Фармацевтична композиція на основі кверцетину, що виявляє нефропротекторну дію та регулюючу електролітичний обмін активність при хронічній нирковій недостатності

1. Фармацевтична композиція для лікування хронічної ниркової недостатності, що містить активну речовину природного походження та допоміжні C2 2 (19) 1 3 же часто супроводжуються різними ускладненнями, аж до розвитку ниркової недостатності. Хронічна ниркова недостатність (ХНН) є важливою проблемою сучасного суспільства, тому що призводить до втрати працездатності, ранньої інвалідності та високої летальності хворих. Термінальна стадія ниркової недостатності для підтримки життя хворих потребує використання методів замісної терапії, які мають високу вартість. На сьогоднішній день методи ниркової замісної терапії найдорожчі у медичній практиці. Незважаючи на сучасні досягнення в лікуванні ниркової недостатності, поширеність даного захворювання як і раніше залишається високою. У різних країнах зареєстровано у середньому від 100 до 2000 хворих на 1 мільйон дорослого населення, що страждають на ХНН різних стадій. Так, епідеміологічні дослідження останніх років показали, що число хворих з нирковою недостатністю в країнах Європи, США і Японії коливається від 157 до 443 на 1 мільйон населення. Поширеність даної патології в Україні складає 212 на 1 мільйон населення. Серед причин летальності ниркова недостатність займає одинадцяте місце. З огляду на вищесказане, пошук ефективних засобів фармакологічної корекції порушення функцій нирок при ХНН є актуальним питанням сучасної нефрології й фармакології. Існує гостра необхідність в уповільненні темпів прогресування хронічних захворювань нирок до термінальної стадії ХНН. Дослідження патогенезу різних за етіологією уражень нирок показали загальні механізми розвитку патологічного процесу, в якому поєднуються зменшення кількості діючих нефронів, значне зниження швидкості клубочкової фільтрації в окремому нефроні. При захворюванні нирок разом з використанням синтетичних препаратів доцільно застосовувати рослинні засоби, насамперед ті, які містять біофлавоноїди з вираженим діуретичним, гіпоазотемічним, антиоксидантним, бактеріостатичним та іншими ефектами. Відомий засіб для лікування пієлонефриту, що містить компоненти природного походження в мас. ч.: листя толокнянки звичайної 3,5, листя берези 20,0, бруньки берези 7,0, трава споришу 14,0, трава звіробою продірявленого 6,0, трава череди трироздільної 14,0, трава деревію звичайного 4,0, плоди кропу городнього 7,0, плоди шипшини 14,0, трава меліси лікарської 7,0, коріння солодки 3,5 [Патент Российской Федерации №2155054, кл. А61K35/78, 2000]. Відомий засіб не виявляє нефропротекторної дії при хронічній нирковій недостатності та не забезпечує комплексний вплив на сечовидільну систему. Відомий лікарський засіб "Канефрон" виробництва фірми Віоnоrіса, Німеччина [Компендиум 2006 - лекарственные препараты /Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. - К.: Морион, 2006. - Т. 1 - С. 609-610]. 1 драже препарату містить: траву золототисячника 18 мг, корінь любистка звичайного 18 мг, листя розмарину 18 мг. Препарат виявляє протизапальну, спазмолітичну, діуретичну, вазодилататорну і антибактеріальну дію. Під впливом препарату посилюється виділення солей се 93707 4 чової кислоти і підвищується рН сечі, що попереджає утворення і зростання конкрементів в сечових шляхах. Засіб використовують як основним або у складі комплексного лікування при хронічних і гострих інфекціях сечового міхура і нирок, зокрема у вагітних; при хронічному гломерулонефриті, інтерстиціальному нефриті; для профілактики утворення сечових конкрементів, зокрема після їх видалення. Відомий засіб не дозволяє знизити або виключити негативні побічні ефекти, зокрема алергічні реакції, внаслідок чого не забезпечується комплексний вплив на сечовидільну систему. Відомий лікарський засіб "Кверцетин" у формі гранул [Компендиум 2006 - Лекарственные препараты / Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. К.: Морион, 2006. - Т. 1. - С. 630], в якому 100 г грануляту містить 4 г кверцетину та допоміжні речовини: пектин яблучний, глюкозу, цукор. Відоме використання препарату для лікування хронічного гломерулонефриту, а не хронічної ниркової недостатності. Кверцетин не відомий як засіб, що виявляє нефропротекторну дію та регулюючу електролітичний обмін активність при хронічній нирковій недостатності. Відомий лікарський засіб "Хофітол" виробництва фірми Lab. Rosa-Phytopharma, Франція, у формі таблеток [Компендиум 2006 - Лекарственные препараты / Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. - К.: Морион, 2006. - Т. 2. - С. 1536-1537]. 1 таблетка містить сухий водний екстракт з соку свіжого листя артишоку польового 0,2 г, допоміжні речовини - решта. Препарат виявляє діуретичну, жовчогінну і гепатопротекторну дію. Засіб застосовують при хронічному нефриті, захворюваннях печінки і жовчного міхура. Відомий засіб не дозволяє знизити або виключити негативні побічні ефекти, внаслідок чого не забезпечується комплексний вплив на сечовидільну систему. Відомий лікарський засіб "Леспенефрил" виробництва фірми Solvay Pharma, Франція, у формі розчину для прийому внутрішньо [Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. /Под ред. Г.Л. Вышковского. - М: РЛС-2007, 2006. 1488 с.], в якому 100 мл розчину містить такі компоненти: настоянку леспедези головчастої 15 мл, есенцію анісу 0,25 мл, спирт етиловий 62 мл, вода - решта. Препарат виявляє гіпоазотемічну і діуретичну дію. Засіб застосовують у складі комплексної терапії латентної і компенсованої стадії хронічної ниркової недостатності у дорослих. Якісний і кількісний склад компонентів не дозволяє в достатній мірі підвищити рівень та розширити спектр їх специфічної активності, знизити або виключити негативні побічні ефекти, внаслідок чого не забезпечується комплексний вплив на сечовидільну систему. Відомий фармацевтичний засіб, що включає розчин кверцетину в терапевтичній дозі 0,25-0,5 г для лікування хворих з хронічною нефропатією алотрансплантата [Патент України №21013 u, кл. А61В17/20, 2007]. Відомий засіб знижує добову протеїнурію, креатининемію, рівень сечовини в крові, що дозволяє збільшити термін функціонування ниркового алотрансплантата і віддалити повернення хворого до діалізної терапії, але приз 5 водить до швидкого прогресування хронічної дисфункції алотрансплантата, зростання азотемії і повернення до гемодіалізної терапії. Частота досягнення клінічного ефекту для кверцетину не перевищує 67 %. Уповільнення прогресування хронічної нефропатії алотрансплантата пов'язано з антиоксидантними, мембраностабілізуючими, ренопротекторними, протизапальними властивостями кверцетину та його здатністю модулювати метаболізм оксиду азоту. Розвиток реакції відторгнення трансплантата нирки з використанням відомого засобу пов'язаний з ініціюванням у реципієнта імунної відповіді на чужорідну антигенну структуру. Таким чином, ефективність кверцетину при хронічній нефропатії алотрансплантата пов'язана з його імуномодулюючою дією. В той же час, не відомо з цього джерела інформації вплив кверцетину на перебіг хронічної ниркової недостатності іншої етіології, ніж аутоімунної. Немає даних про вплив кверцетину на деструкцію клітин у нирках та регулюючу електролітний обмін активність при хронічній нирковій недостатності. Відомий також фармацевтичний засіб для лікування хворих на гломерулонефрит з сечовим синдромом, що включає активні речовини інгібітор ангіотензин-перетворюючий фермент та гранули кверцетину [Патент України №62569 А, кл. А61K35/78, А61Р13/12, 2003]. Засіб при комбінованій терапії призводить до зниження протеїнурії й гематурії, а також посилення гіпотензивного ефекту інгібіторів ангіотензин-перетворюючого ферменту. Проте, застосування кверцетину як засобу монотерапії для лікування і профілактики хронічної ниркової недостатності не описано. Дотепер не було даних про здатність кверцетину попереджувати зміни структури паренхіми нирок, нормалізувати електролітний баланс на фоні вказаної патології. Відомий фармацевтичний засіб для парентерального введення "Корвітин", що містить комплекс кверцетину з полівінілпіролідоном у співвідношенні 1:9, та спосіб його отримання шляхом розчинення кверцетину в розчині полівінілпіролідону в 95 % етиловому спирті, нейтралізації розчиненого в воді сухого залишку, стерилізації, дозуванні у флакони, та ліофілізації до сухого залишку з вмістом кверцетину не менше 0,05 г. [Патент України №38504, кл. А61K9/14, А61K31/79, А61K31/455, 2005]. Засіб та спосіб його отримання відомі як кардіопротекторний препарат для лікування гострого інфаркту. Застосування препарату на основі кверцетину, як засобу, що виявляє нефропротекторну дію та регулюючу електролітичний обмін активність при хронічній нирковій недостатності, авторам з відомих джерел інформації невідоме. В основу винаходів поставлена задача створити такі засоби на основі кверцетину, що виявляють нефропротекторну дію та регулюючу електролітичний обмін активність при хронічній нирковій недостатності, фармацевтичні композиції на його основі та способи їх отримання, в яких виявленням нових властивостей кверцетину, розширенням області його застосування, забезпечувалося б підвищення їх комплексного впливу на сечовиді 93707 6 льну систему за рахунок підвищення рівня та розширення спектра специфічної активності, а саме: нормалізації фільтраційно-реабсорбційної функції нирок, морфологічної структури клітин нирок, нормалізації вмісту ендогенного N-ацетилглюкозаміну, відновлення і підтримання концентрації хлоридів, натрію, калію, кальцію та фосфору на рівні фізіологічних значень, та зниження або виключення негативних побічних ефектів. Поставлена задача вирішується тим, що в засобі на основі кверцетину, згідно з винаходом, є застосування кверцетину, як засобу, що виявляє нефропротекторну дію та регулюючу електролітичний обмін активність при хронічній нирковій недостатності. Доцільно, щоб кверцетин було вибрано переважно у формі ліофілізованого порошку для приготування розчину для ін'єкцій в кількості 2,5-5,0 мас. %. Поставлена задача вирішується також тим, що спосіб одержання фармацевтичного засобу, згідно з винаходом, полягає в розчиненні кверцетину в комплексі з полівінілпіролідоном у співвідношенні 1:9. Доцільно, щоб кверцетин в комплексі з полівінілпіролідоном у співвідношенні 1:9 розчиняли в 95 % етиловому спирті, здійснювали нейтралізацію розчиненого в воді сухого залишку з вмістом кверцетину не менше 0,05 г. Поставлена задача вирішується також тим, що фармацевтичний засіб, згідно з винаходом, виявляє нефропротекторну дію та регулюючу електролітичний обмін активність при хронічній нирковій недостатності. Доцільно, щоб фармацевтичний засіб містив кверцетин в комплексі з полівінілпіролідоном у співвідношенні 1:9. Доцільно, щоб фармацевтичний засіб був отриманий заявленим способом. Доцільно, щоб фармацевтичний засіб виявляв нефропротекторну дію та регулюючу електролітичний обмін активність при хронічній нирковій недостатності. Поставлена задача вирішується також тим, що в фармацевтичній композиції для лікування хронічної ниркової недостатності, що містить активну речовину природного походження та допоміжні речовини, згідно з винаходом, як активну речовину природного походження вибрано кверцетин при такому співвідношенні компонентів, мас. %: кверцетин 2,5-5,0 допоміжні речовини решта. Доцільно, щоб як допоміжні речовини було вибрано наповнювач, змащувальну речовину та ароматизатор харчовий. Доцільно, щоб як наповнювач було вибрано суміш пектину, глюкози та цукру у кількості 95,097,2 мас. %. Доцільно, щоб як змащувальну речовину було вибрано суміш стеарату магнію та тальку у співвідношенні від 1:1 до 1:10. Доцільно, щоб як ароматизатор харчовий було вибрано аромат апельсина або аромат банана, або аромат малини у кількості 0,05-0,3 мас. %. 7 Введення препаратів кверцетину в терапію ХНН має значний фармакоекономічний потенціал, який досягають при здійсненні винаходів. Він полягає у розширенні області застосування кверцетину за рахунок виявлення нових властивостей препаратів, створенні фармацевтичних засобів та композицій на основі кверцетину з таким якісним і кількісним складом компонентів, який би забезпечив підвищення рівня та розширення спектра специфічної активності, знизив або виключив негативні побічні ефекти, внаслідок чого досягається комплексний вплив на сечовидільну систему та дозволив би вирішити також багато соціальних проблем в лікуванні цієї патології. Відомо, що кверцетин виявляє протизапальну, антиоксидантну, капілярозміцнюючу, антисклеротичну, діуретичну активність. Важливою перевагою кверцетину є відсутність значущих побічних ефектів при тривалому застосуванні, можливість застосування у пацієнтів всіх вікових груп, виявлення високого комплаєнсу завдяки використанню цих природних засобів і відсутності боязні "отруєння" організму характерної для синтетичних ліків, при цьому вартість терапії цими препаратами стає прийнятною для більшості пацієнтів різних соціальних груп населення. Використання препаратів на основі кверцетину, які авторами названі "Квертин" та "Корвітин", виявило нефропротекторну дію кверцетину, тобто спроможність нормалізувати фільтраційнореабсорбційну функцію та морфоструктуру нирок; здатність відновлення і підтримки електролітного балансу на рівні фізіологічних значень при нирковій патології. В ході експерименту винахідниками представленого винаходу було знайдено, що кверцетин нормалізує фільтраційно-реабсорбційну функцію і морфоструктуру нирок, а також вміст ендогенного N-ацетилглюкозаміну при хронічній нирковій недостатності. Було також виявлено, що кверцетин відновлює і підтримує концентрацію хлоридів, натрію і калію, а також кальцію та фосфору, на рівні фізіологічних значень при хронічній нирковій недостатності. 93707 8 Кількісний вміст активної речовини - кверцетину, в фармацевтичній композиції обумовлений необхідним рівнем його специфічної активності. При кількості речовини менше значень, що заявляються, цей рівень не є достатнім. Застосування кверцетину більше значень, що заявляються, не призводить до значного підвищення рівня специфічної активності, може викликати алергічні реакції, а також приведе до порушень структурномеханічних властивостей лікарських форм. Допоміжні речовини, що використовуються у композиціях, включають, але не обмежують, наповнювач, змащувальну речовину та ароматизатор харчовий. Наводимо конкретні приклади здійснення винаходів. Нижченаведені приклади ілюструють аспекти даних винаходів, але не повинні розглядатися як такі, що мають обмежувальне значення. В прикладах 1-6 представлені експериментальні дані, що свідчать про переваги засобу для парентерального введення - Корвітин, що містить кверцетин та полівінілпіролідон у співвідношенні 1:9, перед засобами порівняння на фоні експериментальної ниркової недостатності. Приклади 7-11 свідчать про позитивну дію на перебіг хронічної ниркової недостатності засобу на основі кверцетину для перорального введення - Квертин, таблетки. Приклад 1. Дослідження середньоефективних доз Корвітину при парентеральному введенні в умовах експериментальної ниркової недостатності. Дослідження середньоефективних доз Корвітину при парентеральному введенні проводили на моделі ниркової недостатності. Ця патологія викликається у тварин шляхом підшкірного введення 2,5 % розчину хромату калію в дозі 0,7 мл/кг. Показовим впливом нефропротекторної дії препаратів є визначення швидкості клубочкової фільтрації (ШКФ) за кліренсом ендогенного креатиніну. Протягом дослідження у тварин визначали ШКФ за кліренсом ендогенного креатиніну. Результати досліджень наведені в таблиці 1. Таблиця 1 Функціональні показники нирок щурів з нирковою недостатністю при дослідженні середньоефективних доз Корвітину (n=36) Умови досліду Інтактний контроль Контрольна патологія Корвітин 50 мг/кг (1/100 ЛД50) Корвітин 25 мг/кг (1/200 ЛД50) Корвітин 12,5 мг/кг (1/400 ЛД50) Корвітин 6,25 мг/кг (1/800 ЛД50) Примітки: 1) * - р≤0,05 відносно інтактного контролю; 2) ** - р≤0,05 відносно контрольної патології. ШКФ, мл/хв 0,255±0,020 0,101±0,010* 0,196±0,019** 0,190±0,020** 0,139±0,015* 0,123±0,012* 9 93707 Результати дослідження свідчать, що у тварин контрольної групи патології відзначалось значне погіршення гломерулярної фільтрації, оскільки показник ШКФ знижувався в 2,5 разу у порівнянні з інтактними тваринами. На відміну від цього, при застосуванні Корвітину відбувалось збільшення показників ШКФ, яке найбільше було виражено в діапазоні доз 25 мг/кг - 50 мг/кг (середньоефективна доза Корвітину при парентеральному введенні в умовах розвитку ниркової недостатності у щурів становить 33,8 мг/кг). Приклад 2. Дослідження впливу Корвітину при парентеральному введенні на азотистий обмін у щурів в умовах розвитку хронічної ниркової недостатності. 10 Хронічну ниркову недостатність відтворювали шляхом підшкірного введення 0,1 % розчину сулеми в дозі 4 мг/кг тричі протягом трьох днів. Препарати Корвітин (33,8 мг/кг парентерально) та Леспенефрил (1,2 мл/кг перорально, що відповідає середній терапевтичній дозі для людини, перерахованій за допомогою коефіцієнтів видової чутливості) вводили 1 раз на добу, починаючи з сьомого дня експерименту. Для визначення впливу Корвітину на азотистий обмін у щурів з ХНН, на 21-у добу експерименту визначали концентрацію креатиніну й сечовини в крові та сечі і розраховували їх кліренси. Отримані дані наведені в таблиці 2. Таблиця 2 Показники азотистого обміну у щурів з хронічною нирковою недостатністю під впливом експериментальної терапії (n=64) Умови досліду Інтактний контроль Контрольна патологія Корвітин 33,8 мг/кг Леспенефрил 1,2 мл/кг Креатинін крові, мкмоль/л 57,0±5,0 295,3±13,7* 134,0±9,0** 111,0±8,2** Сечовина крові, ммоль/л 4,33±0,33 19,16±1,66* 8,46±0,66** 9,67±0,67** Кліренс креатиніну, мл/хв 0,266±0,007 0,55±0,05* 0,214±0,012** 0,193±0,009** Кліренс сечовини, мл/хв 0,123±0,006 0,031±0,003* 0,087±0,007** 0,074±0,007** Примітки: 1) * - р0,05 відносно інтактних тварин; 2) ** - р0,05 відносно групи контрольної патології. Дослідження фармакологічних властивостей Корвітину на експериментальній моделі ХНН у щурів показало, що даний засіб позитивно впливає на показники азотистого обміну, що підтверджується вірогідним зниженням рівня креатиніну й сечовини крові та збільшенням їх кліренсу, не поступаючись при цьому препарату Леспенефрил (відмінність невірогідна). Приклад 3. Дослідження впливу Корвітину при парентеральному введенні на перебіг деструктивних процесів у нирках щурів з нирковою недостатністю на тлі гломерулонефриту. Оцінювали вплив Корвітину на інтенсивність перебігу процесів деструкції у нирках в умовах розвитку ниркової недостатності на тлі аутоімунно го гломерулонефриту у щурів, що відтворювали підшкірним введенням 20 % емульсії гомогенату коркового шару нирок у суміші з повним ад'ювантом Фрейнда. Як показник інтенсивності перебігу деструктивних процесів у нирках використовували вміст ендогенного N-ацетилглюкозаміну (N-ацГА) у гомогенаті нирок, а також його загальної, вільної, та зв'язаної фракцій у сироватці крові станом на 120 добу досліду. Препарати Корвітин (33,8 мг/кг парентерально) та Леспенефрил (1,2 мл/кг перорально, що відповідає середній терапевтичній дозі для людини, перерахованій за допомогою коефіцієнтів видової чутливості) вводили одноразово, щоденно, починаючи з 90 доби експерименту, протягом місяця. 11 93707 12 Таблиця 3 Вміст ендогенного N-ацетилглюкозаміну у сироватці крові та паренхімі нирок щурів з гломерулонефритом та нирковою недостатністю під впливом експериментальної терапії (n=40) Умови досліду Інтактний контроль Контрольна патологія Корвітин Леспенефрил загальний 6,860,15 13,96±0,37* 9,81±0,82** 11,47±0,96** Вміст ендогенного N-ацетилглюкозаміну сироватка крові, ммоль/л зв'язаний вільний 5,04±0,13 1,820,07 13,470,41* 0,500,13* 8,62±0,78** 1,18±0,08**/ 10,66±0,95** 0,80±0,13* паренхіма нирок, мг/г 1,920,06 0,680,10* 1,10±0,11**/ 0,72±0,10* Примітки: 1) * - р0,05 відносно інтактної групи; 2) ** - р0,05 відносно групи контрольної патології; 3)  - р0,05 відносно тварин, що отримували препарат Леспенефрил. Аналіз експериментальних даних показує, що протягом дослідження у щурів з гломерулонефритом та нирковою недостатністю було відзначено значне підвищення у порівнянні з інтактними тваринами (приблизно в 2 рази) рівня загального та зв'язаного N-ацГА у сироватці крові та зниження вільної фракції, а також його вмісту у паренхімі нирок (табл. 3). Під впливом Корвітину відбувалось вірогідне підвищення вмісту N-ацГА у нирковій тканині (в 1,7 рази) та зниження його вмісту у сироватці крові, в першу чергу, за рахунок зв'язаної фракції. Це призводило до росту вмісту вільної фракції N-ацГА в 2,4 разу і свідчить про зниження інтенсивності деструктивних процесів у нирках тварин. При цьому, за впливом на вміст вільного N-ацГА та вміст N-ацГА у нирковій тканині Корвітин вірогідно перевищував препарат порівняння Леспенефрил. Таким чином, одержані експериментальні дані свідчать про те, що при нирковій недостатності на тлі аутоімунного гломерулонефриту у щурів Корвітин значно знижує інтенсивність деструкції у нирковій тканині, перевершуючи при цьому препарат Леспенефрил. Приклад 4. Дослідження впливу Корвітину при парентеральному введенні на показники функціонального стану нирок в умовах розвитку ниркової недостатності на тлі аутоімунного гломерулонефриту у щурів. Експериментальне дослідження проводили аналогічно прикладу 3. Станом на 120 добу дослідження визначали спонтанний та відносний діурез, рівень протеїнурії, швидкість клубочкової фільтрації (за кліренсом ендогенного креатиніну) та канальцеву реабсорбцію. Результати досліду наведено в таблиці 4. Таблиця 4 Показники функціонального стану нирок щурів з нирковою недостатністю на тлі гломерулонефриту під впливом експериментальної терапії (n=40) Умови досліду Інтактний контроль Контроль-на патологія Корвітин Леспенефрил Діурез, мл/доба Відносний діурез, % Протеїнурія, мг/доба ШКФ, мл/хв. Канальцева реабсорбція, % 7,57±0,17 50,53±0,47 2,13±0,56 0,278±0,011 98,10±0,05 4,33±0,43* 35,99±3,7* 144,0±20,10* 0,070±0,008* 95,71±0,10* 6,01±0,30** 8,34±0,51** 45,17±1,87** 53,75±2,17** 63,28±9,41** 79,47±9,88** 0,181±0,012** 0,158±0,013** 97,66±0,10**/ 96,20±0,40* Примітки: 1) * - р0,05 відносно інтактних тварин; 2) ** - p0,05 відносно групи контрольної патології; 3)  - р0,05 відносно тварин, що отримували препарат Леспенефрил. Протягом дослідження у тварин контрольної групи патології було відмічено вірогідне зменшення відносного діурезу у порівнянні з інтактними тваринами, високу протеїнурію (до 144 мг/доба), показник ШКФ був майже в 4 рази менший, ніж у інтактних тварин. Також у групі контрольної пато логії спостерігалось значне зниження показника канальцевої реабсорбції, що свідчить про пошкодження канальцевого апарата нирок. Встановлено, що при використанні Корвітину для лікування лабораторних тварин з нирковою недостатністю на тлі гломерулонефриту відбува 13 93707 ється покращення функціонального стану нирок щурів, що обумовлює загальний позитивний вплив препарату на перебіг захворювання. Порівняльний аналіз препарату Корвітин з відомим препаратом рослинного походження гіпоазотемічної дії показав, що по ефективності він не поступається засобу Леспенефрил, а за окремим показником (вплив на канальцеву реабсорбцію) перевершує його. Приклад 5. Дослідження впливу Корвітину при парентеральному введенні на показники перекисного окиснення ліпідів у щурів з нирковою недостатністю на тлі аутоімунного гломерулонефриту. Вивчено вплив Корвітину на показники перекисного окиснення ліпідів (ПОЛ) в умовах розвитку ниркової недостатності на тлі аутоімунного гломерулонефриту у щурів. Експериментальне дослідження проводили аналогічно прикладу 3. Станом 14 на 120 добу дослідження у тварин визначали вміст ТБК-чутливих продуктів та дієнових кон'югатів (ДК) у сироватці крові та гомогенаті ниркової тканини. Отримані дані наведені в таблиці 5. Результати досліджень свідчать, що у групі з контрольною патологією було відзначено вірогідне підвищення у 2 рази вмісту ТБК-чутливих речовин та ДК у сироватці крові протягом всього експерименту у порівнянні з інтактними тваринами. Саме така тенденція була відзначена також в групі, де тварини отримували лікування Леспенефрилом. На відміну від цього, під впливом Корвітину, розглянуті показники знижувались в середньому в 1,5 разу у порівнянні з контрольною патологією і були не тільки вірогідно меншими за показники тварин цієї групи, але й ще за показники щурів, що отримували препарат порівняння Леспенефрил. Таблиця 5 Показники ПОЛ щурів з нирковою недостатністю та гломерулонефритом під впливом експериментальної терапії (n=40) Умови досліду Інтактний контроль Контрольна патологія Корвітин Леспенефрил ТБК-чутливі продукти ТБК-чутливі продукти крові, мкмоль/л нирок, мкмоль/г ДК крові, мкмоль/л ДК нирок, мкмоль/г 2,90±0,27 42,82±3,78 56,65±5,09 3,82±0,33 6,11±0,61* 97,52±11,73* 111,21±11,36* 9,36±0,97* 3,78±0,24**/ 5,47±0,43* 50,73±4,46**/ 66,94±5,64** 72,70±5,08**/ 93,52±7,87* 5,57±0,46**/ 7,67±0,42* Примітки: 1) * - р0,05 відносно інтактних тварин; 2) ** - р0,05 відносно групи контрольної патології; 3)  - р0,05 відносно тварин, що отримували Леспенефрил. Аналогічна картина спостерігалась при аналізі динаміки вмісту ТБК-чутливих речовин та ДК в гомогенаті нирок дослідних тварин. Тут також слід відзначити, що під впливом Корвітину вміст ТБК-чутливих речовин та ДК у тканині нирок був вірогідно нижчим приблизно у 2 рази, ніж у тварин з контрольною патологією, а також, ніж у тварин, що отримували препарат порівняння Леспенефрил. Таким чином, результати проведеного дослідження свідчать, що при розвитку у щурів ниркової недостатності на тлі аутоімунного гломерулонефриту Корвітин, на відміну від Леспенефрилу, вірогідно зменшує вираженість процесів вільнорадикального окислення. Приклад 6. Дослідження впливу препарату Корвітин при парентеральному введенні на електролітний обмін у щурів з експериментальною нирковою недостатністю. Оцінювали вплив Корвітину при парентеральному введенні на електролітний обмін у щурів з експериментальною нирковою недостатністю, що викликана внутрішньошлунковим введенням 1 % водного розчину етиленгліколю. Препарати Корвітин (парентерально) та Леспенефрил (перорально) в встановлених терапевтичних дозах вводили одноразово, щоденно, протягом 14 діб. Рівень кальцію, фосфору, хлоридів, натрію і калію в крові і сечі тварин визначали в динаміці на 7 і 14 добу (таблиця 6 та 7). 15 93707 16 Таблиця 6 Вміст кальцію та фосфору в крові і сечі щурів з експериментальною нирковою недостатністю під впливом препаратів Корвітин і Леспенефрил (n=32) Вміст кальцію, ммоль/л кров сеча 7 доба 1,35±0,09 6,804±0,79 2,89±0,181 35,66±7,331 1,08±0,092 35,0±4,131 2 1,53±0,26 30,91±3,351 14 доба 1,32±0,07 5,21±0,991 0,57±0,0671 46,05±6,621 1,22±0,242,3 15,95±2,111,2 1 0,65±0,1 15,04±2,951,2 Група тварин Інтактний контроль Патологія Патологія + Корвітин Патологія + Леспенефрил Інтактний контроль Патологія Патологія+ Корвітин Патологія+ Леспенефрил Вміст фосфору ммоль/л кров сеча 2,28±0,15 2,65±0,098 2,20±0,22 2,24±0,122 36,96±5,24 7,94±1,51 43,03±6,142 35,52±2,9982 2,29±0,16 2,44±0,16 2,29±0,17 2,67±0,16 44,31±5,91 28,9±3,481 38,66±4,52,3 25,9±2,541 Примітки: 1) 1 - р0,05 відносно інтактної групи; 2) 2 - р0,05 відносно групи контрольної патології; 3) 3 - р0,05 відносно тварин, що отримували препарат порівняння. Таблиця 7 Вміст хлоридів, натрію і калію в крові і сечі щурів з експериментальною нирковою недостатністю під впливом препаратів Корвітин і Леспенефрил (n=32) Група тварин Хлориди, ммоль/л кров сеча Інтактний кон97,86±0,54 троль Патологія 107,23± 3,371 Патологія+ 83,705± 2,891,2 Корвітин Патологія+ 84,162± 4,041,2 Леспенефрил Натрій, ммоль/л кров сеча 7 доба 131,83±31,025 673,47±98,05 1 130,78±3,94 1 90,32± 10,97 Калій, ммоль/л кров сеча 121,35±7,25 1 168,4± 8,94 2,501±0,39 0,814± 0,144 3,93±0,588 1 27,426± 0,031 264,24±62,552 95,76± 7,081,2,3 147,22± 10,812 1,017± 0,1621 9,79± 2,261,2,З 414,81±84,151 162,34± 4,291 14 доба Інтактний кон97,31±0,83 171,83± 38,89 123,36± 3,76 троль 1 Патологія 109,57± 3,41 491,89± 86,0041 66,11±9,811 Патологія+ 96,09± 6,042,3 208,38± 36,372 148,55± 7,581,2 Корвітин Патологія+ 110,54± 2,771 188,57± 64,112 146,5± 9,111,2 Леспенефрил 134,14± 12,02 0,599±0,11 116,97± 6,92 2,5±0,306 1 168,17± 9,91 0,466± 0,063 14,78±2,921,2 4,45±0,309 1 27,47±1,431 124,67± 7,932 1,768 ±0,1351,2 4,53±0,712 139,53± 7,851,2 1,66 ±0,1981,2 5,85±0,942 Примітки: 1) 1 - р0,05 відносно інтактної групи; 2) 2 - р0,05 відносно групи контрольної патології; 3) 3 - р0,05 відносно тварин, що отримували препарат порівняння. Розвиток експериментальної ниркової недостатності в групі контролю патології характеризується порушенням електролітного обміну. Встановлено, що Корвітин утримує концентрацію електролітів (натрію, калію, хлоридів, фосфору і кальцію) в крові тварин і регулює їх екскрецію з сечею, порушену при експериментальній нирковій недостатності. Порівняльний аналіз препарату Корвітин з відомим препаратом рослинного походження показав, що по ефективності він не поступається засобу Леспенефрил, а за окремим показником (утримання концентрації хлоридів, фосфору і кальцію в крові) перевершує його. Приклад 7. Дослідження діуретичної дії препарату Квертин при пероральному введенні при експериментальній нирковій недостатності. Експериментальну ниркову недостатність моделювали у білих щурів лінії Vistar шляхом двократної підшкірної ін'єкції хромату калію в дозі 15 мг/кг. Вивчення впливу препарату Квертин (20 17 93707 мг/кг за діючою речовиною перорально) на індукований діурез при експериментальній нирковій недостатності проведено порівняно з препаратами Хофітол (20 мг/кг за діючою речовиною перорально, "Rosa PhytoPharma", Франція) і Канеф 18 рон Н (150 мг/кг за таблетковою масою перорально, "Віоnоrіса", Німеччина) у терапевтичних дозах для людини у перерахунку на тварин. Препарати вводили протягом 14 діб. Оцінювали індукований діурез у щурів і питому щільність сечі. Таблиця 8 Індукований діурез і питома щільність сечі у щурів з експериментальною нирковою недостатністю під впливом препаратів Квертин, Хофітол і Канефрон Н (n=40) Групи тварин Інтактний контроль Патологія Патологія + Хофітол Патологія + Канефрон Н Патологія + Квертин Індукований діурез, мл/доба 6,2±0,73 14 доба патології 3,48±0,191 5,12±0,542 4,92±0,272 7,28±0,342,3,4 Питома щільність, умовн.од. 1,0087±0,0006 0,018±0,00041 1,007±0,00041,2 1,0157±0,00151,2 1,0083±0,00082,4 Примітки: 1 1) - р