Спосіб кріоконсервування еритроцитів кордової крові людини

Спосіб кріоконсервування еритроцитів кордової крові людини, який включає одержання еритроцитів, додавання до них розчину кріоконсерванта Пропандіосахаролю, заморожування до -196 °С і відігрів, який відрізняється тим, що еритроцити одержують шляхом додавання до кордової крові декстрану м.м.60000 у співвідношенні 1:5. (19) (21) u200805744 (22) 05.05.2008 (24) 10.12.2008 (46) 10.12.2008, Бюл.№ 23, 2008 р. (72) ГРИЩЕНКО ВАЛЕНТИН ІВАНОВИЧ, UA, ЦУЦАЄВА АЛЛ А ОЛЕКСАНДРІВН А, U A, НІКОЛЕНКО ОЛЕКСАНДРА ВІКТОРІВН А, UA, КОМП АНІЄЦЬ АНТОНІН А МИ ХАЙЛІВНА, U A, БРОВКО ОЛЕНА ВАЛЕРІЇВНА, U A, СОКІЛ ЛАРІС А ВІТАЛІЇВН А, UA (73) ІНСТИТУТ ПРОБЛЕМ КРІОБІОЛОГІЇ І КРІО 3 37637 жимів заморожування - відігріву еритроцитів з використанням програмного заморожувача. Таким чином за рахунок зміни умов одержання еритроцитів забезпечується можливість заморожування еритроцитів кордової крові шляхом простого занурення у рідкий азот і відігрів у водяній бані. Спосіб здійснюють таким чином. До кордової крові у співвідношенні 1:5 додають декстран м.м. 60000. До одержаної еритромаси при кімнатній температурі додають кріоконсервант Пропандіосахароль у співвідношенні 1:1. Заморожування проводять у металевих контейнерах шляхом занурення у рідкий азот. Відігрівають на водяній бані при 40-42°С шляхом плавного коливання. Далі відмивають і переносять у зваживаючий розчин ЦОЛІПК 8 в. Приклад 1 До кордової крові, заготовленої на гемоконсерванті «ЦФД» (цитратно-фосфатно-декстрозний 4 розчин), додавали у співвідношенні 1:5 декстран м.м. 60000. Після видалення плазми і лейкотромбоцитарного шару до еритромаси у співвідношенні 1:1 додавали при кімнатній температурі кріоконсервант Пропандіосахароль. Клітинну суміш переносили в металеві контейнери і заморожували до -196° шляхом занурення у рідкий азот. Відігрівання проводили на водяній бані при 4042°С шляхом плавного коливання. Відмивали одноразово, після чого еритроциті переносили у зваживаючий розчин ЦОЛІПК 8в. Ступінь схоронності еритроцитів після заморожування-відігріву оцінювали за наступними показниками: гематокрит - визначали у капілярах на мікроцентрифузі МГЦ-8, гемоліз і осмотичну крихкість у 0,6 і 0,9%-них розчинах NaCl - визначали спектрофотометричним методом [3]. Результати схоронності еритроцитів кордової крові людини наведені у Таблиці. Таблиця Схоронність еритроцитів кордової крові людини після кріоконсервування, n=7 Спосіб кріоконсервування Прототип Заявлений Кількість життєздатних клітин, % 93-95 93-96 Осмотична крихкість 0,6% NaCl 5,5±0,14 4,6±2,7 З Таблиці видно, що за всіма досліджуваними показниками схоронність еритроцитів забезпечується на рівні прототипу. Джерела інформації: 1. Прокопюк О.С., Бредихина О.В., Липина О.В. Криоконсервирование фетальных эритроцитов под защитой глицерина и полиэтиленоксида. // Физико-химические свойства и биологическое действие криопротекторов: Сб. науч. тр удов. - Харьков, 1990. - С.135-139. Комп’ютерна в ерстка А. Крулевський Гемолиз, % Гематокрит, % 0,30+0,05 0,60±0,07 34±0,01 42,2±1,0 2. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: "Медицина". - 1987. - С. 119-120. 3. Воротилин A.M., Гучок В.М., Луговой В.И., Моисеев В.А. Особенности основных этапов технологического процесса криоконсервирования эритроцитов с новым консервантом «Пропандиосахароль» // Физико-химические свойства и биологическое действие криопротекторов: Сб. науч. трудов. - Харьков, 1990. - С.25-29. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601