Спосіб діагностики запальних і дистрофічних захворювань міокарда

Изобретение относится к медицине, в частности, к кардиологии. Преимущественная область использования - диагностика и дифференциальная диагностика инфекционно-аллергического миокардита (ИАМ) и вегета тивнодисгормо-нальной миокардиоидистрофии (ВДГИД). Известные методы обследования больных с патологией сердечной мышцы (3,4.5) в большинстве случаев не позволяют дифференцировать ИАМ и ВДМД. Основными недостатками указанных методов являются их низкая чувствительность, трудоемкость, неспецифичность, необходимость специального оснащения, аппаратуры и реактивов. Описан метод цитохимического исследования кислой фосфатазы лимфоцитов крови (6) при ИАМ. В процессе его осуществления выполняются следующие этапы приготовление мазка, его фиксация, инкубация, сушка, окраска ядер лимфоцитов. Существенным недостатком рассматриваемого способа является необходимость фиксации до проведения инкубации, что искажает результаты исследований. Уровень активности кислой фосфатазы (КФ) в клетках крови не позволяет оценить состояние обменных процессов в сердечной мышце и таким образом не позволяет' дифференцировать воспалительные и дистофические процессы. Целью предлагаемого изобретения является разработка способа дифференциальной диагностики ИАМ и ВДМД. Поставленная цель достигается тем. что в качестве диагностического показателя используют ферменты, характеризующие активность пентозофосфатного шунта (ПФШ) лимфоцитов крови, так как их активность находится в корреляционной зависимости с дегидрогеназной активностью ферментов ПФШ миокарда [1]. С целью повышения точности диагностики и дифференциальной диагностики используется одновременное определение активности трех ферментов, что^позволяет повысить надежность метода. • Способ осуществляется следующим образом. 1. Берут венозную кровь в количестве 5 мл. В качестве антикоагулянта используют гепарин до 0,5 мл. 2. Выделяют лейковзвесь. 3. Проводят суправитальные цитохимические тесты на выявление в лимфоцитах активности Г-6-ФДГ (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы), никотинамидадениндинуклеотидфосфат (Н АДФ)-диа форазы, для чего в центрифужные пробирки последовательно вносят 0,25 мл лейковзвеси, субстрат, ингибитор тканевого дыхания (азид натрия), нитросинийтетразолий(НСТ), мембранопротектор (поливинилґіирролидон) [2]. 4. Инкубируют 1 час при температуре + 37°. 5. Центрифугируют при 1000 об/мин в течение 3 минут. 6. Готовят мазки из осадка. 7. Сушат при комнатной температуре. 8. Фиксируют с одновременной окраской клеточных ядер в 1 % растворе метилового зеленого в метаноле. 9. Промывают в проточной воде. 10. Суша т при комнатной температуре. Активность цитохрома "С определяют по методу Флатмарка (1963). В отличие от прототипа, нами применялся лейкоконцентрат, из которого готовят мазки, сушат, фиксируют в парах формалина, инкубируют в растворе А (бензидин - 60 мг, нитропруссид натрия - 40 мг, ледяная уксусная кислота -0,2 мл, 70° этанол - 30 мл) в течение 10 минут, растворе Б (30% перекись водорода - 0,5 мл, ледяная уксусная кислота - 0,4 мл, 70° этанол - 20 мл) в течение 5 минут. Результаты цитохимических реакций оценивают по методу Астальди-Bepra с определением условных единиц активности (УЕА)[8]. Проведено клиническое обследование 39 больных инфекционно-аллергическим миокардитом, 30 больных вегетативно-дисгормональной миокардиодистрофией и 24 здоровых лиц в возрасте от 20 до 50 лет. В результате проведенных исследований определены диагностические критерии для вышеуказанных нозологических форм. С учетом доверительного интервала, определяемого по формуле М± м доверительный интервал М±м, где Μ - генеральная средняя, нормированное отклонение, м - ошибка средней, при вероятности 95% составил для ИАМ по уровню Г-6-ФДГ 0,820,98 УЕА (112,6-151%)', НАДФ-диафоразы 0,630,75 УЕА (67,4%-78,2%), цитохрома "С" 1,41-1,49 УЕА (69,5%-73,4%) [7].. Для ВДМД: Г-6-ФДГ 0,44-0,64 УЕА (67,7%-98,5%), НАДФ-диафоразы 0,63-0,75 УЕА (42,9-51,0), цитохрома "С" 1,01-1,13 УЕА (49,8%-55,7%) относительно нормальных показателей в контрольной группе. В качестве иллюстрации предлагаются следующие клинические примеры: Пример 1. История болезни № 1270/88. Больной Б., 32 года, врач. При поступлении жалобы на одышку, боли в области сердца продолжительные, ноющего и колящего характера, перебои в работе сердца, слабость, снижение работоспособности. Из анамнеза известно, что около месяца назад перенес тяжелую флегмонозную ангину. Объективно состояние средней тяжести. Кожные покровы обычного цвета, повышенной влажности. В легких везикулярное дыхание, хрипов нет, ЧДД -26 в мин, Тоны сердца приглушены, умеренный систолический шум на верхушке, акцентов на основании сердца нет, ЧСС - 80 в мин, Артериальное давление - 125/80 мм рт.ст. Печень не увеличена. Пастозность голеней. ЭКГ: электрическая ось отклонена влево, ритм синусовый, инверсия "Т" в гр удных отведениях. Общий анализ крови: Эр.-5,0х101 , Нв-161 г/л, Л-5,8х109, Э-4, П-4, Л-26, М-6. СОЭ- 6 мм/ч, СРБ -1. АЛТ 1,66 ммоль/л, ACT - 1,87 ммоль/л, КФ лимфоцитов - 1,74 УЕА, цитохром "С" - 1,41 УЕА, НАДФ-диафораза 1,32 УЕА, Г-6-ФДГ - 0,81 УЕА. Диагноз: Инфекционно-аллёргический миокардит, смешанный вариант течения, НК11А. Πример 2. История болезни 1019/88г. Больная К., 46 лет, оператор ЭАМ. Жалобы на длительные боли в облает., гр удной клетки слева, одышку при физической нагрузке, раздражительность, повышенную утомляемость. Вышеперечисленные жалобы беспокоят более 6-ти месяцев и возникают после переутомления, пребывания в психотравмирующи х ситуациях. Объективно: состояние удовлетворительное. Тоны сердца приглушены, легкий' систолический шум на верхушке, акцент второго тока над аортой. Пульс 88 ударов в минуну. Единичные экстрасистолы. АД -140/80 мм рт.ст. ЭКГ: электрическая ось не отклонена. Ритм синусовый, единичные экстрасистолы по типу би- и тригемении, инверсия "Т" в гр удных отведениях. Общий анализ крови: Эр.-4,5х1012, Нв-143 г/л, Л-4,9х109 , Э-3, -П-3, С-42, Л-49, М-3, СОЭ-15 мм/ч, СРБ-0, АЛТ - 0,44 ммоль/л, АСТ-0,61 ммоль/л. КФ лимфоцитов - 1,26 УЕА, ци тохром "С" - 1,14 УЕА, НАДФ-диафораза - 0,99 УЕА, Г-б-ФДГ-0,81 УЕА. Диагноз: Вегетативнодисгормональная миокардиодистрофия, экстрасистолическая аритмия по типу аллоритмии, НК-1. Пример 3. Больной Б., 34 года, крановщик (история болезни 1966/89г.). Жалобы на колющие, длительные боли в околосердечной области, одышку в покое и при незначительной физической нагрузке, раздражительность, утомляемость, слабость. Со слов больного: заболел после того, как впервые 4 месяца назад перенес тяжелую форму ОРВИ, на бюллетене не был, продолжал работать, выполняя тяжелую физическую работу (работа в три смены). Режим труда, отдыха и рационального питания не соблюдал. Объективно: кожные покровы обычного цвета. В легких хрипов нет, ЧДД - 28 в мин. Тоны сердца приглушены, акцентов, шумов нет. ЧСС - 72 в мин. Пульс - 72 удара в мин,. АД- 130/80 мм.рт.ст. Живот мягкий, безболезненный, печень не увеличена. Отеков нет. ЭКГ: электрическая ось сердца отклонена влево. Ритм синусовый. Депрессия "Т" в грудных отведениях. Общий анализ крови; Эр.-4,6х1012, Нв-154 г/л, Л-5,3х109 , С-5. П-1. Л-40, М-4, СОЭ-4 мм/час. СРБ-0, АЛТ0,44 ммоль/л, АСТ-0,61 ммоль/л. КФ лимфоцитов - 1,71 УЕА, цитохром "С -1,21 УЕА, НАДФ-диа фораза - 0,96 УЕА, Г-6-ФДГ-0,94 УЕА. Диагноз: Инфекционно-аллёргический миокардит, затяжное течение Η К-1. В комплекс лечение включены противовоспалительные средства, усилена эффективность метаболической терапии.' Выполнение рекомендаций в течение . месяца привело к положительному клиническому эффекту, уменьшилась одышка при физической нагрузке, исчезла слабость. ЭКГ: электрическая ось сердца не отклонена. Ритм синусовый, правильный, -ЧСС-78 в мин. Общий анализ крови: Эр.-4,2х1012, Нв-137 г/л. Л-4.3х109 , С-2, П-63, Л-31, М-3, СОЭ - 8 мм/час. Цитохимия лимфоцитов: КФ - 1,48 УЕА, Н АДФ-диафораза - 1,45 УЕА, Г-6-ФДГ -0,69 УЕА, цито хром "С" 2,00 УЕА. Таким образом, очевидно, что приведенные результаты цитохимических исследований согласуются с клиническими, лабораторными,и электрокардиографическими данными. Предлагаемый способ оказался решающим для диагностики в данном случае. Существенным отличием изобретения является: 1. Проведение этапа фиксации мазка после инкубации. 2. Использование лейковзвеси для приготовления мазков при изучении содержания цитохрома "С" в лимфоцитах крови. 3. Оценка метаболизма одновременно по трем ферментам, участвующим в окислительновосстановительных процессах. 4. Применение суправитального метода определения Г-6-ФДГ и НАДФ-диафоразы.