Спосіб одержання антидифтерійного імуноглобуліну

Изобретение относится к области медицины и будет использовано при производстве препарата иммуноглобулина, предназначенного для лечения больных дифтерией. Упитывая Значительный рост заболеваемости и летальные исходы при дифтерии, проблема получения антидифтерийного иммуноглобулина из крови доноров является актуальной. Практическое здравоохранение не располагает аллогенным антидифтерийным иммуноглобулином. Широко применяется ксеногенная антидифтерийная сыворотка. Известны способы получения иммуноглобулинов направленного действия; противокоревого, антигриппозного, антистафилококового, антистолбнячного и др. путем выделения их из крови человека, основанных на предварительной иммунизации доноров-добровольцев соответствующими специфическими антигенными препаратами с последующим взятием крови и фракционированием ее [1,2,3,5]. Однако Существующие способы обладают рядом недостатков, главным из которых является необходимость проведения специальной активной иммунизации доноров, а в ряде случаев гипериммунизации. Проведение такой активной иммунизации доноров значительно осложняется следующими моментами: - обязательным наличием высокоактивного антигенного препарата для иммунизации; - активным антигенным раздражением иммунокомпетентных систем донора, что ; может негативно сказываться в дальнейшем на иммунном статусе организма; - постепенным уменьшением контингента подходящих для иммунизации доноров. Ксеногенная антидифтерийная сыворотка имеет следующие недостатки: - получена из крови гипериммунизированных лошадей; - при клиническом применении эффективна только в начальном периоде заболевания; - вызывает различные аллергические реакции, сенсибилизирует организм реципиента, может вызывать анафилактический шок с летальным исходом; - при повторном введении быстро элиминирует из организма. Наиболее близким к заявляемому техническому решению является способ получения антирабического иммуноглобулина [Авт.св. № 1745257]. Сущность прототипа заключается в том, что антирабическую вакцину вводят вн утримышечно донорам О (I) и А (II) групп крови в объеме 1,0 мл на 0,7,15,30 сутки. Выделенную из плазмы крови гамма-глобулиновую фракцию отстаивают, подвергают диафильтрации на плоскорамных фильтрах. Недостатками прототипа является то, что используют доноров 0 (I) и А (II) групп крови, которых необходимо иммунизировать специально приготовленной высокоактивной антирабической вакциной. Задачей предполагаемого изобретения является получение аллогенного высокоспецифичного антидифтерийного иммуноглобулина. Поставленная задача достигается следующим образом. Получают иммуноглобулин путем выделения его из плазмы крови человека с титрами антидифтерийных антител от 1:80 и выше в реакции пассивной гемаглютинации. Поскольку практически все население согласно календаря профилактических прививок вакцинировано дифтерийным анатоксином, плазма крови с такими уровнями антидифтерийных антител выявляется у 60% донороспособного населения. Способ осуществляется следующим образом. Лица, прошедшие профилактическую иммунизацию против дифтерии и давшие согласие стать донорами, проходят тщательное клинико-лабораторное обследование для определения состояния здоровья и установления пригодности плазмы крови для получения специфического иммуноглобулина. Плазму с титрами антидифтерийных антител от 180 и выше не содержащую HBSAg и антител ВГС, ВИЧ, накапливают при температуре (минус 20 ±5)°С в течение не более 6 месяцев. Получают гамма-глобулиновую фракцию этаноловым методом фракционирования на холоду, На этапах те хнологического процесса исходный материал и полуфабрикат подвергают просветляющей и стерилизующей фильтрации через глубинные фильтры. Совокупность вышеуказанных признаков дает возможность разработать способ получения адлогенного антидифтерийного иммуноглобулина с высоким содержанием специфических антител. Сущность изобретения характеризуется конкретными примерами исполнения. Пример 1. Донор К., 30 лет, ранее иммунизирован дифтерийным анатоксином. Через 5 мес после иммунизации берут 300 мл крови. С помощью дифтерийного эритроцитарного диагностикума в реакции пассивной гемагглютинации устанавливают в плазме крови титр специфических антител 1:80 (4). В результате фракционирования такой плазмы крови [4] с помощью осветляющей и стерилизующей фильтрации через глубинные фильтры получают 10% раствор иммуноглобулина в количестве 5,5 мл с титром специфических антител 1:1280. Пример 2. Донор В., 28 лет, ранее иммунизирован дифтерийным анатоксином. Через 4 мес после иммунизации берут 300 мл крови. С помощью выше описанного специфического диагностикума устанавливают в плазме крови титр антител 1:160. В результате фракционирования такой плазмы крови [4] с помощью осветляющей и стерилизующей фильтрации через глубинные фильтры получают 10% раствор иммуноглобулина в количестве 5,6 мл с титром антидифтерийных антител 1:2560, Пример 3. Донор Д., 25 лет, ранее иммунизирован дифтерийным анатоксином. Через 3 мес после иммунизации берут 300 мл крови. Аналогично описанному выше методу устанавливают в плазме крови титр специфических антител 1:640. В результате фракционирования такой плазмы крови [4] с помощью осветляющей и стерилизующей фильтрации через глубинные фильтры получают 10% раствор иммуноглобулина в количестве 5,7 мл с титром антидифтерийных антител 1:5120. Использование плазмы крови доноров с титрами антидифтерийных антител 1:40 и меньше не позволяет получить целевой продукт. Плазма крови с титрами энтидифтерийных антител 1:1280 и выше встречается среди донораспособного населения у 10% и может быть использована в качестве препарата -"аллогенной антидифтерийиой плазмы". Таким образом, согласно заявляемому способу получен аллогенный высокоспецифичный антидифтерийный иммуноглобулин; при этом используют плазму намеренно не иммунизированных доноров всех групп крови по системе АВО; для определения атидифтерийных антител применяется простой доступный метод определения реакция пассивной гемагглютинации, стабильность донорской плазмы сохраняется для последующего фракционирования на протяжении 6 мес при температуре (минус 20 ± 5)°С. Заявляемый способ воспроизводим в условиях производства препаратов плазмы на станциях переливания крови, не требует специального оборудования. Специфическая активность препарата иммуноглобулина против дифтерии превышает в 8-16 раз активность исходной плазмы. Впервые получен аллогенный высокоактивный антидифтерийный иммуноглобулин (таблица). Полученный антидифтерийный Иммуноглобулин может быть использован в комплексном (лечении больных дифтерией взамен ксеногенной антидифтерийной сыворотки.