Спосіб діагностики запальних уражень міокарда

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии. Преимущественная область использования - диагностика и дифференциальная диагностика инфекционно-аллергического миокардита и миокардитического кардиосклероза. Помимо известных физикальных признаков миокардитического поражения в на-стоящее время, с целью постановки клинического диагноза "миокардит", используются лабораторные биохимические методы определения активности сывороточных трансминаз, серомукоидов. гексоз, С-реактивного протеина и пр. [2, 3, 4]. Указанные методы исследований не позволяют своевременно, с достаточной точностью и достоверностью выявить затяжные и вялотекущие формы инфекционно-аллергического миокардита (ИАМ) и, в большинстве случаев, не позволяют дифференцировать ИАМ и миокардитический кардиосклероз (МКС). Ранее указывалось на целесообразность использования цитохимических тестов для выявления миокардитического процесса [6]. При этом предпочтение отдавалось изучению фосфатазных параметров лейкоцитов крови, включающего приготовление мазка крови, взятой у больных, их высуши вании, фиксации и последующей инкубации в буферном растворе субстратов и соответствующи х диазокрасителей. При техническом осуществлении названных методик оказалось очевидным их тр удоемкость, существенные временные затраты, а также обязательная фиксация мазков крови перед погружением их в инкубационную среду, что искажает результаты исследования и, в конечном счете, ограничивает их практическое применение. В основу изобретения поставлена задача усовершенствования способа диагностики воспалительных поражений миокарда путем определения параметров спонтанного НСТ-теста в лимфоцитах крови за счет использования суправитального метода исследования и лейкоконцентрата, что обеспе-чивает достижение технического результата: повышается точность диагностики воспалительных поражений миокарда и сокращается время проведения исследования. Поставленная задача решается таким образом, что в способе диагностики воспалительных поражений миокарда, включающем проведение исследования лимфоцитов крови цитохимическим методом, используют лейкоконцентрат и определяют величину спонтанного НСТ-теста в лимфоцитах крови суправитальным методом, при повышении уровня НСТ-теста на 85-49% диагностируют инфекционно-аллергический миокардит, при колебаниях уровня НСТ-теста в пределах от 3 до 16% диагностируют миокардитический кардиосклероз. Причинами, препятствующими достижению ожидаемого технического результата {повышение точности диагностики и сокращение времени на проведение исследования) являются искажение результатов исследования за счет обязательной фиксации мазков крови перед погружением их в инкубационную среду, трудоемкость способа и существенные временные затраты при его техническом осуществлении, а также отсутствие возможности выявлять затяжные и вялотекущие формы инфекционно-аллергического миокардита, миокардитический кардиосклероз. Между совокупностью существенных признаков заявляемого способа и техническим результатом, который может быть достигнут, проявляется следующая причинно-следственная связь: использование лейкоконцентрата для проведения исследований позволяет в одном поле зрения сразу видеть 30-50 и более исследуемых клеток крови (при использовании обычных мазков крови в поле зрения 1-5 клеток), что сокращает время исследований почти в 6 раз по сравнению со способом-прототипом и повышает их информативность; а использование суправитального метода для определения параметров спонтанного НСТ-теста в лимфоцитах крови не требует предварительной фиксации мазка крови, что позволяет повысить точность получаемых результатов, а следовательно расширяется практическое применение способа, т.е. появляется возможность диагностики инфекционно-аллергического миокардита, миокардитического кардиосклероза. Способ осуществляется следующим образом. 1. Из вены больного берут кровь в количестве 5 мл (в качестве антикоагулянта используется гепарин 0,5 мл). 2. Выделяют лейковзвесь. Для этого наслаивают на взятую кровь смесь (1 мл) 9% фикола-400 (12 частей) и 30% верографина (5 частей). После центрифугирования в надосадочной жидкости определяется (визуально) кольцо белесоватого цвета (взвесь лейкоцитов). Выделившуюся в градиенте плотности лейкомассу при помощи пипетки переносят в отдельную пробирку, пипетируют, готовят мазки. 3. В центрифужную пробирку вносят 1 каплю лейкоконцентрата. 4. Туда же вносится 1 капля раствора НСТ (1 мг/мл нитросинего тетразолия в 0,2 Μ фосфатном буфере). 5. Пробирку ставят на водяную баню при Τ 37°С в течение 20 минут. 6. После инкубации центрифугируют при 1000 об/мин в течение 3 минут. 7. Сливают надосадочную жидкость, из осадка готовят мазок. 8. Сушат при комнатной температуре. 9. Окраска клеточных ядер с одновременной фиксацией в 1 % растворе метилового зеленого в метаноле в течение 3 минут. 10. Промывают в проточной воде и сушат при комнатной температуре. Оценку результатов проводят по методу Астальди-Верга с расчетом среднего цитохимического коэффициента в условных единицах активности (УЕА) [7]. Проведено клиническое обследование 98 больных, из них 36 страдали ИАМ и 62 МКС. Наряду с клиникоинструментальными и биохимическими методами использовался предложенный способ диагностики. В таблице представлены результаты исследований цитохимических показателей по способу-прототипу и предлагаемым способом у больных И AM и МКС, а также у здоровых лиц, составивши х контрольную гр уппу. В результате проведенных исследований определены диагностические критерии для указанных нозологических форм, С учетом доверительного интервала, определенного по формуле М-м доверительный интервал М+м, где Μ - генеральная средняя, - нормированное отклонение, м - ошибка выборочной средней, вычисленная с вероятностью ρ 0,05 [5]. У больных ИАМ величина спонтанного НСТ-теста в лимфоцитах составила 1,94-2,00 УЕА (на 85-94% выше нормы), в то время как у больных МКС она достоверно не отличалась от значений в контрольной группе и когебалась в пределах 1,08-1,22 УЕА (на 3-16% выше нормы). Проводившееся параллельно исследование фосфатазной активности в полиморфных лейкоцитах крови в указанных группах больных не позволило получить показателей с достоверным различием, что лишает возможности использовать названные методы в целях дифференциальной диагностики ИАМ и МКС В качестве иллюстрации практического использования способа приводим следующее клиническое наблюдение: Больной К., 41 год, буровой мастер, ист. бол. № 1590/89 г. При поступлении предъявлял жалобы на длительные боли в области сердца колющего, ноющего характера, одышку при умеренной физической нагрузке, сердцебиение, перебои в работе сердца, общую слабость, утомляемость, снижение работоспособности. Из анемнеза: около 4-х месяцев назад по поводу постгриппозного миокардита находился на стационарном лечении, в течение 3-х недель, после чего был выписан домой с некоторым улучшением, приступил к работе. Однако, больного продолжали беспокоить ноющие боли в околосердечной области, периодически возникали перебои в работе сердца, сохранялась общая слабость. После физического переутомления (работа в ночную смену) самочувствие ухудшилось, появились вышеуказанные жалобы, вследствие чего был госпитализирован в клинику для обследования и лечения. Объективно: состояние удовлетворительное. Кожные покровы бледные, гипергидроз. В легких везикулярное дыхание, хрипов нет, ЧДД-20 в 1 мин. Перкуторно границы сердца не изменены. На основании выслушивается мягкий, непостоянный систолический шум, 1 тон при аускультации ОС' лаблен на верхушке, ЧСС - 66 в 1 минуту, экстрасистолия, дефицит пульса - 6 ударов в 1 минуту. Артериальное давление130/90мм рт.ст. Печень не увеличена. Отеков на нижних конечностях нет. ЭКГ: электрическая ось сердца не отклонена, синусовая тахикардия, частые желудочковые экстрасистолы (до 6-8 в минуту), инверсия зубца "Т" в левы х гр удных отведениях. Общий анализ крови: Эр. -4,02х10*2, Нв - 134 г/л, Л-4.3х109, П-3%, С-60%,Л-28%, Μ - 7%, СОЭ - 3 мм/ч, СРБ - 0, АЛТ -0,76 ммоль/л, ACT - 1,01 ммоль/л. Цитохимические исследования фосфатазной активности полиморфно-ядерных лейкоцитов крови: щелочная фосфатаза (ЩФ) - 0 ,51 УЕА. кислая фосфатаза (КФ) -0,76 УЕА. Имеющиеся клинические, инструментальные и лабораторно-биохимические данные, а также результаты цитохимического исследования лейкоцитов крови требовали дальнейшего обследования больного для исключения затяжного вялотекущего миокардита. С указанной целью были проведены цитохимические исследования НСТ-теста в лимфоцитах, величина которого в данном случае составила 1,98 УЕА, что соответствует полученным критериям данного заболевания. Диагноз: Инфекционно-аллергический миокардит, затяжное течение, желудочковая экстрасистолия, НК-1. В результате проведенного печения, включающего противовоспалительные, метаболические препараты состояние больного значительно улучшилось, прекратились боли в области сердца, значительно уменьшилась одышка, исчезли перебои в работе сердца, восстановлена трудоспособность. Повторное цитохимическое исследование спонтанного НСТ-теста в лимфоцитах при выписке - 1,09 УЕА, Таким образом, проведенные результаты цитохимических исследований согласуются с клиникокатамнестическими и электрокардиографическими данными, предлагаемый способ оказался решающим для постановки диагноза. Дополнительные существенные отличия предложенного способа в сравнении с прототипом: 1. Использование суправительных методов исследования, что не требует предварительной фиксации мазка. 2. Использование лейкоконцентрата в проводимых исследованиях. Указанные отличия позволяют повысить точность способа, значительно сократить время, необходимое для проведения исследования (до 30 минут, в прототипе до 3 часов). Практическое осуществление способа не требует специального оснащения, аппаратуры, дорогостоящих, дефицитных реактивов и специальной подготовки персонала, что позволяет его применять в лечебных учреждениях любого уровня.