3-(4-дифторметокси-3-метоксифініл) пропеноат 3beta гідроксиандрост-5-ен-17-она, який проявляє протипухлинну дію

Изобретение относится к новому биологически активному соединению, а именно, к 3-(4-дифторметокси-3метоксифенил)пропеноату 3b-гидроксиандрост-5-ен-17-она, проявляющему противоопухолевое действие. Указанное свойство дает возможность предположить использование данного соединения в медицине в качестве средства для лечения опухолей предстательной железы. Известны биологически активные соединения, относящиеся к производным фенилпропеновой кислоты, проявляющие противоопухолевое действие [1]. Однако указанные соединения предлагаются только для лечения аденомы предстательной железы. Наиболее близким по структуре и биологическому действию и принятым за прототип является коричный эфир дегидроэпиан-дрестерона, проявляющий противоопухолевое действие [2], формулы Но его противоопухолевый эффект менее выражен по сравнению с таковым заявляемого соединения. Базовым объектом является препарат хлортрианизен (1,1,2~трианизил-2-хлорэтилен), как один из наиболее активных и широко применяемых препаратов при лечении рака предстательной железы [3]. Однако хлортрианизен оказывает лечебный эффект только в 40% случаев. Задачей изобретения является поиск новых соединений, обладающих противоопухолевым действием при опухолях предстательной железы, мало токсичных и более эффективных по сравнению с имеющимися в арсенале. Для решения указанной задачи предлагается новое химическое соединение 3-(4-дифторметокси-3метоксифенил)пропеиоат 3b-гидроксиандрост-5-ен-17-она формулы проявляющее противоопухолевое действие при опухолях предстательной железы в 60-95% случаев по сравнению с 40% случаев при лечении хлортрианизеном. Прототип проявляет противоопухолевое действие в 60% случаев. Предлагаемое соединение мало токсично (3000 мг/кг массы тела не вызывает гибели животных). Указанное соединение получают путем фторметоксилирования 4-гидрокси-3-меток-сибензальдегида, применения реакции Перкина, обработки выделенного продукта хлористым тионилом и ацилиропания полученным хлорангидридом фенилпропеново-го производного 3^3-гидроксиандрост-5-ен-17-она в среде пиридина по следующей схеме: Пример 1.4-дифторметокси-3-меток-сибензальдегид К 152 г (1 моль) 4-гидрокси-3-метокси-бензальдегида в 800 мл сухого диоксаиа прибавляют 650 мл 30% водного NaOH. При температуре 80°С (на масляной бане) и перемешивании пропускают хладон-2 на протяжении 20 часов. Смесь охлаждают, отделяют диоксановый слой от водного и оба слоя экстрагируют эфиром. Эфирные экстракты промывают 5% раствором NaOH, сушат прокаленным MgSO4 Упаривают эфир. Масляный остаток перегоняют при температуре 120°С (5 мм). Выход 130 г (64% теор.) C9H8O3 F2. Пример 2. 3(4-дифторметокси-3-ме-токсифеиил) пропеновая кислота. 23 г (0114 моля) 4-дифторметокси-З-ме-токсибензальдегида, 23 мл (0,225 моля) свежеприготовленного уксусного ангидрида и 7 г (0,078 моля) свежепрожарениого уксуснокислого натрия нагревают на масляной бане при перемешивании в течение 20 часов. Охлаждают и прибавляют холодную воду. Осадок отфильтровывают, промывают водой, переосаждают 170 мл 10% раствора КОН, прибавляют соляную кислоту до нейтральной среды и снова фильтруют. Выход 18 г (63% теор, из сухого бензола), Тпл. 190-200°С. Найдено: % F-15,1. С11Н10 O4F 2. Вычислено, %: F- 15,6. Пример 3. 3(4-дифторметокси-3-ме-токсифенил) пропеноилхлорид. Смесь 13 г (0,053 моля) 3-(4дифторметокси-3-метокси-фенил) пропеновой кислоты, 2 мл сухого ДМФА и 60 мл (0,4 моля) свежеперегианного тионилхлорида кипятят до окончания выделения SO2 и HCI. Остаток тионилхлорида отгоняют. Выпавший при охлаждении осадок отфильтровывают, сушат. Выход: 13 г (92% теор.). Тпл 100-102°С. С11Н9О3СІ. Пример 4. 3(4-Дифторметокси-3-метоксифенил) пропеноат 3b-гидроксианд-рост-5-ен-17-она. Смесь 2 г (0,007 моля) 3β -гидроксианд-рост-5-ен-17-она и 20 мл сухого пиридина охлаждают при перемешивании до (-12 ± 2)°С. Затем прибавляют небольшими порциями 2,7 г (0,01 моля) 3(4дифторметоксифенил) пропеноилхлорида. В реакционную массу прибавляют еще 15 мл пиридина и продолжают перемешивание около 2 часов при температуре (~15±5)°С. Смесь выливают в ледяную воду и добавляют 30 мл H2SO4. Выпавший осадок отфильтровывают водой, сушат. Выход: 2 г (58% теор. из спирта) Тпл 158-160°С. Найдено, %: F - 6,9. С30Н36O 5F 2 Вычислено,%: F-7,4. ИК-спектры, см-1 1745 (СО), 1275 (ОСО), 785,735 (CF), 890 (бенз.). 1100-1200 (CF2). Изучение биологической активности 3(4-дифторметокси-3-метоксифенил) лроленоата 3bгидроксиандрост-5-ен-17-она проводили на крысах самцах линии Вистар массой 140-150 г на модели андрогензависимой опухоли предстательной железы. Данную модель опухоли получали путём двухсторонней гокадэктомии с последующим введением дигидротестостерона и 5α-андростан-3b-17b-диола по 6 мг/кг массы тела каждого один раз в день в течение 21 дня. Затем животных выдерживали 7 дней, после чего им вводили предлагаемое соединение в дозе 2, 4 и 6 мг/кг массы тела через день в количестве 5 инъекций. Через 7 дней после последнего введения животных декапитировали, а органы дополнительного полового аппарата и надпочечники извлекали и взвешивали. Предстательную железу фиксировали в 10%-ном растворе формалина, затем заливали в целлоидинпарафин и окрашивали гематоксилин - эозином по Майеру. При проведении гистологического изучения вентральной доли предстательной железы (ВПЖ) на модели рака предстательной железы установлено, что в 30% случаев наблюдается недифференцированная аденокарцинома ВПЖ. В этих случаях отмечается полная утрата железистых стр уктур. В массивно развитой строме эпителиальные клетки размещены в виде пучков и тяже, иногда наблюдается ее инфильтрация. Ядра эпителиальных клеток гиперхромные, неправильной формы, очень часто отличаются митозы. В 60%случаев отмечается низкодифференцированная аденокарцинома. Ткань состоит из маленьких нерегулярных железок и проточков, которые выстелены кубическим, часто многослойным эпителием. Ядра полиморфные (от маленьких, темных до гигантских или веретеновидных). Мелкие гиперхромные ядра в большинстве случаев находятся в состоянии митоза, эпителий проточков часто создает криброформные структуры, а эпителий железок -большие гроздья ядер без клеточных границ. В соединительной строме мелкие очаги инвазивного роста низкодифференцирован-ного эпителия с незначительной лимфоци-тарной инфильтрацией. Васкуляризация стромы незначительная. В 10% случаев возникает высокодифференцированная аденокарцинома. Железистые структуры определяются небольшими, часто регулярными, круглыми железками и проточками, которые плотно расположены с минимально выраженной стромой между ними. Эпителий однорядный, кубический с бледноватой цитоплазмой и базально расположенным гиперхлоридным ядром. В соединительнотканной строме формируются волокна мышц, которые делят железу на дольки. При применении заявляемого соединения в дозе 6 мкмоля на 1 кг массы животного от 60 до 95% ткани железы по морфологическим признакам приближается к норме с развитой, рыхлой, нежной соединительной тканью. В 40% случаев в строме наблюдаются аденоматозные изменения, которые представляют собой крепкий значительный слой миоэпителиальных клеток и плотную капсулу из мышечных волокон, образующи хся вокруг активных железок. Размеры мышечной капсулы достигают большой величины. Эпителий железок и, особенно, проточков, дистрофически изменен, а иногда целиком разрушен с оголением базальной мембраны. Острая токсичность изучалась на мышах-самцах весом 20-25 г. Испытуемое вещество вводилось внутрибрюшинно. Результаты изучения представлены в таблице. Как видно из таблицы, даже доза 3000 мг/кг массы тела не вызывает гибели животных. Таким образом, показано, что при использовании 3(4-дифторметокси-3-метокси-фенил)пропеноата 3bгидроксиандрост-5-ен-17-она в дозе 6 мкмоль/кг массы тела животных с эденокарциномой предстательной железы, от 60 до 95% ткани железы по морфологическим показателям приближается к норме с развитием рыхлой соединительнотканной стромы, что свидетельствует об исчезновении злокачественной опухоли в предстательной железе.