Спосіб культивування калусної тканини ломиноса виноградолистого (clematis vitalba l.)

Спосіб культивування калусної тканини ломиноса виноградолистого, що включає виділення експланту, стерилізацію і культивування його на живильному середовищі Мурасіге і Скуга, модифі 3 18328 4 моделі як експланти використовували вегетативні (пробірки 2х20 см), по 10 мл живильного середоапекси стебла, ювенільне листя, сегменти зрілої вища, закривають металевими ковпачками з фолистової пластинки, насінні зачатки, вузли і сегмельги, стерилізують в автоклаві при 121°С протягом нти стебла, зародки насіння, стерилізацію прово40 хвилин, рН середовища до автоклавування 5,5дять відомими способами, а культивування прово5,8. На поверхню агаризованного середовища в дять на модифікованому живильному середовищі стерильних умовах уводять експланти (ювенільне Мурасіге і Скуга, що містить фітогормони в настулистя ломиносу (Clematis vitalba L.), попередньо пних концентраціях: 2,4-дихлорфеноксіоцтова киспростерилізовані 50% розчином препарату «бралота (2,4-Д) -2,0-3,0 мг/л, 6-бензиламінопурин (6дофен» (2 хвилини), а потім 5% розчином перекиБАП) - 0,3-0,4 мг/л, індоліл-3-оцтова кислота (ІОК) су водню (1 хвилина), культивують у темряві при -1,0-1,5 мг/л, протягом 70-90 діб в темряві. 20° С протягом 75 доби, після чого калус виймаЛоминіс є одним з перспективних лікарських ють із судин, відокремлюють від експланту, і висарослин для використання його в медичній практиджують для подальшого культивування за таких ці. У деяких країнах дана рослина є традиційним же умов. Дані про частоту калусоутворення надані джерелом лікарських препаратів і широко викорисв таблиці. товується в народній медицині. В основі високої Приклад 3. біологічної активності ломиносу лежить наявність Готують живильне середовище Мурасіге і Скуу біомасі сапонінових глікозидів, серед яких зустріга, що містить мінеральні солі, мікроелементи, і чаються аналогічні таким багатьох рослин, що шисахарозу за прописом Мурасіге і Скуга, агар роко використовуються в сучасній медицині і фар8000, тіамін - 1,0, піридоксин - 0,5, нікотинова кисмакології. Значимість глікозидів як біологічно лота - 1,0, аскорбінова кислота - 5,0; фітогормони: активних сполук із широким спектром фармаколо2,4-дихлорфеноксіоцтова кислота - 3,0 мг/л, 6гічної дії викликає інтерес до їх вивчення в клітинбензиламінопурин - 0,4 мг/л, індоліл-3-оцтової киних культурах рослин. слоти - 1,0 мг/л, розливають у культуральні судини Використання замість інтактних рослин їх клі(пробірки 2х20 см), по 10 мл живильного середотинних культур, отриманих біотехнологічними мевища, закривають металевими ковпачками з фотодами, має ряд переваг: зменшення антропогенльги, стерилізують в автоклаві при 121°С протягом ного впливу на дику природу, можливість 40 хвилин, рН середовища до автоклавування 5,5одержання фітомаси, що не містить полютантів 5,8. На поверхню агаризованного середовища в (гербіцидів, пестицидів, важких металів і ін.), можстерильних умовах уводять експланти (сегменти ливість керування процесом біосинтезу цільових зрілої листової пластинки ломиносу (Clematis продуктів і т.д. vitalba L.), попередньо простерилізовані 50% розПриклад 1. чином препарату «брадофен» (2 хвилини), а потім Готують живильне середовище Мурасіге і Ску5% розчином перекису водню (1 хвилина), культига, що містить мінеральні солі, мікроелементи, і вують у темряві при 25°С, протягом 80 діб, після сахарозу за прописом Мурасіге і Скуга [Murashige чого калус виймають із судин, відокремлюють від Т., Skoog F., // Phisiol. Plant. - 1962. - Bd. 15. - №13 експланту, і висаджують для подальшого культи- P. 473-497], агар - 8000, тіамін - 1,0, піридоксин вування за таких же умов. Дані про частоту калу0,5, нікотинова кислота - 1,0, аскорбінова кислота соутворення надані в таблиці. 5,0; фітогормони: 2,4-дихлорфеноксіоцтова кислоПриклад 4. та - 2,0 мг/л, 6-бензиламінопурин - 0,3 мг/л, індоГотують живильне середовище Мурасіге і Скуліл-3-оцтової кислоти - 1,0, розливають у культуга, що містить мінеральні солі, мікроелементи, і ральні судини (пробірки 2х20 см), по 10 мл сахарозу за прописом Мурасіге і Скуга, агар живильного середовища, закривають металевими 8000, тіамін - 1,0, піридоксин - 0,5, нікотинова кисковпачками з фольги, стерилізують в автоклаві лота - 1,0, аскорбінова кислота - 5,0; фітогормони: при 121°С протягом 40 хвилин, рН середовища до 2,4-дихлорфеноксіоцтова кислота - 2,5 мг/л, 6автоклавування 5,5-5,8. На поверхню агаризованбензиламінопурин - 0,3 мг/л, індоліл-3-оцтової киного середовища в стерильних умовах уводять слоти - 1,0 мг/л, розливають у культуральні судини експланти (вегетативні апекси стебла ломиносу (пробірки 2х20 см), по 10 мл живильного середо(Clematis vitalba L.), попередньо простерилізовані вища, закривають металевими ковпачками з фо50% розчином препарату «брадофен» (2 хвилини), льги, стерилізують в автоклаві при 121°С протягом а потім 5% розчином перекису водню (1 хвилина), 40 хвилин, рН середовища до автоклавування 5,5культивують у темряві при 25°С протягом 70 діб, 5,8. На поверхню агаризованного середовища в після чого калус виймають із судин, відокремлюстерильних умовах уводять експланти (насінні ють від експланту, і пересаджують на живильне зачатки ломиносу (Clematis vitalba L), попередньо середовище такого ж складу. Дані про частоту простерилізовані 50% розчином препарату «бракалусоутворення приведені в таблиці. дофен» (2 хвилини), а потім 5% розчином перекиПриклад 2. су водню (1 хвилина), культивують у темряві при Готують живильне середовище Мурасіге і Ску20°С протягом 80 діб, після чого калус виймають із та, що містить мінеральні солі, мікроелементи, і судин, відокремлюють від експланту, і висаджують сахарозу за прописом Мурасіге і Скуга, агар для подальшого культивування. Дані про частоту 8000, тіамін - 1,0, піридоксин - 0,5, нікотинова кискалусоутворення надані в таблиці. лота - 1,0, аскорбінова кислота - 5,0; фітогормони: Приклад 5. 2,4-дихлорфеноксіоцтова кислота - 2,5 мг/л, 6Готують живильне середовище Мурасіге і Скубензиламінопурин - 0,4 мг/л, індоліл-3-оцтової кига, що містить мінеральні солі, мікроелементи, і слоти - 1,0 мг/л, розливають у культуральні судини сахарозу за прописом Мурасіге і Скуга, агар 5 18328 6 8000, тіамін - 1,0, піродоксин - 0,5, нікотинова кисламінопурин - 0,4 мг/л, індоліл-3-оцтової кислоти лота - 1,0, аскорбінова кислота - 5,0; фітогормони: 1,5 мг/л, розливають у культуральні судини (пробі2,4-дихлорфеноксоцтова кислота - 2,0 мг/л, 6рки 2х20 см), по 10 мл живильного середовища, бензиламінопурин - 0,4 мг/л, індоліл-3-оцтової кизакривають металевими ковпачками з фольги, слоти - 1,0 мг/л, розливають у культуральні судини стерилізують в автоклаві при 121°С протягом 40 (пробірки 2х20 см), по 10 мл живильного середохвилин, рН середовища до автоклавування 5,5вища, закривають металевими ковпачками з фо5,8. На поверхню агаризованного середовища в льги, стерилізують в автоклаві при 121°С протягом стерильних умовах уводять експланти (зародки 40 хвилин, рН середовища до автоклавування 5,5насіння ломиносу (Clematis vitalba L), попередньо 5,8. На поверхню агаризованного середовища в простерилізовані 50% розчином препарату «брастерильних умовах уводять експланти (вузли стедофен» (2 хвилини), а потім 5% розчином перекибел ломиносу (Clematis vitalba L.), попередньо су водню (1 хвилина), культивують в темряві при простерилізовані 50% розчином препарату «бра25°С протягом 80 діб, після чого калус виймають із дофен» (2 хвилини), а потім 5% розчином перекисудин, відокремлюють від експланту і висаджують су водню (1 хвилина), культивують у темряві при на живильне середовище для подальшого культи25°С протягом 85 діб, після чого калус виймають із вування. Дані про частоту калусоутворення надані судин, відокремлюють від експланту, і висаджують в таблиці. для подальшого культивування. Дані про частоту калусоутворення надані в таблиці. Таблиця. Приклад 6. Готують живильне середовище Мурасіге і СкуЧастота калусоутворення в культурі тканин ломиносу га, що містить мінеральні солі, мікроелементи, і виноградолистного в залежності від типу експланту і сахарозу за прописом Мурасіге і Скуга, агар складу живильного середовища 8000, тіамін - 1,0, піридоксин - 0,5, нікотинова кислота - 1,0, аскорбінова кислота - 5,0; фітогормони: Тип і конце2,4-дихлорфеноксоцтова кислота -2,5 мг/л, 6нтрація фітобензиламінопурин - 0,3 мг/л, індоліл-3-оцтової кигормонів в № приТип ексЧастота калусослоти - 1,5 мг/л, розливають у культуральні судини живильному кладу планту утворення, % (пробірки 2х20 см), по 10 мл живильного середосередо–вищі вища, закривають металевими ковпачками з фоІО 2,4 6льги, стерилізують в автоклаві при 121°С протягом К -Д БАП 40 хвилин, рН середовища до автоклавування 5,5Вегетативні 5,8. На поверхню агаризованного середовища в 1. 1,0 2,0 0,3 апекси 40,5±1,6 стерильних умовах уводять експланти (сегменти стебла стебел ломиносу (Clematis vitalba L.), попередньо Ювенільне 2. 1,0 2,5 0,4 57,5±1,58 простерилізовані 50% розчином препарату «бралистя дофен» (2 хвилини), а потім 5% розчином перекиСегменти су водню (1 хвилина), культивують у темряві при зрілої лис3. 1,0 3,0 0,4 46,4±1,9 20°С протягом 90 діб, після чого калус виймають із тової плассудин, відокремлюють від експланту і висаджують тинки для подальшого культивування. Дані про частоту Насінні за4. 1,0 2,5 0,3 76,6±3,2 калусоутворення надані в таблиці. чатки Приклад 7. Вузли стеГотують живильне середовище Мурасіге і Ску5. 1,0 2,0 0,4 32,4±1,5 бла га, що містить мінеральні солі, мікроелементи, і Сегменти сахарозу по прописі Мурасіге і Скуга, агар - 8000, 6. 1,5 2,5 0,3 33,6±1,6 стебла тіамін - 1,0, піридоксин - 0,5, нікотинова кислота Зародки 1,0, аскорбінова кислота - 5,0; фітогормони: 2,47. 1,5 2,0 0,4 64,7±2,1 насіння дихлорфеноксоцтова кислота - 2,0 мг/л, 6- бензи Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601