Поліморфні модифікації аналога епотилону, спосіб їх одержання (варіанти), фармацевтична композиція на їх основі

1. Кристалічна поліморфна модифікація аналога епотилону формули І OH O , 3 75365 4 котра являє собою Форму А, яка характеризується суміш охолоджують до кімнатної температури, переважно такою дебаєграмою, як показано на перемішуючи протягом 18 годин, суміш додатково фіг. 1, і переважно таким спектром комбінаційного охолоджують до приблизно 5°С впродовж приблирозсіювання (раманівський спектр), як показано на зно двох годин і виділяють з неї кристалічну Фофіг. 5, або Форму В, яка характеризується переварму А. 10. Спосіб за п. 7, який відрізняється тим, що жно такою дебаєграмою, як показано на фіг. 2, і переважно таким спектром комбінаційного розсіюзазначену суспензію зазначеного аналога формування (раманівський спектр), як показано на фіг. 6. ли І в етилацетаті нагрівають до температури при3. Кристалічна поліморфна модифікація аналога близно 75°С принаймні впродовж однієї години до епотилону формули І утворення розчину, зазначений розчин охолоджують впродовж близько двох годин до температури O Me приблизно 50°С, додаючи зазначені зародкові криS стали у той момент, коли температура дорівнює Me Me близько 60°С, розчин охолоджують до температуOH N ри приблизно 30°С впродовж приблизно трьох І Me годин, після чого температуру розчину знижують Me Me HN до -10°С впродовж приблизно трьох годин, причоMe му протягом однієї години з цих трьох годин до O OH O реакційної суміші по краплинах додають зазначену , кількість циклогексану, витримують одержану сукотра являє собою Форму А, яка характеризується міш при температурі -10°С впродовж приблизно тим, що її розчинність у воді дорівнює 0,1254, розоднієї години і виділяють з неї кристалічну Форму чинність у 3%-ому водному розчині полісорбату 80 А. дорівнює 0,2511, температура плавлення з розк11. Спосіб одержання кристалічної поліморфної ладенням становить 182-185°С і теплота розчимодифікації, котра являє собою Форму В аналога нення дорівнює 20,6 кдж/мол, або Форму В, яка епотилону формули 1 за п. 1, в якому проводять характеризується тим, що її розчинність у воді нагрівання суспензії зазначеного аналога формули дорівнює 0,1907, розчинність у 3%-ому водному І у приблизно 40-50 мл етилацетату на один грам розчині полісорбату 80 дорівнює 0,5799, темперазазначеного аналога до температури приблизно тура плавлення з розкладенням становить 19175°С-80°С, витримування суспензії при цій темпе199°С і теплота розчинення дорівнює 9,86 ратурі впродовж приблизно однієї години до одеркдж/мол. жання розчину, витримування при цій температурі 4. Кристалічна поліморфна модифікація за будьвпродовж близько 30 хвилин, охолодження розчияким з пп. 1, 2 або 3, яка відрізняється тим, що ну впродовж приблизно двох годин до 30°С, подазазначена поліморфна модифікація являє собою льше зниження температури розчину до -10°С Форму А. впродовж приблизно однієї години, при цьому про5. Кристалічна поліморфна модифікація за будьтягом тридцяти хвилин до реакційної суміші по яким з пп. 1, 2 або 3, яка відрізняється тим, що краплинах додають циклогексан у приблизному зазначена поліморфна модифікація являє собою кількісному відношенні до етилацетату 1:2-2:2, Форму В. витримування одержаної суміші при температурі 6. Кристалічна речовина, яка являє собою суміш 10°С впродовж приблизно двох годин і виділення з Форми А та Форми В за будь-яким з пп. 1, 2 або 3. реакційної суміші кристалічної Форми В. 7. Спосіб одержання кристалічної поліморфної 12. Спосіб за п. 11, який відрізняється тим, що модифікації, котра являє собою Форму А аналога зазначену суспензію зазначеного аналога формуепотилону формули І за п. 1, в якому проводять ли І в етилацетаті нагрівають до температури принагрівання суспензії зазначеного аналога формули близно 78°С з утворенням розчину, розчин охолоІ у приблизно 8-16 мл етилацетату на один грам джують до температури приблизно 10°C впродовж зазначеного аналога до температури приблизно приблизно двох годин, додають зародкові криста75°С, витримування суспензії при цій температурі ли у той момент, коли температура дорівнює 10°С, протягом однієї години, додавання циклогексану в розчин далі охолоджують до -10°С впродовж приприблизному відношенні до етилацетату 1:2-2:2, близно двох годин, при цьому протягом тридцяти природне охолодження суміші до кімнатної темпехвилин до реакційної суміші по краплинах додають ратури з перемішуванням впродовж близько 12-96 зазначену кількість циклогексану, витримують годин, подальше охолодження до температури одержану суміш при -10°С впродовж приблизно приблизно 5°С впродовж двох годин і виділення з двох годин і виділяють з неї кристалічну Форму В. реакційної суміші кристалічної Форми А. 13. Спосіб одержання кристалічної поліморфної 8. Спосіб за п. 7, який відрізняється тим, що цикмодифікації, котра являє собою Форму В аналога логексан додають у кількісному співвідношенні з епотилону формули І за п. 1, в якому проводять етилацетатом, застосовуваним для одержання нагрівання суспензії зазначеного аналога формули зазначеної суспензії, рівному 1:2. І у толуолі в кількості близько 10-20 мл на один 9. Спосіб за п. 7, який відрізняється тим, що заграм зазначеного аналога до температури приблизначену суспензію зазначеного аналога формули І зно 75°С-80°С, витримування реакційної суміші в етилацетаті нагрівають до температури приблипри цій температурі впродовж близько 30 хвилин, зно 75°С, уводять у цю суспензію зародкові крисохолодження суміші до температури приблизно тали і суміш витримують впродовж близько 30 20°С, перемішування при цій температурі впрохвилин, після чого при температурі суміші близько 70°С додають зазначену кількість циклогексану, 5 75365 6 довж приблизно 18 годин і виділення із суміші криморфна модифікація являє собою суміш Форми А сталічної Форми В. та Форми В. 14. Фармацевтична композиція, яка містить як ак18. Спосіб лікування раку або інших проліфератитивний компонент ефективну кількість кристалічної вних захворювань, в якому вводять в організм поліморфної модифікації за будь-яким з пп. 1, 2 ссавця, що потребує лікування, ефективну кільабо 3 і принаймні один прийнятний фармацевтичкість кристалічної поліморфної модифікації за ний носій, наповнювач або розріджувач. будь-яким з пп. 1, 2 або 3. 15. Фармацевтична композиція за п. 14, яка відрі19. Спосіб за п. 18, який відрізняється тим, що зняється тим, що зазначена кристалічна полізазначена кристалічна поліморфна модифікація морфна модифікація являє собою Форму А. являє собою Форму А. 16. Фармацевтична композиція за п. 14, яка відрі20. Спосіб за п. 18, який відрізняється тим, що зняється тим, що зазначена кристалічна полізазначена кристалічна поліморфна модифікація морфна модифікація являє собою Форму В. являє собою Форму В. 17. Фармацевтична композиція за п. 14, яка відрі21. Спосіб за п. 18, який відрізняється тим, що зняється тим, що зазначена кристалічна полікристалічну поліморфну модифікацію вводять парентеральним шляхом. Даний винахід стосується кристалічних поліморфних модифікацій сильнодіючого аналога епотилону, котрий характеризується поліпшеними властивостями. Епотилони являють собою макролідні сполуки, застосовувані в галузі фармацевтики. Наприклад, виявлено, що епотилони А та В з хімічною структурою мають властивість стабілізувати мікроканальці, подібну до дії паклітакселя (TAXOL ), і, отже, характеризуються цитотоксичною активністю проти клітин, що швидко розростаються, наприклад, пухлинних клітин, або ж проти будь-якого іншого гіперпроліферативного клітинного захворювання [див. Hofie, G., et al., Angew. Chem. lnt. Ed. Εngl., Vol.35, No. 13/14, 1567-1569 (1996); міжнародну заявку W093/10121, опубліковану 27 травня 1993 року, та міжнародну заявку W097/19086, опубліковану 29 травня 1997 року]. Синтезовано різні аналоги епотилону, що їх, імовірно, можна використовувати для лікування багатьох різновидів раку та інших аномальних проліферативних захворювань. Такі аналоги описані у [Нойе, G., et al., Id; Nicoiaou, К.С., et al., Angew. Chem. Int. Ed. EngI., VoI.36, No. 19, 20972103 (1997) та Su, D.-S, et al., Angew. Chem. lnt. Ed. Engl., Vol.36, No. 19,2093-2097(1997)]. Найкращим аналогом епотилону, котрий, як виявлено, має найбільш високу активність, є [1S[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11дигідрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2 (2-метил-4-тіазоліл)етеніл]-4-аза-17оксабіцикло[14.1.0] гептадекан-5,9-діон. Згідно із даним винаходом, створено дві кристалічні форми запропонованого аналога епотилону. Ці поліморфні модифікації, позначені як Форма А та Форма В, відповідно являють собою нові кристалічні форми; їх визначення наведені у цьому описі далі за текстом. На Фігурі 1 зображена порошкова рентгенограма (дебаєграма) (СuK =1,5406Å при кімнатній температурі) Форми А аналога епотилону за даним винаходом. На Фігурі 2 зображена порошкова рентгенограма (дебаєграма) (СuK =1,5406Å при кімнатній температурі) Форми В аналога епотилону за даним винаходом. На Фігурі 3 зображена дебаєграма суміші Форм А та В (СuK =1,5406Å при кімнатній температурі) аналога епотилону за даним винаходом. На Фігурі 4 наведено порівняння між змодельованою та фактичною порошковими рентгенограмами (дебаєграмами) Форм А та В аналога епотилону за даним винаходом. На Фігурі 5 наведено спектр комбінаційного (раманівського) розсіювання для Форми А аналога епотилону за даним винаходом. На Фігурі 6 наведено спектр комбінаційного (раманівського) розсіювання для Форми В аналога епотилону за даним винаходом. На Фігурі 7 наведено спектр комбінаційного (раманівського) розсіювання для суміші Форм А та В аналога епотилону за даним винаходом. На Фігурі 8 зображена твердотільна конформація Форми А аналога епотилону за даним винаходом. На Фігурі 9 зображена твердотільна конформація Форми В аналога епотилону за даним винаходом. Згідно з даним винаходом створено дві кристалічні поліморфні модифікації аналога епотилону, представлені формулою I 7 Виявлено, що одна з цих поліморфних модифікацій, позначена як Форма А, характеризується особливо кращими властивостями. Запропонований винахід стосується кристалічних поліморфів Форми А та Форми В, а також їх сумішей. Крім того, запропонований винахід стосується застосування цих кристалічних форм для лікування пацієнтів з різними видами раку та інших проліферативних захворювань, а також фармацевтичних композицій, що містять ці форми. Згідно з даним винаходом запропоновано поліморфи (поліморфні модифікації) аналога епотилону, представленого Формулою I Аналог епотилону, відображений формулою і, хімічно являє собою [1S-[1R*,3R*(E), 7Р*,10S*11R*,12R*,16S*]]-7,11-дигідрокси8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-(2-метил-4тіазоліл)етеніл]-4-аза-17оксабіцикло[14.1.0]гептадекан-5,9-діон. Цей аналог та його одержання описані в патентній заявці США 09/170582, поданій 13 жовтня 1998 року. Поліморфні модифікації аналога, відображеного наведеною вище формулою I, являють собою агенти, що стабілізують мікроканальці. Отже, вони є придатними для лікування багатьох видів раку та інших проліферативних захворювань, включаючи, крім іншого, такі: - рак, у тому числі рак сечового міхура, молочної залози, товстої кишки, нирок, печінки, легенів, яєчників, підшлункової залози, шлунка, шиї, щитовидної залози та шкіри, включаючи плоскоклітинний рак; - пухлини кровотворних тканин лімфоїдного походження, у тому числі лейкоз, гострий лімфолейкоз, гострий лімфобластний лейкоз, B-клітинну лімфому, Т-клітинну лімфому, лімфому Ходжкіна, неходжкінську лімфому, лейкозний ретикулоендотеліоз та лімфому Беркітта; - пухлини кровотворних тканин мієлоїдного походження, у тому числі гострі та хронічні мієлоїдні лейкози та промієлоїдний лейкоз; 75365 8 - пухлини мезенхімного походження, у тому числі фібросаркома та рабдоміосаркома; - інші пухлини, у тому числі меланома, семінома, ембріональний рак, нейробластома та гліома; - пухлини центральної та периферичної нервової системи, у тому числі астроцитома, нейробластома, гліома та невриноми; - пухлини мезенхімного походження, у тому числі фібросаркома, рабдоміосаркома та остеогенна саркома, а також - інші пухлини, у тому числі меланома, ксеродерма пігментна, кератоакантома, семінома, фолікулярний рак щитовидної залози та ембріональний рак (тератокарцинома). Поліморфи за цим винаходом також інгібують ангіогенез, впливаючи у такий спосіб на ріст пухлин, що дозволяє забезпечувати лікування пухлин та порушень, пов'язаних з пухлинами. Такі антіангіогенні властивості також можна застосовувати для лікування інших хворобливих станів, що реагують на антіангіогенні агенти, включаючи, крім іншого, певні форми сліпоти, викликаної васкуляризацією сітківки, а також артрит (зокрема запальний артрит), розсіяний склероз, повторний стеноз та псоріаз. Поліморфні модифікації аналога, відображеного формулою I, індукують або інгібують апоптоз і процес фізіологічного відмирання клітин, що є вирішальним для нормального розвитку та гомеостазису. Зміни шляхів апоптозу сприяють патогенезу багатьох захворювань людини. Поліморфи за даним винаходом - як модулятори апоптозу - можна застосовувати при лікуванні різних захворювань людини з відхиленнями типу апоптозу, включаючи, крім іншого, рак та передракові патологічні зміни, захворювання, пов'язані з реакцією імунної системи, а також вірусні інфекції, дегенеративні захворювання опорно-рухового апарата та хворобу нирок. Не обмежуючись розгляданням будь-якого конкретного механізму чи морфології, слід зазначити, що подібні кристалічні форми епотилону, відображені формулою I, можна застосовувати також для лікування інших хворобливих станів, ніж рак чи інші проліферативні захворювання. До таких хворобливих станів належать, крім іншого, вірусні інфекції, наприклад, вірус герпесу, поксвірус, вірус Епстайна-Барра, Синдбіс-вірус та аденовірус, а також аутоімунні захворювання, наприклад, системний червоний вовчак, опосередковуваний імунною системою гломерулонефрит, ревматоїдний артрит, псоріаз, запальні захворювання кишечника та аутоімунний цукровий діабет; нейродегенеративні порушення, наприклад, хвороба Альцгеймера, слабоумство, пов'язане із СНIДом, хвороба Паркінсона, бічний аміотрофічний склероз, пігментний ретиніт, атрофія спинного мозку та дегенерація мозочка, СНIД, мієлодиспластичні синдроми, апластична анемія, ушкодження ішемічного характеру, зумовлені інфарктом міокарда, удари та ушкодження, викликані ішемічною реперфузією, рестеноз, аритмія, атеросклероз, захворювання печінки, викликані отруєнням токсинами або алкогольним отруєнням, гематологічні захворювання, наприклад, хронічна анемія та гіпопластична анемія, дегенеративні 9 75365 10 захворювання опорно-рухового апарата, наприсі. Аналог епотилону формули I (у вигляді аморфклад, остеопороз та артрит; чутливий до аспірину ної речовини) суспендують у придатному розчинриносинусит, муковісцидоз, розсіяний склероз, нику, в оптимальному варіанті - у змішаному роззахворювання нирок та біль у разі наявності раку. чиннику, наприклад, у суміші Ефективну кількість поліморфних модифікацій етилацетат/хлористий метилен/триетиламін, очиза цим винаходом, зокрема, Форми А, може вищають, наприклад, за допомогою гель-фільтрації значити пересічний фахівець у даній галузі; прибчерез шар силікагелю і кристалізують з охололизний діапазон їх дозування для людини станодженням до температури близько 5°С, одержуючи вить 0,05-200мг/кг/день, причому їх можна вводити кристалічну речовину, котра являє собою суміш у вигляді однократної дози або ж у вигляді окреФорми А та Форми В. На стадії очищення із застомих невеличких доз, наприклад, від 1 до 4 разів на суванням суміші розчинників, котра містить такий добу. В оптимальному варіанті дозування полікомпонент, як хлористий метилен, видаляють реморфів за цим винаходом становить менше від штки використовуваних при синтезуванні розчин100мг/кг/день, причому їх вводять або у вигляді ників, котрі можуть заважати процесу кристалізаоднократної дози, або ж у вигляді 2 -4 окремих ції. доз. Слід усвідомлювати, що рівень конкретної Зазвичай змішування очищеної речовини з дози і частота введення доз в організм будь-якого обмеженою кількістю етилацетату і нагрівання конкретного пацієнта може варіюватися і залежить одержаної суспензії приблизно до 75-80°С призвовід цілої низки факторів, включаючи активність дить до утворення Форми А. Під обмеженою кільконкретної застосовуваної сполуки, її стійкість щокістю розуміють близько 8-16мл, а в оптимальному до процесів обміну речовин, тривалість дії цієї варіанті - близько 8-12мл етилацетату на 1 грам сполуки, типу, віку, ваги тіла, загального стану очищеного матеріалу. В процесі нагрівання розчиздоров'я, статі та дієти пацієнта, способу та часу ну утворюється тонка суспензія, котра, як було застосування, швидкості виділення (вивільнюванвиявлено, містить переважно Форму В. При темня), комбінації лікарських препаратів та ступеня пературі близько 75°С суспензія гусне; було виявтяжкості конкретного хворобливого стану. Полілено, що при цьому утворюється Форма А. Суморфні модифікації за цим винаходом в оптимаспензію витримують при температурі приблизно льному варіанті вводять парентеральним шляхом, 75-80°С впродовж 1 години, що дозволяє пересвіпроте цей опис також охоплює інші способи застодчитися в завершеності процесу утворення Форми сування, котрі є очевидними для фахівців у галузі А; протягом цього часу до суспензії додають циконкології. В оптимальному варіанті ці сполуки залогексан у відношенні до етилацетату приблизно стосовують для лікування тварин, переважно сса1:2-2:2 (в оптимальному варіанті - у відношенні вців, таких як людина та домашні тварини, наприприблизно 1:2) і суміш залишають охолоджуватися клад, собаки, кішки і т.п., у разі виявлення в їх до кімнатної температури. При цій температурі організмі зазначених порушень. суміш перемішують впродовж приблизно 12-96 Препарати аналогів епотилону, відображених годин. Після цього суміш охолоджують до близько формулою і, описані в патентній заявці США 5°С; приблизно через 2 години при цій температурі 09/170582, згідно з якою зазначений аналог епотивипадають кристали аналога епотилону Форми А. лону одержують у вигляді олії, котру можна оброФорму А одержують як з високим виходом кінцевобляти за допомогою хроматографії і очищати, го продукту, так і з високим ступенем чистоти. одержуючи в результаті аморфний порошок. ОпАльтернативні технології одержання Форми А тимальний спосіб одержання описано у продовпередбачаютьдодавання зародкових кристалів. жуючій заявці 09/528526, поданій 20 березня 2000 Згідно з наведеним нижче описом, використовують року. За цим способом одержання продукту (стозародкові кристали Форми А; але також можуть совно аналогів, відображених формулою I), епотивикористовувати зародкові кристали Форми В або лон В реагує з азидним донорним агентом та буїх суміші. За однією з таких технологій очищувану ферним агентом у присутності паладієвого речовину розчиняють в обмеженій кількості етилакаталізатора та відновлювача і з утворенням процетату (як описано вище) і нагрівають при темпеміжного продукту, представленого формулою ратурі приблизно 75°С, додають зародкові кристали, і суміш витримують протягом близько 30 хвилин. Після цього по краплинах додають зазначену вище кількість циклогексану, підтримуючи температуру близько 70°С. Потім суміш охолоджують до 20°С і перемішують при цій температурі впродовж 18 годин, після чого охолоджують до 5°С і механічно відділяють (наприклад, шляхом фільтрування) білі кристали Форми А. За другою технологією початковий розчин речовини в етилацетаті нагрівають до 75°С впродовж принаймні однієї години до утворення потрібного розчину. Розчин охолоджують до Після цього проміжний продукт зазнає макротемператури близько 50°С впродовж приблизно лактонізації з утворенням аналога, представленодвох годин, додаючи зародкові кристали Форми А го формулою I. На цей час виявлено, що цей анау той момент, коли температура дорівнює приблилог - у кристалічній формі - складається із суміші зно 60°С. Кристали починають випадати при темФорм А та В, як детально викладено у цьому опипературі близько 55°С. Температуру знову знижу 11 75365 12 ють приблизно до 20°С впродовж ще двох годин, писаної, сирий продукт перетворюють на суспенпричому протягом однієї години з цих двох годин зію в аналогічній кількості етилацетату і нагрівають по краплинах додають циклогексан, як описано до приблизно 78°С до розчинення, після чого вивище. Утворену суспензію додатково охолоджують тримують при цій температурі протягом близько впродовж двох годин до -10°С і витримують при тридцяти хвилин. Розчин охолоджують до приблицій температурі протягом ще однієї години. Після зно 10°С впродовж приблизно двох годин і додацього суспензію фільтрують, одержуючи білі крисють зародкові кристали Форми А у той момент, тали Форми А. коли температура дорівнює приблизно 10°С. ТемЗа ще однією технологією речовину розчиняпературу знову знижують протягом двох годин до ють (суспендують) у більшій кількості наприклад, 10°С, причому протягом тридцяти хвилин з цього принаймні у близько 40мл/г етилацетату, і утворечасу по краплинах додають потрібну кількість цикну суспензію нагрівають при температурі близько логексану. Температуру -10°С витримують впро80°С до утворення розчину, після чого розчин оходовж двох годин. Кінцеву суспензію фільтрують, лоджують до температури близько 70°С впродовж одержуючи білі кристали Форми В. приблизно однієї години. Зародкові кристали ФорЗгідно з іще однією альтернативною техноломи А додають у той момент, коли температура гією, очищувану речовину змішують з іншим роздорівнює приблизно 70°С. Після цього впродовж чинником (в оптимальному варіанті - з толуолом) у іще трьох годин температуру знижують приблизно кількості близько 10-20мл на 1 грам і нагрівають до 30°С. Кристали починають випадати при темдо 75-80°С впродовж 30хв., після чого охолоджупературі близько 65°С. Температуру знижують до ють до 20°С і перемішують при цій температурі 10°С впродовж іще трьох годин, з яких протягом впродовж 18 годин. Білі кристали Форми В виділятридцяти хвилин по краплинах додають циклогекють із суспензії механічним шляхом. Вихід і чистосан у зазначеній вище кількості. Температуру ту одержаної за цією технологією Форми В слід 10°С підтримують протягом ще однієї години. вважати дуже високими. Створену суспензію фільтрують, одержуючи крисНа Фігурах 1-3 наведені дебаеграми (пороштали Форми А. Вихід і чистоту одержаної за цією кові рентгенограми) відповідно Форм А та В аналотехнологією Форми А слід вважати дуже високими. га за цим винаходом і суміші цих форм. На Фіг.4 Представлену формулою I Форму В запропонаведене порівняння змодельованих на основі нованих за цим винаходом аналогів епотилону монокристалічних структур дебаєграм Форм А та В одержують шляхом перетворення сирої речовини з фактичними дебаєграмами кожної з цих Форм. на суспензію в більшій кількості етилацетату (тобРентгенограми одержують за допомогою приладу то в кількості близько 40-50мл на 1 грам) і нагрі"Philips Xpert" з генераторним джерелом із паравання при 70-80°С впродовж однієї години з утвометрами 44кВ і 40мА та λ (СuK )=1,5406Å при кімренням розчину, що його далі витримують при цій натній температурі. Результати, що їх наведено температурі впродовж близько тридцяти хвилин. далі у тексті, відображено на Фігурах 1-4 і зібрано Розчин охолоджують до температури близько в Таблицях 1 та 2 (в яких підсумовано дані), до30°С впродовж приблизно двох годин, причому зволяють чітко визначити, що Форми А та В аналокристали починають випадати при температурі га епотилону за цим винаходом мають різні крисприблизно 38°С. Після цього температуру знижуталічні структури. В наведених нижче таблицях ють приблизно до -10°С впродовж однієї години, інтенсивності піків в інтервалі значень від 1 до 12 причому протягом тридцяти хвилин з цієї однієї класифікуються як дуже низькі, в інтервалі значень години по краплинах додають потрібну кількість від 13 до 32 - як низькі, в інтервалі значень від 33 циклогексану. Кінцеву суспензію витримують при до 64 - як середні, в інтервалі значень від 65 до 87 10°С протягом ще двох годин і фільтрують, одер- як високі, а в інтервалі значень від 88 до 100 - як жуючи білі кристали Форми В. дуже високі. За технологією, альтернативною щодо вищеоТаблиця 1 Значення для Форми А Положення піка (два тета) (СuK =1,5406Å при кімнатній температурі) 1 5,69 6,76 8,38 11,43 12,74 13,62 14,35 15,09 15,66 16,43 Відносна інтенсивність піка 2 Дуже низька Дуже низька Дуже низька Низька Дуже низька Дуже низька Дуже низька Дуже низька Низька Дуже низька Положення піка (два тета) 3 21,06 21,29 22,31 23,02 23,66 24,18 24,98 25,50 26,23 26,46 Відносна інтенсивність піка 4 Дуже висока Низька Низька Низька Низька Дуже низька Низька Низька Дуже низька Дуже низька 13 1 17,16 17,66 18,31 19,03 19,54 20,57 75365 14 Продовження таблиці 1 2 Дуже низька Дуже низька Низька Низька Середня Низька 3 27,59 28,89 29,58 30,32 31,08 31,52 4 Дуже низька Дуже низька Дуже низька Дуже низька Дуже низька Дуже низька Таблиця 2 Значення для Форми В Положення піка (два тета) (СuK =1,5406Å при кімнатній температурі) 6,17 10,72 12,33 14,17 14,93 15,88 16,17 17,11 17,98 19,01 19,61 20,38 21,55 Відносна інтенсивність Положення піка (два піка тета) Дуже низька 21,73 Дуже низька 22,48 Низька 23,34 Низька 23,93 Середня 24,78 Середня 25,15 Середня 25,90 Середня 26,63 Низька 27,59 Дуже висока 28,66 Середня 29,55 Середня 30,49 Середня 31,22 На Фігурах 5-7 показані спектри комбінаційного розсіювання (раманівські зсуви) відповідно Форм А та В аналога за цим винаходом і суміші цих форм. Спектри також свідчать про наявність двох різних кристалічних форм (зокрема, смуги при 3130см-1 і 3115см-1). Відмінні фізичні характеристики двох поліморфних форм показані нижче у Таблиці 3. Кало Відносна інтенсивність піка Середня Дуже висока Середня Середня Середня Низька Низька Середня Дуже низька Низька Низька Низька Низька риметричні вимірювання в розчинах виконують в етанолі при 25°С за допомогою приладу "Thermometrics Microcatorimeter". Розчинність також визначають при 25°С. З перегляду цілої низки даних, зокрема, теплоти розчинення, стає очевидним той факт, що Форма А є стабільнішою, і, таким чином, Формі А слід віддати перевагу. Таблиця 3 Характеристика Розчинність у воді Розчинність у 3%-му полісорбаті 80 (водному) Теплота розчинення Відображені формулою l Форма А та Форма В аналогів епотилону (див. вище) додатково характеризуються параметрами елементарної комірки, значення яких одержують за допомогою рентгеноструктурного аналізу монокристала (див. ниж Форма А 0,1254 0,2511 20,6кдж/мол че). Детальний розрахунок елементарних комірок можна знайти в [Розділі 3 (Chapter 3) наукової праці авторів Stout and Jensen (X-Ray Structure Determination: A Practicat Guide. MacMillian Co., New York, NY(1968)]. Параметри елементарної комірки Форми А а=14,152(6)Å b=30,72(2)Å с=6,212(3)Å Об'єм=2701(4)Å Просторова група Ρ212121 Орторомбічна Молекули/елементарна комірка 4 Густина (розрах.) (г/см3) 1,247 Температура плавлення 182-185°С (розкладення) Параметри елементарної комірки Форми В Розміри комірки a=16,675(2)Å Розміри комірки Форма В 0,1907 0,5799 9,86кдж/мол 15 75365 b=28,083(4)Å с=6,054(1)Å Об'єм=2835(1)Å Ρ212121 Орторомбічна 4 1,187 191-199°С (розкладення) Просторова група Молекули/елементарна комірка Густина(розрах.)(г/см3) Температура плавлення Відмінності між Формами А та В аналога епотилону за цим винаходом далі поілюстровано на прикладі показаних відповідно на Фіг.8 та Фіг.9 16 конформацій у твердому стані, що їх одержано на основі координат атомів, наведених нижче в Таблицях 4-7. Таблиця 4 Координати атомів аналога епотилону формули l: Форма А Атом С1 O1 С2 С3 O3 С4 С5 O5 С6 С7 O7 С8 С9 С10 С11 С12 O12 С13 С14 С15 N16 С17 С18 С19 C20 C21 C22 C23 C24 C25 N26 C27 S28 C29 С30 X 0,3879(3) 0,4055(2) 0,2864(3) 0,2696(3) 0,3097(2) 0,1615(3) 0,1289(3) 0,0935(3) 0,1343(3) 0,1503(3) 0,1410(3) 0,2449(4) 0,3284(4) 0,4258(4) 0,4467(3) 0,5220(3) 0,6171(2) 0,5983(3) 0,6099(3) 0,5568(3) 0,4552(3) 0,1482(4) 0,1043(4) 0,0386(4) 0,2404(5) 0,4974(4) 0,5935(3) 0,5989(4) 0,6154(3) 0,6392(3) 0,6786(3) 0,6902(3) 0,6529(1) 0,6196(4) 0,7292(4) Υ 0,4352(1) 0,4300(1) 0,4340(1) 0,4210(1) 0,4550(1) 0,4154(1) 0,3732(1) 0,3748(1) 0,3296(1) 0,2921(1) 0,2528(1) 0,2936(1) 0,2824(1) 0,2877(1) 0,3359(1) 0,3426(1) 0,3288(1) 0,3746(1) 0,4053(1) 0,4477(1) 0,4426(1) 0,4138(2) 0,4539(1) 0,3232(2) 0,2630(2) 0,3301(2) 0,4860(1) 0,4815(2) 0,5222(1) 0,5656(1) 0,5941(1) 0,6325(2) 0,6381(1) 0,5846(2) 0,6703(2) Ζ 0,5503(9) 0,7435(5) 0,4675(7) 0,2325(7) 0,1027(5) 0,1852(7) 0,2895(8) 0,4713(6) 0,1769(8) 0,3353(8) 0,2127(6) 0,4540(8) 0,3072(9) 0,4141(8) 0,4622(8) 0,6294(8) 0,5612(5) 0,5991(8) 0,4113(8) 0,4538(8) 0,4005(6) -0,0603(8) 0,2734(8) 0,0572(10) 0,6482(10) 0,8563(9) 0,3281(8) 0,0875(8) 0,4376(8) 0,3573(8) 0,5076(6) 0,4255(8) 0,1655(2) 0,1632(9) 0,5523(10) U11*10e2 60(6) 68(4) 42(6) 56(6) 71(4) 50(6) 58(6) 135(6) 66(6) 84(6) 127(5) 83(7) 81(7) 76(7) 67(6) 53(6) 56(4) 50(6) 47(6) 44(6) 41(5) 103(7) 62(6) 92(8) 145(9) 109(8) 48(6) 132(8) 59(6) 61(6) 75(6) 59(6) 92(2) 85(7) 106(8) 17 75365 18 Таблиця 4 (продовження) U22*10e 25(4) 85(4) 64(5) 44(5) 58(3) 63(5) 82(6) 83(4) 71(5) 43(5) 61(4) 56(5) 68(5) 56(5) 61(5) 64(5) 61(3) 45(5) 63(5) 44(5) 65(4) 128(7) 67(5) 115(7) 114(7) 92(6) 63(5) 78(6) 55(5) 65(5) 58(5) 69(6) 79(1) 78(6) 75(6) U33*10e2 138(8) 100(5) 106(6) 103(6) 128(4) 112(6) 103(7) 144(5) 118(6) 134(6) 163(5) 127(6) 153(7) 166(8) 126(7) 138(7) 155(4) 162(7) 159(7) 143(6) 106(5) 104(7) 164(7) 217(10) 158(8) 131(7) 122(6) 116(7) 132(6) 127(7) 129(5) 128(6) 163(2) 161(8) 186(8) U12*10e2 -2(4) 6(3) 0(4) -7(4) -6(3) -12(4) -6(4) -16(4) -13(5) -27(4) -34(3) -26(5) -1(5) 13(5) -3(4) 16(4) 15(3) 3(4) 2(4) -4(4) -3(3) -29(6) 17(5) -17(6) -34(6) 19(5) 6(4) -7(5) -6(4) -12(4) -9(4) 9(4) -10(1) -13(5) -29(5) U13*10e2 16(5) 4(3) 3(4) 5(4) 18(3) -3(4) -13(5) 39(4) -7(4) -2(5) -17(4) -4(5) -4(5) -19(5) -19(4) 8(5) 8(3) 2(5) 5(5) 7(4) 6(3) -10(5) 9(5) -70(7) -20(6) 10(5) 4(5) 12(5) 9(5) 8(5) 4(4) 2(5) -3(1) -9(6) -5(6) U23*10e2 -9(4) 1(3) -5(4) 13(4) 3(3) 7(4) 4(5) 5(3) -10(4) -10(5) -9(3) 3(5) -26(5) -15(5) -5(5) -1(5) 4(3) -8(5) 7(5) -1(4) -2(3) 18(5) 12(5) -19(7) 47(6) 8(5) -1(5) -13(5) 7(5) 5(5) -5(4) 7(5) 20(1) 3(6) -10(6) Таблиця 5 Координати атомів водню: Форма А Атом Н21 Н22 Н31 Н3 Н61 Н71 Н7 Н81 Н91 Н92 Н101 Н102 Н111 Н112 Н131 Н141 Н142 Н151 X 0,2475(0) 0,2576(0) 0,3056(0) 0,3433(0) 0,1951(0) 0,0960(0) 0,1332(0) 0,2588(0) 0,3274(0) 0,3217(0) 0,4802(0) 0,4253(0) 0,4687(0) 0,3823(0) 0,6275(0) 0,6837(0) 0,5803(0) 0,5638(0) Y 0,4114(0) 0,4663(0) 0,3905(0) 0,4414(0) 0,3304(0) 0,2932(0) 0,2276(0) 0,3266(0) 0,3037(0) 0,2491(0) 0,2743(0) 0,2697(0) 0,3519(0) 0,3519(0) 0,3905(0) 0,4117(0) 0,3901(0) 0,4542(0) Ζ 0,5659(0) 0,4871(0) 0,2005(0) -0,0241(0) 0,0646(0) 0,4607(0) 0,3158(0) 0,5107(0) 0,1672(0) 0,2527(0) 0,3130(0) 0,5663(0) 0,3132(0) 0,5172(0) 0,7410(0) 0,3814(0) 0,2659(0) 0,6281(0) U*10E2 4,86(0) 4,86(0) 4,59(0) 5,55(0) 5,55(0) 5,80(0) 7,23(0) 5,85(0) 6,41(0) 6,41(0) 6,34(0) 6,34(0) 5,60(0) 5,60(0) 5,60(0) 5,88(0) 5,88(0) 5,35(0) Н16 Н171 Н172 Н173 Н181 Н182 Н183 Н191 Н192 Н193 Н201 Н202 Н203 Н211 Н212 19 0,4353(0) 0,1722(0) 0,1919(0) 0,0763(0) 0,1273(0) 0,0295(0) 0,1123(0) 0,0370(0) -0,0186(0) 0,0259(0) 0,3050(0) 0,1828(0) 0,2252(0) 0,4260(0) 0,4998(0) 75365 0,4447(0) 0,4437(0) 0,3871(0) 0,4077(0) 0,4835(0) 0,4491(0) 0,4566(0) 0,2923(0) 0,3233(0) 0,3491(0) 0,2635(0) 0,2733(0) 0,2304(0) 0,3415(0) 0,2955(0) 20 0,2429(0) -0,1367(0) -0,1308(0) -0,1076(0) 0,1956(0) 0,2355(0) 0,4436(0) -0,0226(0) 0,1794(0) -0,0525(0) 0,7355(0) 0,7536(0) 0,5923(0) 0,8951(0) 0,8754(0) 4,88(0) 6,90(0) 6,90(0) 6,90(0) 6,31(0) 6,31(0) 6,31(0) 878(0) 878(0) 878(0) 8,17(0) 8,17(0) 8,17(0) 6,84(0) 6,84(0) Таблиця 6 Координати атомів аналога епотилону Формули I: Форма В Атом С1 O1 С2 С3 O3 С4 С5 O5 С6 С7 O7 С8 С9 С10 С11 С12 O12 С13 С14 С15 N16 С17 С18 С19 С20 С21 С22 С23 С24 С25 N26 С27 S28 С29 С30 X 0,2316(2) 0,2321(2) 0,1812(2) 0,1535(2) 0,2226(2) 0,0876(2) 0,0096(2) -0,0132(2) -0,0409(2) -0,0754(2) -0,1316(2) -0,0135(3) 0,0274(2) 0,0946(3) 0,1389(3) 0,2065(3) 0,2653(2) 0,2894(3) 0,3190(3) 0,3253(3) 0,2738(2) 0,0762(3) 0,1109(2) -0,1098(3) -0,0528(3) 0,1829(4) 0,4128(3) 0,4521(4) 0,4477(3) 0,5303(3) 0,5822(2) 0,6498(3) 0,6565(1) 0,5605(3) 0,7206(4) Υ 0,1043(2) 0,1159(1) 0,0623(1) 0,0622(1) 0,0539(1) 0,0237(1) 0,0415(1) 0,0252(1) 0,0796(1) 0,1151(1) 0,1434(1) 0,1468(1) 0,1817(1) 0,2107(2) 0,2407(2) 0,2688(2) 0,2862(1) 0,2520(2) 0,2049(2) 0,1676(1) 0,1273(1) 0,0176(2) -0,0244(1) 0,0529(2) 0,1729(2) 0,3056(2) 0,1527(2) 0,1784(3) 0,1216(2) 0,1032(2) 0,1091(2) 0,0890(2) 0,0612(1) 0,0785(2) 0,0891(3) Ζ 0,7342(8) 0,5376(5) 0,8106(7) 1,0506(7) 1,1856(5) 1,0903(7) 0,9838(8) 0,8117(6) 1,1023(6) 0,9373(9) 1,0606(7) 0,8213(8) 0,9812(9) 0,8766(10) 1,0447(11) 0,9440(11) 1,1070(8) 0,9406(10) 1,0281(10) 0,8388(8) 0,8901(7) 1,3416(8) 0,9909(8) 1,2197(10) 0,6272(9) 0,7748(15) 0,7991(8) 0,6109(13) 0,9319(9) 0,9346(9) 0,7577(8) 0,7986(10) 1,0487(3) 1,1053(10) 0,6410(12) U11*10e2 56(4) 131(4) 62(4) 52(4) 65(3) 63(4) 57(4) 100(4) 53(4) 60(4) 79(3) 75(5) 80(5) 95(5) 97(5) 110(6) 124(4) 104(6) 117(6) 86(5) 64(4) 102(6) 82(5) 79(5) 149(7) 175(9) 80(5) 141(8) 88(5) 76(9 71(5) 98(6) 107(1) 93(6) 102(7) 21 75365 22 Таблиця 6 (продовження) U22*10e2 74(5) 88(3) 85(5) 67(4) 123(4) 75(4) 61(4) 103(4) 77(4) 111(4) 74(5) 69(4) 89(5) 98(6) 64(5) 98(4) 82(5) 102(6) 74(5) 100(4) 129(6) 58(4) 139(7) 116(6) 86(6) 80(5) 261(11) 111(6) 96(5) 192(7) 165(7) 128(2) 122(6) 443(17) U33*10e2 86(6) 74(4) 68(5) 71(5) 96(4) 63(5) 78(5) 100(4) 92(6) 185(5) 106(6) 136(7) 175(8) 191(9) 208(9) 241(7) 169(9) 160(8) 107(6) 98(5) 66(5) 113(6) 187(9) 123(8) 338(15) 108(6) 237(13) 111(7) 119(7) 114(6) 125(7) 173(2) 166(9) 150(10) U12*10e2 5(4) -24(3) -7(4) 1(3) 7(3) 5(4) -7(3) 19(3) 14(4) 40(3) 4(4) -10(4) -21(4) -22(5) -16(5) -36(3) -25(5) -3(5) -18(4) -26(3) -13(5) 13(4) 1(5) 10(6) -8(6) -29(4) 28(8) -5(5) -12(4) 2(5) -5(6) 12(1) 4(5) 45(10) U13*10e2 -6(4) -13(3) -6(4) -19(4) -29(3) -4(4) -2(4) -38(3) 2(5) 22(4) 8(5) -1(5) 15(7) 27(7) 10(7) 30(5) 23(6) -26(6) -17(5) -13(4) -5(5) -11(5) 54(6) -19(6) 0(11) -5(5) 54(9) 3(5) 2(5) -6(5) -13(6) -25(2) 3(6) 18(7) U23*10e2 -16(5) -7(3) -22(5) -6(4) -19(4) -10(4) -10(4) -38(4) -17(5) -10(4) -14(5) -19(5) -27(6) -48(7) -28(6) -77(5) -38(6) -53(6) -15(5) -19(4) 10(5) -9(5) 29(7) 22(6) 21(9) -6(5) 146(11) 21(6) -2(6) 3(6) -19(7) 0(2) 43(7) -17(12) Таблиця 7 Координати атомів водню: Форма В Атом Н21 Н22 Н31 Н3 Н61 Н71 Н7 Н81 Н91 Η92 Н101 Н102 Н111 Н112 Н131 Н141 Н142 Н151 Н16 X 0,1283(0) 0,2159(0) 0,1272(0) 0,2243(0) -0,0043(0) -0,1059(0) -0,1609(0) 0,0313(0) -0,0180(0) 0,0520(0) 0,1365(0) 0,0691(0) 0,0976(0) 0,1633(0) 0,3308(0) 0,3779(0) 0,2780(0) 0,3046(0) 0,2693(0) Υ 0,0616(0) 0,0306(0) 0,0969(0) 0,0785(0) 0,0983(0) 0,0964(0) 0,1655(0) 0,1244(0) 0,2062(0) 0,1619(0) 0,1874(0) 0,2349(0) 0,2651(0) 0,2170(0) 0,2613(0) 0,2094(0) 0,1920(0) 0,1836(0) 0,1161(0) Ζ 0,7084(0) 0,7857(0) 1,0910(0) 1,3075(0) 1,2199(0) 0,8057(0) 0,9542(0) 0,7484(0) 1,0453(0) 1,1189(0) 0,7953(0) 0,7527(0) 1,1204(0) 1,1686(0) 0,8107(0) 1,1016(0) 1,1530(0) 0,6859(0) 1,0487(0) U*10E2 4,86(0) 4,86(0) 4,51(0) 611(0) 4,99(0) 5,69(0) 7,62(0) 5,58(0) 6,10(0) 6,10(0) 7,47(0) 7,47(0) 7,74(0) 7,74(0) 7,31(0) 7,61(0) 7,61(0) 5,74(0) 5,71(0) 23 Н171 Н172 Н173 Н181 Н182 Н183 Н191 Н192 H193 H201 H202 H203 H211 H212 H213 H231 H291 H301 H302 Н303 0,0304(0) 0,1318(0) 0,0577(0) 0,0633(0) 0,1192(0) 0,1655(0) -0,1481(0) -0,1459(0) -0,0849(0) -0,0094(0) -0,0763(0) -0,1024(0) 0,1596(0) 0,1382(0) 0,2355(0) 0,5051(0) 0,5291(0) 0,7003(0) 0,7623(0) 0,7525(0) 75365 -0,0088(0) 0,0064(0) 0,0512(0) -0,0501(0) -0,0207(0) -0,0370(0) 0,0774(0) 0,0330(0) 0,0274(0) 0,1955(0) 0,1475(0) 0,1951(0) 0,2886(0) 0,3292(0) 0,3265(0) 0,1602(0) 0,0702(0) 0,0920(0) 0.1165(0) 0.0542(0) На підставі наведених вище даних можна зробити висновок про те, що Форми А та В являють собою унікальні (відмінні) кристалічні об'єкти. Наведені нижче приклади, котрі жодним чином не обмежують обсяг цього винаходу, ілюструють практичну реалізацію винаходу. Приклад 1 [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]7,11-дигідрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1метил-2-(2-метил-4-тіазоліл)етеніл]-4-аза-17оксабіцикло[14.1.0]гептадекан-5,9-діон. У круглодонну колбу на 125мл з оболонкою, обладнану механічною мішалкою, поміщають епотилон-В (5,08г), тетрабутиламонійазид (Bu4NN3) (3,55г; 1,25екв.), хлористий амоній (1,07г, 2екв.), воду (1,8мл, 10екв.), тетрагідрофуран (ТГФ) (15мл) і Ν,Ν-диметилформамід (ДМФА) (15мол). Через суміш впродовж 15 хвилин барботують азот. В другу колбу поміщають тетрагідрофуран (70мл), далі триметилфосфін (РМе3) (1,56мл; 1,5екв.), а після цього - аддукт тріс(дибензиліденацетон)дипаладій(0)-хлороформ (Рd2(dbа)3 СНСl3) (0,259г; 0,025екв.). Каталітичну суміш перемішують впродовж 20 хвилин при кімнатній температурі, після чого додають до суміші з епотилоном-В. Об'єднану суміш перемішують впродовж 4,5 годин при температурі 30°С. Реакційну суміш, що повністю прореагувала, фільтрують з метою видалення твердого хлористого амонію (NH4CI). Фільтрат містить тетрабутиламонієву сіль ( S, R, 5, 3, 2R,3S)-3[(2S,3Е)-2-аміно-3-метил-4-(2-метил-4-тіазоліл)-3бутеніл]-р, -дигідрокси- , , , , 2-пентаметил-5оксооксиранундеканової кислоти (1:1) із площею піка у високоефективній рідинній хроматографії (ВЕРХ) 94,1%. У колбу на 500мл поміщають гідрохлорид 1-[3(диметиламіно)пропіл]-3-етилкарбодіїміду (EDO) (3,82г; 2екв.), 1-гідрокси-7-бензотріазолгідрат (HOBt) (1,68м; 1,1екв.), карбонат калію (1,38м; 1екв.), Ν,Ν-диметилформамід (ДМФА) (40мл) та тетрагідрофуран (ТГФ) (160мл). Суміш нагрівають до 35°С і по краплинах впродовж трьох годин додають одержаний перед цим фільтрат. Далі цю суміш перемішують протягом ще 1 години при 24 1,3753(0) 1,4171(0) 1,4165(0) 1,0184(0) 0,8122(0) 1,0628(0) 1,3099(0) 1,1036(0) 1,3402(0) 0,5429(0) 0,5059(0) 0,6816(0) 0,6259(0) 0,8404(0) 0,7267(0) 1,0559(0) 1,2584(0) 0,4744(0) 0,6811(0) 0,6572(0) 6,33(0) 6,33(0) 6,33(0) 5,58(0) 5,58(0) 5,58(0) 8,04(0) 8,04(0) 8,04(0) 7,89(0) 7,89(0) 7,89(0) 11,47(0) 11,47(0) 11,47(0) 6,57(0) 7,73(0) 13,05(0) 13,05(0) 13,05(0) 35°С. Шляхом дистиляції реакційної суміші у вакуумі й об'єм доводять до приблизно 80мл. Одержаний розчин розподіляють (розподільне екстрагування) між 100мл етилацетату і 100мл води. Після цього водяний шар повторно екстрагують 100мл етилацетату. Об'єднані органічні витяжки промивають 50мл води і 20мл сольового розчину. Розчин одержаного продукту фільтрують через шар "Zeta Ptus ", після чого в результаті випаровування одержують олію. Сирий продукт у вигляді олії розчиняють у хлористому метилені (20мл) і промивають водою для видалення слідів розчинників для синтезу, після чого в результаті випаровування одержують тверду речовину. Сирий твердий продукт обробляють з використанням хроматографії на силікагелі 60 (35мл силікагелю на 1 грам продукту для теоретичного виходу) елюентом, що містить 88% хлористого метилену (СН2CI2), 10%30% етилацетату (ЕtOАс) і 2% триетиламіну (Et3N). Фракції аналізують за допомогою технології ВЕРХ, найчистіші з них об'єднують, після чого в результаті випаровування одержують очищений продукт. Одержаний твердий продукт (приблизно 2г) перетворюють на суспензію в етилацетаті (32мл) впродовж 40 хвилин при 75°С, після чого поволі додають циклогексан (С6Н12) (16мл) і суміш повільно охолоджують до 5°С. Очищений твердий продукт відфільтровують через паперовий фільтр, промивають холодною сумішшю етилацетат/циклогексан і висушують. Одержують 1,72г (вихід 38%) продукту, а саме [1S[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11дигідрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2(2-метил-4-тіазоліл)етеніл]-4-аза-17оксабіцикло[14.1.0]гептадекан-5,9-діону з чистотою 99,2% (ВЕРХ) і у вигляді твердої речовини білого кольору. Приклад 2 [1S-[1R*,3R*(E),7R*10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11дигідрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2(2-метил-4-тіазоліл)етеніл]-4-аза-17-оксабіцикло [14.1.0]гептадекан-5,9-діон, Форма А. У тригорловинну колбу на 250мл поміщають 0,61г головної сполуки, яку вже очищали (гель 25 75365 26 фільтрація через шар силікагелю, елюент і одержані білі кристали висушують, в результаті ЕtOАс/гексан/Еt3N, чистота (ВЕРХ) 96,88%), а таодержуючи 16,1г головної сполуки, тобто Форми А, кож етилацетат (28мл, 46мл/1г). Утворену суспенз виходом 88% і чистотою 99,49% (ВЕРХ). зію нагрівають до 75°С. Тверда речовина повністю Приклад 3 розчиняється після 60-хвилинного нагрівання су[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]спензії при 75°С. Одержаний розчин впродовж 120 7,11-дигідрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1хвилин охолоджують від 75°С до 50°С, причому метил-2-(2-метил-4-тіазоліл)етеніл]-4-аза-17при температурі 60°С уводять зародкові кристали оксабіцикло[14.1.0]гептадекан-5,9-діон, Форма В. Форми А. Кристали з'являються при 55°С. Після У тригорловинну колбу на 250мл поміщають цього температуру знижують до 20°С впродовж 0,108г неочищеної головної сполуки з Прикладу 2, 120 хвилин, при цьому впродовж 60 хвилин до Ν,Ν-диметилформамід (0,0216г) та етилацетат суміші по краплинах додають циклогексан (35мл, (5мл, 46мл/1г). Утворену суспензію нагрівають до 57мл/1г). Утворену суспензію впродовж 120 хви80°С і перемішують впродовж 30 хвилин з метою лин охолоджують до -10°С і витримують іще 60 розчинення всіх твердих речовин. Одержаний розхвилин. Суспензію фільтрують і одержані білі кричин охолоджують з 80°С до 30°С впродовж 120 стали висушують, одержуючи 0,514г головної спохвилин, причому кристали з'являються при темпелуки, тобто Форми А, з виходом 84,3% і чистотою ратурі 38°С. Впродовж 30 хвилин до суміші по кра99,4% (ВЕРХ). плинах додають циклогексан (7,5мл; 69,5мл/1г), Форма А - Альтернативна технологія при цьому протягом 60 хвилин температуру зниУ тригорловинну колбу на 250мл поміщають жують до -10°С і суміш витримують при цій темпе0,51г головної сполуки, яку вже очищали (гельратурі впродовж 120 хвилин. Суспензію відфільтфільтрація через шар силікагелю, елюент ровують і одержані білі кристали висушують, ЕtOАс/гексан/Еt3N, чистота (ВЕРХ) 96%)), а також одержуючи 0,082г головної сполуки, тобто Форми етилацетат (8,5мл; 16,7мл/1г). Утворену суспензію В, з виходом 76% і чистотою 99,6% (ВЕРХ). нагрівають до 80° С Одержаний розчин впродовж Форма В - Альтернативна технологія 60 хвилин охолоджують від 80°С до 70°С, причому У тригорловинну колбу на 250мл поміщають при 70°С уводять зародкові кристали Форми А. 0,458г головної сполуки, неочищеної як у Прикладі Після цього впродовж 180 хвилин температуру 2 з вмістом близько 6% Ν,Ν-диметилформаміду, а знижують до 30°С. Кристали з'являються при 65°С. також етилацетат (10мл, 21,8мл/1г). Утворену суПісля цього температуру розчину додатково зниспензію нагрівають до 78°С і перемішують впрожують до -10°С впродовж 180 хвилин, при цьому довж 30 хвилин з метою розчинення всіх твердих протягом 30 хвилин до суміші по краплинах додаречовин. Одержаний розчин охолоджують від 78°С ють циклогексан (10,2мл; 20мл/1г). Одержану судо 10°С впродовж 120 хвилин. При температурі спензію витримують в охолодженому стані ще 60 10°С уводять зародкові кристали Форми А. Впрохвилин. Суспензію фільтрують і одержані білі кридовж 60 хвилин до суміші по краплинах додають стали висушують, одержуючи 0,43г головної споциклогексан (20мл; 43,7мл/1г), при цьому протягом луки, тобто Форми А, з виходом 84,3% і чистотою 120 хвилин температуру знижують до -10°С і суміш 99,7% (ВЕРХ). витримують при цій температурі ще 120 хвилин. Форма А - альтернативна технологія Суспензію відфільтровують і одержані білі кристаУ тригорловинну колбу на 500мл поміщають ли висушують, одержуючи 0,315г головної сполу18,3г суміші Форм А та Б, яку вже очищали (гельки, тобто Форми Б, з виходом 68,8% і чистотою фільтрація через шар силікагелю, елюент 98,2% (ВЕРХ). EtOAc/хлористий метилен/Et3N, чистота (ВЕРХ) Форма В - Альтернативна технологія 99%), а також етилацетат (183мл; 10мл/1г). УтвоУ колбу Уітона (Wheaton) на 5мл поміщають рену суспензію нагрівають до 75°С, після чого 250мг головної сполуки, неочищеної як у Прикладі вводять зародкові кристали Форми А і витримують 2 і толуол (3,75мл; 15мл/г), утворену суміш нагріпри цій температурі впродовж 30 хвилин. По крапвають до 75°С і витримують впродовж 30 хвилин. линах - підтримуючи температуру 70°С - до суміші Одержану суспензію охолоджують до 20°С і видодають циклогексан (90,2мл; 5мл/1г). Після закінтримують при цій температурі впродовж 18 годин з чення процедури додавання температуру знижуперемішуванням. Суспензію фільтрують і одержані ють до 20°С і суміш витримують з перемішуванням білі кристали висушують, одержуючи 150мг головвпродовж іще 18 годин, після чого температуру ної сполуки, тобто Форми В, з 60%-им виходом і знижують до 5°С і суміш витримують при цій темчистотою 99,2% (ВЕРХ). пературі впродовж 5 годин. Суспензію фільтрують 27 75365 28 29 Комп’ютерна верстка О. Гапоненко 75365 Підписне 30 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601