведені більш прийнятні методи і матеріали При цьому 61970 10 сіб його введення При цьому підбір оптимальної матеріали, методи і приклади наведені лише з дози тирозинкінази може виконати будь-який фаметою ілюстрації та ніяким чином не обмежують хівець із середнім рівнем знань в даній галузі даний винахід Інші особливості та переваги даноВ техніці ВІДОМІ різні інгібітори тирозинкінази, го винаходу викладені в докладному описі і в фоприйнятні для використання в рамках даного вирмулі винаходу находу Більш прийнятно, використовуваний в На фіг 1 показаний графік залежності відносцьому винаході інгібітор тирозинкінази являє соного об'єму пухлини (кратні зміни) від часу (дні) на бою trk А інгібітор, trk В інгібітор або trk C інгібітор модельній системі пухлини передміхурової залози Інформацію про прийнятні інгібітори тирозинкінази щура in vivo Колами позначено контроль у вигляді індолокарбазолового типу можна одержати з таконосія, трикутники, що обернені вверх, означають го ряду документальних джерел (Dionne et al , паконтроль, який складається з монотерапм сполутент США №5 516 771, Dionne et al , патент США кою ІІ-4, квадрати означають контроль на стерилі№5 654 427, Lewis et al , патент США №5 461 146 і зацію, перевернуті трикутники означають комбіноMallamo et al , патент США №5 650 407) ване лікування сполукою ll-4/стерилізацією Дозування сполуки ІІ-4 становить 10мг/кг при підВ ряді варіантів реалізації даного винаходу шкірній ін'єкції Введення сполуки ІІ-4 вказане прясполуку II-4-LAE одержують і вводять хворій люмокутниками зі знаками плюс на осі X дині за допомогою такої процедури Сполуку ІІ-4LAE (дипдрохлорид) і осмотично прийнятну КІЛЬФіг 2 являє собою графік залежності відносноКІСТЬ маніту розчиняють в дистильованій воді і дого об'єму пухлини (кратні зміни пухлини Dunning H) водять значення рН розчину приблизно до 3,5 від часу (дні) у стерилізованих щурів Кола ознаЗазначений розчин люфілізують з одержанням чають контроль у вигляді носія, квадрати означапорошку Для зручності зберігання і використання ють сполуку ІІ-4 Час введення сполуки ІІ-4 вказуготують аліквоти люфілізованого порошку, що місється прямокутниками на осі X тять 27,5мг сполуки II-4-LAE і 55мг маніту На час Фіг 3 являє собою графік залежності відносновикористання аліквоту люфілізованого порошку го об'єму пухлини (кратні зміни) від часу (дні) у знову розчиняють в стерильній воді для ін'єкції щурів, яким попередньо вводили сполуку ІІ-4 Кола (фармакопея США) з одержанням 1,1 мл розчину, означають сполуку ІІ-4, квадрати означають лікущо містить 50мг/мл маніту і 25мг/мл сполуки ІІ-4вання з використанням сполуки ІІ-4/стерилізацм LAE (дипдрохлориду) Цей відтворений розчин Час введення сполуки ІІ-4 вказаний прямокутникапотім розбавляють певним об'ємом 5% розчину ми на осі X декстрози для ІН'ЄКЦІЙ (фармакопея США) для Фіг 4 являє собою графік залежності відносновведення бажаної дози сполуки II-4-LAE внутрішго об'єму пухлини (кратні зміни) від часу (дні) на ньовенною інфузією протягом приблизно однієї модельній системі in vivo пухлини передміхурової години Застосування в зазначеній процедурі спозалози щурів Кола означають контроль у вигляді носія, обернені вверх трикутники означають контI-4-LAE можна починати луки дози роль на монотерапію сполукою 11-12, квадрати 1 мг/метр /день і поступово збільшувати, напри2 2 означають контроль на хімічну стерилізацію із заклад, до 64мг/метр /день або 501мг/метр /день, стосуванням ацетату леупроліду (LUPRON®), пезалежно від даних моніторингу, що оцінюють стан ревернуті трикутники означають комбіноване лікупацієнта вання з використанням сполуки ІІ-4 ацетату ВІДОМІ різні засоби для хімічної стерилізації леупроліду Сполука ІІ-4 вводиться в дозі 10мг/кг, Застосовувані в рамках даного винаходу засоби ДВІЧІ на день, перорально Введення сполуки 11-12 для хімічної стерилізації інколи класифікують на вказане прямокутниками на осі X такі групи естрогени, агоністи рилізинг-фактора лютеїнізуючого гормону (ЛГ-РФ), антагоністи ЛГСпільне введення інгібітору тирозинкінази і заРФ і антиандрогени Антиандрогени можуть далі собу для хімічної стерилізації може здійснюватися поділятися на стероїдні і нестероідні в режимі одночасного введення окремих форм, наприклад, композиції з інгібітором тирозинкінази і Естрогени, наприклад, дієти лети л бестрол композиції, що містить засіб для хімічної стерилі(ДЕС), підвищують рівень глобуліну, зв'язаного з зації Введення роздільних форм препарату співстатевим гормоном, і рівень пролактину в плазмі падає у часі, якщо фармакологічна активність інгіЦе, в свою чергу, знижує секрецію ЛГ і синтез тесбітору тирозинкінази і засобу для хімічної тостерону в яєчках по типу негативного зворотного стерилізації виявляються одночасно у ссавців при зв'язку Дозування ДЕС часто становить від лікуванні зазначеними препаратами 1мг/день до 5мг/день Більш прийнятно, уникають більш високих доз ДЕС в зв'язку з можливим ризиВ деяких варіантах реалізації даного винаходу ком розвитку серцево-судинних ускладнень спільне введення інгібітору тирозинкінази і засобу для хімічної стерилізації здійснюють з використанІншим більш прийнятним агоністом ЛГ-РФ, що ням єдиної композиції, що їх містить застосовуються в цьому винаході, є ацетат леупроліду, комерційно доступний як Люпрон® Більш прийнятно, дозування інгібітору тирози(LUPRON®-(Takeda Abbott Pharmaceuticals, Inc)) нкінази складає від 1мкг/кг до 1 г/кг ваги тіла на Хімічне найменування ацетату леупроліду таке день Ще більш прийнятно, дозування інгібітору ацетат 5-OKCo-L-nponin-L-ricTHflHn-L-TpHmx^in-Lтирозинкінази становить від 0,01мг/кг до 100мг/кг серил^-тирозил-О-лейцил^-лейцил^-арпніл-ІЧваги тіла на день Оптимальне дозування інгібітоетил^-пролінаміду (сіль) Ацетат леупроліду як ру тирозинкінази варіює залежно від ряду фактоагоніст ЛГ-РФ є сильним інгібітором секреції гонарів, таких як тип і ступінь прогресування раку педотропшу у випадку його безперервного введення редміхурової залози, загальний стан здоров'я в терапевтичних дозах Цей ефект є оборотним, пацієнта, активність інгібітору тирозинкінази і спо 11 61970 12 що досягається при припиненні введення ацетату справляє свою антиандрогенну дію за рахунок леупроліду інгібування поглинання андрогену, шляхом інгібуВважається, що ацетат леупроліду, наприклад вання в цільових тканинах ядерного зв'язування Люпрон депо® (LUPRON DEPOT®) діє за механізандрогену або при використанні обох механізмів мом негативного зворотного зв'язку У людей одФлутамід в типовому випадку вводять перорально, ночасне введення однократних денних доз ацетанаприклад, у вигляді капсули Одним з прикладів ту леупроліду викликає початкове підвищення дозування флутаміду є дозування 250мг, що прирівня лютеїнізуючого гормону (ЛГ) в сироватці У ймається три рази на день, тобто у КІЛЬКОСТІ 750МГ ЧОЛОВІКІВ протягом двох-чотирьох тижнів після пона день чатку введення ацетату леупроліду вміст тестосІншим нестероідним антиандрогеном є нілутерону в сироватці падає до рівня стерилізації тамід, хімічне найменування якого 5,5-диметил-З[4-нітро-3-(трифторметил-4'-нітрофеніл)-4,4При використанні в рамках даного винаходу диметилімідазолідиндюн Нілутамід в рамках даацетат леупроліду вводять підшкірно, внутрішньоного винаходу може використовуватися, наприм'язово або внутрішньовенно Ацетат леупроліду клад, в дозуванні ЗООмг на день, з подальшим може вводитися, наприклад, шляхом підшкірної зниженням дози до 150мг/день ін'єкції 1мг на день В деяких варіантах реалізації даного винаходу ацетат леупроліду вводять у виВ деяких варіантах реалізації даного винаходу гляді депо-форми Депо-форма забезпечує постійзасіб для хімічної стерилізації являє собою поєдне вивільнення лікарського засобу протягом тринання агоністу ЛГ-РФ, такого як ацетат леупроліду валого періоду часу, наприклад, від 1 до 4 МІСЯЦІВ і антиандрогену, такого як флутамід або нілутамід Приклад депо-форми включає суспензію мікроАцетат леупроліду, наприклад, може вводитися сфер ацетат леупроліду, очищений желатин, співпідшкірною, внутрішньом'язовою або внутрішньополімер DL-молочноі і гліколевої кислот і D-маніт венною ІН'ЄКЦІЄЮ, при цьому одночасно може пеМікросфери можуть бути суспендовані в носи, що рорально вводитися флутамід Інгібітор тирозинкімістить натрій-карбоксиметилцелюлозу, D-маніт і нази може вводитися окремо у вигляді третьої воду Такі депо-форми комерційно доступні у виформи, або його може бути об'єднано з агоністом гляді Люпрону® депо (LUPRON DEPOT® (Takeda ЛГ-РФ або з антиандрогеном в складі однієї комAbbott Pharmaceuticals)), що придатний для внутпозиції рішньом'язової ін'єкції Іншим нестероідним антиандрогеном, що застосовуються в цьому винаході, є Казодекс® Іншим агоністом ЛГ-РФ, що застосовуються в (CASODEX®) Одним з прикладів дозування Казорамках даного винаходу, є ацетат гозереліну, кодекса® є доза від 5мг до 500мг на день, більш мерційно доступний у вигляді Золадекса® прийнятно, приблизно 50мг на день (ZOLADEX® (Zeneca)) Ацетат гозереліну має таку хімічну формулу ацетат mpo-Glu-His-Trp-Ser-TyrПриклад комбінованої форми ВІДПОВІДНО ДО D-Ser (BuVLeu-Arg-Pro-Azgly-Nri2 Золадекс® поцього винаходу включає 1-20мг сполуки 11-12 і 100ставляється у вигляді композиції, придатної для ЮООмг флутаміду в складі капсули, придатної для підшкірної ін'єкції З ПОСТІЙНИМ вивільненням протяперорального введення хворій людині один, два гом 28-денного періоду чи три рази на день В більш прийнятному варіанті реалізації винаходу композиція включає носій, що Прикладом антагоніста ЛГ-РФ, що застосовумістить полісорбат 80 і поліетиленгліколь у співється в даному винаході, є Антид® (ANTIDE® відношенні 1 1 (об'єм/об'єм) для підсилення біоло(Ares-Serono)), хімічне найменування якого таке гічної доступності сполуки 11-12 В деяких варіантах D-аланшамід І\І-ацетил-3-(2-нафталеніл)-О-аланілреалізації винаходу пероральне введення зазна4-хлор-О-фенілаланіл-3-(3-піридиніл)-О-аланіл-І_ченої композиції сполуки ll-12/флутаміду супровосерил-І\І6-(3-піридинілкарбоніл)-І_-лізил-І\І6-(3джується внутрішньом'язовою ІН'ЄКЦІЄЮ ацетату піридинілкарбоніл)-О-лізил-І_-лейцил-ІЧ6-(1леупроліду у формі депо, наприклад, Люпрона метилетил)-І_-лізил-І_-проліл Іншим прикладом депо® (LUPRON DEPOT®) Інший інгібітор тирозивикористовуваного антагоніста ЛГ-РФ є Ганіренкінази, такий як сполука ІІ-4 або сполука II-4-LAE, лікс® (GANIRELIX® (Roche/Akzo Nobel)), хімічна може замінювати сполуку 11-12 в зазначеній компоназва якого N-Ac-D-Nal, D-pCI-Phe, D-Pal, Dзиції Іншим прикладом комбінованої композиції hArg(Et)2, hArg(Et)2, D-Ala ВІДПОВІДНО до цього винаходу є композиція, що Прикладами стероїдних антиандрогенів є ацемістить сполуку 11-12, сполуку ІІ-4 і сполуку ІІ-4тат ципротерону (ЦПА, СРА), і ацетат мегестролу, LAE, а також ХІМІЧНИЙ засіб для стерилізації, об'комерційно доступний як Мегас® (MEG АСЕ® єднані у вигляді одного розчину, придатного для (Bristol-Myers Oncology)) Стероїдні антиандрогени внутрішньовенної інфузм можуть блокувати рецептори андрогенів в передміхуровій залозі Вони можуть також інгібувати Інгібітори тирозинкінази і засоби для хімічної вивільнення ЛГ ЦПА, більш прийнятно, вводять стерилізації можуть бути включені в фармацевтихворій людині в дозуваннях від ЮОмг/день до чні композиції, у вигляді індивідуальних форм або 250мг/день в поєднанні, шляхом змішування з фармацевтично прийнятними нетоксичними наповнювачами і носіНестероідні антиандрогени блокують рецепями Можуть бути одержані композиції для викоритори андрогену Вони також можуть викликати підстання в режимі парентерального введення, зоквищення в сироватці рівня ЛГ і тестостерону рема, у вигляді рідких розчинів або суспензій, для Більш прийнятним нестероідним антиандрогеном перорального введення, зокрема, у вигляді рідини, є флутамід (2-MeTnn-N- [4-нітро-3-(трифторметил) таблеток або капсул або для інтраназального ввефеніл] пропанамід), комерційно доступний як Еудення, зокрема, у вигляді порошків, назальних лексин® (EULEXIN® (Sobering Corp)) Флутамід 14 13 61970 капель або аерозолів вана форма може також включати забуфювальні засоби Тверді композиції аналогічного типу моКомпозиція може вводитися у вигляді стандажуть також використовуватися в якості наповнюртної дозованої форми, при цьому вона може бути вачів для м'яких і твердих желатинових капсул, одержана з використанням будь-яких відомих в при цьому в них використовуються такі наповнютехніці методів Такі методи описані в літературі вачі, як лактоза або молочний цукор, а також висо(наприклад, Remington's Pharmaceutical Sciences комолекулярні полі-етиленгліколі тощо (Mack Pub Co , Easton, Pa , 1980)) РІДКІ дозовані форми, придатні для пероральВ ході виготовлення тверді дозовані форми у ного введення, включають фармацевтично прийнвигляді таблеток, драже, капсул, пілюль і гранул ятні емульсії, мікроемульсм, розчини, суспензії, можуть бути покриті оболонкою, при цьому посиропи і еліксири РІДКІ дозовані форми, окрім аккриття, такі як ентеросолюбільні оболонки та ІНШІ тивної сполуки, можуть містити інертні наповнювавиди покриття ВІДОМІ в фармацевтичній техніці чі, що звичайно використовуються в фармацевтиВони також можуть необов'язково містити зачній техніці, наприклад, воду або ІНШІ розчинники, соби, що надають формі непрозорості, а також солюбілізувальні агенти і емульгатори, такі як етиможуть бути композицією, що вивільнює активловий спирт, ізопропіловий спирт, етилкарбонат, ний(і) шгредієнт(и) тільки або, більш прийнятно, в етилацетат, бензиловий спирт, бензилбензоат, певній частині шлунково-кишкового тракту, в тому пропіленгліколь, 1,3-бутиленгліколь, диметилфорчислі, необов'язково, в режимі затримки Приклади мамід, олії (зокрема, бавовняну, арахісову, кукурукомпозицій з зануреним всередину неї активним дзяну, олію з зародків пшениці, оливкову, кастороінгредієнтом, які можуть використовуватися в рамву і кунжутну олії), гліцерин, ках даного винаходу, включають полімерні речотетрапдрофурфуриловий спирт, поліетиленгліколі, вини івоски складні ефіри жирних кислот і сорбітану, а також їх Тверді композиції аналогічного типу можуть суміші Окрім інертних розріджувачів, пероральні також використовуватися в якості наповнювачів в композиції можуть також включати ад'юванти, такі твердих і м'яких желатинових капсулах з викорисяк змочувальні засоби, емульгатори і засоби, що танням для цього таких наповнювачів, як лактоза, сприяють суспендуванню, підсолоджувачі, смакові або молочний цукор, а також високомолекулярних добавки і віддушки поліетиленгліколівта ш Ін'єковані депо-форми одержують при мікроінЯк зазначалось вище, активні сполуки можуть капсулюванні матриць лікарського засобу в бюдетакож бути мікрошкапсульовані з введенням в таку градовані полімери, такі як полілактид-полігліколід форму одного чи більше наповнювачів В твердих Використовуючи різні співвідношення лікарського дозованих формах активна сполука може бути засобу і полімеру, а також змінюючи природу визмішана, принаймні, з одним інертним розріджувакористовуваного полімеру, можна контролювати чем, таким як сахароза, лактоза або крохмаль швидкість вивільнення лікарського засобу ПриЗазначені дозовані форми можуть також включати, клади інших біодеградованих полімерів включають як це відбувається у звичайній практиці, ДОПОМІЖНІ полі(ортоефіри) і полі(анпдриди) Ін'єковані депоречовини, ВІДМІННІ від інертних розріджувачів, наформи також одержують при введенні лікарського приклад, замаслювачі для приготування таблеток засобу в ліпосоми або мікроемульсм, що повинні та ІНШІ ДОПОМІЖНІ речовини, такі як стеарат магнію бути сумісними з тканинами організму і мікрокристалічна целюлоза У випадку капсул, таблеток і пілюль дозовані форми можуть також Тверді дозовані форми, придатні для пероравключати забуферювальні засоби Вони можуть, льного введення, включають капсули, таблетки, необов'язково, містити засоби для надання препаПІЛЮЛІ, порошки і гранули В таких твердих дозорату непрозорості, а також можуть бути композиціваних формах активна сполука змішана принаймні єю, що вивільнює активний(і) шгредієнт(и) тільки з одним інертним фармацевтично прийнятним або, більш прийнятно, в певній частині шлунковонаповнювачем або носієм, таким як цитрат натрію кишкового тракту, в тому числі, необов'язково, в або двокальцієвий фосфат і/або а) з наповнюварежимі затримки Приклади композицій з зануречами або розріджувачами, такими як крохмалі, ним в них активним інгредієнтом, які можуть виколактоза, сахароза, глюкоза, маніт і кремнева кисристовуватися в цьому винаході, включають полілота, б) із зв'язувальними речовинами, такими як, мерні речовини і воски Нижче даний винахід наприклад, карбоксиметил целюлоза, альгінати, ілюструється наведеними прикладами Зазначені желатин, полівінілпіролідон, сахароза і аравійська приклади подані тільки з метою ілюстрації опису і камедь, в) із зволожувачами, такими як гліцерин, г) ніяким чином не обмежують рамки або зміст виназ речовинами, що сприяють дезинтеграцм, такими ходу як агар-агар, карбонат кальцію, крохмаль з картоплі або тапюки, альпнова кислота, деякі силікати і Приклади карбонат натрію, д) з розчинами засобів, які заПриклад 1 тримують вивільнення, таких як парафін, є) із приСполука ІІ-4, об'єднана з ХІМІЧНОЮ стерилізаціскорювачами поглинання, такими як четвертинні єю амонієві сполуки, ж) зволожуючими засобами, таДані, одержані в експериментах на тваринах, кими як, наприклад, цетиловий спирт і гліцеринмоякі включають введення тирозинкінази в поєднанні ностеарат, з) з абсорбентами, такими як каолін і з хірургічною стерилізацією, розглядаються як ребентонітова глина та и) з замаслювачами, такими левантні для випадку введення тирозинкінази з як тальк, стеарат кальцію, стеарат магнію, тверді поєднанні з ХІМІЧНОЮ стерилізацією поліетиленгліколи, лаурилсульфат натрію та їх В наведених експериментах використовують суміші У випадку капсул, таблеток і пілюль дозопухлину Dunning R-3327 Н (одержану з спонтанної 15 61970 16 пухлини передміхурової залози у старих щурів Copenhagen) в зв'язку з и чутливістю до андрогенів з низькою швидкістю росту (Isaacs, 1989, Cancer Res 49 6290-6294) Передумовою експерименту є той факт, що хірургічна стерилізація щурів з пухлинами Dunning H веде до практично миттєвого припинення зростання пухлини з подальшою регресією приблизно через 5-6 тижнів після стерилізації андроген-нечутливої пухлини (Isaacs et al , (1981) Cancer Res 41 5070-5075) кладуть на спину, роблять невеликий надріз (0,51см) по шкірі на задньому кінчику мошонки Інший розріз роблять так, щоб розрізати з'єднувальну оболонку, що оточує яєчка ЕПІДИДИМІС, сіменники, сім'явиносний проток і СІМ'ЯНІ кровоносні судини, а також жир вищипують і ВІДДІЛЯЮТЬ Повертають назад всі тканини, що залишилися, і розріз закривають автозатискачами Автозатискачі вилучають через 5-7 днів після проведення хірургічної процедури Регресія пухлини Dunning H, індукована сполукою ІІ-4, пов'язана з ефектом не на андрогенному рівні, оскільки експерименти виконувалися на щурах з імплантованими силастиновими капсулами, які вивільнюють тестостерон Капсули імплантували таким чином, щоб підтримувати КІЛЬКІСТЬ циркулюючого в крові тестостерону на фізіологічному Тридцять шість щурів з пухлиною Dunning H (розміром 0,9-18см 3 ) поділяють на чотири групи по дев'ять тварин в кожній Група 1 служить в якості контролю, приймаючого носій Тварин в групі 2 стерилізують в 1 день Тваринам в групі 3 роблять ін'єкції сполуки ІІ-4 (10мг/кг, пш), як описано нижче Тварин в групі стерилізують в 1 день і потім ін'єкують їм сполуку ІІ-4, як описано нижче Тваринам в групах 1 і 3 в 1 день імплантують підшкірно (на боку) закриту силастинову трубку завдовжки 2см, заповнену тестостероном Силастинового імплантату зазначеного розміру достатньо для підтримання вмісту тестостерону в сироватці в фізіологічному діапазоні 1-Змг/мл хронічні протягом шести МІСЯЦІВ Сполуку ІІ-4 періодично вводять підшкірно (10мг/кг/день) тваринам в групах 3 і 4 з тривалістю циклу дозування 5 днів і приблизно з 10-денними періодами між циклами Лікарський засіб вводять у дні 1-5, 14-18, 29-33 і 42-46 Фармацевтичний носій вводять тваринам в групах 1-2 за тією ж схемою, що і сполуку ІІ-4 в експериментальних групах р і в н і В и м і т о с т е р о н т о с т е р о н у р у ю в с т а а с в и н н н о в я о р в и в а т т ь К ц І Н і Ц п £ 1 е І і д 2 к н г с в т е / п р м е д р и и л м и е , н щ т у о р в і м в н і с я т т т е е с с л Наведений нижче експеримент має три ЦІЛІ 1) визначити, чи має поєднання сполуки ІІ-4 з хірургічною стерилізацією більшу протипухлинну ефективність, ніж одна лише сполука ІІ-4 або одна тільки хірургічна стерилізація, 2) визначити чи може сполука ІІ-4 викликати регресію пухлин Dunning H, нечутливих до гормону, що виникли шляхом відбору при попередній стерилізації тварин, 3) визначити, чи будуть пухлини, оброблені сполукою ІІ-4 протягом кількох циклів дозування, все ще чутливими до хірургічної стерилізації Сполуку ІІ-4 було синтезовано в Cephalon, Inc і приготовано (10мг/мл) в носи, що містить 40% поліетиленгліколю (ПЕГ 1000, Spectrum, Los Angeles, CA), 10% полівшілпіролідону (С30, ISP Boundbrook, NJ), 2% бензилового спирту (Spectrum, Los Angeles, CA) у воді (48%) Дорослих інбредних щурів Copenhagen (200240г) одержують від Harlan Sprague Dawley (Indianapolis, IN), тримають їх в клітках по три щура і дають їм комерційну дієту (Purina Formulae 5001) та воду ad libitum Тварин тримають в контрольованих умовах вологості і температури, з 12годинними циклами освітленнял'емряви Щурів витримують на карантині протягом одного тижня перед проведенням експерименту Пухлини раку передміхурової залози Dunning R-3327H трансплантують щурам з використанням троакару Дорослих самців щурів Copenhagen, які мають пухлину Dunning H, умертвляють і виділяють пухлину Зазначену пухлину вирізають і невеликі шматочки інокулюють підшкірно дорослим самцям щурів Copenhagen Експерименти проводять згідно з посібником, наявним в відділенні для тварин Університету Джона Хопкшса (Johns Hopkins University Animal Care), і з використанням протоколу Комітету No RA91M517, а також в рамках посібника відділу по роботі з тваринами інституту Цефалон (Cephalon Institutional Animal Care) і протоколу Комітету No 03-008 Для проведення хірургічної стерилізації щурів з встановленими пухлинами Dunning H анестезують внутрішньом'язовою ІН'ЄКЦІЄЮ Кетамшу™ (KETAMINE™) (4,1мг/100г ваги тіла) і Ксилазину™ (Xylazme™) (0,85мг/100г ваги тіла) Кожного щура На 60 день ВІСІМ щурів з другої групи розподіляють на дві групи по чотири щура в кожній Одній групі тварин вводять сполуку ІІ-4 в дозі 10мг/кг (підшкірно) протягом 5 днів з подальшою ВІДМІНОЮ лікарського засобу протягом 9 днів, і потім проводять другий п'ятиденний режим введення препарату в дозі 10мг/кг/день (підшкірно) Другій групі тварин вводять носій за тією ж схемою дозування На 60 день сім щурів з 3 групи тварин, що брали участь в попередніх експериментах, розподіляють на дві групи В одній групі (N=3) проводять стерилізацію щурів Обом групам тварин вводять сполуку ІІ-4 в дозі 10мг/кг (підшкірно) протягом 5 днів з подальшою ВІДМІНОЮ лікарського засобу протягом 9 днів, і потім проводять другий п'ятиденний режим введення дозування, як описано раніше Розмір пухлини вимірюють у анастезованих тварин (з використанням інгаляції ізофлуораном протягом приблизно 1-2 хвилин) в зазначені інтервали з використанням циркуля Об'єм пухлини обчислюють з використанням формули V (см 3 )=0,5236 х довжина (см) х ширина (см) [(довжина (см) + ширина (см))/2] Для статистичного аналізу одержаних даних з використанням програми Сигмастат (Sigmastat) використовують тест Даннета (Dunnett's test), ранжований тест Ман-Уітні (Mann-Whitney Rank Sum Test), спарений т-тест (Paired t Test) або симптоматичний ранжований тест (Signed Rank) значущості Зростання пухлини Dunning H у інтактних щурів, які приймали носій, був ЛІНІЙНИМ, при цьому спостерігалося приблизно 3,5-кратне збільшення об'єму пухлини протягом 60 днів спостерігання 18 17 61970 (фіг 1) Хірургічна стерилізація викликає швидку аблацм андрогену через хірургічну стерилізацію регресію пухлини, наприклад, на 25% до 5 дня Сім щурів з групи, що приймала сполуку ІІ-4 в поПовторне зростання пухлини у стерилізованих передньому експерименті, були поділені на 60 щурів спостерігається до 12 дня, і 38 дня досягадень на дві групи Тварин в одній групі (N=3) стеється повне відновлення попереднього об'єму рерилізують, як описано вище Обом групам тварин, гресуючої пухлини вводять сполуку ІІ-4 в дозі 10мг/кг, пш протягом 5 днів з подальшою ВІДМІНОЮ введення препарату Сполука ІІ-4 при введенні и самої (10мг/кг, пш, протягом 9 днів і потім проводять другий п'ятиден4 незалежні цикли лікування сполукою ІІ-4 5 днів ний цикл дозування, як описано раніше Хірургічна введення препарату з подальшою ВІДМІНОЮ престерилізація викликає статистично незначущу репарату протягом приблизно 10 днів) викликає погресію пухлин, які піддавалися обробці сполукою вне інгібування зростання пухлини або індукує ІІ-4 протягом 4-х попередніх циклів і двох одночасрегресію пухлини Середній об'єм пухлини у тваних циклів (фігЗ) В цілому, одержані дані вказурин, які одержували препарат, був значно меншим ють на те, що повторний вплив сполуки ІІ-4 не (р