Спосіб визначення альтерації нейтрофілів

Способ определения альтерации нейтрофилов, включающий воздействие аллергена на клетки крови сенсибилизированного организма с последующим их морфологическим исследованием в фиксированном окрашенном мазке периферической крови, от л ич а ю щ и й с я тем, что фиксацию мазка проводят в парах формалина в течение 2 минут, а окраску ведут 0.2 % раствором дитизона в течение 3 часов, после чего мазок заключают в желатин. С > Изобретение относится к лабораторным исследованиям во фтизиатрии. Цель изобретения - повышение точности и упрощение способа за счет фиксации мазка в парах формалина, окраски его раствором дитизона и последующего заключения мазка в желатин. П р и м е р ? . У здорового человека через 24 ч после подкожного введения 2 ТЕ берется кровь проколом мякоти пальца. Приготовленные мазки обрабатываются в течение 2 мин восходящими парами формалина. Для этого в чашку Петри наливается тонким слоем формалин, на дно кладутся два стеклянных валика, на которые по мещ аются предметные стекла мазками вниз, и чашка закрывается крышкой. Фиксированные таким образом мазки извлекаются из чашки и окрашиваются 0,2% раствором дитизона. Для приготовления красящего раствора в колбочку наливается 30 мл дистиллированной воды, добавляется 0,6 мл 25% раствора гидроокиси аммония и 400 мг дитизона. Колбочка закрывается пробкой, смесь перемешивается на водяной бане в течение 10 мин при 70°С, затем фильтруется через беззольный фильтр. Полученный фильтрат разбавляется в 5 раз дистиллированной водой, а результате чего получается 0,2% раствор дитизона. Окраска препаратов производится в герметически закрытом сосуде (банке и др.) о течение 3 ч. Затем мазки промываются дистиллированной водой и заключаются в желатин. Исследование окрашенных мазков производится в световом микроскопе под большим увеличением (900х) с применением масляной иммерсии. На препаратах s цитоплазме нейтрофилов еыявляется зернистость красного цвета. Основная часть гранул имеет четкие контуры, округлую форму, и лишь единичные зерна в нейтрофилах (не более 5 из расчета на клетку) обнаруживают признаки альтерна w о ел О 13305 тивных изменений (укрупнение зерен, их деформация, размытость границ). П р и м е р 2. Мазки периферической вкрои, взятой у больного туберкулезом через 24 ч после подкожного введения 2 ТЕ, фиксируются о течение 2 мин парами формалина и окрашиваются в течение 3 ч 0,2% раствором дитизона, как описано выше. На препаратах значительно чаще, чем у здорового человека, обнаруживаются в нейтрофи- 10 лах альтерированные гранулы. Признаки их повреждения (укрупнение и деформация зерен, размытые их границы) определяются Упорядник Замовлення 4109 Техред М.Моргеитал более, чем в четвертой части исследованных гранул нейтрофилов. Сопоставление известного способа окраски нейтрофилов, используемого при постановке теста повреждения нейтрофилов по В.А.Фрадкину, с предлагаемым способом выявило явные преимущества последнего: большую простоту методики окраски мазков и лучшее выявление гранул в нейтрофильных лейкоцитах. Предлагаемый способ может быть реализован в клинических лабораторных исследованиях для диагностики туберкулеза. Коректор д. фіпь Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, КиТв-53, Львівська пл , 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул Гагаріна, 101