Речовина для кріоконсервування кісткового мозку

Изобретение относится к медицине, в частности к крпоконсервированию костного мозга, С целью повышения сохранности кроветворных клеток костного мозга предложена среда, содержащая (маси %) в качестве криопротектора полиэтиленоксид-400 7,0-9,0; аитиоксидант-378 - 0,5 2,0; гемодез или реополиглюкин ~ остальное , Среда обеспечивает сохранность кроветворных клеток костного мозга 74,7-76,8%. І 1 Изобретение относится к медицине и может быть использовано для низкотемпературного консервирования кроветворных клеток костного мозга с целью их последующей трансплантации,, Цель изобретения - повышение сохранности кроветворных клеток костного мозга. П р и м е р 1. Костный мозг вымывали из бедренных костей гемодезом, ресуспендировали и этим же раствором доводили до концентрации 1-2-10 кг/мл, В суспензию вносили антиоксидант-378 (АО-378) в концентрации 1% и экспонировали при комнатной температуре 5 млн, после чего ввели криопротектор полиэтиленоксид-400 (ПЭО-400) в концентрации 7% и опять экспонировали & при 4 С в течение 5 мин 0 Ампулы с суспензией заї-горажішали от 0 до -20°С со скоростью 1°/мин, затем погружали в жидкий азот (-196°С). Размораживали на водяной бане при 40 С. 19-84 После оттаивания суспензию разбавляли раствором гемодеза до концентрации 5*10 5 кл/мл. Количество стволовых кроветворных клеток (К0£ с ) в сус- — пензии криоконсервированного и на, тивного (контроль) костного мозга определяли методом Тіша и Как Калло00 ха о Сохранность К 0 £ с относительно контроля составила 76,8%, Количество клеток-предшественников грануломоноцитопоэза (KOf 6 ) в суспензиях иативиого и криоконсер- ' вированного костного мозга определяли методом культивирования в агаре, сохранность КО £k относительно контроля составила 74.7% в ю При содержании ПЗО-400 9,0% сохранность К 0 £ с составляла 74,9%, а КОЄ* - 70,6%. При содержании АО-378 0,5% сохранность-КО tc составляет 66,3% , КО £ к а 67^2%, при содержании АО-378 2,0% J 1481926 При содержании АО-378 0,5 сохрансохранность KOEC составляет 67,7%, ность К0£ с составляет 65,9%, а a KOfk - 65,4%. КО £,< - 63,3%, при содержании АО-378 П р и м е р 2о Костный мозг вымывали из бедренных костей реополис 2,0% сохранность КО £ t составляет 70,7%, а КО £к - 61,7%, глюкином, ресуспеидировалп и им же Преимуществом предлагаемой среды доводили до концентрации 1-2 * является т о , что она обеспечивает «10' кл/мл. В суспензию вводили более высокий процент - на 15-16% аниюксндаит-378 (АО-378) в концентрации 1 и экспонировали при комнат- і о сохранности кроветворных клеток % костного мозга с улучшением показанон температуре в течение 5 мин, постелей гемодинамики у больного, к о ле чего добавляли по каплям крпопроторому пересажен костный мозг, криотектор ЇЇ0О-400 до 7%-ной концентраконсервировачие которого проводят цни и экспонировали при ч и п течение 5 мин. Ампулы с суспензией заморажи- 15 в предлагаемой среде„ вали от .0 до -20°С со скоростью Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я і^/мшг, затем погружали в жидкий азот (-196°С), Размораживали па воСреда для криокоисервировання дяной бане при 40 с С. После огтаипаиия суспеизіпо разбавляли рсополнглю- 20 костного мозга, включающая полиэтиленоксид-400, о т л и ч а ю кшюм до концентрации 5 10 5 кл'мл щ а я с я тем, что, с целью повышеи вводили по 1 -10 г в 0,2 мл среды ния сохранности кроветворных клеток мытам-реципиентам. Содержание ствокостного мозга, она дополнительно ловых кроветворных клеток (К0£ с ) в суспензии определяли методом Тила 25 содержит антиоксидаит-378, гемодез или реополиглюкш* при следующем и Мак Каллоха о Контролем служило соотношении компонентов, мас с %: количество колоний, сформированных и а тинным КОЕС. . Полиэтиленокснд-400 7,0-9,0 Антиоксидант-378 0,5-2,0 При содержании ПЭО-400 9,0% сохГемодез или реополиранность КОЕС составляет 77,0%, а 30 глюкин Остальное. КОЕ*- 72,8%. Редактор И. Козлова Составитель В.Фролова Техред М.Дидык Корректор С.Шекмар Заказ 819/ДСН Тираж 344 ПОДПНСНОР Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д . 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101