Аплідин для комбінованої терапії лейкозу та лімфоми
Номер патенту: 83022
Опубліковано: 10.06.2008
Автори: Барнеджі Дебабрата, Бертіно Джозеф Р., Хімено Хосе, Ферклот Глінн Томас, Гурей Сайдам
Формула / Реферат
1. Застосування аплідину або аналога аплідину для одержання лікарського засобу для лікування лейкемії або лімфоми за допомогою комбінованої терапії з використанням аплідину або аналога апліднину та іншого лікарського засобу, вибраного із групи, що складається з метотрексату, цитозину арабінозиду, мітоксантрону, вінбластину, метилпреднізолону і доксорубіцину.
2. Застосування аплідину або аналога аплідину за п. 1 для отримання лікарського засобу для лікування лейкемії.
3. Застосування аплідину або аналога аплідину за будь-яким з пп. 1 або 2, де вказана лейкемія є хронічною лімфоцитарною лейкемією.
4. Застосування аплідину або аналога аплідину за п. 1 для отримання лікарського засобу для лікування лімфоми.
5. Застосування аплідину або аналога аплідину за будь-яким з пп. 1-4, де аплідин або аналог аплідину і інший лікарський засіб є частиною єдиного лікарського засобу.
6. Застосування аплідину або аналога аплідину за будь-яким з пп. 1-4, де аплідин або аналог аплідину і інший лікарський засіб вводять у вигляді окремих лікарських засобів одночасно або у різний час.
7. Застосування аплідину або аналога аплідину за будь-яким з пп. 1-6, яке включає введення пацієнту за необхідності лікування терапевтично ефективної кількості аплідину або аналога аплідину та терапевтичної кількості іншого лікарського препарату, вибраного з групи, яка складається з метотрексату, цитозину арабінозиду, мітоксантрону, вінбластину, метилпреднізолону і доксорубіцину, де введення здійснюють до, під час або після введення аплідину або аналога аплідину.
8. Застосування аплідину або аналога аплідину для отримання лікарського засобу для підвищення терапевтичної ефективності лікарського засобу при лікуванні лейкемії або лімфоми за допомогою комбінованої терапії, де вказаний інший засіб вибраний з групи, яка складається з метотрексату, цитозину арабінозиду, мітоксантрону, вінбластину, метилпреднізолону та доксорубіцину.
9. Застосування аплідину або аналога аплідину за п. 8 для отримання лікарського засобу для підвищення терапевтичної ефективності лікарського засобу при лікуванні лейкемії.
10. Застосування аплідину або аналога аплідину за п. 9, де вказаною лейкемією є хронічна лімфоцитарна лейкемія.
11. Застосування аплідину або аналога аплідину за п. 8 для отримання лікарського засобу для підвищення терапевтичної ефективності лікарського засобу при лікуванні лімфоми.
12. Застосування аплідину або аналога аплідину для отримання лікарського засобу за будь-яким з пунктів, де аплідином або аналогом аплідину є аплідин.
13. Застосування аплідину або аналога аплідину для отримання лікарського засобу за будь-яким з пп. 1-12, де іншим лікарським засобом є метотрексат.
14. Застосування аплідину або аналога аплідину для отримання лікарського засобу за будь-яким з пп. 1-12, де іншим лікарським засобом є цитозин арабінозид.
15. Застосування аплідину або аналога аплідину для отримання лікарського засобу за будь-яким з пп. 1-12, де іншим лікарським засобом є мітоксантрон.
16. Застосування аплідину або аналога аплідину для отримання лікарського засобу за будь-яким з пп. 1-12, де іншим лікарським засобом є вінбластин.
17. Застосування аплідину або аналога аплідину для отримання лікарського засобу за будь-яким з пп. 1-12, де іншим лікарським засобом є метилпреднізолон.
18. Застосування аплідину або аналога аплідину для отримання лікарського засобу за будь-яким з пп. 1-12, де іншим лікарським засобом є доксорубіцин.
19. Спосіб лікування лейкемії або лімфоми, що включає в себе введення пацієнтові, який потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості аплідину або аналога аплідину і терапевтично ефективної кількості іншого лікарського засобу, ефективного для лікування раку, що вводиться до, під час або після введення аплідину або аналога аплідину, де інший лікарський засіб вибраний із групи, що складається з метотрексату, цитозину арабінозиду, мітоксантрону, вінбластину, метилпреднізолону і доксорубіцину.
20. Спосіб за п. 19, де вказаним раком є лейкемія.
21. Спосіб за будь-яким з пп. 19-20, де вказана лейкемія є хронічною лімфоцитарною лейкемією.
22. Спосіб за п. 19, де вказаним раком є лімфома.
23. Спосіб за будь-яким з пп. 19-22, де аплідин або аналог аплідину та інший лікарський засіб є частиною єдиного лікарського засобу.
24. Спосіб за будь-яким з пп. 19-22, де аплідин або аналог аплідину та інший лікарський засіб вводять у вигляді окремих лікарських засобів одночасно або в різний час.
25. Спосіб підвищення терапевтичної ефективності лікарського засобу при лікуванні лейкемії або лімфоми за допомогою комбінованої терапії аплідином або аналогом аплідину, де вказаний лікарський засіб вибраний з групи, яка складається з метотрексату, цитозину арабінозиду, мітоксантрону, вінбластину, метилпреднізолону та доксорубіцину.
26. Спосіб за п. 25, де раком є лейкемія.
27. Спосіб за будь-яким з пп. 25 або 26, де вказана лейкемія є хронічною лімфоцитарною лейкемією.
28. Спосіб за п. 25, де раком є лімфома.
29. Спосіб за будь-яким з пп. 19-28, де аплідином або аналогом аплідину є аплідин.
30. Спосіб за будь-яким з пп. 1-29, де іншим лікарським засобом є метотрексат.
31. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим лікарським засобом є цитозину арабінозид.
32. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим лікарським засобом є мітоксантрон.
33. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим лікарським засобом є вінбластин.
34. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим лікарським засобом є метилпреднізолон.
35. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим лікарським засобом є доксорубіцин.
Текст
1. Застосування аплідину або аналога аплідину для одержання лікарського засобу для лікування лейкемії або лімфоми за допомогою комбінованої терапії з використанням аплідину або аналога апліднину та іншого лікарського засобу, вибраного із групи, що складається з метотрексату, цитозину арабінозиду, мітоксантрону, вінбластину, метилпреднізолону і доксорубіцину. 2. Застосування аплідину або аналога аплідину за п. 1 для отримання лікарського засобу для лікування лейкемії. 3. Застосування аплідину або аналога аплідину за будь-яким з пп. 1 або 2, де вказана лейкемія є хронічною лімфоцитарною лейкемією. 4. Застосування аплідину або аналога аплідину за п. 1 для отримання лікарського засобу для лікування лімфоми. 5. Застосування аплідину або аналога аплідину за будь-яким з пп. 1-4, де аплідин або аналог аплідину і інший лікарський засіб є частиною єдиного лікарського засобу. 6. Застосування аплідину або аналога аплідину за будь-яким з пп. 1-4, де аплідин або аналог аплідину і інший лікарський засіб вводять у вигляді окремих лікарських засобів одночасно або у різний час. 7. Застосування аплідину або аналога аплідину за будь-яким з пп. 1-6, яке включає введення пацієнту за необхідності лікування терапевтично ефективної кількості аплідину або аналога аплідину та терапевтичної кількості іншого лікарського препарату, вибраного з групи, яка складається з метотрексату, цитозину арабінозиду, мітоксантрону, вінбластину, метилпреднізолону і доксорубіцину, де введення здійснюють до, під час або після введення аплідину або аналога аплідину. 2 (19) 1 3 83022 4 лімфоми за допомогою комбінованої терапії аплі19. Спосіб лікування лейкемії або лімфоми, що дином або аналогом аплідину, де вказаний лікарвключає в себе введення пацієнтові, який потреський засіб вибраний з групи, яка складається з бує такого лікування, терапевтично ефективної метотрексату, цитозину арабінозиду, мітоксантрокількості аплідину або аналога аплідину і терапевну, вінбластину, метилпреднізолону та доксорубітично ефективної кількості іншого лікарського зацину. собу, ефективного для лікування раку, що вво26. Спосіб за п. 25, де раком є лейкемія. диться до, під час або після введення аплідину 27. Спосіб за будь-яким з пп. 25 або 26, де вказана або аналога аплідину, де інший лікарський засіб лейкемія є хронічною лімфоцитарною лейкемією. вибраний із групи, що складається з метотрексату, 28. Спосіб за п. 25, де раком є лімфома. цитозину арабінозиду, мітоксантрону, вінбластину, 29. Спосіб за будь-яким з пп. 19-28, де аплідином метилпреднізолону і доксорубіцину. або аналогом аплідину є аплідин. 20. Спосіб за п. 19, де вказаним раком є лейкемія. 30. Спосіб за будь-яким з пп. 1-29, де іншим лікар21. Спосіб за будь-яким з пп. 19-20, де вказана ським засобом є метотрексат. лейкемія є хронічною лімфоцитарною лейкемією. 31. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим лі22. Спосіб за п. 19, де вказаним раком є лімфома. карським засобом є цитозину арабінозид. 23. Спосіб за будь-яким з пп. 19-22, де аплідин або 32. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим ліаналог аплідину та інший лікарський засіб є частикарським засобом є мітоксантрон. ною єдиного лікарського засобу. 33. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим лі24. Спосіб за будь-яким з пп. 19-22, де аплідин або карським засобом є вінбластин. аналог аплідину та інший лікарський засіб вводять 34. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим ліу вигляді окремих лікарських засобів одночасно карським засобом є метилпреднізолон. або в різний час. 35. Спосіб за будь-яким з пп. 19-29, де іншим лі25. Спосіб підвищення терапевтичної ефективноскарським засобом є доксорубіцин. ті лікарського засобу при лікуванні лейкемії або Даний винахід відноситься до комбінацій аплідину або аналогів аплідину з іншими протипухлинними засобами, і до застосування цих комбінацій для лікування раку, зокрема - для лікування лейкозу і лімфом. Аплідин (Дегідродидемнін В) являє собою циклічний депсипептид, виділений з Середземноморського оболонника, Aplidium albicans, і є об'єктом [міжнародної заявки WO 9109485]. Він відноситься до сполук, відомих як дидеміни, і має наступну структуру: Додаткову інформацію про аплідин, аналоги аплідину, їх застосування, фармацевтичні композиції і синтез можна знайти в pпатентних заявках WO 981352, WO 9942125, WO 0176616, WO 0135974, WO 0230441 і WO 0202596[. Автори заявки приводять вміст цих заявок PCT як конкретне посилання. І у тварин, і у людей в доклінічних випробуваннях і на І стадії клінічних випробувань було показано, що ця речовина володіє цитотоксичним ефектом відносно широкого спектра типів пухлин, в тому числі лейкозу і лімфоми. Дивись, наприклад: [Faircloth, G. et al.: «Dehydrodidemnin В (DDE) a new marine derived anticancer agent with activity against experimental tumour models», 9th NCIEORTC Symp New Drugs Cancer Ther (March 12-15, Amsterdam) 1996, Abst 111; Faircloth, G. et al.: «Preclinical characterisation of aplidine, a new marine anticancer depsipeptide», Proc Amer Assoc Cancer Res 1997, 38:Abst 692; Depenbrock H, Peter R, Faircloth GT, Manzanares I, Jimeno J, Hanauske AR.: «In vitro activity of Aplidine, a new marine-derived anti-cancer compound, on freshly explanted clonogenic human tumour cells and haematopoietic precursor cells» Br. J. Cancer, 1998; 78: 739-744; Faircloth G, Grant W, Nam S, Jimeno J, Manzanares I, Rinehart K.: «Schedule-dependency of Aplidine, a marine depsipeptide with antitumor activity», Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 1999:40:394; Broggini M, Marchini S5 D'lncalci M, Taraboletti G, Giavazzi R, Faircloth G, Jimeno J.: «Aplidine blocks VEGF secretion and VEGF/VEGF-R1 autocrine loop in a human leukemic cell line», CHn Cancer Res 2000; 6 (suppl): 4509; Erba E, Bassano L, Di Liberti G, Muradore I, Chiorino G, Ubezio P, Vignati S, Codegoni A, Desiderio MA, Faircloth G, Jimeno J і Dincaici M.: «Cell cycle phase perturbations and apoptosis in tumour cells induced by aplidine», Br J Cancer 2002; 86: 1510-1517; Paz-Ares L, Anthony A, Pronk L, Twelves C, Alonso S, Cortes-Funes H, CeIH N, Gomez C, LopezLazaro L, Guzman C, Jimeno J, Kaye S.: «Phase I clinical and pharmacokinetic study of aplidine, a new marine didemnin, administered as 24-hour infusion weekly» CHn. Cancer Res. 2000; би (suppl): 4509; 5 83022 6 є ефективним для лікування лейкозу і/або лімфоRaymond E, Ady-Vago N, Baudin E, Ribrag V, ми. Найбільш переважно, інший лікарський засіб Faivre S, Lecot F, Wright T, Lopez Lazaro L, Guzman вибраний з групи, що включає метотрексат, цитоC, Jimeno J, Ducreux M, Le Chevalier T, Armand JP.: зин-арабінозид, мітоксантрон, вінбластин, метил«A phase I and pharmacokinetic study of aplidine преднізолон і доксорубіцин. given as a 24-hour continuous infusion every other У ще одному варіанті здійснення винахід відweek in patients with solid tumor and lymphoma», носиться до способу лікування первинного і/або CHn. Cancer Res. 2000; 6 (suppl): 4510; метастазуючого раку, який полягає у введенні паMaroun J, Belanger K, Seymour L, Soulieres D, цієнту, потребуючому такого лікування, терапевCharpentier D, Goel R, Stewart D, Tomiak E, Jimeno тично ефективної кількості аплідину або аналога J, Matthews S. «Phase I study of aplidine in a 5 day аплідину, або його фармацевтично прийнятних bolus q 3 weeks in patients with solid tumors and проліків, солі, сольвату або гідрату, і терапевтично lymphomas», CHn. Cancer Res. 2000; 6 (suppl): ефективної кількості іншого лікарського засобу, 4509; ефективного для лікування раку, або його фармаIzquierdo MA, Bowman A, Martinez M, Cicchella цевтично прийнятних проліків, солі, сольвату або B, Jimeno J, Guzman C, Germa J, Smyth J.: «Phase I гідрату, що вводиться до, під час або після ввеtrial of Aplidine given as a 1 hour intravenous weekly дення аплідину або аналога аплідину. infusion in patients with advanced solid tumors and Переважно, інший лікарський засіб є ефективlymphoma», CHn. Cancer Res. 2000; 6 (suppl): ним для лікування лейкозу і/або лімфоми. Най4509]. більш переважно, інший лікарський засіб вибраний Вивчення механізму показало, що аплідин моз групи, що включає метотрексат, цитозинже блокувати секрецію VEGF в клітинах ALLарабінозид, мітоксантрон, вінбластин, метилпредMOLT4 і цитотоксична активність спостерігалася in нізолон і доксорубіцин. Інші лікарські засоби моvitro при низьких концентраціях (5нМ) в AML і ALL жуть утворювати частину єдиної композиції або пробах, отриманих у хворих дітей з первинним або вводитися як окрема композиція одночасно або в рецидивуючим ALL і AML. Мабуть, аплідин виклиінший час. кає блокаду як G1, так і G2 в лейкозних клітинах, Рак, на який може бути направлене лікування, що зазнавали дії лікарських засобів in vitro. Крім переважно являє собою лейкоз або лімфому, найрегуляції по типу негативного зворотного зв'язку більш переважно ALL (гострий лімфомний лейкоз), VEGF рецептора, досі мало що відомо про механіAML (гострий мієлобластний лейкоз), CML, MML зми дії аплідину. (мієломоноцитарний лейкоз) або CLL (хронічний На І стадії клінічних досліджень з аплідином, Lлімфоцитарний лейкоз). карнітин вводили як 24 годинну підготовку до лікуВ іншому аспекті винахід відноситься до сповання або вводили разом з аплідином для профісобу підвищення терапевтичної ефективності лілактики мієлотоксичності, дивись, наприклад, [WO карського засобу, ефективного для лікування раку, 02 30441]. Було доведено, що спільне введення Lпереважно, лікарського засобу, ефективного для карнітину здатне поліпшувати відновлення після лікування лейкозу і/або лімфоми, найбільш перем'язової токсичності, індукованої лікарським засоважно, лікарського засобу, вибраного з групи, що бом, і дозволило підвищити дозу аплідину. включає метотрексат, цитозин-арабінозид, мітокТаким чином, на І стадії клінічних досліджень сантрон, вінбластин, метилпреднізолон і доксоруаплідин не виявив мієлотоксичності при максимабіцин, або його фармацевтично прийнятні проліки, льно переносимих дозах, за винятком помірної сіль, сольват або гідрат, що полягає у введенні лімфопенії. Ці характеристики роблять аплідин пацієнту, потребуючому цього, деякої кількості потенційно ефективним засобом для лікування аплідину або аналога аплідину, або його фармалейкозу. Додання аплідину під час хіміотерапії цевтично прийнятних проліків, солі, сольвату або лейкозу могло підвищити ефективність лікування гідрату. Аплідин або аналог аплідину вводять до, без необхідності зниження дози лікарського засобу під час або після введення іншого лікарського завнаслідок мієлотоксичності, що підвищується, і собу. підтвердженою антилейкемічною активністю. ОсоАплідин або аналог аплідину здатний підвибливо це відноситься до лікування рецидивуючого щувати терапевтичну ефективність деяких протиALL і первинного, і рецидивуючого AML, оскільки пухлинних лікарських засобів. В одному з аспектів, вони є захворюваннями з несприятливим прогнорезультатом є синергізм, а не адитивність. Такі зом, які в цей час лікують комбінаціями мієлотоксинергетичні комбінації є переважним аспектом сичних лікарських засобів. даного винаходу. Синергізм може бути виявлений Авторам вперше вдалося встановити, що апза допомогою методу Chou-Talalay або іншими лідин і аналоги аплідину посилюють дію інших методами. В інших випадках може бути виявлений протиракових засобів і, отже, можуть успішно виантагонізм. користовуватися в комбінованій терапії раку. ДаЩе в одному аспекті винахід відноситься до ний винахід відноситься до фармацевтичних комфармацевтичної композиції, що містить аплідин позицій, фармацевтичних лікарських форм, або аналог аплідину, або його фармацевтично наборів і способів лікування раку, використовуючи прийнятні проліки, сіль, сольват або гідрат, і інший цю комбіновану терапію. лікарський засіб, ефективний для лікування раку. Відповідно до одного з аспектів винаходу авПереважно, інший лікарський засіб є засобом, тори пропонують ефективну комбіновану терапію ефективним для лікування лейкозу і/або лімфоми. на основі аплідину і аналогів аплідину, використоНайбільш переважно, інший лікарський засіб вибвуючи інші лікарські засоби, які є ефективними для раний з групи, що включає метотрексат, цитозинлікування раку. Переважно інший лікарський засіб 7 83022 8 (DM4), а також і відносно свіжих клітин, отриманих арабінозид, мітоксантрон, вінбластин, метилпреду шести пацієнтів з хронічним лімфолейкозом нізолон і доксорубіцин. (CLL). Значення IC50 становило 10нМ протягом 3Винахід також відноситься до набору, що виденної експозиції з DM4 лінією і після 11-денної користовується для лікування або профілактики експозиції з первинними CLL пробами. раку, який містить лікарську форму аплідину або Вивчення лікарської комбінації проводили на аналога аплідину, або його фармацевтично пристабільній клітинній лінії, а не на первинних клітийнятних проліків, солі, сольвату або гідрату, лікарнах. Автори винаходу вивчали три клітинні лінії viz. ську форму іншого лікарського засобу, ефективноK562, CCRF-CEM і SKI-DLCL, що являють собою го для лікування раку, або його фармацевтично гострий мієлолейкоз, лімфобластну лімфому і диприйнятних проліків, солі, сольвату або гідрату, і фузну В-клітинну крупноклітинну лімфому, відповіінструкції по застосуванню кожної діючої речовини дно. Дані в прикладах показують, що аплідин пов комбінації для лікування або профілактики раку. силює дію метотрексату, цитозин-арабінозиду, Переважно, інший лікарський засіб є засобом, мітоксантрону, вінбластину, метилпреднізолону, а ефективним для лікування лейкозу і/або лімфоми. також доксорубіцину в К562, CCRP-CEM і SKIНайбільш переважно, інший лікарський засіб вибDLCL клітинах, знижуючи IC50 для цих лікарських раний з групи, що включає метотрексат, цитозинзасобів. арабінозид, мітоксантрон, вінбластин, метилпредТаким чином, авторами винаходу було виявнізолон і доксорубіцин. лено, що аплідин є ефективним цитотоксичним Ще в одному аспекті винахід відноситься до засобом відносно клітин деяких гематологічних застосування аплідину для лікування хронічного злоякісних пухлин. Суттєво те, що автори уперше лімфолейкозу. встановили, що аплідин інгібує ріст CLL клітин в Фіг.1. Аплідин інгібує ріст CLL клітин в культурі культурі. Також було виявлено, що аплідин посиФіг.2. Аплідин є ефективним інгібітором пpeBлює цитотоксичність лікарських засобів, що викоALL клітин в культурі ристовуються для лікування лейкозів, таких як Фіг.3. Крива цитотоксична доза - відповідь метотрексат (MTX), цитозин-арабінозид (АrаС), CCRF-CEM (Фіг.3А), SKI-DLCL (Фіг.3В) і К562 (3C) мітоксантрон (Mitox), вінбластин (Vinb), метилпреклітин після лікування аплідином протягом 96 годнізолон (Metpred) і доксорубіцин (DOX). дин Лейкоз класифікують по тому, наскільки швидФіг.4. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину і ко він прогресує. Гострий лейкоз розвивається АrаС в CCRF-CEM клітинах швидко і може розповсюджуватисяв організмі Фіг.5. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину і протягом декількох тижнів або місяців. Навпаки, АrаС в SKI-DLCL клітинах хронічний лейкоз розвивається повільно і поступоФіг.6. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину і во гіршає протягом багатьох років. мітоксантрону в CCRF-CEM клітинах Кровотворні (гематопоетичні) клітини при гостФіг.7. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину і рому лейкозі залишаються на стадії незрілості, мітоксантрону в SKI-DLCL клітинах тому вони дуже швидко діляться і нагромаджуютьФіг.8. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину і ся. Отже, при гострому лейкозі необхідне негайне метотрексату в CCRF-CEM клітинах лікування, інакше захворювання може привести до Фіг.9. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину і летального кінця протягом декількох місяців. На доксорубіцину в CCRP-CEM клітинах щастя, деякі підтипи гострого лейкозу піддаються Фіг.10. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину лікуванню доступними способами терапії і вони і вінбластину в CCRF-CEM клітинах виліковні. У дітей часто розвиваються гострі форФіг.11. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину ми лейкозу, лікування яких відрізняється від лікуі доксорубіцину в SKI-DLCL клітинах вання лейкозу дорослих. Фіг.12. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину При хронічному лейкозі кровотворні клітини і вінбластину в SKI-DLCL клітинах зрілі, або диференційовані, але не «нормальні». Фіг.13. Chou-Talalay аналіз комбінації аплідину Вони залишаються в кровотоці набагато довше, і метилпреднізолону в SKI-DLCL клітинах ніж нормальні лейкоцити, і вони не здатні як слід Фіг.14. Комбінація IC20 аплідину знижувала боротися з інфекцією. IC5O АrаС в CCRP-CEM (Фіг.12A) і SKI-DLCL Лейкоз також класифікують по типу лейкоци(Фіг.12В) клітинах після інкубації протягом 96 годин тів, що діляться, тобто лімфоцитів (клітини імунної Фіг.15. Дія аплідину на розмір пухлини in vivo системи), гранулоцитів (клітини, що руйнують бакяк взятого нарізно засобу і в комбінації з АrаС терії) або моноцитів (макрофаг-утворюючі клітини). Під «раком» розуміють пухлини, новоутворенУ тому випадку, якщо аномальні лейкоцити являня і будь-які інші злоякісні тканини або клітини. ють собою головним чином гранулоцити або моДаний винахід відноситься до застосування апліноцити, лейкоз класифікують як мієлогенний, або дину або аналогів аплідину в комбінації для лікумієлоїдний лейкоз. З іншого боку, якщо аномальні вання раку взагалі, але більш, переважно, для клітини крові виникають з лімфоцитів кісткового лікування різних лейкозів і лімфом. мозку, рак називають лімфолейкозом. Для вивчення можливого посилення дії інших Інші злоякісні захворювання, відомі як лімфопротиракових засобів аплідином автори провели ми, розвиваються з лімфоцитів в лімфатичних систематичне вивчення комбінацій лікарських завузлах, селезінці і інших органах. Такі злоякісні собів для можливого застосування при лейкозах і захворювання виникають не з кісткового мозку і лімфомах. Було виявлено, що аплідин є ефективмають біологічну дію, відмінну від лімфолейкозу. ним цитотоксичним засобом і in vitro відносно первинних клітин, отриманих у пацієнтів з преВ-ALL 9 83022 10 фахівцем в даній галузі, виходячи з шляху ввеІснує велика кількість різних типів лейкозу, але дення і характеристик розчинності компонентів найчастіше зустрічаються чотири типи. Ця класиданої композиції. фікація основана на тому, чи є лейкоз гострим або Приклади фармацевтичних композицій, що міхронічним, мієломним або лімфоцитарним, тобто: стять аплідин або аналог аплідину, включають в Гострий мієлолейкоз (AML): також відомий як себе рідини (розчини, суспензії або емульсії) з гострий нелімфоцитарний лейкоз (ANLL) - є форвідповідною композицією для внутрішньовенного мою лейкозу дорослих, що найчастіше зустрічавведення, і вони можуть містити сполуку в чистому ється. Більшість пацієнтів знаходяться в пенсійновигляді або в поєднанні з яким-небудь носієм, або му віці (приблизний вік діагностування = 65 років), і іншими фармакологічно активними сполуками. чоловіки більше схильні, ніж жінки. На щастя, заРозчинений аплідин значною мірою руйнується вдяки останнім досягненням в лікуванні, AML можпри нагріванні і під дією світла, і були розроблені на втримувати в стані ремісії (ослаблення захволіофілізовані лікарські форми, дивись [публікацію рювання) приблизно у 60%-70% дорослих, які W099/42125], приведену тут як посилання. отримують відповідне лікування. Початкові показВведення аплідину або композицій згідно з даники відповіді на лікування становлять приблизно ним винаходом основане на схемі введення дози, 65-75%, а підсумкові показники ефективності лікупереважно шляхом внутрішньовенної інфузії. Певання складають близько більше 40-50%. реважно, тривалість використовуваної інфузії Хронічний мієломний лейкоз (CML) відомий як складає до 72 годин, більш переважно, від 1 до 24 мієлопроліферативне захворювання - тобто загодин, найбільш переважно, близько 1, близько 3 хворювання, при якому клітини кісткового мозку або близько 24 годин. Особливо переважними є проліферують (розмножуються) поза тканиною інфузії короткої тривалості, що дозволяє проводикісткового мозку. CML легко діагностувати, оскільти лікування, не залишаючи пацієнта на ніч в стаки він є генетично специфічним, тобто має маркер, ціонарі. Однак якщо потрібно, інфузії можуть бути який легко виявляється під мікроскопом. Близько 24 годинними, або навіть більш тривалими. Інфу95% пацієнтів з CML мають генетичну транслоказію можна здійснювати у відповідні інтервали з цію між хромосомами 9 і 22 в лейкозних клітинах. різними режимами, наприклад, раз на тиждень, Філадельфійська хромосома викликає неконтродва рази на тиждень або частіше, повторно кожльовану репродукцію і проліферацію всіх типів ний тиждень, необов'язково, з інтервалом, звичайлейкоцитів і тромбоцитів (фактори згортання кроно в один тиждень. ві). CML поки ще не лікується стандартними хіміоПрийнятні дози сполук даної комбінації будуть терапевтичними або імунотерапевтичними спосозастосовуватися в залежності від конкретної комбами. позиції, шляху введення і конкретного розташуГострий лімфоцитарний лейкоз (ALL) - також вання хазяїна і пухлини, на які направлене лікувідомий як гострий лімфобластний лейкоз - являє вання. Потрібно враховувати інші чинники, такі як собою злоякісне захворювання, що викликається вік, масу тіла, стать, режим харчування, час ввеаномальним ростом і розвитком ранніх агранулодення, швидкість екскреції, стан організму, поєдцитарних лейкоцитів або лімфоцитів. Лейкоз вининання з лікарськими засобами, реакції чутливості і кає в бластних клітинах кісткового мозку (Втяжкість захворювання. Введення може здійснюклітини), тимусу (Т-клітини) і лімфатичних вузлах. ватися безперервно або періодично в максимальALL зустрічається головним чином у дітей, частіше но переносимій дозі. Додаткові вказівки по прийоу дітей у віці 4 роки. му аплідину подані в [публікації WO 0135974], яка Хронічний лімфоцитарний лейкоз (CLL) є найвключена тут як посилання в повному об'ємі. більш поширеним лейкозом в Північній Америці і в У даному винаході можуть бути використані Європі. Це захворювання виникає у немолодих аналоги аплідину, замість APL самого аплідину. В людей і, дуже рідко, серед людей молодших 50основному такі сполуки описані в [WO 0202596]. річного віку. Число хворих CLL чоловіків переверПриклади сполук згідно з даним винаходом вклюшує число хворих жінок в середньому як 2 до 1. чають в себе переважні сполуки, які дані в [WO Вважається, що CLL є результатом поступового 0202596], і, зокрема, автори приводять в описі накопичення зрілих, довгоживучих лімфоцитів. винаходу для видачі патенту обговорення переваОтже, це злоякісне захворювання викликається не жних сполук і пов'язаних з ними аспектів, приведестільки надмірним ростом, скільки надзвичайно них в [WO 0202596]. Більш переважно, аналоги тривалим періодом життя і накопиченням злоякісблизькі до аплідину по структурі і звичайно відрізних клітин. Хоча швидкість накопичення різна у няються від аплідину по одній амінокислоті або окремих людей, велике пухлинне навантаження кінцевому бічному ланцюгу. У циклічній частині згодом викликає ускладнення у всіх пацієнтів з молекули або в бічному ланцюгу можуть бути різні CLL. амінокислоти. Численні приклади таких сполук Композиції згідно з даним винаходом можуть приведені в [WO 0202596], і вони підходять для містити обидва компоненти (лікарського засобу) в використання в даному винаході. одному фармацевтично прийнятному складі. АльПриклади тернативно, дані компоненти можна отримати Приклад 1 окремо і вводити в комбінації один з одним. В даАплідин випробовували на різних первинних ному винаході можуть бути використані різні фарклітинах, отриманих у пацієнтів з гематологічними мацевтично прийнятні композиції, добре відомі злоякісними захворюваннями. Клітини, що викорифахівцям в даній галузі. Вибір відповідної компостовуються, являли собою: зиції для застосування згідно з даним винаходом може бути здійснений по стандартній методиці 11 83022 12 - свіжі клітини, отримані у шести пацієнтів з тодом, складає менше за 1, тоді лікарські засоби є хронічним лімфолейкозом синергістами; в тому випадку, коли CI дорівнює 1, - первинні клітини, отримані у пацієнта з преВдані лікарські засоби є адитивними; і, якщо CI ALL (DM4) складає більше 1, то дані лікарські засоби є антаПроби отримували з урахуванням попередньої гоністами. згоди пацієнта і CLL клітини виділяли шляхом Всі дослідження цитотоксичності проводили з центрифугування в градієнті щільності фінолу використанням XTT або MTS. Автори уперше ви(«histopaque»). Середовище, що використовували, значили величину IC50 цих лікарських засобів на являло собою RPMI, доповнене 10% аутологічною клітинних лініях SKI-DLCL, CCRP-CEM і К562. Була сироваткою і L-глутаміном. Культури інкубували з вивчена комбінація лікарських засобів з викорис10нМ аплідином і виживаність клітин визначали на танням заданих співвідношень IC50 (аплідин):IC50 (Засіб X). 3, 7, 11 і 18 добу в порівнянні з виживаністю необУ таблиці 2 показана комбінація аплідину і Araроблених клітин і STI 571 (0,5мМ). С з величиною (ІС50:ІС50) в клітинах CCRP-CEM. Результати цих досліджень представлені на фігурах 1-2. Приклад 2 Для вивчення можливого посилення дії інших протиракових засобів автори винаходу провели вивчення комбінацій лікарських засобів для можливого використання при лейкозі і лімфомах. Вивчення комбінації лікарських засобів проводили на стабільних клітинних лініях, а не на первинних клітинах. Були вивчені три клітинні лінії, viz. K562, як модель гострого мієлолейкозу, CEM, що являє собою гострий лімфолейкоз, і SKI-DLCL, що являє собою дифузну крупноклітинну лімфому. Результати Chou-Talalay аналізу комбінації Комбіновані дослідження з IC20 і IC50 дозами апліаплідину і Ara-С в CCRF-CEM клітинах представдину з рядом доз метотрексату, цитозинлені на Фігурі 4. Індекс CI для даної комбінації в арабінозиду і доксорубіцину проводили для визнаклітинах CCRF-CEM становить 0,469. чення можливості аплідину посилювати дію цих У таблиці 3 показана комбінація аплідину і Araлікарських засобів. С з величиною (IC50:ІС50) в клітинах SKI-DLCL. Результати приведені в таблиці 1: Безсумнівно, ці дані показують, що аплідин посилює дію доксорубіцину, метотрексату і цитозин-арабінозиду, істотно знижуючи IC50 для цих лікарських засобів. Приклад 3: In vitro дослідження для визначення дії аплідину як самостійного лікарського засобу, на клітинні лінії CCRF-CEM, SKI-DLCL і К562. Клітини CCRF-CEMS, SKI-DLCL і К562 вирощували в середовищі RPMI 1640, доповненому 10% FCS. Для визначення цитотоксичної дії аплідину на всі клітинні лінії і для отримання значень IC50 аплідину в цих клітинних лініях клітини вміщували в 96-ямкові планшети і інкубували протягом 96 годин у вологій камері, з 5% CO2. Виживаність клітин визначали за допомогою XTT аналізу в автоматизованому зчитувачі для планшет. Авторами було виявлено, що аплідин володіє цитотоксичністю відносно всіх клітинних ліній з величиною IC50 0,5-1,0нМ (фігура 3). Приклад 4: Вивчення in vitro дії аплідину+комбінації лікарських засобів із заданими дозами ІС5О:ІС50 на всі клітинні лінії. Метотрексат, цитозин-арабінозид C (ara-С), мітоксантрон, метилпреднізолон, вінбластин і доксорубіцин тестували в поєднанні з аплідином. Для аналізу комбінацій лікарських засобів використали метод Chou-Talalay. У тому випадку, коли індекс комбінування (CI), отриманий цим ме Результати Chou-Talalay аналізу комбінації аплідину і Ara-С в клітинах SKI-DLCL представлені на фігурі 5. Індекс CI для даної комбінації в клітинах SKI-DLCL становить 0,306. У таблиці 4 показана комбінація аплідину і AraС з величиною (IC50:ІС50) в клітинах К562. Індекс CI для даної комбінації в клітинах К562 становить 0,502. У таблиці 5 показана комбінація аплідину і мітоксантрону з величиною (IC50:ІС50) в клітинах CCRP-CEM. 13 Результати Chou-Talalay аналізу комбінації аплідину і мітоксантрону в клітинах CCRF-CEM представлені на Фігурі 6. Індекс CI для даної комбінації в клітинах CCRF-CEM складає 0,911. У таблиці 6 показана комбінація аплідину і мітоксантрону з величиною (IC50:ІС50) в клітинах SKIDLCL. Результати Chou-Talalay аналізу комбінації аплідину і мітоксантрону в клітинах SKI-DLCL представлені на Фігурі 7. Індекс CI для даної комбінації в клітинах SKI-DLCL становить 0,646. У таблиці 7 показана комбінація аплідину і мітоксантрону з величиною (IC50:ІС50) в клітинах К562. Індекс CI даної комбінації в клітинах К562 становить 0,487. У таблиці 8 показана комбінація аплідину і метотрексату з величиною (IC50:ІС50) в клітинах CCRF-CEM. 83022 14 Результати Chou-Talalay аналізу комбінації аплідину і метотрексату в клітинах CCRF-CEM представлені на Фігурі 8. Індекс CI для даної комбінації в клітинах CCRF-CEM становить 0,950. Результати Chou-Talalay аналізу комбінації аплідину і доксорубіцину в клітинах CCRF-CEM представлені на Фігурі 9. Індекс CI для даної комбінації в клітинах CCRF-CEM становить 1,952. Результати Chou-Talalay аналізукомбінації аплідину і вінбластину в клітинах CCRF-CEM представлені на Фігурі 10. Індекс CI для даної комбінації в клітинах CCRF-CEM становить 2,046. У таблиці 9 показана комбінація аплідину і доксорубіцину з величиною (IC50:IC50) в клітинах SKIDLCL. Результати Chou-Talalay аналізу комбінації аплідину і доксорубіцину в клітинах SKI-DLCL представлені на Фігурі 11. Індекс CI для даної комбінації в клітинах SKI-DLCL становить 0,478. У таблиці 10 показана комбінація аплідину і вінбластину з величиною в клітинах SKI-DLCL. Результати Chou-Talalay аналізу комбінації аплідину і вінбластину в клітинах SKI-DLCL представлені на Фігурі 12. Індекс CI для даної комбінації в клітинах SKI-DLCL становить 0,760. У таблиці 11 показана комбінація аплідину і метилпреднізолону з величиною (IC50:ІС50) в клітинах SKI-DLCL. 15 83022 16 Результати Chou-Talalay аналізу комбінації Мишам SCID підшкірно в правий бік інокулюаплідину і метилпреднізолону в клітинах SKI-DLCL вали 107 лейкозних клітин CEM-T. Їх спостерігали представлені на Фігурі 13. Індекс CI для даної двічі на тиждень на виявлення утворення пухлини комбінації в клітинах SKI-DLCL складає 0,646. в місці інокуляції. Після реєстрації пальпованої Приклад 5 пухлини парентерально вводили аплідин як самоТакож проводилися дослідження цитотоксичстійний засіб і в комбінації з декількома дозами ної дії комбінації IC20 (APL) з різними дозами AraС AraС для визначення протипухлинного ефекту. на клітинних лініях CCRF-CEM і SKI-DLCL. Аплідин Миші були рандомізовані для введення тільки апв обох клітинних лініях посилював дію AraС, велилідину в дозах 0,75мг/кг і 1мг/кг, тільки AraС чина IC50 AraС була знижена з 30нМ до 1,6нМ в 50мг/кг або комбінації аплідину і AraС для всіх клітинній лінії SKI-DLCL, і з 10нМ до 0,8нМ в клікомбінацій доз. Доза AraС, вибрана для даної тинній лінії CCRF-CEM, відповідно (Фігура 14). Дакомбінації, являє собою дозу, при якій придушувані були отримані після інкубування клітин протягом вся ріст пухлини, але не спостерігалося регресії 96 годин і з використанням XTT аналізу. Результапухлини. Всі лікарські засоби вводили внутрішньоти представляють середні значення трьох різних черевинно, і розмір пухлини порівнювали з контдослідів. рольною групою мишей, що не отримували ніякого Приклад 6 Дослідження In vivo. лікування, а для комбінованих груп порівнювали з Були проведені досліди in vivo для вивчення розмірами пухлини при лікуванні окремо взятим дії аплідину окремо і в комбінації з іншими лікарсьзасобом. кими засобами для лікування лімфолейкозів. Було виявлено, що найбільш ефективна комВизначення максимальної переносимої дози бінація складає AraС - 50мг/кг + аплідин - 0,75мг/кг (MTD) у C.B.-17 scid/scid (мишей SCID) (Фігура 15). З цією метою використовували in vivo модель Ці відомості відносно аплідину можуть бути лімфоми людини у мишей SCID. Зокрема, викорипоширені на аналоги аплідину, похідні і споріднені стали клітини CCRF-CEMS і мишей CB. 17 сполуки. Наприклад, даний винахід пропонує комscid/scid. Ha основі досвіду роботи з цією моделлю бінацію сполуки, як наприклад, сполук, представбуло оцінене медикаментозне лікування з викорилених в [публікації WO 0202596], з протираковим станням даного ксенотрансплантату [Lacerda J.F. лікарським засобом, переважно, лікарським засоet al Blood 85 (10): 2675-2679 (1995)]. Ми виявили, бом проти лейкозу або лімфоми, особливо метотщо загальна доза 1мг/кг/на тиждень, яку вводили рексатом, цитозин-арабінозидом, мітоксантроном, п'ятьма щоденними дозами, складає максимальну вінбластином, метилпреднізолоном або доксорудозу аплідину, яку можуть переносити миші. біцином. Визначення in vivo протипухлинного ефекту аплідину, взятого окремо і в комбінації з AraС, на моделі ксенотрансплантату у мишей SCID 17 83022 18 19 83022 20 21 83022 22 23 Комп’ютерна верстка О. Гапоненко 83022 Підписне 24 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюAplidine for the combination therapies of leukemia and lymphoma
Автори англійськоюBarnejee Debabrata, Bertino Joseph R., Faircloth Glynn Thomas, Guray Saydam, Jimeno Jose
Назва патенту російськоюАплидин для комбинированной терапии лейкоза и лимфомы
Автори російськоюБарнеджи Дебабрата, Бертино Джозеф Р., Ферклот Глинн Томас, Гурей Сайдам, Химено Хосе
МПК / Мітки
МПК: A61P 35/02, A61K 38/15
Мітки: аплідин, терапії, лейкозу, комбінованої, лімфоми
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/12-83022-aplidin-dlya-kombinovano-terapi-lejjkozu-ta-limfomi.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Аплідин для комбінованої терапії лейкозу та лімфоми</a>
Попередній патент: Роликовий пристрій в установці безперервного розливу металу та спосіб його охолоджування
Наступний патент: Дозувальний вентиль
Випадковий патент: Бетоновід для транспортування та одночасного електророзігріву бетонної суміші