Штам вірусу грипу а /курка/ сиваш/02/05 (h5n1) для виготовлення біопрепаратів проти пташиного грипу

Штам вірусу грипу А/курка/ Сиваш/02/05 (H5N1) для виготовлення біопрепаратів проти пташиного грипу, що зареєстрований у колекції відділу вивчення хвороб птиці Національного наукового центру «Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини» за номером 12/5/2. (19) (21) u200607985 (22) 17.07.2006 (24) 15.01.2007 (46) 15.01.2007, Бюл. № 1, 2007 р. (72) Стегній Борис Тимофійович, Бузун Андрій Ігорович, Музика Денис Васильович, Бабкін Михайло Валерійович, Бісюк Іван Юрійович, Стегній Марина Юріївна, Майорова Клавдія Федорівна, Білявцева Олена Анатоліївна 3 20245 ультрафіолетового опромінення, сонячного світла, температур вище 80°С, Стабілізується у адсорбованому чи ліофілізованому вигляді, особливо у присутності альбуміноподібних білків, при низьких температурах, стійкий у крупнодисперсних аерозолях. Культуральні ознаки. In vitro культивується у 5 пасажах (термін спостереження) на фібробластах ембріонів курей (первинних та перещеплюваних), перещеплюваних культура х клітин нирки мавпи (Vero) та свині (СПЕВ), без додавання трипсину, з утворенням цитопатичного ефекту (утворення вкраплень у цитоплазмі заражених клітин, їхнє округлення та руйнування клітинного моношару), з титрами інфекційної активності 10-104,5 ТЦД50/мл. Іn ovo культивується у пасажах на зародках курей (514-добового віку), качок (7-17-добового віку), з проявою летальної дії (ЛД) та накопиченням гемаглютиніну і віріонів у амніотичній та алантоїсній порожнинах через 12-96 годин після зараження, з титрами інфекційної активності 102,0-108,5 ЕІД50/мл. In vi vo тканинний вірус (вірус-кров) у 70-добових курей викликає типові ознаки класичної чуми птиці через 8-16 годин після внутрішньовенної інокуляції (польові спостереження у епізоотичних осередках), індекс патогенності 2,7 (за даними польових спостережень у епізоотичних осередках). Збудник є вірулентним для усіх видів свійської птиці, викликає у інтактних курей та індиків гостре захворювання з високою контагіозністю (60-90 %) та летальністю (до 100 %); у гусей і качок викликає переважно (до 80 % відомих випадків) хронічне захворювання з клінікою ураження нервової системи, з високою контагіозністю і помірною летальністю (до 30 %) за даними польових спостережень у епізоотичних осередках. Індекс нейтралізації гомологічною антисироваткою у ембріональній системі =7,5. Імуногенність за даними епізоотологічних спостережень є високою: титри антигемаглютинінів у сироватках крові у перехворілої птиці (кури) становлять 1:32-1:4096 (польові спостереження у епізоотичних осередках). Протягом 5-ти пасажів у культуральних та 9-ти пасажів у ембріональних системах не втрачає антигенної специфі Комп’ютерна в ерстка Д. Шев ерун 4 чності. Пасажі у культуральній системі підвищують летальність вірусу для курячих зародків, пасажі у ембріональній системі стабілізують летальність вірусу для курячих зародків. Вірус ізольовано з головного мозку курки, забитої у період гарячки, методом пасажування з очищенням вірусу граничними розведеннями на курячих зародках 5-12добового віку. Патогенність для організму. Циркуляцію штаму зареєстровано в популяціях свійської птиці (кури, індики, качки, гуси) присадибних господарств Північного Криму поблизу озера Сиваш у гр удні 2005 року. Збудник є вірулентним для зазначених видів свійської птиці, викликає у інтактних курей та індиків гостре захворювання з високою контагіозністю (60-90 %) та летальністю (до 100 %); у гусей і качок викликає переважно (до 80 % відомих випадків) хронічне захворювання з клінікою ураження нервової системи, з високою контагіозністю і помірною летальністю (до 30 %) за даними польових спостережень у епізоотичних осередках. Індекс нейтралізації гомологічною антисироваткою у ембріональній системі =7,5. Імуногенність за даними епізоотологічних спостережень є високою: титри антигемаглютинінів у сироватках крові у перехворілої птиці (кури) становлять 1:32-1:4096 (польові спостереження у епізоотичних осередках). Приклад. Визначення гемаглютинаційної активності вірусу. Для цього використовували планшети з лунками у формі літери V, 1 % суспензію еритроцитів півня на фізіологічному розчині. В усі лунки планшету вносили по 25 мкл фосфатного буферу (рН 7,2), в першу лунку вносили 25 мкл екстраембріональної рідини курячих ембріонів, яка містить вірус. Робили двократні послідовні розведення від 1:2 до 1:4096, після чого в усі лунки додавали 25 мкл 1 % еритроцитів. Після 20 хвилин контакту проводили облік реакції за наявності гемаглютинації в лунках планшетів. Встановлено титр 10 log2 (1:1024). Отриманий штам доцільно використовувати для виробництва інактивованої вакцини для птиці проти високопатогенного грипу. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601