Лікування кокцидіозу внутрішньом’язовою композицією триазину

Реферат: Винахід стосується застосування композиції, яка містить триазин, вибраний з толтразурилу або диклазурилу, для профілактичного лікування кокцидіозу у ссавців, за виключенням людей, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою одноразової внутрішньом'язової ін'єкції. UA 115344 C2 (12) UA 115344 C2 UA 115344 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Галузь техніки, до якої відноситься винахід Даний винахід має відношення до композицій і способів лікування кокцидіозу у ссавців, за виключенням людей. Конкретніше, винахід має відношення до внутрішньом'язових композицій і способів лікування кокцидіозу триазинами, зокрема, толтразурилом або поназурилом. Рівень техніки Триазини широко використовуються у ветеринарній індустрії для лікування ссавців, за виключенням людей, від цілого ряду хвороб. Триазини є протимікробними засобами широкого спектра дії, які інгібують і грампозитивні й грамнегативні бактерії, а також деяких найпростіших, таких як кокцидії. Кокцидіоз є паразитарною хворобою кишкового тракту тварин, яка викликається найпростішими кокцидіями, такими як, наприклад, Eimeria або Isospora. Хвороба поширюється від однієї тварини до іншої при контактуванні з інфікованими екскрементами або при проковтуванні зараженої тканини. Первинним симптомом є діарея, яка у важких випадках стає кривавою. Молоді тварини, зокрема, поросята, страждають від важких симптомів, які в результаті можуть призвести до смерті. Триазини, такі як толтразурил і поназурил, є офіційно прийнятими засобами для лікування й контролю над кокцидіозом. У більшості випадків триазини вводять тваринам пероральним шляхом. У зв'язку із цим, EP116175 має відношення до розчину водорозчинного триазину для перорального введення. DE19603954 пропонує гранули триазину для перорального введення, і DE19824483 має відношення до напіврідких препаратів, які застосовуються перорально. EP2164496 має відношення до комбінованих лікарських засобів триазин-залізо. Сполуки триазину вводиться перорально у вигляді суспензії. В US 2010/0179151 було запропоноване введення триазинів трансдермальним шляхом. Трансдермальне введення, запропоноване в US 2010/0179151, передбачає нанесення на шкіру "плям" композиції, яка поглинається шляхом пасивного усмоктування через шкіру. Такий спосіб уведення не забезпечує чіткого контролю дозування, введеного кожній тварині. Крім того, трансдермальне введення не може поєднуватися з іншими видами лікування, які призначаються у вигляді ін'єкції (наприклад, антибіотики, протизапальні засоби, протиглисні засоби, ендоектоциди, мінерали, такі як залізо, або вітаміни). WO01/26660 і US 6,465,460 мають відношення до солі сполук триазину й до композицій для перорального й парентерального введення. Згідно із цим патентом натрієва сіль дає можливість використання більш низьких доз сполуки. Навіть якщо згадуються різні способи введення, увесь експериментальний розділ обмежується внутрішньовенним і пероральним уведенням. Крім того, даний патент показує, що для підтримки відповідних рівнів у крові потрібно кілька введень і/або доза з уповільненим вивільненням. Зокрема, патент пропонує використання початкової дози й декількох підтримуючих доз, які необхідно ввести протягом декількох днів. Незважаючи на попереднє вивчення різних способів (наприклад, трансдермального), пероральне введення залишається на сьогоднішній день кращим, тому що, як вважається, воно забезпечує найбільш придатний фармакокінетичний профіль лікарського засобу, зокрема, у молодих тварин. Зокрема, хоча композиція для перорального застосування вимагає постійної маніпуляції й не може забезпечити контролю за точністю дозування, вважається, що вона забезпечує відповідну біодоступність і терапевтичну ефективність сполук триазину. Після зараження тварин представником найпростіших, який спричиняє хворобу, (як правило, протягом першого тижня життя), перші симптоми хвороби зазвичай з'являються через 3-5 днів після зараження. Відповідно, для одержання найкращого захисту тварин, протимікробний вплив необхідний протягом перших 5 днів після народження. При пероральному введенні триазинів, таких як толтразурил, протягом 3-5 днів після народження, пік (максимум) у крові толтразурилсульфону (тобто поназурилу), за активного метаболізму, може бути досягнутий на 5 день, що забезпечує захист від хвороби. Однак, пероральне введення має недоліки. Дійсно, пероральне введення не забезпечує чіткого контролю за дозуванням, уведеним кожній тварині. Крім того, пероральне введення не може поєднуватися з іншими видами лікування, які надаються за допомогою ін'єкції (наприклад, антибіотики, протизапальні засоби, протиглисні засоби, ендоектоциди, мінерали або вітаміни) поросятам, від новонароджених до 3-денного віку, і, отже, викликає необхідність додаткових маніпуляцій з тваринами. У даній галузі техніки подібні перешкоди залишаються неподоланними, через те, що альтернативні способи, наприклад, трансдермальне введення, також мають деякі обмеження. Тепер було несподівано виявлено, що триазини, зокрема, толтразурил можуть бути введені за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції. Винахідники несподівано виявили, що найбільша 1 UA 115344 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 активність може бути досягнута при використанні одноразової внутрішньом'язової ін'єкції триазинів, зокрема, толтразурилу, і що таке введення молодим поросятам (від новонароджених до поросят 3-денного віку) може забезпечити необхідні концентрацію в сироватці й режим вивільнення активної речовини для захисту тварини від зараження найпростішими, такими як кокцидії. Зокрема, незважаючи на те, що внутрішньом'язове введення змінює фармакокінетичний профіль притаманний толтразурилу, несподівано було виявлено, що таке застосування призводить до оптимізації фармакокінетичного профілю його активного метаболіту, толтразурил-сульфону (тобто поназурилу). Таким чином, винахід забезпечує можливість ефективного введення триазинів, зокрема, толтразурилу, навіть на дуже ранніх стадіях розвитку ссавців, за виключенням людей. До того ж, винахід надає можливість комбінованого застосування триазину з іншими засобами, які вводяться за допомогою ін'єкцій, такими як антибіотики, протизапальні засоби, протиглисні засоби, ендоектоциди, мінерали, такі як залізо, або вітаміни. Крім того, на противагу розповсюдженим відомостям, винахідники виявили, що комбінована внутрішньом'язова ін'єкція триазину, зокрема, толтразурилу, і комплексу заліза одноденним поросятам не викликала специфічного стресу, і являє собою дуже ефективний метод лікування молодих тварин. Розкриття винаходу Ціль винаходу полягає в композиції, яка містить триазин, бажано толтразурил, і призначена для лікування кокцидіозу або споріднених хвороб у ссавців, за виключенням людей, зокрема, у поросят, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції. Інша мета винаходу має відношення до способу лікування кокцидіозу або споріднених хвороб у ссавців, за виключенням людей, зокрема, у поросят, при цьому даний спосіб передбачає внутрішньом'язову ін'єкцію тварині композиції, яка містить триазин, бажано толтразурил. Композиції запропоновані винаходом краще вводяться шляхом однієї внутрішньом'язової ін'єкції тваринам, за виключенням людей. Композиції запропоновані винаходом бажано вводяться новонародженим тваринам до 3денного віку, навіть бажаніше новонародженим у віці до 48 годин після народження. Композиції запропоновані винаходом бажано вводяться в м'яз шиї або за вухом. Кращі варіанти втілення винаходу стосуються застосування одного з наступних триазинів: - похідних 1, 2, 4-триазиндіону, таких як, наприклад, клазурил, диклазурил, летразурил і сулазурил; або - похідних 1, 3, 5-триазинтріону, таких як, наприклад, толтразурил, толтразурил сульфоксид, толтразурил сульфон (наприклад, поназурил). Композиція може містити додаткові активні препарати, такі як антибіотики, протиглисні засоби, ендоектоциди, протизапальні засоби й/або вітаміни, і/або мінерали, такі як залізо, для одноразової, об'єднаної, окремої або послідовної внутрішньом'язової ін'єкції. Переважно, триазин та інші засоби поєднують в одну композицію, призначену для однієї внутрішньом'язової ін'єкції. У зв'язку із цим мета винаходу полягає в композиції, яка містить триазин, зокрема, толтразурил і додатковий активний препарат, і призначена для лікування кокцидіозу або споріднених хвороб в тварин, за виключенням людей, таких як поросята, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції. Кращі композиції запропоновані винаходом містять триазин і залізо, навіть більш бажано толтразурил і комплекс заліза. Винахід може використовуватися для лікування (наприклад, для профілактики, затримки, захисту від, полегшення або лікування) кокцидіозу або спорідненого протозойного захворювання у ссавців за виключенням людей. В окремому варіанті реалізації, винахід використовується для профілактичного лікування кокцидіозу у ссавців, за виключенням людей, наприклад, для захисту тварини від виникнення або розвитку хвороби. Винахід, зокрема, може бути застосований для захисту свиней, овець і жуйних тварин від інфекційних хвороб. Зокрема, винахід пристосований для лікування жуйних тварин або свиней і більш бажано поросят. Винахід може застосовуватися як до дорослих, так і для молодих тварин, від новонароджених до ссавців 10-денного віку, бажано від новонароджених до ссавців 3-денного віку, а ще краще, від новонароджених до тварин у віці 48 годин. Короткий опис фігур Фіг. 1: Підрахунок балів місцевої реакції лікованих і нелікованих поросят, Група 1: внутрішньом'язово 20 мг/кг ваги тіла (0.4 мл/кг); Група 2: внутрішньом'язово 40 мг/кг ваги тіла (1.2 мл/кг). Фіг. 2: Середнє збільшення ваги лікованих і нелікованих поросят: Група 1: 2 UA 115344 C2 5 10 15 20 внутрішньом'язово 20 мг/кг ваги тіла (0.4 мл/кг); Група 2: внутрішньом'язово 40 мг/кг (1.2 мл/кг); Група 3: перорально 20 мг/кг ваги тіла (0.4 мл/кг); Група 4: контроль, без лікування. Фіг. 3: Консистенція екскрементів лікованих і нелікованих поросят. Фіг. 4: Зміна ваги тіла лікованих і нелікованих поросят після внутрішньом'язової ін'єкції 20 мг/кг ваги тіла (Група 1); внутрішньом'язової ін'єкції 40 мг/кг ваги тіла (Група 2); перорального введення 20 мг/кг ваги тіла (Група 3) або нелікованого контролю (Група 4). Фіг. 5: Середній PK - профіль толтразурилу й толтразурил-сульфону після внутрішньом'язової ін'єкції 20мг/кг ваги тіла (A) або 40мг/кг ваги тіла (B) толтразурилу або після перорального введення 20 мг/кг ваги тіла толтразурилу(C). Фіг. 6: Структура сполук триазину. Втілення винаходу Винахід стосується нових композицій і способів лікування кокцидіозу або споріднених хвороб у ссавців, за виключенням людей, з використанням внутрішньом'язового введення триазинів, зокрема, толтразурилу. Сполуки триазину Термін "триазин(и)” визначає добре відомий клас активних речовин, в основному, відносно інфекцій кокцидіями. Типовими триазинами, що підходять для застосування в способах або композиціях винаходу, є сполуки формули A або B нижче, будь-якої чистоти, бажано, які мають чистоту, щонайменше, 90 %, а також будь-яку їхню сіль, складний ефір, рацемат, ізомер, проліки: (формула A) 25 30 35 40 45 (формула B) у якій 1 R представлений R3-SO2- або –S-, 2 R представлений алкіл, алкокси, галоген або SO 2N(CH3)2, 3 R представлений галоалкіл, 4 5 R і R незалежно один від одного можуть представлені галогеном або атомом Cl; і 6 R представлений фтором або хлором. Бажаніше, щоб сполуки триазину включали триазиндіони (формула A) і триазинтріони (формула B). Приклади триазиндіонов включають, без обмеження, клазурил (R4 представлений Cl, R5 представлений H, R6 представлений Cl у формулі A), диклазурил (R4 представлений Cl, R5 представлений Cl, R6 представлений Cl у формулі A) або летразурил (R4 представлений Cl, R5 представлений Cl, R6 представлений F у формулі A). Бажанішими 1, 2, 4-триазиндіонами є диклазурил і сулазурил. Бажанішими триазинами для використання в даному винаході є триазинтріони формули B, і іще краще такі, у яких R2 є C1-C4 алкілом або алкоксигруппой (наприклад, метилом, етилом або н-пропилом), і/або R3 є C1-C3 перфторалкілною групою (наприклад, трифторметилом). Окремими й найкращими триазинами винаходу є толтразурил (R1=R3-S-, R2=CH3, R3=CF3 у формулі B) і поназурил (R1=R3-SO2-, R2=CH3, R3=CF3 у формулі B). Толтразурил (1-метил-3-[3-метил-4-[4-(трифторметил)тіо) феноксил]феніл]-1,3,5триазин(1H, 3H, 5H)-2,4,6-тріон) широко використовується для профілактики й лікування кокцидіозу у свиней, овець, жуйних тварин і птахів за допомогою перорального введення. У цей R R час він доступний на ринку як Cevazuril або Baycox . Способи одержання толтразурилу розкриваються в різних патентах, таких як US 4,219,552, US 5,219,853, EP 0 201 030 і EP 0 879 057. Хімічна структура толтразурилу представлена у формулі (C) нижче: 3 UA 115344 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 (Формула C) Хімічні структури додаткових прикладів сполук триазину, які підходять для використання в даному винаході, показані на Фіг. 6. Як визначено в даному винаході, триазини включають їх солі, наприклад, натрієві солі. Лікування У контексті винаходу термін "лікування" включає зокрема і профілактичне лікування від хвороби тварин, за виключенням людей. Профілактичне лікування тварини від хвороби означає лікування, проведене до того, як тварина була піддана впливу або контактувала з етіологічним фактором захворювання (наприклад, патогеном, вірусом, найпростішим, клітиною тощо), або лікування після зазначеного впливу/контакту, але до розвитку симптомів або на ранній стадії розвитку хвороби. Крім того, термін профілактичне лікування, відносно популяції тварин, за виключенням людей, означає лікування всіх членів популяції, навіть після того, як хвороба була встановлена в деяких членів популяції з метою обмеження або запобігання поширенню й зараження інших членів. В окремому варіанті втілення термін "лікування" означає захист тварин, за виключенням людей, від хвороби, наприклад, від впливу етіологічного фактора захворювання, або від розвитку хвороби в підданих впливу фактора тварин. Зокрема, даний винахід підходить для захисту тварин від інфекційних хвороб, таких як захворювання бактеріального походження або захворювання, пов'язаних із представником найпростіших. Термін "лікування" також включає поліпшення здоров'я (самопочуття) тварин, за виключенням людей, які піддаються лікуванню, наприклад, збільшення виробництва м'яса, молока, вовни тощо. Термін "лікування" або "профілактичне лікування" також включає пригнічення симптомів, а також відтермінування, зменшення або виліковування існуючої інфекції. Кокцидіоз Термін "кокцидіоз" позначає будь-яку хворобу, викликану найпростішими кокцидіями. Зокрема, кокцидіоз включає паразитарні хвороби кишкового тракту тварин, викликані найпростішими кокцидіями, такими як, наприклад, Eimeria або Isospora. Кокцидіоз, як правило, проявляється діареєю й/або лихоманкою. Хвороба може передаватися від однієї тварини до іншої при контакті з інфікованими екскрементами або проковтуванні зараженої тканини. Наприклад, у поросят головною ознакою кокцидіозу є діарея, що звичайно триває протягом 4 – 6 днів. Колір екскрементів може варіювати від білого до жовтого, а консистенція може змінюватися від рідкої до пастоподібної, зазвичай без присутності крові. Кокцидіоз сприяє випадкам вторинних бактеріальних інфекцій у поросят, при цьому поросята при сильному зараженні можуть гинути. Попри те, що смертність, як правило, висока, вона може коливатися, імовірно, внаслідок різниці кількості проковтнутих ооцист, відмінностей у навколишньому середовищі й наявності інших проблем у вигляді супутніх захворювань. Незважаючи на те, що хвороба виявляє тільки слабкий вплив на смертність, вона впливає на наявність супутніх інфекцій і кількість антибіотиків, необхідних для забезпечення контролю над ними. Хвороба також радикальним чином впливає на розвиток поросят, при цьому добовий приріст ваги інфікованих тварин зменшується в порівнянні з неінфікованими тваринами, що викликає незадовільну однорідність у стаді у віці відбирання. Спостерігається значне виснаження й низькорослість. Кокцидіоз зменшує ріст у середньому приблизно на 15 %, тобто, мінімум на 500 г у віці відбирання, і сприяє одержанню значною мірою неоднорідного стада після відлучення від вимені. Кокцидіози є поширеними паразитарними інфекційними хворобами у тварин. Наприклад, найпростіші з роду Eimeria, Isospora, Neospora, Sarcosporidia, cryptosporidium, Hammondia, besnoitia, hepatozoon і Toxoplasma викликають кокцидіоз і протозойні хвороби в самих різних країнах світу. Винахід, зокрема, може використовуватися для профілактики кокцидіозу й протозойних захворювань, викликаних різноманітними найпростішими, такими як, Mastigophora (Flagellata), Sarcomastigophora (Rhizopoda), Myxospora, Microspora або Pneumocystis carinii. Конкретні приклади Mastigophora включають Trypanosomatidae, такі як, без винятку, Trypanosoma brucei, T.gambiense, T. rhodesiense, T. congolense, T. cruzi, T. evansi або T. equinum. Конкретні приклади Sarcomastigophora (Rhizopoda) включають Entamoebidae і Apicomplexa (Sporozoa), такі як Eimeridae, наприклад, E. acervulina, E. adenoides, E. alabahmensis, E. anatis, E. anseris, E. 4 UA 115344 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 arloingi, E. ashata, E. auburnensis, E. bovis, E. brunetti, E. canis, E. chinchillae, E. clupearum, E.columbae, E. contorta, E. crandalis, E. debliecki, E. dispersa, E. ellipsoidales, E. falciformis, E. faurei, E. flavescens, E. gallopavonis, E. hagani, E. intestinalis, E. iroquoina, E. irresidua, E. labbeana, E. leucarti, E. magna, E. maxima, E. media, E. meleagridis, E. meleagrimitis, E. mitis, E. necatrix, E ninakohlyakimovae, E. ovis, E. parva, E. pavonis, E. perforans, E. phasani, E. piriformis, E. praecox, E. residua, E. scabra, E. spec., E. stiedai, E. suis, E. tenella, E. truncata, E. truttae, E. zuernii, Globidium spec., Isospora belli, L canis, L felis, L ohioensis, L rivolta, L spec., L suis, Neospora caninum, N. hugesi, Cystisospora spec., Toxoplasma gondii, Sarcocystis bovicanis, S. bovihominis, Leucozytozoon simondi, Plasmodium berghei, P. falciparum, P. malariae, P. ovate, P. vivax, P. spec., Babesia argentina, B. bovis, B. canis, B. spec., Theileria parva, Theileria spec., такі як Adeleina, наприклад, Hepatozoon canis, H. spec. Слід особливо виділити роди й види найпростіших, які спричиняють преклінічні або клінічні інфекції у свиней, зокрема: Eimeria debliecki, E. suis, E. scabra, E. perminuta, E. spinosa, E. polita, E. porci, E. neodebtiecki, Isospora suis, Cryptosporidium, Toxoplasma gondii, Sarcocystis miescheriana, S. suihominis, Babesia trautmanni, B. perroncitoi, Balantidium coli. Прикладами економічно важливих кокцидіозів є: інфекції свиней, заражених кокцидіями роду Isospora, або великої рогатої худоби, зараженої кокцидіями роду Eimeria. Даний винахід є ефективним на всіх стадіях розвитку патогена. Термін "анемія" включає будь-який дефіцит заліза. Метою винаходу є композиція, яка містить триазин, бажано толтразурил, призначена для лікування кокцидіозу або споріднених хвороб в ссавців, за виключенням людей, за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції. Іншою метою винаходу є спосіб лікування кокцидіозу або споріднених хвороб в ссавців, за виключенням людей, який передбачає внутрішньом'язову ін'єкцію композиції, яка містить триазин, бажано толтразурил, вказаному ссавцеві. Як уже обговорювалося вище, винахідники несподівано виявили, що найбільша активність може бути досягнута за допомогою одноразової внутрішньом'язової ін'єкції триазинів, зокрема, толтразурилу, і що таке введення молодим поросятам (від новонароджених до поросят 3денного віку) може забезпечити необхідні концентрацію в сироватці й режим вивільнення активної речовини, необхідні для захисту тварини від зараження найпростішими, такими як кокцидії. Зокрема, незважаючи на те, що внутрішньом'язове введення змінює фармакокінетичний профіль властивий толтразурилу, несподівано було виявлено, що таке застосування призводить до оптимізації фармакокінетичного профілю його активного метаболіту, толтразурил-сульфону (тобто поназурилу). Фіг. 4 і 5 показують, що після внутрішньом'язової ін'єкції спостерігається швидко досяжний і стійкий рівень у сироватці толтразурил сульфону, що сприяє оптимальному захисту молодих тварин від кокцидіозу. Таким чином, винахід надає можливість ефективного введення триазинів, зокрема, толтразурилу, навіть на дуже ранніх стадіях розвитку тварин. Окремою метою винаходу є композиція, яка містить триазин і призначена для захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції. Іншою метою винаходу є спосіб захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, при цьому даний спосіб передбачає внутрішньом'язову ін'єкцію композиції, яка містить триазин, зазначеним ссавцям, за виключенням людей. Як обговорювалося вище, триазин бажано є похідним 1, 2, 4-триазиндіону або похідним 1, 3, 5-триазинтриону, і бажано є толтразурилом. Внутрішньом'язове введення Важливимим аспектом винаходу є внутрішньом'язовий спосіб введення. З експериментального розділу винаходу видно, що внутрішньом'язово введений триазин, навіть після одноразового введення, забезпечує ефективну захисну дію пролікованим тваринам без необхідності повторних уведень або композицій із тривалим або уповільненим вивільненням. Більше того, винахід показує, що триазини при внутрішньом'язовому введенні можна поєднувати з додатковими внутрішньом'язово-активними засобами, так що ефективне лікування забезпечується без додаткових маніпуляцій із тваринами. Композиції запропоновані винаходом можуть уводитися за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції(й) з використанням методів і/або приладів, відомих per se у даній галузі техніки. При цьому внутрішньом'язове введення можна здійснити за допомогою шприца, шприца-пістолета, приладу з мікроголкою, безголкового приладу, імпульсного приладу тощо. У кращому варіанті втілення ін'єкцію здійснюють за допомогою голчастого інжектора або шприца. В іншому бажаному варіанті втілення ін'єкцію здійснюють за допомогою безголкового ін'єкційного 5 UA 115344 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 приладу, такого як імпульсна безголкова система, конкретніше, пружинно-поршневий прилад з живленням від батареї або такого, до якого підведено газ з балону. Конкретні приклади безголкових технологій описані, наприклад, в WO2006/058426, WO2007/140610 або WO2009/111794. Кращим для застосування в даному винаході обладнанням для безголкової ін'єкції є безголкова технологія Acushot™, описана в міжнародних патентах WO2006/058426 і WO2007/140610. Внутрішньом'язова ін'єкція може бути зроблена в будь-який м'яз. Що стосується сільськогосподарських тварин, таких як велика рогата худоба, внутрішньом'язову ін'єкцію бажано роблять в область шиї, або за вухом, а не в задню кінцівку/м'яз стегна або в пахову складку. Представлені результати показують, що триазини при внутрішньом'язовому введенні демонструють сильний терапевтичний ефект, коли вони вводяться в область шиї. Щодо цього, ціль винаходу стосується композиції, яка містить триазин і призначена для профілактичного лікування кокцидіозу в тварин, за виключенням людей, при чому зазначена композиція вводиться за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції в шию або за вухом. Наступна мета винаходу стосується композиції, яка містить триазин і використовується для захисту тварин, за виключенням людей від кокцидіозу, при чому зазначена композиція вводиться за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції в шию або за вухом. Інша мета винаходу полягає в способі захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, де даний спосіб передбачає внутрішньом'язову ін'єкцію композиції, яка містить ефективну кількість триазину, у шию або за вухом зазначеному ссавцю. В окремому варіанті втілення тварина досі не зазнала впливу етиологічного фактора інфекційної хвороби, за даних умов спосіб можна використовувати для профілактики або зменшення інфекції. В іншому варіанті втілення тварина вже зазнала впливу етиологічного фактора і лікування використовується для профілактики або відтермінування розвитку хвороби й симптомів, або для полегшення або лікування хвороби, або попередження/обмеження поширення хвороби. Композиції запропоновані винаходом бажано вводяться за допомогою одноразової внутрішньом'язової ін'єкції ссавцям, за виключенням людей. Результати показують, що одноразової внутрішньом'язової ін'єкції досить для захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу. Як показано, якщо одноразове внутрішньом'язове введення толтразурилу здійснюють у межах від народження до 3-днів після народження, захисний ефект спостерігається через 3-5 днів, коли очікується поява перших симптомів хвороби. Відповідно, у кращому варіанті втілення винаходу внутрішньом'язове введення триазину здійснюється ссавцям, за виключенням людей (наприклад, поросятам) у віці від народження до 3-днів, навіть більш бажано в межах 48 годин після народження, для того, щоб забезпечити більш ефективний захист, ніж пероральне введення в той самий час (від народження до 3денного віку). У зв'язку із цим, кращим варіантом втілення винаходу є композиція, яка містить триазин і призначена для захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою одноразової внутрішньом'язової ін'єкції, бажано в шию або за вухом. Іншою метою винаходу є спосіб захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, де даний спосіб передбачає одноразову внутрішньом'язову ін'єкцію, бажано в шию або за вухом, композиції, яка містить ефективну кількість триазину, зазначеному ссавцеві. Дозування триазину може варіювати залежно від виду ссавців, за виключенням людей, і природи триазину. Зазвичай використовуються дозування в межах від 1 до 60 мг триазину на кг ваги тіла (мг/кг) тварини, бажано від 5 до 50 мг/кг і іще краще від 10 до 30 мг/кг. Ілюстративними дозами композицій винаходу є 10 мг, 20 мг, 30 мг, 40 мг, 50 мг або 60 мг толтразурилу/дозу. У контексті винаходу термін "ефективна кількість" означає, переважно, дозування активного засобу, яке забезпечує клінічний результат у тварин, лікування яких проводиться. Зокрема, ефективна кількість є кількістю, достатньою для зменшення інфекції, розвитку хвороби або полегшення симптомів. Кращі дозування для внутрішньом'язового введення толтразурилу для різних видів ссавців, окрім людини, розкриваються нижче: - свині: 20 мг/кг ваги тіла/лікування (бажано одноразове введення); - велика рогата худоба: 15 мг/кг ваги тіла/лікування (бажано одноразове введення); - вівці: 20 мг/кг ваги тіла/лікування (бажано одноразове введення); Щодо цього кращий варіант втілення винаходу полягає в композиції, яка містить від 1 до 60 мг толтразурилу на кг ваги тіла й призначена для захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою одноразової 6 UA 115344 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 внутрішньом'язової ін'єкції, бажано в шию або за вухом. Іншою метою винаходу є спосіб захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, де даний спосіб передбачає одноразову внутрішньом'язову ін'єкцію, бажано в шию або за вухом, композиції, яка містить від 1 до 60 мг толтразурилу на кг ваги тіла, зазначеним ссавцям, за виключенням людей. Композиція може бути створена у вигляді розчину або суспензії, або в будь-якій формі, придатній для внутрішньом'язової або підшкірної ін'єкції. Переважно дані композиції є суспензіями. Дані композиції можуть додатково містити придатні з погляду ветеринарії ексципієнти (допоміжні речовини), такі як розчинники, солюбілізатори, поверхнево-активні речовини, антиоксиданти, загущувальні консервуючі речовини, протипінні речовини тощо. Придатні розчинники включають, без обмеження, фізіологічно прийнятну воду, спирти, складні ефіри, рослинні олії і їх суміші в ізотонічних розчинах. Солюбілізатори включають, наприклад, полівінілпіролідон. Приклади придатних антиоксидантів включають аскорбінову кислоту, складні ефіри галієвої кислоти й сульфіти; і придатні консервуючі речовини, включають, без обмеження, бензиловий спирт, н-бутанол, бензалконію хлорид, бензойну кислоту або лимонну кислоту. Протипінні речовини включають, без обмеження, олійні основи, такі як мінеральна олія, рослинна олія, біла олія або будь-яка інша олія, яка є нерозчинною у спіненому середовищі, силіконова олія, симетиконову емульсію, віск і/або гідрофобний діоксид кремнію, такий як етилен-біс-стеарамід (EBS), парафінові воски, складний ефір парафіну, двоокис кремнію, жирний спирт, мила або складні ефіри жирних кислот, силіконові сполуки, співполімери поліетиленгліколю й поліпропіленгліколю і алкіл-поліакрилати. Прикладом композиції, призначеної для використання у винаході, є суспензія, яка містить толтразурил (від 10 до 30 мг толтразурилу на кг ваги тіла) у воді й протипінну речовину. Конкретним прикладом суспензійної композиції, призначеної для застосування в даному винаході, є композиція, яка містить 30 мг толтразурилу, 3 мг докузату натрію, 100 мг полівінілпіролідону, 100 мг етанолу й води, скільки буде потрібно (qs) до 1 мл. Як зазначено вище, композиція може містити додаткові активні речовини, такі як антибіотики, протиглисні засоби, ендоектоциди, протизапальні засоби й/або вітаміни, і/або мінерал(и), такі як залізо, для одноразової, об'єднаної, окремої або послідовної внутрішньом'язової ін'єкції. Переважно, триазин та інші засоби поєднуються в одній і тій же композиції, призначеній для одноразової внутрішньом'язової ін'єкції. У кращому варіанті втілення інший засіб є або містить залізо, бажано комплекс заліза. До препаратів для парентерального введення від залізо-дефіцитної анемії належать найпоширеніші на даний час препарати, які містять комбінований засіб оксигідроксид заліза (або гідроксид заліза) у комбінації із сахаридом, а саме декстраном або декстрином. Відомі інші препарати заліза, такі як залізо-сахароза, залізо-олігосахарид і залізо-глюконат. Приклади кращих комплексів заліза включають водний колоїдний розчин бетаоксигідроксиду заліза й декстрану глюкогептонової кислоти (Gleptoferron запущений у серійне виробництво під торгівельною маркою Gleptosil® або Ursoferran®); гідроксиду заліза з низькомолекулярним декстраном (запущений у серійне виробництво під торгівельною маркою Uniferon® або Dexafer®); гідроксиду заліза з високомолекулярним декстраном (комерціалізований під торгівельною маркою Ferroforte®); або сполуки тривалентного заліза типу I. У наступному кращому варіанті втілення композиція винаходу є суспензією, яка містить триазин і комплекс заліза. Точніше, конкретним і кращим прикладом композиції запропонованої винаходом є суспензія, яка містить триазин, комплекс заліза й протипінну речовину. Більш конкретним прикладом є суспензія, яка містить толтразурил (бажано від 10 до 60 мг), комплекс заліза (бажано бета-оксигідроксид заліза й декстран глюкогептонової кислоти), воду й протипінну речовину. Крім цього, іншою метою винаходу є композиція, яка містить триазин і додатковий активний засіб і призначена для захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції. Бажано, щоб обидва активних засоби входили до складу разом, і навіть бажано у вигляді суспензії. У кращому варіанті втілення два активні засоби вводяться у вигляді одноразової внутрішньом'язової ін'єкції. Окремий варіант втілення винаходу стосується композиції, призначеної для захисту ссавців, за виключенням людей, від кокцидіозу, при цьому дана композиція містить триазин і комплекс заліза, причому композиція вводиться за допомогою одноразовою внутрішньом'язовою ін'єкцією. У кращому варіанті втілення композиція містить від 1 до 60 мг/кг ваги тіла триазину й комплекс заліза, бажано у вигляді суспензії. 7 UA 115344 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Комбіноване введення триазину – заліза У даній галузі техніки було запропоновано скомбінувати триазин із залізом, для того, щоб лікувати й кокцидіоз і анемію. Однак, така комбінація створює проблеми, пов'язані зі складом і введенням. Дійсно, зазвичай триазин уводять перорально, у той час як сполуки заліза в більшості випадків уводять за допомогою ін'єкції. В EP2164196 були запропоновані пероральні композиції обох засобів, однак, у той же час було підтверджено, що сполуки заліза, уведені перорально, демонструють низьку біодоступність і повинні вводитися в межах 8 – 10 годин після народження, внаслідок чого, введення кожної з сполук вимагає окремого режиму. Додатково, пероральне введення перешкоджає суворому контролю дозування, уведеного кожній тварині. Більше того, вказано, що залежно від дозування, сполуки заліза, уведені за допомогою ін'єкції, можуть спричиняти побічні дії. Відповідно, у даній галузі техніки існує потреба оптимізованого комбінованого лікування, яке поєднуватиме триазин і залізо, та є ефективним і зручним. Такий оптимізований продукт бажано повинен містити триазин (наприклад, толтразурил) і залізо в одній композиції, придатній для комбінованого введення, з дозуванням, кількостями й фармакокінетичними параметрами, придатними для забезпечення ефективного захисту ссавців, таких як поросята, навіть відразу після народження, за виключенням людей. Винахід надає можливість оптимізованого комбінованого введення триазину із залізом. Винахід розкриває оптимальні пороги дозування й способи введення обох сполук для забезпечення найкращого захисного ефекту. Крім того, на противагу до поширеної думки, винахід показує, що комбінована внутрішньом'язова ін'єкція триазину, зокрема, толтразурилу, і заліза (у вигляді комплексу) одноденним поросятам не викликає специфічного стресу. Таким чином, винахід пропонує ефективний метод лікування кокцидіозу й анемії в ссавців, за виключенням людей, навіть на дуже ранніх стадіях розвитку тварин. Конкретною метою винаходу є композиція для ін'єкції, яка містить толтразурил і залізо (у вигляді комплексу), при цьому зазначена композиція містить, у загальному обсязі 0,5 – 2,0 мл, 100-400 мг сполук заліза (у вигляді комплексу) і 10-120 мг толтразурилу. Така композиція містить таку кількість толтразурилу й заліза (у вигляді комплексу), яка необхідна для одержання мінімального ефективного дозування, щоб забезпечити ефективний захист. Така композиція придатна для лікування тварин (наприклад, поросят) вагою 0,40-5 кг, без необхідності розведення. Краща композиція запропонована винаходом є одноразовим дозуванням 1,5 мл, яке містить 37,5 мг толтразурилу й 200 мг сполук заліза. Як показано в експериментальному розділі, такий продукт надає оптимізовані кількості обох речовин, у придатній формі для комбінованої доставки в одній окремій ін'єкції, без побічної дії. Композиції запропоновані винаходом входять до препарату, призначеного для введення шляхом ін'єкції і включають придатні ексципієнти або основи, такі як розчинники, допоміжні засоби (ад'юванти), стабілізатори, консерванти, загущувачі, протипінні речовини тощо. Інша мета винаходу стосується зазначеної вище композиції, яка ін'єктується, призначеної для лікування кокцидіозу й анемії в ссавців, за виключенням людей, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції, бажано за допомогою одноразової внутрішньом'язової ін'єкції. Іншою метою винаходу є спосіб лікування кокцидіозу й анемії в cсавців, за виключенням людей, де даний спосіб передбачає внутрішньом'язове введення композиції, описаної вище, зазначеним ссавцям, за виключенням людей. Винахід, зокрема, придатний для лікування молодих поросят, від новонароджених й до 3денного віку, які зазвичай мають вагу від 0,40 до 5 кг. Для лікування цієї категорії немає необхідності в розведенні композиції й зважуванні тварин з метою корегування дози. Композиція може містити додаткові активні речовини, такі як антибіотики, протизапальні засоби, протиглисні засоби, ендоектоциди, мінерали, такі як залізо, або вітаміни, для одноразової, об'єднаної, окремої або послідовної внутрішньом'язової ін'єкції. Винахід також стосується способу встановлення оптимального режиму лікування молоді ссавців, за виключенням людей, де даний спосіб передбачає: - вибір фіксованого загального об'єму (V) композиції, що ін'єктується, зазначений об'єм вибирають у межах від 0,5 до 2,0 мл; - визначення об'єму (V1) і концентрації сполуки заліза у вихідному матеріалі, необхідних для одержання в остаточній композиції концентрації 200 мг/мл; - установлення концентрації толтразурилу у вихідному матеріалі, необхідної для одержання в остаточній композиції концентрації 20-50 мг/мл, коли використовується такий об'єм вихідного матеріалу V2, при якому V1+V2=V; і 8 UA 115344 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 - необов'язкове змішування сполук заліза й толтразурилу в одному або декількох придатних ексципієнтах для одержання композиції. Даний винахід може застосовуватися до ссавців, за виключенням людей, включаючи, свиней, овець, корів, собак або кішок, і бажано сільськогосподарських тварин, племінних тварин, тварин-компаньйонів і лабораторних тварин. Сільськогосподарські тварини й племінні тварини включають таких ссавців, як наприклад, велика рогата худоба, коні, вівці, свині, кози, верблюди, буйволи, осли, кролики, європейські лані, північні олені, хутрові звірі, такі як, наприклад, норка, шиншила або єнот. Тварини-компаньйони включають, наприклад, коней, собак і кішок. Лабораторні тварини й експериментальні тварини включають, наприклад, мишей, пацюків, морських свинок або золотистих хом'ячків. Слід приділити особливу увагу свиням, великій рогатій худобі, вівцям і собакам, усіх видів, підвидів і порід. Винахід може застосовуватися до дорослих або молодих тварин, наприклад, від новонароджених ссавців до тварин 10-денного віку, за виключенням людей. Додаткові аспекти й переваги винаходу будуть розкриті далі в наступному ілюстративному експериментальному розділі. Приклади Приклад A. Місцева й загальна переносимість одноразової внутрішньом'язової ін'єкції толтразурилу поросятам 3-денного віку. Протокол Це цільове дослідження ефективності й безпеки для тварин було проведено на фермі з відомим анамнезом кокцидіозу. Основною метою було дослідження безпеки й ефективності внутрішньом'язової ін'єкції толтразурилу в порівнянні зі стандартним пероральним застосуванням. Група 1:8 поросятам 3-денного віку вводили одноразову внутрішньом'язову дозу толтразурилу (Доза = 20 мг толтразурилу на кг ваги тіла, що дорівнює 0,4 мл/кг ваги тіла) у день SD0. Група 2:8 поросятам 3-денного віку вводили одноразову внутрішньом'язову дозу толтразурилу (60 мг толтразурилу на кг ваги тіла, що дорівнює 1,2 мл/кг ваги тіла) у день SD0. Група 3:8 поросятам 3-денного віку вводили перорально стандартну комерційну композицію толтразурилу Cevazuril® (доза = 20 мг толтразурилу на кг ваги тіла, що дорівнює 0,4 мл/кг ваги тіла) у день SD0. Група 4:12 поросят 3-денного віку залишали без лікування. Усім чотирьом (4) групам поросят у день SD0 уводили залізо (Gleptosil®) у дозі 1 мл на порося. Результати Оцінювали місцеву й загальну переносимість, а також збільшення ваги тіла. Результати представлені на Фіг. 1 і Фіг. 2 і можуть бути узагальнені, як зазначено далі: - Внутрішньом'язові дози аж до 60 мг/кг були добре переносимими. - Відсутність болю, обмежена місцева реакція (набряк) у деяких поросят при введеннях дози 1,2 мл/кг ваги тіла, що зникає менше як за 1 тиждень після ін'єкції. - Збільшення ваги тіла в пролікованих поросят було нормальним. - Поросята, проліковані внутрішньом'язово, набирали більше, ніж контрольні неліковані поросята (+2 кг протягом SD0+29 днів). Приклад B. Фармакокінетика, безпека й анти-кокцидіальна ефективність внутрішньом'язового введення толтразурилу поросятам 2-денного віку при одноразовому застосуванні. Протокол Група 1:10 поросятам 2-денного віку одноразово внутрішньом'язово вводили дозу толтразурилу C629 (Доза = 20 мг толтразурилу на кг ваги тіла, що дорівнює 0,4 мл/кг ваги тіла) у день SD0. Група 2:11 поросятам 2-денного віку одноразово внутрішньом'язово вводили дозу толтразурилу C629 (Доза = 40 мг толтразурилу на кг ваги тіла, що дорівнює 0,8 мл/кг ваги тіла) у день SD0. Група 3:9 поросятам 2-денного віку вводили перорально стандартну комерційну композицію толтразурилу Cevazuril® (Доза = 20 мг толтразурилу на кг ваги тіла, що дорівнює 0,4 мл/кг ваги тіла) у день SD0. Група 4:8 поросят залишали без лікування. Усім чотирьом (4) групам поросят у день SD0 уводили залізо (Gleptosil®) у дозі 1 мл на 9 UA 115344 C2 5 10 15 20 порося. Через 3 дні після обробки (на SD3) поросят перорально заражали охарактеризованим штамом Isospora suis. Для оцінки ефективності дсліджуваної речовин використовували наступні параметри: - Місцева й загальна переносимість (Групи 1 і 2) - Поява діареї й консистенція екскрементів - Виведення ооцист - Збільшення ваги тіла - Концентрації в сироватці толтразурилу і його метаболіту толтразурил сульфону (наприклад, поназурилу) у Групі 1, 2 і 3. Результати Отримані результати представлені на Фіг. 3-5 і в таблиці 1. Результати можуть бути підсумовані, як зазначено далі. - Усі протестовані дози були добре переносимими. - Не спостерігалося виведення ооцист у лікованих тварин, причому консистенція екскрементів у лікованих поросят не змінювалася (Група 1, Група 2 і Група 3). - Інфіковані тварини, яких лікували перорально або внутрішньом'язово (Група 1, Група 2 і Група 3), показали збільшення ваги більше ніж контрольні тварини (Група 4). - Толтразурил добре абсорбується після внутрішньом'язового застосування. - Кінетика толтразурил сульфону (наприклад, поназурилу) статистично не відрізняється у тварин, яких лікували перорально (Група 3) або внутрішньом'язово (Група 1 і Група 2). Таблиця 1 Фармакокінетичні параметри Tmax (годин) Cmax (мг/л) Cmax/Доза AUCinf (площа під кривою) (мг*година/л) AUCinf/доза Група 1 (внутрішньом'язово 20 мг/кг) 157 4025 193 Група 2 (внутрішньом'язово 40 мг/кг) 171 7293 182 854714 1362678 39551 34067 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 25 30 35 40 45 1. Застосування композиції, яка містить триазин, вибраний з толтразурилу або диклазурилу, для профілактичного лікування кокцидіозу у ссавців, за виключенням людей, при цьому зазначена композиція вводиться за допомогою одноразової внутрішньом'язової ін'єкції. 2. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що призначається для введення новонародженій тварині до 3-10-денного віку. 3. Застосування за п. 2, яке відрізняється тим, що призначається для введення через 0-48 годин після народження. 4. Застосування за будь-яким з пунктів 1-3, яке відрізняється тим, що введення здійснюють в м'яз шиї або за вухом. 5. Застосування за будь-яким з попередніх пунктів, яке відрізняється тим, що триазин є толтразурилом. 6. Застосування за п. 5, при якому композиція містить від 1 до 60 мг толтразурилу на кг ваги тіла, переважно від 10 до 30 мг на кг ваги тіла. 7. Застосування за будь-яким з попередніх пунктів, при якому композиція містить один або більше додаткових активних препаратів, вибраних з-поміж антибіотиків, протиглисних засобів, ендоектоцидів, протизапальних засобів і/або вітамінів, і/або мінералів, для одноразової, об'єднаної, окремої або послідовної внутрішньом'язової ін'єкції. 8. Застосування за п. 7, яке відрізняється тим, що додатковий засіб є водним колоїдним розчином, який містить бета-оксигідроксид заліза і декотран глюкагептонової кислоти. 9. Застосування за будь-яким з пунктів 7 або 8, яке відрізняється тим, що триазин і інший засіб(оби) поєднують у одну композицію для об'єднаної внутрішньом'язової ін'єкції. 10. Застосування за п. 9, яке відрізняється тим, що триазин і додатковий засіб(оби) уводяться в одній окремій ін'єкції. 10 UA 115344 C2 5 10 11. Застосування за будь-яким з пунктів 1-10, яке відрізняється тим, що композиція є водним і/або спиртовим розчином або суспензією. 12. Застосування за п. 11, яке відрізняється тим, що композиція є суспензією. 13. Застосування за будь-яким з пунктів 1-12, яке відрізняється тим, що застосовують для введення ссавцям, вибраним з-поміж свиней, овець, корів, собак або кішок, а переважно поросят. 14. Застосування композиції, як визначено за будь-яким з пунктів 1-13, для лікування кокцидіозу у свиней або поросят. 15. Застосування композиції, як визначено за будь-яким з пунктів 1-14, для попередження або зменшення діареї у ссавця, інфікованого кокцидіями. 11 UA 115344 C2 12 UA 115344 C2 13 UA 115344 C2 Комп’ютерна верстка М. Мацело Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 14