Спосіб виготовлення живої та інактивованої вірус-вакцини проти ньюкаслської хвороби птиці

Спосіб виготовлення живої та інактивованої вірус-вакцини проти Ньюкаслської хвороби птиці, 3 14289 4 повненні моношару на 100%. Доза інфікування 100 Флакони ретельно продивлялися у пронизуюТЦД 50/см3 [Сюрин В.М. та ін. Методи лабораторчому світлі. Пластівців, плісняви, зміни консистенної діагностики вірусних хвороб тварин. //М., 1986. ції, механічних домішок не повинно бути. Одноча-С.82140]. Після інфікування флакони з клітинами сно флакони перевіряли на відповідність культивували при 37,5°С до проявлення ЦПД на 3етикування, тріщин флаконів та герметичність. 4 хреста. Після чого флакони заморожували при Визначення вакууму в ампулах (флаконах) температурі - 20°С. Через 24 години розморожупроводили за ГОСТ 28083 за допомогою апарату вали та визначали активність вірусу. Д'Арсенваля. Приклад 2 Приклад 5 У стерильних умовах готували серійні розвеДля визначення контамінації мікоплазмами дення вірусів від 10-1 до і 10-10. Для цього у флаковміст 3-х флаконів (ампул) вакцини розчиняли ни вносили по 9см3 підтримуючого живильного стерильною дистильованою водою до первинного середовища. У перший флакон вносили 1см3 віруоб'єму та центрифугували 10 хвилин при сутримуючого матеріалу, що містить вірус Ньюка1000об/хв. слської хвороби. Після триразового піпетування Одержану надосадову рідину висівали по 1см3 3 1см переносили у другий флакон і так подальше. у 4-й пробірки з середовищем Едварда (0,35% Кожним розведенням вірусу заражали по 5 пробіагару). Кожний посів інкубували протягом 7 днів рок з моношаром клітин культури ФЕК в об'ємі при температурі (37-38)°С. Проводили 3 послідовні 0,2см3 Контроль досліду - 20 пробірок з культурою пасажі. При виконанні 3-го пасажу робили пересіви ФЕК в які вводили по 0,2см3 підтримуючого сереодночасно на середовище Едварда з 0,35% та довища. Пробірки інкубували при температурі 1,30% агару. На жодному з посівів на поживних 37°С. При мікроскопії враховували наявність або середовищах не повинно бути росту мікоплазм. відсутність характерних для вірусу Ньюкаслської Приклад 6 хвороби ознак цитопатичної дії на клітини культуДля проведения контролю методом випадкори. Титр вакцини розраховували за методом Ріда вого відбору із серії відбирали 3 флакони (ампута Менча та виражали в ТЦД 50/см3. ли), розчиняли дистильованою (кип'яченою) водою Приклад 3 до початкового об'єму, після чого вміст флаконів Вакцини контролювали за показниками: (ампул) об'єднували та розводили до необхідного - зовнішній вигляд, колір; об'єму, який залежить від кількості доз у флаконі - наявність механічних домішок, плісняви, пла(ампулі). стівців, зміни консистенції і тріщин флаконів (амВакцину випоювали курчатам дослідної групи пул): із розрахунку 1 доза в 10см3 на голову. - наявність вакууму у флаконах (ампулах); Спостереження вели протягом 14 днів. Конт- етикування; рольну групу утримували ізольовано. - розчинність, хв.; Антигенну активність (напруженість імунітету - масова частка вологи, %; птиці) визначали з урахуванням результатів РЗГА - контамінація мікоплазмами; (титр антитіл до Ньюкаслської хвороби) та ІФА - контамінація сторонніми вірусами: (напруженість імунітету). Титр антитіл до вірусу - контамінація бактеріальною та грибковою міНьюкаслської хвороби в РЗГА повинен бути у 90% крофлорою: випадків не нижче 4 log2. - біологічна активність вірусу; Вакцина, яка виготовлена запропонованим - нешкідливість; способом, має високу імуногенність та є нешкідли- імуногенність; вою при застосуванні. Технологія виготовлення - антигенна активність вакцини є простою та надійною. Приклад 4 СНЕВ - свиняча нирка ембріональна версеніВизначення зовнішнього вигляду, кольору зирована; проводили візуально в пронизуючому світлі. НВ - нирка вівці; Визначення наявності механічних домішок, КСТ - коронарні судини теляти. плісняви, пластівців, герметичності, наявності вакууму у флаконах (ампулах) та якості етикування. Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601