Спосіб культивування калусної тканини фатсії японської (fatsia japonica)

Спосіб культивування калусної тканини фатсії японської, що включає виділення експланта, стерилізацію й культивування його на живильному середовищі, що містить мінеральні солі, 3 антисептик при шкірних захворюваннях і як продіабетичний засіб. На основі рослинної маси фатсії виробляється лікарський препарат фатцифлогин, що володіє протизапальною дією [Кемоклидзе Зураб. Тритерпеновые гликозиды фатсии японской-Fatsia japonica, культивируемой в Грузии и новый лекарственный препарат фатцифлогин. - Автореферат ...канд.фармац.наук: 15.00.02 АН Груз., Ин-т фармаколог.-Тб.-1999. 26с]. Використання замість інтактних рослин їхньої клітинної культур, отриманих біотехнологічним методом, має ряд переваг: зменшення антропогенного впливу на дику природу (фатсія зустрічається в дикому виді тільки в тропічних і субтропічних країнах, а в Європі культивується як кімнатна й оранжерейна рослина), можливість одержання фітомаси, цілком вільної від поллютантів (гербіцидів, пестицидів, важких металів і ін.) і керування процесом біосинтезу цільових продуктів. Приклад 1 Готують живильне середовище Мурасіге і Скуга, що містить, мг/л: мінеральні солі, мікроелементи, сахарозу й інозит за прописом Мурасіге і Скуга [Murashige Т., Skoog F. // Phisiol. Plant. -1962. - Bd.15. - №13. - P.473-497], агар 6000, тіамін - 1,0, піродоксин - 0,5, нікотинова кислота - 0,8 і 2,4-дихлорфеноксіоцетова кислота 0,5, розливають у культиваційні судини ємністю 50мл кожний. Закупорені ватно-марлевими пробками судини стерилізують в автоклаві при 118°С в протягом 30 хвилин, рН середовища до автоклавування 5,5-5,8. У застигле живильне середовище у стерильних умовах уводять експланти (сегменти черешків фатсії японської), попередньо простерилізовані 70%-ним розчином етилового спирту протягом 1 хвилини, культивують у темряві при температурі 118°С протягом 40 діб, після чого калус витягають із судини, відокремлюють від експланту і зважують. Вихід по сухої біомаси при п'ятикратній повторності досліду склав 150мг. Приклад 2 Готують живильне середовище Мурасіге і Скуга, що містить, мг/л: мінеральні солі, мікроелементи, сахарозу й інозит за прописом Мурасиге і Скуга, агар - 6500, тіамін - 1,5, піродоксин - 0,75, нікотинова кислота - 1,0 і 2,4дихлорфеноксіоцетова кислота - 1,0, розливають у культиваційні судини ємністю 50мл кожний. Закупорені ватно-марлевими пробками судини стерилізують в автоклаві при 118°С протягом 30 хвилин, рН середовища до автоклавирования 5,55,8. У застигле живильне середовище у стерильних умовах уводять експланти (сегменти листкових пластинок фатсії японської), попередньо простерізовані 50%-ним розчином брадофену 10 Н протягом 10 хвилин, культивують у темряві при температурі 22°С протягом 25 діб, після чого калус витягають із судини, відокремлюють від експланту і зважують. Вихід сухої біомаси при п'ятикратній повторності досліду склав 320мг. Приклад 3 28833 4 Готують живильне середовище Мурасіге і Скута, що містить, мг/л: мінеральні солі, мікроелементи, сахарозу й інозит за прописом Мурасіге і Скута, агар - 7000, тіамін - 2, піродоксин - 1,0, нікотинова кислота - 1,2 і 2,4дихлорфеноксіоцетова кислота - 4,0, розливають у культиваційні судини ємністю 50мл кожний. Закупорені ватно-марлевими пробками судини стерилізують в автоклаві при 118°С протягом 30 хвилин, рН середовища до автоклавування 5,55,8. У застигле живильне середовище у стерильних умовах уводять експланти (сегменти черешків фатсії японської), попередньо простерилізовані 0,1%-ним розчином діациду протягом 15 хвилин, культивують у темряві при температурі 25°С потягом 30 діб, після чого калус витягають із судини, відокремлюють від експланту і зважують. Вихід сухої біомаси при п'ятикратній повторності досліду склав 340мг. Приклад 4 Готують живильне середовище Мурасіге і Скута, що містить, мг/л: мінеральні солі, мікроелементи, сахарозу й інозит по прописі Мурасіге і Скута, агар - 6500, тіамін - 1,5, піродоксин - 0,75, нікотинова кислота - 1,0 і 2,4дихлорфеноксіоцетова кислота - 5,0, розливають у культиваційні судини ємністю 50мл кожний. Закупорені ватно-марлевими пробками судини стерилізують в автоклаві при 118°С в плин 30 хвилин, рН середовища до автоклавуванняирования 5,5-5,8. У застигле живильне середовище у стерильних умовах уводять експланти (сегменти листкових пластинок фатсії японської), попередньо простерилізовані 50%-ним розчином брадофену 10 Н протягом 10 хвилин, культивують у темряві при температурі 27°С протягом 40 діб, після чого калус витягають із судини, відокремлюють від експланту і зважують. Вихід сухої біомаси при п'ятикратній повторності досліду склав 120мг. Запропонований спосіб культивування калусної тканини фатсії японської може бути використаний для біотехнологічного виробництва його біомаси з метою виділення фармакологически активних речовин трітерпенових глікозидів, що є основою для одержання цінних лікарських препаратів. Перевагою даного способу є зниження антропогенного впливу на навколишнє середовище, одержання екологічно чистої сировини не залежно від періоду вегетації.